CN101306074A - 一种解酒护肝的药物组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种具有解酒护肝作用的药物组合物,该组合物主要由葛根提取物、银杏叶提取物、L-半胱氨酸和维生素C组成,其包括如下重量份的活性成分:葛根提取物150~300份、银杏叶提取物50~200份、L-半胱氨酸30~200份、维生素C 20~300份。本发明组合物制成的剂型,具有良好的保护肝脏的作用,醒酒效果良好,且无毒副作用。
Description
技术领域
本发明提供了一种具有解酒护肝作用的药物组合物,主要由葛根提取物、银杏叶提取物、L-半胱氨酸和维生素C组成,属于保健食品领域。本发明品于2007年获国家食品药品监督管理局颁发的保健食品文号--国食健字G20070342。
背景技术
我国酒文化源远流长,适当饮酒可舒筋活血、强身健体,但过量饮酒,轻则降低机体反应能力、刺激消化道,重则引起中枢麻痹,甚至导致呼吸衰竭和死亡。酒精代谢产物乙醛对肝细胞具有显著毒性作用,可干扰肝脏细胞的氧化还原状态,造成肝细胞变性和坏死。长期持续过量饮酒,可诱发化学性肝损伤,引起脂肪肝、酒精性肝炎和肝硬化等疾病。如果嗜酒者能够及早采取预防和治疗措施,可避免化学性肝损伤的发展。
过量饮酒危害重大,可给家庭和社会造成重大损失。因此,开发安全有效的解酒药品对我国的国计民生意义重大。
目前市售具有解酒护肝功能的产品,多为单纯中药组方,或添加人参、冬虫夏草等组分,或添加茶多酚、几丁聚糖等功能成分,剂型包括口服液、饮料、冲剂等。本发明品由中药、维生素和氨基酸组成,不仅可以有效地预防化学性肝损伤,而且还可以提供肝脏修复所需的营养成分,多角度、多渠道地起到解酒护肝的作用。此外,本发明品经国家权威机构验证,安全无毒副作用。本发明品于2007年获得国家食品药品监督管理局颁发的保健食品文号--国食健字G20070342。
发明内容
本发明的目的是提供一种药物组合物,可以解酒护肝、预防化学性肝损伤,主要由葛根提取物、银杏叶提取物、L-半胱氨酸和维生素C组成。
为了实现本发明目的,本发明的药物组合物,主要成分包括葛根提取物、银杏叶提取物、L-半胱氨酸和维生素C,其包括如下重量份的活性成分:
葛根提取物150~300份、银杏叶提取物50~200份、L-半胱氨酸30~200份、维生素C20~300份。
优选的为:葛根提取物150~250份、银杏叶提取物80~180份、L-半胱氨酸50~150份、维生素C30~150份。
本发明所述的份为重量份,为本领域常用的微克、毫克、克、两、公斤、吨等重量单位。
本发明药物组合物的制备方法可采用本领域常规方法添加药用辅料,如微晶纤维素、糊精、滑石粉、羧甲基淀粉钠、微粉硅胶、硬脂酸镁、羟丙基甲基纤维、钛白粉、滑石粉、有色有机染料等,经过预混、颗粒制备、总混、压片、薄膜包衣等过程制成不同制剂,比如片剂或胶囊剂等。
本发明药物组合物建议日服有效量为1200mg(以60kg成年人为例),饮酒前或饮酒后半小时服用即可。
葛根味甘性凉,入脾、胃经,生津除烦,善治酒积,自唐代即用于“解酒毒”,曾收录于《神农本草经》、《千金要方》、《本草衍义》中。现代药理研究表明葛根可提高肝细胞中谷胱甘肽和超氧化物歧化酶水平,清除自由基并对抗脂质过氧化;促进血液循环,使乙醇排泄加速;提高乙醇脱氢酶活性,促进乙醇分解代谢;对抗中枢抑制,达到醒酒作用;改善心脑循环,减少宿醉反应;缓解胃肠道痉挛,减轻呕吐症状;葛根对嗜酒大鼠的乙醇摄入量还有抑制作用。因此,葛根具有良好的预防饮酒导致的化学性肝损伤的作用。
银杏叶含有多种化学组分,包括黄酮类(山奈黄素、槲皮素、异鼠李黄素)、萜类、烃基酚类和多烯醇类等。银杏叶中的黄酮类成分为强力自由基清除剂和代谢增强剂。研究表明,银杏叶提取物可以通过诱导血红素氧化酶-1表达,减少酒精所致肝脏谷胱甘肽的耗竭,增加抗氧化物质活性或含量,抑制脂质过氧化反应,清除自由基,有效预防酒精所导致的化学性肝损伤。银杏叶还具有降低血中胆固醇、甘油三酯、谷草转氨酶和谷丙转氨酶的作用,起到防治化学性肝损伤的作用。
维生素C是一种强力自由基清除剂,可作为酶的辅因子参与多种重要的代谢酶合成过程,还可以协同其他抗氧化剂,如葛根素中的异黄酮成分、谷胱甘肽等,保护细胞免受过氧化损害。另一方面,研究发现,化学性肝损伤患者血浆维生素C含量显著低于正常。因此,补充维生素C可有效捕获自由基,预防脂质过氧化对肝细胞的损害,从而起到保护和营养肝细胞的作用。
半胱氨酸是含硫氨基酸,所带巯基(-SH)具有多种生理作用。研究发现,酒精性脂肪肝血浆半胱氨酸水平下降超过60.0%。半胱氨酸是合成肝脏谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)的重要氨基酸,GSH是体内重要的抗氧化剂,半胱氨酸水平下降可导致GSH合成不足。因此,补充半胱氨酸可促进GSH的合成,从而减轻酒精性肝脏过氧化损伤。
本发明品综合运用中药、维生素和氨基酸,利用多种不同的作用机理,促使体内乙醇代谢、排泄加快,降低血中乙醇浓度,达到预防、减轻饮酒导致的化学性肝损伤的作用,同时含有修复肝细胞必需的氨基酸、维生素。本发明品不含任何添加剂,服用安全,无毒副作用。原料来源广泛,成本低廉,社会效益和经济效益显著。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明,但不用来限制本发明的范围。
实施例1
本实施例药物组合物片剂的原料如下表:
每100份本发明的药物组合物加15.0份的微晶纤维素、5.0份的羧甲基淀粉钠、1.0份的硬脂酸镁、1.0份的薄膜包衣预混剂,经过预混、颗粒制备、过筛、总混、压片、包衣制成片剂。
实施例2
本实施例药物组合物胶囊剂的原料如下表:
每100份本发明的药物组合物加20.0份的糊精、5.0份的微晶纤维素,经过混匀后,过150目筛,装胶囊,得组合物胶囊剂。
实施例3
制备过程同实施例1,不同的是,本实施例药物组合物片剂的原料如下表:
实验例1
本实验例的目的在于研究本发明药物组合物是否具有急性毒性作用。
使用实施例1中制备的本发明药物组合物,对其急性毒性进行检验。研究对象为ICR种小鼠20只,雌雄各半,体重18~22g,SPF级动物试验室(合格证号医动字01-4059)条件下进行饲养,室温22±2℃,相对湿度60%,真空包装饲料由军事医学科学院实验动物中心提供,合格证号SCXK-(军)2002-018。采用经口最大耐受量法试验,将本发明品10g加纯净水混匀至20ml配制成50%浓度的溶液,给予10g/kgBW(相当于本发明品推荐剂量0.02g/kgBW的500倍),经口灌胃0.2ml/10gBW,灌胃前停食16小时,连续观察2周,记录动物中毒症状及死亡情况。
表1急性毒性试验前后小鼠体重及死亡情况
研究结果表明,动物活动均正常,毛色光泽度良好,未发现任何症状。说明本发明品以急性毒性分级,属实际无毒物质。
实验例2
本实验例的目的在于研究本发明药物组合物遗传毒性作用。
使用实施例3中制备的本发明药物组合物,进行遗传毒性试验,包括小鼠骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核试验、小鼠精子畸变试验和Ames试验,验证其可能的致突变和致畸作用。
1)小鼠骨髓PCE微核试验
研究对象为ICR种小鼠50只,SPF级合格动物(合格证号:医动字01-4059),体重23~28g,按体重分层随机分组,每组动物各10只,雌雄各半。SPF级动物试验室(合格证号医动字01-4059)条件下进行饲养,室温22±2℃,相对湿度60%,群笼喂养5只/笼,真空包装饲料由军事医学科学院实验动物中心提供,合格证号SCXK-(军)2002-018。将本发明品10.0g、5.0g、2.5g分别加纯净水混匀至20ml,配制成50%、25%和12.5%浓度的溶液。按照急性毒性试验最大剂量10g/kgBW为最高计量,以下分别设1/2(5.0g/kgBW)及1/4(2.5g/kgBW)两个剂量组,另设阳性对照组环磷酰胺(CP)40mg/kgBW及阴性对照组。小鼠经口灌胃0.2ml/10gBW,连续给予本发明品两天(间隔24小时)。于末次给药后6小时,动物颈椎脱臼处死。取胸骨骨髓,按常规制片、染色、镜检。每只动物观察100个PCE,记录含微核PCE数,计算微核率及PCE与红细胞(RBC)的比值。采用泊松分布U检验方法进行统计学分析。结果见表2。
表2小鼠骨髓PCE微核试验结果
阳性对照组与阴性对照组比较,**P<0.01。
研究结果表明,各剂量组与阴性对照组相比,均未发现有显著性差异(P>0.05),阳性对照组与阴性对照组相比有非常显著的差异(P<0.01)。结果表明在本试验剂量范围内,该发明品不诱发微核率的增加。
2)小鼠精子畸变试验
研究对象为雄性ICR种小鼠25只,SPF级合格动物(合格证号医动字01-4059),体重23~28g,按体重分层随机分组,每组动物5只。SPF级动物试验室(合格证号医动字01-4059)条件下进行饲养,室温22±2℃,相对湿度60%,群笼喂养5只/笼,真空包装饲料由军事医学科学院实验动物中心提供,合格证号SCXK-(军)2002-018。将实施例1中本发明品10.0g、5.0g、2.5g分别加纯净水混匀至20ml,配制成50%、25%和12.5%浓度的溶液。按照急性毒性试验最大剂量10g/kgBW为最高计量,以下分别设1/2(5.0g/kgBW)及1/4(2.5g/kgBW)两个剂量组,另设阳性对照组(CP 40mg/kgBW)及阴性对照组。小鼠经口灌胃0.2ml/10gBW,连续给予本发明品五天,于第一次给药后的第35天处死,取双侧附睾按常规制片染色和镜检,每只动物观察1000个精子,记录畸变精子数,计算畸变率。采用秩和检验的方法进行统计学分析。结果见表3。
表3小鼠精子畸变试验结果
阳性对照组与阴性对照组比较,**P<0.01。
研究结果可见,各剂量组与阴性对照组相比,均未发现有显著性差异(P>0.05),阳性对照组与阴性对照组相比,其精子畸变数与畸变率差异非常显著(P<0.01)。表明在本试验剂量范围内,未发现该发明品对生殖细胞有诱变作用。
3)Ames试验
采用鼠伤寒沙门氏菌、微粒体酶平板掺入突变试验预先温浴法。试验菌株TA97a、TA98为移码型突变株,TA100、TA102为碱基置换型突变株,四株的五个遗传特性经检测都达到规定标准。实验前,取20μl-80℃保存的菌液接种到10ml营养肉汤培养基中,37℃ 12~16小时水浴振荡培养,得到大约2×108菌悬液。取实施例3中本发明品1g,溶于无菌水中,不溶部分再溶于二甲基亚砜(DMSO)中,将两者混匀后定容至20ml作为5mg/皿剂量,以下分别按1倍、5倍、10倍、50倍稀释。实验剂量选定为5mg/皿、2.5mg/皿、1.0mg/皿、0.5mg/皿、0.1mg/皿五个剂量。同时设空白对照组、溶剂对照(DMSO)组和阳性对照组。试验组加入不同浓度本发明品100μl(5mg/皿、2.5mg/皿、1.0mg/皿、0.5mg/皿、0.1mg/皿五个剂量组)、菌液100μl,需活化时加入S-90.5ml,混合后37℃水浴振荡20分钟,再加2ml顶面琼脂(0.5mM组氨酸/生物素),快速倒板均匀铺平,37℃孵育48小时看结果。阳性对照不加本发明品,只加标准致突变物[2-AF(2-氨基芴)10μg/皿、MMS(甲基甲烷磺酸酯)1μl/皿、芴酮(2,4,7-三硝基9芴酮)0.2μg/皿或2-AA 12μg/皿],溶剂对照(DMSO)加除本发明品和标准致突变物以外所有试剂,空白对照只在培养基上加菌液。实验参数:(1)Aroclo-1254诱导的大鼠肝匀浆,蛋白含量33mg/mL。(2)按1983年Ames Test修订方法,S-9加入量20μl/皿。(3)实验结果数据为三个平皿均数。结果见表4~7。
表4Ames Test结果一
表5Ames Test结果二
表6Ames Test结果三
表7Ames Test结果四
研究结果表明,采用四株两种突变类型的菌株对样品进行了六个剂量的测试,在有代谢活化+S9或无代谢活化-S9系统的条件下,本发明品对四种菌株没有明显的诱导作用。说明在本实验的条件下,所选剂量范围内,该发明品对四种菌株未见明显的诱导突变作用。
实验例3
本实验例目的在于进一步研究本发明药物组合物毒性作用及其对生长发育的影响。
使用实施例1中制备的本发明药物组合物,进行30天喂养试验。试验动物为Wistar种断乳大鼠,体重60~76g。SPF级动物实验室(合格证号医动字01-4059号)条件下进行饲养,室内温度22±2℃,相对湿度53%~57%。粉状基础饲料由军事医学科学院实验动物中心提供真空包装无菌饲料,合格证号SCXK-(军)2002-018。医学观察3天后,按体重分层随机分入各组。以人群推荐量(0.02g/kgBW)的100、75和50倍设三个剂量组,即2.0g/kgBW、1.5g/kgBW及1.0g/kgBW,另设阴性对照组(粉状基础饲料),每组动物雌、雄各10只。以大鼠体重10%作为饲料摄入量,按剂量配制含不同本发明品浓度的饲料,即2.0%、1.5%和1.0%。大鼠自由摄入饲料。
每日观察动物的活动情况、毛色、摄食及排泄情况,症状及出现的时间,出现死亡时进行尸体解剖,肉眼观察脏器的病理改变,有病理改变时作病理切片作组织学观察。实验前及实验期间每周称量体重、饲料加入量及剩余量,计算食物利用率。试验结束时取血,测定血液学指标血红蛋白(Hb)、红细胞(RBC)、血小板(PLT)、白细胞(WBC)及其分类和生化指标谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、白球比(A/G)、尿素氮(BUN)、肌苷(CRE)、血糖(GLU)、总胆固醇(TC)及总甘油三酯(TG)。称量脏器(肝、脾、肾、睾丸或卵巢)并计算脏器系数。病理检查采用常规制片、染色,光学显微镜检查心、肝、脾、胰、肾、胃、十二指肠、睾丸或卵巢的组织学改变。统计学方法采用方差分析。
结果表明,各组动物在实验期间活动正常,毛色光泽度较好,摄食及排泄正常,未发现有症状出现。病理组织学观察结果如下:
1)大体解剖:可见各剂量组及对照组肝脏的颜色正常,边缘锐利,其他脏器均未见异常。病理组织学观察高剂量组20例、中剂量组10例、低剂量组10例和对照组20例共60例(雌雄各半)。
2)光镜观察
肝脏:除各组均有少数动物出现轻度点状坏死(高剂量组雄鼠1例,中剂量组雄鼠2例、雌鼠1例,低剂量组雌鼠2例,对照组雌、雄各2例)及嗜酸性变(中剂量组雌鼠1例、低剂量组雄鼠1例)外,各组肝被膜无明显增厚及渗出,未见汇管区间质纤维组织增生及假小叶形成,未见间质内炎细胞浸润。
肾脏:肾被膜无明显增厚及渗出,肾小球结构正常,球内无内皮细胞增生,无炎性细胞浸润;肾小球未见明显纤维化;肾小管内未见明显蛋白管型、细胞及颗粒管型。
心脏:心外膜无明显增生,无浆液及纤维素渗出,心肌细胞无明显变性及坏死;间质无炎性细胞浸润。心内膜无明显增厚,内膜内无炎性细胞浸润。
脾脏:被膜无明显增厚,小梁无明显增粗,淋巴小结无明显增生。
胃:胃粘膜无明显渗出物,无炎性细胞浸润,胃壁无出血及溃疡,胃粘膜腺体无明显增生及肥大,无萎缩。
胰腺:胰腺的外分泌腺未见出血及坏死,胰岛细胞未见变性及坏死,胰腺间质未见炎细胞浸润。
十二指肠:未见出血、坏死及溃疡形成,粘膜层未见炎性细胞浸润。
生殖系统:睾丸与卵巢未见明显病变。
其他结果见表8~13。
表8各组动物试验前及试验期间各周体重(g,x±s)
可见三个剂量组动物的试验前和试验期间各周体重与阴性对照组相比,均未发现显著性差异(P>0.05)。
表9各组动物的总增重和食物利用率(x±s)
可见三个剂量组动物的增重食物利用率与阴性对照组相比,均未发现显著性差异(P>0.05)。
表10各组动物血液学指标测定结果(x±s)
可见三个剂量组动物的各项血液学指标与阴性对照组相比,均未发现显著性差异(P>0.05)。
表11各组动物生化指标测定结果一(x±s)
表12各组动物生化指标测定结果二(x±s)
由表11、12可见三个剂量组动物的各项生化指标与阴性对照组相比,均未发现显著性差异(P>0.05)。
表13各组动物的主要脏器系数(x±s)
中、高剂量组雄性动物的肝脏重量及脏器系数均高于阴性对照组,但均在正常值范围之内,分析其原因可能与体重有关。2.0g/kgBW、1.5g/kgBW组均有4只动物的体重超过300g,其肝重量均大于10g。但相应动物的肝功能(ALT、AST、TP及ALB)及病理检查均为正常,故考虑无临床意义。其他各主要脏器重量和脏器系数与阴性对照组相比,均未发现有显著性差异(P>0.05)。
试验结果表明,该发明品在本实验剂量范围内(1.0~2.0g/kgBW),对实验动物的生长发育、食物利用率、血液系统、血清生化指标及病理组织学改变均无明显影响。
实验例4
本实验例的目的在于研究本发明药物组合物是否具有预防化学性肝损伤的功能。
使用实施例2中制备的本发明药物组合物,对预防化学性肝损伤功能进行检验。研究对象为昆明种雄性小鼠50只,体重21~23g。剂量设计按照每人每日食用1200毫克的1倍、10倍、30倍设低、中、高三个剂量,即20、200、600mg/kgBW,同时设阴性对照组和乙醇(5600mg/kgBW)阳性对照组,将小鼠随机分组,每组10只。将本发明品以去离子水配制,每日一次经口灌胃给予各剂量组动物,灌胃量0.1ml/10gBW,阴性对照组及乙醇阳性对照组给予等量去离子水,连续灌胃30天,每周称体重,调整给药量。于试验第30天将本发明品灌胃各组及阳性对照组小鼠给予50%(V/V)乙醇0.14ml/10gBW,禁食12小时后,取肝脏制成0.1g/ml肝匀浆,分别测甘油三酯(TG)、丙二醛(MDA)及还原型谷胱甘肽(GSH)含量。结果用“SPSS 8.0”软件进行方差分析统计,见表14~15。
表14药物组合物对实验动物体重影响(g,x±s)
可见各组动物试验期内体重持续增长,各组之间体重差异无显著性(p>0.05)。
表15药物组合物对小鼠化学性肝损伤MDA、GSH、TG水平的影响(x±s)
试验组与阳性对照组比较,**P<0.01,*P<0.05;阳性对照组与阴性对照组比较,##P<0.01。
研究结果表明,阳性对照组与阴性对照组相比,肝组织中MDA、TG含量明显升高,GSH含量明显降低,差异有极显著性(p<0.01)。本发明品中、高剂量组MDA含量比阳性对照组显著降低(p<0.01),低、中、高剂量组GSH含量显著高于阳性对照组(p<0.01),高剂量组TG含量明显低于阳性对照组(p<0.05),表明本发明品可降低肝组织中MDA、TG含量、能有效阻止GSH耗竭,说明本发明品具有预防化学性肝损伤的功能。
实验例5
本实验例的目的在于研究本发明药物组合物对于解酒效果的人体试验。
使用实施例2中制备的本发明的药物组合物胶囊剂,对本品解酒效果进行检验。研究对象为健康男性志愿者40名,体检未发现心、肝、肾等重要脏器疾患,平均年龄29.2±5.8岁。将受试对象按照一般状况指标为参数配对,随机分为试验组和对照组,每组20人。试验组和对照组人员分别在试验前进行心率、血压、反应时、闪光融合频率等一般指标测定,无显著性差异,具有可比性。试验前1周正常饮食,禁止饮酒。试验组在试验前30min服用本发明品胶囊剂(有效量为1200mg),对照组同时服用与本试验品外观、形状完全一致的药用淀粉胶囊。而后按250g/人口服食用酒精。分别于饮酒后1h、2h、4h测定心率、血压、反应时和闪光融合频率等指标,并分别在1h、4h填写主观症状调查表。
表16参试人员饮酒前后心率比较(次/分,x±s)
与对照组相比,*p<0.05
表17参试人员饮酒前后血压变化比较(mmHg,x±s)
与对照组相比,*p<0.05。
表18参试人员饮酒后主观症状比较(%,x±s)
与对照组相比,**p<0.01
表19参试人员饮酒前后反应时比较(秒,x±s)
与对照组相比,**p<0.01。
表20参试人员饮酒前后闪光融合频率比较(秒,x±s)
与对照组相比,**p<0.01。
由表16~20可见,对照组摄入本发明复合物后1h、2h、4h的心率加快,收缩压升高(P<0.05),反应时和闪光融合频率显著延长(P<0.01),对照组饮酒后头痛、头晕、恶心、嗜睡等“醉酒”症状也较试验组明显加重,说明本发明复合物解酒效果良好。
虽然,上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述,但在本发明基础上,可以对之作一些修改或改进,这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此,在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进,均属于本发明要求保护的范围。
Claims (3)
1、一种药物组合物,其包括如下重量份的活性成分:葛根提取物150~300份、银杏叶提取物50~200份、L-半胱氨酸30~200份、维生素C 20~300份。
2、根据权利要求1所述的药物组合物,其特征在于,包括如下活性成分:葛根提取物150~250份、银杏叶提取物80~180份、L-半胱氨酸50~150份、维生素C 30~150份。
3、根据权利要求1或2所述的药物组合物,其特征在于,其与药用辅料制成的片剂或胶囊剂。
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