CN101554386B

CN101554386B - 治疗肝病的药物组合物及其制备方法

Info

Publication number: CN101554386B
Application number: CN2008100644041A
Authority: CN
Inventors: 江卫世
Original assignee: Individual
Current assignee: Heilongjiang Jiang Shi Pharmaceutical Co ltd
Priority date: 2008-04-28
Filing date: 2008-04-28
Publication date: 2013-02-20
Anticipated expiration: 2028-04-28
Also published as: CN101554386A

Abstract

治疗肝病的药物组合物及其制备方法，我国利用动物的各种器官、组织及代谢产物进行治病、防病和医疗保健已有悠久的历史。治疗肝病的药物组合物，其组成包括：牛胎肝提取物、维生素B₁₂、肌醇及载体和赋形剂，其重量份数比为牛胎肝提取物20-60份、维生素B₁₂0.001-0.002份、肌醇10-40份。本发明用于急、慢性肝炎，肝纤维化，脂肪肝，肝硬化等症的辅助治疗。

Description

治疗肝病的药物组合物及其制备方法

技术领域：

本发明涉及一种治疗肝病的药物组合物及其制备方法。

背景技术：

我国利用动物的各种器官、组织及代谢产物进行治病、防病和医疗保健已有悠久的历史，如牛黄、犀角、鹿茸、阿胶等多种动物药物用来治疗疾病。

发明内容：

本发明的目的是提供一种治疗肝病的药物组合物及其制备方法，制备工艺简单、成本低、使用方便无刺激。

上述的目的通过以下的技术方案实现：

治疗肝病的药物组合物，其组成包括：牛胎肝提取物、维生素B₁₂、肌醇及载体和赋形剂，其重量份数比为牛胎肝提取物20-60份、维生素B₁₂0.001-0.002份、肌醇10-40份。

所述的治疗肝病的药物组合物，所述的载体和赋形剂为羟丙纤维素、淀粉、糊精、微晶纤维素、硬脂酸镁、乳糖。

治疗肝病的药物组合物的制备方法，取新鲜健康胎牛肝脏，用水洗净，搅碎，匀浆，经过细胞破碎，去沉渣，得提取液，将提取液浓缩或干燥，制成具有生物活性多肽的牛胎肝提取物浸膏或粉剂，然后按上述重量份数比与维生素B12、肌醇及一种或多种载体和赋形剂按照常规的制备方法制成药物组合物即可。

所述的治疗肝病的药物组合物的制备方法，所述的细胞破碎采用胶体磨粉碎法、或冻融法、或乳匀法、或超声法。

所述的治疗肝病的药物组合物的制备方法，所述的浓缩是将提取液浓缩至原重量的1/5～1/15，得牛胎肝提取物浸膏；所述的干燥为喷雾干燥或直接干燥，得牛胎肝提取物粉剂。

所述的治疗肝病的药物组合物的制备方法，所述的提取物具有生物活性多肽物质，所述的生物活性多肽物质与茚三酮试液反应，溶液显蓝紫色，在285nm波长处有最大吸收。

所述的治疗肝病的药物组合物的制备方法，所述的治疗肝病的药物组合物的剂型是胃肠道途径给药的剂型。

所述的治疗肝病的药物组合物的制备方法，所述的治疗肝病的药物组合物的剂型是片剂。

本发明的有益效果：

1.本发明制备工艺的细胞破碎工序破碎细胞细度达到5～30μm，能将胎牛肝脏完全破碎成为均一、分散的溶液，从而保证了制剂的均一、稳定及安全性。

2.采用本发明的制备方法中的低温热处理去除杂质蛋白，保障了从胎牛肝脏中提取全部有效的生物活性物质，提高了牛胎肝提取物制剂的纯度，从而减少了不良物质和降压物质的产生，保证了临床用药的安全性。

3.本发明采用现代生物提取技术从动物肝脏中提取肝源性肽类细胞因子，通过IGF1、FGF等细胞因子及肌醇的作用诱导肝细胞膜及线粒体膜的聚糖蛋白受体，提高ATP合成酶的活性，促进细胞对葡萄糖的摄取和利用，增加能量合成，可促进脂肪酸和载脂蛋白的结合并入血，减少肝内脂肪积聚，促进脂肪酸β-氧化，加速脂肪分解，可用于急、慢性肝炎，肝纤维化，脂肪肝，肝硬化等症的辅助治疗。

4.本发明制备工艺简单、使用方便无刺激性、稳定性好、成本低。

具体实施方式：

实施例1：

实施例2：

治疗肝病的药物组合物的制备方法，所述的药物组合物是由牛胎肝提取物与维生素B₁₂、肌醇及一种或多种医药上可接受的载体和赋形剂组成的，其中所述的牛胎肝提取物(以多肽量计)与维生素B₁₂、肌醇的重量份数分别为20-60份、0.001-0.002份、10-40份，牛胎肝提取物是健康牛的肝脏依次经过细胞破碎提取、浓缩或干燥所得到具有生物活性多肽的提取物，提取物中的活性多肽物质与茚三酮试液反应溶液显蓝紫色，在285nm的波长处有最大吸收。

所述的治疗肝病的药物组合物的剂型是胃肠道途径给药的片剂。

所述的治疗肝病的药物组合物的制备方法，取新鲜胎牛肝脏，用水洗净，搅碎，匀浆，细胞破碎，去沉渣，得提取液，将提取液浓缩或干燥，制成牛胎肝提取物浸膏或粉剂，其中所述的细胞破碎方法可为胶体磨粉碎法、或冻融法、或乳匀法、或超声法，所述的浓缩是将提取后的溶液于浓缩至原重量的1/5～1/15，得牛胎肝提取物浸膏；所述的干燥方法可为喷雾干燥或直接干燥，得到牛胎肝提取物粉剂，将牛胎肝提取物浸膏或粉剂与维生素B₁₂、肌醇及一种或多种医药上可接受的载体和赋形剂按照常规的制备方法制成药物组合物即为本发明。

用法用量：口服，一次40mg～80mg。

实施例3：

上述的治疗肝病的药物组合物的制备方法，细胞破碎提取：取新鲜胎牛肝脏10kg，用水洗净，剥离除去结缔组织和胆囊组织洗净，放入搅碎机中搅碎。转入胶体磨中，加水10L粉碎1次，直至细度达到5～30μm；浓缩：将提取液于60℃下减压浓缩至原重量的1/5，得牛胎肝提取物浸膏。或向溶液中加入要用肝脏重量5％的淀粉，搅拌均匀，喷雾干燥，即得到牛胎肝提取物(经测定活性多肽物质在285nm处有最大吸收，茚三酮试液反应溶液显蓝紫色)，将牛胎肝提取物浸膏或粉剂及维生素B₁₂、肌醇与一种或多种医药上可接受的载体和赋形剂按照常规的制备方法制成药物组合物。

实施例4：

上述的治疗肝病的药物组合物的制备方法，细胞破碎：取新鲜胎牛肝脏20kg，用水洗净，剥离除去结缔组织和胆囊组织洗净，匀浆，将匀浆液于-10℃～-50℃冷冻，室温解冻，反复冻融5次；浓缩：将处理后的溶液于70℃下减压浓缩至原重量的1/10，得牛胎肝提取溶液。或将溶液置干燥箱中于60℃干燥，即得到牛胎肝提取物(经测定活性多肽物质在285nm处有最大吸收，茚三酮试液反应溶液显蓝紫色)，将牛胎肝提取物浸膏或粉剂及维生素B₁₂、肌醇与一种或多种医药上可接受的载体和赋形剂按照常规的制备方法制成药物组合物。

实施例5：

上述的治疗肝病的药物组合物的制备方法，细胞破碎：取新鲜胎牛肝脏10kg，用水洗净，剥离除去结缔组织和胆囊组织洗净，匀浆，将匀浆液转入高压乳匀机内，均质5次。浓缩：将处理后的溶液于80℃下减压浓缩至原重量的1/15，得牛胎肝提取溶液。或将溶液置干燥箱中于100℃干燥，即得到牛胎肝提取物(经测定活性多肽物质在285nm处有最大吸收，茚三酮试液反应溶液显蓝紫色)，将牛胎肝提取物浸膏或粉剂及维生素B₁₂、肌醇与一种或多种医药上可接受的载体和赋形剂按照常规的制备方法制成药物组合物。

抗肝纤维化的实验研究：

材料与方法：(1)药物：复方牛胎肝提取物片、软肝片(2)造模：将CCl4与橄榄油配成40％油剂，按0.3ml/100g体重皮下注射，2次/周，第4周末，将SD大鼠随机分成复方牛胎肝提取物片大、中和小剂量治疗组、软肝片治疗组，每组45只，模型组70只，另设正常组10只。复方牛胎肝提取物片大、中、小剂量治疗组按每公斤体重相当临床剂量的20、10、5倍灌胃，1次/d，治疗8周。软肝片治疗组按0.625g/kg体重灌胃，模型组和正常组以等渗盐水替代。治疗8周。剩余大鼠均作停药处理，另取10组模型组大鼠停止模型处理，观察4周。(3)常规病理学与免疫组织化学染色：切片标本作苏木精-尹红(HE)、天狼红染色，按肝纤维化诊断与疗效评估共识进行肝纤维化组织学半定量计算计分系统(SSS)标准计分。作平滑肌肌动蛋白-α(α-SMA)、IV型胶原(C-IV)、层黏连蛋白(LN)、血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)、基质金属蛋白酶13(MMP-13)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)和转化生长因子β(TGF-β)免疫组织化学，α-SMA和C-IV-抗为鼠抗，其余为兔抗。α-SMA，LN和PDGF-BB的工作滴度为1∶80，C-IV、MMP-13和TIMP-1的工作滴度为1∶50，TGF-β的工作滴度均1∶200.结果用LEICA图像分析系统进行定量分析。(4)透射电镜检查：新鲜肝组织切成1mm×1mm×1mm小块，经固定、脱水、包埋后在Ultracut E型切片机下切成超薄切片，经醋酸铀和硝酸铅染色，在JOEL 100CX II型透射电镜下观察结果。(5)统计学处理：用SPSS10.0软件进行t检验。

结果：(1)大鼠死亡情况：复方牛胎肝提取物片大剂量治疗组死亡6只(13.3％)，中剂量治疗组死亡14只(31.1％)，小剂量治疗组死亡18只(40.0％)，软肝片治疗组死亡21只(46.7％)，模型组死亡34只(48.6％)。(2)病理检查结果：复方牛胎肝提取物片各剂量治疗组大鼠肝细胞脂肪变性程度较模型组弱，SSS计分较模型组明显减少(t值分别为2.56～2.87，P值均＜0.05)，软肝片组SSS计分也明显减少(t＝3.86，P＜0.01)，各停药组大鼠肝细胞脂肪变性程度和SSS计分有不同程度升高，停止造模组偶见大鼠肝细胞变性，肝组织结构基本恢复正常，SSS计分明显降低(t＝4.48，P＜0.01).(3)免疫组织化学结果：α-SMA、C-IV、LN和TGF-β在正常大鼠肝脏表达局限于汇管区和中央静脉，而PDGF-BB、MMP-13和TIMP-1未见表达。在模型组大鼠肝组织中α-SMA、C-IV、LN和TGF-β在纤维间隔、肝窦、肝细胞、汇管区、中央静脉等均可见表达，α-SMA、C-IV和LN表达以纤维间隔和肝窦为主，肝细胞表达较少。TGF-β表达以肝细胞浆和肝窦为主，肝细胞浆的表达呈弥漫性。PDGF-BB、MMP-13和TIMP-1表达阳性细胞均为肌成纤维细胞。模型组上述各蛋白的表达明显增强(t值分别为6.54～12.51，P值均＜0.01)，治疗组和停止造模组各蛋白的表达有不同程度的减弱，停药后又有所增强，复方牛胎肝提取物片各剂量治疗组与软肝片治疗组间差异无显著性。(4)电镜结果：模型组肝细胞线粒体肿胀，部分外膜破裂和嵴断裂，粗面内质网脱颗粒，严重时各细胞器均溶解消失，肌成纤维细胞增生，胶原生成；Disse间隙消失，肝窦内皮细胞下基底膜形成。三种剂量复方牛胎肝提取物片治疗组和停止造模组肝细胞病较轻；软肝片组与之相似，但肝细胞浆内溶酶体则少见；各停药组肝超微结构的情况与模型组相似。

结论：软肝片是抗肝纤维化纯中药合剂。复方牛胎肝提取物片是从牛胎肝脏中提取出来的，含多肽、维生素等多种物质，临床上用于急、慢性肝炎，肝纤维化等症的辅助治疗。从病死率看，软肝片组最高，复方牛胎肝提取物片组大鼠死亡呈剂量依赖性，剂量越大，死亡就越少，提示复方牛胎肝提取物片的中、大剂量对肝组织损伤具有一定的保护作用，其作用机制之一可能与溶酶体有关。比较试验结果，临床上选择抗肝纤维化药物时要考虑患者的病情，一般情况下，两种药物均可使用，但肝损伤严重时，选择使用复方牛胎肝提取物片较为理想。

治疗肝纤维化的多中心研究：

病例选择：本研究在上海复旦大学附属华山医院、广州中山大学附属第三医院以及沈阳市传染病医院进行。参照药物临床试验质量管理规范要求，此研究方案经复旦大学附属华山医院伦理委员会通过并获患者知情同意后执行。共有115例住院或门诊的慢性肝病纤维化患者入选，男75例，女40例，年龄22～72岁。入选标准：慢性乙型肝炎肝纤维化患者，诊断便准参照2000年《病毒性肝炎防治方案》，筛选时HBsAg阳性或乙型肝炎病史超过6个月，现HBsAg和(或)HBV DNA阳性；血清纤维化标志物：HA、LN、IV型胶原(typeIVcollagen，IV-C)升高。入选时均行肝穿刺做肝活体组织检查，肝脏病理学显示其纤维化程度在1级以上才能入选。

病例选择时排除：慢性重型肝炎合并肝硬化或疑有肝癌、肝脏失代偿、伴有其他严重病、中断服药、酗酒、使用肝损害药物、其它病毒感染等。

研究设计：采用自身对照的多中心临场研究设计，此试验病例数较多，重复性较好；在病情、性别方面均具有较好的可比性。研究分为两个阶段：(1)服药阶段(0～24周)：115例患者均予口服复方牛胎肝提取物片2片/次，3次/d，疗程24周。(2)停药阶段(24～36周)：完成24周的口服复方牛胎肝提取物片治疗后，所有病例接受停药随访处理。

观察指标：各中心的检验科室负责血清肝纤维化标志物HA、LN、IV-C的检测，B超引导下做肝穿刺，肝活组织病理检查由各中心病理科专业人员执行。HA、LN、IV-C的检测采用放射免疫法。总蛋白的检测选用双缩脲法，白蛋白的检测采用溴甲酚绿法，将总蛋白减去白蛋白就得到了球蛋白的数值。所有入选的患者根据研究方案分别在基线(0周)、12、24、36周进行随访。随访内容包括：询问病史及患者的依从性和不良反应、体格检查、血清HA、LN、IV-C、血液学常规、血清生物化学、腹部B超等，其中有38例患者于0周及24周时行肝穿刺，做肝活体组织病理学检查。

疗效评估：疗效评估指示为血清肝纤维化标志物HA、LN、IV-C的变化，血清白蛋白/球蛋白的变化、肝组织病理学的变化。

安全性评价：记录研究期间发生的任何不良事件(包括临床和实验室检查)，严重不良事件及时报告。

统计学分析：本临床试验研究数据处理采用STAT和SAS统计软件。定量资料统计数据以表示，两均数的比较采用t检验，等级资料采用Cochran-Mantel-Haenszel Statistics检验。

结果：

1.血清纤维化标志物的变化情况：115例患者经复方牛胎肝提取物片口服治疗后(24、36周)与治疗前(0周)比较，差异有统计学意义(P＜0.05)，见表1。

表1 115例慢性肝病纤维化患者治疗前后纤维化标志物的比较

注：治疗后(24周)和治疗前(0周)相比，at＝15.3901，bt＝7.5257，ct＝5.9913，P值均＜0.05；治疗后(36周)和治疗前(0周)相比，dt＝22.6605，et＝14.8076，ft＝8.2601，P值均＜0.05。

2.肝活组织病理的变化：复方牛胎肝提取物片口服治疗的慢性肝病肝纤维化的115例患者中有38例于用药前(0周)和用药后(24周)行肝穿刺，做肝活体组织病理检查，用药后肝纤维化程度与用药前比较，差异有统计学意义，见表2。

表2 38例慢性肝病肝纤维化患者治疗前后肝组织病理学比较(例)

注：Cochran-Mantel-Haenszel Statistics，p＜0.01

3.血清白蛋白/球蛋白的变化情况：复方牛胎肝提取物片口服治疗的慢性肝病肝纤维化115例患者中随机选取28例于基线、12、24、36周均对白蛋白/球蛋白进行了检测。白蛋白/球蛋白比值：治疗前(0周)为1.29±0.26，治疗后12周为1.43±0.24，治疗后24周为1.39±0.22，随访36周为1.43±0.21，治疗后12、36周与治疗前(0周)比较，t值分别为-2.0937和-2.2166，P值均＜0.05，差异有统计学意义，治疗后24周与治疗前(0周)比较，差异无统计学意义。

结论：本研究通过治疗后24、36周与基线水平血清纤维化标志物，尤其是通过治疗前后2次肝活体组织检查的对照，证明复方牛胎肝提取物片对慢性肝病肝纤维化患者有明显疗效，既有较好的抗纤维化作用又有肝细胞保护作用，复方牛胎肝提取物片具有的双重优势无疑为抗纤维化的临床治疗提供了一个很好的选择药物。

对非酒精性脂肪肝干预的实验研究：

1.材料：(1)实验动物：雄性SD大鼠，清洁级80～100g；动物饲养条件：清洁级屏障系统实验室。(2)试剂与药品：胆固醇，三号胆盐，蛋黄粉，猪油自备。瘦素放免试剂盒，复方牛胎肝提取物片。

2.模型的建立：雄性SD大鼠55只按体重随机分层组：(1)正常对照组(NC，n＝11)饲喂基础饲料。(2)模型组(MG，n＝9)以高脂饲料喂养，即在基础饲料(80.5％)中加入2％高胆固醇、7％猪油、10％蛋黄粉以及0.5％胆盐。(3)复方牛胎肝提取物片大剂量组(AD，n＝11)高脂饲料喂养8周成膜后加复方牛胎肝提取物片40mg/kg/d灌胃。(4)复方牛胎肝提取物片中剂量组(AZ，n＝12)为复方牛胎肝提取物片24mg/kg/d灌胃。(5)复方牛胎肝提取物片小剂量组(AX，n＝12)为复方牛胎肝提取物片15mg/kg/d灌胃。实验开始后每周称重，16周末时所有大鼠均处死。方法为隔夜禁食物，次日以股动脉采血后处死，全血3000rpm离心3min分离血清，密封-70℃冻存，备测各血清学指标。称取肝脏湿重，在肝脏最大叶距边缘5mm处取小块肝组织，浸泡于福尔马林中固定，石蜡包埋，切片，HE染色，光镜下观察。

3.检测方法：采用日力7600全自动生化测定血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天门东氨酸转氨酶(AST)甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)血糖(FBG)；血清瘦素(leptln)采用放射免疫法(RIA)测定。

4.统计方法：资料以

表示，采用SPSS11.5统计软件分析，连续变量采用单因素方差分析，定性变量采用秩和检验。

结果：

1.大鼠体重、肝湿重和肝指数：入选分组时各组大鼠体重无明显差别(P＞0.05).16周时：(1)复方牛胎肝提取物片大剂量组体重和模型组相比下降(P＜0.05).(2)模型组大鼠肝湿重和肝指数(肝湿重/体重×100％)均增加(P＜0.01).(3)和模型组相比：复方牛胎肝提取物片各组肝湿重均减轻(P＜0.05)；复方牛胎肝提取物片大中剂量组肝指数减少(P＜0.05)。见表3。

表3体重、肝湿重、肝指数变化

注：与对照组比较，^*P＜0.01，与模型组比较，^*◇P＜0.05；^*◇◇P＜0.01

2.大鼠肝功能指标：(1)模型组(MG)和对照组(NC)相比，ALT、AST均升高(P＜0.01)。(2)各治疗组和NC组相比，ALT、AST明显升高(P＜0.05)和MG组相比，其差异无统计学意义(P＞0.05)。见表4。

表4大鼠血清ALT，AST水平

注：与对照组比较，^*P＜0.01，与模型组比较，◇：P＞0.05

3.大鼠血脂：(1)模型饮食组(MC)和对照组(NC)相比，TC升高(P＜0.01)，TC降低(P＜0.05)。(2)复方牛胎肝提取物片治疗组及MG组和NC组相比，TC均降低(P＜0.05)，TC均升高(p＜0.05)；治疗组和模型组之间TG、TC均无统计学差异。见表5。

表5大鼠血清TG、TC水平

注：与对照组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01．和模型组比较，◇P＞0.05

4.大鼠空腹血糖、瘦素变化：(1)模型组(MG)和对照组(NC)相比，FBG、leptin均升高(P＜0.01)。(2)各干预组和正常组相比，除了中剂量组FBG低于NC组外，其余FBG、leptin均无显著差异(P＞0.05)：各干预组和模型组相比，FBG、leptin均降低(P＜0.05)见表6。

表6大鼠血清FBG、leptin水平

注：与对照组比较，^*P＜0.01，与模型组比较，◇P＜0.05，◇◇P＜0.01

5.肝脏形态学观察：模型组肝体积增大，包膜紧张，呈土黄色，切面油腻，复方牛胎肝提取物片治疗组介于正常和模型组之间。光镜下正常组无脂肪肝表现，正常对照组肝组织形态排列正常，细胞中央有大而园的核，肝小叶规则，无脂肪滴及炎症细胞发现。模型组12周时所有切片均表现为脂肪性肝炎，出现重度的脂肪变性和大量的炎症细胞浸润，炎症细胞浸润以汇管区为著。复方牛胎肝提取物片治疗组肝脏病变程度和炎症浸润程度均轻于模型组，大中剂量之间差异较小，小剂量组病变程度相对较为严重。结果见表7。

表7大鼠肝脏脂变程度和炎症活动度评分

注：与对照组比较，^**P＜0.01，与模型组比较，◇P＜0.01

结论：研究发现，复方牛胎肝提取物片大剂量及中剂量对大鼠脂肪病变和肝脏炎症具有明显的改善作用，同时肝指数下降。复方牛胎肝提取物片含有小分子多肽，其吸收入体内后影响细胞因子网络而发挥作用，从而发挥改善脂肪肝的作用。

治疗脂肪肝的临床研究：

1.一般资料：随机按序选择门诊和住院病例58例，分为治疗组32例，对照组26例。其中男42例，女16例，年龄29～56岁，平均41岁，病程1～13年，平均4.6年。肥胖12例，高脂血症5例，嗜酒(饮酒年数＞5年，饮酒量＞150g/d)21例，两组患者在年龄、性别、病程及肝功能等生化指标方面比较，差异无显著性(P＞0.05).全部病例符合脂肪肝的B超诊断标准，肝功能异常，无HBV、HCV等病毒感染的证据。观察期间均积极治疗两组患者的原发病包括降低体重、低脂肪高蛋白饮食，同时配合适当运动。治疗组口服复方牛胎肝提取物片，80mg/次，3次/天，疗程3个月。对照组口服葵花护肝片，4片/次，3次/天，疗程3个月。主要观察患者的临床症状、体征、肝功能指标、血脂指标及肝脏B超影像学，并观察患者服药后的不良反应。获得的数据：组间百分率比较采用t检验，组间均数比较采用方差分析检验。

2结果：

2.1疗效判定标准：根据临床症状、肝功能、血脂、B超结果综合判断。显效：乏力、纳差、肝区痛消失，B超提示肝脏形态及实质回声明显减弱、肝后场衰减明显减轻、肝内血管清晰，TC与TG均下降＞原值的20％，ALT与ACT恢复正常，血脂、肝功能恢复正常。好转：乏力、纳差、肝区痛消失，B超提示肝脏炎症较治疗前有所恢复，TC与TG均下降原值的10％～19％，ALT与AST复常好转。无效：未达到好转标准或加重。

2.2两组患者综合疗效比较：见表8。

表8两组脂肪肝治疗效果比较(例，％)

组别	例数	显效	好转	无效	总有效数
						观察组	32	26(81.25)	4(12.5)	2(6.25)	30(93.75)^*
对照组	26	14(53.84)	4(15.38)	8(30.76)	18(69.23)

注：与对照组比较，^*P＜0.01

2.3两组患者治疗前后肝功能和血脂情况：与治疗前比较，和另一组比较，均有统计学意义。两组患者用药期间均未出现不良反应。

结论：复方牛胎肝提取物片主要成分为复方牛胎肝提取物、维生素B12、肌醇，可通过IGF、FGF等细胞因子及肌醇的作用，诱导肝细胞及线粒体膜的聚糖蛋白受体，提高ATP合成酶的活性，促进细胞对葡萄糖的摄取和利用，增加能量合成。同时还可促进脂肪酸和载脂蛋白的结合并入血，减少肝内脂肪积聚，促进脂肪酸β氧化，加速脂肪分解，从而增强了肝细胞的抗损伤和修复能力，一定程度上恢复肝细胞的生理功能。

Claims

1.一种治疗肝病的药物组合物的制备方法，其特征是：细胞破碎提取：取新鲜胎牛肝脏10kg，用水洗净，剥离除去结缔组织和胆囊组织洗净，放入搅碎机中搅碎；转入胶体磨中，加水10L粉碎1次，直至细度达到5～30μm；浓缩：将提取液于60℃下减压浓缩至原重量的1/5，得牛胎肝提取物浸膏或向溶液中加入要用肝脏重量5%的淀粉，搅拌均匀，喷雾干燥，即得到牛胎肝提取物，经测定活性多肽物质在285nm处有最大吸收，茚三酮试液反应溶液显蓝紫色，将牛胎肝提取物浸膏或粉剂及维生素B ₁₂ 、肌醇与一种或多种医药上可接受的载体和赋形剂按照常规的制备方法制成药物组合物；

所述的药物组合物，其组成包括：牛胎肝提取物、维生素B ₁₂ 、肌醇及载体和赋形剂，其特征是：其重量份数比为牛胎肝提取物20份、维生素B120.001-0.002份、肌醇10-40份；所述的载体和赋形剂为羟丙纤维素、淀粉、糊精、微晶纤维素、硬脂酸镁、乳糖。

2.一种治疗肝病的药物组合物的制备方法，其特征是：细胞破碎：取新鲜胎牛肝脏20kg，用水洗净，剥离除去结缔组织和胆囊组织洗净，匀浆，将匀浆液于-10℃～-50℃冷冻，室温解冻，反复冻融5次；然后进行浓缩，将处理后的溶液于70℃下减压浓缩至原重量的1/10，得牛胎肝提取溶液或将溶液置干燥箱中于60℃干燥，即得到牛胎肝提取物，经测定活性多肽物质在285nm处有最大吸收，茚三酮试液反应溶液显蓝紫色，将牛胎肝提取物浸膏或粉剂及维生素B ₁₂ 、肌醇与一种或多种医药上可接受的载体和赋形剂按照常规的制备方法制成药物组合物；

所述的药物组合物，其组成包括：牛胎肝提取物、维生素B12、肌醇及载体和赋形剂，其特征是：其重量份数比为牛胎肝提取物60份、维生素B120.001-0.002份、肌醇10-40份；所述的载体和赋形剂为羟丙纤维素、淀粉、糊精、微晶纤维素、硬脂酸镁、乳糖。