CN101482511A - 一种检测食品中甲醛的快速检测试剂及其方法和试剂盒 - Google Patents
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Abstract
本发明为一种检测食品中甲醛的快速检测试剂，包括：试剂1：1－5.0g/L AHMT，介质：0.5mol/L盐酸；试剂2：2.0－7.5mol/L氢氧化钾；试剂3：5－15g/L KIO4，介质0.2mol/L氢氧化钾。还公开了利用上述试剂检测甲醛的方法，包括如下步骤：a.将被测样品溶于水；b.吸取0.5ml浸提液，加入1～2滴试剂2和试剂1，混匀；c.加入1～2滴试剂3反应，生成稳定的化合物；d.与已知浓度的标准色卡进行比较，得出甲醛含量。另一目的为一种检测甲醛的试剂盒，包括分别装入塑料瓶并密封的上述试剂1～3、一次性塑料洗管、塑料样品杯、多联比色管和标准色卡。本发明具有试剂稳定、检测快速、使用方便的特点。
Description
技术领域
本发明涉及化学物质检测技术领域，具体的说是检测甲醛的试剂及其方法。
背景技术
甲醛是一种无色，有强烈刺激性气味的气体。易溶于水、醇醚。甲醛在常温下是气态，通常以水溶液形式出现。其40％的水溶液称为福尔马林，此溶液沸点为19℃。故在室温时极易挥发，随着温度的上升挥发速度加快。
甲醛是一种具有较高毒性的破坏生物细胞蛋白质的原生质毒物，能与蛋白质的氨基结合，使蛋白质变性凝固，扰乱细胞代谢。同时甲醛也是一种刺激物和诱变剂，已也是潜在的强致突变物之一。甲醛对人体健康危害极大，故世界各国规定食品中禁止加入甲醛，在食品中甲醛含量不应超出国家标准。
目前已有的检测食品中甲醛的方法主要：液相色谱法、气相色谱法、示波极谱法、间苯三酚法、酚试剂法、乙酰丙酮法、变色酸法。色谱法和示波极谱法均要利用大型仪器分析，不适于现场检测，间苯三酚和酚试剂法由于试剂保存困难；乙酰丙酮法的样液显色后容易干扰。而且上述方法都需要低浓度的甲醛标准溶液，然而甲醛标准溶液不易保存，容易被氧化影响测定结果估算。
发明内容
本发明目的是解决上述背景技术存在的不足，提出一种检测食品中甲醛的快速检测试剂。
实现上述发明目的的技术方案如下：
一种检测食品中甲醛的快速检测试剂，包括如下试剂：
试剂1：1-5.0g/L AHMT(甲醛分析试剂，4-氨基-3-联氮-5-硫基-1，2，4-三氮杂茂，分子式为C2H6N6S，分子量为146.18)，介质：0.5mol/L盐酸；
试剂2：2.0-7.5mol/L氢氧化钾；
试剂3：5-15g/L KIO4，介质0.2mol/L氢氧化钾。
本发明的另一目的为提供一种利用上述试剂检测甲醛的方法。技术方案如下：
一种利用上述试剂检测甲醛的方法，包括如下步骤：
a.将一定量被测样品溶于水，将甲醛浸提入水相；
b.吸取0.5ml浸提液，直接加入试剂2的KOH溶液1～2滴，试剂1的AHMT溶液1～2滴，混匀；
c.加入试剂3，KIO43溶液1～2滴反应，生成稳定的化合物后；
d.与已知浓度的标准色卡进行比较，得出样品中甲醛含量。
所述标准色卡是由配置不同浓度的标准甲醛溶液按照上述a～c步骤显色后，按数字化技术制作而成。
本发明还有一目的为提供一种试剂盒，具有便于携带，易于检测的效果。其技术方案如下：
一种检测甲醛的试剂盒，包括上述试剂1～3三种试剂、一次性塑料洗管、塑料样品杯、多联比色管和标准色卡，所述试剂1～3分别装入塑料瓶，密封。
本发明试剂能快速检测甲醛含量，稳定性高，抗干扰性能好，对标准溶液的最低检出限达0.15ug，试剂盒试剂稳定、操作简单、抗干扰性强、快速灵敏，操作无需专业人员，适于现场测定。
具体实施方式
下面结合具体实施例和试验对本发明作进一步说明。
一种检测食品中甲醛的快速检测试剂，包括如下试剂：
试剂1：5.0g/L AHMT：称取0.5g AHMT用0.5mol/L盐酸溶解，定容于100mL容量瓶中。分装入5—10ml带小口塑料瓶中，密封；
试剂2：7.5mol/L氢氧化钾：配置7.5mol/L氢氧化钾(AR)，分装入5—10ml带小口塑料瓶中，密封；
试剂3：15g/L KIO4：称取1.5g0 KIO4.用2mol/L氢氧化钾(AR)溶解并定容于100ml容量瓶，分装入5—10ml带小口塑料瓶中，密封。
一种利用上述试剂检测甲醛的方法，包括如下步骤：
a.将一定量被测样品溶于水，将甲醛浸提入水相；
b.吸取0.5ml浸提液，直接加入试剂2的KOH溶液1～2滴，试剂1的AHMT溶液1～2滴，混匀；
c.加入试剂3，KIO43溶液1～2滴反应，生成稳定的化合物后；
d.与已知浓度的标准色卡进行比较，得出样品中甲醛含量。
所述标准色卡是由配置不同浓度的标准甲醛溶液按照上述a～c步骤显色后，按数字化技术制作而成。
一种检测甲醛的试剂盒，包括上述试剂1～3三种试剂、一次性塑料洗管、塑料样品杯、多联比色管和标准色卡，所述试剂1～3分别装入塑料瓶，密封。
下面结合实施例的试验数据对本发明的效果进行说明。
1.试剂与仪器
紫外分光光度计(岛津公司生产UV2401)；1604电子天平(上海天平厂，0.0001g)；移液管若干；各种容量瓶若干；移液枪；比色管若干个；
5.0g/L AHMT：称取0.5g AHMT用0.5mol/L盐酸溶解，定容于100mL容量瓶中。分装入5—10ml带小口塑料瓶中，密封；
7.5mol/L氢氧化钾：配置7.5mol/L氢氧化钾(AR)，分装入5—10ml带小口塑料瓶中，密封；
15g/L KIO4称取1.5g0 KIO4.用2mol/L氢氧化钾(AR)溶解并定容于100ml容量瓶，分装入5—10ml带小口塑料瓶中，密封。
色卡。
磷酸溶液：1+9；
液体石蜡
乙酰丙酮溶液：于100ml蒸馏水中加入醋酸铵(AR)25g，冰醋酸3ml和乙酰丙酮(AR)0.40ml，振摇促溶，贮于棕色瓶中。此液可稳定1个月；
甲醛标准使用液：取甲醛1g放入盛有5ml水的100ml容量瓶中，加水至刻。吸取10.0ml放入碘量瓶中，加0.10mol/L碘溶液50ml，1.0mol/L的KOH溶液20ml，在室温放置15分钟后，加10％硫酸15ml，以淀粉溶液为指示剂用0.1mol/L的Na2S2O3滴定，同时以10ml蒸馏水做空白。
计算：甲醛(mg/L)＝(V1—V2)×C×15×1000/10式中：V1空白滴定消耗0.025mol/L硫代硫酸钠溶液ml数；V2滴定甲醛消耗0.025mol/L硫代硫酸钠溶液ml数；C硫代硫酸钠溶液当量；15为1mol/L碘相当甲醛重(mg)。
甲醛标准使用液：临用时以蒸馏水将标准贮备液稀释成50mg/L
甲醛标准系列浓度溶液：50mg/L，5mg/L，0.5mg/L
2.试验目的
最低理论检出浓度：配置不同系列浓度的标准溶液，按照检测步骤显色后，三个人在同等状态下，观察，2个人以上肉眼判断有目标色，则认为检出目标物质。
抗干扰能力：在标准甲醛中加入与检测对象常见的和与甲醛化学结构相似的化学物质，与分析步骤同样操作显色，观察是否产生干扰。
分析方法结果可靠性：市场获得样品，采用快速检测试剂盒与乙酰丙酮法分别分析，判断分析结果的相关性。
2.1 理论最低检出浓度
分别取含25、20、15、10……0.20、0.15、0.10、0.05μg甲醛标准溶液于1ml比色管中分别加蒸馏水定容至0.5mL，加盖混匀，往比色管中滴加2滴试剂1和试剂2，1分钟后再加入2滴试剂3，观察混合液的颜色变化，10分钟后，进行结果判断。
表1 甲醛最低检出浓度试验
| 甲醛标准使用液(μg) | 蒸馏水 | 总体积 | 浓度mg/L | 现象 | 视觉判断 |
| 25 | 0ml | 0.5ml | 50.0 | 紫色 | +++ |
| 20 | 0.1ml | 0.5ml | 40.0 | 紫色 | +++ |
| 15 | 0.2ml | 0.5ml | 30.0 | 紫色 | +++ |
| 10 | 0.3ml | 0.5ml | 20.0 | 紫色 | +++ |
| 5 | 0.4ml | 0.5ml | 10.0 | 紫色 | +++ |
| 2.5 | 0ml | 0.5ml | 5.0 | 紫色 | +++ |
| 2.0 | 0.1ml | 0.5ml | 4.0 | 紫色 | +++ |
| 1.5 | 0.2ml | 0.5ml | 3.0 | 浅紫色 | +++ |
| 1.0 | 0.3ml | 0.5ml | 2.0 | 浅紫色 | +++ |
| 0.5 | 0.4ml | 0.5ml | 1.0 | 浅紫色 | +++ |
| 0.25 | 0ml | 0.5ml | 0.5 | 淡紫色 | +++ |
| 0.20 | 0.1ml | 0.5ml | 0.4 | 轻微紫色 | ++- |
| 0.15 | 0.2ml | 0.5ml | 0.3 | 无现象 | --- |
| 0.1 | 0.3ml | 0.5ml | 0.2 | 无现象 | --- |
| 0.05 | 0.4ml | 0.5ml | 0.1 | 无现象 | --- |
注：+表示判断为阳性，-表示判断为阴性，个数为人数。
表1可以看出，浓度大于0.5mg/L(含0.25μg甲醛)时，3个人观察判断结果一致，均为阳性，浓度0.4mg/L(含0.20μg甲醛)时，3人判断结果产生分歧，2人判断为阳性，1人为阴性，该浓度为甲醛检出量临界值，即快速检测试剂盒的最低检出质量(浓度)。
2.2 干扰剂实验试剂：
分别配置50mg/L的乙醛(纯化)、醋酸、1.2-丙二醇，无水乙醇、丙酮、硫代硫酸钠、亚硝酸钠、甲醇等溶液，氨基酸直接采用医用注射液。
分别吸取上述溶液0.5mL分别加到1-9号比色管中，往比色管中滴加2滴检测液A和检测液B，1分钟后再加入2滴检测液C，观察混合液的颜色变化，进行结果判断。
表2 甲醛快速检测试剂盒干扰性试验
表2可见，50mg/L乙醛、冰醋酸、1.2-丙二醇，无水乙醇、丙酮、硫代硫酸钠、亚硝酸钠、甲醇、氨基酸对甲醛快速试剂盒检测过程没有产生颜色。
2.3 添加回收率
分别在样品中添加0.10、1.0、5.0、20.0mg甲醛标准，用样品浸提液定容至100mL，分别用分光光度计和目视判断测试添加回收率。
表3 快速检测试剂盒添加回收率
由表3可见，快速检测试剂盒的添加回收率在96.2～102.3％。目测添加回收率基本与仪器测定值一致。
2.4 不同检测方法比较
2006年4月对行前农贸市场和新桥农贸市场进行采样结果，样品的抽取样品采取随机抽取方法，在批发市场和零售商以同一货主、同一产区、同一品种的水产品及水发产品为一批次，同一批次的样品均匀地分成两份，1份用于甲醛试剂盒定性检测，另1份用于乙酰丙酮法分析。检测结果见表4。
表4 不同方法对实际样品检测结果
| 样品名称 | 采样地点 | 样品状态 | 速测剂是否检出 | 乙酰丙酮法(mg/kg) |
| 芋头 | 行前农贸 | 干样 | - | 0.096 |
| 鸭肠 | 行前农贸 | 熟食 | - | 未检出 |
| 去皮芋头 | 行前农贸 | 水发 | + | 1.576 |
| 荸荠 | 行前农贸 | 去皮 | - | 未检出 |
| 去皮芋头 | 行前农贸 | 水发 | + | 1.68 |
| 腐竹 | 行前农贸 | 水发 | - | 0.588 |
| 腐竹 | 行前农贸 | 水发 | + | 2.698 |
| 年糕 | 行前农贸 | 干样 | - | 0.208 |
| 年糕 | 行前农贸 | 干样 | - | 0.218 |
| 年糕 | 行前农贸 | 干样 | - | 0.292 |
| 豆腐 | 行前农贸 | 水发 | - | 0.124 |
| 豆腐 | 行前农贸 | 水发 | - | 0.112 |
| 豆腐 | 行前农贸 | 水发 | - | 0.234 |
| 大豆 | 行前农贸 | 水发 | + | 1.014 |
| 大豆 | 行前农贸 | 水发 | + | 1.084 |
| 大豆 | 行前农贸 | 水发 | + | 1.920 |
| 水孱 | 行前农贸 | 新鲜冰冻 | +++ | 12.010 |
| 水孱 | 行前农贸 | 新鲜冰冻 | +++ | 11.112 |
| 水孱 | 行前农贸 | 新鲜冰冻 | +++ | 12.104 |
| 大豆 | 水心农贸 | 水发 | - | 0.776 |
| 大豆 | 水心农贸 | 水发 | - | 0.378 |
| 大豆 | 水心农贸 | 水发 | - | 未检出 |
| 去皮芋头 | 水心农贸 | 水发 | ++ | 2.814 |
| 去皮芋头 | 水心农贸 | 水发 | - | 未检出 |
| 去皮芋头 | 水心农贸 | 水发 | ++ | 3.516 |
| 豆腐 | 水心农贸 | 水发 | - | 0.372 |
| 豆腐 | 水心农贸 | 水发 | + | 1.728 |
| 豆腐 | 水心农贸 | 水发 | - | 0.366 |
| 腐竹 | 水心农贸 | 水发 | - | 未检出 |
| 腐竹 | 水心农贸 | 水发 | - | 0.184 |
| 腐竹 | 水心农贸 | 水发 | + | 0.950 |
| 香菇 | 水心农贸 | 水发 | + | 0.802 |
| 香菇 | 水心农贸 | 水发 | - | 0.643 |
| 香菇 | 水心农贸 | 水发 | - | 0.626 |
| 水孱 | 水心农贸 | 新鲜冰冻 | +++ | 14.628 |
| 水孱 | 水心农贸 | 新鲜冰冻 | +++ | 13.184 |
| 水孱 | 水心农贸 | 新鲜冰冻 | ++ | 6.276 |
| 大豆 | 新桥农贸 | 水发 | - | 未检出 |
| 大豆 | 新桥农贸 | 水发 | - | 未检出 |
| 大豆 | 新桥农贸 | 水发 | - | 未检出 |
| 去皮芋头 | 新桥农贸 | 水发 | ++ | 3.845 |
| 去皮芋头 | 新桥农贸 | 水发 | + | 2.506 |
| 去皮芋头 | 新桥农贸 | 水发 | + | 1.242 |
| 豆腐 | 新桥农贸 | 水发 | - | 0.354 |
| 豆腐 | 新桥农贸 | 水发 | - | 未检出 |
| 豆腐 | 新桥农贸 | 水发 | - | 0.656 |
| 腐竹 | 新桥农贸 | 水发 | - | 0.502 |
| 腐竹 | 新桥农贸 | 水发 | - | 0.581 |
| 腐竹 | 新桥农贸 | 水发 | - | 0.783 |
| 香菇 | 新桥农贸 | 水发 | - | 0.762 |
| 香菇 | 新桥农贸 | 水发 | - | 0.528 |
| 香菇 | 新桥农贸 | 水发 | - | 未检出 |
| 水孱 | 新桥农贸 | 新鲜冰冻 | ++ | 5.432 |
| 水孱 | 新桥农贸 | 新鲜冰冻 | +++ | 20.666 |
| 水孱 | 新桥农贸 | 新鲜冰冻 | +++ | 13.870 |
(-表示没有检测出颜色，+，++，+++代表检测出的颜色深浅)
表1可见，从检测的8种食品，快速检测试剂盒与乙酰丙酮的检测结果基本一致，说明含甲醛的食品均能在本方法中检出。表中可以看出实际样品检出限。随甲醛残留量的升高，甲醛速测盒定性与乙酰丙酮法定量分析的阳性符合率亦提高，当残留量大于0.8mg/kg时，符合率100％。
2.4 检测试剂稳定性研究
将配好的三种试剂，贮存在常温下，0、7d、30d、120d、365d后，按上述操作方式检测样品中甲醛的含量，检测结果一致。
3 结果讨论
甲醛快速检测试剂盒理论检出浓度0.4mg/L，实际检出限0.8mg/L，满足市场现场检测需要。检测快速，整个分析过程消耗时间10—30min，也能满足现场检测要求。试剂稳定时间长，贮存一年检测结果不变。与乙酰丙酮法检测的结果基本一致，检测结果可靠。
Claims (5)
1.一种检测食品中甲醛的快速检测试剂，其特征为：包括如下试剂：
试剂1：1-5.0g/L AHMT，介质：0.5mol/L盐酸；
试剂2：2.0-7.5mol/L氢氧化钾；
试剂3：5-15g/L KIO4，介质0.2mol/L氢氧化钾。
2.根据权利要求1所述的检测食品中甲醛的快速检测试剂，其特征为：
所述试剂1：5.0g/L AHMT，介质：0.5mol/L盐酸；
所述试剂2：7.5mol/L氢氧化钾；
所述试剂3：15g/L KIO4，介质0.2mol/L氢氧化钾。
3.一种利用上述试剂检测甲醛的方法，其特征为，包括如下步骤：
a.将一定量被测样品溶于水，将甲醛浸提入水相；
b.吸取0.5ml浸提液，直接加入试剂2的KOH溶液1～2滴，试剂1的AHMT溶液1～2滴，混匀；
c.加入试剂3，KIO43溶液1～2滴反应，生成稳定的化合物后；
d.与已知浓度的标准色卡进行比较，得出样品中甲醛含量。
4.根据权利要求3所述的检测甲醛的方法，其特征为：所述标准色卡是由配置不同浓度的标准甲醛溶液按照上述a～c步骤显色后，按数字化技术制作而成。
5.一种检测甲醛的试剂盒，包括权利要求1所述试剂1～3三种试剂、一次性塑料洗管、塑料样品杯、多联比色管和标准色卡，所述试剂1～3分别装入塑料瓶，密封。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Open date: 20090715 |