CN1321649C - 一种治疗女性痛经的组合物及制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用于治疗女性痛经的组合物及制备方法，该组合物由缬草、当归按一定比例配制而成，其步骤是：首先将缬草根和根状茎切段置入提取罐，采用隔水式水蒸汽直接蒸馏提取缬草挥发油；其次将当归药材切片置入提取罐，采用隔水式水蒸汽蒸馏提取当归挥发油；第三是取缬草油挥发油、当归挥发油混合；第四是上述混合物与辅料混合制成制剂，制剂形式可以是滴丸、片剂、胶囊、颗粒剂或膏剂。本发明配方合理、有效成分明确、疗效确定、起效迅速、无副作用，方法易于实施，可适用于大规模生产。

Description

一种治疗女性痛经的组合物及制备方法

技术领域

本发明属于治疗妇女每值经期或行经前后，出现小腹疼痛，或痛行腰骶，甚则剧痛以致昏厥者的妇科领域，更具体涉及一种治疗女性痛经的组合物，本发明还涉及该组合物的制备方法。

背景技术

本组合物主治伴随月经的疼痛。1978年全国妇女月经生理常数协作组，对全国29个省市、自治区的13万多妇女月经生理常数的调查分析，痛经者占33.19％，轻度占45.73％，中度占12.81％，重度占13.55％。

目前治疗痛经的药物主要有：

1、化学药物

A.避孕药

口服避孕药可通过抑制排卵降低血液中的前列腺素水平，达到治疗目的，90％患者能在服药周期解除症状。但无论短效、长效、速效等避孕药都可能导致患者出现类早孕反应、皮肤褐斑、白带增多、体重增加、精神抑郁、药物性皮疹和血压升高等不良反应。因此，除非需要同时避孕，一般不作为痛经的治疗手段。

B.前列腺素合成酶抑制剂

前列腺素合成酶抑制剂能减少前列腺素的释放，降低子宫肌收缩和痉挛程度而消除痛经。只要在疼痛发作前开始服用，持续2～3天即可，但须试用一个阶段，来确定每个人疗效最满意的药物种类及最适宜的剂量，试用调整阶段有时可长达半年。

常用的前列腺素合成酶抑制剂按其化学结构可分：①吲哚类：如消炎痛、炎痛静；②灭酸类：甲灭酸、氯灭酸、氟灭酸；③苯丙酸衍生物：布洛芬、萘普生(naproxan)；④保泰松类：保泰松或羟基保泰松。

该类药的主要副作用为消化道症状及过敏反应，有消化道溃疡及对上述药物过敏者禁忌。

C.钙拮抗剂

可阻止钙离子通过细胞膜，从而抑制子宫收缩，常用硝苯地平等。此类药主要副作用有血压下降、心动过速、血管扩张头痛和面部潮红，一般不作为首选药。

2、中成药

1.加味逍遥丸：

主要由丹皮、柴胡、当归、生白芍、白术、炒薄荷等组成。具有疏肝解郁，活血调经的功效，适用于痛经伴经前乳房胀痛，心烦易怒者。

2.益母草膏

主要由益母草、当归、生地、川芎等组成。具有活血通经之功效，适用于痛经伴经行不畅，色黯，有血块者。

3.元胡止痛片

主要组成为元胡。具有理气止痛的功效，适用于经行小腹胀痛，胸胁胀满者。

4.妇女痛经丸

主要由五灵脂、蒲黄、元胡、丹参组成。具有活血化瘀，通经止痛的功效。适用于经行小腹刺痛，经行不畅，血块多，血块排出后痛减者。

5、妇痛宁滴丸：由当归油制成，具有解痉止痛的功效，用于妇女痛经，产后宫缩痛，感染性腹泻引起的急性腔痛等。

上述各种治疗痛经的中成药存在有效成分不确切、质量控制水平低、服用剂量大、起效时间长、疗效不确定等缺陷。

本发明组合物由当归和缬草组成。当归：为伞形科植物当归Angelicasinensis(Oliv.)Diels的干燥根。缬草，拉丁名：Valeriana officinalis L.，为败酱科缬草属楂物缬草的干燥根及根茎。主产于四川、河北、河南、山东、山西、台湾、湖北等地。别名：鹿子草、拔地麻。其中主要含挥发油，油中主要成分为异戊酸龙脑酯(Bornyll sovalerate)、缬草酮(Valer-anone)等。并含有额草宁碱(Valerianine)、鬃草宁碱(缬草恰碱Chatinine)等生物碱，以及缬草酸(Valeric Acld)、异缬草酸(lsovalericAcid)等有机酸、鞣质、树脂、β-谷甾醇等。

现代药理证明：当归具有抑制血小板聚集、抗血栓、改善贫血及心肌缺血作用；此外还有扩张血管、促进免疫功能、降血脂、保肝、抗炎等作用。在临床上，当归主要用于血虚萎黄、眩晕心悸，月经不调，经闭痛经，虚寒腹痛，痈疽疮疡，风湿痹痛等。动物实验证明，当归对子宫具有抑制兴奋、加强收缩双重功能，当归对子宫的作用与其化学成分及子宫机能状态有关。当归所含挥发油成分对子宫有抑制作用；其水溶性非挥发性碱性成分则对子宫具有兴奋作用。当子宫内加压时，当归使其收缩力加强；不加压时，则有轻微抑制作用。采用小鼠扭体法，观察当归精油对醋酸所致小鼠疼痛及雌性小鼠痛经模型的影响；通过对正常和经缩宫素处理的小鼠离体子宫平滑肌实验表明：当归精油对雌性小鼠痛经模型和醋酸所致的小鼠疼痛，均有明显的抑制作用；对正常雌性小鼠离体子宫平滑肌和由缩宫素所致的子宫平滑肌剧烈收缩亦均有明显抑制作用。(刘琳娜，梅其炳，程建峰，等.当归精油治疗痛经的药理研究[J].解放军药学学报，2002，18(2)：77～78.)

缬草具有广泛的药理活性及悠久的用药历史，其用作镇静剂使用由来已久。近来，德国、荷兰、日本进行了大量的活性及化学分离研究，表明缬草较之目前常用的合成药如2，3-苯丙二嗪(benzodiazepines)具有镇静效果温和，无药物依赖性及成瘾性等优点。目前缬草已收载在许多欧洲国家的药典中。

Chevalier的研究表明，缬草镇静效果是确切的，其主要活性源于挥发油组分中。1966年Thies分离出缬草三酯，并通过实验证实了其镇静活性。Leathwood对缬草水提物活性的临床试验表明：缬草提取物可减少受试者入睡时间并客观上改善睡眠质量。Hendriks进一步说明缬草烯酸非常类似于戊巴比妥(镇静活性指标)，因而很可能也有抗抑郁活性而非肌肉松弛活性。对缬草化学和药理活性的广泛研究，为缬草药物进入临床奠定了前期基础，也为缬草药物的开发打下了坚实的依据。目前在德国药品市场上已有57种缬草成药作为镇静剂上市(单方和复方)。此外，缬草还具有解除平滑肌痉挛，扩张冠状动脉血管及肾，皮肤和横纹肌的血管等作用。它还能降低心肌耗氧量，对肠道平滑肌有松驰和解痉作用及对支气管平滑肌有一定的舒张效应。但在本发明前，无将缬草用于女性痛经治疗的研究报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种治疗女性痛经的组合物，其配方合理、有效成分明确、疗效确定、起效迅速、无明显副作用。

本发明的另一目的是提供一种制备治疗女性痛经组合物的方法，提取的有效成分确定、方法易于实施，可适用于大规模生产。

本发明药物由下列原料按重量份制成：

缬草1-95份    当归1-95份

本发明药物由下列原料按重量份制成：

缬草1-95份    当归1-95份

本发明组合物的配方较好的重量份比是：

缬草1-9份    当归1-9份

本发明药物的配方优选重量份比是：

缬草3份    当归1份

为了实现上述目的，本发明采取以下技术措施：

1、将秋后采集的缬草根和根状茎洗去泥砂，自然晾干至水分含量低于12％，剁成2-4cm段；

2、置入提取罐，采用隔水式水蒸汽蒸馏提取缬草挥发油。时间1-6小时，蒸汽压力为0.01-0.15mPa/cm²；

3、将蒸馏获得的缬草挥发油乙醇萃取2-4次，每次加1～5倍量的50～95％乙醇萃取1-4小时，每次萃取后静置至油-醇分离，合并醇相；

4、减压回收乙醇并静置待油-水分离，弃水后即得缬草挥发油；

5、将当归药材切成0.2-1cm片后置入提取罐，采用隔水式水蒸汽蒸馏提取当归挥发油，提取时间1-6小时，蒸汽压力为0.01-0.10mPa/cm²；

6、将蒸馏获得的当归挥发油进一步做真空精馏处理，留取沸点140℃-280℃的成分得当归挥发油；

7、取步骤4所得缬草挥发油与步骤6所得当归挥发油混合均匀，得到一种组合物；

8、以步骤7组合物根据临床需要制成胶囊、滴丸、片剂、颗粒剂、膏剂等剂型。

以本发明之组合物(缬草与当归的配比为3∶1)进行了对动物离体子宫的解痉作用，对动物在体子宫的解痉作用，对正常在体子宫运动的影响，镇静-镇痛作用及抗炎等方面的药效学研究。

在对离体子宫解痉作用的实验中，以生理盐水为阴性对照、以目前常用中药“妇痛宁滴丸”(有效成份为当归挥发油)为阳性对照，证实了本组合物对离体豚鼠、大鼠子宫平滑肌有显著的解痉作用。终浓度为10-160mg/L时，对缩宫诱导的豚鼠离体子宫持续痉挛呈现近乎直线的解痉量(浓度)-效关系。其始效时间约1/2min，5min时即接近或达到解痉作用于的高峰，ED₅₀(半效量)＝8.28mg/L，仅相当于“妇痛宁”的1/30。在此实验中，“妇痛宁”在降低痉挛子宫张力的同时，仍存在比较强烈的节律性收缩，而本组合物在降低痉挛子宫张力的同时已不存在明显的节律性收缩。

在对正常家兔在体子宫运动影响的实验中，以生理盐水为阴性对照，以“妇痛宁”为阳性对照，证实本组合物10mg/Kg可使子宫收缩的频率与压力明显下降，以子宫造瘘法观察本组合物对雌激素化家兔在体子宫正常运动的影响，资料显示：阴性对照组家兔给予生理盐水后子宫收缩的频率与压力虽有波动，但与基础值间无显著性差异(p＞0.05)；阳性对照组给予“妇痛宁滴丸”后子宫收缩的频率明显降低，与本身基础值及阴性对照组间存在显著性差异(p＜0.05)；10mg/Kg本组合物灌胃即可使子宫收缩的频率与压力明显下降，与本身基础值及阴性对照组间存在显著性或极显著性差异(p＜0.05或p＜0.01)。

在对在体子宫解痉作用的实验中，以“妇痛宁”为阳性对照，证实本组合物对缩宫素引起的小鼠在体子宫痉挛有突出的防治作用，并呈现有明显的剂量依赖性，其作用效果与“妇痛宁”对照组相比具有显著差异(p＜0.05)。

在镇静-镇痛作用实验中，以生理盐水为阴性对照组，以氯丙嗪为阳性对照组，结果证实灌胃本组合物的小鼠不仅自主活动次数明显减少，而且活动的强度也显著减弱，提示本组合物具有一定的镇静作用，并且该作用呈现有明显的剂量依赖性。采用扭体法观察本组合物的镇痛作用，结果显示本组合物具有一定的镇痛作用，并且该作用有明显的剂量依赖性关系。

以耳廓肿胀法观察本组合物的抗炎作用。结果显示本组合物具有一定的抗炎作用，并且该作用有明显的剂量依赖性关系。

我们还以本发明之组合物进行了毒理学研究：

A、毒性试验基本情况：

受试药物为本组合物，即缬草和当归(3∶1)，分别提取缬草挥发油和当归挥发油，加入适量橄榄油稀释。每只鼠灌胃容积均为0.4ml，死亡观察时间为7.2h。各组小鼠的共同反应为中枢神经系统抑制和外周血管扩张，随剂量的增加抑制加深而呈麻醉状态，乃至呼吸严重抑制而死亡。依寇氏法计算其LD₅₀为2149.5mg/Kg，本组合物预定临床使用剂量为1.5～2.0mg/Kg.次、4.5～6.0mg/Kg.日，所以安全系数非常大。

B、试验目的

观察本组合物一次性给予动物后所产生的急性毒性反应、死亡情况及急性致死的原因。根据LD₅₀、结合药效学试验测定的ED₅₀及临床用药剂量判断该新药的安全梯度，并指导长期毒性试验的剂量选择。

C、受试药物

1.缬草和当归按重量比3∶1分别提取挥发油，由华中科技大学同济医学院老年医药学研究所提供，批号为20040712。

2.药剂的配置与含量：上述缬草挥发油和当归挥发油混合，取混合油5.25g用橄榄油稀释为①号液30ml，浓度为175mg/ml，取①号液25.5ml用橄榄油4.5ml稀释为②号液，依此法顺序配制③、④、⑤、⑥号液。①～⑥号液的灌胃剂量分别为3.500g/Kg、2.975g/Kg、2.529g/Kg、2.149g/Kg、1.827g/Kg、1.553g/Kg(灌胃容积均为0.4ml)，每组间距为0.85。①～⑥组灌胃的对数剂量分别为log0.5441、0.4735、0.4029、0.3322、0.2671、0.1912g/Kg，间差i为0.0706。

3.实验动物：昆明种小鼠，雌雄各半，体重20.0±0.5g，每组10只，由卫生部生物制品研究所实验动物中心提供，许可证号SCXK2003-0005。小鼠按①～⑥～①～⑥随机抓取分组，每组雌雄各5只。

D、实验方法与结果

1.给药途径：采取与临床一致的灌胃给药。

2.预实验：灌胃给药观察48h，测得DM3.5g/Kg，DN1.6g/Kg。

3.剂量分组：根据实验结果DM3.5g/Kg，DN1.6g/Kg，DM/DN＝2±，总组数定为6，每组间距为0.85，每组剂量分别为3.500g/Kg、2.975g/Kg、2.529g/Kg、2.149g/Kg、1.827g/Kg、1.553g/Kg。

4.观察时限：灌胃给药后观察7天，死亡统计时限为72h。

5.实验条件：灌胃给药前禁食不禁水5h，雌雄分开5只/笼群养，自由摄食摄水，饲养室温20～22℃，湿度40％。

6.灌药后实验鼠的反应：药剂灌胃初始数小时内各组鼠均呈现不同程度的抑制状态，不摄食摄水，少动甚至瘫卧，耳廓及尾显著充血。2.975g/Kg以上剂量组部分鼠呈现麻醉状态，呼吸缓慢而不规则，骨骼肌松弛，随剂量增加发生比例越高、情况越严重，大多数死亡时间发生在18～48h，死亡鼠解剖心、肺、肝、肾、胃肠及脑肉眼未见明显异常。60h后未再发生死亡现象。72h起1.553g/Kg组鼠已接近活动正常，2.529g/Kg以下剂量组尚存活鼠也开始恢复活动摄食摄水。

7.动物死亡情况：

死亡时间	死亡只数
							3.500g/Kg	2.975g/Kg	2.529g/Kg	2.149g/Kg	1.827g/Kg	1.553g/Kg
	0-12h	4	3	0	0	0							0
12-24h							2	3	1	1	2	0
	24-36h	3	1	2	1	0							0
36-48h							1	1	2	1	0	0
	48-60h	0	1	2	1	1							0
60-72h							0	0	0	1	1	0
	＞72h	0	0	0	0	0							0

死亡与性别无明显关系，死亡原因为中枢神经系统高度抑制导致呼吸循环停止。

8.实验资料及统计学处理(寇氏法)：

药物剂量(g/Kg)	对数剂量(logg/Kg)	动物数(只)	死亡数(只)	死亡率(Pi)	Xi+xi+1	Pi+1-pi	(Xi+xi+1)×(Pi+1-pi)
								3.500	0.5441	10	10	1.0			∑0.6647
2.975	0.4735	10	9	0.9	1.0176	0.1	0.1018
								2.529	0.4029	10	7	0.7	0.8764	0.2	0.1753
2.149	0.3322	10	5	0.5	0.7351	0.2	0.1470
								1.827	0.2617	10	4	0.4	0.5939	0.1	0.0594
1.553	0.1912	10	0	0.0	0.4529	0.4	0.1812

注：X_i+x_i+1相邻两组对数浓度和；P_i+1-p_i相邻两组死亡率差

半数致死量LD₅₀计算——

lgLD₅₀＝1/2∑(X_i+x_i+1)(P_i+1-p_i)

＝1/2(0.6647)

＝0.33235

LD₅₀＝lg^-10.33235

＝2.1495(g/Kg)

lgLD₅₀的标准误SlgLD₅₀计算——

$\mathrm{SlgL}{D}_{50}=d\sqrt{\mathrm{\Σ}{p}_i(1-p_i)/(n_i-1)}$

$=0.0969\×\sqrt{0/9+0.09/9+0.21/9+0.25/9+0.24/9+0/9}$

$=0.0969\×0.2963$

$=0.0287$

(d：相邻两组对数浓度差；n_i-1：组自由度)

LD₅₀的95％可信限＝lg^-1(lgLD₅₀±1.96 SlgLD₅₀)

＝lg^-1(0.33435±0.05625)

＝lg^-1(0.2781～0.3906)

＝1.8972～2.4582(g/Kg)

9.急性毒性试验小结：

本组合物小鼠灌胃的LD₅₀值为2.1495g/Kg；

lgLD₅₀的标准误为0.0287；

LD₅₀的95％可信限为1.8972～2.4582(g/Kg)

本发明与现有技术相比，具有以下优点和效果：

1.采用缬草与当归组成组合物，提取有效成分——缬草挥发油和当归挥发油，效果确切，制剂服用剂量小于大多数现有药品，易于被患者所接受；

2.经实验显示，本发明得到的制剂起效时间短，适合痛经患者快速止痛的要求；

3.实验证实，本发明得到的制剂毒副作用极小，与现有的化学药品比较适合女性用于痛经治疗；

4.缬草与当归组合成组合物对子宫平滑肌的解痉作用明显优于当归或缬草的单独作用；

5.由于缬草具有镇静、安神作用，对于改善痛经患者的精神紧张及睡眠具有显著效果，而这一效果是目前已有治疗痛经产品所缺乏的。

具体实施方式

实施例1：

缬草3份当归1份

其制备步骤是：

1、将秋后采集的鲜缬草根和根状茎洗去泥砂，自然晾干至水分含量低于12％，并剁成2-4cm段；

2、置入提取罐，采用隔水式水蒸汽蒸馏提取缬草挥发油。时间3小时，蒸汽压力为0.06mPa/cm²；

3、将蒸馏获得的缬草挥发油乙醇萃取2次，每次加3倍量的70％乙醇萃取2小时，每次萃取后静置至油-醇分离，合并醇相；

4、减压回收乙醇并静置待油-水分离，弃水后即得精制的缬草挥发油。

5、将当归药材切成0.2-0.5cm片后置入提取罐，采用隔水式水蒸汽蒸馏提取当归挥发油，提取时间2小时，蒸汽压力为0.08mPa/cm²；

6、将蒸馏获得的当归挥发油进一步做真空精馏处理，留取沸点160℃的成分即得精制当归挥发油；

7、取步骤4所得缬草挥发油与步骤6所得当归挥发油混合，得混合油，混合油中加入吐温80(混合油和吐温80重量比为1∶1)，混合均匀，得混合物；

8、取聚乙二醇6000(聚乙二醇6000和步骤7所得混合物的重量比为3.5∶1)在80℃融化，加入步骤7所得混合物充分混合均匀；

9、将步骤8混合物置于滴丸设备，制成滴丸，每丸重20mg。

实施例2(用量为重量份)

缬草9份  当归1份

制备步骤与实施例1相同。

实施例3(用量为重量份)

缬草1份，当归3份

制备步骤与实施例1相同。

实施例4(用量为重量份)

缬草6份，当归1份

制备步骤与实施例1相同。

实施例5(用量为重量份)

缬草20份，当归1份

制备步骤与实施例1相同。

实施例6(用量为重量份)

缬草9份，当归1份

制备步骤与实施例1相同。

实施例7(用量为重量份)

缬草3份，当归1份

制备步骤与实施例1相同。

实施例8(用量为重量份)

缬草1份，当归1份

制备步骤与实施例1相同。

Claims (10)

1、一种用于治疗女性痛经的组合物，该组合物为下述原料中提取的挥发油制成，其特征在于制成该组合物的原料由下述组份按重量份组成：

缬草1-95份    当归1-95份

2、根据权利要求1所述的一种用于治疗女性痛经的组合物，该组合物为下述原料中提取的挥发油制成，其特征在于制成该组合物的原料由下述组份按重量份组成：

缬草1-50份    当归1-50份

3、根据权利要求1所述的一种用于治疗女性痛经的组合物，该组合物为下述原料中提取的挥发油制成，其特征在于制成该组合物的原料由下述组份按重量份组成：

缬草20份    当归1份

4、根据权利要求1所述的一种用于治疗女性痛经的组合物，该组合物为下述原料中提取的挥发油制成，其特征在于制成该组合物的原料由下述组份按重量份组成：

缬草9份    当归1份

5、根据权利要求1所述的一种用于治疗女性痛经的组合物，该组合物为下述原料中提取的挥发油制成，其特征在于制成该组合物的原料由下述组份按重量份组成：

缬草6份    当归1份

6、根据权利要求1所述的一种用于治疗女性痛经的组合物，该组合物为下述原料中提取的挥发油制成，其特征在于制成该组合物的原料由下述组份按重量份组成：

缬草3份    当归1份

7、根据权利要求1所述的一种用于治疗女性痛经的组合物，该组合物为下述原料中提取的挥发油制成，其特征在于制成该组合物的原料由下述组份按重量份组成：

缬草1份    当归1份

8、根据权利要求1所述的一种用于治疗女性痛经的组合物，该组合物为下述原料中提取的挥发油制成，其特征在于制成该组合物的原料由下述组份按重量份组成：

缬草1份    当归3份

9、一种实现权利要求1所述的制备治疗女性痛经的组合物的方法，它包括下列步骤：

A、将秋后采集的鲜缬草根和根状茎洗去泥砂，自然晾干至水分含量低于12％，并剁成2-4cm段；

B、置入提取罐，采用隔水式水蒸汽蒸馏提取缬草挥发油。时间1-6小时，蒸汽压力为0.01-0.15mPa/cm²；

C、将蒸馏获得的缬草挥发油乙醇萃取2-4次，每次加1～5倍量的55～95％乙醇萃取1-4小时，每次萃取后静置至油-醇分离，合并醇相；

D、减压回收乙醇并静置待油-水分离，弃水后即得缬草挥发油。

E、将当归药材切成0.2-1cm片后置入提取罐，采用隔水式水蒸汽蒸馏提取当归挥发油，提取时间1-6小时，蒸汽压力为0.01-0.10mPa/cm²；

F、将蒸馏获得的当归挥发油进一步做真空精馏处理，留取沸点140℃-280℃的成分即得当归挥发油。

G、取步骤D所得缬草挥发油与步骤F所得当归挥发油混合即得；

10、根据权利要求1所述的一种用于治疗女性痛经的组合物，其特征在于该组合物为原料中提取的挥发油制成以下剂型：

a、滴丸；

b、片剂：

c、颗粒剂；

d、胶囊；

e、膏剂。