CN101301427B - 一种药物组合物及其制备方法和用途 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种具有抗衰老或/和免疫调节作用的药物组合物，它是含有维生素C、葡萄籽提取物OPC、山楂、黄精、枸杞子、低聚果糖为原料制备而成的药剂。本发明还提供了该药物组合物的制备方法和用途。本发明药物组合物是将维生素C等抗氧化剂和中药有机组合在一起，全面调节人体的免疫功能、清除体内的氧自由基，提高细胞内SOD的活性，抑制肝脏LPO生成，减少有毒物质的产生，增加有毒物质的排泄而起到抗衰老和调节人体免疫功能的作用，原料的配伍使用达到了协同增效的目的，为临床或食品提供了一种新的选择。
Description
技术领域
本发明涉及一种具有抗衰老或/和免疫调节作用的药物组合物，属药物领域。
背景技术
衰老是人体各器官功能开始逐渐降低的一种生理现象。导致人体衰老的原因有很多学说，如脑中心学说、自由基学说、微循环障碍学说等。但自由基学说是影响人衰老的主要因素，衰老的过程不是产生在花甲之年，而是生命成长过程中时刻伴随的现象。一旦体内清除自由基的能力减弱，衰老就随之而来。
衰老是被动，但防止衰老是主动。可以通过提供必要的营养素、保健食品或药品可以阻止衰老的进程。其中防止自由基毒性反应的抗氧化剂在决定寿命中起决定作用，抗氧化剂是哺乳动物寿命的决定因子。大量的科学根据证明：体内抗氧化剂的水平与人类寿命有高度的正相关性。随年龄的增长，人体固有的抗氧化剂已远远不能满足要求，必须从外界补充，以最大限度地清除氧自由基的毒性效应。
现有这类抗衰老的产品很多，如单一的维生素E、维生素C、葡萄籽提取物OPC、微量元素硒、中药提取姜黄素、茶多酚等，这些产品在抗衰老方面有一定的疗效，但常常配方单一，作用不全面，只考虑了体内抗氧自由基的问题，未全面考虑与抗衰老有关的问题，如免疫调节、代谢、各器官功能、排毒等。而人是一个整体，将抗氧自由基和中医理论结合起来，将抗氧自由基、免疫调节、补气益血结合起来。
维生素C是一种较强的抗氧化剂，葡萄籽提取物OPC亦具有很强的抗氧化能力，在体内为VE的50倍，为VC的20倍。两者都是很好的自由基清除剂。OPC尤其对超氧化阴离子和羟基自由基的抑制能力约为80％，而VC为12％，同时OPC还可调节血脂、血压，防止血栓形成，透过血脑屏障，保护心脑血管。而VC不具备这些功能，二者具有互补性。山楂，功能与主治：消食积，化滞瘀。主治饮食积滞，脘腹胀痛，泄泻痢疾，血瘀痛经，经闭，产后腹痛，恶露不尽，高脂血症。《本草衍义补遗》：健胃，行结气。《本草纲目》：化饮食，消肉积。滞血痛胀。药理作用：促进消化、扩冠强心、降压、降脂、抗氧化、免疫增强、防癌、抗菌。在临床上用于降血脂，预防和治疗冠心病、高脂血症、高血压、扩张血管、改善微循环的作用，对组织供血供氧及时清除代谢产物和氧自由基具有重要作用，山楂总黄酮对超氧阴离子有很强的清除作用，可直接抑制肝脏脂质过氧化反应，降低超氧阴离子诱导的透明质酸解聚使用。黄精，功能与主治：养阴滋肺，补脾益气，滋肾填精。主治阴虚劳嗽，肺燥咳嗽；脾虚乏力，食少口干，消渴；肾亏腰膝酸软，阳痿遗精，耳鸣目暗，须发早白，体虚羸瘦。《别录》主补中益气，除风湿，安五脏。久服轻身延年。《日华子》补五劳七伤，助筋骨.......，益脾胃，润心肺......，食之助颜。《道藏神仙芝草经》宽中益气，五脏调良，肌肉充盛，骨体坚强......。颜色鲜明，发白更黑，齿落更生。《滇南本草》补虚添精。《本草蒙筌》壮元阳。《纲目》补诸虚.....，填精髓。《药物图考》主理气血，坚筋骨，润皮肤，去面黑。药理作用：抗病原微生物、增加冠脉流量、降血脂、抗衰老、降血糖、免疫调节。在临床上用于补脾益气、增强机体代谢、提高免疫功能、抗缺O2、抗衰老的应用。黄精多糖对老年小鼠SOD(超氧化物歧化酶)、CAT(过氧化氢酶)、GSH-PX(谷胱甘肽过氧化物酶)活力，而呈现较好的抗氧化作用。枸杞子，功能与主治：养肝、滋肾、润肺。主治肝肾亏虚，头晕目眩，目视不清，腰膝酸软，阳痿遗精，虚劳咳嗽，消渴引饮。《药性论》能补益精诸不足，易颜色，变白，明目，安神，令人长寿。《本草经集注》补益精气，强盛阴道。《纲目》滋肾，润肺，明目。药理作用：免疫调节、抗肿瘤、降血脂与保肝、抗脂肪肝、造血、降血糖、抗衰老。在临床上用于补肝肾、明目、益精血、抗衰老、抗肿瘤、保肝，提高免疫功能及促进造血系统机能等的应用，枸杞多糖对O2 -均有清除使用，对细胞内SOD活力具有提高作用。
现有技术已经公开葡萄籽原花青素提取物具备抗氧化和清除自由基、心血管保护、抗肿瘤、抗疲劳、抗衰老的功效，这些都与提高机体免疫力相关(原花青素生物学作用研究进展，中国公共卫生2006，22(1)110-111；葡萄籽原花青素提取物的保健功能与应用，食品科技2006，1)，并且维生素C与抗氧化相关，山楂与保护心血管相关，黄精、枸杞与抗衰老、提高机体免疫力相关，现有技术也公开了葡萄籽提取物分别与这些组分的组合物。申请号：02159540，发明名称：以葡萄籽提取物为原料的胶囊剂，公开了：一种以葡萄籽提取物为原料的胶囊剂，由胶囊外壳和内装粉剂组成，其内装粉剂按以下重量配比：从葡萄籽中提取的原花青素25-90％；维生素C10-30％；膳食纤维0-62％。其膳食纤维可以是植物纤维或动物纤维。本发明提高了原花青素在配方中的比例，克服了人们普遍认为的原花青素不能大剂量服用的偏见，解决了含有葡萄籽提取物胶囊疗效较低、产品成本过高，并有副作用的技术问题。采用原花青素与VC的简单组方，使原花青素与VC的功效互相彰显，起到保护细胞内外的生化成分免受自由基攻击，延长细胞的寿命达到抗衰老、软化血管、改善微循环、抑制肿瘤、增加食欲、美容祛斑的功效。申请号：03111132，发明名称：一种具有延缓衰老、免疫调节功能的保健食品及其制备方法，公开了一种具有延缓衰老、免疫调节功能的保健食品及其制备方法。本发明的保健食品由沙苑子、黄精、葡萄籽提取物和小麦胚芽油等原料制成，是将沙苑子、黄精经水提浓缩干燥、葡萄籽经乙醇提取浓缩干燥后的提取物与小麦胚芽油及其它辅料混合加工而成。具有组方合理、工艺科学、生物利用度高，配方独特，功能显著，服用剂量小，易被人体吸收，可长期食用等特点。申请号：200410013133，发明名称：一种能预防、治疗心脑血管疾病的保健食品，公开了一种能预防、治疗心脑血管疾病的保健食品，属于中药保健食品领域。它主要是由下列有效成分制成：葡萄籽、山楂、昆布、木耳；还可与黑芝麻、黄精组合；还可在上述有效成分的基础上加入丹参。本发明能具有扩张血管，增加外周血液循环和血流速度，降低胆固醇含量而抑制血栓的形成，能极大改善心脑血管疾病和降低血压。申请号：200410024985，发明名称：一种具有调节血糖、调节免疫功能的保健食品，公开了一种具有调节血糖、调节免疫功能的保健食品。由按重量计枸杞提取物0.5-20份、茶叶提取物5-35份、葛根提取物5-30份、葡萄籽提取物5-15份和牛磺酸1-10份组成。现有产品多以控制血糖为主，而忽视了由于血糖升高引起的生化代谢紊乱，最终造成并发症的发生与发展。本发明产品配方，不仅考虑血糖，同时也考虑控制NIIDDM患者由于生化代谢紊乱而导致的并发症的发生与发展。申请号：92106184，发明名称：益寿降脂灵的制取工艺，公开了一种适用于治疗高血脂症的益寿降脂灵制取工艺，其特点是先取一定量的黄精、枸杞子采用水煎煮、将滤液蒸发浓缩至稠膏状，再取一定量的首乌、山楂、决明子，采用乙醇煎煮，其滤液蒸发浓缩至稠膏状。合并稠膏并加入适量的淀粉，混匀后制粒过筛，加入0.5％的硬脂酸镁，混匀压片，包糖衣即为成品。该发明所制取的降脂灵片具有补肝益肾、养血明目、降脂等功能，用于肝肾阴益、头晕、目昏、发须早白、高血脂症。
由于原料的选择和配伍是达到最终药效的关键，目前尚无将维生素C、葡萄籽提取物OPC、山楂、黄精、枸杞子、低聚果糖同时配伍使用的相关报道。
发明内容
本发明的技术方案是提供了一种复方药物组合物，它是由天然原料和维生素配伍制备而成。本发明还提供了该复方药物组合物的制备方法和用途。
本发明提供了一种具有抗衰老或/和免疫调节作用的药物组合物，它是含有由下述重量配比的原料制备而成的药剂：
维生素C0.2～1.2份、葡萄籽提取物OPC0.05～0.5份、山楂2～10份、黄精2～10份、枸杞子2～10份、低聚果糖1～10份。
本发明所述的葡萄籽提取物，英文名称OligomericProanthocyamidins简称为OPC，又称葡萄籽多酚或葡萄籽原花青素提取物。
进一步地，它是由下述重量配比的原料制备而成的药剂：
维生素C0.2～1.2份、葡萄籽提取物OPC0.05～0.5份、山楂2～10份、黄精2～10份、枸杞子2～10份、低聚果糖1～10份。
更进一步优选地，它是由下述重量配比的原料制备而成的药剂：
维生素C0.5～1份、葡萄籽提取物OPC0.1～0.2份、山楂5～8份、黄精5～8份、枸杞子5～8份、低聚果糖2～5份。
所述的葡萄籽提取物中含低聚原花色素的重量含量不低于40％；采用紫外分光光度法测定，原花青素的重量百分含量>95％。(由西安原生植物工程技术有限公司生产)
更进一步优选地，它是由下述重量配比的原料制备而成的药剂：
维生素C1份、葡萄籽提取物OPC0.1份、山楂5份、黄精5份、枸杞子5份、低聚果糖2份。
本发明药物组合物是由山楂、黄精、枸杞子的水或有机溶剂提取物、葡萄籽提取物、维生素C、低聚果糖为活性成分，加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的药剂。
本发明将维生素、葡萄籽提取物OPC、山楂、黄精、枸杞子按重量配比组合在一起，加上低聚果糖，低聚果糖可以调节胃肠道菌群，预防和治疗便秘、减少肠道有毒物质的产生，促进肠道对维生素C、矿物质的吸收、调节免疫功能，都具有非常重要的作用。同时该成份对高血糖患者亦是重要的抗衰老产品，在肠道不被吸收，而甜度又和蔗糖相近，故可作为矫味剂，减少或取代蔗糖的用量，可预防糖尿病的产生。
其中，所述的药剂是：普通片、咀嚼片、含片、泡腾片、分散片、口服液、饮料、颗粒剂、胶囊剂、散剂、注射剂。同时本发明原料配比制备的组合物还可制备成食品或保健食品。
本发明还提供了该药物组合物的制备方法，包括如下步骤：
a、称取重量配比的原料：维生素C0.2～1.2份、葡萄籽提取物OPC0.05～0.5份、山楂2～10份、黄精2～10份、枸杞子2～10份、低聚果糖1～10份；
b、取山楂、黄精、枸杞子加水或有机溶剂提取，得提取物；
c、取葡萄籽提取物、取b步骤的提取物，加入维生素C、低聚果糖，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分，制备成药学上常用的制剂。
本发明还提供了该药物组合物在制备抗衰老的药物中的用途。
本发明还提供了该药物组合物在制备具有免疫调节作用的药物中的用途。
本发明药物组合物是将维生素C等抗氧化剂和中药有机组合在一起，全面调节人体的免疫功能、清除体内的氧自由基，提高细胞内SOD的活性，抑制肝脏LPO生成，减少有毒物质的产生，增加有毒物质的排泄而起到抗衰老和调节人体免疫功能的作用，原料的配伍使用达到了协同增效的目的，为临床或食品提供了一种新的选择。
具体实施方式
实施例1本发明药物咀嚼片制备
按下述配比称取原料：
维生素C1.2Kg OPC0.1Kg 山楂10Kg
黄精10Kg 枸杞子10Kg 低聚果糖6Kg
生产方法如下：
先将山楂、黄精、枸杞子加水煎煮三次，每次1小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至相对密度为1.10～1.15(60℃)的清膏，加入适量乙醇使醇沉浓度为60％，搅匀，静置24小时，取上清液回收乙醇，浓缩至相对密度1.15～1.20(60℃)的清膏，加入维生素C、OPC、低聚果糖和适量的阿司巴甜、淀粉，混匀，制颗粒，60℃干燥6小时，整粒，过20目筛，压制成10000片，即得咀嚼片。
实施例2本发明药物咀嚼片制备
按下述配比称取原料：
维生素C1Kg OPC0.5Kg 山楂12Kg
黄精12Kg 枸杞子12Kg 低聚果糖3Kg
生产方法如下：
先将山楂、黄精、枸杞子加水煎煮三次，每次1小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至相对密度为1.10～1.15(60℃)的清膏，加入适量乙醇使醇沉浓度为60％，搅匀，静置24小时，取上清液回收乙醇，浓缩至相对密度1.15～1.20(60℃)的清膏，加入维生素C、OPC、低聚果糖和适量的阿司巴甜、淀粉，混匀，制颗粒，60℃干燥6小时，整粒，过20目筛，压制成10000片，即得咀嚼片。
实施例3本发明药物咀嚼片制备
按下述配比称取原料：
维生素C0.5Kg OPC0.2Kg 山楂8Kg
黄精8Kg 枸杞子8Kg 低聚果糖3Kg
生产方法如下：
先将山楂、黄精、枸杞子加水煎煮三次，每次1小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至相对密度为1.10～1.15(60℃)的清膏，加入适量乙醇使醇沉浓度为60％，搅匀，静置24小时，取上清液回收乙醇，浓缩至相对密度1.15～1.20(60℃)的清膏，加入维生素C、OPC、低聚果糖和适量的阿司巴甜、淀粉，混匀，制颗粒，60℃干燥6小时，整粒，过20目筛，压制成10000片，即得咀嚼片。
实施例4本发明药物口含片制备
按下述配比称取原料：
维生素C1Kg OPC0.1Kg 山楂5Kg
黄精5Kg 枸杞子5Kg 低聚果糖3Kg
生产方法如下：
先将山楂、黄精、枸杞子加水煎煮三次，每次1小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至相对密度为1.10～1.15(60℃)的清膏，加入适量乙醇使醇沉浓度为60％，搅匀，静置24小时，取上清液回收乙醇，浓缩至相对密度1.15～1.20(60℃)的清膏，加入维生素C、OPC、低聚果糖和适量的阿司巴甜、橘子香精、山梨醇、淀粉，混匀，制颗粒，60℃干燥6小时，整粒，过20目筛，压制成10000片，即得口含片。
实施例5本发明药物普通片制备
按下述配比称取原料：
维生素C1Kg OPC0.1Kg 山楂10Kg
黄精10Kg 枸杞子10Kg 低聚果糖3Kg
生产方法如下：
先将山楂、黄精、枸杞子加水煎煮三次，每次1小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至相对密度为1.10～1.15(60℃)的清膏，加入适量乙醇使醇沉浓度为60％，搅匀，静置24小时，取上清液回收乙醇，浓缩至相对密度1.15～1.20(60℃)的清膏，加入维生素C、OPC、低聚果糖和适量的淀粉，混匀，制颗粒，60℃干燥6小时，整粒，过20目筛，压制成10000片，即得。
实施例6本发明药物口服液制备
按下述配比称取原料：
维生素C1Kg OPC0.2Kg 山楂10Kg
黄精10Kg 枸杞子10Kg 低聚果糖6Kg
生产方法如下：
先将山楂、黄精、枸杞子加水煎煮三次，每次1小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至相对密度为1.10～1.15(60℃)的清膏，加入适量乙醇使醇沉浓度为60％，搅匀，静置24小时，取上清液回收乙醇，浓缩至相对密度1.05(60℃)的清膏，滤过，加入维生素C、OPC、低聚果糖、蛋白糖、山梨酸，搅匀，滤过，加水至20000ml，灌封，灭菌，即得。
实施例7本发明药物泡腾片制备
按下述配比称取原料：
维生素C1Kg OPC0.15Kg 山楂10Kg
黄精10Kg 枸杞子10Kg 低聚果糖6Kg
生产方法如下：
先将山楂、黄精、枸杞子加水煎煮三次，每次1小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至相对密度为1.10～1.15(60℃)的清膏，加入适量乙醇使醇沉浓度为60％，搅匀，静置24小时，取上清液回收乙醇，浓缩至相对密度1.15～1.20(60℃)的清膏，加入适量碳酸氢钠、淀粉制成颗粒；另取维生素C、OPC、低聚果糖和适量的淀粉，混匀，制成颗粒。将上述两种颗粒分别于60℃干燥6小时，整粒，过20目筛，混合，压制成10000片，即得。
实施例8本发明药物分散片制备
按下述配比称取原料：
维生素C0.5Kg OPC0.1Kg 山楂8Kg
黄精8Kg 枸杞子8Kg 低聚果糖6Kg
生产方法如下：
先将山楂、黄精、枸杞子加水煎煮三次，每次1小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至相对密度为1.10～1.15(60℃)的清膏，加入适量乙醇使醇沉浓度为60％，搅匀，静置24小时，取上清液回收乙醇，浓缩至相对密度1.15～1.20(60℃)的清膏，加入维生素C、OPC、低聚果糖和适量的L-HPC、阿司巴甜、淀粉，混匀，制颗粒，60℃干燥6小时，整粒，过20目筛，压制成10000片，即得分散片。
实施例9本发明药物颗粒剂制备
按下述配比称取原料：
维生素C1Kg OPC0.3Kg 山楂10Kg
黄精10Kg 枸杞子10Kg 低聚果糖3Kg
生产方法如下：
先将山楂、黄精、枸杞子加水煎煮三次，每次1小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至相对密度为1.10～1.15(60℃)的清膏，加入适量乙醇使醇沉浓度为60％，搅匀，静置24小时，取上清液回收乙醇，浓缩至相对密度1.15～1.20(60℃)的清膏，加入维生素C、OPC、低聚果糖和适量阿司巴甜、淀粉，混匀，制颗粒，60℃干燥6小时，整粒，过20目筛，分装，即得。
实施例10本发明药物胶囊剂制备
按下述配比称取原料：
维生素C0.5Kg OPC0.1Kg 山楂5Kg
黄精5Kg 枸杞子5Kg 低聚果糖3Kg
生产方法如下：
先将山楂、黄精、枸杞子加水煎煮三次，每次1小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至相对密度为1.10～1.15(60℃)的清膏，加入适量乙醇使醇沉浓度为60％，搅匀，静置24小时，取上清液回收乙醇，浓缩至相对密度1.15～1.20(60℃)的清膏，加入维生素C、OPC、低聚果糖和适量淀粉，混匀，制颗粒，60℃干燥6小时，填充胶囊，即得。
实施例11本发明药物散剂制备
按下述配比称取原料：
维生素C0.5Kg OPC0.1Kg 山楂10Kg
黄精10Kg 枸杞子10Kg 低聚果糖5Kg
生产方法如下：
先将山楂、黄精、枸杞子加水煎煮三次，每次1小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至相对密度为1.10～1.15(60℃)的清膏，加入适量乙醇使醇沉浓度为60％，搅匀，静置24小时，取上清液回收乙醇，浓缩至相对密度1.15～1.20(60℃)的清膏，喷雾干燥，收集细粉，加入维生素C、OPC、低聚果糖和适量蛋白糖、淀粉，混匀，即得。
以下通过药效试验进一步说明本发明的有益效果。
试验例1原料不同剂量配比试验
分组：组1空白对照组
组2维生素C1.2g，OPC0.2g，山楂2g，黄精2g，枸杞子2g，低聚果糖5g。
组3维生素C1g，OPC0.1g，山楂5g，黄精5g，枸杞子5g，低聚果糖2g。
组4维生素C1g，OPC0.05g，山楂8g，黄精8g，枸杞子8g，低聚果糖2g。
组5维生素C0.2g，OPC0.05g，山楂10g，黄精10g，枸杞子10g，低聚果糖3g。
组6维生素C1.2g，OPC0.5g，山楂10g，黄精10g，枸杞子10g，低聚果糖10g。
实验方法：wistar大鼠72只，雌雄各半，体重180～250g，随机分成6组，每组12只。每组给予相应的药物，按大鼠等效剂量折算，连续灌胃给药14天，于末次给药后24小时，从眼眶静脉丛取血测定血清谷胱甘肽(GSH)浓度。
实验结果如下：
表1组合物抗氧化实验结果
| 组别 | 动物数 | GSH(mg/L) |
| 组1 | 12 | 216.85±38.63 |
| 组2 | 12 | 282.65±46.37<sup>***</sup> |
| 组3 | 12 | 289.42±39.58<sup>***</sup> |
| 组4 | 12 | 279.85±41.5<sup>***</sup> |
| 组5 | 12 | 286.41±43.38<sup>***</sup> |
| 组6 | 12 | 286.82±48.50<sup>***</sup> |
注：与空白对照组比较：*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001
实验证明：本发明的原料不同剂量间的配比都有很强的抗氧化作用，与空白对照组比较有非常显著性差异(p<0.001)，但各剂量配比组间无显著性差异。
试验例2本发明组合物对大鼠抗氧化实验研究
分组：组1——生理盐水对照组
组2——维生素C1g
组3——OPC0.1g
组4——维生素C0.5g，OPC0.05g，
组5---山楂5g，黄精5g，枸杞子5g，
组6--维生素C1g，OPC0.1g，山楂5g，黄精5g，枸杞子5g，低聚果糖2g
wistar大鼠60只，雌雄各半，体重180～250g，随机分成6组，每组10只。每组给予相应的药物，按大鼠等效剂量折算，正常组用生理盐水灌胃，每天一次，连续灌胃给药14天，于末次给药后24小时，从眼眶静脉丛取血测定血清谷胱甘肽(GSH)浓度。
实验结果如下表：
表2组合物抗氧化实验结果
| 组别 | 动物数 | GSH(mg/L) |
| 组1 | 10 | 210.18±38.42 |
| 组2 | 10 | 243.50±32.69<sup>*</sup> |
| 组3 | 10 | 251.23±42.15<sup>**</sup> |
| 组4 | 10 | 266.95±36.39<sup>**</sup> |
| 组5 | 10 | 241.61±35.33<sup>*</sup> |
| 组6 | 10 | 285.81±49.52<sup>***</sup> |
注：与对照组比较：*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001
通过以上实验证明：维生素C和OPC均有很强的抗氧化作用(组2P<0.05，组3P<0.01)维生素C和OPC又有协同作用(组4，P<0.01)，进一步提高抗氧化使用的强度。中药组山楂，黄精与枸杞子亦有较强的抗氧化作用(组5，P<0.05)，而维生素C和OPC二者和三味中药组合在一起后，更能显著提高血中谷胱甘肽(GSH)的水平，抗氧化水平进一步显著提高(组6，P<0.001)。提示本发明组合物原料中的中药与维生素C及OPC具有良好的协同增效作用。
试验例3组合物对小鼠自由基代谢相关酶的影响
分组：组1——生理盐水对照组
组2(高剂量组)--维生素C2g，OPC0.2g，山楂10g，黄精10g，枸杞子10g，低聚果糖4g
组3(中剂量组：高剂量的1/2倍)——维生素C1g，OPC0.1g，山楂5g，黄精5g，枸杞子5g，低聚果糖2g
组4(低剂量组：高剂量组的1/4倍)——维生素C0.5g，OPC0.05g，山楂2.5g，黄精2.5g，枸杞子2.5g，低聚果糖1g
组5---阳性组，维生素C1g，
1、实验方法
10月龄昆明种小鼠：雌性小鼠50只，随机分为5组，分别为：生理盐水对照组、组合物高剂量组、中剂量组，低剂量组及阳性组。各给药组分别灌胃给予相应剂量的药物。正常组用生理盐水灌胃，每天灌胃1次，各小鼠连续给受试药物42天后，处死小鼠，采集血液，并制备心肌组织均浆备用。
2、实验指标
测定血液中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及心肌脂褐质。
3、实验结果
表3对小鼠血清SOD活力、MDA及GSH-Px的影响(X±S)
| 组别 | 动物数 | SOD(u/ml) | MDA(nmok/ml) | GHS-Px(u/mg) | 脂褐质(ug/g组织) |
| 对照组 | 10 | 200±20 | 4.61±0.50 | 12.8±3.0 | 5.7±1.2 |
| 高剂量组 | 10 | 260+30<sup>*</sup> | 4.07±0.52<sup>**</sup> | 14.9+3.3<sup>*</sup> | 4.3±1.0<sup>*</sup> |
| 中剂量组 | 10 | 256±28<sup>*</sup> | 4.10±0.52<sup>**</sup> | 14.8±3.4<sup>*</sup> | 4.4±0.9<sup>*</sup> |
| 低剂量组 | 10 | 220+32<sup>*</sup> | 4.23±0.70<sup>*</sup> | 13.9±5.7 | 4.5±1.1<sup>*</sup> |
| 阳性组 | 10 | 210±27<sup>*</sup> | 4.25±0.68<sup>*</sup> | 13.2+3.8 | 4.6±1.1<sup>*</sup> |
注：与对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。
与对照组相比，组合物高中低3个剂量组及阳性组血液中SOD活力显著增高(P<0.05)，MDA水平明显降低(P<0.05或P<0.01)，GHS-Px活性试验高剂量组较对照组变化明显(P<0.05)，低剂量组虽有提高，但无统计学意义。心肌脂褐质含量高中低三个剂量组均明显降低(P<0.05)，且三个组合物剂量组呈现良好的量效关系。组合物中剂量组为人等效剂量，高剂量组为人等效剂量的2倍，两组之间各项指标无显著差异，说明再增加剂量而效果无明显增加。阳性药维生素C与对照组比各项指标均有显著性改变(P<0.05)，但不如组合物三个剂量组显著。进一步证明组合物中的其它成份对维生素C在抗自由基代谢相关酶方面具有协同作用。
试验例4本发明药物组合物与现有技术中公开的药物组合物的比较
分组：
组1 正常对照组
组2 OPC200mg，黄精提取物200mg
组3 OPC200mg，山楂提取物200mg
组4 OPC200mg，枸杞子提取物200mg
组5 山楂提取物200mg，黄精提取物200mg，枸杞子提取物200mg
组6 黄精提取物200mg，枸杞子提取物200mg
组7(高剂量)维生素C1000mg，OPC200mg，山楂提取物200mg，黄精提取物200mg，枸杞子提取物200mg，低聚果糖2000mg
组7(低剂量)维生素C500mg，OPC100mg，山楂提取物100mg，黄精提取物100mg，枸杞子提取物100mg，低聚果糖1000mg
实验方法：正常小鼠80只，雌雄各半，按体重随机分成8组。各给药组分别灌胃给予相应剂量的药物。正常组用生理盐水灌胃，每天一次，连续两周。两周后进行各项免疫指标的测定。实验结果见表4。
实验结果
表4不同组合物对正常小鼠淋巴细胞增殖能力的影响(n＝10，x±s)
| 组别 | 动物数 | 淋巴细胞增殖能力 | r-INF(pg/ml) |
| 组1(正常组) | 10 | 0.011±0.001 | 272.08±25.12 |
| 组2 | 10 | 0.027±0.085<sup>*</sup> | 320.45±38.15<sup>*</sup> |
| 组3 | 10 | 0.016±0.082 | 288.2±26.14 |
| 组4 | 10 | 0.028±0.076<sup>*</sup> | 324.53±41.26<sup>*</sup> |
| 组5 | 10 | 0.029±0.069<sup>*</sup> | 327.85±36.37<sup>*</sup> |
| 组6 | 10 | 0.030±0.077<sup>*</sup> | 328.68±39.35<sup>*</sup> |
| 组7(高剂量) | 10 | 0.048±0.087<sup>***</sup> | 372.50±32.18<sup>***</sup> |
| 组7(低剂量) | 10 | 0.045±0.085<sup>***</sup> | 367.11±35.23<sup>***</sup> |
注：与正常组比较，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001
通过以上试验表明：除正常对照组外，其余各组均有提高免疫功能的作用，包括促进正常小鼠淋巴细胞增殖和促进干扰素(r-INF)的分泌，其中组2(OPC+黄精)、组4(OPC+枸杞子)，组5(山楂+黄精+枸杞子)，组6(黄精+枸杞子)具有显著性差异(p<0.05)，组3(OPC+山楂)虽有提高免疫功能，但没有显著性差异。而组7即本发明药物组合物，无论是高剂量组还是低剂量组对淋巴细胞的增值能力还是对促进干扰素的分泌作用，与正常对照组比均具有极显著的差异(p<0.001)，证明本发明药物组合物明显优于其它组合物的疗效。且各成份的组合明显发挥了协同增效的作用。
试验例5低聚果糖在组合物中对排便次数的影响
分组：
甲组--维生素C1g，OPC0.1g，山楂5g，黄精5g，枸杞子5g，
乙组--维生素C1g，OPC0.1g，山楂5g，黄精5g，枸杞子5g，低聚果糖2g，
按组合物处方，组1不用低聚里糖作矫味剂，用蔗糖作矫味剂组2用低聚果糖作矫味剂，按片剂常规工艺压制成咀嚼片，30例男女随机分成二组，每组10例，甲组服用组1片剂，一次一片，每天5片，乙组服用组2片剂，一次一片，每天5片，连续服用15天，两组在服用试验药期间饮食习惯不便。观察排便次数，结果如下：
表5本发明药物对对排便次数的结果
| 组别 | 人数 | 排便次数(天) |
| 甲组 | 10人 | 0.5次 |
| 乙组 | 10人 | 0.9次 |
实验证明甲组人群大便几乎是两天一次，而乙组人群几乎是一天一次，表明低聚果糖作为矫味剂的同时，可以预防便秘的作用，间接缩短大便在肠道的停留时间，减少有毒物质的吸收。
试验例6本发明组合物抗衰老实验研究---对果蝇生存寿命的影响
分组：组1——生理盐水对照组
组2(高剂量组)--维生素C2g，OPC0.2g，山楂10g，黄精10g，枸杞子10g，低聚果糖4g
组3(中剂量组：高剂量的1/2倍)——维生素C1g，OPC0.1g，山楂5g，黄精5g，枸杞子5g，低聚果糖2g
组4(低剂量组：高剂量组的1/4倍)——维生素C0.5g，OPC0.05g，山楂2.5g，黄精2.5g，枸杞子2.5g，低聚果糖1g
组5---阳性组，维生素C1g，
1、实验方法：
收集6h内卵出的成虫进行分组，选择个体大小相近的果蝇20只，雌雄分养。每组雌雄各200只，组别设置为：对照组、试验药高剂量组、中剂量组及低剂量组、阳性组；在成虫期给受试物，受试物掺入预先溶化的50℃基础饲料中，保持各组pH一致。每天定时统计果蝇存活数和死亡数，直至全部死亡。每组最后死亡的20只果蝇存活天数的平均数为该组的最高寿命。实验结束，计算平均寿命和最高奉命及半数死亡时间。
2、统计指标
果蝇平均寿命和最高寿命以及半数死亡时间。
3、实验结果
表6该组合物对果蝇寿命的影响(X±S)
注：与对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。
由表4可以看出，与对照组相比，组合物高、中、低三个剂量组雄蝇、雌蝇平均寿命和最高寿命均较对照组显著延长(P<0.05，P<0.01)，试验阳性组平均寿命显著延长(P<0.05)，最高寿命虽有延长趋势，但无统计学意义。
试验例7组合物对小鼠免疫调节的实验研究
分组：组1——生理盐水对照组
组2(高剂量组)--维生素C2g，OPC0.2g，山楂10g，黄精10g，枸杞子10g，低聚果糖4g
组3(中剂量组：高剂量组的1/2倍)—维生素C1g，OPC0.1g，山楂5g，黄精5g，枸杞子5g，低聚果糖2g
组4(低剂量组：高剂量组的1/4倍)——维生素C0.5g，OPC0.05g，山楂2.5g，黄精2.5g，枸杞子2.5g，低聚果糖1g
组5--维生素C1g，
组6--OPC0.1g
正常小鼠60只，雌雄性各半，按体重随机分成6组。各给药组分别灌胃给予相应剂量的药物。正常对照组用生理盐水灌胃，每天一次，连续两周。两周后进行各项免疫指标的测定。实验结果见表5。
表7组合物对正常小鼠淋巴细胞增殖和r-IFN和IL2的影响(n＝10，x±s)
| 组别 | 动物数 | 淋巴细胞增殖能力 | r-INF(pg/ml) | IL<sub>2</sub>(pg/ml) |
| 正常组 | 10 | 0.012±0.002 | 278.05±26.88 | 221.35±16.85 |
| 维生素C | 10 | 0.015±0.073 | 281.5±22.31 | 276.24+90.31 |
| OPC | 10 | 0.025±0.090<sup>*</sup> | 316.55+30.25<sup>*</sup> | 336.58±87.30<sup>*</sup> |
| 组合物(高) | 10 | 0.045±0.016<sup>***</sup> | 371.40+35.56<sup>***</sup> | 436.92±98.81<sup>***</sup> |
| 组合物(中) | 10 | 0.039±0.089<sup>***</sup> | 368.52±39.48<sup>***</sup> | 351.78±86.68<sup>**</sup> |
| 组合物(低) | 10 | 0.032±0.022<sup>**</sup> | 331.60±39.32<sup>**</sup> | 346.14+93.40<sup>**</sup> |
注：与正常对照组比较：*p<0.05；**p<0.01；***p<0.001
实验结果表明：维生素C有促进免疫功能的作用，但作用不显著。OPC有促进免疫功能的作用，能刺激正常小鼠淋巴细胞的转化和增殖能力(p<0.05)，还能促进正常小鼠分泌干拢素(INF)和白细胞介素-2(IL-2)的作用(p<0.05)，优于维生素C组但没有组合物高中低三个剂量组强。与正常对照组比较，组合物高中低三个剂量组均可显著刺激正常小鼠淋巴细胞的转化和增殖能力(p<0.01～0.001)，显著刺激正常小鼠淋巴细胞分泌r-INF和IL2的作用(p<0.01～0.001)，且呈现良好的量效关系。但中剂量组与高剂量组免疫调节作用比较接近，中剂量组是人每日服用等效剂量，再增加剂量后效果没有显著变化，但低剂量组为中剂量组的减半剂量，其作用远不如中剂量组，说明中剂量组为最佳有效剂量。证明组合物能显著提高免疫功能，且各成份之间有良好协同增效作用。
试验例8本组合物加入其它原料对免疫功能影响的比较试验
分组：组1：空白对照组
组2：维生素C1.0g，OPC0.1g，山楂5g，黄精5g，枸杞子5g，低聚果糖2g
组3：维生素C1.0g，OPC0.1g，山楂5g，黄精5g，枸杞子5g，低聚果糖2g，人参5g；
组4：维生素C1.0g，OPC0.1g，山楂5g，黄精5g，枸杞子5g，低聚果糖2g，何首乌5g，决明子5g
组5：维生素C1.0g，OPC0.1g，山楂5g，黄精5g，枸杞子5g，低聚果糖2g，沙苑子5g，小麦胚芽油0.5g
实验方法：昆明种小鼠60只，雌雄各半。体重18～22g，将动物随机分成5组。动物连续灌胃6天，每天一次，每次0.2ml/10g体重，第6天给药后30分钟，经小鼠尾静脉注经稀释后的中华墨汁0.1ml/10g体重，注射后第2，10分钟分别经眼眶后静脉丛取血20ul，加至4ml蒸馏水中溶解红细胞，应用分光光度计(600nm)测定光密度，计算单位时间内血清中碳粒清除速度，结果见表：
表8组合物对小鼠吞噬功能的影响
| 组别 | 动物数(只) | 廓清指数(x±sd) |
| 组1(对照组) | 12 | 0.0252±0.0043 |
| 组2 | 12 | 0.0302±0.0025<sup>*</sup> |
| 组3 | 12 | 0.0301+0.0046<sup>*</sup> |
| 组4 | 12 | 0.0295±0.0032<sup>*</sup> |
| 组5 | 12 | 0.0308±0.0051<sup>*</sup> |
注：与空白对照组比*P<0.05
结果证实：除空白对照组外，各组合物都有显著增加血清中异物清除率的作用，即有促进小鼠巨噬细胞的吞噬功能，从而提高免疫功能，但组合物2、3、4、5之间没有显著差异。组2是是本发明的组合物，组3、4、5是在本发明组合物基础上加上具有提高免疫功能的中药和其它原料后，对原组合物的免疫功能并无进一步提高。证明本组合物在提高免疫功能方面具有良好的组合物优势。
试验例9本组合物加入其它原料对抗衰老影响的比较研究
实验分组
组1：对照组
组2：维生素C1.0g，OPC0.1g，山楂5g，黄精5g，枸杞子5g，低聚果糖2g；
组3：维生素C1.0g，OPC0.1g，山楂5g，黄精5g，枸杞子5g，低聚果糖2g，何首乌5g，人参5g；
组4：维生素C1.0g，OPC0.1g，山楂5g，黄精5g，枸杞子5g，低聚果糖2g，熟地黄5g，黄芪5g；
组5：维生素C1.0g，OPC0.1g，山楂5g，黄精5g，枸杞子5g，低聚果糖2g，沙苑子5g，小麦胚芽油0.5g；
实验方法：
实验将雌雄果蝇分养，分成5组，每组雌、雄果蝇各200只。先喂饲普通培养基，2周后换成带有不同浓度受试首药物的培养基，放入恒温箱培养，隔天一次统计果蝇存活数、死亡数、直至全部死亡，计算平均寿命(平均存活天数)、半数死亡时间(果蝇半数死亡天数)及最高寿命(每组最后死亡的20只果蝇存活天数的平均数)。实验结果如下：
表9组合物对雌性果蝇寿命的影响(n＝200)
| 组别 | 半数死亡(d) | 最高寿命(d) | 平均寿命(d) |
| 组1(对照组) | 52 | 70.6±2.4 | 50.8±11.4 |
| 组2 | 60 | 86.6±3.7<sup>**</sup> | 60.9±16.1<sup>**</sup> |
| 组3 | 62 | 88.7+3.5<sup>**</sup> | 61.2±15.3<sup>**</sup> |
| 组4 | 61 | 87.6±4.3<sup>**</sup> | 59.8±16.7<sup>**</sup> |
| 组5 | 59 | 84.5±4.2<sup>**</sup> | 58.7±15.6<sup>**</sup> |
注：与对照组比：*P<0.05，**P<0.01
表10组合物对雄性果蝇寿命的影响(n＝200)
| 组别 | 半数死亡(d) | 最高寿命(d) | 平均寿命(d) |
| 组1(对照组) | 58 | 78.6±5.1 | 56.8±14.4 |
| 组2 | 60 | 89.6±4.5<sup>**</sup> | 58.4±17.2<sup>**</sup> |
| 组3 | 59 | 84.7+3.5<sup>**</sup> | 56.6±15.7<sup>**</sup> |
| 组4 | 59 | 85.6±5.2<sup>**</sup> | 56.3±18.2<sup>**</sup> |
| 组5 | 58 | 86.5±3.4<sup>**</sup> | 57.0±15.1<sup>**</sup> |
注：与对照组比：*P<0.05，**P<0.01
实验结果表明：雌雄性果蝇实验各组(组2、组3、组4、组4)无论是最高寿命还是平均寿命均较对照组(组1)显著延长(P<0.01)，但各实验组之间无论是最高寿命还是平均寿命均无显著性差异。组2是本发明的组合物，组3、4、5是在本发明组合物基础上加上能延缓衰老的中药和其它原料，增加的原料和中药并不能进一步延长寿命，证明本发明药物是在延缓衰老方面是一优良的药物。
Claims (8)
1.一种具有抗衰老或/和免疫调节作用的药物组合物，其特征在于：它是由下述重量配比的原料药制备而成的药剂：
维生素C 0.2～1.2份、葡萄籽提取物OPC 0.05～0.5份、山楂2～10份、黄精2～10份、枸杞子2～10份、低聚果糖1～10份，
其中，所述的葡萄籽提取物中含低聚原花色素的重量百分含量不低于40％；采用紫外分光光度法测定，原花青素的重量百分含量＞95％；
所述的山楂、黄精、枸杞子采用如下方法提取：将山楂、黄精、枸杞子加水煎煮三次，每次1小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至在60℃时测定相对密度为1.10～1.15的清膏，加入适量乙醇使醇沉浓度为60％，搅匀，静置24小时，取上清液回收乙醇，浓缩至在60℃时测定相对密度为1.15～1.20的清膏。
2.根据权利要求1所述的具有抗衰老或/和免疫调节作用的药物组合物，其特征在于：它是由下述重量配比的原料药制备而成的药剂：
维生素C 0.5～1份、葡萄籽提取物OPC 0.1～0.2份、山楂5～8份、黄精5～8份、枸杞子5～8份、低聚果糖2～5份。
3.根据权利要求2所述的具有抗衰老或/和免疫调节作用的药物组合物，其特征在于：它是由下述重量配比的原料药制备而成的药剂：
维生素C1份、葡萄籽提取物OPC 0.1份、山楂5份、黄精5份、枸杞子5份、低聚果糖2份。
4.根据权利要求1-3任一项所述的具有抗衰老或/和免疫调节作用的药物组合物，其特征在于：它是由山楂、黄精和枸杞子的水提取物、葡萄籽提取物、维生素C、低聚果糖为活性成分，加上药学上可接受的辅料制备而成的药剂。
5.根据权利要求4所述的具有抗衰老或/和免疫调节作用的药物组合物，其特征在于：所述的药剂是：普通片、咀嚼片、含片、泡腾片、分散片、口服液、颗粒剂、胶囊剂、散剂、注射剂。
6.一种制备权利要求1所述的具有抗衰老或/和免疫调节作用的药物组合物的方法，包括如下步骤：
a、称取重量配比的原料药：维生素C 0.2～1.2份、葡萄籽提取物OPC0.05～0.5份、山楂2～10份、黄精2～10份、枸杞子2～10份、低聚果糖1～10份；
b、将山楂、黄精、枸杞子加水煎煮三次，每次1小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至在60℃时测定相对密度为1.10～1.15的清膏，加入适量乙醇使醇沉浓度为60％，搅匀，静置24小时，取上清液回收乙醇，浓缩至在60℃测定时相对密度为1.15～1.20的清膏：
c、取葡萄籽提取物、取b步骤的提取物，加入维生素C、低聚果糖，加入药学上可接受的辅料，制备成药学上常用的制剂。
7.权利要求1所述的药物组合物在制备抗衰老的药物中的用途。
8.权利要求1所述的药物组合物在制备具有免疫调节作用的药物中的用途。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| EE01 | Entry into force of recordation of patent licensing contract |
Assignee: Sichuan Pingda biologic Products Co., Ltd. Assignor: Chengdu Zihao Pharmaceutical Co., Ltd. Contract record no.: 2011510000268 Denomination of invention: Pharmaceutical composition, its preparation method and application Granted publication date: 20101201 License type: Exclusive License Open date: 20081112 Record date: 20110913 |