CN1803179B - 一种中药组合物及其制备方法和有效成分的检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种中药组合物,该组合物是由板蓝根、忍冬藤、山豆根、鱼腥草、重楼、贯众、白芷、青蒿和川射干等原料药制成,对于治疗病毒性上呼吸道感染有着较好疗效。同时,本发明还公开了该药物组合物的制备方法和质量控制方法。
Description
技术领域
本发明涉及一种中药组合物及其制备方法,特别是涉及一种治疗病毒性感冒的中药组合物及其制备方法,属中药领域。
背景技术
病毒性感冒包括流行性感冒和普通感冒,全部急性呼吸道感染的90~95%系由病毒所致,其重要性远超过其他微生物,对病毒性感冒的治疗和其它病毒性疾病一样,还没有特效的药物治疗方法,预防手段也不理想,目前,主要是希望从中医药中寻求有效的治疗方药。病毒性感冒在病因与病机上有以下基本特征,在病因上,六淫为患,多挟湿邪,在病机上,卫气同病,气机郁滞。因此治疗病毒性感冒在临床上应针对湿-郁-热三个基本环节进行用药施治,往往能较好地解决发热反复、缠绵难愈的问题,提高临床治疗效果。根据病毒性感冒的病理特征,发明一种能够有效治疗病毒性感冒的中药制剂,在现阶段具有重要的意义。
本发明目的在于提供一种治疗病毒性感冒的中药组合物及其制备方法;本发明目的还在于提供该中药组合物的质量控制方法。
发明内容
本发明的目的是通过如下技术方案实现的:
首先是制剂处方,本发明的制剂是由如下重量份的原料药制成的:
板蓝根250-400重量份 忍冬藤300-450重量份 山豆根100-200重量份
鱼腥草400-500重量份 重楼100-200重量份 贯众200-300重量份
白芷100-200重量份 青蒿100-200重量份 川射干100-200重量份
确切的,是按如下比例配比的:
板蓝根300重量份 忍冬藤375重量份 山豆根150重量份
鱼腥草450重量份 重楼150重量份 贯众225重量份
白芷150重量份 青蒿150重量份 川射干150重量份
根据以上配方,可以制成各种现代剂型,包括片剂、口服液体制剂、胶囊剂和软胶囊剂等,发明也据此进行了工艺的研究,制定了制备方法,可以是如下三种中的任一种。
第一种:取鱼腥草用水煎煮两次,滤过,滤液浓缩至相对密度为1.03,冷却,加入乙醇,使含量为50%,静置沉淀,取上清液回收乙醇至无醇味,备用;其余药物加水煎煮两次,滤过,合并滤液及鱼腥草提取液,浓缩,干燥,制成细粉。
第二种:处方各味药,加水煎煮两次,滤过,滤液浓缩至60℃时相对密度为1.03,冷却,加入乙醇,使含量为50%,静置沉淀,取上清液回收乙醇,浓缩,干燥,制成细粉。
第三种:处方各味药,加70%乙醇回流提取两次,滤过,滤液合并,减压回收乙醇,浓缩,干燥,所得干膏粉碎成细粉。
由以上三种中的任一种方法制得的提取物细粉,加入适宜辅料,应用常规制剂工艺,就可以制成临床所需的剂型。发明人还着重对辅料的选择进行了适当的摸索:
第一,上述中药组合物可制备成片剂,在制备成片剂时,需要加入可压性好的辅料帮助片剂成型,微晶纤维素是一种可压性好且兼有粘合、助流、崩解作用的片剂成型辅料,加入微晶纤维素压成的药片有较大的硬度,并有利于片剂的崩解。以微晶纤维素为例,进行试验。并以片剂的外观、硬度为评价指标,对微晶纤维素用量进行优选。
干膏粉量(份) | 微晶纤维用量(份) | 外观 | 硬度 |
100 | 1-15 | 片面有麻点 | 较小 |
100 | 15-25 | 片面光亮 | 适中 |
100 | 30-50 | 片面光亮 | 较大 |
试验结果表明,本发明中药组合物提取物细粉每100重量份中加入微晶纤维素的量在15-25重量份时,片剂外观较好硬度适宜。
第二,上述中药组合物的提取物细粉制成颗粒时,可选用适当的粘合剂制粒。羟丙甲纤维素是一种很好的粘合剂和崩解剂,以羟丙甲纤维素制成的颗粒,在制备成片剂或胶囊剂时,药物的溶出速度比不加入羟丙甲纤维素的提高一半,且崩解速度也有所提高,因此,在制粒时以低浓度的乙醇的羟丙甲纤维素溶液制粒,对制备成颗粒剂,以及片剂、胶囊剂均有利。
为了控制本发明产品的质量,
上述本发明中药组合物制成药剂的质量控制方法包括鉴别和\或含量测定。
鉴别:
1)取本发明制剂3g,加浓氨试液1ml、氯仿20ml,密塞,超声处理20分钟,滤过,滤液水浴上蒸干,残渣加氯仿1ml使溶解,作为供试品溶液。另取苦参碱对照品加氯仿制成每1ml含0.5mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法试验,吸取供试品溶液、对照品溶液各10μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上,以醋酸乙酯-氯仿-浓氨试液(6∶4∶0.3)为展开剂,展开12cm,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
2)取本发明制剂3g,加入氯仿20ml,密塞,超声处理20分钟,滤过,滤液水浴上蒸干,残渣加氯仿1ml使溶解,作为供试品溶液。另取白芷对照药材1g,加水200ml,煎煮30分钟,滤过,滤液浓缩至约40ml,放冷,转至分液漏斗中,加氯仿20ml,密塞,振摇2~3分钟,放置,分取氯仿层,置水浴上蒸干,残渣加氯仿1ml使溶解,作为白芷对照药材溶液。照薄层色谱法试验,吸取供试品溶液、对照药材溶液各10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿-甲醇(10∶0.5)为展开剂,展开12cm,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视,供试品色谱中,在与对照药材相应的位置上显一个相同的淡黄色荧光主斑点。
3)取本发明制剂5g,研细,加水20ml使溶解,以氯仿振摇提取二次,每次25ml,合并氯仿液,蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取东莨菪内酯对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法试验,吸取供试品溶液、对照品溶液各5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿-醋酸乙酯-冰醋酸(10∶8∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
含量测定:
a.色谱条件与系统适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;乙腈-0.1%磷酸溶液(3∶97)为流动相;检测波长为203nm;理论板数按苦参碱峰计算应不低于2000。
b.对照品溶液的制备取苦参碱对照品适量,精密称定,加0.1%磷酸溶液制成每1ml中含30μg的溶液,即得。
c.供试品溶液的制备取本发明制剂1g,研细,取0.3g,精密称定,加水20ml使溶解,用氨试液调节pH值至9~10,置分液漏斗中,用氯仿提取5次,每次20ml,合并氯仿液,蒸干,残渣以0.1%磷酸溶液定容至5ml,用微孔滤膜(0.45um)滤过,即得。
d.测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
具体实施方式:
本发明药物制剂具有清热解毒的功能,发明人根据其功能主治,从清热、抗病毒方面对其药效学进行了验证。
受试药物:按照本发明三种技术方案制备的KBD胶囊1-3号,含0.7g生药/粒的胶囊。
六神丸:北京同仁堂科技发展股份有限公司批号:030010。
清热解毒口服液:北京北卫药业有限责任公司批号:021209
病毒唑注射液:豫洲制药股份有限公司批号:030323
甲型流感(A3)北京医科大学病毒研究室提供
动物:白色家兔雌雄各半,2.0~2.5kg,鸡胚及雄鸡,均由中国药科大学新药研究中心动物室提供。
试验1:对细菌内毒素所致家兔发热模型的影响:
取健康家兔,每日测定体温1~2次,连续3天以上,使家兔适应体温操作,选择体温38.5~40之间,波动在0.3℃以内者,随机分为5组,每组6只,阳性对照组给予清热解毒口服液40ml/kg,空白对照组家兔,给予凉开水、其余三组每兔给予KBD胶囊1-3号,40ml/kg,40ml中含有相当生药8.4g的药粉,给药后1.5小时,每兔均从耳缘静脉注射内毒素标准品50EU/kg,于内毒素攻击后0.5小时,1小时、2小时、3小时、4小时、6小时各测体温1次,以给药前家兔体温平均值为基数,计算各测定时间点家兔体温变化,以各时间点体温变化作t检验。结果见下表。
与空白基质比较,**p<0.01,*p<0.05。
试验结果显示KBD胶囊可对抗内毒素0.5h所致家兔体温升高,作用持续至6小时,与空白基质组比较,有显著性差异.说明KBD胶囊可明显抑制内毒素所致家兔感染性发热。
试验2:抗病毒试验
鸡胚法,选10日龄鸡胚,首先测定EID50,参照药效学剂量及浓度摸索出六神丸的抗病毒的可能有效浓度为相当生药0.378mg/ml,病毒唑注射液用生理盐水稀释至10mg/ml,KBD胶囊1-3制成相当生药30mg/ml,每胚给0.2ml,分两大组:①同途径治疗组。经尿囊腔注射病毒(含20EID50)0.1ml,培养60分钟,再经尿囊腔注射0.1ml药物;②同途径预防组,先经尿囊腔注射药物,培养60min后,再经尿囊腔注射病毒。以上各组鸡胚注射完毕后,均用溶化石蜡封闭注射孔,置37℃温箱培养,每日在检卵灯下逐个观察2次,24h内死去者弃去,至48h,将存活的鸡胚移至4℃冰箱过夜,次日分别收获每胚之尿囊液,用0.5%鸡红细胞进行定性血球凝集试验,用等量的尿囊液(0.5ml)与0.5%的鸡红细胞混合,置室温(20±5℃)45min,观察记录结果。
抗病毒作用治疗组
抗病毒作用预防组
**:与对照组比较,p<0.01,六神丸组与病毒唑组及KBD1-3号组间比较无统计学意义,p>0.05。
由试验结果可知,KBD胶囊1-3号,无论是治疗给药还是预防给药,其对流感病毒均有明显的防治作用。
以下再以实施例来进一步说明本发明的技术方案:
实施例
板蓝根300g 忍冬藤375g 山豆根150g
鱼腥草450g 重楼150g 贯众225g
白芷150g 青蒿150g 川射干150g。
以上药味,取鱼腥草用水煎煮两次,滤过,滤液浓缩至相对密度为1.03,冷却,加入乙醇,使含量为50%,静置沉淀,取上清液回收乙醇至无醇味,备用。其余药物加水煎煮两次,滤过,合并滤液及鱼腥草提取液,浓缩至相对密度为1.08(60℃)的清膏,喷雾干燥(进风180℃,出风90℃),喷干粉加入聚乙二醇-400量为320g,丙二醇40g,蜂蜡24g,加聚乙二醇400至总量为720g,过胶体磨研磨20分钟,制成软胶囊2000粒,即得。
实施例二
板蓝根300g 忍冬藤375g 山豆根150g
鱼腥草450g 重楼150g 贯众225g
白芷150g 青蒿150g 川射干150g。
以上药味,加水煎煮两次,滤过,滤液浓缩至相对密度为1.03,冷却,加入乙醇,使含量为50%,静置沉淀,取上清液回收乙醇,并浓缩至相对密度为1.08(60℃)的清膏,喷雾干燥(进风180℃,出风90℃),干燥,所得干膏粉碎成细粉,用1%羟丙甲基纤维素的50%乙醇溶液制粒,干燥(60℃),整粒,加入硬脂酸镁1g及淀粉适量,至总量250g,混匀,装胶囊,制成1000粒,即得。
实施例三
上述本发明组合物制成的胶囊剂的质量控制方法:
鉴别:
a.取内容物3g,加浓氨试液1ml、氯仿20ml,密塞,超声处理20分钟,滤过,滤液水浴上蒸干,残渣加氯仿1ml使溶解,作为供试品溶液。另取苦参碱对照品加氯仿制成每1ml含0.5mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》一部附录V IB)试验,吸取供试品溶液、对照品溶液各10μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上,以醋酸乙酯-氯仿-浓氨试液(6∶4∶0.3)为展开剂,展开12cm,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
b.取本品内容物3g,加入氯仿20ml,密塞,超声处理20分钟,滤过,滤液水浴上蒸干,残渣加氯仿1ml使溶解,作为供试品溶液。另取白芷对照药材1g,加水200ml,煎煮30分钟,滤过,滤液浓缩至约40ml,放冷,转至分液漏斗中,加氯仿20ml,密塞,振摇2~3分钟,放置,分取氯仿层,置水浴上蒸干,残渣加氯仿1ml使溶解,作为白芷对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》一部附录VIB)试验,吸取供试品溶液、对照药材溶液各10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿-甲醇(10∶0.5)为展开剂,展开12cm,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视,供试品色谱中,在与对照药材相应的位置上显一个相同的淡黄色荧光主斑点。
c.取本品内容物5g,研细,加水20ml使溶解,以氯仿振摇提取二次,每次25ml,合并氯仿液,蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取东莨菪内酯对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》一部附录VIB)试验,吸取供试品溶液、对照品溶液各5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿-醋酸乙酯冰醋酸(10∶8∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
含量测定:
a.色谱条件与系统适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;乙腈-0.1%磷酸溶液(3∶97)为流动相;检测波长为203nm;理论板数按苦参碱峰计算应不低于2000。
b.对照品溶液的制备取苦参碱对照品适量,精密称定,加0.1%磷酸溶液制成每1ml中含30μg的溶液,即得。
c.供试品溶液的制备取本品内容物1g,研细,取0.3g,精密称定,加水20ml使溶解,用氨试液调节pH值至9~10,置分液漏斗中,用氯仿提取5次,每次20ml,合并氯仿液,蒸干,残渣以0.1%磷酸溶液定容至5ml,用微孔滤膜(0.45um)滤过,即得。
d.测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
Claims (6)
1.一种中药组合物,其特征在于该药物组合物是由下述原料药制成的:
板蓝根250400重量份 忍冬藤300-450重量份 山豆根100-200重量份
鱼腥草400-500重量份 重楼100-200重量份 贯众200-300重量份
白芷100-200重量份 青蒿100-200重量份 川射干100-200重量份。
2.如权利要求1所述的中药组合物,其特征在于该组合物是由下列原料药制成的:
板蓝根300重量份 忍冬藤375重量份 山豆根150重量份
鱼腥草450重量份 重楼150重量份 贯众225重量份
白芷150重量份 青蒿150重量份 川射干150重量份。
3.权利要求1或2所述的中药组合物的制备方法,其特征在于该方法包含如下提取精制工艺中的任一种:
1)取鱼腥草用水煎煮两次,滤过,滤液浓缩至相对密度为1.03,冷却,加入乙醇,使含量为50%,静置沉淀,取上清液回收乙醇至无醇味,备用;其余药物加水煎煮两次,滤过,合并滤液及鱼腥草提取液,浓缩,干燥,制成细粉;
2)处方各味药,加水煎煮两次,滤过,滤液浓缩至60℃时相对密度为1.03,冷却,加入乙醇,使含量为50%,静置沉淀,取上清液回收乙醇,浓缩,干燥,制成细粉;
3)处方各味药,加70%乙醇回流提取两次,滤过,滤液合并,减压回收乙醇,浓缩,干燥,所得干膏粉碎成细粉。
4.如权利要求3所述的中药组合物的制备方法,其特征在于该方法还包括如下步骤,即将最后制得的药粉加入常规辅料,制成临床可接受的剂型,包括片剂、口服液体制剂、硬胶囊剂和软胶囊剂。
5.权利要求1或2所述的中药组合物有效成分的检测方法,其特征在于该方法的包含如下定性鉴别方法中的一种或几种:
1)取本发明干膏粉3g,加浓氨试液1ml、氯仿20ml,密塞,超声处理20分钟,滤过,滤液水浴上蒸干,残渣加氯仿1ml使溶解,作为供试品溶液;另取苦参碱对照品加氯仿制成每1ml含0.5mmg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取供试品溶液、对照品溶液各10μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上,以6∶4∶0.3的醋酸乙酯-氯仿-浓氨试液为展开剂,展开12cm,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;
2)取本发明干膏粉3g,加入氯仿20ml,密塞,超声处理20分钟,滤过,滤液水浴上蒸干,残渣加氯仿1ml使溶解,作为供试品溶液;另取白芷对照药材1g,加水200ml,煎煮30分钟,滤过,滤液浓缩至约40ml,放冷,转至分液漏斗中,加氯仿20ml,密塞,振摇2~3分钟,放置,分取氯仿层,置水浴上蒸干,残渣加氯仿1ml使溶解,作为白芷对照药材溶液;照薄层色谱法试验,吸取供试品溶液、对照药材溶液各10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以10∶0.5的氯仿-甲醇为展开剂,展开12em,取出,晾干,置365nm的紫外光灯下检视,供试品色谱中,在与对照药材相应的位置上显一个相同的淡黄色荧光主斑点;
3)取本发明干膏粉5g,研细,加水20ml使溶解,以氯仿振摇提取二次,每次25ml,合并氯仿液,蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取东莨菪内酯对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取供试品溶液、对照品溶液各5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以10∶8∶1的氯仿-醋酸乙酯-冰醋酸为展开剂,展开,取出,晾干,置365nm的紫外光灯下检视,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
6.如权利要求5所述的中药组合物有效成分的检测方法,其特征在于该方法中包含如下定量方法:
a.色谱条件与系统适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;3∶97的乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相;检测波长为203nm;理论板数按苦参碱峰计算应不低于2000;
b.对照品溶液的制备取苦参碱对照品适量,精密称定,加0.1%磷酸溶液制成每1ml中含30μg的溶液,即得;
c.供试品溶液的制备取本发明干膏粉1g,研细,取0.3g,精密称定,加水20ml使溶解,用氨试液调节pH值至9~10,置分液漏斗中,用氯仿提取5次,每次20ml,合并氯仿液,蒸干,残渣以0.1%磷酸溶液定容至5ml,用0.45um微孔滤膜滤过,即得;
d.测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
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