CN101216462A - 威灵仙药材中有效成分含量的测定方法 - Google Patents
威灵仙药材中有效成分含量的测定方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101216462A CN101216462A CNA2007100330266A CN200710033026A CN101216462A CN 101216462 A CN101216462 A CN 101216462A CN A2007100330266 A CNA2007100330266 A CN A2007100330266A CN 200710033026 A CN200710033026 A CN 200710033026A CN 101216462 A CN101216462 A CN 101216462A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- hederagenin
- oleanolic acid
- reference substance
- methyl alcohol
- methanol
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明公开了一种威灵仙药材中有效成分含量的测定方法，其主要步骤是：(1)对照品溶液的制备；(2)供试品溶液的制备；(3)分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，采用蒸发光散射检测器进行测定，然后获到齐墩果酸、常春藤皂苷元两种有效成分的含量；色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇－水－冰醋酸－三乙胺为流动相，各溶剂间的体积比为80～95∶5～20∶0.01～0.1∶0.01～0.1；理论板数按齐墩果酸计算不低于2000。该方法操作简单，能够准确测出威灵仙药材中齐墩果酸、常春藤皂苷元的含量。
Description
技术领域
本发明涉及了一种威灵仙药材中有效成分含量的测定方法，尤其是涉及一种威灵仙药材中齐墩果酸、常春藤皂苷元含量的测定方法。
背景技术
威灵仙为毛茛科植物威灵仙Clematis chinensis Osbeck、棉团铁线莲Clematishexapetala Pall.或东北铁线莲Clematis manshurica Rupr.的干燥根及根茎。味辛咸，性温。有祛风除湿、通络止痛之功，用于风湿痹痛，肢体麻木，筋脉拘挛，屈伸不利，骨哽咽喉。
威灵仙药材中化学成分较为复杂。现代植物化学和药理学研究表明，齐墩果酸及常春藤皂苷元为其多种药理作用的活性成分它的含量
威灵仙药材中齐墩果酸、常春藤皂苷元的含量是确定威灵仙药材质量标准的重要参数，但目前尚未有一种准确地测定威灵仙药材中齐墩果酸、常春藤皂苷元含量的测定方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种准确测定威灵仙药材中有效成分含量的测定方法，该方法主要是测定齐墩果酸、常春藤皂苷元的含量。
本发明的目的是通过以下技术方案来实现：一种威灵仙药材中有效成分含量的测定方法，主要步骤如下：
(1)对照品溶液的制备：
(2)供试品溶液的制备：
(3)分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，采用蒸发光散射检测器进行测定，然后获到齐墩果酸、常春藤皂苷元两种有效成分的含量；色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-冰醋酸-三乙胺为流动相，各溶剂之间的体积比为80～95∶5～20∶0.01～0.1∶0.01～0.1；理论板数按齐墩果酸计算不低于2000。
所述步骤(3)中的流动相甲醇-水-冰醋酸-三乙胺的各溶剂间的体积比为85∶15∶0.05∶0.03。
所述步骤(3)中采用外标两点法对数方程计算齐墩果酸、常春藤皂苷元含量。
所述步骤(1)的具体方法为：精密称取齐墩果酸对照品、常春藤皂苷元对照品，加甲醇制成齐墩果酸、常春藤皂苷元浓度均为1ml/mg的混合溶液，即为对照品溶液。
所述步骤(2)的具体方法为：精密称定威灵仙药材粉末，按料液重量体积比1∶10～50加入甲醇，超声处理20～30分钟，滤过，残渣用甲醇洗涤，合并滤液与洗液，回收溶剂至干，残渣加水溶解，用饱和正丁醇振摇提取2～4次，每次10～30ml，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇10～30ml、盐酸1～3ml，加热水解3～5小时，水解物加水稀释，用三氯甲烷振摇提取2～4次，每次10～30ml，合并提取液，回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解并转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得到供试品溶液。
本发明公开测定方法操作简单，只需测定威灵仙药材中齐墩果酸、常春藤皂苷元的特征峰面积后通过外标两点法对数方程计算即可准确得出威灵仙药材中齐墩果酸、常春藤皂苷元的含量。
具体实施方式
以下实施例仅用于阐述本发明，而本发明的保护范围并非仅仅局限于以下实施例。所述技术领域的普通技术人员依据以上本发明公开的内容，均可实现本发明的目的。
实施例一
(1)对照品溶液的制备：
精密称取齐墩果酸对照品、常春藤皂苷元对照品适量，加甲醇制成齐墩果酸、常春藤皂苷元浓度均为1ml/mg的混合溶液，即为对照品溶液；
(2)供试品溶液的制备：
取威灵仙药材粉末2g，精密称定，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，残渣用甲醇适量洗涤，合并滤液与洗液，回收溶剂至干，残渣加10ml水溶解，用饱和正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇20ml、盐酸2ml，加热水解4小时，水解物加水10ml，用三氯甲烷振摇提取2次，每次20ml，合并提取液，回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解并转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得到供试品溶液；
(3)精密吸取对照品溶液5μl、10μl，供试品溶液10μl，注入waters2695-2420高效液相色谱仪，采用蒸发光散射检测器进行测定得到对照品和供试品溶液中齐墩果酸、常春藤皂苷元的特征峰面积，并根据外标两点法对数方程计算得出威灵仙样品中齐墩果酸、常春藤皂苷元的含量，结果见表1。
色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-冰醋酸-三乙胺为流动相，它们之间的体积比为85∶15∶0.05∶0.03，蒸发光散射检测器，理论板数按齐墩果酸计算不低于2000。
回归方程：常春藤皂苷元：Y＝0.0748X+6.6867
齐墩果酸：Y＝0.0829X+6.4278
表1：
| 对照品 | 保留时间 | 峰面积 | 含量(mg/g) | ||
| 5μl10μl | 常春藤皂苷元齐墩果酸常春藤皂苷元齐墩果酸 | 6.97814.2426.99714.283 | 1220872972951433066942819874627 | 1111 | |
| 威灵仙 | 123 | 常春藤皂苷元齐墩果酸常春藤皂苷元齐墩果酸常春藤皂苷元齐墩果酸 | 7.01414.357.09514.6297.08214.513 | 685654417477494789630329062804569012113100594 | 0.954.911.346.250.444.16 |
实施例二
与实施例一不同的是：步骤(2)供试品溶液的制备：取威灵仙药材粉末2g，精密称定，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，残渣用甲醇适量洗涤，合并滤液与洗液，回收溶剂至干，残渣加10ml水溶解，用饱和正丁醇振摇提取2次，每次10ml，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇10ml、盐酸1ml，加热水解4小时，水解物加水10ml，用三氯甲烷振摇提取3次，每次10ml，合并提取液，回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解并转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得到供试品溶液；
(3)精密吸取对照品溶液5μl、10μl，供试品溶液10μl，注入waters2695-2420高效液相色谱仪，采用蒸发光散射检测器进行测定得到对照品和供试品溶液中齐墩果酸、常春藤皂苷元的特征峰面积，并根据外标两点法对数方程计算得出威灵仙样品中齐墩果酸、常春藤皂苷元的含量，结果见表2。
色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-冰醋酸-三乙胺为流动相，它们之间的体积比为80∶20∶0.02∶0.01，蒸发光散射检测器，理论板数按齐墩果酸计算不低于2000。
回归方程：常春藤皂苷元：Y＝0.0791X+6.7115
齐墩果酸：Y＝0.0721X+6.5771
表2：
| 对照品 | 保留时间 | 峰面积 | 浓度(mg/ml) | ||
| 5μl10μl | 常春藤皂苷元齐墩果酸常春藤皂苷元齐墩果酸 | 10.65427.84110.36827.661 | 1302361290254133295645421569782 | 1111 | |
| 威灵仙 | 123 | 常春藤皂苷元齐墩果酸常春藤皂苷元齐墩果酸常春藤皂苷元齐墩果酸 | 10.92527.83410.47827.13110.69527.229 | 720265819563259809630331975213589012115423024 | 0.924.951.246.430.374.24 |
实施例三：
与实施例一不同的是：步骤(2)供试品溶液的制备：取威灵仙药材粉末2g，精密称定，加甲醇100ml，超声处理25分钟，滤过，残渣用甲醇适量洗涤，合并滤液与洗液，回收溶剂至干，残渣加10ml水溶解，用饱和正丁醇振摇提取4次，每次30ml，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇30ml、盐酸3ml，加热水解4小时，水解物加水10ml，用三氯甲烷振摇提取4次，每次30ml，合并提取液，回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解并转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得到供试品溶液；
(3)精密吸取对照品溶液5μl、10μl，供试品溶液10μl，注入waters2695-2420高效液相色谱仪，采用蒸发光散射检测器进行测定得到对照品和供试品溶液中齐墩果酸、常春藤皂苷元的特征峰面积，并根据外标两点法对数方程计算得出威灵仙样品中齐墩果酸、常春藤皂苷元的含量，结果见表3。
色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-冰醋酸-三乙胺为流动相，它们之间的体积比为90∶10∶0.07∶0.05，蒸发光散射检测器，理论板数按齐墩果酸计算不低于2000。
回归方程：常春藤皂苷元：Y＝0.0738X+6.6891
齐墩果酸：Y＝0.0918X+6.3068
表3：
| 对照品 | 保留时间 | 峰面积 | 浓度(mg/ml) | ||
| 5μl10μl | 常春藤皂苷元齐墩果酸常春藤皂苷元齐墩果酸 | 4.25110.6854.36210.837 | 1158453861483672745638418653587 | 1111 | |
| 威灵仙 | 123 | 常春藤皂苷元齐墩果酸常春藤皂苷元齐墩果酸常春藤皂苷元齐墩果酸 | 4.56910.4544.68710.6754.12510.769 | 665368716398421761538726086579550398411266752 | 0.914.951.316.040.354.16 |
Claims (5)
1.一种威灵仙药材中有效成分含量的测定方法，其特征是，其主要步骤是：
(1)对照品溶液的制备；
(2)供试品溶液的制备；
(3)分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，采用蒸发光散射检测器进行测定，然后获到齐墩果酸、常春藤皂苷元两种有效成分的含量；色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-冰醋酸-三乙胺为流动相，各溶剂间的体积比为80～95∶5～20∶0.01～0.1∶0.01～0.1；理论板数按齐墩果酸计算不低于2000。
2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征是，所述步骤(3)中的流动相甲醇-水-冰醋酸-三乙胺的各溶剂间的体积比为85∶15∶0.05∶0.03。
3.根据权利要求1所述的测定方法，其特征是，所述步骤(3)中采用外标两点法对数方程计算齐墩果酸、常春藤皂苷元含量。
4.根据权利要求1所述的测定方法，其特征是，所述步骤(1)的具体操作步骤为：精密称取齐墩果酸对照品、常春藤皂苷元对照品，加甲醇制成齐墩果酸、常春藤皂苷元浓度均为1ml/mg的混合溶液，即为对照品溶液。
5.根据权利要求1所述的测定方法，其特征是，所述步骤(2)的具体操作步骤为：精密称定威灵仙药材粉末，以料液重量体积比1∶10～50加入甲醇，超声处理20～30分钟，滤过，残渣用甲醇洗涤，合并滤液与洗液，回收溶剂至干，残渣加水溶解，用饱和正丁醇振摇提取2～4次，每次10～30ml，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇10～30ml、盐酸1～3ml，加热水解3～5小时，水解物加水稀释，用三氯甲烷振摇提取2～4次，每次10～30ml，合并提取液，回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解并转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得到供试品溶液。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNA2007100330266A CN101216462A (zh) | 2007-12-29 | 2007-12-29 | 威灵仙药材中有效成分含量的测定方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNA2007100330266A CN101216462A (zh) | 2007-12-29 | 2007-12-29 | 威灵仙药材中有效成分含量的测定方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101216462A true CN101216462A (zh) | 2008-07-09 |
Family
ID=39622939
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CNA2007100330266A Pending CN101216462A (zh) | 2007-12-29 | 2007-12-29 | 威灵仙药材中有效成分含量的测定方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101216462A (zh) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105699562A (zh) * | 2016-04-15 | 2016-06-22 | 广西壮族自治区梧州食品药品检验所 | 一种威灵仙中齐墩果酸的测定方法 |
| CN105954383A (zh) * | 2016-04-22 | 2016-09-21 | 广西壮族自治区梧州食品药品检验所 | 一种威灵仙中齐墩果酸和常春藤皂苷元的测定方法 |
| CN105954385A (zh) * | 2016-04-22 | 2016-09-21 | 广西壮族自治区梧州食品药品检验所 | 一种威灵仙中齐墩果酸和常春藤皂苷元的萃取方法 |
| CN106905405A (zh) * | 2017-03-10 | 2017-06-30 | 成都大学 | 一种从威灵仙中提取苷元的方法及应用 |
| CN110579547A (zh) * | 2019-09-27 | 2019-12-17 | 淮阴工学院 | 一种威灵仙药材hplc指纹图谱的检测方法 |
| CN112098569A (zh) * | 2019-06-17 | 2020-12-18 | 国药集团同济堂（贵州）制药有限公司 | 一种威灵仙提取物的制备方法及其质量测定方法 |
-
2007
- 2007-12-29 CN CNA2007100330266A patent/CN101216462A/zh active Pending
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105699562A (zh) * | 2016-04-15 | 2016-06-22 | 广西壮族自治区梧州食品药品检验所 | 一种威灵仙中齐墩果酸的测定方法 |
| CN105699562B (zh) * | 2016-04-15 | 2017-11-24 | 广西壮族自治区梧州食品药品检验所 | 一种威灵仙中齐墩果酸的测定方法 |
| CN105954383A (zh) * | 2016-04-22 | 2016-09-21 | 广西壮族自治区梧州食品药品检验所 | 一种威灵仙中齐墩果酸和常春藤皂苷元的测定方法 |
| CN105954385A (zh) * | 2016-04-22 | 2016-09-21 | 广西壮族自治区梧州食品药品检验所 | 一种威灵仙中齐墩果酸和常春藤皂苷元的萃取方法 |
| CN106905405A (zh) * | 2017-03-10 | 2017-06-30 | 成都大学 | 一种从威灵仙中提取苷元的方法及应用 |
| CN112098569A (zh) * | 2019-06-17 | 2020-12-18 | 国药集团同济堂（贵州）制药有限公司 | 一种威灵仙提取物的制备方法及其质量测定方法 |
| CN110579547A (zh) * | 2019-09-27 | 2019-12-17 | 淮阴工学院 | 一种威灵仙药材hplc指纹图谱的检测方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101216462A (zh) | 威灵仙药材中有效成分含量的测定方法 | |
| CN101564514A (zh) | 一种小儿风热清颗粒的分析方法 | |
| CN102100818A (zh) | 霍香正气片的质量控制方法 | |
| CN104502485B (zh) | 由穿山龙和刺五加为药材的中药复方制剂中6个化学成分的定量分析方法 | |
| CN101138594B (zh) | 一种治疗跌打损伤、风湿骨痛的中药制剂的检测方法 | |
| CN102139067B (zh) | 清瘟解毒片的检测方法 | |
| CN102879516B (zh) | 补阳还五汤的鉴别和含量测定方法 | |
| CN104280507A (zh) | 一种筋骨疼痛酒的薄层色谱鉴别方法 | |
| CN102100850A (zh) | 精制银翘解毒片的质量控制方法 | |
| CN102928521B (zh) | 复方丹参提取物中糖类成分的含量测定方法 | |
| CN101332287B (zh) | 一种胆乐胶囊的质量控制方法 | |
| Ye et al. | Determination of camphor and borneol in Flos Chrysanthemi Indici by UAE and GC-FID | |
| CN102331467A (zh) | 一种南板蓝根颗粒的质量检测方法 | |
| CN101390984B (zh) | 蓝花药的检测方法 | |
| CN101285812A (zh) | 抗病毒复方制剂的质量控制方法 | |
| CN105929066A (zh) | Hplc测定穿心莲片中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的方法 | |
| CN101279066A (zh) | 一种治疗妇科子宫肌瘤的药物组合物的质量检测方法 | |
| CN101601855B (zh) | 一种桂龙咳喘宁片的分析方法 | |
| CN101632804B (zh) | 疏风散热胶囊的检测方法 | |
| CN103267824A (zh) | 风寒感冒颗粒的检测方法 | |
| CN101306126B (zh) | 一种复方南板蓝根片的检测方法 | |
| CN101224259A (zh) | 一种复方南板蓝根颗粒的质量控制方法 | |
| CN101647997A (zh) | 感冒疏风胶囊及其制备方法和质量控制方法 | |
| CN101502630A (zh) | 一种妇炎康片指纹图谱的测定方法 | |
| CN105259264A (zh) | 消栓通络片中多种活性成分的含量测定方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Open date: 20080709 |