CN101573359A

CN101573359A - 作为cxcr2拮抗剂的5-硫基甲基-吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-醇衍生物

Info

Publication number: CN101573359A
Application number: CNA2007800436288A
Authority: CN
Inventors: P·亨特; D·波特; N·J·普雷斯; C·斯庞克; S·J·沃森
Original assignee: Novartis AG
Current assignee: Novartis AG
Priority date: 2006-11-23
Filing date: 2007-11-21
Publication date: 2009-11-04
Also published as: KR20090082424A; US20100152205A1; AU2007324472A1; WO2008062026A1; JP2010510291A; CA2669579A1; MX2009005358A; BRPI0718956A2; EP2094697A1

Abstract

本发明涉及式(I)化合物及这些化合物作为药物、例如在预防或治疗CXCR2受体介导的病症或疾病中的用途。

Description

作为CXCR2拮抗剂的5-硫基甲基-吡唑并[1，5-A]嘧啶-7-醇衍生物

本发明涉及吡唑并嘧啶类化合物如式(I)化合物及其用途。

一方面，本发明提供了作为药物的式(I)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物：

其中

R₁、R₂和R₃独立地是氢、(C_1-8)烷基、卤代(C_1-8)烷基、(C_3-8)环烷基、(C_3-8)环烷基(C_1-8)烷基、(C_1-4)烷氧基、(C_1-4)烷氧基(C_1-8)烷基、(C_1-8)烷基(C_1-4)烷氧基、氰基、(C_1-8)烷硫基、未取代的或取代的(C_6-18)芳基、未取代的或取代的(C_1-4)烷基(C_6-18)芳基、未取代的或取代的(C_6-18)芳基(C_1-4)烷基、具有5或6个环成员和1至4个选自N、O、S的杂原子的未取代的或取代的杂环基，或

R₁或R₂中一个是氧代基，另一个是氢，且R₃如上定义，或

R₁和R₂一起形成未取代的或取代的5至8元脂环族或芳族环系，该环系任选地含有至少1个选自N、O、S的杂原子和/或任选地与5至8元脂环族或芳族环系稠合，且R₃如上定义，

R₄是未取代的(C_6-18)芳基或被下述基团单取代或多取代的(C_6-18)芳基：卤素、卤代(C_1-6)烷基、卤代(C_1-6)烷氧基、氰基、苯基、具有5至6个环成员和1至4个选自N、O、S的杂原子的杂环基；或具有5或6个环成员和1至4个选自N、O、S的杂原子的未取代的或取代的杂环基。

另一方面，本发明提供了如上定义的式(I)化合物，其中

R₁、R₂和R₃独立地是氢、(C_1-4)烷基、卤代(C_1-4)烷基、(C_3-6)环烷基、(C_3-6)环烷基(C_1-4)烷基、(C_1-2)烷氧基、(C_1-2)烷氧基(C_1-4)烷基、(C_1-4)烷基(C_1-2)烷氧基、氰基、(C_1-4)烷硫基、未取代的或取代的苯基、未取代的或取代的苯基(C_1-4)烷基、具有5或6个环成员和1至2个选自N、O、S的杂原子的未取代的或取代的杂环基，或

R₁或R₂中一个是氧代基，另一个是氢，且R₃如上定义，或

R₁和R₂一起形成5或6元脂环族或芳族环系，该环系任选地含有1个选自N、O、S的杂原子和/或任选地与未取代的或取代的苯基稠合，且R₃如上定义，

R₄是未取代的苯基或被下述基团单取代或多取代的苯基：卤素、卤代(C_1-4)烷基、卤代(C_1-4)烷氧基、氰基、苯基；或具有5至6个环成员和1至2个选自N、O、S的杂原子的杂环基。

另一方面，本发明提供了如上定义的式(I)化合物，其中

R₁是氢、甲基、乙基、异丙基、叔丁基、三氟甲基、甲氧基、1-苯基丙基、环丙基、环戊基、环己基甲基、甲氧基甲基、1-甲氧基乙基、氰基、甲硫基、未取代的苯基；被甲基、三氟甲基、甲氧基、氯、氟或氨基磺酰基单取代或二取代的苯基；苄基、被氯二取代的苄基；未取代的或取代的吡啶基，如吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基；呋喃基，如呋喃-2-基，例如3-甲基呋喃-2-基、5-溴呋喃-2-基，或呋喃-3-基，例如2-甲基呋喃-3-基、2，5-二甲基呋喃-3-基、2-甲基-5-叔丁基-呋喃-3-基；四氢呋喃基，如四氢呋喃-2-基；噻吩基，如噻吩-2-基；异噁唑基，如异噁唑-5-基；

R₂是氢、甲硫基、氰基、苯基、苄基，或

R₁是氧代基，且R₂和R₃是氢，或

R₁和R₂一起形成芳族6元环、与被甲氧基取代的苯基稠合的脂环族6元环或具有S作为杂原子的脂环族5元环，

R₃是氢，

R₄是未取代的苯基、被氯、氟、溴单取代或二取代的苯基；或未取代的吡啶基。

在式(I)化合物中，R₁优选是氢、甲基、乙基、异丙基、叔丁基、三氟甲基、甲氧基、1-苯基丙基、环丙基、环戊基、环己基甲基、甲氧基甲基、1-甲氧基乙基、氰基、甲硫基、未取代的苯基；被甲基、三氟甲基、甲氧基、氯、氟或氨基磺酰基单取代或二取代的苯基；苄基、被氯二取代的苄基；未取代的或取代的吡啶基，如吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基；呋喃基，如呋喃-2-基，例如3-甲基呋喃-2-基、5-溴呋喃-2-基，或呋喃-3-基，例如2-甲基呋喃-3-基、2，5-二甲基呋喃-3-基、2-甲基-5-叔丁基-呋喃-3-基；四氢呋喃基，如四氢呋喃-2-基；噻吩基，如噻吩-2-基；异噁唑基，如异噁唑-5-基。

在式(I)化合物中，R₂优选是氢、甲硫基、氰基、苯基、苄基。

在式(I)化合物中，R₃优选是氢。

在式(I)化合物中，R₄优选是未取代的苯基、被氯、氟、溴单取代或二取代的苯基；或未取代的吡啶基，更优选是被氟单取代或二取代的苯基。

在式(I)化合物中，R₁优选是氧代基，且R₂和R₃是氢。

在式(I)化合物中，优选R₁和R₂一起形成芳族6元环、与被甲氧基取代的苯基稠合的脂环族6元环或具有S作为杂原子的脂环族5元环。

在式(I)化合物中，每一个单独定义的取代基可以是优选的取代基，例如独立于所定义的每一个其他的取代基。

另一方面，本发明提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物：

其中

R₁或R₂中一个是氧代基，另一个是氢，且R₃如上定义，或

R₄是未取代的(C_6-18)芳基或被下述基团单取代或多取代的(C_6-18)芳基：卤素、卤代(C_1-6)烷基、卤代(C_1-6)烷氧基、氰基、苯基、具有5至6个环成员和1至4个选自N、O、S的杂原子的杂环基；或具有5或6个环成员和1至4个选自N、O、S的杂原子的未取代的或取代的杂环基，

条件是，下列化合物除外：

-其中R₁是甲基、R₂和R₃是氢且R₄是苯基的式(I)化合物，

-其中R₁是甲基、R₂和R₃是氢且R₄是4-氯-苯基的式(I)化合物，

-其中R₁是3-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-噻吩-2-基、R₂和R₃是氢且R₄是苯基的式(I)化合物，和

-其中R₁是3-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-噻吩-2-基、R₂和R₃是氢且R₄是4-氯-苯基的式(I)化合物。

如果在此没有另外定义，那么：

-烷基包括直链或支链(C_1-8)烷基，如(C_1-6)烷基或(C_1-4)烷基，例如(C_1-2)烷基，包括未取代的或取代的烷基，例如被有机化学中常见基团如卤素、OH、NH₂或卤代(C_1-6)烷基取代的烷基；

-卤代烷基包括卤代(C_1-8)烷基，例如卤代(C_1-4)烷基，例如三氟甲基；

-环烷基包括(C_3-8)环烷基，如(C_3-6)环烷基，例如环丙基；

-卤素包括氟、氯、溴、碘，例如氟、氯、溴，优选氟或氯；

-烷氧基包括(C_1-4)烷氧基，如(C_1-2)烷氧基，例如甲氧基；

-烷硫基包括(C_1-8)烷硫基，如(C_1-4)烷硫基，例如甲硫基；

-芳基包括(C_6-18)芳基，如苯基，和(C_6-18)芳基，例如与具有5或6个环成员和1至4个选自N、O、S的杂原子的杂环基稠合的苯基；

-杂环基包括具有5或6个环成员和1至4个选自N、O、S、优选N、O的杂原子的杂环基，如脂环族和芳族杂环基，例如具有6个环成员和1至2个选自N、O、S的杂原子的杂环基，例如吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基；呋喃基，如呋喃-2-基，例如3-甲基呋喃-2-基、5-溴呋喃-2-基，或呋喃-3-基，例如2-甲基呋喃-3-基、2，5-二甲基呋喃-3-基、2-甲基-5-叔丁基-呋喃-3-基；四氢呋喃基，如四氢呋喃-2-基；噻吩基，如噻吩-2-基；异噁唑基，如异噁唑-5-基；未取代的或取代的5至8元脂环族或芳族环系包括(C_5-6)元环系，例如环己基或苯基，任选地与5至8元脂环族或芳族环系稠合，例如与未取代的或取代的苯基稠合。

式(I)化合物优选选自下组：

-5-(3-氯-苯基硫基甲基)-2-甲基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(3，4-二氯-苯基硫基甲基)-2-甲基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2-溴-苯基硫基甲基)-2-甲基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2-氟-苯基硫基甲基)-2-甲基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(3-氟-苯基硫基甲基)-2-甲基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(3，4-二氟-苯基硫基甲基)-2-甲基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-甲基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-苄基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-叔丁基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-苯基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-3-苯基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-(1-苯基-丙基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-环丙基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-异丙基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-(2-甲基)-苯基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-甲氧基甲基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-3-氰基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-甲基-3-氰基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-甲硫基-3-氰基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-3-苄基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-(3-氯-4-氨基磺酰基)-苯基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-(3-氯-苯基)-3-甲硫基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-(2，4-二氯-苯基)-3-甲硫基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-(3，4-二甲氧基-苯基)-3-苯基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-吡啶-2-基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-吡啶-3-基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-吡啶-4-基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-噻吩-2-基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-呋喃-2-基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-2-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-嘧啶并[1，2-b]吲唑-4-醇

-8-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-3-甲氧基-5，6-二氢-7，10a，11-三氮杂-苯并[a]芴-10-醇

-2-(5-叔丁基-2-甲基-呋喃-3-基)-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-(四氢-呋喃-2-基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-(3-氟-苯基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-2-(2，6-二氯-苯基)-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-2-(3-氯-苯基)-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-(3-甲基-呋喃-2-基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-呋喃-3-基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-异噁唑-5-基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-2-环戊基-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-(2，5-二甲基-呋喃-3-基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-2-(3，5-二氯-苯基)-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-2-环己基甲基-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-(2-三氟甲基-苯基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-(3-三氟甲基-苯基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-三氟甲基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-(1-甲氧基-乙基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-2-(2，3-二氯-苄基)-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-2-(5-溴-呋喃-2-基)-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-(2-甲基-呋喃-3-基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇和

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-2，7-二醇。

游离或药学上可接受盐形式的式(I)化合物在下文被替代性地称为本发明化合物。

本发明化合物可以以异构体和其混合物的形式存在；例如旋光异构体、非对映异构体、顺式/反式异构体。本发明化合物可例如包含不对称碳原子，因此可以以对映体或非对映体和其混合物的形式、例如外消旋物存在。在任何不对称碳原子上的取代基可以以(R)-、(S)-或(R，S)-构型、优选以(R)-或(S)-构型存在。例如在本发明化合物存在脂族双键的情况下，顺式/反式异构体可存在。异构体混合物可例如根据、例如类似于常规的方法适当分离以获得纯异构体。本发明包括任何异构形式和任何异构混合物的本发明化合物。

本发明还包括本发明化合物的互变异构体，例如本发明化合物可以以下列形式存在：

本文所述的任何化合物如本发明化合物可例如根据、例如类似于常规的或如本文详细说明的方法适当制备。原料是已知的或可根据、例如类似于常规或如本文所述的方法制备。

另一方面，本发明提供了用于制备本发明化合物的方法，包括将式(A)化合物

其中R₁、R₂和R₃如上定义，

与式(B)化合物

HS-R₄(B)

其中R₄如上定义，

在适宜的条件下、例如在K₂CO₃存在下、在DMF中反应，以获得本发明的式(I)化合物；或者

将下式化合物

其中R₁和R₂如上定义，

与下式化合物

其中R₃和R₄如上定义，

在适宜的条件下、例如在乙酸中、70℃、4小时反应，以获得本发明的式(I)化合物。

由此所得的式(I)化合物可转化成另一种式(I)化合物，例如或以游离形式获得的式(I)化合物可转化成式(I)化合物的盐，反之亦然。

本发明化合物可用作药物。

因此，本发明还提供了作为药物使用的游离或药学上可接受盐形式的式(I)化合物。

另一方面，本发明提供了其中所述取代基如上所定义的式(I)化合物作为药物的用途。

本发明化合物起CXCR2受体拮抗剂的作用，因此抑制炎症细胞、特别是嗜中性粒细胞、单核细胞和CD8+T细胞和涉及慢性阻塞性肺疾病(COPD)的介体的浸润和活化。因此，本发明化合物提供了症状缓解并减轻了疾病进展。

患有COPD对象的气道显示主要是嗜中性的炎症应答。当气道暴露于香烟气雾时，巨噬细胞、CD8+T细胞和上皮细胞被活化，释放促炎症介质、氧化剂、细胞因子和嗜中性粒细胞趋化因子、IL-8、GROα、ENA-78和白细胞三烯。IL-8、GROα和ENA-78是嗜中性粒细胞的选择性化学引诱物。在人嗜中性粒细胞中，IL-8以相似亲和力结合两种不同受体，CXCR1和CXCR2。包括GROα、β、γ、NAP-2和ENA-78的紧密相关的趋化因子仅与CXCR2结合。因此，抑制嗜中性粒细胞募集是可被认可的用于治疗数种肺疾病的治疗策略。阻断IL-8、GROα和ENA-78与趋化因子受体CXCR2的结合可通过抑制关键炎症细胞的浸润和活化而在患有COPD的患者中提供有益的效果，因此减轻了随后的组织损伤、粘液分泌、气流阻塞和疾病进展。

本发明化合物的IL-8和GROα趋化因子抑制性质可在下列测定中证明：

受体结合测定法

[¹²⁵I]IL-8(人重组体)得自Amersham Pharmacia Biotech，其比活性为2000Ci/mmol。所有其他化学品为分析级。中国仓鼠卵巢细胞(CHO-K1)中表达的人重组体CXCR2受体购自Euroscreen。中国仓鼠卵巢膜根据由Euroscreen提供的实验方案制备。膜蛋白浓度使用Bio-Rad蛋白测定法确定。根据White等人，J Biol Chem.，1998，273，10095中所述的方法，在96孔微孔板中进行测定。每一反应混合物在含有1.2mM MgSO₄、0.1mMEDTA、25mM NaCl和0.03％CHAPS的20mM pH 8.0的Bis-Tris-丙烷中包含0.05mg/ml CXCR2膜蛋白。此外，加入预溶解于二甲基亚砜(DMSO)中以便达到10μM至0.0005μM的终浓度(DMSO的终浓度为2％(v/v))的有关化合物。加入0.02nM¹²⁵I-IL-8，引发结合。在室温2小时后，使用BrandellTM 96孔收集器将板收集到玻璃纤维滤板上(GF/c)，该滤板用1％聚乙烯亚胺+0.5％BSA阻断且用25mM NaCl、10mM TrisHCl、1mMMgSO₄、0.5mM EDTA、0.03％CHADS pH 7.4洗涤3次。将滤器在50℃干燥过夜。将背封(Backseal)应用到板上，加入50μl液体闪烁液。在PackardTopcount^TM闪烁计数器上测量计数。

使用SPA技术的人CXCR2受体的[ ³⁵ S]-GTPγS结合测定法

[³⁵S]-GTPγS(比活性为1082Ci/mmol)和麦胚凝集素聚乙烯甲苯闪烁亲近珠购自Amersham Pharmacia Biotech。表达人CXCR2受体的中国仓鼠卵巢细胞(CHO-K1)膜购自Biosignal Packard Inc。所有其他化学品为分析级。白色非结合表面96孔Optiplate^TM微孔板得自Packard。如前所述(Lindley I等人，Proc.Natl.Acad.Sci.，1988，85(23)：9199)，在大肠杆菌(Escherichia coli)中合成、克隆并表达重组体人IL-8。

测定以每孔250μl的终体积在96孔Optiplate^TM微孔板中进行，一式两份。将化合物在DMSO(0.5％终浓度)中稀释，在含有10mM MgCl₂、100mM NaCl、1mM EDTA的20mM HEPES缓冲液pH 7.4中和每孔100nM IL-8、50μM GDP、500pM[³⁵S]GTPγS中孵育。将SPA珠(1mg/孔终浓度)与膜在测定缓冲液即含有10mM MgCl₂、100mM NaCl、1mMEDTA的20mM HEPES缓冲液pH 7.4中预混合(10μg/孔终浓度)。将珠膜混合物加入到每孔中，将板密封，在室温孵育60分钟。将板离心，在PackardTopCount^TM闪烁计数器上读数，设定[³⁵S dpm]为1分钟/孔。数据表示为减去基线的对100nM IL-8的％响应。

趋化性测定

这些化合物的体外抑制性质在嗜中性粒细胞趋化性测定法中确定。根据之前公开的方法(Frevert CW等人，JImmunolog.Methods，1998，213，41)，在96孔板中进行测定。96孔趋化性室5μm得自Neuro Probe，所有细胞缓冲液得自英国Invitrogen Paisley，葡聚糖-T500和Ficoll-PaquePlusTM密度梯度离心介质购自英国Pharmacia Biotech Buckinghamshire。钙黄绿素(calcein)-AM染料得自Molecular Probes。如前所述(Haslett，C.，等人Am J Path.，1985，119：101)，分离嗜中性粒细胞。将经柠檬酸盐处理的全血与4％(w/v)葡聚糖-T500混合，放置在冰上30分钟以除去红细胞。将15ml细胞悬液用15ml Ficoll-Paque PLUS密度梯度分层，以250xg离心25分钟，将粒细胞(PMN)从外周血单核细胞中分离。离心后，PMN沉淀的任何红细胞污染通过使用10ml冰冷的不含内毒素的无菌水低渗休克裂解50秒而除去，用10ml冷的2×磷酸盐缓冲盐水中和。经分离的嗜中性粒细胞(1×10⁷)用荧光染料钙黄绿素-AM(5μg)、以总体积1ml标记，在37℃孵育30分钟。标记的细胞用不含酚红+0.1％牛血清白蛋白的RPMI洗涤，在使用之前将细胞计数，将终浓度调节至5×10⁶细胞/ml。然后将标记的嗜中性粒细胞与用DMSO(0.1％终浓度)稀释的测试化合物(0.001-1000nM)混合，在室温孵育10分钟。将化学引诱物(29μl)放置在96孔趋化性室的底部，浓度在0.1-5nM之间。将聚碳酸酯滤器(5μm)覆盖在板上，将细胞(25μl)荷载在滤器上部。在37℃，使细胞在含有5％CO₂的加湿孵育箱中迁移90分钟。在孵育期结束时，使用多孔荧光板读数器(Fluroskan II^TM，Labsystems)在485nm激发波长和538nm发射波长定量迁移的细胞。使用4个不同的供体一式四份测试每种化合物。将阳性对照细胞即还未用化合物处理的细胞加至底部孔。这些代表细胞的最大趋化性反应。将阴性对照细胞即还未被化学引诱物激发的那些加入到底部室。阳性对照和阴性对照之间的差异代表细胞的趋化活性。

在[³⁵S]-GTPγS结合测定法中，本文下述实施例的化合物通常具有小于2μM的IC₅₀值。例如，实施例32和7的化合物分别具有1.9μM和561nM的IC₅₀值。

鉴于它们抑制CXCR2的结合，本发明化合物可用于治疗由CXCR2介导的病症或疾病，例如炎症性或过敏性病症或疾病，特别是慢性阻塞性肺气道疾病或慢性阻塞性肺疾病(COPD、COAD或COLD)，包括慢性支气管炎或与其相关的呼吸困难、肺气肿、闭塞性细支气管炎综合征和重度哮喘。

本发明化合物进一步了用于治疗各种疾病，如癌症，例如卵巢癌、前列腺癌、黑素瘤、包括转移性黑素瘤、肺癌如非小细胞肺癌、肾细胞癌；肿瘤血管发生、缺血/再灌注损伤、移植物功能延迟(delayed graft function)、骨关节炎、伴有骨髓纤维化的髓样化生(myeloid metaplasia)、子宫内膜异位、接触超敏性(皮肤)以及创伤愈合。

根据本发明的治疗可以是症状性的或预防性的。

在治疗慢性支气管炎或COPD中的预防效能可通过下降的频率或严重度、提供症状缓解和减轻疾病进展、改善肺功能来证明。它可进一步通过对其他对症治疗、即用于或意欲用于限制或中止发生时的症状发作的治疗、例如抗炎(例如皮质类固醇)或支气管扩张治疗的需求减少来证明。

本发明可适用的其他炎症性或阻塞性气道疾病和病症包括急性肺损伤(ALI)、急性/成人呼吸窘迫综合征(ARDS)、特发性肺纤维化、纤维化肺、气道高反应性、呼吸困难、肺纤维化、过敏性气道炎症、小气道疾病、肺癌、患有镰状细胞病和肺动脉高压的患者的急性胸部综合征(acute chestsyndrome)以及继发于其他药物治疗、特别是其他吸入性药物治疗的气道高反应性恶化。本发明也可用于治疗无论何种类型或起源的支气管炎，例如包括急性、花生仁吸入性、卡他性、格鲁布性、慢性或结核性支气管炎。本发明适用的其他炎性或阻塞性气道疾病包括无论何种类型或起源的尘肺病(炎性、通常为职业性肺疾病，经常伴有气道阻塞，慢性或急性均可，由反复吸入粉尘引起)，例如包括矾土肺、炭肺、石棉肺、石末肺、驼鸟毛尘肺、铁尘肺、硅肺、烟尘肺(tobacosis)和棉屑肺。

本发明化合物还可用于治疗呼吸道病毒感染，其加重潜在的慢性病症如哮喘、慢性支气管炎、COPD、中耳炎和鼻窦炎。所治疗的呼吸道病毒感染可与二次细菌感染如中耳炎、鼻窦炎或肺炎相关。

本发明化合物还可用于治疗皮肤的炎性病症，例如银屑病、特应性皮炎、红斑狼疮和皮肤的其他炎性或过敏性病症。

本发明活性剂也可用于治疗其他疾病或病症，特别是具有炎性因素的疾病或病症，例如影响鼻子的疾病，例如萎缩性鼻炎、慢性鼻炎或季节性鼻炎；胃肠道的炎性病症，例如炎性肠病如溃疡性结肠炎和局限性回肠炎；骨与关节疾病，包括类风湿性关节炎、银屑病关节炎；以及其他疾病如动脉粥样硬化、多发性硬化和急性与慢性同种异体移植排斥，例如在心、肾、肝、肺或骨髓移植后。

本发明化合物还可用于治疗内毒素性休克、肾小球性肾炎、脑和心缺血、阿尔茨海默病、囊性纤维化、病毒感染和与这些相关的恶化、获得性免疫缺陷综合征(AIDS)、多发性硬化症(MS)、幽门螺旋杆菌(Helicobacterpylori)相关性胃炎和癌症、特别是卵巢癌的生长。

本发明化合物还可用于治疗人中由病毒感染引起的症状，所述病毒感染由人鼻病毒、其他肠道病毒、冠状病毒、疱疹病毒、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒或腺病毒引起。

本发明化合物还可用于治疗疾病如胰腺炎、贝赫切特病和与反应性胆小管相关的肝胆管疾病，如慢性病毒性肝炎、肝硬化、脓毒症、肝外胆管梗阻、暴发性肝炎、原发性胆汁性肝硬化和原发性硬化性胆管炎(primarysclerosing cholangitis)。

本发明化合物在抑制炎性病症如炎性气道疾病中的有效性可在气道炎症或其他炎性病症的动物模型如小鼠、大鼠或兔模型中证明，例如Wada等人，J.Exp.Med(1994)180：1135-40；Sekido等人，Nature(1993)365：654-57；Modelska等人，Am.J.Respir.Crit.Care.Med(1999)160：1450-56；和Laffon等人(1999)Am.J.Respir.Crit.Care Med.160：1443-49所述。

本发明化合物还可用作共治疗化合物，用于与其他药物组合，如抗炎药、支气管扩张剂、抗组胺药或镇咳药，特别用于治疗阻塞性或炎性气道疾病如上文提及的那些，例如作为这类药物治疗活性的强化剂或者作为减少这类药物的所需剂量或潜在副作用的手段。本发明化合物可以与其他药物物质混合在固定的药物组合物中，或者它可以与其他药物物质分开、之前、同时或之后施用。因此，本发明包括上文所述的本发明化合物与抗炎药、支气管扩张剂、抗组胺药或镇咳药的组合，所述本发明化合物和所述药物在相同或不同的药物组合物中。

适合的抗炎药包括类固醇，特别是糖皮质类固醇，例如布地奈德、倍氯米松二丙酸酯、丙酸氟地松、环缩松或糠酸莫美他松，或者如下文献所述类固醇：WO 02/88167、WO 02/12266、WO 02/100879、WO 02/00679(尤其实施例3、11、14、17、19、26、34、37、39、51、60、67、72、73、90、99和101的那些)、WO 03/35668、WO 03/48181、WO 03/62259、WO03/64445、WO 03/72592、WO 04/39827和WO 04/66920；非甾类糖皮质激素受体激动剂，例如如下文献所述那些：DE 10261874、WO 00/00531、WO 02/10143、WO 03/82280、WO 03/82787、WO 03/86294、WO 03/104195、WO 03/101932、WO 04/05229、WO 04/18429、WO 04/19935和WO04/26248；LTD4拮抗剂，如包括孟鲁司特和扎鲁司特；PDE4抑制剂，例如cilomilast(

GlaxoSmithKline)、Roflumilast(Byk Gulden)、V-11294A(Napp)、BAY19-8004(Bayer)、SCH-351591(Schering-Plough)、Arofylline (Almirall Prodesfarma)、PD189659/PD168787(Parke-Davis)、AWD-12-281(Asta Medica)、CDC-801(Celgene)、SelCID(TM)CC-10004(Celgene)、VM554/UM565(Vernalis)、T-440(Tanabe)、KW-4490(KyowaHakko Kogyo)和公开在如下文献中的那些：WO 92/19594、WO 93/19749、WO 93/19750、WO 93/19751、WO 98/18796、WO 99/16766、WO 01/13953、WO 03/104204、WO 03/104205、WO 03/39544、WO 04/000814、WO04/000839、WO 04/005258、WO 04/018450、WO 04/018451、WO 04/018457、WO 04/018465、WO 04/018431、WO 04/018449、WO 04/018450、WO04/018451、WO 04/018457、WO 04/018465、WO 04/019944、WO 04/019945、WO 04/045607和WO 04/037805；A_2A激动剂如在以下文献中描述的那些：EP 1052264、EP 1241176、EP 409595A2、WO 94/17090、WO 96/02543、WO 96/02553、WO 98/28319、WO 99/24449、WO 99/24450、WO 99/24451、WO 99/38877、WO 99/41267、WO 99/67263、WO 99/67264、WO 99/67265、WO 99/67266、WO 00/23457、WO 00/77018、WO 00/78774、WO 01/23399、WO 01/27130、WO 01/27131、WO 01/60835、WO 01/94368、WO 02/00676、WO 02/22630、WO 02/96462和WO 03/086408；和A2B拮抗剂，如在WO02/42298中所述的那些。

适合的支气管扩张药包括抗胆碱能或抗毒蕈碱化合物，特别是异丙托溴铵(opratropium bromide)、氧托溴铵(oxitropium bromide)、噻托铵(tiotropium)盐和CHF 4226(Chiesi)，和格隆溴铵，以及如下文献所述那些：EP 424021、US 3714357、US 5171744、WO 01/04118、WO 02/00652、WO 02/51841、WO 02/53564、WO 03/00840、WO 03/33495、WO 03/53966、WO 03/87094、WO 04/018422和WO 04/05285；和β-2肾上腺受体激动剂，例如阿布叔醇(沙丁胺醇)、奥西那林、特布他林、沙美特罗、非诺特罗、丙卡特罗，尤其福莫特罗、卡莫特罗(carmoterol)及其药学上可接受的盐，和引用在此作为参考的WO 00/75114的式I化合物(游离或者盐或溶剂化物形式)，优选其实施例化合物，尤其下式化合物：

及其药学可接受的盐，以及WO 04/16601的式(I)化合物(游离或盐或溶剂合物形式)，还有EP 1440966、JP 05025045、WO 93/18007、WO 99/64035、US 2002/0055651、WO 01/42193、WO 01/83462、WO 02/66422、WO 02/70490、WO 02/76933、WO 03/24439、WO 03/42160、WO 03/42164、WO03/72539、WO 03/91204、WO 03/99764、WO 04/16578、WO 04/22547、WO04/32921、WO 04/33412、WO 04/37768、WO 04/37773、WO 04/37807、WO 04/39762、WO 04/39766、WO 04/45618、WO 04/46083和WO 04/80964的化合物。

这些抗组胺药包括盐酸西替利嗪、对乙酰氢基酚、富马酸氯马斯汀、异丙嗪、氯雷他定、地氯雷他定(desloratidine)、苯海拉明和盐酸非索那定。

还可使用本发明化合物与抗胆碱能或抗毒蕈碱化合物、类固醇、β-2激动剂、PDE4抑制剂、多巴胺受体激动剂、LTD4拮抗剂或LTB4拮抗剂的组合。本发明化合物与抗炎药的其他有用的组合是与下述组合的那些：趋化因子受体如CCR-1、CCR-3、CCR-4、CCR-5、CCR-6、CCR-7、CCR-8、CCR-9和CCR10、CXCR1、CXCR2、CXCR3、CXCR4、CXCR5的其他拮抗剂，特别是CCR-5拮抗剂，如Schering-Plough拮抗剂SC-351125、SCH-55700和SCH-D、Takeda拮抗剂如N-[[4-[[[6，7-二氢-2-(4-甲基苯基)-5H-苯并环庚烯-8-基]羰基]氨基]苯基]-甲基]-四氢-N，N-二甲基-2H-吡喃-4-氯化铵(TAK-770)、US 6166037(特别是权利要求18和19)、WO0066558(特别是权利要求8)和WO 0066559(特别是权利要求9)中所述的CCR-5拮抗剂。

根据前述，本发明还提供了用于治疗治疗由CXCR2介导的病症或疾病如炎症性或过敏性病症、特别是治疗炎症性或阻塞性气道疾病的方法，所述方法包括对有需要的对象、特别是人施用有效量的上文所述的游离或药学上可接受盐形式的式(I)化合物。

另一方面，本发明提供了上文所述的游离或药学上可接受盐形式的式(I)化合物在制备药物、例如用于治疗由CXCR2介导的病症或疾病如炎性或过敏性病症或疾病、特别是治疗炎性或阻塞性气道疾病的药物中的用途。

本发明化合物可以借助任意适当的途径施用，例如口服，例如片剂或胶囊的形式；肠胃外，例如静脉内；吸入，例如在炎性或阻塞性气道疾病的治疗中；鼻内，例如在变应性鼻炎的治疗中；皮肤局部，例如在特应性皮炎的治疗中；或者直肠，例如在炎性肠疾病的治疗中。

进一方面，本发明也提供药物组合物，包含作为活性成分的式I化合物的游离形式或者药学上可接受的盐形式，可选地以及药学上可接受的稀释剂或载体。组合物可以含有共治疗化合物，例如上述抗炎、支气管扩张、抗组胺或镇咳药。这类组合物可以利用常规稀释剂或赋形剂和盖仑制剂领域已知的技术制备。因而，口服剂型可以包括片剂和胶囊。局部给药制剂可以采取霜剂、软膏、凝胶或透皮递送系统、例如贴剂的形式。吸入组合物可以包含气雾剂或者其他可雾化的制剂或干粉制剂。

当组合物构成气雾剂时，它优选地含有例如氢氟烷烃(HFA)推进剂，例如HFA134a或HFA227或者这些的混合物，且可以含有一种或多种本领域已知的助溶剂，例如乙醇(至多20重量％)，和/或一种或多种表面活性剂，例如油酸或脱水山梨醇三油酸酯，和/或一种或多种填充剂，例如乳糖。当组合物构成干粉制剂时，它优选地含有例如粒径至多10微米的式I化合物，可选地以及所需粒径分布的稀释剂或载体如乳糖，和帮助保护产品性能不因水分受破坏的化合物如硬脂酸镁。当组合物构成雾化制剂时，它优选地含有例如溶解或悬浮在载体中的式I化合物，所述载体含有水、助溶剂如乙醇或丙二醇和稳定剂，其可以是表面活性剂。

本发明包括(A)本发明化合物的可吸入形式，例如气雾剂或其他可雾化组合物或者可吸入的微粒、例如微粉化形式；(B)可吸入的药物，包含本发明化合物的可吸入形式；(C)药物产品，包含本发明化合物的可吸入形式以及可吸入的装置；和(D)吸入装置，含有本发明化合物的可吸入形式。

当然，实施本发明所用的本发明化合物的剂量将随例如待治疗的具体病症、期望的效果和施用模式而变化。一般而言，通过吸入施用的适宜的日剂量为每天0.01至1mg/kg的级别，而对于口服施用，适宜的日剂量为0.005至100mg/kg总体重的级别。胃肠外的日剂量方案为约0.001至约80mg/kg总体重。局部日剂量方案可优选为0.1mg至150mg，每天施用1至4次，优选2至3次。

在下述实施例中，所有温度以摄氏温度表示(°)。

示例化合物的表征数据的一般条件：质谱使用电喷射离子化、在OpenAccess Waters 600/ZQ HPLC/质谱仪系统上运行。[M+H]⁺是指单同位素分子量。

使用下列缩写：

ACN 乙腈

AcOH 乙酸

CH₂Cl₂ 氯仿

DABCO 1，4-重氮二环[2.2.2]辛烷

DMF N，N-二甲基甲酰胺

EtOAc 乙酸乙酯

EtOH 乙醇

Et₂O 二乙醚

MeOH 甲醇

RT 室温

TBME 叔丁基甲基醚

THF 四氢呋喃

实施例

实施例1：

5-(3-氯-苯基硫基甲基)-2-甲基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

将73mg 3-氯苯硫酚和50mg K₂CO₃加至100mg 5-氯甲基-2-甲基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇在2.5ml DMF中的搅拌的分散体中。将所得反应混合物在室温搅拌16小时，加至H₂O中。过滤收集所得沉淀。获得标题化合物。[M+H]⁺306.0。

使用合适的硫醇，以与实施例1类似的方法制备实施例2至7。

实施例8：

2-苄基-5-(2，3-二氟苯基硫基甲基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

a)3-氧代-4-苯基-丁腈

于-78℃、氩气下，将正丁基锂(1.6M在己烷中)加至0.2g氰基乙酸和1mg 2，2’-联吡啶在15ml无水THF中的溶液中，直到粉红色持续。将所得反应混合物加热至-10℃，加入另外的正丁基锂，直到粉红色再次持续。将所得混合物冷却至-78℃。逐滴加入0.18g苯基酰氯，将所得反应混合物在-78℃搅拌1小时，然后升温到室温，用10％NH₄Cl溶液淬灭。所得反应混合物用20ml乙醚稀释，用20ml饱和NaHCO₃溶液和H₂O洗涤。将所得溶液干燥，过滤，浓缩。可进行用EtOAc∶异己烷(20-50％)的硅胶柱色谱法纯化。获得3-氧代-4-苯基-丁腈。

b)5-苄基-2H-吡唑-3-基胺

将0.04g 3-氧代-4-苯基-丁腈和0.013g一水合肼在乙醇中的溶液在90℃加热4小时，浓缩。可进行用ACN∶CH₂Cl₂(15％)、之后MeOH∶CH₂Cl₂(15-30％)的硅胶柱色谱法纯化。获得5-苄基-2H-吡唑-3-基胺。

c)2-苄基-5-(2，3-二氟苯基硫基甲基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

将0.02g 5-苄基-2H-吡唑-3-基胺和0.03g 4-(2，3-二氟-苯基硫基)-3-氧代-丁酸甲酯(中间体A)在1ml乙酸中的溶液在70℃加热4小时。冷却后，将所得混合物用10ml EtOAc稀释，用H₂O、盐水洗涤，干燥。过滤所得残余物，蒸发溶剂。将所得产物与Et₂O在室温搅拌16小时。滤出所得沉淀，干燥。获得标题化合物。[M+H]⁺：384。

使用合适的原料，以实施例8的方法制备实施例9至35。

实施例36：5-(2，3-二氟-苄基硫基)-2-乙基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

将52mg 4-(2，3-二氟-苯基硫基)-3-氧代-丁酸甲酯(中间体A)和20mg 5-乙基-1H-吡唑-3-基胺在0.8ml冰醋酸中的混合物在120℃加热4小时。在冷却至室温期间，产物从所得溶液中结晶。滤出所得沉淀，用Et₂O洗涤，干燥。获得标题化合物。

表1所示的实施例37至55的化合物类似于实施例36、使用合适的原料(中间体D至F)制备。使用乙酸、在范围为80℃至120℃的反应温度进行反应，反应时间为1.25小时至4小时。可通过常规技术进行纯化。

表1：

实施例56-57：

使用CHIRALPAK AS柱(20μm，5×50cm；溶剂：正己烷/EtOH 3∶2；流速：80ml min^-1；在210nm UV检测)、通过手性HPLC将100mg外消旋-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-(四氢-呋喃-2-基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇(实施例37)手性制备型HPLC分离成其对映体，提供：

实施例56：

(+)-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-(四氢-呋喃-2-基)吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

粉末(42mg)；[α]³⁶⁵ ₂₂＝+106°，c＝0.1(MeOH)，手性HPLC：t_R＝4.27分钟，ee＞99.9％(分析条件：CHIRALPAK AS 10μm(0.46×25cm)；溶剂：正己烷/EtOH 3∶7；流速：1ml min^-1；检测：UV 210nm)。[M+H]⁺364。

实施例57：

(-)-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-(四氢-呋喃-2-基)吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

粉末(46mg)；[α]³⁶⁵ ₂₂＝-102.5°，c＝0.1(MeOH)，手性HPLC：t_R＝8.69分钟，ee＞99.5％(分析条件：CHIRALPAK AS 10μm(0.46×25cm)；溶剂：正己烷/EtOH 3∶7；流速：1m1min^-1；检测：UV 210nm)。[M+H]⁺364。

实施例58：5-(2-溴-苯基硫基甲基)-2-甲基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

将40.5mg K₂CO₃加至100mg 5-(氯甲基)-2-甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇和95.6mg 2-溴硫代苯酚在2ml DMF中的搅拌的悬液。将所得反应混合物搅拌过夜，加入30mlH₂O，过滤收集所得沉淀，干燥。获得标题化合物。[M+H]⁺350。

实施例59：2-呋喃-2-基-5-(吡啶-4-基硫基甲基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

将55.4mg细粉状无水K₂CO₃加至20mg 5-氯甲基-2-呋喃-2-基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇(中间体G)和9mg吡啶-4-硫醇在300μl干DMF中的溶液。将所得反应混合物在100℃加热2小时，加入1.5ml冰醋酸。将所得反应混合物放置15分钟。蒸发溶剂，将5ml H₂O加至所得残余物中，过滤收集所得沉淀，用Et₂O洗涤，干燥。获得标题化合物。[M+H]⁺325。

实施例60：

2-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-7，8，9，10-四氢-嘧啶并[1，2-b]吲唑-4-醇

使用合适的原料(中间体H)，类似于实施例36制备此化合物。[M+H]⁺348。

实施例61：5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-1H，3H-2-硫杂-4，7a，8-三氮杂-环戊二烯并[a]茚-7-醇

使用合适的原料(中间体I)，类似于实施例36制备此化合物。[M+H]⁺352。

中间体的制备：

中间体A：4-(2，3-二氟-苯基硫基)-3-氧代-丁酸甲酯

在室温、惰性气氛下将308mg固体Na分批加至20ml无水MeOH中。在所有Na溶解后，将所得反应混合物冷却至0℃，用2.22g 4-氯乙酰乙酸盐/酯和1.96g 2，3-二氟-苯硫酚(中间体B)处理。将所得反应混合物升温至室温，搅拌过夜。蒸发溶剂，将所得残余物溶解于EtOAc，用饱和NH₄Cl溶液洗涤。将所得有机部分干燥，过滤，浓缩。粗残余物通过快速色谱法纯化，使用异己烷∶EtOAc(3∶1)洗脱。获得标题化合物。

中间体B：2，3-二氟-苯硫酚

步骤1：二甲基-硫代氨基甲酸O-(2，3-二氟-苯基)酯

在氩气惰性气氛下，用14.45g DABCO和12g二甲基硫代氨基甲酰氯处理8.39g 2，3-二氟苯酚在100ml无水DMF中的溶液。将所得反应混合物在35℃加热30分钟，在75℃加热4小时。将所得反应混合物冷却至室温，用200ml H₂O稀释，在室温搅拌48小时。过滤收集所得沉淀，用H₂O洗涤，干燥。获得标题化合物。

步骤2：二甲基-硫代氨基甲酸S-(2，3-二氟-苯基)酯

将5.55g二甲基-硫代氨基甲酸O-(2，3-二氟-苯基)酯、20ml

A(25.6％联苯+73.5％二苯醚的低共溶混合物)和70mg K₂CO₃混合，在250℃加热3.5小时。冷却至室温后，通过硅胶快速色谱法纯化所得反应混合物，先用异己烷洗脱以除去dowtherm、然后将梯度增加至异己烷∶EtOAc(3∶1)。将适合的部分合并，浓缩，干燥。获得标题化合物。

步骤3：2，3-二氟-苯硫酚

在氩气惰性气氛下，将620mg固体Na分批加至90ml无水MeOH中，得到NaOMe溶液。用9ml MeOH中的3.8g二甲基-硫代氨基甲酸S-(2，3-二氟-苯基)酯处理所得溶液，将所得反应混合物回流加热3小时。冷却至室温后，将所得反应混合物搅拌过夜16小时，蒸发溶剂，将所得残余物用Et₂O稀释，用2M HCl洗涤2次。将所得有机部分干燥，过滤，浓缩。获得标题化合物。

中间体C：N-(2，3-二氯-苯基)-1H-吡唑-3，5-二胺

由市售可得的异硫氰酸2，3-二氯苯酯，类似于A.D.Grabenko，P.S.Pel’kis，L.N.Kulaeva，Zh.Obshchei.Khim.1962，32，2248和A.D.Grabenko，L.N.Kulaeva，P.S.Pel’kis，Khim.Geterosikl.Soedin.1967，713中所述的方法以2步法制备此化合物。

中间体D1：5-(2，6-二氯-苯基)-2H-吡唑-3-基胺

步骤1：3-(2，6-二氯-苯基)-3-氧代-丙腈

将773mg干氰基乙酸盐/酯在50ml干THF中的溶液在干冰/丙酮浴中冷却，以使内部温度保持低于-20℃的速率加入11.3ml 1.6M丁基锂的己烷溶液。在-50℃，加入0.66ml 2，6-二氯苯甲酰氯在1.5ml干THF中的溶液。将所得悬液升温至室温，再搅拌1.5小时，然后用10ml 2M HCl淬灭。蒸发溶剂，用10ml TBME洗涤所得蒸发残余物3次。用2M HCl、H₂O、饱和NaHCO₃和盐水洗涤合并的有机萃取液，干燥，浓缩。粗残余物的纯化可通过用己烷/TBME(60％至80％TBME)洗脱的硅胶快速色谱法进行。获得标题化合物。

步骤2：5-(2，6-二氯-苯基)-2H-吡唑-3-基胺

将308mg 3-(2，6-二氯苯基)-3-氧代-丙腈和0.71ml水合肼在6ml乙醇中的溶液回流6天。冷却至室温后，蒸发溶剂。粗残余物通过用MeOH/DCM(0至5％MeOH)洗脱的硅胶快速色谱法进一步纯化。获得标题化合物。

中间体D2-D6：

使用合适的原料，类似于中间体D1制备这些化合物，即

D2：5-(3-氯-苯基)-2H-吡唑-3-基胺

D3：5-(3-甲基-呋喃-2-基)-2H-吡唑-3-基胺

D4：5-呋喃-3-基-2H-吡唑-3-基胺

D5：5-(5-溴-呋喃-2-基)-2H-吡唑-3-基胺

D6：5-(2-甲基-呋喃-3-基)-2H-吡唑-3-基胺。

中间体E1：外消旋5-(1-甲氧基-乙基)-2H-吡唑-3-基胺

步骤1：外消旋4-甲氧基-3-氧代-戊腈

将16.91ml干二异丙胺在180ml无水THF中的溶液冷却至-20℃(干冰/丙酮浴)。在10分钟内加入71ml1.6M丁基锂的己烷溶液，将反应温度保持在-25℃至-20℃之间。在-20℃继续搅拌另外30分钟，将溶液冷却至-60℃，加入5.46ml干乙腈。形成锂盐的细微悬液，在-60℃继续搅拌30分钟。加入6.19g外消旋2-甲氧基丙酸甲酯在12ml THF中的溶液。在-60℃1小时后，移去冷却浴，使所得反应混合物达到-10℃。用20ml H₂O淬灭所得反应混合物，用22ml浓HCl调节至pH 2-3。加入50ml叔丁基甲基醚，有机层用H₂O洗涤2次，用盐水洗涤1次，干燥，过滤，浓缩。可进行粗残余物的纯化。获得标题化合物。

步骤2：外消旋3-氨基-5-(1-甲氧基乙基)-2H-吡唑

将2.17ml水合肼加至3.74g外消旋4-甲氧基-3-氧代-戊腈在75ml乙醇中的溶液中。将所得反应混合物回流17小时，蒸发溶剂。粗残余物通过用TBME/MeOH(0％至10％MeOH)洗脱的硅胶快速色谱法纯化，得到标题化合物。

中间体E2-E7：

使用合适的原料，类似于中间体E1制备这些化合物，即

E2：5-环戊基-2H-吡唑-3-基胺

E3：5-(2，5-二甲基-呋喃-3-基)-2H-吡唑-3-基胺

E4：5-环己基甲基-2H-吡唑-3-基胺

E5：5-三氟甲基-2H-吡唑-3-基胺

E6：5-(2，3-二氯-苄基)-2H-吡唑-3-基胺

E7：5-(四氢-呋喃-2-基)-2H-吡唑-3-基胺。

中间体F1：3-氨基-5-(2-三氟甲基苯基)-2H-吡唑

步骤1：3-氧代-3-(2-三氟甲基-苯基)-丙腈

将5.27ml干二异丙胺在100ml无水THF中的溶液冷却至-20℃(干冰/丙酮浴)，加入22ml 1.6M丁基锂的己烷溶液，将反应温度保持在-25℃至-20℃之间。在-20℃继续搅拌另外10分钟，将所得反应混合物冷却至-60℃，加入1.70ml干乙腈。在-20℃继续搅拌20分钟，加入2.4ml 2-三氟甲基苯甲酰氯在4.8ml THF中的溶液，在-60℃继续搅拌另外3小时。用50ml H₂O淬灭所得反应混合物，蒸发溶剂。所得水性残余物用25ml叔丁基甲基醚萃取3次，在10℃添加1.2ml 50％H₂SO₄调节pH至3。过滤收集所形成的沉淀，用H₂O洗涤，干燥。获得标题化合物。

步骤2：3-氨基-5-(2-三氟甲基苯基)-2H-吡唑

将2.47ml水合肼加至2.14g 3-氧代-3-(2-三氟甲基-苯基)-丙腈在20ml乙醇中的溶液。将所得反应混合物回流加热20小时，蒸发溶剂。粗残余物可通过用TBME/MeOH(0％至8％MeOH)洗脱的硅胶快速色谱法进行纯化。获得标题化合物。

中间体F2-F4：

使用合适的原料，类似于中间体F1制备这些化合物，即

F2：5-异噁唑-5-基-2H-吡唑-3-基胺

F3：5-(3，5-二氯-苯基)-2H-吡唑-3-基胺

F4：5-(3-三氟甲基-苯基)-2H-吡唑-3-基胺。

中间体G：5-氯甲基-2-呋喃-2-基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

将500mg 3-氨基-5-(2-呋喃基)吡唑和0.47ml 4-氯-3-氧代-丁酸乙酯在2.5ml冰醋酸中的悬液在80℃加热3小时。将所得反应混合物冷却至室温，用EtOAc稀释混合物，过滤收集沉淀，用EtOAc洗涤，干燥。获得标题化合物。

中间体H：4，5，6，7-四氢-2H-吲唑-3-基胺

根据S.Plescia等人，J.Heterocycl.Chem.1973，10，261制备此化合物。

中间体I：2，6-二氢-4H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-基胺

将993mg 4-氰基-3-四氢噻吩和0.58ml水合肼在20ml乙醇中的溶液回流4.5小时。蒸发溶剂，所得粗残余物可通过硅胶快速色谱法纯化，用TBME/MeOH(0％至20％MeOH)洗脱，之后从Et₂O中结晶，得到标题化合物。

Claims

1.式(I)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为药物的用途：

其中

R₁、R₂和R₃独立地是氢、(C_1-8)烷基、卤代(C_1-8)烷基、(C_3-8)环烷基、(C_3-8)环烷基(C_1-8)烷基、(C_1-4)烷氧基、(C_1-4)烷氧基(C_1-8)烷基、(C_1-8)烷基(C_1-4)烷氧基、氰基、(C_1-8)烷硫基、未取代的或取代的(C_6-18)芳基、未取代的或取代的(C_1-4)烷基(C_6-18)芳基、未取代的或取代的(C_6-18)芳基(C_1-4)烷基、含有5或6个环成员和1至4个选自N、O、S的杂原子的未取代的或取代的杂环基，或

R₁或R₂中一个是氧代基，另一个是氢，且R₃如上定义，或

R₁和R₂一起形成未取代的或取代的5至8元脂环族或芳族环系，该环系统任选地含有至少1个选自N、O、S的杂原子和/或任选地与5至8元脂环族或芳族环系稠合，且R₃如上定义，

R₄是未取代的(C_6-18)芳基或被下述基团单取代或多取代的(C_6-18)芳基：卤素、卤代(C_1-6)烷基、卤代(C_1-6)烷氧基、氰基、苯基、具有5至6个环成员和1至4个选自N、O、S的杂原子的杂环基；或含有5个或6个环成员和1至4个选自N、O、S的杂原子的未取代的或取代的杂环基。

2.权利要求1的式(I)化合物的用途，其中

R₁或R₂中一个是氧代基，另一个是氢，且R₃如上定义，或

3.权利要求1或2的式(I)化合物的用途，其中

R₁是氢、甲基、乙基、异丙基、叔丁基、三氟甲基、甲氧基、1-苯基丙基、环丙基、环戊基、环己基甲基、甲氧基甲基、1-甲氧基乙基、氰基、甲硫基、未取代的苯基；被甲基、三氟甲基、甲氧基、氯、氟或氨基磺酰基单取代或二取代的苯基；苄基、被氯二取代的苄基；未取代的或取代的吡啶基、噻吩基、呋喃基、四氢呋喃基、异噁唑基，

R₂是氢、甲硫基、氰基、苯基、苄基，或

R₁是氧代基，且R₂和R₃是氢，或

R₃是氢，

R₄是未取代的苯基，被氯、氟、溴单取代或二取代的苯基；或未取代的吡啶基。

4.权利要求1至3任一项的式(I)化合物与至少一种第二药物的组合的用途。

5.权利要求1至4任一项的式(I)化合物在制备用于治疗CXCR2受体介导的病症或疾病的药物中的用途。

6.权利要求5的式(I)化合物的用途，其中CXCR2受体介导的病症或疾病是炎症性或过敏性病症或疾病，特别是炎症性或阻塞性气道疾病。

7.用于预防或治疗CXCR2受体介导的病症或疾病的方法，包括对需要这种治疗的对象施用有效量的至少一种权利要求1至4任一项的式(I)化合物。

8.权利要求7的方法，其中的病症或疾病是炎症性或过敏性病症，特别是炎症性或阻塞性气道疾病。

9.式(I)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物：

其中

R₁或R₂中一个是氧代基，另一个是氢，且R₃如上定义，或

条件是，下列化合物除外：

-其中R₁是甲基、R₂和R₃是氢且R₄是苯基的式(I)化合物，

10.权利要求9的化合物，其选自下组：

-5-(3-氯-苯基硫基甲基)-2-甲基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(3，4-二氯-苯基硫基甲基)-2-甲基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2-溴-苯基硫基甲基)-2-甲基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2-氟-苯基硫基甲基)-2-甲基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(3-氟-苯基硫基甲基)-2-甲基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(3，4-二氟-苯基硫基甲基)-2-甲基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-甲基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-苄基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-叔丁基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-苯基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-3-苯基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-环丙基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-异丙基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-3-氰基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-3-苄基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-2-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-嘧啶并[1，2-b]吲唑-4-醇

-2-环戊基-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-2-(1-甲氧基-乙基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇-

-5-(2，3-二氟-苯基硫基甲基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-2，7-二醇。

11.权利要求9或10的式(I)化合物，其用作药物。

12.权利要求9或10的式(I)化合物，其用来制备用于治疗CXCR2受体介导的病症或疾病的药物。

13.权利要求9或10的式(I)化合物，其中CXCR2受体介导的病症或疾病是炎症性或过敏性病症或疾病，特别是炎症性或阻塞性气道疾病。

14.药物组合物，其包含权利要求9或10的式(I)化合物和至少一种药学上可接受的赋形剂。

15.权利要求14的药物组合物以及第二药学活性物质的组合。