CN101423495A - 一种乌头类水解单酯型生物碱的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种乌头类水解单酯型生物碱的制备方法。以乌头属中药为原料,加20倍水浸泡,置于高压容器内,提取压力为0.05~0.17MPa,在提取温度为110~130℃,提取时间为10min~6h的范围内进行提取,将提取液浓缩,调pH=9,用乙酸乙酯、乙醚或三氯甲烷萃取,得到的有机溶剂层浓缩,干燥,得到一种乌头类水解单酯型生物碱。通过电喷雾质谱检测,用有机溶剂萃取后得到的水解型生物碱较纯净,用滴定法测得含量可达50%以上并且无脂类生物碱干扰。此方法方便、高效、易于操作,可用于新药开发。

Description

一种乌头类水解单酯型生物碱的制备方法
技术领域
本发明属于天然药物化学领域,具体涉及一种乌头类水解单酯型生物碱的制备方法。
背景技术
毛茛科乌头属植物如:草乌、川乌、附子,是中医临床常用药。研究表明,这些中药发挥药效作用的主要化学成分是其中的生物碱类成分,按化学结构可将生物碱类成分分为双酯型、单酯型、胺醇型和脂型。其中的单酯型和胺醇型为双酯型生物碱的一级和二级分解产物[1]。由于乌头属生药中的生物碱以双酯型为主,而双酯型生物碱对心脏和神经系统有强烈的毒性,由于其有效剂量与中毒剂量非常接近,稍有不慎,即造成中毒乃至致死事故[2,3],给临床用药带来了极大的不便,因此临床应用时主要采用上述中药的炮制品。对炮制品的化学成分及药理作用研究表明:炮制品中双酯型生物碱的含量远低于生品,而单酯型生物碱的含量有所增加,并且毒性大大降低[4]。但如果双酯型生物碱的含量控制不当,在临床上仍然会有中毒情况发生。如果可以得到仅含有单酯型生物碱的提取物,并且将这种提取物应用于临床,即可以保证临床用药的安全性、有效性。由于单酯类生物碱又分为水解型和热解型两种,并且药理研究表明,二者的药效并不完全相同[5],有必要建立仅含有单一类型单酯生物碱的提取方法。
(参考文献:[1]马鸿雁,李楠,杨明.乌头碱水解实验和热力学研究.成都中医药大学学报[J],2005,28(3):57~59;
[2]郭俊玲.乌头碱中毒致恶性心律失常.药物不良反应杂志[J],2003(6);
[3]张宏.附子、川乌、草乌、草乌叶煎煮时间、剂量与药效的相关性研究[D],2005:14;
[4]楚春莲,王萍.生品、制品草乌毒性成分变化分析.Journal of Qiqihar
College[J],2004,25(5):546;
[5]许庆轩.附子及乌头属植物中二萜类生物碱的电喷雾质谱研究[D],2004:18。)
发明内容
本发明提供了一种乌头类水解单酯型生物碱的制备方法。其步骤和条件如下:
以乌头属中药为原料,加入原料药的20倍水浸泡,置于高压容器内,在压力为0.05~0.17MP,温度为110~130℃,时间为10min~6h提取,将提取液浓缩,调pH=9,用乙酸乙酯、乙醚或三氯甲烷萃取,得到的有机溶剂层浓缩,干燥,得到一种乌头类水解单酯型生物碱。
有益效果:通过电喷雾质谱检测,用有机溶剂萃取后得到的水解型生物碱较纯净,用滴定法测得含量可达50%以上并且无脂类生物碱干扰。此方法方便、高效、易于操作,可用于新药开发。
附图说明
图1a是生草乌未经高压煎煮的电喷雾质谱图。
图1b是生草乌经高压提取后总生物碱的电喷雾质谱图。
图2a是制草乌未经高压煎煮的电喷雾质谱图。
图2b是制草乌经高压提取后总生物碱的电喷雾质谱图。
具体实施方式
实施例1
将生草乌35g,加水700ml,置于高压容器内,在110℃、0.05MP下煎煮3次,每次2h,合并3次提取液,浓缩,调pH=9,用乙醚、乙酸乙酯或氯仿萃取,得到的有机溶剂层浓缩干燥,即得较纯净的水解型单酯生物碱,用滴定法测得总碱含量为57.98%。图1a是生草乌未经高压煎煮的电喷雾质谱图。可以看出生草乌中含有的双酯型生物碱包括乌头碱(m/z646)、3-去氧乌头碱(m/z630),单酯型生物碱为去乙酰乌头碱(m/z586),脂型生物碱包括8-亚油酰-苯甲酰乌头原碱(m/z866),8-棕榈酰-苯甲酰乌头原碱(m/z842)。图1b是生草乌经高压提取后总生物碱的电喷雾质谱图,未检测到双酯型及脂型生物碱,而主要含有水解型生物碱-苯甲酰乌头原碱(m/z604)和苯甲酰中乌头原碱(m/z590)。
实施例2
将制草乌35g,加水700ml,置于高压容器内,在115℃、0.07MP下煎煮3次,每次1.5h,合并3次提取液,浓缩,调pH=9,用乙醚、乙酸乙酯或氯仿萃取,得到的有机溶剂层浓缩干燥,即得较纯净的水解型单酯生物碱,用滴定法测得总碱含量为74.42%。图2a是制草乌未经高压煎煮的电喷雾质谱图,含有的双酯型生物碱包括乌头碱(m/z646)、3-去氧乌头碱(m/z630);以及乌头碱的热解产物-去乙酰乌头碱(m/z586);分子离子峰出现在m/z800~1000区域的为脂型生物碱,其中包括8-亚油酰-苯甲酰乌头原碱(m/z866)、8-棕榈酰-苯甲酰乌头原碱(m/z842)。图2b是制草乌经高压提取后总生物碱的电喷雾质谱图,主要为水解型单酯型生物碱-苯甲酰乌头原碱(m/z604)、苯甲酰中乌头原碱(m/z590)、苯甲酰次乌头原碱(m/z574)。
实施例3
将生川乌35g,加水700ml,置于高压容器内,在120℃、0.1MP下煎煮3次,每次1h,合并3次提取液,浓缩,调pH=9,用乙醚、乙酸乙酯或氯仿萃取,得到的有机溶剂层浓缩干燥,即得较纯净的水解型单酯生物碱,用滴定法测得总碱含量为76.11%。
实施例4
将生附子35g,加700ml,置于高压容器内,在125℃、0.14MP下煎煮3次,每次40min,合并3次提取液,浓缩,调pH=9,用乙醚、乙酸乙酯或氯仿萃取,得到的有机溶剂层浓缩干燥,即得较纯净的水解型单酯生物碱,用滴定法测得总碱含量为96.27%。
实施例5
将黑顺片30g,加水600ml,置于高压容器内,在120℃、0.1MP下煎煮3次,每次1h,合并3次提取液,浓缩,调pH=9,用乙醚、乙酸乙酯或氯仿萃取,得到的有机溶剂层浓缩干燥,即得较纯净的水解型单酯生物碱,用滴定法测得总碱含量为89.58%。

Claims (1)

1.一种乌头类水解单酯型生物碱的制备方法,其步骤和条件如下:以乌头属中药为原料,加入原料药的20倍水浸泡,置于高压容器内,在压力为0.05~0.17MP,温度为110~130℃,时间为10min~6h提取,将提取液浓缩,调pH=9,用乙酸乙酯、乙醚或三氯甲烷萃取,得到的有机溶剂层浓缩,干燥,得到一种乌头类水解单酯型生物碱。
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