CN102823504B - 桉树组织培养培养基 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种桉树组织培养培养基，该培养基包括继代培养基、生根培养基。该培养基具有在继代培养时，桉树材料继代苗月增殖高、继代苗生长良好，小苗粗壮、整齐，叶色浓绿、玻璃化苗少，得苗率高等优点，生根无须经过壮苗阶段，可直接进行生根，生根苗生根率高、出根快，根系发达，小苗木质化好，移栽成活率高。

Description

桉树组织培养培养基

技术领域

本发明涉及组织培养基，尤其涉及一种桉树组织培养培养基。

背景技术

桉树(Eucalyptus)是桃金娘科桉树属、杯果木属、伞房桉属植物的泛称，约有900种。原产澳大利亚及马来西亚，广泛引种于亚洲热带、亚热带各地，我国四川中部及长江以南各地栽培最多，是经济价值和观赏价值都很高的树种。它生长快、用途广。既可用于营造用材林和经济林，也可用于营造防护林和风景林。我国已成为世界桉树栽培第二大国。桉树也因此成为我国发展前景广阔的树种。我国引种桉树已有110多年的历史，现已成为我国南方速生丰产林的战略性树种，桉树与杨树、松树一起被称为世界三大速生树种。目前我国桉树人工林面积已达170万公顷，主要分布在广东、广西、云南、海南、福建、四川、湖南、江西等省。桉树是目前我国南方三大用材树种之一，以其速生丰产、轮伐期短、适生性广、用途多等优点，已成为南方速生丰产林基地工程的首选树种，深受广西、广东、福建、云南、海南、四川、贵州、湖南、江西等省的推广种植，并且以种子繁殖育苗转变到用无性繁殖育苗造林，特别是扦插繁殖育苗更受欢迎和采用。

目前，国内已有许多桉树组培技术研究报道，组织培养中，芽的增殖速度在离体快速繁殖中是最为重要的一环，在这阶段中繁殖速度快生产实践中才有应用价值，决定繁殖速度的因子最主要是材料本身的生理生长状态和培养基及其附加成分的相互作用。在生根培养时，将继代增殖培养过程中获得的丛芽（无根苗）分割成单株，选取健壮的的芽苗转接到1/2MS+IBA0.5生根培养基上，经25d左右培养，即可获得可供瓶移栽的完整植株。接入生根培养基10d左右即可生根。有些还需经过壮苗过程，再进行生根培养才能获得较好的生根效果。在上述培养基中，生根培养的时间长、生根苗不壮、根量少、移栽成活率低。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种桉树组织培养培养基，该培养基包括继代培养基和生根培养基，其中：

每升（L）继代培养基的组分及各组分的含量如下：

每升（L）生根培养基的组分及各组分的含量如下：

本发明桉树组织培养培养基中的继代培养基、生根培养基的配制方法为：

1、母液配制：为便于取样，宜先配制各种母液，分为大量元素母液、微量元素母液、有机物母液和各种植物生长调节剂母液。蔗糖、琼脂不宜配成母液，需要时直接称样。

（1）大量元素母液与培养基的组分浓度成100～200的倍数关系，有机物母液和微量元素母液成200的倍数关系，而植物生长调节试剂母液的浓度宜配成1mg/ml；

（2）母液宜用无菌的蒸馏水、去离子水或超纯水配制，大量生产时可用沉淀过夜的开水；

（3）配制大量元素母液时，每个组分应单独溶解，后按氮、磷、钙、镁、的顺序逐个混合，否则容易引起沉淀；

（4）微量元素母液含有见光易分解的碘化钾和易氧化的硫酸亚铁，应用棕色瓶保存；

（5）植物生长调节剂母液和有机物母液应置于冰箱中保存；

（6）母液配制后应及时使用，贮存时间不宜超过1个月；

（7）发现母液有沉淀，或有微生物生长，或有藻类生长，应废弃不用。

2、配制培养基

（1）依照培养基配方，按配制体积用量筒量取母液至量杯中，备用；

（2）量取一定量水至不锈钢锅内；

（3）称取适量琼脂和糖，加入不锈钢锅内并搅拌使凝固剂充分分散，糖充分溶解；

（4）加热至沸腾，使琼脂和糖完全溶解，用量杯量水至规定体积；

（5）用1.0N盐酸或1.0N氢氧化钾调整至pH至5.8；

（6）尽快将培养基分装到培养器皿内，以免培养基凝固或变稠而难以分装；

（7）分装培养基时应避免培养基粘到瓶口，一旦粘上，应擦除干净，否则容易引起污染。

本发明桉树组织培养继代培养的方法为：

（1）继代材料培养：培养室内的温度控制在26-28℃。培养器皿上部的光照强度为1500-3000Lx，光照时间每天10-16小时。刚接种出来的继代材料宜放在弱光环境下培养7-10天左右，避免直射光照，待有芽分化后，新芽长高约0.5厘米后，转到较强的散射光下培养，避免直射光照及过高的温度，温度过高，苗易衰老，切口及老组织易产生愈伤及褐化，温度过高、光照不足，材料易玻璃化。

本发明桉树组织培养生根培养的方法为：

（1）生根苗的选取：选取健壮芽条，叶片展开，茎轴通直，木质化或半木质化1.5厘米以上的粗壮芽条，除去基部叶片、小芽、愈伤组织等，切分为单个芽，避免两个以上的芽连在一起生根。每瓶均匀直扦25株。

（2）生根材料的培养：刚接种的生根材料以塑料筐装好置弱光培养7-10天，待出根达80%以上，再转到炼苗室培养10-20天。

与目前现有技术的桉树组织培养基相比，本发明的优点是：

1、用继代培养基进行培养，桉树材料继代苗月增殖5倍、年增殖率达到5¹²、继代苗生长良好，小苗粗壮、整齐，叶色浓绿、玻璃化苗少，得苗率高；

2、用生根培养基进行培养生根苗生根率可达98%、出根快，温度25±2℃时，平均出根时间为5-7天，根系发达，出根量多平均有5-8条根，小苗木质化好，移栽成活率高，移栽成活率达97%以上，出苗时间快温度25±2℃时，瓶苗出圃时间平均为16天左右。

具体实施方式

下面以实施例对本发明作进一步说明，但本发明并不局限于这些实施例。

实施例1：

桉树组织培养培养基，该培养基包括继代培养基和生根培养基，其中：

每升（L）继代培养基的组分及各组分的含量如下：

每升（L）生根培养基的组分及各组分的含量如下：

实施例2：

桉树组织培养培养基，该培养基包括继代培养基和生根培养基，其中：

每升（L）继代培养基的组分及各组分的含量如下：

每升（L）生根培养基的组分及各组分的含量如下：

实施例3：

桉树组织培养培养基，该培养基包括继代培养基和生根培养基，其中：

每升（L）继代培养基的组分及各组分的含量如下：

每升（L）生根培养基的组分及各组分的含量如下：

实施例4：

桉树组织培养培养基，该培养基包括继代培养基和生根培养基，其中：

每升（L）继代培养基的组分及各组分的含量如下：

每升（L）生根培养基的组分及各组分的含量如下：

对比例：

继代培养基：现有技术采用采用1/2MS+6-BA0.2-1.0mg/L+NAA0.1-0.25mg/L的组合；

生根培养基：现有技术采用1/2MS+IBA0.5-1.0mg/L。

利用上述实施例1和对比例制成的培养基，对桉树进行组织培养，从下表的结果可以看出，实施例的技术指标远超过对比例。

Claims (1)

1.一种桉树组织培养培养基，该培养基包括继代培养基和生根培养基，其特征在于： 

每升（L）继代培养基的组分及各组分的含量如下： 

KNO₃             1900mg/L        肌醇              100mg/L 

NH₃NO₃           400mg/L         盐酸硫胺素（V_B1） 10mg/L 

KH₂PO₄           280mg/L         盐酸吡哆醇（V_B6） 0.8mg/L 

Ca（NO₃）₂·4H₂O 650mg/L         生物素（V_H）      0.05mg/L 

MgSO₄·7H₂O      360mg/L         烟酸（V_B3）       0.5mg/L 

FeSO₄·7H₂O      27.8mg/L        甘氨酸            3.0mg/L 

Na₂·EDTA        37.3mg/L        D-泛酸钙          2.0mg/L 

KI               0.083mg/L       抗坏血酸（V_C）    3.0mg/L 

MnSO₄·4H₂O      22.3mg/L        核黄素（V_B2）     4.0mg/L 

ZnSO₄·7H₂O      8.6mg/L         L-半胱氨酸        2.5mg/L 

CuSO₄·5H₂O      0.025mg/L       6-苄氨基嘌呤      0.4-0.6mg/L 

H₃BO₃            6.2mg/L         萘乙酸            0.2-0.3mg/L 

NaMoO₄·2H₂O     0.25mg/L        蒸馏水            余量； 

每升（L）生根培养基的组分及各组分的含量如下： 

KNO₃             250mg/L         肌醇              60mg/L 

NH₃NO₃           165mg/L         盐酸硫胺素（V_B1） 4.8mg/L 

KH₂PO₄           440mg/L         盐酸吡哆醇（V_B6） 0.48mg/L 

Ca（NO₃）₂·4H₂O 220mg/L         生物素（V_H）      0.0969mg/L 

MgSO₄·7H₂O      260mg/L         烟酸（V_B3）       0.5mg/L 

FeSO₄·7H₂O      27.8mg/L        甘氨酸            0.8mg/L 

Na₂·EDTA        37.3mg/L        泛酸钙            1.0mg/L 

MnSO₄·4H₂O      22.3mg/L        抗坏血酸（V_C）    0.2mg/L 

ZnSO₄·7H₂O      8.6mg/L         L-半胱氨酸        0.5mg/L 

CuSO₄·5H₂O      0.025mg/L       ABT6号            0.5-0.8mg/L 

H₃BO₃            6.2mg/L         吲哚丁酸          0.2-0.4mg/L 

NaMoO₄·2H₂O     0.25mg/L        蒸馏水            余量。