CN101402573A - 双羟基-2-酰基苯乙酸酯及其制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

双羟基－2－酰基苯乙酸酯及其制备方法与应用，涉及一种含有双羟基－2－酰基苯乙酸酯结构的化合物。提供一类结构新颖的双羟基－2－酰基苯乙酸酯及其制备方法与应用。以二羟基苯甲酸1为原料，经酯化，保护羟基，还原酯基成醇4，再依次用甲磺酰氯及氰化钾处理，得到腈化物6，6水解为羧酸后与醇作用得到相应的苯乙酸酯8；在三氟乙酸酐或多聚磷酸作用下，8与羧酸R²CO₂H反应得到酰基化产物(9)，最后，脱保护基得到双羟基－2－酰基－苯乙酸酯CsA。此外，采用酸催化下酯交换方法也可制备双羟基－2－酰基－苯乙酸酯CsA。所涉及的制备方法具有试剂易得、操作简单、产率较高等特点。

Description

双羟基-2-酰基苯乙酸酯及其制备方法与应用

技术领域

本发明涉及一种含有双羟基-2-酰基苯乙酸酯结构的化合物，尤其是涉及一种具有抗肿瘤活性的双羟基-2-酰基苯乙酸酯及其制备方法与应用。

背景技术

有机小分子化合物从最初的细胞毒作用发展到目前作为各类生物靶点的抑制剂，始终是抗肿瘤药物的研究热点之一。研究开发结构新颖的化合物，寻找新的抗肿瘤药物，对于保障人类健康具有重要意义。

2005年，厦门大学徐庆妍等(徐庆妍等，厦门大学学报(自然科学版)，2005，44，425-428)从福建九龙江口浮宫镇红树林自然保护区内红树植物桐花树树皮分离的内生真菌小穴壳菌属(Dottriorella sp.)HTF3菌株的代谢物中分离得到10个结构不同的3，5-二羟基-2-酰基-苯乙酸酯或它的衍生物，并发现它们具有不同的抗肿瘤活性。其它文献(Paranagama，P. A.et al，J.Nat.Prod.2007，7O，1939-1945；Huang，Z.，et al，Photochemistry，2008，69，1604-1608)也报道了3，5-二羟基-2-辛酰基-苯乙酸乙酯(Cytosporone B)的某些生物活性测试结果。

然而，至今尚未见Cytosporone B及其同系物合成报道。目前，Cytosporone B及其类似物是从真菌代谢产物中分离得到的，其数量有限，影响了它们的研究与应用进展。

发明内容

本发明的目的在于提供一类结构新颖的双羟基-2-酰基苯乙酸酯(CsA)及其制备方法。

本发明的另一目的在于将双羟基-2-酰基苯乙酸酯作为抗肿瘤药物或其它活性药物的先导物。

本发明所述的双羟基-2-酰基苯乙酸酯的结构式如下：

其中，R¹＝C₁～C₁₀烷基或烯基，R²＝C₁～C₂₀烷基或烯基，Y＝OH，位于苯环C3，C4或C6位。

本发明所述的双羟基-2-酰基苯乙酸酯的制备方法的路线如下：

本发明所述的双羟基-2-酰基苯乙酸酯的制备方法包括以下步骤：

1)制备二羟基苯甲酸甲酯2

将二羟基苯甲酸1溶于甲醇中，制成0.3～0.6mol/L的溶液，加入氯化亚砜，搅拌至反应完成，减压下浓缩，加入水，用乙醚提取，合并有机提取液，洗涤，干燥，减压浓缩，柱层析纯化，得到产物二羟基苯甲酸甲酯2；

2)制备二烷氧基苯甲酸甲酯3

将二羟基苯甲酸甲酯2溶于丙酮中，制成0.5～0.8mol/L的溶液，分别加入卤代烃RX(R＝CH₃、CH₂C₆H₅、X＝Cl、Br、I)和粉末状的无水碳酸钾，加热，搅拌下回流至反应完成，过滤，滤液减压下浓缩，柱层析纯化，得到产物二烷氧基苯甲酸甲酯3；

3)制备芳基甲醇4

将LiAlH₄悬浮于无水四氢呋喃(THF)中，加入二烷氧基苯甲酸甲酯溶于无水THF的溶液，搅拌至反应完成，加入盐酸溶液，用乙酸乙酯提取，合并有机提取液，洗涤，干燥，减压下浓缩，柱层析分离，得到芳基甲醇4；

4)制备甲磺酸酯5

芳基甲醇4溶于二氯甲烷中，制成0.1～0.3mol/L的溶液，加入甲磺酰氯和三乙胺，搅拌直至反应完成，加入水，分出有机层，水层用二氯甲烷提取，合并有机提取液，洗涤，干燥，减压浓缩，柱层析分离，得到产物甲磺酸酯5；

5)制备芳基乙腈6

将甲磺酸酯5溶于甲氧基乙二醇，制成0.2～0.5mol/L的溶液，加入KCN，搅拌直至反应完成，加入乙醚，过滤，减压浓缩，柱层析纯化，得到产物芳基乙腈6，KCN的用量相当于甲磺酸酯5的1.2～2.0倍摩尔；

6)制备芳基乙酸7

将芳基乙腈6溶于乙醇中，制成0.2～0.4mol/L的溶液，加入氢氧化钾，搅拌下回流，直至反应完全，减压下浓缩，加入水，用盐酸酸化，所得水溶液用乙酸乙酯提取，合并有机提取液，洗涤，干燥，减压下浓缩，柱层析分离，得到产物芳基乙酸7；

7)制备芳基乙酸酯8

将芳基乙酸7溶于醇R¹OH(R¹＝C₁-C₁₀烷基或烯基)中，制成0.2～0.4mol/L的溶液，加入硫酸，将反应混合物加热，回流直至反应完全，加入碳酸氢钠中和，减压下浓缩，柱层析分离，得到产物芳基乙酸酯8；

8)制备2-酰基芳基乙酸酯9

将芳基乙酸酯8溶于三氟乙酸酐(TFAA)，制成0.2～0.4mol/L的溶液，加入羧酸R²CO₂H(R²＝C₁-C₂₀的烷基或烯基)，其用量为化合物8的1.0～1.2倍摩尔，搅拌直至反应完全，加入碳酸氢钠溶液，用乙醚提取，有机提取液用氯化钠溶液洗涤，干燥，减压浓缩，柱层析分离，得到2-酰基芳基乙酸酯9；

制备2-酰基芳基乙酸酯9的另一方法为：混合芳基乙酸酯8和羧酸R²CO₂H(R²＝C₁-C₂₀的烷基或烯基)，加入相当于芳基乙酸酯8的6～10倍摩尔数的多聚磷酸(PPA)，将反应混合物在70～90℃下搅拌，直至反应完全，加入冰水，用二氯甲烷提取，用饱和碳酸氢钠溶液及氯化钠溶液洗涤，干燥，减压浓缩，柱层析分离，得到2-酰基芳基乙酸酯9；

9)制备化合物CsA

对于R＝CH₂C₆H₅的化合物9：将相应的2-酰基芳基乙酸酯9溶于乙醇中，制成0.1～0.3mol/L的溶液，加入10％Pd/C，其用量为化合物9质量的5％～20％，反应体系用氢气洗涤后，在室温、常压下与氢气作用，直至反应完全，过滤，将滤液减压浓缩，柱层析纯化，得到化合物CsA；

对于R＝CH₃的化合物9：将相应的2-酰基芳基乙酸酯溶于二氯甲烷中，制成0.1～0.3mol/L的溶液，加入无水AlCl₃，其用量为化合物9的5～10倍摩尔数，搅拌直至反应完成，加入盐酸，用乙酸乙酯提取，合并提取液，用饱和氯化钠溶液洗涤，干燥，减压下浓缩，柱层析分离，得到化合物CsA。

在步骤1)中，氯化亚砜的加入量最好相当于二羟基苯甲酸1的1.5倍摩尔数，洗涤可用碳酸氢钠溶液洗涤。

在步骤2)中，卤代烃RX(R＝CH₃、CH₂C₆H₅、X＝Cl、Br、I)的加入量最好相当于二羟基苯甲酸甲酯2的1.2～3.0倍摩尔数，粉末状的无水碳酸钾的加入量最好相当于二羟基苯甲酸甲酯2的2～5倍摩尔数。

在步骤3)中，加入二烷氧基苯甲酸甲酯溶于无水THF的溶液的温度最好为0℃，洗涤可用碳酸氢钠溶液及氯化钠溶液洗涤。

在步骤4)中，甲磺酰氯的加入量最好相当于芳基甲醇4的1.0～1.5倍摩尔数，三乙胺的加入量最好相当于芳基甲醇4的1.2～2.0倍摩尔数，洗涤可用氯化钠溶液洗涤。

在步骤6)中，氢氧化钾的用量最好为芳基乙腈6的8～12倍摩尔，用盐酸酸化最好至pH＝2，洗涤可用氯化钠溶液洗涤。

在步骤7)中，硫酸的加入量最好为催化量硫酸，加入碳酸氢钠中和最好至pH＝7。

本发明所述的双羟基-2-酰基苯乙酸酯的另一种制备方法是采用酯交换法，该方法适合于制备R¹＝C₃-C₁₀烷基或烯基的CsA系列化合物。利用含有较小分子量的双羟基2-酰基苯乙酸甲酯或乙酯(R¹＝CH₃，C₂H₅)化合物，在酸催化下用C₃-C₁₀的醇R¹OH进行酯交换反应，合成相应的含有R¹＝C₃-C₁₀基团的CsA系列化合物。

本发明所述的双羟基-2-酰基苯乙酸酯的另一种制备方法的路线如下：

CsA(R¹＝CH₃，C₂H₅)             CsA(R¹＝C₃-C₁₀烷基或烯基)

其中，R＝CH₂C₆H₅，CH₃，R²＝C₁～C₂₀烷基或烯基，OH位于苯环C3，C4或C6位。其具体步骤为：

将双羟基2-酰基苯乙酸甲酯或乙酯(R¹＝CH₃，C₂H₅)化合物溶于R¹＝C₃-C₁₀的醇R¹OH中，制成0.05～0.2mol/L的溶液，加入催化量的浓硫酸，反应混合物在55～60℃下搅拌4～12h，加入碱NaHCO₃中和，硅藻土过滤，滤液减压浓缩，残留物用柱层析纯化，得到产物CsA(R¹＝C₃-C₁₀)。

本发明所述的双羟基-2-酰基苯乙酸酯可作为抗肿瘤药物或其它活性药物的先导物。

对本发明所涉及的化合物，测定了它们的生物活性。利用细胞毒MTT法(四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法)进行体外抗肿瘤活性测试。例如，化合物CsA1，CsA2，CsA3分别以0.5、1.00、4.00、8.00、12.00μg/mL 5个浓度试验对人胃癌细胞株BGC-823的细胞毒性抑制，化合物CsA的细胞毒活性见表1。

表1

试验结果表明：本发明所合成的化合物CsA1，CsA2，CsA3具有较好的细胞毒活性，化合物CsA2在浓度为12μg/mL时，抑制率高达96.06％。

此外，还用MTT法对化合物CsA1，CsA2，CsA3进行了抗肿瘤活性试验。化合物CsA的抗肿瘤活性见表2。

表2

实验结果表明，用本发明方法合成的化合物CsA1，CsA2，CsA4对人胃癌细胞株BGC-823有较强的抑制活性。其中化合物CsA2的抑制率达到96.17％。这些结果说明本发明所涉及的化合物可应用于制备抗肿瘤药物或其它生物活性药物的先导物。

本发明通过有机合成技术，制备Cytosporone B及其类似物，开展抗肿瘤作用的构效关系，寻找其高活性先导物，为开发具有自主知识产权的抗肿瘤新药奠定基础。

具体实施方式

下面通过实施例对本发明作进一步说明。

实施例1

3，5-二羟基-2-壬酰基-苯乙酸乙酯(化合物CsA2，R¹＝C₂H₅，R²＝n-C₈H₁₇)

1)3，5-二羟基苯甲酸甲酯(化合物2)

3，5-二羟基苯甲酸(2.4mmol)溶于5mL甲醇中，加入氯化亚砜(3.6mmol)，混合物在室温下搅拌3h。蒸去甲醇及过量氯化亚砜，加入水，用乙酸乙酯提取，合并有机提取液，用碳酸氢钠溶液洗涤，无水MgSO₄干燥，减压下浓缩，残留物用柱层析分离，得到3，5-二羟基苯甲酸甲酯，产率95％。

2)3，5-二苄氧基苯甲酸甲酯(化合物3，R＝CH₂C₆H₅)

3，5-二羟基苯甲酸甲酯(20mmol)溶于30mL丙酮，加入苄溴(43mmol)和粉末状无水K₂CO₃(85mmol)，搅拌下加热回流4.5h，过滤，减压下蒸去溶剂，残留物用柱层析纯化，得到产物3，5-二苄氧基苯甲酸甲酯，产率96％。

3)3，5-二苄氧基苯甲醇(化合物4，R＝CH₂C₆H₅)

往悬浮于无水THF(2mL)中的氢化铝锂(2.4mmol)中加入3，5-二苄氧基苯甲酸甲酯(2mmol)溶于4mL无水THF的溶液，室温下搅拌下1.5h，加入4N HCl(10mL)，用乙酸乙酯提取，合并提取液，用碳酸氢钠溶液洗涤，无水MgSO₄干燥，减压下蒸去溶剂，柱层析纯化，得到产物3，5-二苄氧基苯甲醇，产率90％。

4)3，5-二苄氧基苯甲醇甲磺酸酯(化合物5，R＝CH₂C₆H₅)

3，5-二苄氧基苯甲醇(1.6mmol)溶于10mL干燥二氯甲烷中，加入甲磺酰氯(1.0mmol)和三乙胺(2.1mmol)，混合物在氮气氛中搅拌2h，加入水(8mL)，分出有机层，水层用二氯甲烷提取，合并有机提取液，用饱和氯化钠溶液洗涤，无水MgSO₄干燥，减压下浓缩，残留物用柱层析纯化，得到产物3，5-二苄氧基苯甲醇甲磺酸酯，产率94％。

5)3，5-二苄氧基苯乙腈(化合物6，R＝CH₂C₆H₅)

3，5-二苄氧基苯甲醇甲磺酸酯(1.4mmol)和氰化钾(2.1mmol)的混合物中加入甲氧基乙二醇(4mL)，室温下搅拌18h。加入乙醚，过滤，滤液减压下浓缩，残留物用柱层析纯化，得到3，5-二苄氧基苯乙腈，产率71％。

6)3，5-二苄氧基苯乙酸(化合物7，R＝CH₂C₆H₅)

3，5-二苄氧基苯乙腈(0.8mmol)溶于3mL乙醇中，加入氢氧化钾(9mmol)，混合物在搅拌下加热回流18h。减压下蒸去溶剂，加入水，用盐酸调至pH＝2，用乙酸乙酯提取，合并有机提取液，用饱和氯化钠溶液洗涤，无水MgSO₄干燥，减压浓缩，柱层析纯化，得到3，5-二苄氧基苯乙酸，产率84％。

7)3，5-二苄氧基苯乙酸乙酯(化合物8，R＝CH₂C₆H₅，R¹＝C₂H₅)

3，5-二苄氧基苯乙酸(0.3mmol)溶于无水乙醇(25mmol)，加入2滴浓硫酸，将反应混合物加热回流4h。小心加入NaHCO₃，调节pH至中性。过滤，滤液在减压下浓缩，残留物用柱层析分离，得到3，5-二苄氧基苯乙酸乙酯，产率86％。

8)3，5-二苄氧基-2-壬酰基-苯乙酸乙酯(化合物9，R＝CH₂C₆H₅，R¹＝C₂H₅，R²＝n-C₈H₁₇)

3，5-二苄氧基苯乙酸乙酯(0.53mmol)溶于三氟乙酸酐(1.8mL)中，加入正-壬酸(0.54mmol)，混合物在室温下搅拌48h。加入1mL碳酸氢钠溶液，用乙醚提取，合并有机提取液，用饱和氯化钠溶液洗涤，无水MgSO₄干燥，减压浓缩，柱层析纯化得到3，5-二苄氧基-2-壬酰基-苯乙酸乙酯，产率71％。

9)3，5-二羟基-2-壬酰基-苯乙酸乙酯(化合物CsA2，R¹＝C₂H₅，R²＝n-C₈H₁₇)

3，5-二苄氧基-2-壬酰基-苯乙酸乙酯(1.4mmol)溶于24mL乙醇中，加入10％Pd/C(70mg)，反应体系用氢气洗涤三次，然后在室温下于氢气氛中搅拌12h。过滤，滤液减压下浓缩，柱层析分离，得到3，5-二羟氧基-2-壬酰基-苯乙酸乙酯，产率95％。

实施例2

3，5-二羟基-2-辛酰基-苯乙酸乙酯(化合物CsA1(cytosporone B)，R¹＝C₂H₅，R²＝n-C₇H₁₅)CsA1的制备从中间产物3，5-二苄氧基苯乙酸乙酯8(R＝CH₂C₆H₅，R¹＝C₂H₅)开始。

1)3，5-二苄氧基-2-辛酰基-苯乙酸乙酯(化合物9，R＝CH₂C₆H₅，R¹＝C₂H₅，R²＝n-C₇H₁₅)

3，5-二苄氧基苯乙酸乙酯(1mmol)溶于三氟乙酸酐(3.8mL)中，加入正-辛酸(1.05mmol)，混合物在室温下搅拌48h。加入2mL碳酸氢钠溶液，用乙醚提取，合并有机提取液，用饱和氯化钠溶液洗涤，无水MgSO₄干燥，减压浓缩，柱层析纯化，得到3，5-二苄氧基-2-辛酰基-苯乙酸乙酯，产率74％。

2)3，5-二羟基-2-辛酰基-苯乙酸乙酯(化合物CsA1，R¹＝C₂H₅，R²＝n-C₇H₁₅)

3，5-二苄氧基-2-辛酰基-苯乙酸乙酯(1.5mmol)溶于25mL乙醇中，加入10％Pd/C(75mg)，反应体系用氢气洗涤三次，然后在室温下于氢气氛中搅拌12h。过滤，滤液减压下浓缩，柱层析分离，得到3，5-二羟氧基-2-辛酰基-苯乙酸乙酯CsA1(cytosporone B)，产率93％。

实施例3

3，5-二羟基-2-丙酰基-苯乙酸乙酯(化合物CsA5，R¹＝C₂H₅，R²＝C₂H₅)CsA5的制备从中间产物3，5-二苄氧基苯乙酸乙酯8(R＝CH₂C₆H₅，R¹＝C₂H₅)开始。

1)3，5-二苄氧基-2-丙酰基-苯乙酸乙酯(化合物9，R＝CH₂C₆H₅，R¹＝C₂H₅，R²＝C₂H₅)

3，5-二苄氧基苯乙酸乙酯(0.8mmol)溶于三氟乙酸酐(2.5mL)中，加入丙酸(0.96mmol)，混合物在室温下搅拌48h。加入1mL碳酸氢钠溶液，用乙醚提取，合并有机提取液，用饱和氯化钠溶液洗涤，无水MgSO₄干燥，减压浓缩，柱层析纯化得到3，5-二苄氧基-2-丙酰基-苯乙酸乙酯，产率76％。

2)3，5-二羟基-2-丙酰基-苯乙酸乙酯(化合物CsA5，R¹＝C₂H₅，R²＝C₂H₅)

3，5-二苄氧基-2-丙酰基-苯乙酸乙酯(2mmol)溶于25mL乙醇中，加入10％Pd/C(88mg)，反应体系用氢气洗涤三次，然后在室温下于氢气氛中搅拌12h。过滤，滤液减压下浓缩，柱层析分离，得到3，5-二羟氧基-2-壬酰基-苯乙酸乙酯，产率96％。

实施例4

3，5-二羟基-2-十八烷酰基-苯乙酸乙酯(化合物CsA6，R¹＝C₂H₅，R²＝n-C₁₇H₃₅)CsA6的制备从中间产物3，5-二苄氧基苯乙酸乙酯8(R＝CH₂C₆H₅，R¹＝C₂H₅)开始。

1)3，5-二苄氧基-2-十八烷酰基-苯乙酸乙酯(化合物9，R＝CH₂C₆H₅，R¹＝C₂H₅，R²＝n-C₁₇H₃₅)

3，5-二苄氧基苯乙酸乙酯(0.5mmol)溶于三氟乙酸酐(1.8mL)中，加入正十八烷酸(0.52mmol)，混合物在室温下搅拌48h。加入1mL碳酸氢钠溶液，用乙醚提取，合并有机提取液，用饱和氯化钠溶液洗涤，无水MgSO₄干燥，减压浓缩，柱层析纯化得到3，5-二苄氧基-2-十八烷酰基-苯乙酸乙酯，产率70％。

2)3，5-二羟基-2-十八烷酰基-苯乙酸乙酯(化合物CsA6，R¹＝C₂H₅，R²＝n-C₁₇H₃₅)

3，5-二苄氧基-2-十八烷酰基-苯乙酸乙酯(1.5mmol)溶于25mL乙醇中，加入10％Pd/C(80mg)，反应体系用氢气洗涤三次，然后在室温下于氢气氛中搅拌12h。过滤，滤液减压下浓缩，柱层析分离，得到3，5-二羟氧基-2-十八烷酰基-苯乙酸乙酯，产率90％。

实施例5

3，5-二羟基-2-壬酰基-苯乙酸[(Z)-2-戊烯醇]酯(化合物CsA7，R¹＝(Z)-CH₂CH＝CHC₂H₅，R²＝n-C₈H₁₇)

CsA7的制备采用CsA2经酯交换法：

1)CsA2的制备见实施例1。

2)3，5-二羟基-2-壬酰基-苯乙酸[(Z)-2-戊烯醇]酯(化合物CsA7)

CsA2(R¹＝C₂H₅，R²＝n-C₈H₁₇)(0.32mmol)溶于(Z)-2-戊烯-1-醇(3mL)，加入2滴浓硫酸，将反应混合物加热到55-60℃，搅拌过夜。加入NaHCO₃中和，硅藻土过滤，滤液减压浓缩，残留物用柱层析纯化，得到化合物CsA7，产率60％。

实施例6

4，5-二羟基-2-辛酰基-苯乙酸乙酯(化合物CsA8，R¹＝C₂H₅，R²＝n-C₇H₁₅)

1)3，4-二羟基苯甲酸甲酯(化合物2)

按照实施例1中步骤1)所述的方法，将起始原料3，5-二羟基苯甲酸改为3，4-二羟基苯甲酸，其他操作相同，得到3，4-二羟基苯甲酸甲酯，产率92％。

2)3，4-二苄氧基苯甲酸甲酯(化合物3，R＝CH₂C₆H₅)

按照实施例1中步骤2)所述的方法，3，4-二羟基苯甲酸甲酯在碱作用下与苄溴反应，得到3，4-二苄氧基苯甲酸甲酯，产率95％。

3)3，4-二苄氧基苯甲醇(化合物4，R＝CH₂C₆H₅)

按照实施例1中步骤3)所述的方法，将3，4-二苄氧基苯甲酸甲酯用氢化铝锂还原，得到3，4-二苄氧基苯甲醇，产率95％。

4)3，4-二苄氧基苯甲醇甲磺酸酯(化合物5，R＝CH₂C₆H₅)

按照实施例1中步骤4)所述的方法，将3，4-二苄氧基苯甲醇用甲磺酰氯处理，得到3，4-二苄氧基苯甲醇甲磺酸酯，产率90％。

5)3，4-二苄氧基苯乙腈(化合物6，R＝CH₂C₆H₅)

按照实施例1中步骤5)所述的方法，将3，4-二苄氧基苯甲醇甲磺酸酯与氰化钾作用，得到3，4-二苄氧基苯乙腈，产率70％。

6)3，4-二苄氧基苯乙酸(化合物7，R＝CH₂C₆H₅)

按照实施例1中步骤6)所述的方法，将3，4-二苄氧基苯乙腈水解，得到3，4-二苄氧基苯乙酸，产率80％。

7)3，4-二苄氧基苯乙酸乙酯(化合物8，R＝CH₂C₆H₅，R¹＝C₂H₅)

按照实施例1中步骤7)所述的方法，3，4-二苄氧基苯乙酸用乙醇酯化，得到3，4-二苄氧基苯乙酸乙酯，产率85％。

8)4，5-二苄氧基-2-辛酰基-苯乙酸乙酯(化合物9，R＝CH₂C₆H₅，R¹＝C₂H₅，R²＝n-C₇H₁₅)

混合3，4-二苄氧基苯乙酸乙酯(1.2mmol)和正-辛酸(1.3mmol)，加入多聚磷酸(9.5mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌12h。加入冰水，用二氯甲烷提取，用饱和碳酸氢钠溶液及氯化钠溶液洗涤，无水MgSO₄干燥，减压浓缩，柱层析分离，得到4，5-二苄氧基-2-辛酰基-苯乙酸乙酯，产率64％。

9)4，5-二羟基-2-辛酰基-苯乙酸乙酯(化合物CsA8，R¹＝C₂H₅，R²＝n-C₇H₁₅)

按照实施例1中步骤9)所述的方法，用Pd/C催化氢解，脱去双苄基保护基，得到4，5-二羟基-2-辛酰基-苯乙酸乙酯(化合物CsA8)，产率92％。

Claims (10)

1.双羟基-2-酰基苯乙酸酯，其特征在于其结构式为：

其中，R¹＝C₁～C₁₀烷基或烯基，R²＝C₁～C₂₀烷基或烯基，Y＝OH，位于苯环C3，C4或C6位。

2.如权利要求1所述的双羟基-2-酰基苯乙酸酯的制备方法，其特征在于其路线为：

3.如权利要求2所述的双羟基-2-酰基苯乙酸酯的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)制备二羟基苯甲酸甲酯2

将二羟基苯甲酸1溶于甲醇中，制成0.3～0.6mol/L的溶液，加入氯化亚砜，搅拌至反应完成，减压下浓缩，加入水，用乙醚提取，合并有机提取液，洗涤，干燥，减压浓缩，柱层析纯化，得到产物二羟基苯甲酸甲酯2；

2)制备二烷氧基苯甲酸甲酯3

将二羟基苯甲酸甲酯2溶于丙酮中，制成0.5～0.8mol/L的溶液，分别加入卤代烃RX(R＝CH₃、CH₂C₆H₅、X＝Cl、Br、I)和粉末状的无水碳酸钾，加热，搅拌下回流至反应完成，过滤，滤液减压下浓缩，柱层析纯化，得到产物二烷氧基苯甲酸甲酯3；

3)制备芳基甲醇4

将LiAlH₄悬浮于无水四氢呋喃(THF)中，加入二烷氧基苯甲酸甲酯溶于无水THF的溶液，搅拌至反应完成，加入盐酸溶液，用乙酸乙酯提取，合并有机提取液，洗涤，干燥，减压下浓缩，柱层析分离，得到芳基甲醇4；

4)制备甲磺酸酯5

芳基甲醇4溶于二氯甲烷中，制成0.1～0.3mol/L的溶液，加入甲磺酰氯和三乙胺，搅拌直至反应完成，加入水，分出有机层，水层用二氯甲烷提取，合并有机提取液，洗涤，干燥，减压浓缩，柱层析分离，得到产物甲磺酸酯5；

5)制备芳基乙腈6

将甲磺酸酯5溶于甲氧基乙二醇，制成0.2～0.5mol/L的溶液，加入KCN，搅拌直至反应完成，加入乙醚，过滤，减压浓缩，柱层析纯化，得到产物芳基乙腈6，KCN的用量相当于甲磺酸酯5的1.2～2.0倍摩尔；

6)制备芳基乙酸7

将芳基乙腈6溶于乙醇中，制成0.2～0.4mol/L的溶液，加入氢氧化钾，搅拌下回流，直至反应完全，减压下浓缩，加入水，用盐酸酸化，所得水溶液用乙酸乙酯提取，合并有机提取液，洗涤，干燥，减压下浓缩，柱层析分离，得到产物芳基乙酸7；

7)制备芳基乙酸酯8

将芳基乙酸7溶于醇R¹OH(R¹＝C₁-C₁₀烷基或烯基)中，制成0.2～0.4mol/L的溶液，加入硫酸，将反应混合物加热，回流直至反应完全，加入碳酸氢钠中和，减压下浓缩，柱层析分离，得到产物芳基乙酸酯8；

8)制备2-酰基芳基乙酸酯9

将芳基乙酸酯8溶于三氟乙酸酐，制成0.2～0.4mol/L的溶液，加入羧酸R²CO₂H(R²＝C₁-C₂₀的烷基或烯基)，其用量为化合物8的1.0～1.2倍摩尔，搅拌直至反应完全，加入碳酸氢钠溶液，用乙醚提取，有机提取液用氯化钠溶液洗涤，干燥，减压浓缩，柱层析分离，得到2-酰基芳基乙酸酯9；或

混合芳基乙酸酯8和羧酸R²CO₂H(R²＝C₁-C₂₀的烷基或烯基)，加入相当于芳基乙酸酯8的6～10倍摩尔数的多聚磷酸，将反应混合物在70～90℃下搅拌，直至反应完全，加入冰水，用二氯甲烷提取，用饱和碳酸氢钠溶液及氯化钠溶液洗涤，干燥，减压浓缩，柱层析分离，得到2-酰基芳基乙酸酯9；

9)制备化合物CsA

对于R＝CH₂C₆H₅的化合物9：将相应的2-酰基芳基乙酸酯9溶于乙醇中，制成0.1～0.3mol/L的溶液，加入10％Pd/C，其用量为化合物9质量的5％～20％，反应体系用氢气洗涤后，在室温、常压下与氢气作用，直至反应完全，过滤，将滤液减压浓缩，柱层析纯化，得到化合物CsA；

对于R＝CH₃的化合物9：将相应的2-酰基芳基乙酸酯溶于二氯甲烷中，制成0.1～0.3mol/L的溶液，加入无水AlCl₃，其用量为化合物9的5～10倍摩尔数，搅拌直至反应完成，加入盐酸，用乙酸乙酯提取，合并提取液，用饱和氯化钠溶液洗涤，干燥，减压下浓缩，柱层析分离，得到化合物CsA。

4.如权利要求3所述的双羟基2-酰基苯乙酸酯的制备方法，其特征在于在步骤1)中，氯化亚砜的加入量相当于二羟基苯甲酸1的1.5倍摩尔数。

5.如权利要求3所述的双羟基2-酰基苯乙酸酯的制备方法，其特征在于在步骤2)中，卤代烃RX(R＝CH₃、CH₂C₆H₅、X＝Cl、Br、I)的加入量相当于二羟基苯甲酸甲酯2的1.2～3.0倍摩尔数，粉末状的无水碳酸钾的加入量相当于二羟基苯甲酸甲酯2的2～5倍摩尔数。

6.如权利要求3所述的双羟基2-酰基苯乙酸酯的制备方法，其特征在于在步骤4)中，甲磺酰氯的加入量相当于芳基甲醇4的1.0～1.5倍摩尔数，三乙胺的加入量相当于芳基甲醇4的1.2～2.0倍摩尔数。

7.如权利要求3所述的双羟基-2-酰基苯乙酸酯的制备方法，其特征在于在步骤6)中，氢氧化钾的用量为芳基乙腈6的8～12倍摩尔，用盐酸酸化至pH＝2。

8.如权利要求3所述的双羟基-2-酰基苯乙酸酯的制备方法，其特征在于在步骤7)中，硫酸的加入量为催化量硫酸，加入碳酸氢钠中和至pH＝7。

9.如权利要求3所述的双羟基-2-酰基苯乙酸酯的另一种制备方法，其特征在于其路线为：

其中，R＝CH₂C₆H₅，CH₃，R²＝C₁～C₂₀烷基或烯基，OH位于苯环C3，C4或C6位。

其具体步骤为：

将双羟基2-酰基苯乙酸甲酯或乙酯(R¹＝CH₃，C₂H₅)化合物溶于R¹＝C₃-C₁₀的醇R¹OH中，制成0.05～0.2mol/L的溶液，加入催化量的浓硫酸，反应混合物在55～60℃下搅拌4～12h，加入碱NaHCO₃中和，硅藻土过滤，滤液减压浓缩，残留物用柱层析纯化，得到产物CsA(R¹＝C₃-C₁₀)。

10.如权利要求1所述的双羟基-2-酰基苯乙酸酯在制备抗肿瘤药物或其它活性药物的先导物中的应用。