CN101505775B - 含有来自金合欢属树皮的物质的抗氧化组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明提供在生物体内具有优异的抗氧化作用的组合物。该抗氧化组合物的特征在于含有来自金合欢属树皮的物质。

Description

含有来自金合欢属树皮的物质的抗氧化组合物
技术领域
本发明涉及来自属于金合欢属(Acacia)的树木的抗氧化组合物以及该抗氧化组合物作为食品、动物用饲料、药品和准药品(quasi drug)的用途。
背景技术
一般而言，在大气中，氧是被称为三重态氧的稳定的物质。若该氧的一部分在生物体内转变为过氧化物及羟基自由基、单重态氧、过氧化氢等被称为活泼氧的反应性高的物质，则其一部分对中性粒细胞及巨噬细胞中产生的异物具有生物体防御的作用，另一方面，若活泼氧在生物体内过度存在，则会攻击脂质、蛋白质、酶、核酸等，损伤生物体膜和组织等，还会导致动脉硬化症、脑血管疾病、肺气肿、类风湿性关节炎、白内障、高血压症、老年痴呆症、阿耳茨海默病、斑·雀斑或老化等。
一直以来，为了预防由这些过剩的活泼氧的氧化应激引起的上述各种疾病，对在食品中添加SOD样物质及捕捉活泼氧的物质(活泼氧清除活性物质)的抗氧化物质进行了广泛研究，上述SOD样物质具有与超氧化物歧化酶(SOD)类似的作用，超氧化物歧化酶是催化将初始物质的过氧化物(O2-)歧化而产生过氧化氢和氧分子的反应的酶。
例如，作为这样的物质，来自天然物的物质有脂溶性的α-生育酚(维生素E)和水溶性的抗坏血酸(维生素C)，合成物质有BHT(丁基羟基甲苯)、BHA(丁基羟基茴香醚)、TBHQ(叔丁基氢醌)等酚性物质。
然而，这些物质虽然经常作为食品的抗氧化物质使用，但对生物体的活泼氧清除作用并不充分，特别是合成物质BHA，还存在有致癌性的可能等问题。
为此，近年来，致力于从动植物等天然物研究开发安全性高的活泼氧清除活性物质，例如专利文献1、2、3、4和5等。实际上已制成产品的有从茶叶、可可豆提取物提取的儿茶素类、蓝莓果皮中含有的花青素类化合物、从发酵大豆中得到的异黄酮类等，因多酚类化合物具有非常好的活泼氧清除效果而特别受到关注。
上述证实活泼氧清除效果好的多酚类化合物中，特别是茶叶中含有的(-)表没食子儿茶素、(-)表没食子儿茶素-3-没食子酸酯、(-)表儿茶素、(-)表儿茶素-3-没食子酸酯、(+)儿茶素等以黄烷-3-醇为基本骨架的黄烷醇的儿茶素类与其他的多酚类相比，具有更好的活泼氧清除效果。
另一方面，从作为金合欢属的一种的学名：Acacia mearnsii De Wild.的树皮中用水提取得到的丹宁自古以来在南非和巴西大量生产，一般被称为荆树丹宁，非常廉价地主要作为鞣皮剂和木材用胶粘剂使用。学名：Acacia mangium Willd.马占相思)由于生长非常快，近年来在以印尼、马来西亚为代表的亚热带～热带地区广泛种植。该荆树丹宁归类于缩合型丹宁。
最近公开了金合欢属的提取物具有COX-2的选择性抑制效果(专利文献6)、金合欢属的树皮具有活泼氧清除效果(专利文献7)以及酪氨酸酶活性抑制效果产生的美白效果(专利文献8)。
但是，并未发现以特定的用量摄取金合欢属的树皮和来自树皮的多酚能在生物体内发挥优异的抗氧化作用。
专利文献1：日本专利特开平01-25726号公报
专利文献2：日本专利特开平6-65074号公报
专利文献3：日本专利特开平7-300422号公报
专利文献4：日本专利特开平11-5975号公报
专利文献5：日本专利特开2001-98264号公报
专利文献6：日本专利特表2004-532811号公报
专利文献7：日本专利特开2004-352639号公报
专利文献8：日本专利特开平10-025238号公报
发明内容
本发明提供安全性高的、在生物体内发挥优异的抗氧化作用的组合物。
本发明人等为了解决上述技术问题，进行了潜心研究，结果发现：按特定的用量来摄取来自金合欢属树皮的物质，能在生物体内发挥优异的抗氧化作用，从而完成了本发明。
即，本发明涉及抗氧化组合物，其特征在于，按特定的用量含有来自金合欢属树皮的物质。
本发明还涉及使用来自金合欢属树皮的物质的抗氧化方法。
此外，本发明还涉及用于制造抗氧化组合物的来自金合欢属树皮的物质的使用方法。
本发明能得到通过按特定用量摄取而能发挥优异的抗氧化作用的组合物。
本发明的组合物即使长期服用也不必太担心副作用等，安全性高。
具体实施方式
本发明能使用的来自金合欢属树皮的物质，只要是以属于金合欢属(Acacia)树木(以下称为“金合欢”或“金合欢属”)的树皮为原料而得到的物质即可，没有特殊限制，例如可以列举金合欢属的树皮的碎片、粉末及它们的悬浮液、金合欢属的树皮的提取液、浓缩提取液、及提取粉末等提取物以及将该提取物精制得到的精制物。从能得到优异的抗氧化活性的观点出发，优选金合欢属树皮的提取物，特别优选金合欢树皮多酚。
在本发明中，可以只使用1种来自上述金合欢属树皮的物质，也可以并用2种以上。
本发明能使用的金合欢，只要是属于金合欢属的树木即可，没有特殊限制，从能得到具有优异的抗氧化作用的来自金合欢属树皮的物质的观点出发，优选从由学名：Acacia mearnsii De Wild.(俗名：黑荆树)、学名：Acacia mangium Willd.(俗名：马占相思)、学名：Acacia dealbata Link、学名：Acacia decurrens Willd.、以及学名：Acacia pycnanthaBenth.构成的组中选择的金合欢属的树皮，特别优选Acacia mearnsiiDe Wild.以及Acacia mangium Willd.。
在本发明中，可以只使用1种上述金合欢属的树皮，也可以并用2种以上。
上述金合欢属的树皮，通常可通过将树木采伐后只剥离树皮并采取干燥来得到，优选进一步在阳光下干燥得到的树皮。
金合欢属的树皮由外皮和略有纤维性的内皮构成，干燥至含水率为20％左右以下时，在锤式粉碎机等粉碎机中易微粉化。在本发明中，作为金合欢属的树皮，可以将该金合欢属的内皮和外皮两者一起使用，也可以只使用任一方。
上述金合欢属的树皮的碎片，可以通过用常法将金合欢属的树皮粉碎成合适的大小来获得。
上述金合欢属的树皮的粉末，可以通过将金合欢属的树皮用常法粉碎而粉末化来获得，特别优选粒径为100μm以下、尤其是50μm～70μm的粉末。关于粉末的区分，将干燥至含水率为20％以下的树皮粉碎成合适的大小例如粒径为1.6mm以下左右，将得到的粉末用振动筛等分级，即可得到所需的粉末。
上述金合欢属的树皮的提取物，可以通过将金合欢属的树皮用常法提取来获得。为了得到具有优异的抗氧化作用的金合欢属树皮的提取物，优选用醇或极性溶剂对金合欢属的树皮进行提取。
作为上述醇，可以使用乙醇，作为极性溶剂，可以使用水等，还可以根据需要单独使用这些溶剂或并用2种以上。特别是为了得到优异的抗氧化作用，优选水和乙醇等醇的混合溶剂。
此外，也可以用相同或不同的溶剂进行多次提取操作。
为了得到具有优异的抗氧化作用的提取物，也可以使用通过将来自金合欢属树皮的经水或热水得到的提取物进一步用乙醇提取得到的提取物。
关于提取，在金合欢属树皮的碎片或粉末等中加入溶剂并根据需要搅拌来提取，对温度和时间或固液比没有特殊限制。当溶剂采用水时，可以用热水来提取。得到的提取液可以直接冷冻干燥或喷雾干燥，或者也可以在减压浓缩后冷冻干燥或喷雾干燥。得到的提取物可以为提取液、溶液、粉末、浓缩液、糊状物等各种形态，可以根据需要广泛使用。
此外，以上述形态得到的本发明的金合欢属树皮提取物可以直接作为抗氧化组合物使用，还可以根据需要精制，该精制物也可以作为抗氧化活性成分使用。
在本发明中，作为来自金合欢属树皮的物质，还可以例示在金合欢属的树皮中含有的成分。作为这样的成分，可以例示金合欢树皮多酚等。特别是金合欢树皮多酚具有优异的抗氧化作用，因而为优选的成分。
本发明的金合欢树皮多酚是指(-)-非瑟酮醇、(-)-刺槐亭醇、(+)-儿茶素以及(+)-没食子儿茶素等以黄烷-3-醇为基本骨架的黄烷醇类以C4-C8、C4-C6结合得到的聚合物即缩合型丹宁的一种。这里，作为这种缩合型丹宁，优选分子量为300～3000，特别优选500～3000。本发明使用的金合欢树皮多酚可以通过将上述金合欢属树皮的粉末等进行热水提取来获得。
作为金合欢树皮多酚产品，可以例示MIMOSA Central Co-operativeLtd.制的注册商标为MIMOSA ME POWDER、MIMOSA MS POWDER、MIMOSA GS POWDER、MIMOSA FS POWDER、MIMOSA WS POWDER、MIMOSA RG POWDER、MIMOSA RN POWDER、MIMOSA DKPOWDER、MIMOSA AL POWDER、MIMOSA CR POWDER、GOLDENMIMOSA POWDER的产品等。
本发明的组合物可以是来自金合欢属树皮的物质，例如金合欢属的树皮、其提取物、其精制物、或金合欢树皮多酚，也可以含有其他具有抗氧化作用的物质，例如维生素C、维生素E、辅酶Q10、α-生育酚、原花青素、异黄酮、槲皮素、绿茶或小麦胚芽。特别是从利用协同作用得到优异的抗氧化作用的观点出发，优选含有辅酶Q10、绿茶或小麦胚芽。
本发明的组合物可以是来自金合欢属树皮的物质，例如金合欢属的树皮、其提取物、其精制物、或金合欢树皮多酚，在不损坏本发明效果的前提下，可以含有赋形剂、甜味剂、酸味剂、增粘剂、香料、色素、乳化剂及其他在药品及食品中常用的添加剂及材料。
本发明的组合物可以用于活泼氧相关疾病的预防或治疗。在本发明中，活泼氧相关的疾病只要是由过氧化物、羟基自由基、单重态氧或过氧化氢等活泼氧或被它们氧化得到的过氧化脂质等引起的细胞或组织疾病即可，没有特殊限制，可以列举动脉硬化症、脑血管疾病、肺气肿、类风湿性关节炎、白内障、高血压症、老年痴呆症、阿耳茨海默病、斑·雀斑或老化等。优选动脉硬化症。
本发明的组合物的摄取量没有特殊限制，可以根据剂型以及使用者或患者等摄取者或摄取动物的年龄、体重及症状来适当选择。例如，相对于摄取者的体重或摄取动物的体重1kg，作为有效成分量而每日摄取特别是口服摄取0.001g～1g、优选为0.001g～0.5g、更优选为0.005g～0.1g的金合欢树皮多酚量，可以获得优异的抗氧化作用。
摄取时间可以根据摄取者或摄取动物的年龄、症状来任意设定。
本发明的组合物作为食品或动物饲料而言，可以作为例如健康食品、功能性食品、健康辅助食品、特定保健用食品、美容食品以及营养补助食品(营养补充剂)来使用。这些食品和动物饲料例如可以是茶、果汁等饮料；冰激淋、果冻、糖果、巧克力以及口香糖等的形态。另外，也可以是液体制剂、粉剂、颗粒剂、胶囊剂或片剂的形态。这里，动物饲料的动物包含包括宠物动物、畜产动物或动物园等中饲养的动物在内的需要预防或治疗上述活泼氧有关的疾病的所有动物。
本发明的组合物作为药品或准药品，可以以例如散剂、片剂、包衣剂、糖衣剂、硬明胶胶囊或软明胶胶囊剂、液体制剂、乳浊剂或悬浮剂的形态口服给药，也可以非口服给药，例如以栓剂的形态直肠给药；例如以软膏、霜剂、凝胶剂或液体制剂的形态局部或经皮非口服给药。
[实施例]
以下，列举制造例、试验例、掺和例来更详细地具体说明本发明，但本发明不限于这些。特别是这里未将本发明的金合欢属树皮分为外皮和内皮来示出实施例，也可以将外皮从内皮分离而分别使用。
在以下的制造例、试验例等中，将本发明的各金合欢用各自学名后的括号内所示的号来表示。例如，将学名：Acacia mearnsii De Wild.的金合欢记作金合欢No.1。
学名：Acacia mearnsii De Wild.(No.1)、学名：Acacia mangium Willd.(No.2)、学名：Acaciadealbata Link(No.3)、学名：Acacia decurrens Willd.(No.4)、学名：Acaciapycnantha Benth.(No.5)。
另外，％在没有特殊说明的情况下表示重量％。
金合欢树皮粉末的制造例1
将金合欢No.1的树皮干燥至含水率为20％以下，将该干燥树皮用锤式粉碎机粉碎成1.6mm以下(过10目筛(泰勒：Tyler))的粉末，然后再用振动筛分级，得到63μm以下(过250目筛)的微粉。
同样操作，将其余4种金合欢No.2～5的树皮粉碎，分别得到63μm以下的微粉。因种类不同，过250目筛的微粉的收率多少存在差异，但均得到了目标微粉。
金合欢树皮提取物的制造例2
将本发明的各金合欢No.1～5的树皮分别干燥至含水率为20％以下，将该干燥树皮用锤式粉碎机粉碎至1.6mm以下的粉末后，相对于该干燥粉碎树皮100g，加入5倍量的热水，沸腾后提取15分钟，用10μm～20μm的过滤器过滤。将得到的滤液用喷雾干燥器进行喷雾干燥，得到树皮提取物各40g。
以下，将各树皮提取物记作金合欢No.1～5热水提取物。
金合欢树皮提取物的制造例3
将本发明的金合欢树皮干燥至含水率为20％以下，将该干燥树皮用锤式粉碎机粉碎至1.6mm以下的粉末后，相对于该干燥粉碎树皮100g，加入5倍量的乙醇，一边沸腾回流一边提取15分钟，用10μm～20μm的过滤器过滤。从得到的滤液蒸发乙醇，将浓缩液用封闭式喷雾干燥器进行喷雾干燥，得到树皮提取物(以下记为金合欢No.1乙醇提取物)40g。
同样操作，得到金合欢No.1～5的乙醇提取物。
金合欢树皮提取物的制造例4
在制造例2中得到的金合欢热水提取物10g中加入3倍量的乙醇，一边沸腾回流一边提取15分钟，用10μm～20μm的过滤器过滤。从得到的滤液蒸发乙醇，在其中加水后冷冻干燥，得到9g提取物(以下记为金合欢No.1热水提取物乙醇馏分)。
同样操作，得到金合欢No.1～5的热水提取物乙醇馏分。
试验例1抗氧化试验(1)
(1)试验方法
将制造例2所述的金合欢No.1热水提取物悬浮于0.3％(W/V)羧甲基纤维素钠溶液(CMC-Na溶液)中，以2g/kg的每日剂量经口给予大鼠(Slc：SDF、雄、7周龄)14天。向对照组给予CMC-Na溶液。
在开始给药的第14天，分别使用高灵敏度8-OHdG Check以及New8-OHdG Check(日研Seil株式会社制)来测定大鼠的血清中和尿中的8-OHdG(8-羟基-2’-脱氧鸟苷)浓度。
上述各测定值用平均值±标准误差来表示。与对照组的显著性差异检验采用Student的t检验。显著水平为5％。
(2)试验结果
结果如表1所示。所有例子中均未见死亡和一般状态异常。
表18-OHdG浓度的变化
Figure GSB00000679140400081
()表示与对照组相比较的减少率(％)。
*是与对照组的值的比较。P＜0.05。
试验例2抗氧化试验(2)
(1)试验样品液的制备
将与上述试验例1同样制备的制造例2所述的金合欢No.1热水提取物以0.1g/kg～2.0g/kg的每日剂量经口给予大鼠(Slc：SD、雄、7周龄)
14天。向对照组给予CMC-Na溶液。
在开始给予第14天，与上述试验例1同样操作，测定尿中的8-OhdG浓度。
测定值用平均值±标准误差来表示。对照组与各给予组间的显著性差异检验采用Dunnett多重比较检验。显著水平为5％和1％。
(2)试验结果
结果如下表2所示。所有例子中均未见死亡和一般状态异常。
表2尿中的8-OHdG浓度
Figure GSB00000679140400091
()表示与对照组相比较的减少率(％)。
由上述试验例1和2的结果可知：金合欢树皮多酚具有抗氧化作用。
试验例3突变诱发性试验
根据劳动省告示第77号(1988年9月1日)，实施突变诱发性试验。用156μg/板～5000μg/板的用量的样品(制造例2的金合欢No.1～5热水提取物)进行试验，结果任一菌株的回复突变菌落数均未增加。
试验例4微核试验
按照常法，分析体内微核诱发能力的有无。向雄性ICR系小鼠以2000mg/kg、1000mg/kg及500mg/kg的日用量间隔24小时口服给予2次金合欢No.1热水提取物，在最终给予24小时后，制作微核标本。
金合欢No.1热水提取物的任一用量均未显示阳性。同时观察的总多染性红细胞相对于总红细胞的比没有一定的变动，与阴性对照组相比，未见红细胞的增殖抑制。
试验例5小鼠急性毒性试验(口服给药)
根据OECD(Guidelines for the Testing of Chemicals 401，1987)，用ICR系雌雄小鼠进行急性口服毒性试验。其结果是，金合欢No.1热水提取物的LD50值在雄小鼠中为4468mg/kg，在雌小鼠中为3594mg/kg。
对制造例2的金合欢No.2～5热水提取物进行上述试验，得到同样的结果。
试验例6大鼠反复给药毒性试验(口服给药)
根据常法，用大鼠进行13周反复给药毒性试验。
向Slc：SD大鼠的雌雄大鼠给予含有0.5％、1.5％以及5.0％金合欢No.1热水提取物的混合饲料。
其结果是，没有大鼠死亡的例子。在包括一般状态在内的检查中未见异常。
试验例7人单次给药试验
让32岁～43岁的健康成年男性5名摄取1500mg(12片下述掺和例4的片剂)金合欢No.1热水提取物，在摄取前·摄取3小时后·摄取8小时后·摄取24小时后·摄取1周后，实施一般检查·血液学检查·血液生化学检查·尿检，没有成为临床问题的检测值的变动。也没有与片剂相关的有害现象。
试验例8人4周连续给药试验
让23岁～44岁的健康成年男性25名分别摄取4周750mg/日(6片掺和例4的片剂)以及1000mg/日(8片掺和例4的片剂)下述掺和例4的金合欢No.1热水提取物。
在各组的摄取前·摄取2周后·摄取4周后·摄取结束2周后，实施一般检查、血液检查、尿检。没有有问题的检测值的变动。也没有有害现象。
掺和例1内服制剂的制备
使用制造例4的金合欢树皮热水提取物乙醇馏分，按下述所示的组成，制备内服制剂。
Figure GSB00000679140400101
掺和例2宠物食品的制备
使用制造例2的金合欢树皮热水提取物，按下述所示的组成制备宠物食品。
Figure GSB00000679140400111
掺和例3片剂(点心)的制备
使用制造例4的金合欢树皮热水提取物乙醇馏分，按下述所示的组成制备片剂(点心)。
Figure GSB00000679140400112
掺和例4片剂的制备
使用制造例2的金合欢树皮No.1热水提取物，按下述所示的组成制备片剂。
Figure GSB00000679140400113
工业上利用的可能性
本发明能得到用于预防和/或治疗活泼氧相关疾病的组合物。
更详细而言，本发明的组合物对于动脉硬化症的预防和/或治疗有用。
这些组合物可以用于药品、准药品、化妆品、或健康食品、健康补助食品、特定保健用食品或营养补助食品等食品或动物饲料。

Claims (7)

1.Acacia mearnsii De Wild.树皮的提取物在制造抗氧化组合物中的应用，其特征在于，所述抗氧化组合物相对于每1kg摄取者或摄取动物的体重，以金合欢树皮多酚的用量每日为0.005g～1g的方式含有Acaciamearnsii De Wild.树皮的提取物，所述提取物是以水作为溶剂时所得的提取物、以醇作为溶剂时所得的提取物、以水与醇的混合溶剂作为溶剂时所得的提取物、或者经以水作为溶剂时所得的提取物进一步用以乙醇作为溶剂时提取得到的提取物。
2.根据权利要求1所述的应用，其中，所述以水作为溶剂时所得的提取物是以热水作为溶剂时所得的提取物。
3.根据权利要求1或2所述的应用，所述抗氧化组合物为食品。
4.根据权利要求1或2所述的应用，所述抗氧化组合物为动物用饲料。
5.根据权利要求1或2所述的应用，所述抗氧化组合物为药品。
6.根据权利要求1或2所述的应用，所述抗氧化组合物为准药品。
7.根据权利要求1或2所述的应用，所述抗氧化组合物为化妆品。
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