CN104173451A - 一种天然药物组合物在降血糖药品及保健食品中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种以啤酒花总黄酮、西洋参茎叶皂苷及桑叶提取物为主要成分的组合物，该组合物具有有助于降血糖作用。本发明组合物具有成分明确、服用剂量小、是一种安全有效的有助于降血糖的组合物，并且本发明组合物较啤酒花总黄酮、西洋参茎叶皂苷、桑叶提取物及任意两者的组合物具有更强的药理活性，体现了中药组合物的协同作用，可用于制备具有有助于降血糖作用的药品、保健食品和食品。

Description

一种天然药物组合物在降血糖药品及保健食品中的应用

技术领域

本发明涉及一种有助于降血糖作用的药物组合物及制备方法，属于医药和食品领域。

背景技术

糖尿病是以胰岛素分泌绝对或相对不足，糖代谢紊乱为主要表现的内分泌代谢性疾病，是当前危害人类健康的常见病，已成为人类的第5位死亡杀手，表现为体重下降、疲乏无力和易饥多食，容易发生心血管、脑血管、肾、眼底视网膜及神经系统的慢性病变，甚至造成失明和致残，严重影响健康和工作、生活能力。现代随着生活条件的改变，糖尿病患者人数急剧上升，目前我国糖尿病患者总数已成为世界上糖尿病人数最多的国家之一。糖尿病的发生发展是一个缓慢而隐匿的过程，若早期发现血糖增高，并及时地进行预防治疗，可以从源头上控制糖尿病的继续发展。按中医理论，糖尿病属于消渴的范畴。古代医术多有记载，如《素问·奇病论篇》、《太平圣惠方》、《外台秘要·消中消渴肾消》等。传统中草药治疗糖尿病上作用温和持久、副作用小，且作用机理常为多靶点、多效应、多功能的综合作用。在与糖尿病长期抗争的过程中，一些具有降血糖、增强身体抵抗力的中药，因其药食同源、无毒副作用和便宜易得而备受关注。对于这类中药及其组方的开发将会大大造福人类。本发明就是基于以上状况，利用药食同源的原料制成的有助于降血糖的保健食品或药品，具有广阔的市场前景。

　    啤酒花总黄酮是从桑科植物啤酒花 Humuluslupulus L.中经过提取纯化而得。啤酒花味苦、性平，有健胃、消食、利尿、安神、止咳化痰之功效, 用于治疗食欲不振、腹胀、肺结核、胸膜炎、失眠、癔病、浮肿、膀胱炎等。啤酒花主要含有树脂类、黄酮类及多酚类成分，黄酮类主要含有紫云英苷、槲皮素、异槲皮素、芦丁、金丝桃苷、山柰酚苷、黄腐醇、去甲基黄腐醇、黄盔芹素等。啤酒花中含有的黄腐酚对实验性小鼠血糖、甘油三酸酯、饮水量、白脂肪组织具有显著的降低作用，提示黄腐酚具有预防、治疗动脉样硬化和糖尿病的作用（杨小兰等，2007，食品科学）；刘玉梅报道了啤酒花中的苦味成分β-酸及六氢β-酸具有降血糖的作用（刘玉梅等，2009，食品科学）。

桑叶提取物为桑科植物桑Morus alba L. 的干燥叶采用稀乙醇提取得到。现代研究发现桑叶化学成分有黄酮、生物碱、多糖类、氨基酸等。《本草纲目》记载桑叶乃手、足阳明之药，治劳热咳嗽，明目长发，止消渴。日本古书《吃茶养生记》也记载桑叶有改善“饮水病”的作用。《本草备要》记载桑叶代茶止消渴。国内外研究资料证实，生物碱和多糖是桑叶中主要的降血糖成分。桑叶的降血糖作用是通过两个途径实现的：一是通过生物碱1-脱氧野尻霉素对二糖类分解酶活性产生抑制作用，从而抑制小肠对双糖的吸收，降低食后血糖的高峰值（Kimura，1995）；二是通过桑叶生物碱fagomine及桑叶多糖促进β细胞分泌胰岛素，而胰岛素可以促进细胞对糖的利用、肝糖原合成以及改善糖代谢，最终达到降血糖的效果（陈福君等，1996）。从桑叶中分离出的多羟基去甲莨菪碱具有很强的糖苷酶抑制作用（Asano等，1994）； N-Me-DNJ、GAL-DNJ和fagomine都可显著地降低血糖水平，其中GAL-DNJ和fagomine降血糖作用最强（Kimura等，1995）。桑叶在脱皮甾酮对四氧嘧啶引起的大鼠糖尿病；或肾上腺素、胰高血糖素、抗胰岛素血清引起的小鼠高血糖症均有降血糖作用。脱皮甾酮促进葡萄糖转变为糖原，但不改变正常动物的血糖水平。有人认为桑叶中所含某些氨基酸能刺激胰岛素的分泌以降低血糖。很多研究证实桑叶降血糖作用与黄酮类化合物密切相关。陈玲玲报道桑叶黄酮能明显降低糖尿病小鼠糖化血清蛋白，促进血清胰岛素、肝己糖激酶的分泌和肝糖元的合成，提高肝SOD活力、降低肝MDA含量和促进体质量恢复。朱玉霞报道了桑叶黄酮能增加高脂喂养2型糖尿病大鼠胰岛素敏感性，同时具有降低血脂的作用。薛长勇报道桑叶总黄酮具有抑制α-糖苷酶活性的作用。桑叶中黄酮化合物对体外蛋白糖基化有抑制作用；桑叶总黄酮也能够抑制双糖酶活性，从而具有显著的降血糖作用。俞灵莺等报道给糖尿病大鼠灌胃桑叶总黄酮后，可显著降低餐后双糖的消化、葡萄糖的吸收。同时，桑叶为可食用的资源，没有毒副作用，10%桑叶注射液小鼠1次腹腔注射的安全用量相当于人用量的250倍。以相当于人用量的60倍连续给小鼠腹腔注射21天，对肝、肾、肺等无损害。

西洋参茎叶皂苷是从五加科植物西洋参Panax qujnquefolium L.的茎叶中提取分离得到。西洋参茎叶皂苷具有调脂降糖、改善心肌缺血、促血管新生、抑制炎性因子释放、降低心肌耗氧量的作用。现代研究表明，西洋参茎叶皂苷具有抗失血性休克及对心脏的保护作用，西洋参茎叶皂苷50-100mg/kg，能显著减少应激状态下坏死心肌面积，降低血清磷酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)的活性，表明它对心肌坏死有保护作用（关利新，中药药理与临床，2004）；西洋参茎叶皂苷100mg/kg和200mg/kg可明显降低高脂血症大鼠血小板聚集率，并升高血清SOD 活性，说明西洋参茎叶皂苷有抗血小板聚集作用，防治动脉粥样硬化；西洋参茎叶皂苷可降低血清中丙氨酸转氨酶的活性和丙二醛( MDA)含量下降，增加肝糖原含量和谷胱甘肽过氧化酶的活性，以减轻四氯化碳引起的大鼠肝损伤（郑毅男，吉林农业大学学报）；张颖等观察西洋参茎叶总皂苷对脂肪细胞糖脂代谢及胰岛素抵抗信号转导的影响，结果发现西洋参茎叶总皂苷能够促进脂肪细胞利用葡萄糖、抑制TNF－α的促脂解作用，从而调节糖脂代谢（张颖，中国中西医结合杂志，2010）；殷惠军等观察西洋参茎叶总皂苷对四氧嘧啶高血糖大鼠血糖、血脂和血清胰岛素水平的影响，结果表明西洋参茎叶总皂苷能明显降低高血糖大鼠血糖、血清总胆固醇(TC) 和甘油三酯(TG) 的水平，且提高血清高密度脂蛋白(HDL－C)和胰岛素含量（殷惠军，天津中医药，2004）。

本发明就是将从天然植物中发现或者提取的一种具有防治糖尿病及其并发症等相关疾病的化学成分制成的组合物。该组合物是由有效成分创新组合成天然产物组合物，从几种不同作用机制上入手治疗糖尿病，达到长短结合，标本兼治的效果，以期从疗效和安全性上有显著的突破和提高。

    本发明首次将啤酒花总黄酮、桑叶提取物及西洋参茎叶皂苷按照一定比例组成，具有辅助降血糖及防治糖尿病并发症的作用。本发明完成前还没有文献报道由啤酒花总黄酮、桑叶提取物及西洋参茎叶皂苷组成的组合物具有有助于降血糖的作用的报道。

发明内容

发明目的是提供一种由啤酒花总黄酮、桑叶提取物及西洋参茎叶皂苷组成的组合物有助于降血糖作用。本发明对啤酒花、桑叶及西洋参茎叶的有效成分进行了研究，寻找到了活性更强、实用性强的有效部位，用于糖尿病的预防和治疗。更进一步地，本发明的发明人通过进一步的研究发现，啤酒花总黄酮、桑叶提取物及西洋参茎叶皂苷按一定比例配方组成的组合物较单一成分啤酒花总黄酮、桑叶提取物、西洋参茎叶皂苷及任意二者组合的组合物在降血糖方面有更显著的作用。这种天然的药物组合物是本发明人首次通过实验筛选得到，也体现了复方中药的协同作用，具有突出的贡献及显著的技术进步。

本发明组合物从引起糖尿病不同病因及并发症类型入手，达到有助于降血糖及防治并发症的作用。本发明组合物按照最佳的配比使各成分相互协同、多靶点、多途径作用，从根本上全面调节糖尿病人的机体，改善糖尿病人的身体健康状况。利用西洋参茎叶皂苷提高机体免疫力、促进物质代谢的作用；桑叶提取物促进血清胰岛素、肝己糖激酶的分泌、肝糖元的合成、提高肝SOD活力、降低肝MDA含量和促进体质恢复作用；啤酒花总黄酮降血脂、抗自由基、促进胆固醇的代谢、防治代谢综合症等作用。本组合物所含不同类型药效物质，从不同的作用靶点和途径都有非常明确的有助于降血糖作用，可将糖尿病人的血糖平稳调节到正常水平。可用于制备具有防治糖尿病及其并发症等相关疾病的药品和保健品。具有明显的创新性和技术进步。

本发明提供了一种具有有助于降血糖及其防治并发症等相关疾病的天然产物制成的组合物，该组合物包括啤酒花总黄酮50-200份，西洋参茎叶皂苷20-100份，桑叶提取物150-400份，优选啤酒花总黄酮80份，西洋参茎叶皂苷30份，桑叶提取物100份。为了实现以上比例配比，本发明人经过拆方实验，进行了单一组分及任意两者按照1：1配比的降血糖作用，优选出最佳的配比组合，具有明显的创新性和技术进步，也是最突出的贡献。

本发明的另一目的是提供了分别提取啤酒花总黄酮、桑叶提取物及西洋参茎叶皂苷的方法及组合物的制备方法，该方法包括：     （1）啤酒花用30-90%乙醇回流提取2-3次，每次2-3小时，过滤，合并滤液，回收乙醇，得乙醇提取物，乙醇提取物通过预先处理好的AB-8大孔树脂柱，先用去离子水洗脱，弃去洗脱液，继用60-90%乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，干燥，得啤酒花总黄酮；

（2）西洋参茎叶用8-14倍量的水提取1-3次，每次2-3小时，过滤，合并滤液，浓缩，浓缩液通过预先处理好的D-101大孔树脂柱，先用去离子水洗脱，弃去洗脱液，继用60-90%乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，干燥，得西洋参茎叶皂苷；

（3）桑叶用30-60%乙醇提取2-3次，每次2-3小时，过滤，回收乙醇提取液，浓缩，干燥，得桑叶提取物；

（4）将啤酒花总黄酮50-200份，西洋参茎叶皂苷20-100份，桑叶提取物150-400份，混合均匀后，加入适量辅料混合均匀，即得。

本发明又一个目的是提供了上述提取的啤酒花总黄酮、西洋参茎叶皂苷、桑叶提取物组成的组合物在制备有助于降血糖的药物和保健食品中的应用。     由于本发明首次公开了由啤酒花总黄酮、西洋参茎叶皂苷、桑叶提取物组成的组合物具有有助于降血糖作用及其防治并发症等相关疾病的作用，因此，将本组合物单独或与其它活性组份或辅料配合制成药剂，只要是该药剂用于预防和治疗高血糖及其并发症，均属于本发明的保护范围。本发明的组合物在制成任何一种剂型时，均具有预防和治疗高血糖的作用。

由啤酒花总黄酮、西洋参茎叶皂苷及桑叶提取物组成的组合物（简称组合物）具有降血糖作用，通过以下药效学实验得到证实。

实验原料：本药效学中用到的各个原料为本发明人提供，按照实例1提取得到各部位，按照比例配成各组合物：啤酒花总黄酮与西洋参茎叶皂苷（1：1）为组合物1；啤酒花总黄酮与桑叶提取物（1：1）为组合物2；西洋参茎叶皂苷与桑叶提取物（1：1）为组合物3；啤酒花总黄酮：西洋参茎叶皂苷：桑叶提取物（8：3：10）为本发明组合物。拜糖平为拜耳医药保健有限公司生产（批号：20130905）。

1、本发明组合物对正常小鼠糖耐量实验

取小鼠110只，每组10只，随机分成11组，按表1分组。阴性对照组灌生理盐水，阳性对照为拜糖平灌胃30mg/kg，按照表1给药连续给药7天，末次给药前禁食8h，给药时同时淀粉（5g/kg)灌胃，测定给淀粉后0.5h，1h，2h，3h的血糖值。眼眶静脉窦采血。用葡萄糖氧化酶试纸法测定血糖值。结果见表1。

表1  本发明组合物对正常小鼠糖耐量实验结果

组别

剂量

0h（mmol/L）

0.5 h（mmol/L）

1 h（mmol/L）

2 h（mmol/L）

3 h（mmol/L）

性对照

——

4.26±1.26

13.22±1.62

14.13±1.28

12.08±0.98

9.96±1.08

组合物

0.8g/kg

4.35±1.00

5.52±1.46**

6.22±1.28**

5.56±1.08**

4.68±0.88**

组合物

0.4g/kg

4.44±1.08

8.75±1.16*

9.05±1.38*

6.63±1.21*

5.55±1.22**

组合物

0.2g/kg

4.49±1.22

10.25±1.05

11.36±0.92

9.47±1.35

9.08±1.24

组合物1

0.8g/kg

4.38±1.28

10.86±1.25

11.88±1.33

10.08±1.25

9.48±1.33

组合物2

0.8g/kg

4.40±1.38

9.05±1.33*

9.44±1.28*

7.79±1.15*

6.25±1.20*

组合物3

0.8g/kg

4.29±1.33

9.15±1.20*

9.78±1.42*

7.08±1.24*

7.25±1.20

啤酒花总黄酮

0.8g/kg

4.35±1.17

9.48±1.38*

9.99±1.02*

6.99±1.21*

7.00±1.02

西洋参茎叶皂苷

0.8g/kg

4.49±1.28

11.05±1.28

11.99±1.48

10.35±1.08

8.25±1.08

桑叶提取物

0.8g/kg

4.42±1.08

9.38±1.05*

9.85±1.42*

6.82±1.32*

6.82±1.24

拜糖平

30mg/kg

4.22±0.98

5.62±1.08**

5.67±1.25**

5.45±1.24**

5.59±0.98**

*与阴性对照组比较，*P﹤0.01；**P﹤0.001

说明本发明组合物能抑制正常小鼠餐后血糖升高，高、中剂量组具有显著性差异。相同剂量下，本发明组合物较单一各个组份及任意二者的组合物均具有更强的药理活性。

2、本发明组合物对四氧嘧啶诱导的高血糖小鼠耐糖量实验

取雄性小鼠110只，每组10只，禁食14h后，腹腔注射2%四氧嘧啶（200mg/kg)生理盐水溶液，注射72h后，眼眶静脉窦采血。测定空腹血糖（取血前禁食10h），用葡萄糖氧化酶试纸法测定血糖值。血糖高于11.1mmol/L的为糖尿病模型小鼠。模型按照表2分组，模型对照组灌生理盐水，阳性对照为拜糖平灌胃30mg/kg，按照表2给药连续给药10天，末次给药前禁食6h，给药同时淀粉（5g/kg)灌胃,测定给淀粉后0.5h，1h，2h的血糖值。眼眶静脉窦采血。用葡萄糖氧化酶试纸法测定血糖值。结果见表2。

表2 本发明组合物对四氧嘧啶诱导的高血糖小鼠耐糖量实验结果

 *与模型对照组比较，*P﹤0.05；**P﹤0.001

说明本发明组合物能延缓四氧嘧啶诱导的高血糖小鼠餐后血糖升高。高、中剂量组均有显著性差异，低剂量组较高、中剂量组效果较差。相同剂量下，本发明组合物较单一各个组份及任意二者的组合物均具有更强的药理活性。

 3、本发明组合物对四氧嘧啶诱导的高血糖小鼠血糖值实验

取雄性小鼠110只，每组10只，禁食14h后，腹腔注射2%四氧嘧啶（200mg/kg)生理盐水溶液，注射72h后，眼眶静脉窦采血。测定空腹血糖（取血前禁食10h），用葡萄糖氧化酶试纸法测定血糖值。血糖高于11.1mmol/L的为糖尿病模型小鼠。模型按照表3分组，模型对照组灌生理盐水，阳性对照为拜糖平灌胃30mg/kg，按照表3给药连续给药10天，末次给药前禁食10h，眼眶静脉窦采血，离心取血清。用葡萄糖氧化酶试纸法测定血糖值。结果见表3。

表3  本发明组合物对四氧嘧啶诱导的高血糖小鼠血糖值实验结果

*与模型对照组比较，*P﹤0.05；**P﹤0.001

说明本发明组合物高、中剂量组均能显著降低四氧嘧啶诱导的高血糖小鼠血糖水平。相同剂量下，本发明组合物较单一各个组份及任意二者的组合物均具有更强的药理活性。

本发明是通过下面的实施例进行详细的说明，但不意味着本发明仅限于此，具体实施方案如下：

实施例1、提取物的制备

（1）啤酒花用8倍量60%乙醇回流提取2次，每次2小时，过滤，合并滤液，回收乙醇，得乙醇提取物，乙醇提取物通过预先处理好的AB-8大孔树脂柱，先用去离子水洗脱4倍柱体积，弃去洗脱液，继用85%乙醇洗脱4倍柱体积，收集洗脱液，回收乙醇，干燥，得啤酒花总黄酮；

（2）西洋参茎叶用12倍量的水提取2次，每次2小时，过滤，合并滤液，浓缩，浓缩液通过预先处理好的D-101大孔树脂柱，先用去离子水洗脱5倍柱体积，弃去洗脱液，继用70%乙醇洗脱4倍柱体积，收集洗脱液，回收乙醇，干燥，得西洋参茎叶皂苷；

（3）桑叶用8倍量50%乙醇提取2次，每次2小时，过滤，回收乙醇提取液，浓缩，干燥，得桑叶提取物。

实施例2 、（胶囊剂）

称取啤酒花总黄酮80g、西洋参茎叶皂苷30g、桑叶提取物100g、淀粉40g，混合均匀，制粒，干燥，整粒，装入胶囊，制成1000粒，即得。每次2粒、每日2次。

实施例3、（片剂）

称啤酒花总黄酮80g、西洋参茎叶皂苷30g、桑叶提取物100g、淀粉40g，混合均匀，制粒，干燥，整粒，压片，制成1000片，即得。每次2片、每日2次。

实施例4、（滴丸）

称啤酒花总黄酮8g、西洋参茎叶皂苷3g及桑叶提取物10g混合均匀，将聚乙二醇6000 79g加热使其溶化，加入药粉，混合均匀，在70℃保温，滴成2000粒，每粒50mg，即得。每次40粒，每日2次。

Claims (4)

1.一种有辅助降血糖作用的天然药物组合物，其特征在于，它是由下述重量份的原料制成：啤酒花总黄酮50-200份，西洋参茎叶皂苷20-100份，桑叶提取物150-400份。

2.根据权利要求1所述一种有辅助降血糖作用的天然药物组合物，其特征在于，它是由下述重量份的原料制成：啤酒花总黄酮80份，西洋参茎叶皂苷30份，桑叶提取物100份。

3.根据权利要求1、2所述的天然药物组合物，其制备方法如下：

（1）啤酒花用30-90%乙醇回流提取2-3次，每次2-3小时，过滤，合并滤液，回收乙醇，得乙醇提取物，乙醇提取物通过预先处理好的AB-8大孔树脂柱，先用去离子水洗脱，弃去洗脱液，继用60-90%乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，干燥，得啤酒花总黄酮；

（2）西洋参茎叶用8-14倍量的水提取1-3次，每次2-3小时，过滤，合并滤液，浓缩，浓缩液通过预先处理好的D-101大孔树脂柱，先用去离子水洗脱，弃去洗脱液，继用60-90%乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，干燥，得西洋参茎叶皂苷；

（3）桑叶用30-60%乙醇提取2-3次，每次2-3小时，过滤，回收乙醇提取液，浓缩，干燥，得桑叶提取物；

 （4）将啤酒花总黄酮50-200份，西洋参茎叶皂苷20-100份，桑叶提取物150-400份，混合均匀后，加入适量辅料混合均匀，即得。

4.根据权利要求3所述的天然药物组合物，与药用辅料混合，制成口服制剂，它可以是口服液、硬胶囊、软胶囊、片剂、颗粒剂、散剂、丸剂、滴丸中的任意一种。