CN101173274A - 一种细菌和血液的基因组dna提取试剂盒 - Google Patents

一种细菌和血液的基因组dna提取试剂盒 Download PDF

Info

Publication number
CN101173274A
CN101173274A CNA2006101501582A CN200610150158A CN101173274A CN 101173274 A CN101173274 A CN 101173274A CN A2006101501582 A CNA2006101501582 A CN A2006101501582A CN 200610150158 A CN200610150158 A CN 200610150158A CN 101173274 A CN101173274 A CN 101173274A
Authority
CN
China
Prior art keywords
washing buffer
blood
bacterium
genomic dna
kit
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CNA2006101501582A
Other languages
English (en)
Inventor
张伟
周巍
陈珊珊
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Individual
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Priority to CNA2006101501582A priority Critical patent/CN101173274A/zh
Publication of CN101173274A publication Critical patent/CN101173274A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Landscapes

  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明的目的是，提供一种分子生物学中基因组DNA提取方法，特别涉及利用膜法和洗脱液Washing buffer I和Washing buffer II处理提取细菌和血液的基因组DNA提取方法。本试剂盒是用于细菌和血液的基因组DNA纯化试剂盒。试剂盒是依据细菌菌液的特殊性质和血液的特殊性质，采用了膜裂解技术，无需预先去除蛋白质、多糖、脂质、红细胞、蛋白质、血红素等杂质，通过Washing buffer I和Washing buffer II的洗脱作用将纯化后的基因组DNA吸附在膜片上。本试剂盒具有高效、快速、简洁的特点，整个操作过程只需45分钟。此基因组DNA可用于PCR反应、RAPD、AFLP、RFLP分析等各种分子生物学试验以及细菌和血液的基因组DNA的贮存。

Description

一种细菌和血液的基因组DNA提取试剂盒
技术领域
本发明涉及分子生物学中一种基因组DNA提取方法，特别涉及利用膜法和洗脱液处理提取细菌和血液的基因组DNA提取方法。
背景技术
目前，细菌和血液的基因组DNA提取方法多种多样，大部分提取方法都是通过试剂处理，一些也通过膜和其它一些辅助材料来实现。
试剂的提取方法具有一定的优点，原理简单，方便实用，但针对性较差。
膜法和其它辅助材料具有针对性强，提取效果好等有点，但一般价格较高，操作较繁琐。
而将试剂和膜结合起来处理样品具有两者的优点，效果好、针对性强、方便实用。
发明内容
本发明的目的是，提供一种分子生物学中基因组DNA提取方法，特别涉及利用膜法和洗脱液Washing buffer I和Washing buffer II处理提取细菌和血液的基因组DNA提取方法。本试剂盒是用于细菌和血液的基因组DNA纯化试剂盒。试剂盒是依据细菌菌液的特殊性质和血液的特殊性质，采用了膜裂解技术，无需预先去除蛋白质、多糖、脂质、红细胞、蛋白质、血红素等杂质，通过Washing buffer I和Washing buffer II的洗脱作用将纯化后的基因组DNA吸附在膜片上。本试剂盒具有高效、快速、简洁的特点，整个操作过程只需45分钟。此基因组DNA可用于PCR反应、RAPD、AFLP、RFLP分析等各种分子生物学试验以及细菌和血液的基因组DNA的贮存。
整个试剂盒的操作过程包括以下步骤：将增菌后的菌液样品和血液样品取300ul加入到灭菌管中的提取膜片上，在无菌条件下静置，将管中的菌液样品和血液吸净，只留下提取膜片，干燥，在管中用Washing buffer I洗脱提取膜片，反复吹吸提取膜片，将Washing bufferI吸净，再重复操作，干燥，用Washing bufferII洗脱提取膜片，反复吹吸提取膜片，将Washing buffer II吸净，再重复操作，干燥，此干燥的提取膜片直接加入到预先加好的PCR体系中，即可用于基因组DNA可用于PCR反应、RAPD、AFLP、RFLP分析等各种分子生物学试验以及细菌和血液的基因组DNA的贮存。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明做进一步说明。
实施例1
1.将增菌后的菌液样品取300ul加入到Eppendorf管中的提取膜片上，保证膜片处于菌液样品中。
2.在无菌条件下静置10分钟。
3.将Eppendorf管中的菌液样品吸净，只留下提取膜片，用移液枪将提取膜片贴在Eppendorf管壁上，放入干燥箱内56℃干燥10分钟。
4.在Eppendorf管中用200ul Washing buffer I洗脱提取膜片，需反复吹吸(约20次)提取膜片，将Washing buffer I吸净。
5.再重复操作步骤4一次。
6.用移液枪将提取膜片贴在Eppendorf管壁上，放入干燥箱内56℃干燥10分钟。
7.用200ul Washing buffer II洗脱提取膜片，需反复吹吸(约20次)提取膜片，将Washingbuffer II吸净。
8.再重复操作步骤7一次。
9.用移液枪将提取膜片贴在Eppendorf管壁上，放入干燥箱内56℃干燥10分钟。
10.此干燥的提取膜片直接加入到预先加好的PCR体系中，即可用于基因组DNA可用于PCR反应、RAPD、AFLP、RFLP分析等各种分子生物学试验以及细菌菌液中基因组DNA的贮存。
实施例2
1.将保存的血液样品取100ul加入到Eppendorf管中的提取膜片上，保证膜片处于血液样品中。
2.在无菌条件下静置5分钟。
3.将Eppendorf管中的血液样品吸净，只留下提取膜片，用移液枪将提取膜片贴在Eppendorf管壁上，放入干燥箱内56℃干燥10分钟。
4.在Eppendorf管中用200ul Washing buffer I洗脱提取膜片，需反复吹吸(约20次)提取膜片，将Washing buffer I吸净。
5.再重复操作步骤4两次。
6.用200ul Washing bufferII洗脱提取膜片，需反复吹吸(约20次)提取膜片，将WashingbufferII吸净。
7.再重复操作步骤6一次。
8.用移液枪将提取膜片贴在Eppendorf管壁上，放入干燥箱内56℃干燥10分钟。
9.此干燥的提取膜片直接加入到预先加好的PCR体系中，即可用于基因组DNA可用于PCR反应、RAPD、AFLP、RFLP分析等各种分子生物学试验以及血液中基因组DNA的贮存。

Claims (4)

1.本发明的目的是，提供一种分子生物学中基因组DNA提取方法，特别涉及利用膜法和洗脱液Washing buffer I和Washing buffer II处理提取细菌和血液的基因组DNA提取方法。本试剂盒是用于细菌和血液的基因组DNA纯化试剂盒。试剂盒是依据细菌菌液的特殊性质和血液的特殊性质，采用了膜裂解技术，无需预先去除蛋白质、多糖、脂质、红细胞、蛋白质、血红素等杂质，通过Washing buffer I和Washing buffer II的洗脱作用将纯化后的基因组DNA吸附在膜片上。本试剂盒具有高效、快速、简洁的特点，整个操作过程只需45分钟。此基因组DNA可用于PCR反应、RAPD、AFLP、RFLP分析等各种分子生物学试验以及细菌和血液中的基因组DNA的贮存。
2.根据权利要求1所述的利用膜法和洗脱液Washing buffer I和Washing buffer II处理提取细菌和血液的基因组DNA提取试剂盒，其特征在于，其中所述的Washing buffer I配方为：Tris 2g～3g；Hcl 0.5～1.0ml；定容至100ml。
3.根据权利要求1或2所述的利用膜法和洗脱液Washing buffer I和Washing bufferII处理提取细菌和血液的基因组DNA提取试剂盒，其特征在于，其中所述的Washing bufferII配方为：1M Tris-Hcl 100～200ml；0.5M EDTA 20～40ml；定容至1L。
4.根据权利要求1～3任意一项所述的利用膜法和洗脱液Washing buffer I和Washingbuffer II处理提取细菌和血液的基因组DNA提取试剂盒，Washing buffer I、Washing bufferII和膜的结合使用，其特征在于，其中所述的Washing buffer I、Washing buffer II和膜，三者结合使用可以直接提取血液和细菌的基因组DNA。
CNA2006101501582A 2006-10-30 2006-10-30 一种细菌和血液的基因组dna提取试剂盒 Pending CN101173274A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNA2006101501582A CN101173274A (zh) 2006-10-30 2006-10-30 一种细菌和血液的基因组dna提取试剂盒

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNA2006101501582A CN101173274A (zh) 2006-10-30 2006-10-30 一种细菌和血液的基因组dna提取试剂盒

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN101173274A true CN101173274A (zh) 2008-05-07

Family

ID=39422026

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNA2006101501582A Pending CN101173274A (zh) 2006-10-30 2006-10-30 一种细菌和血液的基因组dna提取试剂盒

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN101173274A (zh)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101792756A (zh) * 2010-03-19 2010-08-04 天根生化科技（北京）有限公司 一种提取基因组脱氧核糖核酸的方法
CN102321613A (zh) * 2011-09-05 2012-01-18 吴剑 一种凝血基因组dna的提取方法
CN102836698A (zh) * 2012-09-11 2012-12-26 西安交通大学口腔医院 用于dna和rna分离纯化回收的核酸吸附材料的制备方法
CN102864139A (zh) * 2012-09-11 2013-01-09 西安交通大学口腔医院 一种用于组织细胞基因组dna的核酸吸附快速分离方法

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101792756A (zh) * 2010-03-19 2010-08-04 天根生化科技（北京）有限公司 一种提取基因组脱氧核糖核酸的方法
CN102321613A (zh) * 2011-09-05 2012-01-18 吴剑 一种凝血基因组dna的提取方法
CN102321613B (zh) * 2011-09-05 2013-03-06 吴剑 一种从凝血块中提取基因组dna的方法
CN102836698A (zh) * 2012-09-11 2012-12-26 西安交通大学口腔医院 用于dna和rna分离纯化回收的核酸吸附材料的制备方法
CN102864139A (zh) * 2012-09-11 2013-01-09 西安交通大学口腔医院 一种用于组织细胞基因组dna的核酸吸附快速分离方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6392857B2 (ja) 核酸サンプルを回収するためのシステム及び方法
CN109722431B (zh) 一种基于磁珠法的无醇病毒核酸提取试剂盒
CN101115833B (zh) 分离核酸的方法，该核酸在提高的温度下固定于基质上
US9012614B2 (en) Rapid nucleic acid purification using paper chromatography
CN110923228A (zh) 一种磁珠法核酸纯化的结合液、试剂盒、方法及应用
CN102604935B (zh) 一种安全快速从血液中提取基因组dna的方法
CN111057705B (zh) 一种提取游离核酸的试剂盒及使用方法
CN101173274A (zh) 一种细菌和血液的基因组dna提取试剂盒
CN106591297A (zh) 一种磁珠法核酸提取方法
CN107841498B (zh) 一种鸡全血简便快速dna提取方法
JP2007525982A5 (zh)
CN114107289A (zh) 粪便样本的核酸提取试剂盒、制备方法及提取方法
CN108410861A (zh) 一种皮张中古dna的提取方法及试剂盒
CN107502605A (zh) 一种石蜡包埋组织基因组dna快速提取方法
CN107893070B (zh) 磁笔式单人份核酸提取试剂盒及其使用方法
CN110628762A (zh) 一种基于纳米磁珠的核酸提取方法及应用
CN111808721B (zh) 一种核酸提取芯片及采用其快速提取血液dna的方法
CN103820434A (zh) 一种真菌菌丝总dna的提取方法
CN102229927B (zh) 提高案件微量检材脱落细胞dna提取效率的方法及试剂
CN103509786A (zh) 一种昆虫干标本基因组提取方法及其应用
CN106987587A (zh) 一种用于荧光定量pcr检测的快速提取核酸方法
CN113621606B (zh) 一种提取血浆游离dna的试剂盒和方法
US9809794B2 (en) Materials and methods for achieving differential lysis of mixtures with the aid of alkaline lysis and pressure cycling technology (PCT)
CN110669759A (zh) 一种适用于纳米孔测序的真菌高纯度长片段基因组dna提取方法
CN221028351U (zh) 一种核酸提取和pcr体系构建装置

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C02 Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001)
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Open date: 20080507