CN101229201A - 含有球花报春提取物的组合物及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种含有球花报春提取物的组合物和它在治疗痤疮和减少皮肤、头发和头皮出现油脂或毛孔方面的应用。

Description

含有球花报春提取物的组合物及其应用
背景技术
痤疮病通常分为非炎症性类型或炎症性类型。非炎症性痤疮的特征是闭合粉刺(白头)和开放粉刺(黑头)，由会使毛囊管扩张的甲蛋白、皮脂和细菌的致密块组成。当毛囊皮脂腺管阻塞和/或当皮脂腺产生的皮脂增加时会形成粉刺。形成粉刺后会由于细菌增殖和/或皮脂过度产生而引起发炎。通常，细菌是厌氧菌例如丙酸杆菌(痤疮丙酸杆菌(P.acnes))。炎症性痤疮的特征是会引起瘢痕化的丘疹(面泡)、脓疱和结节囊肿性损伤。认为有多种因素对痤疮的发病起了重要作用，包括：皮脂产生、激素刺激、毛孔堵塞和皮肤病菌。患有痤疮的个体的皮脂水平相比对照个体的皮脂水平升高了约70％。
本发明涉及一项意外发现，即球花报春(primula denticulata)提取物能够局部有效治疗痤疮和减少皮肤出现油光或毛孔。
发明内容
一方面，本发明的特征是一种通过给予需要此类治疗的皮肤含有球花报春提取物的组合物来治疗痤疮或减少皮肤出现油脂或毛孔的方法。
一方面，本发明的特征是一种包括(a)含有球花报春提取物的组合物；和(b)指导使用者将所述组合物用于皮肤以治疗痤疮或减少皮肤出现油脂或毛孔的说明书的产品。
一方面，本发明的特征是一种通过指导使用者将所述组合物用于皮肤以治疗痤疮或减少皮肤出现油脂或毛孔来宣传含有球花报春提取物的组合物的方法。
一方面，本发明的特征是一种通过给予需要此类治疗的皮肤含有总状芦笋(Asparagus racemosus)提取物和含儿茶素的提取物的组合物来治疗痤疮或减少皮肤出现油脂或毛孔的方法。
本发明的其它特征和优点可以从发明详述和从权利要求书中显见。
发明详述
相信本领域技术人员根据本文的描述可以最大程度地利用本发明。以下具体实施方式应该解释为仅是说明性的，而无论如何都不是以任何方法来限制本公开说明书的余下部分。
除非在其它地方有具体说明，本文采用的所有技术和科学术语都具有与本发明所属领域的普通技术人员的通常理解相同的含义。同样，本文提到的所有出版物、专利申请、专利和其它参考文献均以其全文纳入本文作为参考。除非在其它地方有指出外，百分比指重量百分比(即，％(W/W))。
定义
“治疗痤疮”的意思是减轻或预防痤疮或红斑痤疮(rosacea)。
“产品”的意思是包装好形式中的产品。一实施方式中，包装是容器例如含有组合物的塑料、金属或玻璃管或罐。所述产品还可以包括其它包装例如用于保存此类容器的塑料或纸板盒。一实施方式中，所述产品包括指导使用者将所述组合物用于皮肤以治疗皮肤病，例如治疗痤疮或减少皮肤出现油脂或毛孔的说明书。
“宣传”的意思是宣传、做广告或营销。宣传的例子包括但不限于：在产品上或在店内、杂志上、报纸上、电台上、电视上、互联网上等进行书面、视觉或口头声明。
为了宣传其痤疮治疗作用，这类声明的例子包括但不限于：“治疗痤疮”、“预防痤疮”、“减少痤疮损伤、粉刺或面泡”、“减少痤疮损伤、粉刺或面泡的出现”、“减少痤疮性皮疹和痤疮斑(blemish)的出现”、“预防、控制或调节痤疮性皮疹和痤疮斑”和“减少皮疹和斑”。
为了宣传其减少皮肤出现油脂的作用，这类声明的例子包括但不限于：“减少皮脂的出现”、“预防、控制或调节皮脂产生”、“减少皮脂”、“减少皮肤出现油脂/油光”、“减少皮肤出现油腻”和“减少皮肤、头发或头皮的油光”。一实施方式中，将所述组合物用于无需痤疮治疗的皮肤(即，未患痤疮的皮肤或头皮/头发)。
为了宣传其减少皮肤出现毛孔的作用，这类声明的例子包括但不限于：“缩小毛孔”、“将毛孔的出现减到最低”、“净化毛孔”、“降低可见度或缩小毛孔”和“关闭打开的毛孔”。一实施方式中，将所述组合物用于无需痤疮治疗的皮肤(即，未患痤疮的皮肤)。
本文所用的“给予需要此类治疗的皮肤”指接触需要此类治疗的皮肤区域或紧邻需要此类治疗皮肤区域的皮肤区域(如通过用手或涂药器，例如但不限于拭纸、管、辊子、喷雾或膏药)。
本文所用的“组合物”指适合施用于皮肤的组合物。
本文所用的“美容上可接受的”指所述术语描述的成分适用于接触皮肤，而没有不当毒性、不相容性、不稳定性、刺激性、过敏反应等。
本文所用的“安全有效量”指足以引起组织弹性增加，却又足够低到能避免严重副作用的化合物、载体或组合物的量。化合物或组合物的所述安全有效量随治疗面积、终端使用者的年龄、健康和皮肤类型、治疗持续时间和性质、所采用的具体化合物或组合物、所采用的具体美容上可接受的载体等因素而变化。
具体实施方式
球花报春提取物
本发明组合物含有球花报春提取物。“球花报春提取物”或“球花报春的提取物”指的是一种分离自球花报春的化合物的混合物。这类化合物的例子包括但不限于：皂苷元、黄酮和查耳酮。
如上所概括，申请人发现樱草素、2-甲氧基-6-戊基-1，4-苯醌(存在于球花报春植物中)，居然具有脂肪生成活性(例如，增加皮脂产生)。由于樱草素会引起一些对于樱草属的过敏反应，因此期望减少樱草素的提取物制成的局部组合物可以无刺激性和优质。因此，一实施方式中，所述球花报春提取物基本上没有樱草素(例如，含有低于0.1重量％的樱草素，例如低于0.01重量％的樱草素或不含樱草素)。一实施方式中，所述组合物基本上没有樱草素(例如，含有低于0.01重量％的樱草素，例如低于0.001重量％的樱草素或不含樱草素)。
芦笋提取物
本发明组合物可包含芦笋提取物。由“芦笋提取物”或“芦笋的提取物”所表示，是指一种分离自芦笋(天门冬科)的化合物的混合物。一实施方式中，将总状芦笋(芦笋草(Shatavari))用于本发明组合物。阿育吠陀经(Ayurvedic text)中推荐总状芦笋来预防和治疗胃溃疡、消化不良和作为催乳剂。
芦笋提取物中存在的化合物的例子包括但不限于：甾族皂草苷、皂草配基和黄酮。
紫藤提取物
本发明组合物可包含紫藤提取物。“紫藤提取物”或“紫藤的提取物”指的是一种分离自紫藤(蝶形花科)的化合物的混合物。一实施方式中，将多花紫藤(Wisteriafloribundae)(日本紫藤)用于本发明组合物。紫藤属的其它种包括但不限于：山紫藤(Wisteria brachybotrys)、美国紫藤(Wisteria frutescens)、长穗紫藤(Wisteriamacrostachya)、紫藤(Wisteria sinensis)、白花藤萝(Wisteria venusta)、藤萝(Wisteriavillosa)均可用于本发明组合物。
紫藤提取物中存在的化合物的例子包括但不限于：桦木素、桦木酸和黄酮。
组合物
本发明通常包括含有能改良减少或控制皮脂产生及其所引起疾病的组合物，所述组合物含有球花报春植物提取物或球花报春和一种或多种儿茶素或含有儿茶素的植物提取物，例如球花报春植物提取物和高良姜(Alpinia galangal)植物提取物的组合物或球花报春和绿茶的植物提取物的组合物。另一实施方式中，本发明组合物含有芦笋植物提取物和一种或多种儿茶素或含有儿茶素的植物提取物，例如芦笋植物提取物和高良姜植物提取物的组合物或芦笋和绿茶的植物提取物的组合物。
另一实施方式中，本发明组合物含有紫藤植物提取物和一种或多种儿茶素或含有儿茶素的植物提取物，例如紫藤植物提取物和高良姜植物提取物的组合物或紫藤和绿茶的植物提取物的组合物。
这类组合物可用于任何皮肤护理目的中，包括但不限于：例如通过改善皮肤状况而使健康皮肤受益。本发明组合物还可以治疗性用于各种医学病症(例如发炎)，来减少皮脂过度产生、油性皮肤和由它们所引起的皮肤病例如痤疮和粉刺形成的影响。
本发明采用的植物和植物部分从商品化来源购得。例如，报春花属植物购自美国和英国的各多年生植物苗圃，例如布鲁斯特多年生植物(有限)公司(BluestonePerennial，Inc.)(俄亥俄州麦迪逊)。高良姜种子购自U.C.医药公司(U.C.Medicine)(纽约州蜜纽拉(Mineola，NY))。绿茶和芦笋购自萨宾萨公司(Sabinsa Corporation)(新泽西州皮斯卡塔韦)。儿茶素购自例如因都凡公司(Indofine)(新泽西州萨默维尔)或奥尔德利希公司(Aldrich)(威斯康星州密尔沃基)。
可用于本发明的组合物包括适于施用到靶组织例如哺乳动物皮肤例如人皮肤的制剂。一实施方式中，所述组合物含有安全有效量的(i)球花报春提取物和(ii)美容上可接受的载体。一实施方式中，所述美容上可接受的载体约为组合物的50-99.99重量％(例如，约为组合物的80-99重量％)。
可以将所述组合物制成各种产品类型，包括但不限于：溶液、悬液、护肤液(lotion)、乳膏剂、凝胶、收敛剂(toner)、棒(stick)、喷雾、软膏、液体清洁洗剂和固体皂剂、香波和头发护理剂、糊剂、泡沫、粉剂、摩丝、剃须膏、拭子(wipe)、条(strip)、膏药、粉状膏药、伤口敷料和粘性绷带、水凝胶、成膜产品、面膜和体膜、化妆品例如粉底、眼线和眼影等。这些产品类型可以含有多种类型的美容上可接受的载体，包括但不限于：溶液、悬液、乳剂例如微乳和纳乳、凝胶、固体和微脂体。以下是这类载体的非限制性例子。本领域普通技术人员还可以配制其它载体。
可以将用于本发明的组合物配制成溶液。溶液通常包括水性或有机溶剂(例如，美容上可接受的水性或有机溶剂约为50-99.99％或约为90-99％)。合适的有机溶剂的例子包括：丙二醇、聚乙二醇(200-600)、聚丙二醇(425-2025)、丙三醇、1，2，4-丁三醇、山梨醇酯、1，2，6-己三醇、乙醇和它们的混合物。
可以由这类溶液来配制护肤液。护肤液通常含有约1-20％(例如，约5-10％)的润肤剂和约50-90％(例如约60-80％)的水。本文所用的“润肤剂”指用来预防或缓解干燥以及保护皮肤或头发的材料。润肤剂的例子包括但不限于：在《国际美容成分字典和手册》(International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbood)，Wenninger和McEwen编，第1656-61、1626和1654-55页(美容、化妆和香水协会，哥伦比亚华盛顿，第7版，1997)(在下文中为“ICI手册”)中提到的那些。
可以由溶液配制的另一种产品类型是乳膏剂。乳膏剂通常含有约5-50％(例如约10-20％)的润肤剂和约45-85％(例如约50-75％)的水。
可以由溶液配制的再另一种产品类型是软膏。软膏可以含有单一的动物、植物或合成油脂基或半固体烃类。软膏可以含有约2-10％的润肤剂加约0.1-2％的增稠剂。增稠剂的例子包括但不限于ICI手册第1693-1697页中提到的那些。
可用于本发明的组合物还可以配制成乳液。如果载体是乳液，则约1-10％(约2-5％)的载体含有乳化剂。乳化剂可以是非离子、阴离子或阳离子。乳化剂的离子包括但不限于ICI手册第1673-1686页中提到的那些。
可以将护肤液和乳膏剂配制成乳剂。通常这类护肤液含有约0.5-5％的乳化剂，而这类乳膏剂通常含有约1-20％(例如约5-10％)的润肤剂；约20-80％(例如约30-70％)的水；和约1-10％(例如约2-5％)的乳化剂。
单相皮肤护理制品乳剂，例如水包油类和油包水类的护肤液和乳膏剂已为本领域所熟知，可用于本发明主题。多相乳剂组合物，例如水包油包水类或油包水包油类也可用于本发明主题。大体上，此类单或多相乳剂含有作为主要成分的水、润肤剂和乳化剂。
还可以将本发明组合物配制成凝胶(例如利用合适胶凝剂制成的水、醇、醇/水或油性凝胶)。针对水和/或醇凝胶的合适胶凝剂包括但不限于天然树胶、丙烯酸和丙烯酸酯聚合物和共聚物、和纤维素衍生物(例如羟甲基纤维素和羟丙基纤维素)。针对油(例如矿物油)的合适胶凝剂包括但不限于氢化丁烯/乙烯/苯乙烯共聚物和氢化乙烯/丙烯/苯乙烯共聚物。这类凝胶通常含有约0.1-5重量％的这类凝胶剂。
还可以将本发明组合物配制成固体制剂(例如，蜡基棒、肥皂组合物、粉末和包含在拭子中的粉末)。
除了上述组分外，可用于本发明主题的组合物还可以含有各种各样在皮肤上以其本领域已确定的水平使用的常规用于组合物中的额外油溶性材料和/或水溶性材料。
其它美容活性添加剂
一实施方式中，除上述化合物以外，所述组合物还含有另一种美容活性剂。“美容活性剂”指的是一种对组织具有美容或治疗作用的化合物(例如合成的化合物或分离自天然来源的化合物，或含有化合物混合物的天然提取物)，包括但不限于增亮剂、增暗剂例如自染剂、抗痤疮剂、控油光剂、抗菌剂例如抗酵母剂、抗真菌和抗细菌剂、消炎剂、抗寄生虫剂、外用止痛剂、防晒剂、光照保护剂、抗氧化剂、去角质剂、清洁剂/表面活性剂、保湿剂、营养剂、维生素、增能剂、止汗剂、收敛剂、除臭剂、脱毛剂、生发剂、增强剂、延缓毛发生长剂、紧致剂、抗结茧剂、皮肤调理剂、抗脂肪团剂、氟化物和气味控制剂例如掩味剂，或pH改变剂。
一实施方式中，所述美容活性剂选自，但不限于下组：羟酸、过氧化苯酰、D-泛醇、甲氧基肉桂酸辛酯、二氧化钛、水杨酸辛酯、胡莫柳酯、阿伏苯宗、类胡萝卜素、自由基清除剂、自旋捕获剂(spin traps)、维甲酸和维甲酸前体例如视黄醇、棕榈酸视黄酯、神经酰胺、多不饱和脂肪酸、必需脂肪酸、酶、酶抑制剂、矿物质、激素例如雌激素、类固醇例如皮质醇、2-二甲氨基乙醇、铜盐例如氯化铜、含铜钛例如Cu:Gly-His-Lys、辅酶Q10、氨基酸例如脯氨酸、维生素、乳糖酸、乙酰辅酶A、烟酸、核黄素、硫胺、核糖、电子运载体例如NADH和FADH2，和其它植物提取物例如芦荟、野甘菊和大豆及其衍生物和混合物。所述美容活性剂通常以组合物约0.001-20重量％，例如约0.005-10％，如约0.01-5％的量存在于本发明组合物中。
维生素的例子包括但不限于：维生素A、维生素B例如维生素B3、维生素B5和维生素B12、维生素C、维生素K、维生素E例如α、γ或δ生育酚及其衍生物(例如盐和酯)和混合物。
羟酸的例子包括但不限于羟乙酸、乳酸、苹果酸、水杨酸、柠檬酸和酒石酸。
抗氧化剂的例子包括但不限于水溶性抗氧化剂，例如巯基化合物及其衍生物(例如偏亚硫酸氢钠和N-乙酰基-半胱氨酸)、硫辛酸和二氢硫辛酸、白藜芦醇、乳铁蛋白、抗坏血酸和抗坏血酸衍生物(例如抗坏血酸棕榈酸盐和抗坏血酸多肽)。适用于本发明组合物的油溶性抗氧化剂包括但不限于：二叔丁对甲酚、维甲酸(例如视黄醇和棕榈酸视黄酯)、不同类型的生育酚(例如α、γ或δ生育酚和它们的酯例如乙酸酯)及其混合物、生育二烯酸和泛醌。适用于本发明组合物的含有抗氧化剂的天然提取物包括但不限于含有类黄酮、异类黄酮和它们的衍生物例如染料木黄酮和大豆黄酮(例如大豆和三叶草提取物、含有白藜芦醇的提取物等)的提取物。这类天然提取物的例子包括葡萄籽、绿茶、松树皮和蜂胶。
酶的例子包括但不限于：蛋白酶例如真菌蛋白酶、细菌蛋白酶或哺乳动物蛋白酶。这类蛋白酶的例子包括但不限于：胃蛋白酶、组织蛋白酶、人尿酸蛋白酶、衍生自水稻脉孢霉(Neurospora oryzae)、微小毛霉(Mucor pusillus)、米黑毛霉(Mucormiehei)、华根霉(Rhizopus chinensis)或栗疫菌(Endothia parasitica)的真菌蛋白酶和细菌蛋白酶如根霉胃蛋白酶(rhizopuspepsin)、青霉胃蛋白酶(penicillopepsin)和栗疫霉胃蛋白酶(endothiapepsin)。而且，还可以通过包括基因工程方法和技术在内的方法得到所述蛋白酶。
真菌提取物的例子包括但不限于：水稻脉孢霉、微小毛霉、米黑毛霉、华根霉、或栗疫菌米黑毛霉的提取物。含有这类蛋白酶和真菌提取物的组合物的例子如美国专利号5,976,556所述。
抗痤疮剂
一实施方式中，本发明涉及含有抗痤疮剂的局部组合物。抗痤疮剂指一种由美国食品与药品管理局批准用于局部治疗痤疮的化合物(如联邦文档第56卷，第152号，第37622-37635页和联邦文档第56卷，第159号，第41008-41020页所述)。抗痤疮剂的例子包括但不限于：水杨酸、过氧化苯酰、硫磺、视黄酸、假丝酵母(Candidabombicola)/葡萄糖/菜籽油酸甲酯发酵产物、泥炭水(peat water)、间苯二酚、砂、泥炭、扑灭司林(permethin)、壬二酸、克林霉素、阿达帕林、红霉素、磺胺醋酰钠及其组合。一实施方式中，抗痤疮剂在组合物中的量为约占组合物总重量的0.01-10重量％，例如约0.1-5重量％，或约0.5-2重量％。
儿茶素
一实施方式中，本发明组合物还包含协同作用的儿茶素。术语“儿茶素”指一种属于类黄酮的黄烷-3-醇类的多酚物质。所述儿茶素可以是人工合成或天然形成(例如作为植物提取物的一部分)。示例性儿茶素包括但不限于：儿茶素(catechin，C)、儿茶素没食子酸酯(catechin gallate，CG)、表儿茶素(epicatechin，EC)、倍儿茶酸(gallocatechin，GC)、倍儿茶酸没食子酸酯(gallocatechin gallate，GCG)、表焙儿茶素(epigallocatechin，EGC)、表儿茶素没食子酸酯(epicatechin gallate，ECG)和表焙儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate，EGCG)。含有儿茶素的示例性植物包括但不限于儿茶(Catechu)、绿茶(茶(Camellia sinensis)、油茶(Camellia oleifera))、葡萄(Vitisvinifera)、葡萄(葡萄(Vitis vinifera))、龙芽草(欧洲龙芽草(Agrimonia eupatoria))、棉(棉(Gossypium sp))、黑醋栗(黑穗醋栗(Ribes nigrum))、越桔(越桔(Vaccinium vitis-idaea var.minus))、大高良姜(Alpinia galanga)和草豆蒄(Alpinia katsumada)。其它植物如JamesA.Duke所著的《GRAS草药的植物化学成分和其它经济植物》手册(Handbood ofPhytochemical Constituents of GRAS Herbs and Other Economic Plants)所述(CRC出版社1992)。
植物提取物
一实施方式中，本发明组合物还含有另一种植物提取物。“植物提取物”指的是分离自植物的化合物的混合物。可以通过物理分离这类植物的一部分，例如研磨植物的花而从植物的一或多个部位(例如，完整的植物、植物的花、种子、根、根茎、茎、果实和/或叶片)分离这类化合物。还可以通过采用本领域公知的萃取方法而从植物分离这类化合物(例如，利用有机溶剂例如低级C1-C8醇、C1-C8多元烷醇、C1-C8烷酮、C1-C8烷醚、乙酸C1-C8烷酯、和氯仿，和/或无机溶剂例如水、无机酸例如盐酸、和无机碱例如氢氧化钠)。
一实施方式中，组合物中存在的所述植物提取物(例如良姜提取物、绿茶提取物、野甘菊提取物、龙芽草提取物、棉提取物、葡萄提取物、黑醋栗提取物、越橘提取物、或大豆提取物)的量约为组合物重量的0.001-20％，具体的量约为组合物重量的0.1-10％。除非在其它地方有说明，提取物的重量指提取物的净重。
野甘菊提取物
一实施方式中，本发明组合物还含有野甘菊提取物。“野甘菊提取物”指的是分离自野甘菊植物的化合物的混合物。这类化合物的例子包括但不限于：芹菜素-7-葡糖苷、芹菜素-7-葡糖苷酸、1-β-羟基阿布库灵(arbusculin)、6-羟基莰非醇-3，7-4′-三甲醚(泰汀(Tanetin))、6-羟基莰非醇-3，7-二甲醚、8-β-喘诺木烯内酯(8-β-reynosin)、10-依匹西林、抗坏血酸、β-胡萝卜素、钙、铬、菊花内酯(chrysanthemolide)、菊花素(chrysanthemomin)、金沙腾(chrysarten)-A、金沙腾-C、金圣草黄素-7-葡糖苷酸、钴、大波斯桔苷、环氧南艾蒿烯内酯(epoxyartemorin)、木犀草素-7-葡糖苷、木犀草素-7-葡糖苷酸、莽诺内酯(mangnoliolide)、银胶菊内酯、六羟黄酮-3，7，3`-三甲醚、六羟黄酮-3，7-二甲醚、喘诺木烯内酯、他那帕星(tanaparthin)、他那帕星-1α，4α-环氧化物、他那帕星-1β，4β-环氧化物、β-闭鞘姜酯、3-β-羟基-银胶菊内酯和3，7，3`-三甲氧基六羟黄酮。已知野甘菊植物中存在的所述α-不饱和γ-内酯例如银胶菊内酯会引起过敏反应。因此，一实施方式中，所述野甘菊提取物基本上没有引起过敏的α-不饱和γ-内酯。基本上没有银胶菊内酯的野甘菊提取物制品如美国专利申请号20040105905中的实施例1所述。
大豆提取物
一实施方式中，本发明组合物还含有大豆提取物。“大豆提取物”指的是分离自大豆的化合物的混合物。所述大豆提取物可以仅含有大豆的一部分(例如，大豆提取物例如无水大豆粉或过滤豆奶)或可以含有完整的大豆(例如，研磨的大豆粉)。所述大豆提取物可以是液体(例如豆奶)或固体(例如大豆粉或豆奶粉)。
所述大豆提取物可以是大豆粉。大豆粉可以通过研磨干大豆制得。所述大豆粉可以是冻干粉。豆奶和豆奶粉也是可用的大豆提取物。豆奶是衍生自大豆和水的固体组合物，而且过滤掉了该混合物的一些或所有不溶成分。豆奶粉是经蒸发的豆奶，在一实施方式中，是冻干粉或经喷雾干燥的。制造豆奶的方法包括但不限于以下3种方法。首先，可以通过将大豆放进水里让它们吸收水份来制备豆奶。然后研磨泡大的大豆，然后再加水。然后过滤该混合物除去不溶残留物。第二，还可用大豆粉制备豆奶。将大豆粉与水充分混合(例如，至少1小时)，然后通过过滤方法除去不溶残留物。第三，还可以通过加水使豆奶粉再变成豆奶。所述豆奶可以含有约1-50重量％(例如，约5-20重量％)的大豆固体。
大豆的已知活性成分包括但不限于：异黄酮、植物雌激素、染料木黄酮、大豆黄酮、黄豆黄素、皂苷和植物甾醇。可用于本发明的所述大豆提取物可以由所有大豆品种制备，而不需要考虑它们的地理起源、日光照射、收割期等。然而，可以优选特定的种系、地理起源或生长条件。例如，但不限于：特别富含大豆胰蛋白酶抑制剂(STI)或富含异黄酮的大豆品系，或者可以优选能使大豆富含STI或异黄酮的生长条件。
一实施方式中，所述大豆提取物是未变性大豆提取物。“变性”在《精简医药字典》(Bantam Medical Dictionary)(1990版)中的定义为“热、X射线或化学物质带来的蛋白质的物理和生理学性质的改变。这些改变包括活性丧失(就酶而言)和抗原性丧失(或改变)(就抗原而言)”。“未变性植物提取物”指的是一种萃取或衍生自植物的产品，对这种植物提取物的衍生物的处理(例如，温度、萃取介质)不会消除其蛋白酶抑制活性。这类蛋白酶之一是胰岛素。一实施方式中，通过测量完整大豆胰岛素抑制剂(STI)蛋白或通过测量其胰岛素抑制活性来测定本发明大豆提取物的未变性态。
值得注意的是，可用于本发明组合物的大豆提取物可能具有独特的气味，如果需要，可以通过采用衍生自已知能减少气味产生的特殊大豆品系，包括但不限于脂肪氧化酶-2缺陷型大豆和那些具有改良糖分布的大豆产品来减少该提取物的气味。减少制剂中的氧水平的方法也可以减少气味。还可以用各种掩味剂或香精来遮盖气味。一种制造豆奶的方法是将大豆在去离子水或纯水中浸泡数小时，在它们充分吸水后加入少量水进行研磨。采用研磨方法可以提取大豆奶。收集豆奶后过滤除去任何豆壳的残留部分。
用于以下所述配方中的豆奶可以是上述新鲜豆奶，或可以从大豆粉和水来制备。所述大豆粉是由碾磨大豆得到，还可以经冻干、喷雾干燥或冷冻干燥，得到的豆奶可以过滤也可以不过滤。这类豆奶制品可以含有约1-90重量％的干豆粉。另一实施例是使用通过冻干、喷雾干燥或冷冻干燥的豆奶粉，加水，最后过滤或不过滤或匀浆化。提取大豆的其它方法还可以用于在以下所述配方中引入活性成分。例如，所述活性成分可以采用乙醇/水混合物从大豆研磨物中提取出来，接下来除去提取物中的乙醇，这样可以保留大豆的丝氨酸蛋白酶抑制活性，优选完整保留STI蛋白。
一实施方式中，用于本发明的所述大豆提取物中含有低于约1,000cfu/g(例如低于约100cfu/g)的微生物。
可以使所述大豆提取物接触γ射线。可以使所述大豆提取物接触约2-30kGy的γ射线，例如约5-10kGy的γ射线。这类处理可以降低大豆提取物中的微生物含量，而又保留其生物学活性(例如，丝氨酸蛋白酶抑制活性)。用γ射线处理大豆提取物保留了该组合物的美观优雅，例如保留了天然颜色而不会散发明显恶臭。
其它可以单独实施或与γ射线组合实施的同样能保留大豆提取物蛋白酶活性的抗微生物方法包括但不限于：接触x射线、高能电子或质子束、紫外线照射、流体静力学压力和加入具有抗微生物活性的化学剂，和它们的组合。
其它物质
可用于本发明主题的组合物中还可以存在各种其它物质。这些包括湿润剂、蛋白质和多肽、防腐剂和碱剂。这类试剂的例子描述于ICI手册，第1650-1667页。本发明组合物还可以含有螯合剂(例如EDTA)和防腐剂(例如对羟基苯甲酸酯)。合适的防腐剂和碱剂的例子列于ICI手册第1626页和1654-55页。另外，本文可用的组合物可以含有常规美容佐剂，例如着色剂例如染料和色素、遮光剂(例如二氧化钛)和香精。
矿物水
可以用矿物水来制备本发明组合物，例如含有天然矿物质的矿物水例如依云矿物水(法国Evian)。一实施方式中，所述矿物水所含矿物质至少约200mg/L(例如，约300-1000mg/L)。一实施方式中，所述矿物水含有至少约10mg/L的钙和/或至少约5mg/L的镁。
用途
本发明组合物可用于治疗各种皮肤病，包括但不限于痤疮。一实施方式中，将所述组合物用于治疗其它皮脂病例如高脂血症、雄激素过多症、皮脂溢出、脂溢性皮炎、头皮皮脂溢出、湿疹样皮脂溢出、面部皮脂溢出、油性皮脂溢出、干性皮脂溢出、新生儿鳞屑皮脂溢出、皮脂增生、红斑痤疮、毛囊疹、毛囊脂螨、油性皮肤、角质囊肿、须部假性毛囊炎和多毛症。
本发明组合物还可用于减少皮肤(例如，脸部、头皮或头发)出现毛孔和油脂。
本发明组合物还可用于减少痤疮损伤、粉刺或面泡，减少痤疮损伤、粉刺或面泡的出现，减少出现痤疮性皮炎和痤疮斑，预防、控制或调节出现痤疮性皮炎和痤疮斑，和减少皮炎和斑。
本发明组合物还可用于促进减少皮肤出油，例如减少出现皮脂，预防、控制或调节皮脂产生，减少皮脂，减少出现油性/油光皮肤，减少出现油腻皮肤，和减少皮肤、头发或头皮油光。
本发明组合物可用于无需痤疮治疗的皮肤(即，未患痤疮的皮肤)或头皮/头发。
含有本发明组合物的所述组合物和制剂可用普通技术人员熟知的方法来制备。
实施例1：球花报春叶的提取和分级
用1∶1的二氯甲烷/甲醇在室温下搅拌过夜来提取球花报春(又称为鼓槌报春花)的叶片(25g)。过滤和真空蒸发溶剂后，获得9g提取物。
将提取后获得的5g粗提取物与20g的DiaionHP-20树脂(苏普克公司(Supelco)，宾夕法尼亚州白露枫丹(Bellefonte))和100mL甲醇混合。除去溶剂后，将所述提取物和DiaionHP-20树脂混合物装入填充有100g的DiaionHP-20树脂的柱内，用1L水、1.2L甲醇和1L丙酮洗脱。将甲醇级分蒸干得到1.92g提取物。
通过利用C18-反相硅胶芯(奥泰克公司(Alltech Associates Inc)，伊利诺斯州迪费尔德(Deerfield))进行的固相抽提(SPE)将上述甲醇级分中的残留物进一步分级成10个级分。将572mg残留物装入10g的C18硅胶SPE芯中，用30mL等分梯度的各为20、40、45、50、55、60、65、70、90和100％的乙腈/水洗脱。合并用50-65％洗脱液获得的级分。
实施例2：大高良姜种子提取和分级
用1∶1的二氯甲烷/甲醇在室温下搅拌过夜来萃取高良姜(大高良姜(Alpiniagalanga))种子(200g)。过滤和真空蒸发溶剂后，获得18g提取物。
将上述获得的2g粗提取物与8g Diaion HP-20树脂(苏普克公司，宾夕法尼亚州白露枫丹)和40mL甲醇混合。除去溶剂后，将所述提取物和HP-20树脂混合物装到填充有40g Diaion HP-20树脂的柱内，用H2O预处理。用400mL水、500mL甲醇和400mL丙酮对HP-20柱进行洗脱。将甲醇级分蒸干得到1.6g提取物。
通过利用C18-反相硅胶芯(奥泰克公司，伊利诺斯州迪费尔德)进行的固相抽提(SPE)将甲醇级分进一步分级成10个级分。将922mg残留物装入10g的C18硅胶SPE芯中，用30mL等分梯度的各为20、40、45、50、55、60、65、70、90和100％的乙腈/水洗脱。合并20-40％洗脱液获得的级分。
实施例3：体外皮脂细胞脂肪生成试验
采用获自进行面部除皱手术的对象的面部皮肤样品。样品一到，立即除去用取皮机获得的表层0.4mm皮肤切片，采用第二个0.4mm真皮切片(预先显示富含皮脂腺)来分离皮脂细胞。将该组织在含有青霉素和链霉素和10％小牛血清的Dulbecco改良的Eagle培养基(DMEM)中用分散酶37℃消化20分钟，然后在磷酸缓冲盐水中用0.3％胰岛素/0.1％乙二胺四乙酸(EDTA)37℃消化10分钟。通过用手术刀片用力刮擦组织而获得单细胞悬液。将分离出来的细胞接种到丝裂霉素C灭活的3T3成纤维细胞的饲养层上，在生长培养基中37℃培养3天。生长培养基含有DMEM和F12培养基(3∶1)、L-谷氨酰胺、丙酮酸钠、青霉素、链霉素、8％胎牛血清、2％热灭活人血清、表皮生长因子、胰岛素、氢化可的松，和含或不含霍乱毒素(ChT)。将ChT处理的培养物转移到低血清培养基中培养3天，然后在无血清培养基中培养另外7天诱导脂质形成和储存，而未经ChT处理的培养物留在生长培养基(非诱导条件)中培养10天。低血清培养基由补充进L-谷氨酰胺、丙酮酸钠、青霉素、链霉素、2％热灭活胎牛血清、2％热灭活人血清、1X胰岛素-运铁蛋白-硒、1X微量元素的DMEM和F12培养基(3∶1)组成。无血清培养基由补充进L-谷氨酰胺、丙酮酸钠、青霉素、链霉素、2％热灭活胎牛血清、2％热灭活人血清、1X胰岛素-运铁蛋白-硒、1X微量元素、3，3′，5-三碘-L-甲腺原氨酸钠的DMEM和F12培养基(3∶1)组成。为了用尼罗红(Nile red)染色分析中性脂质，使细胞在96孔板内生长，为了用薄层色谱法分析脂质，使细胞在6孔板内生长，培养结束时通过刮擦收集细胞。
检测皮脂细胞分化和脂质产生的刺激剂或抑制剂
将待检测激素、激素混合物即牛脑垂体提取物或化合物在无血清培养基添加开始时加入培养物。采用两种标准来评估这些材料对皮脂培养物的作用：1)目测观察和2)评估皮脂脂质积累和合成。用尼罗红(Nile red)方法完成脂质积累的评估。该方法基于通过尼罗红使中性脂质可视化，和通过在535nm激发光、580nm发射光处用平板读数器对荧光读数来定量。通过利用14C醋酸盐作为放射性标记来评估所述脂质合成，利用4.1软件通过Bio Rad磷影相分析仪(Bio Rad Phosphoimager)(分子成像仪(Molecular Imager)，FX)进行定量。
因为增大的细胞在明视野光学显微镜中呈现细胞内的淡黄色圆形脂质颗粒，很容易进行脂质积累的形态学评估。通过尼罗红结合试验可以完成对皮脂细胞中中性脂质的积累/抑制的定量。简单而言，将皮脂细胞接触检测化合物后，使细胞在含有DMSO和普朗尼克F127(Pluronic F127)的Hanks缓冲盐水溶液中与1μM尼罗红反应。培养4小时后，洗涤和培养过夜，用荧光平板读数器读取535nm激发光和580nm发射光处的荧光与诱导剂比较(即霍乱毒素)。为了确定所述化合物是否对细胞生长具有抑制作用，进行了细胞计数。
上述方法之后，目测本发明提取物和尼罗红评估脂质积累。
结果如表1所示，即球花报春抑制皮脂细胞中的脂质生成。而绿茶基本上没有活性，它与球花报春组合显示能够协同抑制脂质生成。樱草素，常见的报春花属皮肤致敏剂，具有脂质生成活性(表2)。
表1
    抑制脂质生成
    检测物     0.3μg/mL     1.0μg/mL
    球花报春     9.6％     22.9％
    绿茶     1.4％     4.2％
    球花报春+绿茶     17.8     39.3
表2
    樱草素     引起脂质生成
    0.0μg/mL     0.0
    0.3μg/mL     17.9％
    1.0μg/mL     21.3％
    3.0μg/mL     41.5％
总状芦笋提取物与绿茶提取物组合能协同抑制脂肪细胞中的脂质生成(表3)。
表3
  抑制脂质生成     芦笋浓度(μg/mL)
    0     1.125     2.5     5
  绿茶浓度(μg/mL)     0     0     0     5.4     1.7
    1.125     0.9     21.2     ND     ND
    2.5     7.7     ND     22.3     ND
    5     18     ND     ND     47.2
(ND)数据未得

Claims (24)

1.一种治疗痤疮或减少皮肤、头发和头皮出现油脂或毛孔的方法，所述方法包括给予需要此类治疗的皮肤含有球花报春提取物的组合物。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法包括治疗痤疮。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法包括减少无需痤疮治疗的皮肤上油脂或毛孔的出现。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述组合物含有低于约0.001重量％的樱草素。
5.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述组合物含有低于约0.001重量％的樱草素。
6.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述组合物含有低于约0.001重量％的樱草素。
7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述组合物还包含水杨酸或过氧化苯酰。
8.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述组合物还包含水杨酸或过氧化苯酰。
9.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述组合物还包含水杨酸或过氧化苯酰。
10.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述组合物还包含水杨酸或过氧化苯酰。
11.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述组合物还包含绿茶或良姜的提取物。
12.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述组合物还包含绿茶或良姜的提取物。
13.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述组合物还包含绿茶或良姜的提取物。
14.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述组合物还包含绿茶或良姜的提取物。
15.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述组合物还包含绿茶或良姜的提取物。
16.如权利要求11所述的方法，其特征在于，所述组合物还包含绿茶或良姜的提取物。
17.一种产品，其包含：
(a)含有球花报春提取物的组合物；和
(b)指导使用者将所述组合物用于皮肤来治疗痤疮或减少皮肤出现油脂或毛孔的说明书。
18.如权利要求17所述的产品，其特征在于，所述说明书指导使用者将所述组合物用于治疗痤疮。
19.一种宣传含有球花报春提取物的组合物的方法，所述方法包括指导使用者将所述组合物用于皮肤来治疗痤疮或减少皮肤出现油脂或毛孔。
20.如权利要求19所述的方法，其特征在于，所述方法包括指导使用者将所述组合物用于治疗痤疮。
21.如权利要求15所述的方法，其特征在于，所述组合物还包含水杨酸或过氧化苯酰。
22.一种治疗痤疮或减少皮肤出现油脂或毛孔的方法，所述方法包括给予需要此类治疗的皮肤含有总状芦笋提取物和含儿茶素的提取物的组合物。
23.如权利要求22所述的方法，其特征在于，所述方法包括治疗痤疮。
24.如权利要求22所述的方法，其特征在于，所述方法包括减少无需痤疮治疗的皮肤上出现油脂或毛孔。
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