CN101575588A - 一种2-酮基-l-古龙酸发酵菌种的制备工艺 - Google Patents
一种2-酮基-l-古龙酸发酵菌种的制备工艺 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种2-酮基-L-古龙酸发酵菌种的制备工艺,该制备工艺采用大小菌进行混合培养,小菌为普通生酮基古龙酸菌,大菌为巨大芽孢杆菌,先将小菌单独接种到斜面培养基上培养16~48小时,然后再接种大菌,继续培养24~72小时,大小菌的数量比例控制为1∶20~40;采用浓度为5~30g/L的蔗糖或浓度为5~20g/L的果糖作为培养基中的主要碳源,将大小菌混合种子接入其中培养,控制接种种液菌数为108~1010个/ml。本发明改变小菌与大菌的比例,增加菌种密度,提高菌种活力,从而缩短发酵周期;本制备工艺菌种不变,操作简便,易广泛应用。
Description
技术领域
本发明涉及维生素C的制备方法,具体地说是一种2-酮基-L-古龙酸发酵菌种的制备工艺。
背景技术
目前,我国维生素C生产厂家均采用二步发酵生产技术。其主要特点是第二步发酵过程由两种菌混合培养完成的。其中普通生酮基古龙酸菌将山梨糖转化2-酮基-L-古龙酸,俗称小菌,另一种菌为巨大芽孢杆菌,作为小菌的伴生菌,促进小菌生长与产酸,俗称大菌。两种菌共同作用,将山梨糖转化为2-酮基-L-古龙酸。公知的2-酮基-L-古龙酸发酵菌种制作技术中:在斜面菌种制作时,大小菌同时搭配进行混合培养;液体种子培养基配方中,碳源主要采用山梨糖和葡萄糖,采用该方法制作的菌种,小菌比例偏小,菌种密度低,造成实际生产中发酵周期偏长,发酵转化率低,从而影响2-酮基-L-古龙酸的产量,增加能耗和成本。
发明内容
本发明的目的是提供一种操作简便、能够缩短发酵周期的2-酮基-L-古龙酸发酵菌种的制备工艺。
本发明的技术解决方案是该工艺采用大小菌进行混合培养,小菌为普通生酮基古龙酸菌,大菌为巨大芽孢杆菌,先将小菌单独接种到斜面培养基上培养16~48小时,然后再接种大菌,继续培养24~72小时,大小菌的数量比例控制为1∶20~40;采用浓度为5~30g/L的蔗糖或浓度为5~20g/L的果糖作为培养基中的主要碳源,将大小菌混合种子接入其中培养,控制接种种液菌数为108~1010个/ml。
本发明对菌种制作方法和种子液体培养基配方进行优化,改变小菌与大菌的比例,增加菌种密度,提高菌种活力,从而缩短发酵周期;本制备工艺不需要增添新设备,亦不需要改造原设备,菌种不变,操作简便,易广泛应用。
具体实施方式
实施例1:
先将小菌单独接种到斜面培养基上培养24小时,然后再接种大菌,继续培养28小时,大菌与小菌的数量比为1∶30,在液体种子培养基中用浓度为15g/L的果糖作为主要碳源,接种种液菌数为5.5×108个/ml,通过扩大培养,接种到1m3发酵罐中,发酵46小时结束,发酵液终点2-酮基-L-古龙酸含量101.63mg/ml,发酵转化率为92.56%。
实施例2:
先将小菌单独接种到斜面培养基上培养20小时,然后再接种大菌,继续培养32小时,大菌与小菌的数量比为1∶28,在液体种子培养基中用浓度为10g/L的蔗糖作为主要碳源,接种种液菌数为1.9×109个/ml,通过扩大培养,接种到50m3发酵罐中,发酵45小时结束,发酵液终点2-酮基-L-古龙酸含量104.86mg/ml,发酵转化率为92.91%。
实施例3:
先将小菌单独接种到斜面培养基上培养32小时,然后再接种大菌,继续培养34小时,大菌与小菌的数量比为1∶38,在液体种子培养基中用浓度为15g/L的蔗糖作为主要碳源,接种种液菌数为8.3×109个/ml,通过扩大培养,接种到100m3发酵罐中,发酵41小时结束,发酵液终点2-酮基-L-古龙酸含量104.81mg/ml,发酵转化率为92.81%。
本技术发酵平均周期缩短15%,发酵转化率提高2个百分点,设备利用率得到很大提高,成本也大幅下降。
本发明不限于这些公开的实施例,本发明将覆盖技术方案所描述的范围,以及权利要求范围的各种变形和等效变化,在不偏离本发明的技术解决方案的前提下,对本发明所作的本领域技术人员容易实现的任何修改或改进均属于本发明所要求保护的范围。
Claims (1)
1、一种2-酮基-L-古龙酸发酵菌种的制备工艺,采用大小菌进行混合培养,小菌为普通生酮基古龙酸菌,大菌为巨大芽孢杆菌,其特征在于:先将小菌单独接种到斜面培养基上培养16~48小时,然后再接种大菌,继续培养24~72小时,大小菌的数量比例控制为1∶20~40;采用浓度为5~30g/L的蔗糖或浓度为5~20g/L的果糖作为培养基中的主要碳源,将大小菌混合种子接入其中培养,控制接种种液菌数为108~1010个/ml。
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