CN104491124B - 兽用鱼腥草芩蓝口服液及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
兽用鱼腥草芩蓝口服液及其制备方法，属于兽药技术领域，所述兽用鱼腥草芩蓝口服液由以下重量份的中药材制成：鱼腥草20‑50份、柴胡20‑50份、黄芩10‑50份、板蓝根40‑100份、连翘5‑20份、金银花5‑20份。所述制备方法包括以下步骤：以重量份计，取柴胡20‑50份、黄芩10‑50份、板蓝根40‑100份、连翘5‑20份，加6‑8倍水于80‑85℃下提取30‑60min，过滤，药渣加6‑8倍水于60‑80℃下再次提取30‑40min，过滤；合并滤液，浓缩成浸膏；取鱼腥草20‑50重量份、金银花5‑20重量份加6‑8倍水蒸馏提取两次，收集挥发油和提取液，将提取液浓缩成浸膏；合并步骤（1）和（2）所得浸膏，并加入步骤（2）所得挥发油，加水定容，即得。
Description
技术领域
本发明属于兽药技术领域，具体涉及一种用于治疗家禽呼吸道感染的鱼腥草芩蓝口服液，同时还涉及其制备方法。
背景技术
在家禽的规模化养殖过程中，家禽常因通风不良、温湿度控制不当、疫苗应激、转群应激、粉尘刺激以及病毒、细菌感染等引起风热感冒或发生病毒性呼吸道病，尤其是通风不良引起的普通（风寒）感冒，一般主要表现为肺经病明显，症见甩鼻、吭哧、精神萎靡、畏寒扎堆、流清鼻涕等。普通型感冒发展3~5天以后往往有肾脏和肺脏的病变。感冒一般是由外入里发展，遵循上焦而中焦而下焦的传变规律，普通感冒若得不到有效缓解就会郁而化热导致感冒病情加重发生风热感冒，症见呼吸道症状较轻，家禽往往突然发热，全身器官病变迅速且严重，尤其是肝脏、肾脏等免疫体系遭到严重破坏，最终使养殖户蒙受巨大损失。抗病毒西药和抗生素虽然具有很好的治疗效果，但却容易影响肉禽产品的安全性。中药制剂安全性高、成本低，针对家禽呼吸道疾病开发新的中药制剂对家禽养殖业具有重要意义。
中华人民共和国药典2010版第一部P916记载有复方鱼腥草片，其处方为：鱼腥草583g、黄芩150g、板蓝根150g、连翘58g、金银花58g，并明确记载该药适用于风热感冒、风寒感冒禁用。该药为人用药。由于家禽与人体的生理结构及生存环境具有显著差异，该药与家禽的病症并不对应，不能直接用于家禽上呼吸道感染的治疗。
发明内容
本发明的目的旨在提供一种兽用鱼腥草芩蓝口服液，提供相应的制备方法则是本发明的另一目的。
基于上述目的，本发明采取了如下技术方案：
兽用鱼腥草芩蓝口服液，由以下重量份的中药材制成：鱼腥草20-50份、柴胡20-50份、黄芩10-50份、板蓝根40-100份、连翘5-20份、金银花5-20份。
所述口服液的体积与中药材原料的质量比为0.33-0.5ml/g，也即：每0.33-0.5ml口服液相当于1g中药材。
兽用鱼腥草芩蓝口服液的制备方法，包括以下步骤：
（1）以重量份计，取柴胡20-50份、黄芩10-50份、板蓝根40-100份、连翘5-20份，加6-8倍水于80-85℃下提取30-60min，过滤，药渣加6-8倍水于60-80℃下再次提取30-40min，过滤；合并滤液，浓缩成浸膏；(2)取鱼腥草20-50重量份、金银花5-20重量份加6-8倍水蒸馏提取两次，收集挥发油和提取液，进一步将提取液浓缩成浸膏；(3)合并步骤（1）和（2）所得浸膏，并加入步骤（2）所得挥发油，加水定容，即得。
所述步骤（3）中，加水定容至所述口服液的体积与中药材原料的质量比达到0.33-0.5ml/g。
所述步骤（3）中，加水定容前先向体系中加入0.2-0.8重量份苯甲酸钠、0.3-1.2重量份尼泊金乙酯，并用1-2mol/LHCL调pH值为4.0-5.0。
所述步骤（1）和步骤（2）中，浓缩至浸膏密度为1.1-1.2g/ml（本发明的密度均为常温测定）。
所述步骤（1）和步骤（2）中，先将中药材粉碎并过20-40目筛，然后再加水提取。
家禽的肺与9个气囊相通，且无淋巴结、无膈肌等。基于这种独特的生理结构，家禽很容易受忽冷忽热、通风不良等因素影响从而发生风寒感冒（精神差，发热、咳嗽、流清鼻涕等）。本发明根据家禽生理及发病实际，选用板蓝根、鱼腥草为君药，清热、解毒、利咽；柴胡、黄芩为臣药，解热、抗炎以辅助君药解表祛邪；金银花、连翘为佐药疏风清热、透邪外出；诸药合用共奏清热解毒、解表退热之功，制成的兽用鱼腥草芩蓝口服液为棕褐色至棕黑色液体，气香，味甜微涩，对家禽因风寒感冒和因风寒化热所致的风热症状均有明显改善作用。
与现有的人用复方鱼腥草制剂相比，本发明降低了鱼腥草的用量，着重利用柴胡与黄芩之间特有的药对配伍作用，强化了板蓝根的解毒利咽功效，在清热解毒、抗病毒的基础之上，加强了解热抗炎的治疗作用。经辽宁、河北等多家养殖场试用，证实该产品家禽的风寒感冒、因风寒入里化热所致的风热感冒有疗效确切，组方与适应症均有别于人用药复方鱼腥草片（中华人民共和国药典2010版一部P916）。
其次，本发明为纯中药制剂，无药残，无毒副作用，临床使用不会产生耐药性，对禽类产品的安全性不会造成影响。
此外，在提取前对中药材原料进行粉碎、过筛处理，药材粒度小、植物细胞壁更易破坏，有利于药材中活性成分溶出，提高了收率；利用蒸馏提取收集鱼腥草及金银花中的挥发油成分，进一步加强了有效成分的提取率，从而增加了药材的利用度，节约资源，降低了生产成本。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步说明。
实施例1
兽用鱼腥草芩蓝口服液，由以下重量份的中药材制成：鱼腥草20份、柴胡20份、黄芩10份、板蓝根40份、连翘5份、金银花10份；口服液的体积与中药材原料的质量比为0.5ml/g。
其制备方法包括以下步骤：
（1）按上方比例称取柴胡、黄芩、板蓝根、连翘，粉碎，过20目筛，加8倍水于80℃下提取40min，过滤，药渣加8倍水于70℃下再次提取30min，过滤；合并滤液，浓缩成密度为1.1g/ml（温度）的浸膏；
（2）按比例称取鱼腥草、金银花，粉碎，过20目筛，加8倍水蒸馏提取两次，收集挥发油和提取液，进一步将提取液浓缩成1.1g/ml（温度）的浸膏；
（3）合并步骤（1）和（2）所得浸膏，并加入步骤（2）所得挥发油，加入0.2重量份苯甲酸钠、0.3重量份尼泊金乙酯，并用1mol/L HCL调pH值为4.0，加水定容至所述口服液的体积与中药材原料的质量比达到0.5ml/g。
实施例2
兽用鱼腥草芩蓝口服液，由以下重量份的中药材制成：鱼腥草30份、柴胡40份、黄芩30份、板蓝根60份、连翘10份、金银花20份；口服液的体积与中药材原料的质量比为0.33ml/g。
其制备方法包括以下步骤：
（1）按上方比例称取柴胡、黄芩、板蓝根、连翘，粉碎，过25目筛，加7倍水于85℃下提取30min，过滤，药渣加7倍水于60℃下再次提取40min，过滤；合并滤液，浓缩成密度为1.2g/ml（温度）的浸膏；
（2）按比例称取鱼腥草、金银花，粉碎，过25目筛，加7倍水蒸馏提取两次，收集挥发油和提取液，进一步将提取液浓缩成1.2g/ml（温度）的浸膏；
（3）合并步骤（1）和（2）所得浸膏，并加入步骤（2）所得挥发油，加入0.5重量份苯甲酸钠、0.6重量份尼泊金乙酯，并用1mol/L HCL调pH值为4.5，加水定容至所述口服液的体积与中药材原料的质量比达到0.33ml/g。
实施例3
兽用鱼腥草芩蓝口服液，由以下重量份的中药材制成：鱼腥草40份、柴胡50份、黄芩50份、板蓝根100份、连翘20份、金银花20份；口服液的体积与中药材原料的质量比为0.4ml/g。
其制备方法包括以下步骤：
（1）按上方比例称取柴胡、黄芩、板蓝根、连翘，粉碎，过40目筛，加8倍水于85℃下提取60min，过滤，药渣加8倍水于60℃下再次提取30min，过滤；合并滤液，浓缩成密度为1.1g/ml（温度）的浸膏；
（2）按比例称取鱼腥草、金银花，粉碎，过40目筛，加8倍水蒸馏提取两次，收集挥发油和提取液，进一步将提取液浓缩成1.1g/ml（温度）的浸膏；
（3）合并步骤（1）和（2）所得浸膏，并加入步骤（2）所得挥发油，加入0.8重量份苯甲酸钠、1.2重量份尼泊金乙酯，并用2mol/L HCL调pH值为4.8，加水定容至所述口服液的体积与中药材原料的质量比达到0.4ml/g。
实施例4
兽用鱼腥草芩蓝口服液，由以下重量份的中药材制成：鱼腥草50份、柴胡40份、黄芩40份、板蓝根80份、连翘15份、金银花5份；口服液的体积与中药材原料的质量比为0.45ml/g。
其制备方法包括以下步骤：
（1）按上方比例称取柴胡、黄芩、板蓝根、连翘，粉碎，过30目筛，加6倍水于80℃下提取50min，过滤，药渣加6倍水于80℃下再次提取35min，过滤；合并滤液，浓缩成密度为1.2g/ml（温度）的浸膏；
（2）按比例称取鱼腥草、金银花，粉碎，过30目筛，加6倍水蒸馏提取两次，收集挥发油和提取液，进一步将提取液浓缩成1.2g/ml（温度）的浸膏；
（3）合并步骤（1）和（2）所得浸膏，并加入步骤（2）所得挥发油，加入0.6重量份苯甲酸钠、1.0重量份尼泊金乙酯，并用2mol/L HCL调pH值为5.0，加水定容至所述口服液的体积与中药材原料的质量比达到0.45ml/g。
实施例5 产品鉴定
【性状】本品为黄棕色至棕色的液体；味甜、微苦涩。
【鉴别】（1）取本品25ml，加水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次25ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加水5ml使溶解，加于已处理好的D101型大孔吸附树脂柱（内径1.5cm，长12cm）上，先用水100ml洗脱，弃去水洗液，再用30％乙醇50ml洗脱，弃去洗脱液，继续用70％乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。取鱼腥草对照药材1g，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法（中国兽药典2010年版二部附录）试验，吸取上述两种溶液各5µl ，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以醋酸丁酯-甲酸-水（7∶2.5∶2.5）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点。
（2）取黄芩对照药材1g，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国兽药典2010年版二部附录）试验，吸取上述两种溶液及[鉴别]（1）项下的供试品溶液各5µl ，分别点于同一以含4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5∶3∶1∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，分别在与对照品及对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
【检查】 相对密度 应不低于1.05（中国兽药典2010年版二部附录）。
pH值 应为4.0～5.0（中国兽药典2010年版二部附录）。
其他 应符口服液项下有关的各项规定（中国兽药典2010年版二部附录）
【含量测定】 照高效液相色谱法（中国兽药典2010年版二部附录）测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；以0.6％磷酸溶液-甲醇（58∶42）为流动相；检测波长为280nm。理论板数按黄芩苷峰计应不低于2000。
对照品溶液的制备 取经五氧化二磷减压干燥24小时的黄芩苷对照品，精密称定，加甲醇制成每1ml含20µg 的溶液，即得。
供试品溶液的制备 精密量取本品2ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法 精密吸取对照品溶液10µl 、供试品溶液5～10µl ，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每1ml含黄芩苷（C21H18O11），不得少于0.45mg。
以实施例3制得的兽用鱼腥草芩蓝口服液为例进行检测，检测结果见表1。
表1 兽用鱼腥草芩蓝口服液（实施例3）检测结果
| 检验项目 | 药典标准 | 检测结果 |
| 澄清度 | 黄棕色 | 黄棕色 |
| 密度 | ≥1.05 | 1.08 |
| pH | 4.0～5.0 | 4.6 |
| 定性鉴别 | 鱼腥草对照药材、黄芩相应位置，斑点清晰可见。 | 鱼腥草对照药材、黄芩相应位置，斑点清晰可见。 |
| 黄芩苷含量 | 0.45mg/ml | 3.5mg/ml |
实施例6 临床疗效实验
6.1 试验方案
将360羽15日龄雏鸡，随机分为6组，每组60羽，Ⅰ组为健康对照组，其余5组滴鼻感染IBV，胚毒0.3mL/只，Ⅱ组为染毒对照组，Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组于染毒作为用药组。Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组于染毒48 h后，分别在饮水中投放0.01 %利巴韦林和0.4%、0.2 %、0.1%鱼腥草芩蓝口服液（实施例3），2次/d，连用3 d；试验鸡只自由饮水和采食，观察用药前后鸡只的临床症状。
从给药后每天记录鸡只的死亡数，攻毒2 d之内死亡者不计，最后统计死亡率以及药物对雏鸡的有效率和治愈率。实验方案如下表2所示。
表2 兽用鱼腥草芩蓝口服液实验方案
| 组别 | 数量（只） | 用药方式 |
| Ⅰ（健康对照） | 60 | 自由饮水，采食 |
| Ⅱ（染毒对照） | 60 | 自由饮水，采食 |
| Ⅲ（0.01%利巴韦林） | 60 | 攻毒48h后，2次/d，连用3 d |
| Ⅳ（0.4%复方鱼腥草） | 60 | 攻毒48h后，2次/d，连用3 d |
| Ⅴ（0.2%复方鱼腥草） | 60 | 攻毒48h后，2次/d，连用3 d |
| Ⅵ（0.1%复方鱼腥草） | 60 | 攻毒48h后，2次/d，连用3 d |
6.2试验结果
临床观察，染毒对照组鸡于攻毒36h后陆续发病，迅速波及全群。第3d开始症状明显，病鸡主要表现为精神沉郁、不安或嗜眠、畏寒怕冷、积堆，羽毛松乱，垂翅呆立，甩头、粘涕、喷嚏、喘咳、出现明显的气管啰音，晚上症状尤为明显。
Ⅰ组（健康对照）对照鸡全部健活，其余各组死亡鸡只病鸡剖检发现鼻道、气管、支气管粘膜肿胀，腔内含有不同数量的浆液、粘液或干酪样渗出物；支气管和气管交界处有出血，而气管的环状部分也呈现出血症状；气囊混浊；肾肿胀、肾小管和输尿管内积满尿酸盐；法氏囊和其它脏器未见异常。
治疗组病鸡饮服鱼腥草芩蓝口服液后病情很快得到控制，给药3d 后，精神渐显活泼，食欲好转；5d后呼吸困难得到改善，气管啰音减弱，咳嗽减轻；7d后病鸡停止死亡，各项症状大为减轻；12d后病鸡症状基本消失，饮食恢复正常。
雏鸡感染IBV后，染毒对照组死亡率明显增加(P<0.01)，药物治疗组死亡率明显降低，且Ⅳ组、Ⅴ组与染毒对照组差异极显著(P< 0.01)。
各药物治疗组之间，Ⅳ、Ⅴ组治愈率明显高于Ⅲ、Ⅵ组，其中Ⅳ组与Ⅲ、Ⅵ组之间差异显著(P < 0.05)；Ⅲ、Ⅵ组的治疗效果相当，无显著性差异(P > 0.05)。
Ⅳ与Ⅴ组用药3d即控制了病情，临床症状改善明显，治疗效果最佳，结合用药成本，临床选用该口服液用量为0.2 %，为饮水最佳添加量。实验结果如下表3所示。
表3 兽用鱼腥草芩蓝口服液临床疗效实验结果
| 组别 | 治愈率 | 显效率 | 死亡率 | P值（对比利巴韦林组） |
| Ⅰ（健康对照） | / | / | / | / |
| Ⅱ（染毒对照） | / | / | 65% | 0.49 |
| Ⅲ（0.01%利巴韦林） | 79% | 10% | 11% | / |
| Ⅳ（0.4%复方鱼腥草） | 83% | 12% | 5% | 0.03 |
| Ⅴ（0.2%复方鱼腥草） | 81% | 11% | 8% | 0.04 |
| Ⅵ（0.1%复方鱼腥草） | 79% | 9% | 12% | 0.14 |
以上显示和描述了本发明基本原理、主要特征及优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书描述的只是本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围中。
Claims (6)
1.兽用鱼腥草芩蓝口服液，其特征在于，由以下重量份的中药材制成：鱼腥草20-50份、柴胡20-50 份、黄芩10-50 份、板蓝根40-100 份、连翘5-20 份、金银花5-20 份。
2.如权利要求1 所述的兽用鱼腥草芩蓝口服液，其特征在于，所述口服液的体积与中药材原料的质量比为0.33-0.5ml/g。
3.兽用鱼腥草芩蓝口服液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：以重量份计，取柴胡20-50 份、黄芩10-50 份、板蓝根40-100 份、连翘5-20 份，加6-8倍水于80-85℃下提取30-60min，过滤，药渣加6-8 倍水于60-80℃下再次提取30-40min，过滤；合并滤液，浓缩成浸膏；取鱼腥草20-50 重量份、金银花5-20 重量份加6-8 倍水蒸馏提取两次，收集挥发油和提取液，进一步将提取液浓缩成浸膏；合并步骤（1）和（2）所得浸膏，并加入步骤（2）所得挥发油，加水定容，即得；所述步骤（1）和步骤（2）中，浓缩至浸膏密度为1.1-1.2g/ml。
4.如权利要求3 所述兽用鱼腥草芩蓝口服液的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）中，加水定容至所述口服液的体积与中药材原料的质量比达到0.33-0.5ml/g。
5.如权利要求4 所述兽用鱼腥草芩蓝口服液的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）中，加水定容前先向体系中加入0.2-0.8 重量份苯甲酸钠、0.3-1.2 重量份尼泊金乙酯，并用1-2mol/L HCL 调pH 值为4.0-5.0。
6.如权利要求3-5 任一所述兽用鱼腥草芩蓝口服液的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）和步骤（2）中，先将中药材粉碎并过20-40 目筛，然后再加水提取。
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