CN101281131A - Mn掺杂ZnS量子点室温磷光检测生物体液中依诺沙星的方法 - Google Patents

Abstract

一种Mn掺杂ZnS量子点室温磷光检测生物体液中依诺沙星的方法。本发明利用Mn掺杂ZnS量子点的室温磷光性质，提供了一种简单、快速、经济、灵敏和高选择性的检测生物体液中依诺沙星的方法，将Mn掺杂ZnS量子点配成溶液，尿样或血清样品稀释30、50或80倍，用于检测依诺沙星的线性方程为线性范围为0.2－7.2μmol/L，检出限为58.6nmol/L；该方法在检测生物体液中依诺沙星时不需要加入除氧剂和诱导剂，并且能够避免本底荧光和散射光的干扰。同时也由于该方法的高选择性，在进行生物体液中依诺沙星检测时，不需要复杂的样品预处理过程。

Description

Mn掺杂ZnS量子点室温磷光检测生物体液中依诺沙星的方法

【技术领域】：

本发明涉及水相合成Mn掺杂ZnS量子点室温磷光检测生物体液中的依诺沙星，属于生物分析检测技术领域。

【背景技术】：

量子点主要是由II-VI族元素或III-V族元素组成的半导体纳米粒子。与有机荧光染料相比，量子点的光致发光性质十分优越：长程激发，发射峰窄而对称，斯托克斯位移大，量子产率高，不易光解。量子点的荧光性质已经广泛应用于检测各种离子、小分子和生物大分子。然而，量子点的磷光性质及其在分析检测中的应用得到的关注较少。

相对于荧光分析法，室温磷光法具有很多优点。磷光的寿命比荧光长，因此在进行磷光检测时可以避免自体荧光和散射光的干扰；并且磷光相对于荧光是一种更为少见的现象，因此检测时的选择性得到进一步的增强。

依诺沙星是喹诺酮类抗生素的一种。喹诺酮类抗生素通过抑制DNA旋转酶的活性杀死细菌的，因其有抗菌谱广、吸收好、血液浓度高、能迅速分解到各组织、半衰期长、能制成各种剂型等特点而得到迅速推广，但喹诺酮抗生素对人体有一定的副作用，主要表现为胃肠道反应、皮肤损害、中枢神经系统反应、泌尿生殖系统反应及肝功能损伤等。

目前普遍用于分离和检测复杂样品中依诺沙星的方法是各种联用技术，但是它们需要对待测物进行衍生，操作繁琐，且使用的衍生剂一般具有毒性，并且仪器较昂贵。而光谱分析法虽然简单、快速、经济、灵敏，但是会有来自本底荧光和散射光的干扰。而室温磷光能够克服上述缺点。

【发明内容】：

本发明目的是克服现有技术存在的上述不足，利用Mn掺杂ZnS量子点的室温磷光性质，提供一种简单、快速、经济、灵敏和高选择性的检测生物体液中依诺沙星的方法。

该方法在检测生物体液中依诺沙星时不需要加入除氧剂和诱导剂，并且能够避免本底荧光和散射光的干扰。同时也避免了复杂的样品预处理过程。

本发明提供的Mn掺杂ZnS量子点室温磷光检测生物体液中依诺沙星的方法，包括如下步骤：

第一、Mn掺杂ZnS量子点母液的配制：

称量10-50mg Mn掺杂ZnS量子点，定容在100ml的容量瓶中；

第二、待检测样品的稀释：

将未经过处理的待检测尿样或血清样品按常规稀释30、50或80倍；

第三、待检测样品中依诺沙星的检测：

在比色管中，依次加入1mL第一步配制的Mn掺杂ZnS量子点母液，1mL pH值为6-7.4的Tris-HCl缓冲溶液，最后用第二步稀释后的待检测尿样或血清样品定容在10ml容量瓶，然后将样品倒入比色池中，进行磷光检测，选取的磷光的激发波长为316-400nm，发射波长为590-620nm。

其中第一步中所述的Mn掺杂ZnS量子点可以经过以下步骤制得：

将L-半胱氨酸、ZnSO₄和MnCl₂按摩尔比为2∶1∶0.03的比例混合，用NaOH调节溶液的pH值到11，以上混合溶液经氩气保护，室温搅拌30min，将与ZnSO₄等摩尔量的Na₂S迅速注射到溶液中，继续室温搅拌30min，然后溶液在空气中加热至50℃陈化2小时，提纯，经真空干燥得到Mn掺杂ZnS量子点产品。

本发明的优点和积极效果：

本发明利用量子点的光致发光性质，特别是量子点的磷光性质，进行生物体液中依诺沙星的室温磷光检测，用于检测依诺沙星的线性范围为0.2-7.2μmol/L，检出限为58.6nmol/L；本发明方法可以避免自体荧光和散射光的干扰；并且磷光相对于荧光是一种更为少见的现象，因此检测时的选择性得到进一步的增强。该方法能用于尿和血清样本中依诺沙星的检测，可用于监控依诺沙星的药物代谢过程，能够免除繁琐的样品预处理过程，且不需要加入除氧剂和诱导剂，检测更加经济、灵敏、简便。

【具体实施方式】：

实施例1、室温磷光检测生物体液中的依诺沙星

1、制备Mn掺杂ZnS量子点：

将1mmol的L-半胱氨酸、0.5mmol的ZnSO₄和0.015mmol的MnCl₂加入到45ml的水中，用NaOH调节溶液的pH值到11，氩气保护，室温搅拌30min，将5ml0.1mol/L的Na₂S迅速注射到溶液中，继续室温搅拌30min，然后溶液在空气中加热至50℃陈化2小时，提纯，经真空干燥得到Mn掺杂ZnS量子点产品。

2、配制Mn掺杂ZnS量子点母液：

称量50mg Mn掺杂ZnS量子点，定容在100ml的容量瓶中。

3、实际样品的处理：

将尿样常规稀释80倍，不需要进一步复杂的样品预处理过程。

4、尿样中依诺沙星的检测：

在比色管中，依次加入1mL的Mn掺杂ZnS量子点母液，1mL pH值为7.4的Tris-HCl缓冲溶液，最后加入尿样定容在10ml的容量瓶中。然后将样品倒入比色池中，进行磷光检测，选取的磷光的激发波长为316nm，发射波长为590nm，因为含有依诺沙星样本的磷光强度会低于无依诺沙星样本的磷光强度，据此判断样品中是否含有依诺沙星。

实施例2、室温磷光检测生物体液中的依诺沙星

1、制备Mn掺杂ZnS量子点：

将2mmol的L-半胱氨酸、1mmol的ZnSO₄和0.03mmol的MnCl₂加入到90ml的水中，用NaOH调节溶液的pH值到11，氩气保护，室温搅拌30min，将10ml0.1mol/L的Na₂S迅速注射到溶液中，继续室温搅拌30min，然后溶液在空气中加热至50℃陈化2小时，提纯，经真空干燥得到Mn掺杂ZnS量子点产品。

2、配制Mn掺杂ZnS量子点母液：

称量50mg Mn掺杂ZnS量子点，溶解在100mL的容量瓶中。

3、实际样品的处理：

将血清样品按常规稀释50倍，不需要进一步复杂的样品预处理过程。

4、血清样品中依诺沙星的检测：

在比色管中，依次加入1mL的Mn掺杂ZnS量子点母液，1mL pH值为7.4的Tris-HCl缓冲溶液，最后加入血清样品定容在10ml的容量瓶中。然后将样品倒入比色池中，进行磷光检测，选取的磷光的激发波长为316nm，发射波长为590nm，因为含有依诺沙星样本的磷光强度会低于无依诺沙星样本的磷光强度，据此判断样品中是否含有依诺沙星。

Claims (2)

1、一种Mn掺杂ZnS量子点室温磷光检测生物体液中依诺沙星的方法，其特征在于包括如下步骤：

第一、Mn掺杂ZnS量子点母液的配制：

称量10-50mg Mn掺杂ZnS量子点，定容在100ml的容量瓶中；

第二、待检测样品的稀释：

将未经过处理的待检测尿样或血清样品按常规稀释30、50或80倍；

第三、待检测样品中依诺沙星的检测：

在比色管中，依次加入1mL第一步配制的Mn掺杂ZnS量子点母液，1mL pH值为6-7.4的Tris-HCl缓冲溶液，最后用第二步稀释后的待检测尿样或血清样品定容在10ml容量瓶，然后将样品倒入比色池中，进行磷光检测，选取的磷光的激发波长为316-400nm，发射波长为590-620nm。

2、根据权利要求1所述的方法，其特征是第一步中所述的Mn掺杂ZnS量子点经以下步骤制得：

将L-半胱氨酸、ZnSO₄和MnCl₂按摩尔比为2∶1∶0.03的比例混合，用NaOH调节溶液的pH值到11，以上混合溶液经氩气保护，室温搅拌30min，将与ZnSO₄等摩尔量的Na₂S迅速注射到溶液中，继续室温搅拌30min，然后溶液在空气中加热至50℃陈化2小时，提纯，经真空干燥得到Mn掺杂ZnS量子点产品。