CN101592636A - 一种新的复方头孢噻肟钠舒巴坦钠的检测方法 - Google Patents

Abstract

一种新的高效液相色谱(HPLC)方法，可以同时检测头孢噻肟钠与舒巴坦钠复方制剂中两种单一成分的含量及有关杂质，两种成分不相互干扰与影响，该方法操作简单易行，专属性强，灵敏度高，线性范围大，稳定性好，可用于复方制剂与原料的检测。

Description

一种新的复方头孢噻肟钠舒巴坦钠的检测方法

发明背景：

头孢噻肟钠(cefotaxime sodium，CTX)是1977年德国赫司特公司研制开发的第一个三代头孢菌素，用于治疗多种革兰氏阳性菌和阴性菌所致的感染性疾病，具有抗菌谱广，抗菌活性强，组织分布少，低毒等特点。该产品上市近30年，在全世界多个国家与地区使用，受到广泛好评，至今仍是临床一线用药。

由于大量和广泛的临床应用，甚至近年来滥用的出现，临床上产生了耐头孢噻肟的耐药菌。这类耐药菌大多数是通过产β-内酰胺酶降解头孢噻肟起作用的，这样降低了头孢噻肟钠的抗菌活性。针对这种情况开发的β-内酰胺酶抑制剂与抗生素合用后可有效抑制细菌的耐药性，恢复抗生素的活性，因此，采用“抗生素+β-内酰胺酶抑制剂”的复方组合能有效地抑制了产酶菌的耐药问题。由这种思路开发的复方制剂如“阿莫西林克拉维酸”、“头孢哌酮钠舒巴坦钠”、“哌拉西林钠舒巴坦钠”等在临床上获得了很大的成功。以头孢噻肟钠为主药的复方抗生素“头孢噻肟钠”加上“舒巴坦钠”的组合包装在临床上也有使用，并且获得很好的效果(朱培成，1999；李复雄等，2004)。这样的组合使用在临床上已被证明是安全、有效的。但从制剂的角度来看，因为头孢噻肟钠含有一定水分，而舒巴坦钠遇水降解，不稳定，如果简单的将两者混合到一起，则无法解决产品的稳定性问题，须在制剂工艺上解决产品的稳定性问题。同时由于之前没有复方制剂，均是单一成分做检测，两者混合后的复方检验需要建立新的检测方法，这样的检测方法能够检测出复方中单一成分的含量和有关杂质，同时，这一检测方法对单一成分的测定还不能受到另一成分的影响，而且能够达到专属灵敏、简便操作等要求，并能够在制剂工厂以及各地检测机构或医院对产品质量进行检查，针对这样的要求我们建立了一个新的检测复方头孢噻肟钠舒巴坦钠的方法。

发明内容：

我们采用在工厂、药品检验所、医院等常见的高效液相色谱法(HPLC)通过优化流动相、流速、检测波长等指标，建立了一种新的检测方法，这种方法可以检测复方头孢噻肟钠舒巴坦钠中两种单一成分的含量和有关物质，而不会出现两种成分相互影响与干扰，该方法简便易行、操作步骤少，方法专属性强、灵敏度高、线性范围大、重复性好等，可用于复方制剂和原料的常规检测。

专利实例：

实施例一、复方原料与制剂的初步检测

实验采用“注射用头孢噻肟钠舒巴坦钠”，比例为2∶1，规格为1.5g，因其他配比和规格在制剂上简单的装量变化，其原料来源、制备工艺均无显著差异。故用该配比、规格样品进行研究。

试验样品为白色、类白色或微黄白色粉末，进行以下各种试验。

1、鉴别试验：

两种组分舒巴坦和头孢噻肟均以钠盐形式存在，灼烧时应呈现钠盐的火焰反应。取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取本品，在无色的火焰中燃烧，火焰即显鲜黄色。

两种组分舒巴坦钠和头孢噻肟钠极性不同，可通过HPLC法进行分离，并用对照品进行对照鉴别。取本品和舒巴坦和头孢噻肟的标准品，分别用流动相制成每1ml含0.5mg头孢噻肟钠和0.25mg舒巴坦钠的溶液，按照本专利以下描述的含量测定项下高效液相色谱法试验，结果供试品峰与对照品峰一致。(试验方法见实施例二、三)

2、检测试验

试验样品酸度检查：取试验样品加注射用水制成每ml含150mg的溶液，用酸度计测定，结果试验样品的pH在4.5-5.5之间，为合格产品。

试验样品溶液澄清度检查：取试验样品5瓶，分别加水制成每1ml中约含本品0.1g的溶液，与1号浊度标准液进行比较，检查澄清度。结果试验样品为澄明液体，未超过1号浊度标准液，澄清度符合相关规定，为合格样品。

试验样品溶液颜色检查：取试验样品5瓶，加水溶解，置于25ml的纳氏比色管中，加水稀释至10ml，与黄色色调标准比色液比较。结果试验样品为澄明液体，颜色不深于5号黄色标准比色液，符合相关规定，为合格样品。

试验样品澄明度检查：取试验样品本品五瓶，每瓶用注射针注入4ml注射用水使溶解后，照澄明度检查细则和判断标准操作，检查澄明度。结果试验样品溶液为澄明液体，毛、点总数未超过5个，其中色点数未超过3个，符合澄明度检查细则和判断标准规定，为合格样品。

试验样品水分检查：取试验样品1g，按水分检测法测定，结果试验样品水分含量均在2％左右符合标准，为合格样品。

由于该制剂是由无菌原料直接分装的，所以，原料与制剂的成分、含量上完全一样，没有差别。采用本专利的检测方法对原料进行的检测，得到与制剂相同的结果。

实施例二、复方原料与制剂的分析和质量控制方法

为控制产品的质量，必须对产品中的有可能出现的杂质进行分析研究。之前由于没有将两个物质混合在一起使用的经验，所以现有的资料也只有对单一头孢噻肟钠(或舒巴坦钠)中有关杂质的检验方法。

这样的检验方法虽然是对单一物质检验有效，但是否能够检验混合物中的有关杂质还不清楚，因为制备成混合制剂以后两种主要成分是否会相互影响对方的检测，两种杂质是否也会影响对方的检测有很多不确定因素，需要进行大量的试验来验证。所以，我们根据头孢噻肟钠、舒巴坦钠单一物质检测方法，建立了相应的对复方物质中杂质的检测方法。

1、有关杂质物质检测：

由于HPLC方法已经能够很好地用于单一的两种成分检测，因此我们采用HPLC方法建立复方的杂质检测方法。

试验首先进行破坏性试验，按照药物稳定性试验指南分别进行了1)碱破坏：分别取头孢噻肟钠、舒巴坦钠约25mg，以及样品用0.1mol/L的NaOH溶液20ml溶解，室温放置6小时。2)、然后采用酸破坏：分别取头孢噻肟钠约25mg、舒巴坦钠约12mg，以及样品用0.1mol/L的盐酸溶液20ml溶解，室温放置6小时。3)、再采用氧化降解：分别取头孢噻肟钠约50mg、舒巴坦钠约25mg，以及样品用30％H₂O₂20ml溶解，置室温6小时。

取经过上述三种破坏性试验的溶液精密量取5ml，置25ml量瓶中，用流动相(配方见后)稀释至刻度，在下述色谱条件下测试，检测舒巴坦钠、头孢噻肟钠是否有明显降解，以降解产物峰与主峰分离＞2.0，头孢噻肟钠降解产物与舒巴坦钠主峰分离度＞1.5为合格标准的判断指标。

我们首先采用如下的色谱条件进行筛选最佳的检测方法：

色谱条件(1)：试验采用Waters 515泵，Waters2487紫外检测器；色谱柱：UltimateXB-NH2正相分析柱；规格：5μm，4.6*50mm；流动相：正己烷-氯仿溶液(2∶1)；检测波长：220nm-260nm；流速：0.1～3ml/min；进样量：10～30μl。

色谱条件(2)：试验采用Waters 515泵，Waters2487紫外检测器，色谱柱采用Hypersil ODS2 250×4.6mm，流动相采用0.00125mol/L四丁基氢氧化铵(磷酸调节pH至5.0-5.4)∶乙腈＝75-90∶25-10，流速0.1~3.0ml/min，检测波长采用210-230nm，柱温为室温，进样量为10-30μl。

色谱条件(3)：试验采用Waters 515泵，Waters2487紫外检测器，色谱柱采用Hypersil ODS2 250×4.6mm，流动相采用0.05mol/L磷酸二氢钾溶液-甲醇(70~89∶30~11)，流速0.1~3.0ml/min，检测波长采用210-230nm，柱温为室温，进样量为10-30μl。

色谱条件(4)：试验采用Waters 515泵，Waters2487紫外检测器，色谱柱采用Hypersil ODS2 250×4.6mm，流动相采用0.05mol/L磷酸二氢钾溶液-乙腈(65~90∶45~10)，流速0.1~3.0ml/min，检测波长采用210-230nm，柱温为室温，进样量为10-30μl。

采用上述方法检测发现，色谱条件(1)、(3)、(4)虽然也可以用于检测但两者的分离度都小于1.0，两组分都分不开，而色谱条件(2)的分离度较好，但还需优化。经过三种破坏性试验的样品在色谱条件(2)试验条件下舒巴坦钠、头孢噻肟钠均无明显降解，头孢噻肟钠杂质峰与舒巴坦钠主峰分离度＞1.5。

哪是不是方法学不够灵敏没检测出杂质？还是本身就没有出现杂质？对此，我们首先采用LC-MS对样品进行了检验，发现经过上述三种破坏试验的样品，在LC-MC检测条件下也没有发现有杂质出现，说明本检验方法是可靠。

更进一步，我们采用极端手段将上述的破坏条件增强2-10倍，用LC-MS首先检测以保证出现杂质，观察本试验条件是否可以检测出来。结果发现，采用更强烈的破坏条件后，头孢噻肟钠和舒巴坦钠均在不同程度上出现了降解，这样的降解在3倍强化的酸破坏的条件下刚刚出现，杂质量很低，用LC-MS可以检测到杂质的出现，更强烈破坏条件可以产生更多的杂质。我们采用上述建立的检测方法，对于3倍强化的酸破坏的条件下刚刚出现杂质进行分析，结果该方法可以发现杂质的出现。

我们以“3倍强化的酸破坏的条件下刚刚出现杂质的溶液”作为检测对象，对我们建立的HPLC检测方法进行了优化，最后确定了以下方法作为最佳鉴定方法：

色谱条件：试验采用Waters 515泵，Waters2487紫外检测器，色谱柱采用Hypersil ODS2 250×4.6mm，流动相采用0.00125mol/L四丁基氢氧化铵(磷酸调节pH至5.0)∶乙腈＝82.5∶17.5，流速1.0ml/min，检测波长采用230nm，柱温为室温，进样量为10μl。

我们以上述检验方法，对检验样品进行了检测，结果如下：

样品溶液制备：取本品适量，精密称定，用流动相溶解制成每1ml中含头孢噻肟钠0.5mg和舒巴坦钠0.25mg的溶液，作为供试品溶液。精密量取0.33ml至10ml量瓶，用流动相稀释至刻度，作为对照溶液。取对照溶液10μl注入液相色谱仪，调整仪器灵敏度，使头孢噻肟峰高度约为记录仪满量程的10~25％；再精密量取上述两种溶液各10μl分别进样，记录供试液色谱图至头孢噻肟主成分峰保留时间的2倍。供试品溶液的色谱图中如显示杂质峰，计算各杂质峰面积的和，不得大于对照溶液主成分的峰面积。

试验检验了三批生产样品有关物质检查结果均符合规定。结果见表1及图1~3

表1有关物质检查结果

2、头孢噻肟钠聚合物

由于头孢噻肟钠还有聚合物产生，如果聚合物含量高会导致不良反应的发生，需要在产品中控制聚合物的含量，按照相关要求必须对聚合物进行检测。以往，只有在单方头孢噻肟钠中进行聚合物的检测，还没有关于复方头孢噻肟舒巴坦钠混合后中进行聚合物测定的研究报告，是否单方测定的条件可以准确反应复方中的情况，或者说，复方混合物是否会影响原来条件的检测的准确性，对此，我们也进行了研究。

我们首先进行了头孢噻肟聚合物色谱条件与测定方法试验。

色谱条件：采用仪器是Waters 515泵加上Waters2487紫外检测器，色谱柱为葡聚糖凝胶柱(G-10)，流动相A采用磷酸盐缓冲液(取磷酸氢二钠21.85g，磷酸二氢钠5.83g，加水1000ml溶解，调节pH至7.0)，流动相B采用0.01％十二烷基硫酸钠溶液，流速为1.5ml/min，检测波长为254nm，柱温采用室温，进样量采用100μl。

对照品溶液取头孢噻肟钠对照品约25mg，置250ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。首先进行系统适用性试验，以流动相A为流动相，用1mg/ml蓝色葡聚糖2000溶液进样100μl，理论塔板数以蓝色葡聚糖2000计算大于700；再以流动相B为流动相，取对照品溶液，反复进样100μl，头孢噻肟钠峰面积值的相对标准差为0.71％，小于5％。结果见下表2及图4~10。

表2头孢噻肟钠精密度测定结果

根据上述结果表明，原来用于单方中聚合物检测的方法是可以用于复方药物中的头孢噻肟钠聚合物的测定的。

为了进一步验证这样的情况，我们对于上述方法采用了LC-MS验证，结果发现，采用上述方法测定的结果和LC-MS方法测定的结果能够很好的对应，说明复方药物虽然是混合物，但是这样的混合物并不影响原来测定聚合物方法的专属性和灵敏度。

依此，我们对试验样品进行了头孢噻肟聚合物测定：

取试验样品约0.2g，精密称定，置10ml量瓶中，加流动相A溶解并稀释至刻度，摇匀。立即取100μl注入色谱仪，以流动相A为流动相进行测定，记录色谱图；另取对照品溶液100μl注入色谱仪，以流动相B为流动相，记录色谱图，按外标法计算。本品含头孢噻肟聚合物以头孢噻肟计不得过1.0％为合格作为检测指标，结果三批样品的头孢噻肟聚合物含量均符合规定。结果见表3及图11~15。

表3头孢噻肟聚合物检查结果

实施例三、用于该复方制剂的新检测方法的建立和制剂含量测定验证

为控制产品的质量，对复方制剂中两个主要成分的含量控制是个重要指标，对于单一头孢噻肟钠、舒巴坦钠两种含量检测已经有比较多的研究方法建立，中国药典也有指定的方法。但是，在制备成混合物后，是否这样的方法仍然能够用于混合物中成分的检测？或者说，混合物中两个物质是否会相互影响对方的检测？这样的问题尚无人进行研究，其中还有很多不确定因素需要面对和解释。对此，我们对于如何开展复方制剂中两种成分的含量进行检测方法进行了研究。

由于HPLC方法已经能够很好地用于单一的两种成分检测，同时HPLC方法也是中国药典推荐的方法，因此，我们采用HPLC方法建立复方的两个成分含量的检测方法。

色谱条件选用：仪器：Waters 515泵和Waters2487紫外检测器，试验采用色谱柱为Hypersil ODS2 250×4.6mm，5μm；流动相：0.00125mol/L四丁基氢氧化铵溶液(磷酸调节pH至5.0)-乙腈(82.5∶17.5)，流速为1.0ml/min，检测波长为230nm，柱温为室温，进样量为10μl。

流动相的选择和优化：本品为复方制剂，流动相的选择主要考虑两主峰的出峰时间，分离效果以及主峰与杂质峰的分离情况，选用磷酸二氢钾溶液-甲醇为流动相及磷酸二氢钾溶液-乙腈为流动相测定时，两组份的分离度太小，而且头孢噻肟钠的保留时间过长，不适于测定。适当调节流动相组成。为避免头孢噻肟保留时间过长，采用离子对试剂四丁基氢氧化铵溶液浓度为0.00125mol/L。当选择0.00125M四丁基氢氧化铵溶液(磷酸调节pH至5.0)-乙腈(75~80∶25~20)和(85~90∶15~10)为流动相时，头孢噻肟杂质峰与舒巴坦主峰和头孢噻肟主峰分离度不好(R＜1.5)，将流动相组成调节为四丁基氢氧化铵溶液(磷酸调节pH至5.0)-乙腈(82.5∶17.5)，头孢噻肟杂质峰与舒巴坦主峰和头孢噻肟主峰分离度均大于1.5，能获得较佳的分离效果。

检测波长的选择和优化：分别将浓度为20μg/ml的头孢噻肟钠，134.4μg/ml的舒巴坦钠在200~300nm范围内进行紫外扫描，结果舒巴坦钠和头孢噻肟钠在230nm处均有较大吸收，且头孢噻肟钠吸收度远高于舒巴坦，故选择230nm作为测定波长。

在上述研究的基础上，我们采用选定的色谱条件首先进行了系统适用性试验，在上述色谱条件下，溶剂峰保留时间约3min，不干扰主成分测定。分别注入舒巴坦、头孢噻肟对照品以及样品供试溶液，记录色谱图。舒巴坦保留时间13.198min，理论塔板数为13722；头孢噻肟保留时间23.685min，理论塔板数为10027。样品溶液谱图中，舒巴坦主峰(13.165min)与杂质峰(11.532min，14.565min)分离度，头孢噻肟主峰(23.665min)与杂质峰(20.065min)分离度均大于2.0(见图16~18)。

我们进一步对检测方法的线性范围进行了研究：精密称取舒巴坦钠对照品(批号130483-200102，纯度92.0％)42.40mg，头孢噻肟钠对照品(批号0430-200002，纯度90.6％)80.00mg，置于50ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度。精密吸取1.00，2.00，3.00，4.00，5.00ml溶液，置于10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度。各精密吸取10μl进样测定，以峰面积对进样浓度进行回归。结果表明，舒巴坦钠在0.078016mg/ml～0.39008mg/ml浓度范围内，峰面积与浓度呈良好的线性关系；头孢噻肟钠在0.14496mg/ml~0.7248mg/ml浓度范围内，峰面积与浓度呈良好的线性关系。结果见表4，线性图见图19~23。

表4舒巴坦钠与头孢噻肟钠线性范围

再进一步，我们对这个检测方法的精密度进行了试验，采用舒巴坦钠浓度为0.19504mg/ml，头孢噻肟钠浓度为0.3624mg/ml的对照品溶液，按照前述含量测定方法，进样10μl测定。重复测定六次，其峰面积值的相对标准偏差，舒巴坦钠为0.63％，头孢噻肟钠为0.64％。结果见表5，色谱图见图24~29。

表5精密度试验结果

我们对这个方法的灵敏度也进行了研究，取舒巴坦钠浓度为1.952μg/ml，头孢噻肟钠浓度为3.624μg/ml的对照品溶液，照前述含量测定方法，进样5μl测定。以信号是噪音的3倍所对应的样品量进行计算，结果舒巴坦钠的检测灵敏度为1.21ng，头孢噻肟钠的检测灵敏度为0.32ng。

我们还对这个检测方法进行了重复性试验，称取同一批号的样品6份，按照前述含量测定方法制备供试液，测定舒巴坦钠和头孢噻肟钠的含量。测得舒巴坦钠含量相对标准偏差为0.75％，头孢噻肟钠含量相对标准偏差为0.88％，结果见表6，色谱图见图30~35。

表6  重复性试验测定结果

我们还进行了样品检测的回收率试验，精密称取试验样品60.08mg，于50ml量瓶，加流动相溶解并稀释至刻度。精密吸取样品溶液5ml，于10ml量瓶，分别加入对照品溶液(舒巴坦钠0.4480mg/ml，头孢噻肟钠1.1887mg/ml)1.0ml，2.0ml，3.0ml，用流动相稀释至刻度。按照前述含量测定方法，进样10μl测定，计算加样回收率。结果见表7，色谱图见图36~44。

表7回收率测定结果

从上面的试验结果表明，我们建立的这个含量测定方法，具有灵敏度、稳定性好，重复性高。是个理想的用于检验复方药物两个成分的方法。

由于该制剂是由无菌原料直接分装的，所以，原料与制剂的成分、含量上完全一样，没有差别。采用本专利的检测方法对原料进行的检测，得到与制剂相同的结果。

实施例四、采用新的检测方法对复方头孢噻肟钠舒巴坦钠样品进行检测

进一步，我们采用这个新的检验方法对三批GMP条件下生产的试验样品含量测定。按照前述含量测定方法进行，取本品适量，精密称定，加流动相溶解并稀释成每ml含头孢噻肟钠0.5mg和含舒巴坦钠0.25mg的溶液，精密量取10μl，注入色谱仪；另取头孢噻肟钠和舒巴坦钠对照品适量，同法稀释并测定，按外标法计算供试品中舒巴坦钠和头孢噻肟钠的含量。

说明：W对：对照品的称样量，W样：样品的称样量，W装：样品的平均装量，A标：对照品的峰面积，A样：样品的峰面积，对％：对照品的纯度，标示量：样品的标示量

三批样品含量测定结果见表8，色谱图见图45~50。

表8三批样品含量测定结果

由于该制剂是由无菌原料直接分装的，所以，原料与制剂的成分、含量上完全一样，没有差别。采用本专利的检测方法对原料进行的检测，得到与制剂相同的结果。

实施例五、新检测方法对不同配比的复方制剂的检测

采用上述实例建立的检测方法，我们对不同配比的头孢噻肟钠舒巴坦钠的复方制剂进行了检测，以观察这样的方法是否可以用于不同的配比的复方制剂的检测，结果发现，对于头孢噻肟钠/舒巴坦钠20∶1，10∶1，8∶1，6∶1，5∶1，4∶1，3∶1，2∶1，1∶1，1∶2，1∶3，1∶4，1∶5，1∶6，1∶8，1∶10，1∶20等17个不同配比的样品的检测，本专利建立的新方法均能很好的对两个组成成分进行测定，该方法有很好的灵敏度和可靠性。

实施例六、采用该种检验方法评判为合格制剂的进行动物试验的结果

根据GMP规范进行三批样品制备，按照本专利实例一、二、三的方法对三批样品进行检验，采用上述标准检验合格的制剂样品进行动物试验，检查通过上述新检测方法检验合格的样品是否能够符合动物试验的要求。

试验样品首先进行无菌检查。在无菌室内进行无菌操作，取三批试验样品各6支，分别加入100ml 0.9％无菌氯化钠溶液使溶解，摇匀，打开滤器盖，在火焰旁打开样品供试液的塞子使瓶口通过火焰，立即倒入滤器中，并闭滤器盖，打开排液架的阀门，启动真空泵进行减压抽滤，待干后，用灭菌生理盐水照上述操作冲洗滤膜3次，每次100ml。打开抽气瓶排气管，将过滤器取下，用灭菌镊子将滤膜取出放入灭菌双碟中。用灭菌剪刀将滤膜平均分成3份，分别置于各含50ml硫乙醇酸盐流体培养基和改良马丁培养基的容器中，其中一份做阳性对照。按规定的温度培养14天。培养期间逐日观察并记录是否有菌生长。结果无细菌生长，无菌试验符合规定，为合格产品。

试验样品进行异常毒性检查：取三批试验样品，加氯化钠注射液制成每1ml中含0.15g的溶液，取15只小鼠分成三组，每组5只尾静脉注射同一批号的溶液0.5ml，观察48小时的内无异常反应也无死亡，结果为合格产品。

试验样品进行热原检查：取三批试验样品，加灭菌注射用水制成每1ml中含0.15g的溶液，取9只家兔分成3组，每组3只，测定其正常体温后15分钟内，剂量按家免体重每1kg注射1ml，自耳静脉缓缓注入规定剂量并温热至38℃的供试品溶液，然后每隔30分钟测量其体温1次，共测6次，以6次体温中最高的一次减去正常体温，即为该兔体温的升高温度。各兔体温升高均低于0.6℃，而且每组家兔体温升高总和低于1.4℃，因此三批样品可判断为热源检查符合规定，三批样品为合格产品。

结果见表9

表9：热原检查结果

附图说明：

图1是wm0201批有关物质检查图谱    图2是wm0202批有关物质检查图谱

图3是wm0203批有关物质检查图谱    图4是头孢噻肟聚合物精密度1图

图5是头孢噻肟聚合物精密度2图     图6是头孢噻肟聚合物精密度3图

图7是头孢噻肟聚合物精密度4图     图8是头孢噻肟聚合物精密度5图

图9是头孢噻肟聚合物精密度6图     图10是头孢噻肟聚合物精密度7图

图11是头孢噻肟聚合物测定对照1图  图12是头孢噻肟聚合物测定对照2图

图13是wm0201批样品聚合物测定图   图14是wm0202批样品聚合物测定图

图15是wm0203批样品聚合物测定图   图16是舒巴坦对照品图谱

图17是头孢噻肟钠对照品图谱       图18是样品图谱

图19是线性试验图谱               图20是线性试验图谱2

图21是线性试验图谱3              图22是线性试验图谱4

图23是线性试验图谱5            图24是精密度试验图谱1

图25精密度试验图谱2            图26精密度试验图谱3

图27精密度试验图谱4            图28精密度试验图谱5

图29精密度试验图谱6            图30重复性试验图谱1

图31重复性试验图谱2            图32重复性试验图谱3

图33重复性试验图谱4            图34重复性试验图谱5

图35重复性试验图谱6            图36回收率试验图谱1

图37回收率试验图谱2            图38回收率试验图谱3

图39回收率试验图谱4            图40回收率试验图谱5

图41回收率试验图谱6            图42回收率试验图谱7

图43回收率试验图谱8            图44回收率试验图谱9

图45是wm0201批含量测定图谱1    图46是wm0201批含量测定图谱2

图47是wm0202批含量测定图谱1    图48是wm0202批含量测定图谱2

图49是wm0203批含量测定图谱1    图50是wm0203批含量测定图谱2。

Claims (8)

1、一种新的用于头孢噻肟钠与舒巴坦钠复方原料和制剂的检测方法。

2、根据权利要求1所述的方法，其特征在于该方法采用高效液相色谱法，所采用的流动相可以是正己烷，氯仿，二氯甲烷，四丁基氢氧化胺、乙腈、磷酸二氢钾、甲醇、水等，其中优选的采用四丁基氢氧化胺和乙腈。

3、根据权利要求1、2所述的方法，其特征在于该方法所采用的检测波长可以是210~260nm，优选的波长采用230nm。

4、根据权利要求1、2、3所述的方法，其特征在于该方法所采用的流动相流速可以是0.1~3.0ml/min，优选地流速采用1.0ml/min；

5、根据权利要求1、2、3、4所述的方法，其特征在于该方法所采用的色谱柱可以是胺基柱，氰基柱，十八烷基硅烷键合硅胶柱，八烷基硅烷键合硅胶柱，四烷基硅烷键合硅胶柱，苯基硅烷键合硅胶柱等；优选地采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱(C18柱)。

6、根据权利要求1、2、3、4、5所述的方法，其特征在于该方法对于不同比例的头孢噻肟钠舒巴坦钠复方均能检测，头孢噻肟钠他唑巴坦钠两者成分的比例可以包括1∶50~50∶1，优选地用于1∶20~20∶1。

7、根据权利要求1、2、3、4、5、6所述的方法，其特征在于该方法可以用于头孢噻肟钠舒巴坦坦钠复方的原料检测，也可以用于该复方的制剂检测。

8、根据权利要求1、2、3、4、5、6、7所述方法，这种检测头孢噻肟钠舒巴坦钠复方的方法，对两个组分的含量及杂质能很好地检测，并且这样的检验不受另一成分的干扰，有很好的灵敏度、专属性、简便易行，该方法可以用于制药公司在该复方的原料与制剂生产过程中对于产品质量的检测，也可以用于药检所、医院等单位对制剂质量的监控。

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