CN101491611A - 六月雪提取物的制备方法及其应用 - Google Patents
六月雪提取物的制备方法及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101491611A CN101491611A CNA2008100566536A CN200810056653A CN101491611A CN 101491611 A CN101491611 A CN 101491611A CN A2008100566536 A CNA2008100566536 A CN A2008100566536A CN 200810056653 A CN200810056653 A CN 200810056653A CN 101491611 A CN101491611 A CN 101491611A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- extract
- serissa foetida
- ethanol
- concentrated solution
- serissa
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
本发明涉及一种六月雪提取物的制备方法及其应用,将六月雪药材经30%~60%的乙醇提取、醇沉过柱后可得到六月雪提取物,本发明提取物与现有技术相比,六月雪提取物中的抗肝炎有效成分齐墩果酸、乌索酸等三萜类成分转移率得到较大的提高,最终药用提取物纯度较现有技术好,用药量大大减少。
Description
技术领域
本发明涉及一种民间植物六月雪提取物的制备方法及其应用,属于天然药物有效成分制备领域。
背景技术
六月雪又名白马骨、满天星,为茜草科植物六月雪Serissa Serissoides(DC.)Druce的干燥全草,分布于我国东南部及东部各省区,为民间常用药,早在《本草拾遗》中就有记载;能活血、凉血、疏肝泄湿、消肿止痛。主要用于急慢性肝炎、黄疸、流行性腮腺炎、肾性水中、血尿及高血压等症。据药理及临床报道,六月雪对急性黄疸型肝炎及高血压有明显的疗效,并物毒性反应。六月雪含车叶草苷、齐墩果酸、齐墩果酸乙酰化物、乌索酸、β-谷甾醇等成分,车叶草苷具有降压作用,而齐墩果酸、乌索酸等甾体类化物则为本品治疗肝炎的主要有效成分。
现阶段,对六月雪用于治疗肝炎类疾病的提取物中,普遍采用水煎煮提取法,煎煮后所得到的提取物直接用药或者经过简单的醇沉处理。由于六月雪中治疗肝炎的有效成分齐墩果酸等一些甾体类化合物极性较小,用水煎煮提取损失大,提取不完全,且提取物中存有很多一些无效的水溶性成分,直接用药,给药量大。
发明内容
本发明的目的在于提供一种六月雪提取物的制备方法。与现有技术相比,本发明采用30%~60%的乙醇为提取溶媒,经醇沉和树脂吸附除杂后得到六月雪提取物。
具体地,本发明提取六月雪有效成分的方案为:六月雪干燥全草经粉碎成粗粉,以30%~60%的乙醇为提取溶媒,回流提取2~4次,过滤合并乙醇提取液,减压浓缩后,往浓缩液中加入95%的乙醇,边加边充分搅拌,调节药液乙醇量,使最终药液中乙醇浓度为50%~70%,静置,室温放置约24小时,离心或过滤,取上清液或滤液,减压浓缩至浓缩液相对密度为1.05~1.30,无醇味,浓缩液上已处理好的大孔吸附树脂柱,先用低于15%的乙醇洗脱至洗脱液颜色变淡,弃此部分洗脱液,改用大于60%的乙醇洗脱4~8个柱体积,收集此部分洗脱液,合并,减压浓缩,干燥,粉碎,得六月雪提取物。
本发明中,提取溶媒乙醇优选50%的乙醇,提取次数为3次,每次提取溶媒用量为10倍、8倍、8倍。
洗脱大孔吸附树脂柱时,起始洗脱溶媒优选10%的乙醇,第二次洗脱溶媒优选75%的乙醇。
本发明技术与现有技术相比,六月雪中的抗肝炎有效成分齐墩果酸、乌索酸等三萜类成分转移率得到较大的提高,最终药用提取物纯度较现有技术好,用药量大大减少。
为说明上述有益效果,可以从实验数据加于说明,需要说明的是,下述的对比方案仅是为了说明本发明所取得的进步,而不是为了限制本发明。
1、有效成分的转移率
取100g干燥六月雪全草,分别采用水煎煮提取、50%的乙醇回流提取方案(即本发明提取方案),对比其中齐墩果酸、乌索酸的转移率,结果见表1
表1不同方案提取六月雪的结果比较
从上表结果可以看出,采用50%的乙醇回流提取法,其中乌索酸和齐墩果酸的提取转移率较水煎煮法明显要高,本发明六月雪最终提取物中,乌索酸和齐墩果酸的绝对量较水煎煮提取法高,而浸膏量却明显要少,两成分在浸膏中的含量为:水煎煮法,乌索酸0.164%,齐墩果酸0.0504%;本发明提取物,乌索酸0.76%,齐墩果酸0.26%。
2、体外抗HBV活性
试药:本发明六月雪提取物、六月雪水煎煮提取物。
细胞株:2.2.15细胞株:中国医学科学研究院药物研究所药理室提供。
试剂:RPMI1640培养基,日本日水制药株式会社;乙型肝炎s抗体(HBsAg)、乙型肝炎e抗体(HBeAg)ELISA检测试剂盒,华美生物工程公司生产。
将本发明提取物用双蒸水配成200μg/mL的水溶液,过0.22μm的微孔滤膜除菌,4℃保存,用时用RPMI1640稀释成200、160、100、50、25、13μg/mL的溶液。将2.2.15细胞解冻后常法接种到96孔板上,37℃5%CO2条件下培养4天,换含叶下珠13、25、50、100、160、200μg/mL的RPMI1640完全培养基,每个浓度接种6孔,继续培养10天后测定(第5天时换液1次),结果取平均值,求出对细胞无明显毒性作用的最高药物浓度为160μg/mL,选用对细胞基本无毒性的浓度80μg/mL,六月雪水煎煮提取物选用260μg/mL浓度(两个给药剂量折合生药量计算均为890μg药材/mL),均设4个复孔,并设不加药物的对照,结果取平均值。将2.2.15细胞按常规方法传入24孔板,5%CO2条件下培养4天后,各孔分别换以不同浓度药物培养基,继续培养10天并分别收集药物作用后5天和10天的培养上清液,分别作HBsAg和HBeAg测定。操作按试剂盒说明书进行,结果见表2
表2 六月雪提取物对2.2.15细胞HBsAg和HBeAg的体外抑制作用
上表结果表明,六月雪提取物对HepG2.2.15细胞株中HBV的HBeAg的表达均具有一定的抑制作用,在生药剂量相等的情况下,本发明精制提取物的体外抑制作用要强于水煎煮提取物。
3、对CCl4所致肝损伤保护作用
将40只小鼠随机分为对照组、CCl4模型组、本发明提取物组(给药量:0.27g提取物/kg,相当于原药材3g/kg)、六月雪水煎煮提取物组(1.5g水煎物/kg,相当于原药材5g/kg),每组10只。实验室饲养2天后,除对照组及模型组小鼠用蒸馏水0.5ml/鼠灌胃外,其余各组均按剂量灌胃,1次/天,连续1周。末次给药后2h,除对照组小鼠外,均按10ml/kg一次性腹腔注射0.1%CCl4花生油溶剂,禁食不禁水,16h后眼眶取血,离心取血清,测定血清谷丙转氨酶(ALT)、血清谷草转氨酶(AST)的活性,结果见表3,本发明提取物对CCl4致小鼠肝损伤血清ALT、AST活性的升高有明显的拮抗作用。
表3六月雪提取物对CCl4致小鼠肝损伤的影响(x±s)
与模型组相比,*p<0.05,**p<0.01
从上表结果可以看出,六月雪提取物对由CCl4所致的肝损伤的ALT、AST升高有明显的抑制作用,其中本发明提取物的作用效果较水煎煮提取物强(按生药量计,六月雪水煎煮提取物给药量大于本发明提取物给药量,而降酶效果不如本发明方法所得的提取物)。
本发明的再一目的在于提供一种含有依本发明方法所得六月雪提取物的制剂。本发明提取物可以与其它具有类似作用的药物联合使用组成复方制剂,类似的其它药物可以是化学药,也可以是其它中药提取物,如可以在本发明提取物中加入拉米夫定,或将本发明提取物与青叶胆提取物、黄芪提取物等合用以用于制备抗乙型肝炎和治疗急慢性肝损伤的药物。
本发明制剂中,所述的口服制剂可以是以胶囊或片剂形式或液体形式给药的口服制剂。本发明中除含有活性成分六月雪提取物外,还含有其它制药上可接受的赋形剂,这些赋形剂可以是填充剂、粘合剂、润滑剂、润湿剂、崩解剂、表面活性剂、骨架材料、阻滞剂等中的一种或多种的组合,这些赋形剂为本领域技术人员所熟知的。
本发明的还一目的在于提供本发明所得的六月雪提取物在制备具有治疗肝炎和急慢性肝损伤作用的药物中的应用。
具体实施例
以下从本发明具体制备实施例来说明本发明
实施例1
取六月雪干燥全草10kg,粉碎成粗粉,以50%的乙醇回流提取3次,每次溶剂用量为100L、80L、80L,提取时间分别为2小时、1小时、1小时,过滤,合并提取液,60℃下减压浓缩至药液约10L,加95%的乙醇,调节药液乙醇量,使药液乙醇浓度为60%,室温放置24小时,过滤,取滤液,60℃减压浓缩,至相对密度为1.15,无醇味,上已处理好的HP-20大孔吸附树脂,先用10%的乙醇洗脱,至洗脱液颜色变淡,弃10%的乙醇洗脱部分,改用75%的乙醇洗脱5个柱体积,收集75%的乙醇洗脱液,合并,60℃减压浓缩,干燥得六月雪提取物913g。RP-HPLC法测定乌索酸含量为0.84%,齐墩果酸含量为0.29%。
实施例2
取六月雪干燥全草10kg,粉碎成粗粉,以30%的乙醇回流提取3次,每次溶剂用量为100L、80L、80L,提取时间分别为2小时、1小时、1小时,过滤,合并提取液,60℃下减压浓缩至药液约9L,加95%的乙醇,调节药液乙醇量,使药液乙醇浓度为60%,室温放置24小时,过滤,取滤液,60℃减压浓缩,至相对密度为1.20,无醇味,上已处理好的AB-8型大孔吸附树脂,先用15%的乙醇洗脱,至洗脱液颜色变淡,弃10%的乙醇洗脱部分,改用80%的乙醇洗脱5个柱体积,收集80%的乙醇洗脱液,合并,60℃减压浓缩,干燥得六月雪提取物1120g。RP-HPLC法测定乌索酸含量为0.74%,齐墩果酸含量为0.25%。
Claims (5)
1、一种六月雪提取物,其特征在于是通过如下方法得到:
(1)取六月雪干燥茎叶,粉碎,以30%~60%的乙醇回流提取,过滤,合并提取液,减压浓缩至每毫升药液含0.9~1.1g药材,得浓缩液I;
(2)在步骤(1)中所得的浓缩液I中加95%的乙醇,充分搅拌,调节浓缩液乙醇含量,使最终药液的乙醇浓度为50%~70%,室温静置,离心,取上清液,上清液减压浓缩至无醇,至相对密度为1.05~1.30,得浓缩液II;
(3)浓缩液II上已处理好的大孔吸附树脂柱,先以低于15%的乙醇洗脱至洗脱液颜色变淡,改用大于60%的乙醇洗脱,收集此部分乙醇洗脱液,合并,减压浓缩,干燥,粉碎,得六月雪提取物。
2、如权利要求1所述的六月雪提取物,其特征是所述的六月雪提取物中,乌索酸的含量不低于0.75%,齐墩果酸的含量不低于0.25%。
3、一种含有如权利含有依权利要求1所述的六月雪提取物的药物。
4、如权利要求3所述的药物,其特征是主要为口服药物。
5、如权利要求1所述的六月雪提取物在制备具有治疗乙型肝炎及急慢性肝损伤药物中的应用。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN2008100566536A CN101491611B (zh) | 2008-01-23 | 2008-01-23 | 六月雪提取物的制备方法及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN2008100566536A CN101491611B (zh) | 2008-01-23 | 2008-01-23 | 六月雪提取物的制备方法及其应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN101491611A true CN101491611A (zh) | 2009-07-29 |
CN101491611B CN101491611B (zh) | 2012-06-06 |
Family
ID=40922511
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN2008100566536A Active CN101491611B (zh) | 2008-01-23 | 2008-01-23 | 六月雪提取物的制备方法及其应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN101491611B (zh) |
Cited By (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102675403A (zh) * | 2011-03-09 | 2012-09-19 | 雷海民 | 抗乙肝药物lqc-x的合成及其应用 |
CN103859505A (zh) * | 2014-03-31 | 2014-06-18 | 哈尔滨升益生物科技开发有限公司 | 一种六月雪舒肝活血汤料及其生产方法 |
CN105748652A (zh) * | 2016-04-01 | 2016-07-13 | 武汉理工大学 | 一种治疗痛风的六月雪胶囊及其制备方法 |
CN109619661A (zh) * | 2019-01-11 | 2019-04-16 | 广西中烟工业有限责任公司 | 一种六月雪提取物的制备方法及其在卷烟中的应用 |
CN111759846A (zh) * | 2020-07-27 | 2020-10-13 | 大理大学 | A环双键齐墩果酸用于制备防治病毒性乙肝的医药用途 |
CN111759847A (zh) * | 2020-07-27 | 2020-10-13 | 大理大学 | 共轭双烯齐墩果酸甲酯用于制备抗病毒性乙肝药物的用途 |
CN111759848A (zh) * | 2020-07-27 | 2020-10-13 | 大理大学 | 3-羰基齐墩果酸用于制备防治病毒性乙肝药物的用途 |
CN111789850A (zh) * | 2020-07-27 | 2020-10-20 | 大理大学 | 双羟基烯酮齐墩果酸用于制备抗病毒性乙肝药物的用途 |
CN111789849A (zh) * | 2020-07-27 | 2020-10-20 | 大理大学 | 脱水烯酮齐墩果酸用于制备抗病毒药物的用途 |
CN111888363A (zh) * | 2020-07-27 | 2020-11-06 | 大理大学 | 二羟基烯酮齐墩果酸甲酯的制备及其抗病毒用途 |
CN111888364A (zh) * | 2020-07-27 | 2020-11-06 | 大理大学 | 异环双烯羟甲基齐墩果烷用于制备抗病毒性乙肝药物的用途 |
CN111904964A (zh) * | 2020-07-27 | 2020-11-10 | 大理大学 | 双烯甲磺酰氧基齐墩果烷醇的制备及其抗乙肝的医药用途 |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1129086A (zh) * | 1995-02-15 | 1996-08-21 | 董永弟 | 一种含六月雪的保健饮料及生产方法 |
CN1454630A (zh) * | 2003-01-24 | 2003-11-12 | 高俊 | 治疗中耳炎的特效药 |
-
2008
- 2008-01-23 CN CN2008100566536A patent/CN101491611B/zh active Active
Cited By (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102675403A (zh) * | 2011-03-09 | 2012-09-19 | 雷海民 | 抗乙肝药物lqc-x的合成及其应用 |
CN102675403B (zh) * | 2011-03-09 | 2014-08-13 | 雷海民 | 抗乙肝药物lqc-x的合成及其应用 |
CN103859505A (zh) * | 2014-03-31 | 2014-06-18 | 哈尔滨升益生物科技开发有限公司 | 一种六月雪舒肝活血汤料及其生产方法 |
CN105748652A (zh) * | 2016-04-01 | 2016-07-13 | 武汉理工大学 | 一种治疗痛风的六月雪胶囊及其制备方法 |
CN105748652B (zh) * | 2016-04-01 | 2020-04-21 | 武汉理工大学 | 一种治疗痛风的六月雪胶囊及其制备方法 |
CN109619661A (zh) * | 2019-01-11 | 2019-04-16 | 广西中烟工业有限责任公司 | 一种六月雪提取物的制备方法及其在卷烟中的应用 |
CN111759846A (zh) * | 2020-07-27 | 2020-10-13 | 大理大学 | A环双键齐墩果酸用于制备防治病毒性乙肝的医药用途 |
CN111759847A (zh) * | 2020-07-27 | 2020-10-13 | 大理大学 | 共轭双烯齐墩果酸甲酯用于制备抗病毒性乙肝药物的用途 |
CN111759848A (zh) * | 2020-07-27 | 2020-10-13 | 大理大学 | 3-羰基齐墩果酸用于制备防治病毒性乙肝药物的用途 |
CN111789850A (zh) * | 2020-07-27 | 2020-10-20 | 大理大学 | 双羟基烯酮齐墩果酸用于制备抗病毒性乙肝药物的用途 |
CN111789849A (zh) * | 2020-07-27 | 2020-10-20 | 大理大学 | 脱水烯酮齐墩果酸用于制备抗病毒药物的用途 |
CN111888363A (zh) * | 2020-07-27 | 2020-11-06 | 大理大学 | 二羟基烯酮齐墩果酸甲酯的制备及其抗病毒用途 |
CN111888364A (zh) * | 2020-07-27 | 2020-11-06 | 大理大学 | 异环双烯羟甲基齐墩果烷用于制备抗病毒性乙肝药物的用途 |
CN111904964A (zh) * | 2020-07-27 | 2020-11-10 | 大理大学 | 双烯甲磺酰氧基齐墩果烷醇的制备及其抗乙肝的医药用途 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN101491611B (zh) | 2012-06-06 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN101491611B (zh) | 六月雪提取物的制备方法及其应用 | |
AU658614B2 (en) | Pharmaceutical compositions for the treatment of skin disorders | |
CN101721488B (zh) | 一种治疗肝病的药物组合物及其制备方法 | |
CN101313927A (zh) | 青蒿总黄酮及其组合物的制备方法与医药用途 | |
CN107206042B (zh) | 预防或治疗肝肾损伤相关疾病的药物或保健品及其应用 | |
CN1923194B (zh) | 一种秦皮香豆素组合物 | |
CN104173451A (zh) | 一种天然药物组合物在降血糖药品及保健食品中的应用 | |
WO2013155995A1 (zh) | 一种调节血脂的红曲葛根药物组合及其制备方法 | |
CN1985891B (zh) | 一种具有保肝作用的中药有效部位复方制剂及其制备方法 | |
CN100477996C (zh) | 虎眼万年青提取物及其制备方法、药物组合物以及用途 | |
CN100431566C (zh) | 一种中药组合物及其制备方法和应用 | |
CN104042647B (zh) | 矮地茶总黄酮在制备保护肝脏药物中的应用 | |
CN106361811A (zh) | 一种通脉药物组合物及其制备方法 | |
JP2005194256A (ja) | 肝臓病治療用医薬組成物及びその製造方法 | |
CN109966339A (zh) | 一种具有抗hbv病毒作用的苦豆子有效部位及制法与应用 | |
CN101036684B (zh) | 一种板蓝根提取物及其提纯方法和药物组合物 | |
CN101829264A (zh) | 治疗高尿酸血症及相关疾病的药物组合物及制法与用途 | |
CN110025659A (zh) | 一种具有抗hbv作用的中药活性部位及制备方法与应用 | |
CN1215876C (zh) | 一种抗痛风药物组合物及其制备方法 | |
CN1839931B (zh) | 一种治疗心脑血管疾病的药物组合物及其制备方法 | |
CN101147757A (zh) | 一种用于治疗慢性乙型肝炎的中药组合物及其制备方法 | |
CN104510857B (zh) | 一种用于降脂的中药有效部位组合物及其制剂 | |
CN1331475C (zh) | 治疗胆囊炎、胆石症的药物及其制备方法 | |
CN101375951B (zh) | 一种治疗乙型肝炎的药物组合物 | |
CN103239569B (zh) | 蔓茎堇菜在制备治疗病毒性肝炎药物中的应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant |