CN101502601A - 一种用于阿尔茨海默氏症的中药组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种治疗阿尔茨海默氏病的中药组合物及其制备方法。组合物活性成分由人参、地骨皮、地黄、远志、菖蒲、川芎和五味子的提取物组成,提取物制备采用大孔吸附树脂、聚酰胺树脂等先进技术精制纯化。其剂型为胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂之一。该组合物用于预防和治疗阿尔茨海默氏病以及其他以健忘为主症状的疾病;本品也可用于提高记忆力。
Description
技术领域
本发明涉及中药组合物及其制备方法,具体涉及一种治疗阿尔茨海默氏病的中药组合物及其制备方法。
背景支持
随着世界人口老龄化程度的不断加深,老年性痴呆已成为继肿瘤、心脏病、脑卒中之后引起老年人死亡的第四大疾病。由于此病影响患者的认知功能、记忆功能、语言功能、视空间功能、社会生活能力、个人生活自理能力和情感人格等,给社会和患者的家庭带来很大负担。现广泛应用的阿尔茨海默氏病(Alzheimer’s disease,AD)的治疗药物以化学药物为主,如多奈哌齐、他克林等,然而上市的化学药物多数具有较大的副作用,耐受性差,且多数不能阻止AD发展进程,也无法恢复患者已经失去的认知功能,只能延缓患者认知功能减退的速度。此外,AD是多因素复杂性疾病,任何一种作用于单靶位的药物都难取得满意的结果,因此发挥中医药特色,采用多靶点治疗,利用中药复方对AD多个病理环节起作用将会是较为理想的治疗手段。虽然在中药治疗阿尔茨海默氏症方面人们已经做了很多的探索,并且有欣喜的成果,但是都是限于汤药的使用,目前国内外尚无治疗AD的中药复方制剂上市。
发明内容
本发明的目的在于根据中医“补肾益髓、安神开窍、健脾益气、化痰逐瘀”的辨证论治理论组方,以人参宁神益智为君,地黄菟丝子滋补肝肾,远志启肾水上达于心,使心肾交通为臣,石菖蒲开心窍,五味子安心神,川芎通心瘀,地骨皮清心火并制约人参、川芎之“温燥”共为佐药。全方邪正兼顾,标本同治,共奏健脑益智强记之功。同时,对各位药材在提取后通过现代科学技术进行精制,混合制备出中成药,以提供一种质量稳定、疗效确切、安全廉价的治疗阿尔茨海默氏病的中药组合物,及其制备方法。
本发明在保证原有方剂的显著疗效的基础上,通过使用现代科学技术对药材进行精制,既保留了有明显作用的活性成分,又可适当的摒弃药材中多余的无效成分,降低患者对药物的摄入量,提高药物的服用方便性,提高了患者长期服用的依从性。
本发明所提出的用于治疗阿尔茨海默氏病的中药组合物,其特征在于该制剂由人参、五味子、远志、川芎、菟丝子、地黄、石菖蒲和地骨皮的提取物为活性成分与药用辅料组成,并且按含活性成分为0.01%-99.99%与含药用辅料为99.99%-0.01%的任意配比制成100%的组成。本发明所述制剂为硬胶囊剂、软胶囊、片剂及颗粒剂中的任意一种。该组合物用于预防和治疗阿尔茨海默氏病以及其他以健忘为主症状的疾病,也可用于提高记忆力。
本发明中,获得的提取物的生药配比为:人参:五味子:远志:川芎:菟丝子:地黄:石菖蒲:地骨皮=0.1-5:1-10:1-10:0.1-5:5-15:5-15:1-10:1-10。经试验优选比例为:人参:五味子:远志:川芎:菟丝子:地黄:石菖蒲:地骨皮=3:5:5:3:10:10:5:5。药材可以是其生药或其炮制品。
本发明所述的人参提取物为人参水提物或醇提物或提取后过柱精制物;五味子提取物为五味子水提物或醇提物或提取后过柱精制物;远志提取物为远志水提物或醇提物或提取后过柱精制物;川芎提取物为川芎水提物或醇提物或提取后过柱精制物;地黄提取物为地黄水提或醇提物或提取后过柱精制物;石菖蒲、菟丝子和地骨皮提取物为石菖蒲、菟丝子、地骨皮的水提物或水提醇沉提取物与石菖蒲挥发油提取物的组合物。
本发明所述人参提取物的制备可以是但不限于如下方法中的任意一种:
1.将人参药材粉碎后加入5-15倍量水煎煮提取2-5次,每次2-4h,浓缩干燥得人参水提取物。
2.将人参药材粉碎后,加入5-15倍量的40%-95%乙醇,回流提取2-5次,每次2-4h。回收乙醇,浓缩干燥得人参醇提取物。
3.将人参药材粉碎后,加入5-15倍量水或40%-95%乙醇,回流提取2-5次,每次2-4h。浓缩去除有机试剂,上于大孔树脂柱,水洗脱杂质,10%-100%的乙醇洗脱,流速1-5BV/h,收集洗脱液,回收溶剂,减压干燥得人参过柱精制物。
本发明所述五味子提取物的制备可以是但不限于如下方法中的任意一种:
1.将五味子药材粉碎后加入5-15倍量水煎煮提取2-5次,每次2-4h,浓缩干燥得五味子水提取物。
2.将五味子药材粉碎后,加入5-15倍量的40%-95%乙醇,回流提取2-5次,每次2-4h。回收乙醇,浓缩干燥得五味子醇提取物。
3.将五味子药材粉碎后,加入5-15倍量水或40%-95%乙醇,回流提取2-5次,每次2-4h。浓缩去除有机试剂,上于大孔树脂柱,水洗脱杂质,10%-100%的乙醇洗脱,流速1-5BV/h,收集洗脱液,回收溶剂,减压干燥得五味子过柱精制物。
本发明所述远志提取物的制备可以是但不限于如下方法中的任意一种:
1.将远志药材粉碎后加入5-15倍量水煎煮提取2-5次,每次2-4h,浓缩干燥得远志水提取物。
2.将远志药材粉碎后,加入5-15倍量的40%-95%乙醇,回流提取2-5次,每次2-4h。回收乙醇,浓缩干燥得远志醇提取物。
3.将远志药材粉碎后,加入5-15倍量水或40%-95%乙醇,回流提取2-5次,每次2-4h。浓缩去除有机试剂,上于大孔树脂柱,水及10%-30%乙醇洗脱杂质,50%-100%的乙醇洗脱,流速1-5BV/h,收集洗脱液,回收溶剂,减压干燥得远志过柱精制物。
本发明所述川芎提取物的制备可以是但不限于如下方法中的任意一种:
1.将川芎药材粉碎后加入5-15倍量水煎煮提取2-5次,每次2-4h,浓缩干燥得川芎水提取物。
2.将川芎药材粉碎后,加入5-15倍量的40%-95%乙醇,回流提取2-5次,每次2-4h。回收乙醇,浓缩干燥得川芎醇提取物。
3.将川芎药材粉碎后,加入5-15倍量水或40%-95%乙醇,回流提取2-5次,每次2-4h。浓缩去除有机试剂,上于大孔树脂柱,水洗脱杂质,10%-100%的乙醇洗脱,流速1-5BV/h,收集洗脱液,回收溶剂,减压干燥得川芎过柱精制物。
本发明所述地黄提取物的制备可以是但不限于如下方法中的任意一种:
1.将地黄药材粉碎后加入5-15倍量水煎煮提取2-5次,每次2-4h,浓缩干燥得地黄水提取物。
2.将地黄药材粉碎后,加入5-15倍量的40%-95%乙醇,回流提取2-5次,每次2-4h。回收乙醇,浓缩干燥得地黄醇提取物。
3.将地黄药材粉碎后,加入5-15倍量水或40%-95%乙醇,回流提取2-5次,每次2-4h。浓缩去除有机试剂,上于大孔树脂柱,水洗脱杂质,10%-100%的乙醇洗脱,流速1-5BV/h,收集洗脱液,回收溶剂,减压干燥得地黄过柱精制物。
本发明所述菟丝子、石菖蒲、地骨皮提取物的制备可以是但不限于如下方法:
1.石菖蒲药材中加5-10倍量水浸泡0.5-2h,置于挥发油提取器中提取4-10h,保存挥发油。将水提液过滤,滤液和药渣分别保存备用。
2.将菟丝子和地骨皮药材混合后加5-10倍量的水,煎煮提取1-3h,过滤后滤液和药渣分别保存备用。
3.将保存的药渣合并,加入5-10倍量的水,煎煮提取2次,每次1-3h,过滤,合并滤液。
4.合并所有滤液,减压回收溶剂,使药液比重在1.00-1.40之间,缓慢加入乙醇,使终浓度为30%-75%,过滤,滤液回收溶剂,减压干燥得到提取物。
本发明所述大孔树脂型号可以是:D101,D130,DA201,X5,AB-8,HPD-100,WLD-3,HPD-300。
现代药学研究证明,人参总皂苷提取物、远志总皂苷提取物以及五味子总木脂素提取物在抑制AchE、提高乙酰胆碱及5-羟色胺水平、抑制Aβ的形成或淀粉样斑块形成以及保护神经元免受Aβ损伤等方面有明显作用,而川芎、石菖蒲、菟丝子、地黄以及地骨皮的化学成分也都有调节神经递质水平保护神经细胞的左右,在治疗老年痴呆方面有着显著疗效。因此,本方多成分多靶点治疗,可能显著优于已经上市的化学药物,成为中成药治疗AD的突破点。
同时,我们在保持原有方剂组成的基础上,对有明确药理作用的三味药的有效成分进行提取精制,然后与其他药材的粗提物按照科学的君臣佐使之配比混合制备出中成药,既能保证原有方剂的显著疗效,又可以适当的摒弃药材中多余的无效成分,降低患者对药物的摄入量,提高了本品服用的方便性,从而提高了患者长期服用的依从性。本品按照现代化医药要求遵守严格的规范标准,安全、有效、稳定、质量可控、服用方便,是具有现代剂型的新一代中药,符合并达到国际主流市场标准和中药现代化的要求。
本发明的药效学研究如下:
1.读书胶囊对东莨菪碱所致记忆障碍的影响
小鼠60只,♀各半,体重19.4±0.8g,按性别体重分层随机分为6组,第1、2组分别给蒸馏水,其他组分别给读书胶囊5、10、20g/kg和阿尼西坦0.5g/kg灌胃,体积均为20ml/kg,每天1次,共7天。第6天给药1小时后用Y型电迷路法训练动物,末次给药同时除蒸馏水正常对照组腹腔注射5ml/kg生理盐水外,其余各组动物均腹腔注射东莨菪碱5mg/kg,体积均为5ml/kg,1小时后用Y型电迷路同法测试,记录10次测试正确次数。
表1.读书胶囊对东莨菪碱所致记忆障碍的影响(x±SD,n=10)
注:与蒸馏水正常比较:+P>0.05;+++P<0.01;与蒸馏水模型组比较:*P>0.05;***P<0.01。
2.读书胶囊对利血平所致记忆障碍的影响
小鼠50只,♀各半,体重19.5±0.9g,按性别体重分层随机分成5组,第1、2组给蒸馏水,其他组分别给读书胶囊5、10g/kg和阿尼西坦0.5g/kg灌胃,体积均为20ml/kg,每天一次,共7天,第6天给药1小时后用避暗法训练小鼠,末次给药同时除蒸馏水正常对照组外,其余各组动物均皮下注射利血平0.5mg/kg,1小时后同法测试,记录潜伏期和5min内的错误次数。
表2.读书胶囊对利血平所致记忆障碍的影响(x±SD,n=10)
注:与正常蒸馏水比较:+++P<0.01;与模型蒸馏水组比较:*P>0.05;**P<0.05
3.读书胶囊对阿扑吗啡所致记忆障碍的影响
小鼠50只,♀各半,体重19.3±0.9g,按性别体重分层随机分成5组,第1、2组给蒸馏水,其他组分别给读书胶囊5、20g/kg和阿尼西坦0.5g/kg灌胃,体积均为20ml/kg,每天一次,共7天,第6天给药1小时后用避暗法训练小鼠,末次给药同时除蒸馏水正常对照组外,其余各组动物均皮下注射阿扑吗啡0.5mg/kg,1小时后同法测试,记录潜伏期和5min内的错误次数。
表3.读书胶囊对阿扑吗啡所致记忆障碍的影响(x±SD,n=10)
注:与正常蒸馏水比较:+++P<0.01;与模型蒸馏水组比较:*P>0.05;**P<0.05
4.读书胶囊对模型小鼠脑组织乙酰胆碱酯酶活性的影响
小鼠喂养1周后跳台法每批筛选60只,雌雄各半,随机分为6组,分别为正常组、模型组、模型+多奈哌齐组、模型+读书胶囊小剂量组、模型+读书胶囊中剂量组、模型+读书胶囊大剂量组。共两批。多奈哌齐组给予多奈哌齐0.3g/kg,读书胶囊大中小剂量组分别给予读书胶囊50g/kg、25g/kg、12.5g/kg。以上均配制成0.5ml液体,灌胃(ig)给药,每日一次,连续10天。正常组和模型组均灌以等量生理盐水。末次给药1h后,正常组腹腔注射生理盐水10ml/kg,各模型组腹腔注射东茛菪碱3mg/kg。24h后脱臼法处死小鼠,取脑(去除小脑)置预冷的生理盐水中漂洗,除去血迹,滤纸拭干,称重后将脑迅速浸入冷生理盐水中(生理盐水体积总量为组织总量的9倍),用玻璃匀浆器在冰浴中制成10%的组织匀浆,将匀浆以3000r/min离心10min,取上清,按胆碱酯酶试剂盒说明处理,用752型分光光度计测定。
表4.读书胶囊对东茛菪碱模型小鼠脑组织乙酰胆碱酯酶活性的影响(x±S)
注:与正常组比较:+P<0.01;与模型组比较:*P<0.05;**P<0.01
5.读书胶囊对AD大鼠模型脑内神经细胞的保护
取SD大鼠30只,随机分为a.假手术对照组、b.模型组、c.模型+读书胶囊组,每组10只。对大鼠行脑定位右半球单侧注射:bc组大鼠注射Aβ1-40和鹅膏蕈氨酸(IBO)的混合液(每鼠1μL,含Aβ1-40 4μg和IBO 1μg,溶于生理盐水):a组同侧注射等量无菌生理盐水。术后第4天起c组大鼠按12.5g/kg灌胃给予读书胶囊,ab组大鼠喂等体积生理盐水。连续用药30天。脱臼法处死大鼠后取出脑组织,4%多聚甲醛固定后,经浸洗、酒精梯度脱水、透明、浸蜡、包埋、切片(8μm)、脱蜡、复水等步骤后,分别取切片进行常规HE染色和NISSL染色,光镜下观察注射区神经细胞的形态。
HE染色观察:在假手术组脑切片中,海马结构完整,形态清晰,细胞数量丰富(×40);神经元体积较大,大多数为球形,核圆形,呈淡紫色,核仁明显(×400)。模型组中,神经元数量减少,胞体退化,胞核固缩深染,核小呈扁圆形或三角形,核仁不明显,胞质较少,少量细胞出现空泡性变化(×400)。药物组动物用药30天后,神经元的数量较模型组明显增多,形态也较完整(×400)。
尼氏体染色观察:假手术组大脑皮层分层明显,细胞清晰可见,细胞排列紧密且数目多,树突和轴突结构清晰,细胞核圆形淡染,核仁染成蓝色,大小清晰可见,胞浆透明,在核周区尼氏体含量丰富,突触结构完整(×100)。模型组中海马CA2区细胞大量缺失且皮层细胞数目明显减少,分层不明显(×100),形态不完整的细胞数目较多,尼氏体溶解,核仁不明显甚至消失,突触结构不清晰(×400)。药物组动物海马结构相对较完整(×40),细胞密度明显增多,但有些神经元树突结构缺失,尼氏体较丰富,突触可见,核仁较清晰(×400)。与模型组比较差异十分明显。
具体实施方式
实施例1
本实施例以生药组成为人参、川芎各90g,远志、五味子、石菖蒲、地骨皮各150g,菟丝子、地黄各300g制备活性成分提取物。
1.将人参粉碎后加入720ml 60%乙醇,回流提取3次,2h/次。合并提取液,过滤后回收乙醇,上于D101大孔树脂柱上,先用3BV水洗脱至无糖,然后用70%的乙醇洗脱,流速2.5BV/h,收集洗脱液,回收溶剂,减压干燥。
2.五味子药材粉碎后加入1200ml 80%乙醇,回流提取2次,2h/次。提取液过滤后回收溶剂,上于AB-8大孔树脂柱上,3BV的水洗脱杂质,然后用95%的乙醇洗脱,流速2.5BV/h,收集洗脱液,回收溶剂,减压干燥。
3.远志药材粉碎后加入1200ml的80%乙醇,回流提取2次,2h/次。合并提取液,过滤后回收乙醇,上于D101大孔树脂柱,3BV的水和30%的乙醇洗脱杂质,最后用70%的乙醇3BV洗脱,流速3BV/h,收集洗脱液,回收溶剂,减压干燥。
4.地黄药材粉碎后加入1500ml 70%乙醇,回流提取2次,1.5h/次。提取液过滤后回收溶剂,上于D101大孔树脂柱上,3BV的水洗脱杂质,然后用50%的乙醇洗脱,流速2.5BV/h,收集洗脱液,回收溶剂,减压干燥。
5.川芎药材粉碎后加入720ml 75%乙醇,60℃以下回流提取2次,2h/次。提取液过滤后回收溶剂,上于HPD-300大孔树脂柱上,3BV的水洗脱杂质,然后用50%的乙醇洗脱,流速2.5BV/h,收集洗脱液,回收溶剂,减压干燥。
6.石菖蒲药材加4000ml水浸泡1h,置于挥发油提取器中提取6h,保存挥发油。将水提液过滤,滤液和药渣分别保存备用。
7.将菟丝子和地骨皮药材混合后加8倍量的水,煎煮提取2h,过滤后滤液和药渣分别保存备用。
8.将6、7中保存的药渣合并,加入8倍量的水,煎煮提取2次,每次2h,过滤,合并滤液。
9.合并6、7、8中的所有滤液,减压回收溶剂,使药液比重在1.0-1.4之间,缓慢加入乙醇,使终浓度为50%,过滤,滤液回收溶剂,减压干燥得到浸膏I。
10.将人参、五味子、远志、地黄、川芎提取物、浸膏I与石菖蒲挥发油混合均匀。
实施例2
本实施例以生药组成为人参、川芎各150g,远志、五味子、石菖蒲、地骨皮各250g,菟丝子、地黄各500g制备读书胶囊。
按实施例1的方法制备出活性成分提取物,加入羧甲基淀粉钠、二氧化硅、硬脂酸镁,混匀,制粒,装入胶囊,即得。
实施例3
本实施例以生药组成为人参、川芎各150g,远志、五味子、石菖蒲、地骨皮各250g,菟丝子、地黄各500g制备读书片。
按实施例1的方法制备出活性成分提取物,加入羧甲基淀粉钠,混匀,制粒,然后加入二氧化硅、硬脂酸镁,压片即得。
Claims (8)
1.一种中药组合物,活性成分由人参、地骨皮、地黄、远志、菖蒲、川芎和五味子的提取物组成。
2.如权利要求1所述的中药组合物,其特征为所述组合物给药剂型为胶囊剂、片剂、颗粒剂和丸中的任意一种。
3.如权利要求1和2所述的中药组合物,其特征在于获得的提取物的生药配比为:人参:五味子:远志:川芎:菟丝子:地黄:石菖蒲:地骨皮=0.1-5:1-10:1-10:0.1-5:5-15:5-15:1-10:1-10。
4.如权利要求3所述的生药配比,优选比例为:人参:五味子:远志:川芎:菟丝子:地黄:石菖蒲:地骨皮=3:5:5:3:10:10:5:5。
5.如权利要求1所述的中药材可以是原生药或其炮制品。
6.如权利要求1和2所述的组合物,其特征在于所述的人参提取物为人参水提物或醇提物或提取后过柱精制物;五味子提取物为五味子水提物或醇提物或提取后过柱精制物;远志提取物为远志水提物或醇提物或提取后过柱精制物;川芎提取物为川芎水提物或醇提物或提取后过柱精制物;地黄提取物为地黄水提或醇提物或提取后过柱精制物;石菖蒲、菟丝子和地骨皮提取物为石菖蒲、菟丝子、地骨皮的水提物或水提醇沉提取物与石菖蒲挥发油提取物的组合物。
7.如权利要求1和2所述的组合物用于治疗阿尔茨海默病。
8.如权利要求1和2所述的组合物还可用于治疗以健忘为主症状的其他疾病,也可用于提高记忆力。
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