CN101204131A - 褐环粘盖牛肝菌人工栽培方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于食用真菌的栽培技术领域,尤其涉及褐环粘盖牛肝菌圃地的人工栽培方法。褐环粘盖牛肝菌人工栽培方法,包括以下的步骤:菌种分离培养;菌种扩繁;无菌苗培育;菌根苗培育以及栽培出菇。本发明采用合成的褐环粘盖牛肝菌湿地松菌根苗采用10-50厘米间距密植于经过消毒的圃地,实现人工栽培,达到褐环粘盖牛肝菌产业化生产的目的,生产得到的褐环粘盖牛肝菌与天然褐环粘盖牛肝菌的形态特征一致。
Description
技术领域
本发明属于食用真菌的栽培技术领域,尤其涉及褐环粘盖牛肝菌圃地的人工栽培方法。
背景技术
褐环粘盖牛肝菌[Suillus luteus(L:Fr)Gray]是一种优良的菌根食用菌,在国内广泛分布,是一种重要的野生商品蘑菇,也是出口的野生牛肝菌之一,目前褐环粘盖牛肝菌的商品全部靠野生采集,尚无成功的人工栽培方法。
所见报道有陈连庆、裴致达对褐环粘盖牛肝菌的生物学特性和液体培养条件进行了研究,证明它是我国亚热带地区特有树种马尾松共生的优良菌根真菌(《林业科学研究》1998,11(4):443-446)。目前人们没有找到一种适合的褐环粘盖牛肝菌人工栽培方法,因此也无法实现产业化生产褐环粘盖牛肝菌。
发明内容
为了实现褐环粘盖牛肝菌人工栽培,本发明的目的是提供一种褐环粘盖牛肝菌人工栽培方法,实现了褐环粘盖牛肝菌产业化的人工栽培方法。
为了实现上述的目的,本发明采用了以下的技术方案:
褐环粘盖牛肝菌人工栽培方法,包括以下的步骤:
A、菌种分离培养:采集的新鲜子实体,切取菌肉带部分菌管组织块,接入母种培养基内,进行培养;
B、菌种扩繁:将上述的培养的母种,接入置有扩繁培养基的容器内培养,先静止培养,待接入的母种块萌发后,开始震荡培养至容器内有大量棕褐色菌球;
C、无菌苗培育:选新鲜湿地松饱满种子在水中浸泡,沥干后经消毒处理,然后将种子催芽,待露白后,播入经灭菌的无菌苗培养基质,培养得到无菌苗;
D、菌根苗培育以及栽培出菇:将扩繁获得的菌球打碎成菌浆,将培育的无菌苗进行蘸菌浆后重新栽培,培育成菌根苗,然后将菌根苗密植在经消毒的苗圃地,培养出菇;或者将蘸菌浆后的无菌苗直接密植在经消毒的苗圃地,培养出菇。
作为优选,上述的步骤A中母种培养的温度为20~28℃,时间为25~30天。
作为再优选,上述的母种培养基每1000毫升水中包括以下重量份数的成份:
马铃薯 80~150g 葡萄糖 10~20g
磷酸二氢铵 0.5~2g 磷酸二氢钾 0.5~1.5g
硫酸镁 0.5~1g 松根150~300g煮后的过滤液
琼脂 10~30g。
作为最优选,上述的母种培养基每1000毫升水中包括以下重量份数的成份:
马铃薯 100g 葡萄糖 10g
磷酸二氢铵 1g 磷酸二氢钾 0.5~1.5g
硫酸镁 0.5~1g 松根200g煮后的过滤液
琼脂 20g。
作为优选,上述的步骤B中容器采用三角烧瓶,用化纤棉塞封口,外加牛皮纸,置常规灭菌,冷却后接入母种,培养温度为20~22℃,静止培养2~4天,震荡培养,转速为100~140转/分,培养20~30天。
作为再优选,上述的步骤B中扩繁培养基每1000毫升水中包括以下重量份数的成份:
磷酸二氢钾 0.5~2g 硫酸镁0.1~1g
磷酸二氢铵 0.5~2g 葡萄糖5~30g
淀粉 2~20g。
作为最优选,上述的步骤B中扩繁培养基每1000毫升水中包括以下重量份数的成份:
磷酸二氢钾 1g 硫酸镁0.5g
磷酸二氢铵 1g 葡萄糖10g
淀粉 5g。
作为优选,上述的步骤C中新鲜湿地松饱满种子浸泡温度为20~25℃,浸泡时间12~15小时,无菌苗的培养时间为1~1.5个月。
作为再优选,上述的无菌苗基质配方包括蛭石、泥炭、沙,配比为1∶0.5~1.5∶0.1~0.3。作为最优选,上述的蛭石、泥炭、沙的配比为1∶1∶0.2。
本发明提供得褐环粘盖牛肝菌人工栽培方法:菌种分离培养——菌种扩繁——无菌苗培育——菌根苗培育密植——栽培出菇。与现有其他菇类人工栽培技术路线相比完全不同,本发明采用合成的褐环粘盖牛肝菌湿地松菌根苗采用10-50厘米间距密植于经过消毒的圃地,实现人工栽培,达到褐环粘盖牛肝菌产业化生产的目的,生产得到的褐环粘盖牛肝菌与天然褐环粘盖牛肝菌的形态特征一致。
附图说明
图1为本发明的褐环粘盖牛肝菌人工栽培方法顺序简图。
具体实施方式
下面结合附图1按时间顺序对本发明的具体实施方式做一个详细的说明。
2001年12月21日,采集到褐环粘盖牛肝菌子实体,经消毒,采用组织分离方法获得,取菌盖与菌肉带部分菌管组织,置入母种培养基试管中,于25℃温度下培养25~30天获得。母种培养基采用每1000毫升水中包括以下重量份数的成份:马铃薯100g、葡萄糖10g、磷酸二氢铵1g、磷酸二氢钾0.5~1.5g、硫酸镁0.5~1g、松根200g煮后的过滤液、琼脂20g。
2005年3月18日,采用磷酸二氢钾1g,硫酸镁0.5g,磷酸二氢铵1g,葡萄糖10g,淀粉5g,水1000毫升。配方,配制后用1000毫升三角烧瓶装培养基800毫升,用化纤棉塞封口,外加牛皮纸,置高压锅内常规灭菌,冷却后接入母种,置回旋式震荡培养机培养。培养温度为20~22℃,先静止培养3天,待接入的母种块萌发后,开始震荡培养,转速为120转/分。培养30天,瓶内有大量棕褐色菌球,培养液颜色为橙黄色,透明,拔开棉塞有牛肝菌特有的菇香味。每瓶过滤后得菌球约100毫升。
2005年3月18日,配无菌苗培育基质,蛭石、泥炭、沙配比为1∶1∶0.2,调水灭菌后倒入泡沫箱。2005年3月21日,取湿地松种子个1000克用0.1%升汞水浸泡2分钟,然后用无菌水浸洗5次,混于湿沙中保湿保温催芽,3月24日播于基质中,培养得到无菌苗。
2005年4月26日用过滤后得菌球打碎成菌浆,将培育的无菌苗进行蘸菌浆接种后重新栽培原位进行管理,管理方法同一般湿地松苗。
栽培方法一:2005年12月31日将培育的无菌苗经检查有白色菌根菌丝的菌根苗按10×10和10×50厘米间距移栽于经消毒的苗圃地。
栽培方法二:2005年5月10日将蘸褐环粘盖牛肝菌菌浆后的无菌苗10×10厘米和10×50厘米直接移植经消毒的苗圃地。
2006年12月21日发现栽培方法一和方法二均有褐环粘盖牛肝菌子实体从松苗丛中长出。12月25日有较多量的褐环粘盖牛肝菌子实体发生,到2007年2月27日出数量相当多的第二批,4月份仍有少量的子实体发生,子实体鲜重100-280g/m2。所得褐环粘盖牛肝菌子实体形态特征:菌盖扁半球形至近扁平,直径3~12cm,湿时粘滑,淡黄色或黄褐色,干后有光泽。菌肉淡黄色,受伤后不变色。菌管鲜黄色,管口三角形,直生或延生,不易分离。菌柄近柱形,淡黄褐色,长1.5~7cm,全柄略等粗或下部稍粗,直径0.9~2.4cm,实心,菌柄上部常具小腺点。菌环在菌柄上部,易脱落,孢子印淡黄褐色至黄褐色,圆形至椭圆形8~10×3.5~5。上述形态特征与野生褐环粘盖牛肝菌一致。子实体根部菌丝与树根联结紧密,说明培养成功。
Claims (10)
1.褐环粘盖牛肝菌人工栽培方法,其特征在于包括以下的步骤:
A、菌种分离培养:采集的新鲜子实体,切取菌肉带部分菌管组织块,接入母种培养基内,进行培养;
B、菌种扩繁:将上述的培养的母种,接入置有扩繁培养基的容器内培养,先静止培养,待接入的母种块萌发后,开始震荡培养至容器内有大量棕褐色菌球;
C、无菌苗培育:选新鲜湿地松饱满种子在水中浸泡,沥干后经消毒处理,然后将种子催芽,待露白后,播入经灭菌的无菌苗培养基质,培养得到无菌苗;
D、菌根苗培育以及栽培出菇:将扩繁获得的菌球打碎成菌浆,将培育的无菌苗进行蘸菌浆后重新栽培,培育成菌根苗,然后将菌根苗密植在经消毒处理的苗圃地,培养出菇;或者将蘸菌浆后的无菌苗直接密植在经消毒的苗圃地,培养出菇。
2.根据权利要求1所述的褐环粘盖牛肝菌人工栽培方法,其特征在于步骤A中母种培养的温度为20~28℃,时间为25~30天。
3.根据权利要求1或2所述的褐环粘盖牛肝菌人工栽培方法,其特征在于母种培养基每1000毫升水中包括以下重量份数的成份:
马铃薯 80~150g 葡萄糖 10~20g
磷酸二氢铵 0.5~2g 磷酸二氢钾 0.5~1.5g
硫酸镁 0.5~1g 松根150~300g煮后的过滤液
琼脂 10~30g。
4.根据权利要求3所述的褐环粘盖牛肝菌人工栽培方法,其特征在于母种培养基每1000毫升水中包括以下重量份数的成份:
马铃薯 100g 葡萄糖10g
磷酸二氢铵 1g 磷酸二氢钾0.5~1.5g
硫酸镁 0.5~1g 松根200g煮后的过滤液
琼脂 20g。
5.根据权利要求1所述的褐环粘盖牛肝菌人工栽培方法,其特征在于步骤B中容器采用三角烧瓶,用化纤棉塞封口,外加牛皮纸,置常规灭菌,冷却后接入母种,培养温度为20~22℃,静止培养2~4天,震荡培养,转速为100~140转/分,培养20~30天。
6.根据权利要求1或5所述的褐环粘盖牛肝菌人工栽培方法,其特征在于步骤B中扩繁培养基每1000毫升水中包括以下重量份数的成份:
磷酸二氢钾 0.5~2g 硫酸镁 0.1~1g
磷酸二氢铵 0.5~2g 葡萄糖 5~30g
淀粉 2~20g。
7.根据权利要求6所述的褐环粘盖牛肝菌人工栽培方法,其特征在于步骤B中扩繁培养基每1000毫升水中包括以下重量份数的成份:
磷酸二氢钾 1g 硫酸镁0.5g
磷酸二氢铵 1g 葡萄糖10g
淀粉 5g。
8.根据权利要求1所述的褐环粘盖牛肝菌人工栽培方法,其特征在于步骤C中新鲜湿地松饱满种子浸泡温度为20~25℃,浸泡时间12~15小时,无菌苗的培养时间为1~1.5个月。
9.根据权利要求1或7所述的褐环粘盖牛肝菌人工栽培方法,其特征在于无菌苗基质配方包括蛭石、泥炭、沙,配比为1∶0.5~1.5∶0.1~0.3。
10.根据权利要求9所述的褐环粘盖牛肝菌人工栽培方法,其特征在于蛭石、泥炭、沙的配比为1∶1∶0.2。
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