发明内容
本发明的一个目的在于公开一种制备脑多肽提取物的方法;本发明的另一个目的在于公开一种含有上述提取物的牛奶及其制备方法。
本发明目的是通过如下技术方案实现的:
本发明肽乳的原料组成为:
牛奶100体积份 脑多肽提取物0.1-2体积份。
本发明肽乳的原料组成优选为:
牛奶100体积份 脑多肽提取物0.5体积份。
本发明肽乳的原料组成优选为:
牛奶100体积份 脑多肽提取物0.25体积份。
本发明肽乳的原料组成优选为:
牛奶100体积份 脑多肽提取物1.5体积份。
其中脑多肽提取物的制备方法如下:
收集胎牛脑组织;将新鲜或冷冻的胎牛脑组织在室温下用超纯水洗净;加入3~5倍体积无菌超纯水,制成匀浆;加入3~8倍体积的无菌超纯水,混匀,置-10℃~-30℃反复冻融2~3次;将冻融的匀浆在温度4~8℃下,以每分钟8000转离心10~30分钟,去除沉淀;用切向流超滤设备截留上清液,取分子量<30000道尔顿的脑多肽提取物;除菌过滤,即得。
其中脑多肽提取物的制备方法优选为:
收集胎牛脑组织;将新鲜或冷冻的胎牛脑组织在室温下用超纯水洗净;加入3~5倍体积无菌超纯水,制成匀浆;加入5倍体积的无菌超纯水,混匀,置-20℃反复冻融2~3次;将冻融的匀浆在温度4~8℃下,以每分钟8000转离心20分钟,去除沉淀;用切向流超滤设备截留上清液,取分子量<30000道尔顿的脑多肽提取物;除菌过滤,即得。
脑多肽提取物中分子量低于60道尔顿的多肽含量为22.6~24.0%,60~150道尔顿的多肽含量为19.1%~22.2%,150~270道尔顿的多肽含量为35.0%~37.1%,270~460道尔顿的多肽含量为4.7%~5.0%,460~4500道尔顿的多肽含量为2.0%~2.3%,4500~30000道尔顿的多肽含量为11.1~13.5%。
按常规方法将上述脑多肽提取物加入到鲜奶中,制成肽乳。
本发明肽乳是一种健康、安全并具有一定医疗作用的新型功能性食品。本发明以胎牛脑组织为原料,提取其中有效成分(脑多肽提取物)加入到牛奶中,制备成肽乳,并采用有效的功能学测定方法对其增强智力、刺激干细胞和淋巴细胞增殖等功能加以评价。在市场上有很好的应用前景,将为人类的保健事业做出贡献。
下面实验例和实施例用于进一步说明但不限于本发明。
实验例1 本发明所述脑多肽提取物对干细胞和淋巴细胞的增殖作用实验,试验结果如表1,脑多肽提取物1∶100、1∶200、1∶400、1∶800、1∶1600五个稀释浓度组的淋巴细胞增殖率均显著高于空白组。
表1 脑多肽提取物对淋巴细胞增殖活力的影响(体外)
稀释倍数 |
OD值 |
增殖率 |
1∶100稀释1∶200稀释1∶400稀释1∶800稀释1∶1600稀释空白 |
1.256±0.0751,21.115±0.0781,21.268±0.121,21.078±0.0241,21.020±0.0691,20.847±0.036 |
48.2%31.6%49.7%27.3%20.4%- |
注:1.P<0.05,与空白组相比,差异有统计学意义,即脑多肽提取物对淋巴细胞有增殖作用;2.P>0.05,不同稀释浓度之间差异无统计学意义。
实验例2 肽乳功能鉴定实验的过程及结果
SPF级昆明小鼠90只,4~6周龄,雌雄各半,随机分为3组,每组30只;A组给予肽乳0.5ml/天灌胃;B组给予纯牛奶0.5ml/天灌胃,C组给予生理盐水0.5ml/天灌胃;在灌胃30天后,通过Morris水迷宫试验对其增智功能进行评价,将小鼠面朝池壁不同象限轻轻放入水中,记录鼠从入水至找到平台的游泳路线的长度及找到平台的时间,每次允许小鼠游泳时间90s,如果爬上平台,让鼠在平台上停留10s,再进行下一个测试,试验结果如表2。
表2 肽乳对小鼠空间记忆能力的影响
组别 |
第一天持续时间(s) |
第二天持续时间(s) |
第三天持续时间(s) |
第四天持续时间(s) |
第五天持续时间(s) |
A组B组C组 |
53.8±11.94155.75±18.15161.99±16.12 |
31.94±12.9842.46±17.1762.03±16.97 |
30.31±5.0443.09±17.7955.74±10.97 |
26.42±4.9940.35±16.7559.02±18.33 |
22.54±7.072,341.81±16.89449.65±8.45 |
注:1.BC组:P>0.05,纯牛奶组与生理盐水组相比,差异无统计学意义,说明纯牛奶与生理盐水对小鼠空间记忆力的影响无差别;2.AB组:P<0.05,肽乳组与纯牛奶组相比,差异有统计学意义,说明肽乳与纯牛奶对小鼠空间记忆力的影响有差别;3.AC组:P<0.05,肽乳组与生理盐水组相比,差异有统计学意义,说明肽乳与生理盐水对小鼠空间记忆力的影响有差别。
下述实施例均能实现上述实验例的效果。
具体实施方式
实施例1:
收集胎牛脑组织;将新鲜或冷冻的胎牛脑组织在室温下用超纯水洗净;加入4倍体积无菌超纯水,制成匀浆;加入5倍体积的无菌超纯水,混匀,置-20℃反复冻融2次;将冻融的匀浆在温度4~8℃下,以每分钟8000转离心20分钟,去除沉淀;用切向流超滤设备截留上清液,取分子量<30000道尔顿的脑多肽提取物,其中分子量低于60道尔顿的多肽含量为22.6~24.0%,60~150道尔顿的多肽含量为19.1%~22.2%,150~270道尔顿的多肽含量为35.0%~37.1%,270~460道尔顿的多肽含量为4.7%~5.0%,460~4500道尔顿的多肽含量为2.0%~2.3%,4500~30000道尔顿的多肽含量为11.1~13.5%;除菌过滤,即得;将1ml脑多肽提取物加入到200ml鲜乳中,包装,即成肽乳。
实施例2:
收集胎牛脑组织;将新鲜或冷冻的胎牛脑组织在室温下用超纯水洗净;加入5倍体积无菌超纯水,制成匀浆;加入4倍体积的无菌超纯水,混匀,置-15℃反复冻融3次;将冻融的匀浆在温度4~8℃下,以每分钟8000转离心15分钟,去除沉淀;用切向流超滤设备截留上清液,取分子量<30000道尔顿的脑多肽提取物,其中分子量低于60道尔顿的多肽含量为22.6~24.0%,60~150道尔顿的多肽含量为19.1%~22.2%,150~270道尔顿的多肽含量为35.0%~37.1%,270~460道尔顿的多肽含量为4.7%~5.0%,460~4500道尔顿的多肽含量为2.0%~2.3%,4500~30000道尔顿的多肽含量为11.1~13.5%;除菌过滤,即得;将0.5ml脑多肽提取物加入到200ml鲜乳中,包装,即成肽乳。
实施例3:
收集胎牛脑组织;将新鲜或冷冻的胎牛脑组织在室温下用超纯水洗净;加入3倍体积无菌超纯水,制成匀浆;加入7倍体积的无菌超纯水,混匀,置-25℃反复冻融2次;将冻融的匀浆在温度4~8℃下,以每分钟8000转离心25分钟,去除沉淀;用切向流超滤设备截留上清液,取分子量<30000道尔顿的脑多肽提取物,其中分子量低于60道尔顿的多肽含量为22.6~24.0%,60~150道尔顿的多肽含量为19.1%~22.2%,150~270道尔顿的多肽含量为35.0%~37.1%,270~460道尔顿的多肽含量为4.7%~5.0%,460~4500道尔顿的多肽含量为2.0%~2.3%,4500~30000道尔顿的多肽含量为11.1~13.5%;除菌过滤,即得;将3ml脑多肽提取物加入到200ml鲜乳中,包装,即成肽乳。