CN101623469A - 一种古威活络酊的检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种古威活络酊的检测方法，它是在现有的产品生产过程中增加了可以对古威活络酊的主要药物成分进行有效检测的方法，使得古威活络酊成品中的主要药物成分比较确定，产品质量的监控水平有很大的提高。本发明的应用，既有利于生产厂家和管理部门对产品的监测，也可以为医疗部门和患者的治疗提供较好的保障。
Description
技术领域
本发明属于制药技术领域，涉及一种酊剂的检测方法，特别涉及一种古威活络酊的检测方法。
背景技术
古威活络酊具有镇痛消肿，驱风祛湿，舒筋活络的功能。用于风湿骨痛，伤风感冒，心胃气痛等症。木香、桂枝、五加皮及薄荷脑分别是古威活络酊的特征性指标成份。在现有的古威活络酊生产过程中，由于缺少有效的鉴别方法，对于古威活络酊成品中的木香、桂枝、五加皮及薄荷脑是不做成份鉴别的，这样古威活络酊成品主要药物成份会不确定，使得产品质量差异比较大，势必造成疗效的不稳定，另外古威活络酊成品中樟脑含量的多少也是影响疗效的主要因素，而在现有标准中未对樟脑进行定量检查，既不利于生产厂家和管理部门对产品的控制，也影响产品在医疗部门和患者中的声誉。为了更进一步保证该产品的质量及更有利于对该产品质量的监督、管理，所应对该产品中的有效成份木香、桂枝、五加皮、薄荷脑进行鉴别检查及樟脑的含量测定检查，从而更进一步保证了该产品的质量和疗效。
发明内容
本发明的目的是：提供一种古威活络酊的检测方法。本发明在原有的质量控制基础上，增加了可以对古威活络酊的主要药物成份进行有效检测的方法，弥补了原质量控制过程的不足，提高了产品的质量监控水平，也有利于管理部门对产品的监测。
本发明的目的可通过下列技术方案来实现：本古威活络酊的检测方法，按照重量份计算，古威活络酊是用细辛7.14g、徐长卿14.3g、七叶莲42.9g、两面针21.4g、古羊藤21.4g、十八症42.9g、鸡骨香21.4g、搜山虎21.4g、救必应21.4g、九龙藤28.6g、大血藤28.6g、山花椒21.4g、高良姜14.3g、威灵仙21.4g、千斤拔28.6g、桂枝14.3g、白芷14.3g、五加皮21.4g、防己21.4g、木香21.4g、泽兰21.4g、土鳖虫7.14g、续断14.3g、独活2.14g、薄荷脑6g、樟脑4g制成1000ml酊剂；该检测方法包括以下步骤：
性状：本酊剂为棕色的澄清液体；气芳香；味辛辣而清凉。
鉴别：(1)取本酊剂50ml，挥至无薄荷味，残渣加乙醚使溶解3次(2ml、1ml、1ml)，合并乙醚液，低温挥至0.5ml，作为供试品溶液。另取丹皮酚对照品，加乙醚制成1ml含每1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯(20∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以盐酸酸性5％三氯化铁乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(2)取本酊剂25ml，挥至近干，用石油醚(60～90℃)2ml使溶解，作为供试品溶液。另取木香对照药材0.2g，加乙醚10ml，振摇10分钟，弃去乙醚液，残渣挥尽乙醚，加乙酸乙酯10ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加石油醚(60～90℃)2ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10～15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-丙酮(10∶3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(3)取本酊剂20ml，低温挥至近干，用石油醚(30～60℃)2ml使溶解，作为供试品溶液，另取桂枝对照药材0.5g，加乙醇10ml，浸泡24小时，滤过，滤液低温挥干，残渣加石油醚(30～60℃)2ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10～15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(17∶3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼试液。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(4)取本酊剂20ml，挥至近干，加水20ml使溶解，用氯仿萃取2次，每次10ml，合并氯仿液，挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取五加皮对照药材1g，加乙醇20ml，加热回流1小时，滤过，滤液挥至近干，加水10ml使溶解，用氯仿萃取2次，每次10ml，合并氯仿液，挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10～15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-甲苯-乙酸乙酯-甲酸(2∶1∶2∶0.4)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
(5)取本酊剂1ml，加氯化钠0.1g，加石油醚(30～60℃)2ml，振摇静置分层，取石油醚液作为供试品溶液。另取薄荷脑对照品，加石油醚(30～60℃)制成每ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯乙酸乙酯(19∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸试液-乙醇(2∶8)的混合溶液，于100℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
检查：乙醇量应为56％～66％(中国药典2005年版一部附录IX M)。其他：应符合酊剂项下有关的各项规定(中国药典2005年版一部附录I N)。含量测定：照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。
色谱条件与系统适用性实验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；氯仿-甲醇-水(14∶52∶30，用冰乙酸调pH3.0)为流动相；检测波长为289nm，柱温为30℃。理论板数按樟脑峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备：精密称取樟脑对照品适量，加甲醇制成每1ml含4mg的溶液，摇匀，即得。
供试品溶液的制备：取本酊剂10ml，经微孔滤膜(0.45μm)滤过，即得。
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本酊剂每1ml含樟脑(C10H16O)应为3.60mg～4.40mg。
所检测的古威活络酊是按照下述方法制成的：取细辛、徐长卿置于密闭容器内，加乙醇117ml，浸泡48小时，滤过，浸提液密闭储存备用，药渣取出待用；取高良姜、威灵仙、千斤拔、桂枝、白芷、五加皮、防己、木香、泽兰、土鳖虫、续断、独活及上述药渣置于蒸馏锅中，加水浸泡过夜，蒸馏，收集蒸馏液47ml密闭储存备用。收集蒸馏液后，药液滤过，滤液浓缩至相对密度1.15～1.20(50℃)的清膏。药渣加水煎煮二次，每次2小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.15～1.20(50℃)的清膏。取七叶莲、两面针、古羊藤、十八症、鸡骨香、搜山虎、救必应、九龙藤、大血藤、山花椒，加水煎煮二次，每次2小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.15～1.20(50℃)的清膏。将上述清膏、蒸馏液、醇浸提液、乙醇619ml混合，静置3天。滤取上清液，将薄荷脑、樟脑用乙醇适量溶解，缓缓加入上清液中，加水、乙醇至规定量，静置24小时，分装，即得。
与现有技术相比，本发明在现有的产品生产过程中增加了对木香、桂枝、五加皮、薄荷脑薄层鉴别，增加了樟脑含量测定。可以对古威活络酊的主要药物成分进行更有效检测，使得古威活络酊成品中的主要药物成分比较确定，产品质量的监控水平有很大的提高。本发明的应用，既有利于生产厂家和管理部门对产品的监测，也可以为医疗部门和患者的治疗提供较好的保障。
具体实施方式
本古威活络酊的检测方法，按照重量份计算，古威活络酊是用细辛7.14g、徐长卿14.3g、七叶莲42.9g、两面针21.4g、古羊藤21.4g、十八症42.9g、鸡骨香21.4g、搜山虎21.4g、救必应21.4g、九龙藤28.6g、大血藤28.6g、山花椒21.4g、高良姜14.3g、威灵仙21.4g、千斤拔28.6g、桂枝14.3g、白芷14.3g、五加皮21.4g、防己21.4g、木香21.4g、泽兰21.4g、土鳖虫7.14g、续断14.3g、独活2.14g、薄荷脑6g、樟脑4g制成1000ml酊剂；该检测方法包括以下步骤：
性状：本酊剂为棕色的澄清液体；气芳香；味辛辣而清凉。
鉴别：(1)取本酊剂50ml，挥至无薄荷味，残渣加乙醚使溶解3次(2ml、1ml、1ml)，合并乙醚液，低温挥至0.5ml，作为供试品溶液。另取丹皮酚对照品，加乙醚制成1ml含每1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯(20∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以盐酸酸性5％三氯化铁乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(2)取本酊剂25ml，挥至近干，用石油醚(60～90℃)2ml使溶解，作为供试品溶液。另取木香对照药材0.2g，加乙醚10ml，振摇10分钟，弃去乙醚液，残渣挥尽乙醚，加乙酸乙酯10ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加石油醚(60～90℃)2ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10～15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-丙酮(10∶3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(3)取本酊剂20ml，低温挥至近干，用石油醚(30～60℃)2ml使溶解，作为供试品溶液，另取桂枝对照药材0.5g，加乙醇10ml，浸泡24小时，滤过，滤液低温挥干，残渣加石油醚(30～60℃)2ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10～15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(17∶3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼试液。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(4)取本酊剂20ml，挥至近干，加水20ml使溶解，用氯仿萃取2次，每次10ml，合并氯仿液，挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取五加皮对照药材1g，加乙醇20ml，加热回流1小时，滤过，滤液挥至近干，加水10ml使溶解，用氯仿萃取2次，每次10ml，合并氯仿液，挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10～15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-甲苯-乙酸乙酯-甲酸(2∶1∶2∶0.4)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
(5)取本酊剂1ml，加氯化钠0.1g，加石油醚(30～60℃)2ml，振摇静置分层，取石油醚液作为供试品溶液。另取薄荷脑对照品，加石油醚(30～60℃)制成每ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯(19∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸试液-乙醇(2∶8)的混合溶液，于100℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
检查：乙醇量应为56％～66％(中国药典2005年版一部附录IX M)。其他：应符合酊剂项下有关的各项规定(中国药典2005年版一部附录I N)。含量测定：照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。
色谱条件与系统适用性实验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；氯仿-甲醇-水(14∶52∶30，用冰乙酸调pH3.0)为流动相；检测波长为289nm，柱温为30℃。理论板数按樟脑峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备：精密称取樟脑对照品适量，加甲醇制成每1ml含4mg的溶液，摇匀，即得。
供试品溶液的制备：取本酊剂10ml，经微孔滤膜(0.45μm)滤过，即得。
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本酊剂每1ml含樟脑(C10H16O)应为3.60mg～4.40mg。
所检测的古威活络酊是按照下述方法制成的：取细辛、徐长卿置于密闭容器内，加乙醇117ml，浸泡48小时，滤过，浸提液密闭储存备用，药渣取出待用；取高良姜、威灵仙、千斤拔、桂枝、白芷、五加皮、防己、木香、泽兰、土鳖虫、续断、独活及上述药渣置于蒸馏锅中，加水浸泡过夜，蒸馏，收集蒸馏液47ml密闭储存备用。收集蒸馏液后，药液滤过，滤液浓缩至相对密度1.15～1.20(50℃)的清膏。药渣加水煎煮二次，每次2小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.15～1.20(50℃)的清膏。取七叶莲、两面针、古羊藤、十八症、鸡骨香、搜山虎、救必应、九龙藤、大血藤、山花椒，加水煎煮二次，每次2小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.15～1.20(50℃)的清膏。将上述清膏、蒸馏液、醇浸提液、乙醇619ml混合，静置3天。滤取上清液，将薄荷脑、樟脑用乙醇适量溶解，缓缓加入上清液中，加水、乙醇至规定量，静置24小时，分装，即得。
Claims (3)
1.一种古威活络酊的检测方法，按照重量份计算，古威活络酊是用细辛7.14g、徐长卿14.3g、七叶莲42.9g、两面针21.4g、古羊藤21.4g、十八症42.9g、鸡骨香21.4g、搜山虎21.4g、救必应21.4g、九龙藤28.6g、大血藤28.6g、山花椒21.4g、高良姜14.3g、威灵仙21.4g、千斤拔28.6g、桂枝14.3g、白芷14.3g、五加皮21.4g、防己21.4g、木香21.4g、泽兰21.4g、土鳖虫7.14g、续断14.3g、独活2.14g、薄荷脑6g、樟脑4g制成1000ml酊剂；其特征在于，该检测方法包括以下步骤：
性状：本酊剂为棕色的澄清液体；气芳香；味辛辣而清凉；
鉴别：(1)取本酊剂50ml，挥至无薄荷味，残渣加乙醚使溶解三次，每次为2ml、1ml、1ml，合并乙醚液，低温挥至0.5ml，作为供试品溶液；另取丹皮酚对照品，加乙醚制成1ml含每1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以20∶1的甲苯-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以盐酸酸性5％三氯化铁乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(2)取本酊剂25ml，挥至近干，用温度为60～90℃的石油醚2ml使溶解，作为供试品溶液。另取木香对照药材0.2g，加乙醚10ml，振摇10分钟，弃去乙醚液，残渣挥尽乙醚，加乙酸乙酯10ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加温度为60～90℃的石油醚2ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10～15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以10∶3的环己烷-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(3)取本酊剂20ml，低温挥至近干，用温度为30～60℃的石油醚2ml使溶解，作为供试品溶液，另取桂枝对照药材0.5g，加乙醇10ml，浸泡24小时，滤过，滤液低温挥干，残渣加温度为30～60℃的石油醚2ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10～15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以17∶3温度为60～90℃的石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼试液；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(4)取本酊剂20ml，挥至近干，加水20ml使溶解，用氯仿萃取2次，每次10ml，合并氯仿液，挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取五加皮对照药材1g，加乙醇20ml，加热回流1小时，滤过，滤液挥至近干，加水10ml使溶解，用氯仿萃取2次，每次10ml，合并氯仿液，挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10～15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以2∶1∶2∶0.4的正己烷-甲苯-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm的紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
(5)取本酊剂1ml，加氯化钠0.1g，加温度为30～60℃的石油醚2ml，振摇静置分层，取石油醚液作为供试品溶液；另取薄荷脑对照品，加30～60℃的石油醚制成每ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以19∶1的甲苯-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2∶8的香草醛硫酸试液-乙醇的混合溶液，于100℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
2.根据权利要求1所述的古威活络酊的检测方法，其特征在于，该检测方法还包括：
检查乙醇量应为56％～66％；
其他应符合酊剂项下有关的各项规定：
含量测定，照高效液相色谱法；
色谱条件与系统适用性实验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以14∶52∶30用冰乙酸调pH3.0的氯仿-甲醇-水为流动相；检测波长为289nm，柱温为30℃；理论板数按樟脑峰计算应不低于3000；
对照品溶液的制备，精密称取樟脑对照品适量，加甲醇制成每1ml含4mg的溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备，取本酊剂10ml，经0.45μm的微孔滤膜滤过，即得；测定法，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
本酊剂每1ml含樟脑(C10H16O)应为3.60mg～4.40mg。
3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述的古威活络酊是按照下述方法制成的：
取细辛、徐长卿置于密闭容器内，加乙醇117ml，浸泡48小时，滤过，浸提液密闭储存备用，药渣取出待用；取高良姜、威灵仙、千斤拔、桂枝、白芷、五加皮、防己、木香、泽兰、土鳖虫、续断、独活及上述药渣置于蒸馏锅中，加水浸泡过夜，蒸馏，收集蒸馏液47ml密闭储存备用；收集蒸馏液后，药液滤过，滤液浓缩至相对密度1.15～1.20温度为50℃的清膏；药渣加水煎煮二次，每次2小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.15～1.20温度为50℃的清膏；取七叶莲、两面针、古羊藤、十八症、鸡骨香、搜山虎、救必应、九龙藤、大血藤、山花椒，加水煎煮二次，每次2小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.15～1.20温度为50℃的清膏；将上述清膏、蒸馏液、醇浸提液、乙醇619ml混合，静置3天；滤取上清液，将薄荷脑、樟脑用乙醇适量溶解，缓缓加入上清液中，加水、乙醇至规定量，静置24小时，分装，即得。
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2009
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