CN101214272A - 附红细胞体病用二丙酸咪唑苯脲兽用复方制剂及制备方法 - Google Patents

附红细胞体病用二丙酸咪唑苯脲兽用复方制剂及制备方法 Download PDF

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华修国
李政萍
崔立
杨志彪
沈权
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Abstract

本发明涉及一种附红细胞体病用二丙酸咪唑苯脲兽用复方制剂及制备方法。本发明主要以二丙酸咪唑苯脲、黄芪提取物、氟苯尼考和青蒿琥酯为主料，配以辅料，经由称量、搅拌、混匀、检验、计量、包装等常规方法制备而成。该复方制剂可拌料给药，其组分及重量百分比为：二丙酸咪唑苯脲5－15％，黄芪提取物2－5％，氟苯尼考3－12％，青蒿琥酯5－15％，β－环糊精25－65％，辅美粉10－40％。本发明具有成本低廉、储存稳定、效果确实及附红细胞体清除彻底等特点，是一种新型、高效的治疗动物附红细胞体病的用制剂。

Description

附红细胞体病用二丙酸咪唑苯脲兽用复方制剂及制备方法
技术领域
本发明涉及一种生物技术领域的制剂及其制备方法，具体是一种附红细胞体病用二丙酸咪唑苯脲兽用复方制剂及制备方法。
背景技术
附红细胞体病是由附红细胞体(Eperythrozoon)寄生于人和动物红细胞表面、血浆及骨髓中引起的一种人兽共患病。猪附红细胞体病主要引起仔猪发热、贫血、黄疸和母猪流产等，该病常与其他猪病混合感染，防治困难，危害十分严重，给养猪业造成巨大经济损失。但目前临床上对该病的治疗还没有安全高效环保的特效治疗药物。有些药物临床应用比较普遍，效果也较好，但是由于是单方用药，容易出现耐药现象，如临床常用的土霉素制剂不稳定，贝尼尔毒副作用较大等，因此安全高效的复方药物的发明具有重要的临床意义。
二丙酸咪唑苯脲是均二苯基脲的衍生物-咪唑苯脲的二丙酸盐。咪唑苯脲是一种动物用的抗原虫药，具有广谱、低毒、应用范围广、作用时间长、用药剂量小等优点，该药已被美国药典收录为允许应用于梨形虫病治疗的药物。黄芪提取物主要含黄芪多糖、黄芪总皂苷及黄芪异黄酮等有效成分。黄芪多糖能提高机体免疫力，增强细胞生理代谢，提高巨噬细胞活性：黄芪总皂苷能改善心肌收缩功能。黄芪提取物能增强能量，抗疲劳，抗突变，保肝，抑制破骨细胞的作用。氟苯尼考为抗菌药，用于敏感细菌所致的细菌性疾病。对大肠杆菌，伤寒杆菌，肺炎杆菌，沙门氏菌，痢疾杆菌，流感杆菌，支原体，钩端螺旋体具有显著疗效。适用于大肠杆菌病，沙门氏菌病，巴氏杆菌病等。主治传染性胸膜肺炎，猪喘气病，猪丹毒，朱红黄白痢，猪肺疫，呼吸困难，咽喉肿胀，严重下痢，皮肤发绀，肠粘膜脱落，气喘无名高热。青蒿琥酯是青蒿素最重要的衍生物之一，具有水溶性好，抗疟活性高等特点。研究发现，青蒿琥酯具有抗疟、抗血吸虫及其他寄生虫、影响免疫功能、抗肿瘤等作用。
经对现有技术的文献检索发现，相关报道极少，黄水洪等在《当代畜牧》2004年第2期上发表的《猪附红细胞体病的药物疗效探索》，该文中提出用对附红细胞体敏感的药物“血虫净”、磺胺对甲氧嘧啶钠、土霉素、金霉素、甲硝唑和强力霉素治疗附红细胞体病，在一定程度上可以降低附红细胞体的感染强度，但均不能净化血液中的附红细胞体，疾病治疗后依然可以检测到附红细胞体的存在，均不能彻底清除血液中附红细胞体病。
发明内容
本发明的目的在于克服现有治疗药物的不足，提供一种附红细胞体病用二丙酸咪唑苯脲兽用复方制剂及制备方法，使其用于治疗附红细胞体病，具有安全高效、成本低廉的优点。
本发明是通过以下技术方案来实现的：
本发明所涉及的附红细胞体病用二丙酸咪唑苯脲兽用复方制剂，其主要以二丙酸咪唑苯脲、黄芪提取物、氟苯尼考和青蒿琥酯为主料，配以适量的β-环糊精和辅美粉，经由称量、粉碎、搅拌、混匀、检验、计量、包装等常规方法制备而成，其组分及重量百分比为：
二丙酸咪唑苯脲5％-15％
黄芪提取物2％-5％
氟苯尼考3％-12％
青蒿琥酯5％-15％
β-环糊精25％-65％
辅美粉10％-40％
进一步优选的重量百分比：二丙酸咪唑苯脲10％，黄芪提取物3％，氟苯尼考5％，青蒿琥酯8％，β-环糊精50％，辅美粉24％。
所述黄芪提取物为豆科植物蒙古黄芪或荚膜黄芪的干燥根的提取物的市售成品，主要成分为黄芪多糖，黄酮，胆碱，甜菜碱，氨基酸，蔗糖，葡萄糖醛酸及微量的叶酸。
本发明所涉及的附红细胞体病用盐酸左旋咪唑兽用复方制剂的制备方法，包括以下步骤：
第一步，将青蒿琥酯与β-环糊精混匀；
第二步，加入二丙酸咪唑苯脲和氟苯尼考，混匀；
第三步，将黄芪提取物与辅美粉混匀；
第四步，将第二步和第三步所得溶液混合，混匀，即制成含二丙酸咪唑苯脲的复方制剂。
本发明经六个月的光照和温度加速试验，表明该制剂较稳定，颜色无变化，外观均匀，无结块；并且经实施例中感染试验证实，其治疗效果较好，杀虫率高，不仅附红细胞体的感染强度降低，且治疗后未观察到附红细胞体。
具体实施方式
下面对本发明的实施例作详细说明：本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。
实施例1
含二丙酸咪唑苯脲的兽用复方制剂，是用下述方法制成：
(1)  按重量称取二丙酸咪唑苯脲15g，黄芪提取物5g，氟苯尼考12g，青蒿琥酯15g，β-环糊精33g，辅美粉20g；
(2)将青蒿琥酯与β-环糊精混匀；
(3)加入二丙酸咪唑苯脲和氟苯尼考，混匀；
(4)将黄芪提取物与辅美粉混匀；
(5)将上述步骤(3)和步骤(4)所得溶液混合，混匀，即制成含二丙酸咪唑苯脲的复方制剂。
经上述制成的含二丙酸咪唑苯脲的复方制剂用于治疗人工感染附红细胞体的大鼠。大鼠随机分成5组，即：空白对照(1)，二丙酸咪唑苯脲(2)，贝尼尔(3)，长效土霉素(4)，复方二丙酸咪唑苯脲(5)。实验结果见表1。
表1人工感染大鼠药物治疗后感染率
感染率 空白对照(1) 二丙酸咪唑苯脲(2) 贝尼尔(3) 长效土霉素(4) 复方二丙酸咪唑苯脲(5) 组间差异
第一天第二天第三天第四天第五天第六天 99，96，9794，95，9494，95，9493，96，9488，89，9491，93，92 98，97，9765，67，6557，60，5622，22，2225，23，2217，19，16  96，97，9965，67，6047，47，4639，39，3922，23，2223，23，23  99，95，9969，68，6564，64，6218，16，1922，24，2311，10，12 99，99，968，12，114，4，21，0，20，0，00，0，0 1a2a3a4a5a1A2Ba3Bb4Bb5C1A2B3C4D5E1A2B3C4D5E1A2Ba3Bb4Bb5C1A2B3B4C5D
第七天第八天第九天 93，91，9193，94，9392，96，95   18，16，2218，18，1716，14，18   17，18，2223，24，2114，11，14   23，24，2316，17，1713，14，14     0，0，00，0，00，0，0     1A2B3B4C5D1A2B3C4B5D1A2Ba3Bb4C5D
注：大写字母不同表示差异极显著；小写字母不同表示差异显著。
本实施例结果经统计分析，整个实验周期，二丙酸咪唑苯脲组，长效土霉素组及贝尼尔组与空白对照组差异显著P＜0.05，尤其是复方盐酸左旋咪唑组差异极显著P＜0.01。
结论：结果表明含二丙酸咪唑苯脲的兽用复方制剂疗效显著，适用于附红细胞体病的治疗。
实施例2
含二丙酸咪唑苯脲的兽用复方制剂，是用下述方法制成：
(1)按重量称取二丙酸咪唑苯脲5g，黄芪提取物2g，氟苯尼考3g，青蒿琥酯5g，β-环糊精65g，辅美粉20g；
(2)将青蒿琥酯与β-环糊精混匀；
(3)加入二丙酸咪唑苯脲和氟苯尼考，混匀；
(4)将黄芪提取物与辅美粉混匀；
(5)将上述步骤(3)和步骤(4)所得溶液混合，混匀，即制成含二丙酸咪唑苯脲的复方制剂。
经上述制成的含二丙酸咪唑苯脲的复方制剂用于抗附红细胞体体外药敏实验。实施如下：无菌采抗凝血，1∶7加入营养液RPMI-1640，各孔加入配置好的药物母液，轻轻震荡摇匀后将96孔板置37℃，5％CO2培养箱中培养。分别在6h、9h、20h，24h和30h时鲜血压滴标本法观察其感染率。
结果见表2-6。
表2 6h时的平均感染率
药物 感染率 差异显著性分析
50μg/mL(I) 100μg/mL(II) 500μg/mL(III)
空白对照1二丙酸咪唑苯脲2 99，99，9899，95，100 99，99，9996，98，97 97，99，9812，11，8 I aIIaIIIaI AIIAIIIB
贝尼尔3   99，97，97   48，55，54   8，10，9   I AIIBIIIC
长效土霉素4   98，100，99   98，98，97   50，50，49   I AaIIAbIIIB
复方二丙酸咪唑苯脲5 99，100，98 30，32，31 0，0，0 I AIIBIIIC
差异显著性分析   1a2a3a4a5a   1A2A3B4A5C   1A2B3B4C5D   ---
注：大写字母不同表示差异极显著；小写字母不同表示差异显著。
表3 9h时的平均感染率
药物     感染率 浓度显著性分析
    50μg/mL(I)     100μg/mL(II)     500μg/mL(III)
空白对照1     99，98，99     98，99，99     98，99，99   I aIIaIIIa
二丙酸咪唑苯脲2     98，99，99     29，28，32     5，5，4   I AIIBIIIC
贝尼尔3     99，96，97     31，33，29     9，8，8   I AIIBIIIC
长效土霉素4     100，99，100     97，98，99     29，33，27   I AIIAIIIB
复方二丙酸咪唑苯脲5 99，97，98 16，16，16 0，0，0 I AIIBIIIC
药物显著性分析     1a2a3b4a5ab     1A2B3B4A5C     1A2B3C4D5E   ---
注：大写字母不同表示差异极显著；小写字母不同表示差异显著。
表4 20h时的平均感染率
药物     感染率 浓度显著性分析
    50μg/mL(I)     100μg/mL(II)     500μg/mL(III)
空白对照1     100，99，99     98，99，100     98，98，99   I aIIaIIIa
二丙酸咪唑苯脲2     98，99，97     22，21，22     4，4，2   I AIIBIIIC
贝尼尔3     99，97，98     22，25，26     1，5，3   I AIIBIIIC
长效土霉素4     98，99，100     98，97，97     7，7，7   I AIIAIIIB
复方二丙酸咪唑苯脲5 99，100，98 10，12，13 0，0，0 I AIIBIIIC
药物显著性分析     1ab2ab3a4b5ab     1A2B3C4A5D     1A2Ba3Ba4C5Bb   ---
注：大写字母不同表示差异极显著；小写字母不同表示差异显著。
表5 24h时的平均感染率
药物     感染率 浓度显著性分析
    50μg/mL(I) 100μg/mL(II) 500μg/mL(III)
空白对照1     99，99，98     99，99，99     97，99，98   I aIIaIIIa
二丙酸咪唑苯脲2     99，99，99     20，18，17     4，5，3   I AIIBIIIC
贝尼尔3     99，99，98     11，12，12     4，5，5   I AIIBIIIC
长效土霉素4     100，99，100     76，78，80     10，12，8   I AIIBIIIC
复方二丙酸咪唑苯脲5 99，100，99 6，5，7 0，0，0 I AIIBIIIC
药物显著性分析     1a2ab3a4b5ab     1A2B3B4C5D     1A2B3B4C5D   ---
注：大写字母不同表示差异极显著；小写字母不同表示差异显著。
表6 30h时的平均感染率
药物     感染率50μg/mL 浓度显著性分析
    (I)     100μg/mL(II)     500μg/mL(III)
空白对照1     100，99，99     98，99，100     98，98，99   I aIIaIIIa
二丙酸咪唑苯脲2     99，100，99     3，5，1     3，4，2   I AIIBIIIB
贝尼尔3     99，99，98     3，2，1     4，5，5   I AIIBIIIC
长效土霉素4     100，99，100     40，36，43     8，10，8   I AIIBIIIC
复方二丙酸咪唑苯脲5 99，100，99 3，5，3 0，0，0 I AIIBIIIC
药物显著性分析     1a2a3a4a5a     1A2B3B4C5B     1A2B3B4C5B   ---
注：大写字母不同表示差异极显著；小写字母不同表示差异显著。
实施例3
含二丙酸咪唑苯脲的兽用复方制剂，是用下述方法制成：
(1)按重量称取二丙酸咪唑苯脲8g，黄芪提取物4g，氟苯尼考6g，青蒿琥酯6g，β-环糊精50g，辅美粉26g；
(2)将青蒿琥酯与β-环糊精混匀；
(3)加入二丙酸咪唑苯脲和氟苯尼考，混匀；
(4)将黄芪提取物与辅美粉混匀；
(5)将上述步骤(3)和步骤(4)所得溶液混合，混匀，即制成含二丙酸咪唑苯脲的复方制剂。
经上述制成的含二丙酸咪唑苯脲的复方制剂用于治疗人工感染附红细胞体的试验用小型猪。试验用小型猪随机分成5组，即：空白对照(1)，二丙酸咪唑苯脲(2)，贝尼尔(3)，长效土霉素(4)，复方二丙酸咪唑苯脲(5)。实验结果见表7。
表7人工感染试验用小型猪药物治疗后感染率
感染率 空白对照(1) 二丙酸咪唑苯脲(2) 贝尼尔(3) 长效土霉素(4)     复方二丙酸咪唑苯脲(5) 组间差异
第一天第二天第三天第四天第五天第六天第七天第八天第九天  95，96，9794，93，9493，95，9493，92，9487，89，9491，93，9092，90，9393，95，9590，94，96 98，94，9766，67，6857，62，5623，23，2217，18，1825，26，2018，16，2216，18，1716，14，18  98，97，9165，67，6047，47，4639，39，3922，22，2224，23，2218，18，2023，24，2114，13，12  99，95，9964，64，6266，67，6718，18，1922，24，2311，10，1213，14，1417，17，1723，24，23     99，92，969，12，84，4，21，0，00，1，00，0，00，0，00，0，00，0，0     1a2a3a4a5a1A2Ba3Bb4Bb5C1A2B3C4D5E1A2B3C4D5E1A2Ba3Bb4Bb5C1A2B3B4C5D1A2B3B4C5D1A2B3C4B5D1A2Ba3Bb4C5D

Claims (8)

1.一种附红细胞体病用二丙酸咪唑苯脲兽用复方制剂，其特征在于，组分及重量百分比为：二丙酸咪唑苯脲5％-15％，黄芪提取物2％-5％，氟苯尼考3％-12％，青蒿琥酯5％-15％，β-环糊精25％-65％，辅美粉10％-40％。
2.根据权利要求1所述的附红细胞体病用二丙酸咪唑苯脲兽用复方制剂，其特征是，所述二丙酸咪唑苯脲重量百分比为10％。
3.根据权利要求1所述的附红细胞体病用二丙酸咪唑苯脲兽用复方制剂，其特征是，所述黄芪提取物重量百分比为3％。
4.根据权利要求1所述的附红细胞体病用二丙酸咪唑苯脲兽用复方制剂，其特征是，所述氟苯尼考重量百分比为5％。
5.根据权利要求1所述的附红细胞体病用二丙酸咪唑苯脲兽用复方制剂，其特征是，所述青蒿琥酯重量百分比为8％。
6.根据权利要求1或2所述的附红细胞体病用二丙酸咪唑苯脲兽用复方制剂，其特征是，所述β-环糊精重量百分比为50％。
7.根据权利要求1或2所述的附红细胞体病用二丙酸咪唑苯脲兽用复方制剂，其特征是，所述辅美粉重量百分比为24％。
8.一种如权利要求1所述的附红细胞体病用二丙酸咪唑苯脲兽用复方制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
第一步，将青蒿琥酯与β-环糊精混匀；
第二步，加入二丙酸咪唑苯脲和氟苯尼考，混匀；
第三步，将黄芪提取物与辅美粉混匀；
第四步，将第二步和第三步所得溶液混合，混匀，即制成含二丙酸咪唑苯脲的复方制剂。
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