CN101653508A - 一种治疗前列腺肥大、慢性前列腺炎的中药复方制剂 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种具有治疗前列腺肥大、慢性前列腺炎作用的中药复方制剂。本发明的中药复方制剂的活性成分为下列重量百分配比的中药原料组成成分：熟地黄15％－30％，萝摩15％－30、山茱萸5％－20％、车前草15％－30、冬虫夏草5％－20％、甘草梢2％－5％。本发明的中药复方制剂动物实验和糖尿病临床研究，结果显示对于前列腺肥大、慢性前列腺炎治疗具有积极作用，有较大的临床应用价值。本发明制剂配方合理，制备方法简单，宜于规摸型工业化生产。

Description

一种治疗前列腺肥大、慢性前列腺炎的中药复方制剂

技术领域

本发明涉及中药制剂，具体涉及一种含熟地黄等中药的治疗前列腺肥大、慢性前列腺炎的复方制剂及其制备方法和应用。

背景技术：

前列腺肥大、慢性前列腺炎是男性生殖系统的常见疾病，大多数发生于50-70岁之间，在50岁以前也可发生，但较少见。50岁以上男子中有50％-70％的人患有此症，这意味着在发达国家中有3千万潜在病人，其中，美国有1400万病人，欧洲有1400万病人，日本有100万病人。随着人口的老龄化和生活水平的提高，中国前列腺增生患者发病率与世界其他国家一样呈增高的趋势，根据中国前列腺增生治疗领域的专家估计，目前50岁以上的男子中大约有31253975万人患有此症，而且，近年来每年约以0.1％的速度增加。为此，对于制药企业来讲，研究和开发安全有效的前列腺增生治疗药物已成为当务之急。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于研究设计用于治疗前列腺增生的中药制剂。

本发明提供了一种具有治疗前列腺肥大、慢性前列腺炎作用的中药复方制剂。

本发明的中药复方制剂，其中活性成分为下列重量百分配比的中药原料组成成分：

熟地黄15％-30％，萝摩15％-30％、山茱萸5％-20％、车前草15％-30％、冬虫夏草5％-20％、甘草梢2％-5％。

本发明中药复方制剂所述的熟地黄，功能补益肾气，为本发明配方中的君药；山茱萸、冬虫夏草亦均有补肾作用，两药均能辅助熟地黄，增强补肾之功，为本发明配方中的臣药；萝摩补益精气同时可解毒，属兼清兼补；甘草梢清火解毒，针对茎中疼痛与浊淋而设，综观全方，补而不留邪，祛邪不伤正，恰中病机。

本发明的中药复方制剂补益精气，清热通淋。主治劳淋，气淋，热淋，症见小便淋沥不畅，遇劳辄发，或伴小腹作胀，或伴尿急，尿痛等症。适用于前列腺肥大，慢性前列腺炎等病症。主要为治疗前列腺肥大、慢性前列腺炎设计组方制成。此两病症虽然古代中医文献无此名称，但近年来有所阐述，如《实用中医大全》说：“前列腺炎属中医淋证…范畴”前列腺肥大“可见小便不畅，尿频尿急”之症，亦与中医淋症主症相似。祖国医学所说淋症范围颇广，根据淋证的表现症状，其中劳淋、气淋与前列腺肥大较相似，而热淋则可能包括慢性前列腺炎。

本发明所涉及的熟地黄、萝摩、山茱萸、车前草、冬虫夏草、甘草梢符合中国国家药典标准规定的质量要求。

本发明的另一目的是提供了上述治疗前腺肥大、慢性前列腺炎复方制剂的制备方法，该方法包括下列步骤：

配方：

熟地黄10％-30％，山茱萸5％-20％，冬虫夏草5％-20％，萝摩10％-30％，车前草10％-30％，甘草梢2％-8％g；

方法：

(1)取熟地黄，山茱萸，萝摩，车前草及甘草梢混合，加入药材总重2-8倍量的60％乙醇，回流提取3次，每次时间分别为1.5、1、1小时，过滤，合并滤液；

(2)65℃减压浓缩滤液，浓缩比例为1000ml药液：37g生药，然后按照50ml絮凝剂/1000ml药液的量，于35-55℃加入1％壳聚糖絮凝剂，使其沉降4小时，高速离心；

(3)取上清液，80℃～85℃浓缩至相对密度1.34～1.36，再加入虫草菌丝粉，70℃干燥5h，即得复方制剂浸膏粉；

(4)将浸膏粉与糖粉、糊精混合制颗粒，过14目筛，制成口服颗粒剂。

本发明的又一目的是提供了上述中药复方制剂在制备治疗前列腺肥大、慢性前列腺炎药物中的应用。

本发明复方制剂进行了动物实验和糖尿病临床研究，结果显示，

(1)将SD大鼠去势7天后皮下注射睾酮4mg/kg，同时给予0.0938，0.1875，0.375/kg的该复方制剂混悬液罐胃(相当于临床拟用量的2.5，5，10倍)，每天一次，每周7天，连续5周后处死检测。大、中剂量组的前列腺指数、前列腺干重、背叶重量较模型组有显著性差异，大剂量组的前列腺体积较模型组有极显著的差异；大、中剂量组的腺体上皮高度、腺腔管径较模型组有显著性差异，大剂量组的酸性磷酸酶，大、中剂量组的DNA含量较模型组有显著性差异。试验提示，该复方制剂在本试验条件下对良性前列腺增生有较显著的抑制作用。

(2)将昆明小鼠种植胎鼠生殖窦后给予0.0938，0.1875，0.375g/kg的该复方制剂混悬液罐胃(相当于临床拟用量的2.5，5，10倍)，每天一次，每周7天，连续5周后处死检测。大剂量组的前列腺指数、大、中剂量组的背叶重量、中剂量组的体积较模型组有显著性差异；大、中剂量组的腺体上皮高度、各剂量组的腺腔管径较模型组有显著性差异，大、小剂量组的酸性磷酸酶较模型组有显著性差异。试验提示，该复方制剂在本试验条件下对良性前列腺增生有较显著的抑制作用。

(3)观察连续给予受试物一周后对大鼠棉球肉芽肿增生的抑制作用。结果表明，该复方制剂各剂量组抑制棉球肉芽肿增生的作用具有显著意义。

本发明的中药复方制剂动物实验和糖尿病临床研究，结果显示对于前列腺肥大、慢性前列腺炎治疗具有积极作用，有较大的临床应用价值。

本发明的中药复方制剂配方合理，制备方法简单，宜于规摸型工业化生产。

具体实施方式

实施例1对大鼠前列腺增生影响的实验研究

摘要：根据新药临床前研究指导原则汇编要求，对滴泉(胶囊、片)进行抗前列腺增生的试验研究。将SD大鼠去势7天后皮下注射睾酮4mg/kg，同时给予0.0938，0.1875，0.375/kg的滴泉(胶囊、片)混悬液罐胃(相当于临床拟用量的2.5，5，10倍)，每天一次，每周7天，连续5周后处死检测。试验表明，大、中剂量组的前列腺指数、前列腺干重、背叶重量较模型组有显著性差异，大剂量组的前列腺体积较模型组有极显著的差异；大、中剂量组的腺体上皮高度、腺腔管径较模型组有显著性差异，大剂量组的酸性磷酸酶，大、中剂量组的DNA含量较模型组有显著性差异。试验提示，滴泉(胶囊、片)在本试验条件下对良性前列腺增生有较显著的抑制作用。

1.试验依据

1.1委托单位提供的有关资料

1.2预试验结果

1.3参考资料：

中华人民共和国卫生部药政局新药(西药)临床前研究指导原则汇编药理学101-103 1993

陈奇主编中药药理研究方法学人民卫生出版社804-806 1993

2.试验目的观察连续给予受试物对大鼠良性前列腺增生模型的抑制作用，包括前列腺重量、组织结构、ACP、DNA含量等的影响，为临床使用提供药效学参考。

3.受试物

3.1名称：滴泉(胶囊、片)，棕褐色干浸膏，袋装。

3.2提供单位：上海信谊百路达药业有限公司。

3.3批号：000618

3.4含量：每g浸膏含3.42g生药。

3.5配置方法：给药前用动物饮用消毒水配置所需浓度的混悬液

3.6溶剂：动物饮用消毒水

3.7保存条件：0-4℃下密封保存

4动物

4.1来源、种属、品系、合格证

由中国科学院上海实验动物中心提供的SD大鼠，鼠龄5个月，动物合格证号：中科动管字第003号。试验前对动物观察1周，剔除不合格动物后随机分为6组

4.2体重：试验开始时体重313.5±29.15(X±SD)kg。

4.3性别：雄性

4.4每组动物数：各10只

4.5饲养条件：清洁级动物房，温度22±2℃，湿度45±10％，换气次数12次/分，喂养本中心常规消毒大鼠饲料，饮用消毒水，群居饲养，每笼5只。

5.剂量

5.1剂量设置及理由：参照新药药理学指导原则，公司提供的临床拟用剂量，即成人2.25g/d，按60kg体重计算，2.25g/d÷60kg体重＝0.0375g/kg/d。动物给药量按临床拟用量的2.5倍、5倍、10倍设小、中、大三个剂量组。

小剂量组，0.0375g/kgx2.5倍＝0.09375g/kg/d

(2)中剂量组，0.0375g/kgx5倍＝0.1875g/kg/d

(3)大剂量组，0.0375g/kgx10倍＝0.375g/kg/d

6.剂距：2倍

7.对照

7.1空白对照组：给予相同体积的消毒饮用水

7.2模型对照组(模型组。手术，注射睾酮)：给予相同体积的消毒饮用水

7.3阳性对照组(前列康组)：采用临床常用的抗前列腺增生药物前列康，相当于临床口服剂量的5倍。成人5g/d，按60kg计算，即5g÷60kg x 5倍＝0.417g/kg/d

8.给药体积：每只大鼠给药容量10ml/kg，按等量不同给药浓度

9.给药期：5周

10.给药途经：灌胃与临床给药途径相同。

11.试验方法：

11.1药物与主要器械

丙酸睾酮注射液，上海第九制药厂生产，每支1ml，含丙酸睾酮25mg/ml，批号：991203

前列康，康恩贝集团制药有限公司制造，批号000421-1，规格0.5g x 60片/瓶，临床用量，一次3-4片，一日3次，口服。

光学显微镜，日本0lympus

分光光度计UV-VIS-756型，上海医疗器械三厂生产

MD100.1型电子天平

11.2药物配置：取滴泉(胶囊、片)3.75g，溶于100ml饮用水中，配置成3.75％浓度为高剂量组，中剂量组、小剂量组分别稀释2倍、4倍。

11.3给药方法：按临床给药途径，灌胃给药，每天给药一次，每周给药7天，连续给药5周，每周称量体重，根据每只动物的体重，调整给药剂量。

11.4前列腺增生动物模型的制备

剂量组、模型组、前列康组SD大鼠50只。戊巴比妥钠按40mg/kg腹腔注射，麻醉成功后，经阴囊行无菌手术，摘除双侧睾丸，经1周恢复后，每只大鼠均皮下注射丙酸睾酮4ml/kg，同时剂量组给予滴泉胶囊，模型组给予生理盐水，前列康组给予前列康罐胃，一个月后，放血处死，精心剥离前列腺周围组织，取出前列腺检测.

11.5DNA提取

步骤(1).取约25-30mg前列腺组织，用手术刀切成小块，再用液氮碾碎。(2).将组织收集到1ml离心管中，加200ulTE悬浮。再加入400ul消化液，混匀，加入3ul蛋白酶K，混匀，55~C保温，过夜。(3).加入200ul无水乙醇，混匀，然后将样品全部转移到3S柱，柱子放入2.0ml收集管，离心，10000转/分，室温，离心1分钟。(4).取下3S柱，弃取离心管中的离心液，将柱子放入同一根离心管中，加入500ul洗液，10000转/分，室温离心1分钟。(5).重复步骤(4)一次。(6).取下3S，弃去离心管中的离心液，将柱子放入同一根离心管中，10000转/分，室温离心2分钟，弃去残留的洗液.(7).在柱子中央加入100ul Elution Buffer，将柱子放入新的干净2.0ml离心管中，室温或37-55℃放置2分钟。(8).10000转/分，室温离心1分钟。收集管中的液体即为DNA。(9).用分光光度计测量DNA含量，10D260＝50ug DNA。

12观察指标

12.1一般症状：每日给药前、后两次观察动物的外观体征、行为活动、进食量、粪便等情况。

12.2体重：手术前、给药期间至给药结束时，每周称量每只动物体重，计算每组平均体重。

12.3尿常规检测：试验结束前一天，采集一夜蓄留尿，进行尿糖定性试验(斑氏法)、蛋白定性检测、尿血红蛋白检测(联苯胺法)，PH值(精密PH试纸)。

12.4前列腺重量、前列腺指数、体积、腹叶，背叶干重、湿重检测：剖开腹腔，暴露前列腺，分离周围组织，取出前列腺部分，从腹叶和背叶交界处切开前列腺，剥离并剔除前列腺包绕的输尿管，用电子天平分别称取前列腺总重、腹叶重、背叶重。分别将上述组织放入含有生理盐水的计量管中，并将增高的液体量用三通管移入微量吸管，读取吸管的液体量既为组织的体积a分别切取腹叶、背叶部分组织称重，并将该组织放入80℃烤箱中24h，取出称取干重，通过部分干重计算总体干重。留取少量腹叶组织，-80℃保存，用做DNA含量测定。

12.4组织病理学检查：各动物取前列腺腹叶组织，尽量相同部位，用10％福尔马林固定，石蜡切片，H.E.染色，光镜下观察，随机取不同视野下的前列腺上皮细胞和腺腔管经，用目镜测微尺进行测量。测量每个前列腺中不同区域50个腺上皮细胞的高度及20个腺腔的最大直径。

12.5.血清生化：给药结束时，每只动物分别经股静脉放血，离心取血清，进行酸性磷酸酶检查(ACP，采血前禁食14-16小时)。

13.统计学方法：采用OFFICE软件，对体重、前列腺重量、体积、干重、脏器指数、前列腺组织上皮高度和腺腔管经、血清生化、DNA含量算出每组的平均值和标准差(X±SD)，再进行显著性t检验。

14.试验结果

14.1一般观察模型组个别动物出现脱毛现象外，其余动物在症状、体征、行为等方面未见异常。

14.2各组体重、前列腺重量、脏器指数、前列腺干重、前列腺体积以及腹叶重、腹叶干重、腹叶体积、背叶重，背叶干重如下：

组别	体重(g)	前列腺重(mg)	脏器指数	前列腺干重(mg)	前列腺体积(ml)
						对照组	342±21	683.1±114.4	0.200±0.033	151±29.26	0.74±0.095
模型组	309±37	1019±185.6	0.332±0.064	191.9±32.8	1.013±0.211
						前列康组	323±39	884.7±112.3*★★	0.278±0.048*★★	168.4±32.47	0.982±0.276★★
大剂量组	327±54	871.8±54.21*★	0.272±0.035*★	176.9±28.82*	0.85±0.179**
						中剂量组	330±41	886.8±116.4★★	0.271±0.046*★★	175.4±34.85*	0.936±0.313★
小剂量组	316±29	986.1±254.4★★	0.311±0.07★★	210.5±38.38△△★★	0.97±0.272★

组别	腹叶重(mg)	腹叶干重(mg)	腹叶体积(ml)	背叶重(mg)	背叶干重(mg)
						对照组	440.4±66.413	99.161±33.997	0.45±0.06	242.7±71.12	51.88±12.42
模型组	590.7±159.8	107.47±29.321	0.6±0.19	428.3±171.2	84.4±34.17
						前列康组	611.5±134.88★★	109.75±23.448	0.65±0.19★★	273.2±71.27*	74.1±34.91**★★
大剂量组	563.3±67.09★	123.91±37.336	0.57±0.11	275.5±50.79*	52.94±11.48△★★
						中剂量组	601.4±133.24★	114.68±30.386	0.61±0.16★★	282.4±70.44*	60.69±13.23★★
小剂量组	674.7±206.6	144.15±40.459*△★	0.65±0.21★	311.4±155.8★	66.33±30.31*★★

n＝10，与模型组比较*P＜0.05，**P＜0.01，与前列康比较，△P＜0.05，△△

P＜0.01，与对照组比较，★P＜0.05，★★P＜0.01

14.3尿液分析：尿血红蛋白均为阴性、蛋自定性均为阴性、PH值均为8.0、尿糖检测除个别为“+、±”外，其它均为阴性，各组比较无显著差异。

14.4体重变化如下表：

组别	1周	1周	2周	3周	4周	5周
							对照组	325.5±19.64	320.5±16.24	326.5±15.10	332.5±16.37	337.5±17.99	342±20.98
模型组	303±31.02	291±30.71*	299.5±32.70*	301±33.42*	303.5±34.88*	308.5±37.27*

前列康组	307±20.30	293.5±20**	301±22.46**	308±26.06**	316.5±32.75*	323±39.17
							大剂量组	323.5±55.56	315±48.65	322.5±48.72	322±51.27	325±53.59	326.5±53.7
中剂量组	308±20.71	316±35.96	314.5±28.23	318±31.64	324±35.81	330±40.62
							小剂量组	308.5±18.11	297.5±14.77**	306±17.23*	310±20.68*	324±35.81	316±29.14*

各剂量组与模型组比较未见显著性差异，与对照组比较，Ic＜0.05，料P＜0.01

14.5组织病理变化：对照组前列腺组织未见明显异常，模型组腺体排列明显密集，部分腺体扩张，部分呈乳头状突向腔内，有时腔内可见粉染物质，上皮细胞呈复层或假复层，细胞柱状，浆少，核圆或立方形，可见核仁，部分组织间质小血管扩张充血，前列康组、滴泉(胶囊、片)剂量组与模型组比较，也有程度不等的增生，但增生的上皮乳头减少，腺腔扩大，上皮细胞呈立方或扁平，胞浆透明，核圆居中，间质减少。上皮细胞高度(单位mm，放大400倍)、腺腔管经(单位咖，放大100倍)计数结果如下表。

组别	动物数	上皮细胞高度计数	X±SD
				对照组	10	500	0.8218±0.2502
模型组	10	500	1.4654±0.5679
				前列康组	10	500	1.3572±0.5634**
大剂量组	10	500	1.3176±0.5232**
				中剂量组	10	500	1.3796±0.5566**

与模型组比较**P＜0.01

组别	动物数	腺腔管径计数	X±SD
				对照组	10	200	4.8605±1.7549
模型组	10	200	6.0640±2.2450
				前列康组	10	200	5.0595±2.1038**
大剂量组	10	200	5.0895±1.5198**
				中剂量组	10	200	5.2450±1.3631*
小剂量组	10	200	5.5935±1.5085*

与模型组比较*P＜0.05

14.6酸性磷酸酶的变化

14.7前列腺组织DNA含量的变化

组别	X±SD	与对照组比较	与模型组比较
				对照组	58.613±1.967
模型组	85.475±16.709	P＜0.01
				前列康组	70.949±13.082	P＜0.05	P＜0.05
大剂量组	70.392±11.217	P＜0.05	P＜0.05
				中剂量组	70.825±13.884	P＜0.05	P＜0.05
小剂量组	82.654±20.334	P＜0.01	P＜0.05

与模型组比较**P＜0.01，*P＜0.05

15结果评价：本试验表明，将SD大鼠去势7天后皮下注射睾酮4mg/kg，同时给予0.0938，0.1875，0.375g/kg的滴泉(胶囊、片)混悬液灌胃(相当于临床拟用量的2.5，5，10倍)，每天一次，每周7天，连续5周后处死检测。大、中剂量组的前列腺指数、前列腺干重、背叶重量较模型组有显著性差异，大剂量组的前列腺体积较模型组有极显著的差异：大、中剂量组的腺体上皮高度、腺腔管径较模型组有显著性差异，大剂量组的酸性磷酸酶，大、中剂量组的DNA含量较模型组有显著性差异。试验提示，滴泉(胶囊、片)在本试验条件下对良性前列腺增生有较显著的抑制作用。并获得较为一致的结果，为临床治疗前列腺疾病提供了一个新的有效复方。试验中出现的体重差异，与动物睾丸切除手术有关。

15.1本试验有效作用剂量在0.1875g/kg以上。

实施例2对小鼠前列腺增生影响的实验研究

摘要：根据新药临床前研究指导原则汇编要求，对滴泉(胶囊、片)进行抗前列腺增生的试验研究。将昆明小鼠种植胎鼠生殖窦后给予0.0938，0.1875，0.375g/kg的滴泉(胶囊、片)混悬液罐胃(相当于临床拟用量的2.5，5，10倍)，每天一次，每周7天，连续5周后处死检测。试验表明，大剂量组的前列腺指数、大、中剂量组的背叶重量、中剂量组的体积较模型组有显著性差异；大、中剂量组的腺体上皮高度、各剂量组的腺腔管径较模型组有显著性差异，大、小剂量组的酸性磷酸酶较模型组有显著性差异。试验提示，滴泉(胶囊、片)在本试验条件下对良性前列腺增生有较显著的抑制作用。

1.试验依据

1.1委托单位提供的有关资料

1.2预试验结果

1.3参考资料：

中华人民共和国卫生部药政局新药(西药)临床前研究指导原则汇编药理学101.103 1993

陈奇主编中药药理研究方法学人民卫生出版社806-807 1993

2.试验目的观察连续给予受试物对小鼠良性前列腺增生模型的抑制作用，包括前列腺重量、组织结构、酸性磷酸酶等的影响，为临床使用提供药效学参考。

3.受试物

3.1名称：滴泉(胶囊、片)，棕褐色干浸膏，袋装。

3.2提供单位：上海信谊百路达药业有限公司。

3.3批号：000618

3.4含量：每g浸膏含3.42g生药。

3.5配置方法：给药前用动物饮用消毒水配置所需浓度的混悬液

3.6溶剂：动物饮用消毒水

3.7保存条件：0-4℃下密封保存

4动物

4.1来源、种属、品系、合格证

由本校实验动物中心提供昆明小鼠，动物合格证号：医动字第02-24-5号。

试验前对动物观察1周，剔除不合格动物后随机分为6组

4.2体重：试验开始时体重35.4±2.09(X±SD)g。

4.3性别：雄性

4.4每组动物数：各10只

4.5饲养条件：清洁级动物房，温度22±2℃，湿度45±10％，换气次数12次/分，喂养本中心常规消毒大鼠饲料，饮用消毒水，群居饲养，每笼5只。

5.剂量

5.1剂量设置及理由：参照新药药理学指导原则，公司提供的临床拟用剂量，即成人2.25g/d，按60kg体重计算，2.25g/d÷60kg体重＝0.0375g/kg/d。动物给药量按临床拟用量的2.5倍、5倍、10倍设小、中、大三个剂量组。

(1)小剂量组，0.0375g/kgx2.5倍＝0.09375g/kg/d

(2)中剂量组，0.0375g/kgx5倍＝0.1875g/kg/d

(3)大剂量组，0.0375g/kgx10倍＝0.375g/kg/d

6.剂距：2倍

7.对照

7.1空白对照组：给予相同体积的消毒饮用水

7.2假手术组：给予相同体积的消毒饮用水

7.3阳性对照组(前列康组)：采用临床常用的抗前列腺增生药物前列康，相当于临床口服剂量的5倍。成人5g/d，按60kg计算，即5g÷60kgx5倍＝0.417g/kg/d

8.给药体积：每只小鼠给药容量20ml/kg，按等量不同给药浓度

9.给药期：5周

10.给药途经：灌胃与临床给药途径相同。

11.试验方法：

11.1药物与主要器械

前列康，康恩贝集团制药有限公司制造，批号000421-1，规格0.5gx60片/瓶，临床用量，一次3-4片，一日3次，口服。

光学显微镜，日本Olympus

分光光度计UN-VIS-756型，上海医疗器械三厂生产

MD100-1型电子天平

11.2药物配置：取滴泉(胶囊、片)1.875g，溶于100ml饮用水中，配置成1.875％浓度为高剂量组，中剂量组、小剂量组分别稀释2倍、4倍。

11.3给药方法：按临床给药途径，灌胃给药，每天给药一次，每周给药7天，连续5周，每周称量体重，根据每只动物的体重，调整给药剂量。

11.4前列腺增生动物模型的制备

取16天胎龄昆明小鼠的生殖窦组织25个，放入试管中，加生理盐水8ml混匀，匀浆机下匀浆10秒钟，将组织捣碎而又不破坏细胞的完整性。取雄性小鼠50只，，鼠龄10周。戊巴比妥钠按60mg/kg腹腔注射，麻醉成功后，无菌操作剖开下腹部，仔细分离前列腺腹叶，选正中、两侧三个不同的位点，用微型注射器将生殖窦组织的混悬液分别注入前列腺组织内，每点50ul；另取10只，用上述方法分别注射生理盐水50ul，作为假手术对照。然后缝合腹壁，观察7天后给药。剂量组给予滴泉(胶囊、片)，模型组、假手术组给予生理盐水，前列康组给予前列康灌胃，5周后，放血处死，精心剥离前列腺周围组织，取出前列腺检测.

12观察指标

12.1一般症状：每日给药前、后两次观察动物的外观体征、行为活动、进食量、粪便等情况。

12.2体重：手术前、给药期间至给药结束时，每周称量每只动物体重，计算每组平均体重。

12.4前列腺重量、前列腺指数、体积、干重、腹叶、背叶湿重检测：剖开腹腔，暴露前列腺，分离周围组织，取出前列腺部分，从腹叶和背叶交界处切开前列腺，剥离并剔除前列腺包绕的输尿管，用电子天平分别称取前列腺总重、腹叶重、背叶重。分别将上述组织放入含有生理盐水的计量管中，并将增高的液体量用三通管移入。微量刻度吸管，读取吸管的液体量既为组织的体积。切取背叶部分组织放入80~C烤箱中24h，取出称取干重，通过部分干重计算总体干重。

12.4组织病理学检查：剩余前列腺组织，用10％福尔马林固定，石蜡切片，

H.E.染色，光镜下观察，随机取不同视野下的前列腺上皮细胞和腺腔管经，用目镜测微尺进行测量。测量每个前列腺中不同区域20个腺上皮细胞的高度及10个腺腔的最大直径。

12.5血清生化：给药结束时，每只动物分别经眼眶静脉取血，离心取血清，进行酸性磷酸酶检查(ACP)，采血前禁食14-16小时。

13.统计学方法：采用OFFICE软件，对体重、前列腺重量、体积、干重、脏器指数、前列腺组织上皮高度和腺腔管经、血清生化算出每组的平均值和标准差(X±SD)，再进行显著性t检验。

14试验结果

14.1一般观察动物在症状、体征、行为等方面未见异常。

14.2各组体重、前列腺重量、脏器指数、前列腺体积、腹叶重、背叶重结果如下：

组别	体重(g)	前列腺湿重(mg)	脏器指数	腹叶重(mg)	背叶重(mg)	体积(ml)
							对照组	44.43±4.116	43.8±6.596	9.982±1.989	14.7±3.335	29.1±4.977	0.043±0.008
假手术组	46.61±2.7	45.3±7.818	9.743±1.767	15.7±2.869	29.6±5.441	0.044±0.005
							模型组	45.14±3.044	53.1±4.771△##	11.8±1.332△△#	18.1±2.079△#	35±4.523△#	0.051±0.003△△#
前列康组	46.37±3.794	47.4±5.296*	10.29±1.456*	14.8±3.458*	32.6±3.373	0.048±0.008
							大剂量组	46.92±4.444	46.4±7.501*	9.956±1.752*	16.5±2.173	29.9±5.801*	0.046±0.007
中剂量组	44.93±2.714	48.4±5.125*	10.82±1.51	17.6±1.578#	30.8±4.022*	0.045±0.005*
							小剂量组	45.36±3.415	48.8±5.846	10.8±1.424	16.9±3.143	31.9±3.725	0.048±0.006

n＝10与模型组比较 *P＜0.05 **P＜0.01

与假手术组比较△P＜0.05，△△P＜0.01

与对照组比较#P＜0.05，##P＜0.01

14.3体重(g)变化如下表：

组别	-1周	1周	2周	3周	4周	5周
							对照组	37.3±1.39	40.2±3.16	41.2±	42.3±	43.5±3.8	44.4±

			2.78	3.28		4.12
							假手术组	40.1±1.99	41.3±2.01	42.8±2.29	44.1±2.57	45.5±2.54	46.6±2.7
模型组	39.9±1.24	40.8±1.44	42.1±1.65	43.2±2.16	44.3±2.8	45.1±3.04
							前列康组	39.73±1.54	40.7±1.77	42.7±2.31	43.8±2.64	44.8±2.95	46.4±3.79
大剂量组	39.96±3.84	41.2±4.94	43.0±4.83	44.6±4.66	46.2±4.52	46.9±4.44
							中剂量组	38.78±1.75	39.8±1.58	41.6±1.89	42.8±2.07	44.0±2.39	44.9±2.71
小剂量组	38.69±1.60	40.0±1.77	41.2±2.07	42.4±2.53	43.8±3.06	45.4±3.42

各剂量组与模型组比较未见显著性差异

14.4组织病理变化：对照组前列腺组织未见明显异常，模型组腺体排列明显密集，部分腺体扩张，部分呈乳头壮突向腔内，上皮细胞呈复层或假复层增生，细胞柱状，部分组织间质小血管扩张充血，前列康组、滴泉(胶囊、片)剂量组与模型组比较，也有程度不等的增生，但增生的上皮乳头减少，上皮细胞呈立方或扁平，胞浆透明，，间质减少。上皮细胞高度(单位mm，放大400倍)、腺腔管经(单位咖。放大100倍)计数结果如下表。

组别	动物数	上皮细胞高度计数	X±SD	P值(与模型组比较)
					对照组	10	200	0.917±0.306	＜0.01
假手术组	10	200	0.930±0.253	＞0.05
					模型组	10	200	1.031±0.381

前列康组	10	200	0.975±0.354	＜0.05
					大剂量组	10	200	0.929±0.314	＜0.01
中剂量组	10	200	0.936±0.335	＜0.05
					小剂量组	10	200	0.948±0.359	＞0.05

组别	动物数	腺腔管径计数	X±SD	P值(与模型组比较)
					对照组	10	100	2.586±0.903	＜0.01
假手术组	10	100	2.812±0.1.255	＞0.05
					模型组	10	100	3.044±1.274
前列康组	10	100	2.667±1.064	＜0.05
					大剂量组	10	100	2.662±1.215	＜0.05
中剂量组	10	100	2.658±1.092	＜0.05
					小剂量组	10	100	2.649±0.915	＜0.05

14.5酸性磷酸酶的变化

组别	动物数	X±SD
			对照组	10	109.59±13.987
假手术组	10	117.54±23.57
			模型组	10	137.09±26.67**

前列康组	10	124.39±22.44
			大剂量组	10	126.89±16.66*
中剂量组	10	122.25±17.46*
			小剂量组	10	128.85±20.48

与对照组比较*P＜0.05 **P＜0.01

15结果评价：本试验表明，将昆明小鼠种植胎鼠生殖窦后给予0.0938，0.1875，0.375g/kg的滴泉(胶囊、片)混悬液罐胃(相当于临床拟用量的2.5，5，10倍)，每天一次，每周7天，连续5周后处死检测。大剂量组的前列腺指数、大、中剂量组的背叶重量、中剂量组的体积较模型组有显著性差异；大、中剂量组的腺体上皮高度、各剂量组的腺腔管径较模型组有显著性差异，大、小剂量组的酸性磷酸酶较模型组有显著性差异。试验提示，滴泉(胶囊、片)在本试验条件下对良性前列腺增生有较显著的抑制作用。

实施例3治疗实验性前列腺炎的药效研究

摘要：观察连续给予受试物一周后对大鼠棉球肉芽肿增生的抑制作用。结果表明，滴泉胶囊各剂量组抑制棉球肉芽肿增生的作用具有显著意义。

1.试验依据

1.1委托单位提供的有关资料。

1.2中华人民共和国卫生部药政局中药新药研究指南1993

2.试验目的观察连续给予受试物一周，对大鼠棉球肉芽肿增生的抑制作用对昆明小鼠疼痛的抑制作用。

3.受试物

3.1名称：滴泉胶囊，棕褐色干浸膏，袋装。

3.2提供单位：上海信谊百路达药业有限公司。

3.3批号：000618

3.4含量：每g浸膏含3.42g生药。

3.5配置方法：给药前用动物饮用消毒水配置所需浓度的混悬液

3.6溶剂：动物饮用消毒水

3.7保存条件：0-4~C下密封保存

4动物

4.1来源、种属、品系、合格证

由上海中医药大学实验动物中心提供的SD大鼠，鼠龄4个月，动物合格证号：中科动管字第003号。

4.2体重：试验体重366±24(X±SD)g。

4.3性别：雄性

4.4每组动物数：各10只

4.5饲养条件：清洁级动物房，温度22±2℃，湿度45±10％，换气次数12次/分，喂养本中心常规消毒大鼠饲料，饮用消毒水，群居饲养，每笼5只。

5.剂量

5.1剂量设置及理由：参照新药药理学指导原则，公司提供的临床拟用剂量，即成人2.25g/d，按60kg体重计算，2.25g/d÷60kg体重：0.0375g/kg/d。动物给药量按临床拟用量的2.5倍、5倍、10倍设小、中、大三个剂量组。

(1)小剂量组，0.0375g/kgx2.5倍＝0.09375g/kg/d

(2)中剂量组，0.0375g/kgx5倍＝0.1875g/kg/d

(3)大剂量组，0.0375g/kgx10倍＝0.375g/kg/d

6.对照

6.1空白对照组：给予相同体积的消毒饮用水

6.2阿司匹林组：200mg/kg

6.3前列康组：相当于临床口服剂量的5倍。成人5g/d，按60kg计算，即5g÷60kgx5倍＝0.417g/kg/d

7.给药体积每只大鼠给药容量10ml/kg，按等量不同给药浓度

8.给药途经灌胃与临床给药途径相同。

9.试验方法

9.1药物及材料：阿司匹林，上海九福药业有限公司，批号001201，规格：25mg/片临床用量，25-50mg/日，口服。避光、密封保存。前列康，康恩贝集团制药有限公司制造，批号000421-1，规格0.5g x 60片/瓶，临床用量，一次3-4片，一日3次，口服。脱脂棉球，做成重10±1g，大小相近，直径约7mm，高压消毒后使用。

9.2药物配制：取滴泉胶囊3.75g，溶于100ml饮用水中，配置成3.75％浓度为高剂量组，中剂量组、小剂量组分别稀释2倍、4倍。取阿司匹林2g，溶于100ml消毒饮用水中，配置成2％的浓度，取前列康4.17g，溶于100ml饮用水中，配置成4.17％的浓度。

9.3动物模型：大鼠在戊巴比妥麻醉下，在左右掖窝各剪一小口，用血管钳扩充皮下组织，将灭菌棉球分别植入大鼠两侧掖窝皮下，然后缝合，术后次日开始按上述剂量给药，第8天称重，给药2小时后，将大鼠麻醉，剥离并取出棉球肉芽组织，剔尽周围脂肪组织，60℃下12h，烘干，称重。

10观察指标 肉芽肿净重，将烘干的肉芽肿重量减去原棉球重量即为肉芽肿净重。

11统计学方法 采用OFFICE软件，算出每100g体重下棉球的重量(各组肉芽肿的指数)，计算其平均值和标准差(X±SD)，再进行显著性t检验。

12结果及评价 结果如下表。

滴泉胶囊对大鼠棉球肉芽肿增生的影响

组别	给药剂量(g/kg/d)	动物数(只)	肉芽肿干重(mg/100g)(抑制率％)	P值(与对照组比较)
					正年产对照组	0	10	19.90±1.76
阿司匹林组	0.2	10	15.88±2.08(20.23)	P＜0.01
					前列康组	0.417	10	16.96±2.77(14.80)	P＜0.05
滴泉胶囊大剂量组	0.375	10	16.42±4.26(17.50)	P＜0.05

中剂量组	0.1875	10	16.84±2.88(15.36)	P＜0.05
					小剂量组	0.09375	10	16.83±3.86(15.41)	P＜0.05

结果表明：滴泉胶囊各剂量组与阿司匹林组、前列康组均有抑制慢性肉芽肿增生的作用。

实施例4：

取熟地黄500g，山茱萸300g，萝摩400g，车前草400g及甘草梢80g，加入23L的60％乙醇，回流提取3次，每次时间分别为1.5、1、1小时，过滤，合并滤液；65℃减压浓缩滤液，浓缩至无醇味，于35℃加入500ml 1％壳聚糖絮凝剂，使其沉降4小时，3000r/min高速离心，取上清液，80℃浓缩至相对密度1.35，再加入虫草菌丝粉150g，70℃干燥5h，即得复方制剂浸膏粉，将浸膏430g与糖粉340g、糊精230g混合制颗粒，过14目筛，制成1000g口服颗粒剂。

实施例5：

取熟地黄600g，山茱萸250g，萝摩500g，车前草300g及甘草梢80g，加入23L的60％乙醇，回流提取3次，每次时间分别为1.5、1、1小时，过滤，合并滤液；65℃减压浓缩滤液，浓缩至无醇味，于35℃加入500ml 1％壳聚糖絮凝剂，使其沉降4小时，2500r/min高速离心，取上清液，80℃浓缩至相对密度1.37，再加入虫草菌丝粉100g，70℃干燥5h，即得复方制剂浸膏粉，将浸膏400g与糖粉300g、糊精250g混合制颗粒，过14目筛，制成1000g口服颗粒剂。

实施例6：

取熟地黄450g，山茱萸300g，萝摩450g，车前草400g及甘草梢60g，加入23L的60％乙醇，回流提取3次，每次时间分别为1.5、1、1小时，过滤，合并滤液；65℃减压浓缩滤液，浓缩至无醇味，于35℃加入500ml 1％壳聚糖絮凝剂，使其沉降4小时，3000r/min高速离心，取上清液，80℃浓缩至相对密度1.35，再加入虫草菌丝粉200g，70℃干燥5h，即得复方制剂浸膏粉，将浸膏450g与糖粉350g、糊精220g混合制颗粒，过14目筛，制成1000g口服颗粒剂。

Claims (3)

1、一种治疗前列腺肥大、慢性前列腺炎的复方制剂，其特征在于其中活性成分为下列重量百分配比的中药原料组成成分：熟地黄10％-30％，山茱萸5％-20％，冬虫夏草5％-20％，萝摩10％-30％，车前草10％-30％，甘草梢2％-8％g。

2、一种如权利要求1所述的治疗前列腺肥大、慢性前列腺炎的复方制剂的制备方法，其特征在于该方法包括下列步骤：

配方：

熟地黄10％-30％，山茱萸5％-20％，冬虫夏草5％-20％，萝摩10％-30％，车前草10％-30％，甘草梢2％-8％g；

方法：

(1)取熟地黄，山茱萸，萝摩，车前草及甘草梢混合，加入药材总重2-8倍量的60％乙醇，回流提取3次，每次时间分别为1.5、1、1小时，过滤，合并滤液；

(2)65℃减压浓缩滤液，浓缩比例为1000ml药液：37g生药，然后按照50ml絮凝剂/1000ml药液的量，于35-55℃加入1％壳聚糖絮凝剂，使其沉降4小时，高速离心；

(3)取上清液，80℃～85℃浓缩至相对密度1.34～1.36，再加入虫草菌丝粉，70℃干燥5h，即得复方制剂浸膏粉；

(4)将浸膏粉与糖粉、糊精混合制颗粒，过14目筛，制成口服颗粒剂。

3、一种中药复方制剂在制备治疗前列腺肥大、慢性前列腺炎的药物中的应用，其特征在于所述复方制剂中活性成分为下列重量百分配比的中药原料组成成分：

熟地黄10％-30％，山茱萸5％-20％，冬虫夏草5％-20％，萝摩10％-30％，车前草10％-30％，甘草梢2％-8％g。