发明内容
本发明目的在于公开一种从胎盘组织提取胎盘多肽提取物的方法,本发明另一目的在于公开一种含有上述提取物的牛奶及其制备方法。
本发明目的是通过如下技术方案实现的:
本发明肽乳的原料组成为:
牛奶100体积份 胎盘多肽提取物0.1-2体积份。
本发明肽乳的原料组成优选为:
牛奶100体积份 胎盘多肽提取物0.5体积份。
本发明肽乳的原料组成优选为:
牛奶100体积份 胎盘多肽提取物0.25体积份。
本发明肽乳的原料组成优选为:
牛奶100体积份 胎盘多肽提取物1.5体积份。
其中胎盘多肽提取物的制备方法如下:
收集牛胎盘组织;将新鲜或冷冻的牛胎盘组织在室温下用超纯水洗净;加入3~5倍体积无菌超纯水,制成匀浆;加入3~8倍体积的无菌超纯水,混匀,置-10℃~-30℃反复冻融2~3次;将冻融的匀浆在温度4~8℃下,以每分钟8000转离心10~30分钟,去除沉淀;用切向流超滤设备截留上清液,取分子量<30000道尔顿的胎盘多肽提取物;除菌过滤,备用。
其中胎盘多肽提取物的制备方法优选为:
收集牛胎盘组织;将新鲜或冷冻的牛胎盘组织在室温下用超纯水洗净;加入3~5倍体积无菌超纯水,制成匀浆;加入5倍体积的无菌超纯水,混匀,置-20℃反复冻融2~3次;将冻融的匀浆在温度4~8℃下,以每分钟8000转离心20分钟,去除沉淀;用切向流超滤设备截留上清液,取分子量<30000道尔顿的胎盘多肽提取物;除菌过滤,备用。
胎盘多肽提取物中分子量低于80道尔顿的多肽含量为57.0%~69.3%,90~280道尔顿的多肽含量为20.1%~31.7%,280~30000道尔顿的多肽含量为5.2~11.3%。
按常规方法将上述胎盘多肽提取物加入到鲜奶中,制成肽乳。
本发明肽乳是一种健康、安全并具有一定医疗作用的新型功能性食品,饮用此肽乳,可以改善肠道微生态环境,清除肠道中病原菌和腐败菌及其产生的毒素,促进机体健康。本发明对人体安全无害,对肠道中一些有益微生物不会产生影响,没有抗生素所具有的诸多副作用,不会使正常菌群失衡,导致产生毒性更大的耐药性菌株等,具有很好的经济效益和社会效益。同时,本发明肽乳具有补充人体所需的微量元素,增强人体体质,提高免疫功能,滋阴增强体力,增加皮肤营养,保持皮肤光滑润洁,安神补胎盘,缓解焦躁不安,平定情绪等功能。本发明的创新点在于用现代的工艺方法提取牛胎盘组织的有效成分制成乳制品用于人类的保健。
下述实验例用于进一步说明但不限于本发明。
实验例1 本发明肽乳对干细胞和淋巴细胞的增殖作用实验
本发明所述胎盘多肽提取物对干细胞和淋巴细胞的增殖作用实验,试验结果如表1,胎盘多肽提取物1∶100、1∶200、1∶400、1∶800、1∶1600五个稀释浓度组的淋巴细胞增殖率均显著高于空白组,可以有效促进淋巴细胞增殖。
表1 胎盘多肽提取物对淋巴细胞增殖活力的影响(体外)
稀释倍数 |
OD |
增殖率 |
1∶1001∶2001∶4001∶8001∶1600空白 |
1.396±0.1063<sup>1,2</sup>1.418±0.067<sup>1,2</sup>1.454±0.099<sup>1,2</sup>1.069±0.170<sup>1,2</sup>1.165±0.057<sup>1,2</sup>0.847±0.036 |
64.7%67.4%71.7%26.2%37.5%- |
注:1.P<0.05,与空白组相比,差异有统计学意义;2.P>0.05,不同稀释浓度之间差异无统计学意义。
实验例2 肽乳功能鉴定实验的过程及结果
SPF级昆明小鼠90只,4~6周龄,雌雄各半,随机分为3组,每组30只。A组给予肽乳0.5ml/天灌胃;B组给予纯牛奶0.5ml/天灌胃,C组给予生理盐水0.5ml/天灌胃。连续灌胃15天后,调整初始细胞数约0.7×106/ml,以细胞计数法观察小鼠淋巴细胞转化试验,结果如表2。连续灌胃45天后,按照0.1ml/10g体重从小鼠的尾静脉注入墨汁。在注入墨汁后2min、10min后,分别从眼球静脉丛取血20ul,并立即将其加入到2ml0.1%Na2CO3溶液中。用酶标仪在620nm波长处测定OD值,以0.1%Na2CO3溶液作空白对照,计算小鼠吞噬指数,结果如表3。在连续灌胃第30天的次日,将尾部负荷5%体重铅皮的小鼠置于游泳箱中游泳。水深不低于30cm,水温20℃±1.0℃,记录小鼠自游泳开始至死亡的时间,即为小鼠负重游泳时间(min),结果如表4。肽乳可以显著增强小鼠细胞免疫功能和单核-巨噬细胞功能,具有免疫增强和抗疲劳作用。
表2 肽乳对小鼠淋巴细胞增殖活力的影响
组别 |
动物只数 |
细胞培养时间 |
细胞计数 |
增殖率 |
A组B组C组 |
101010 |
72h72h72h |
2.230±0.622<sup>1,2</sup>1.246±0.239<sup>3</sup>0.837±0.319 |
218.6%78.0%19.6% |
注:1.P<0.05,与纯牛奶组相比,差异有统计学意义;2.P<0.05,与生理盐水组相比,差异有统计学意义;3.P>0.05,与生理盐水组相比,差异无统计学意义。
表3 肽乳对小鼠非特异性免疫功能的影响
组别 |
动物只数 |
剂量 |
校正的吞噬指数 |
A组B组C组 |
101010 |
0.1ml/10g0.1ml/10g0.1ml/10g |
12.27±0.94<sup>1,2</sup>7.20±0.70<sup>3</sup>7.09±0.13 |
注:1.P<0.05,与纯牛奶组相比,差异有统计学意义;2.P<0.05,与生理盐水组相比,差异有统计学意义;3.P>0.05,与生理盐水组相比,差异无统计学意义。
表4 肽乳对小鼠抗疲劳功能的影响
组别 |
动物只数 |
负重 |
游泳时间(min) |
A组B组C组 |
101010 |
5%体重5%体重5%体重 |
67.0±15.7<sup>1,2</sup>48.4±4.51<sup>3</sup>31.0±8.48 |
注:1.P<0.05,与纯牛奶组相比,差异有统计学意义;2.P<0.05,与生理盐水组相比,差异有统计学意义;3.P<0.05,与生理盐水组相比,差异有统计学意义。
下述实施例均能实现上述实验例所述的效果
具体实施方式
实施例1:
收集牛胎盘组织;将新鲜的牛胎盘组织在室温下用纯化水洗净;加入4倍体积无菌超纯水,制成匀浆;加入5倍体积无菌超纯水,混匀,置-20℃反复冻融2次;将冻融的匀浆在温度为4~8℃,以转速8000转/分离心20分钟,去除沉淀;用切向流超滤设备截留上清液,取分子量<30000道尔顿的胎盘多肽提取物,其中胎盘多肽提取物中分子量低于80道尔顿的多肽含量为57.0%~69.3%,90~280道尔顿的多肽含量为20.1%~31.7%,280~30000道尔顿的多肽含量为5.2~11.3%,除菌过滤,备用;将1ml胎盘多肽提取物加入到200ml鲜乳中,经高压均质工艺加工,包装,即成肽乳。
实施例2:
收集牛胎盘组织;将冷冻的胎牛胎盘组织在室温下用超纯水洗净;加入5倍体积无菌超纯水,制成匀浆;加入4倍体积的无菌超纯水,混匀,置-15℃反复冻融3次;将冻融的匀浆在温度4~8℃下,以每分钟8000转离心15分钟,去除沉淀;用切向流超滤设备截留上清液,取分子量<30000道尔顿的胎盘多肽提取物,其中胎盘多肽提取物中分子量低于80道尔顿的多肽含量为57.0%~69.3%,90~280道尔顿的多肽含量为20.1%~31.7%,280~30000道尔顿的多肽含量为5.2~11.3%,除菌过滤,备用;将1ml胎盘多肽提取物加入到200ml鲜乳中,经高压均质工艺加工,包装,即成肽乳。
实施例3:
收集牛胎盘组织;将新鲜的牛胎盘组织在室温下用超纯水洗净;加入3倍体积无菌超纯水,制成匀浆;加入7倍体积的无菌超纯水,混匀,置-25℃反复冻融2次;将冻融的匀浆在温度4~8℃下,以每分钟8000转离心25分钟,去除沉淀;用切向流超滤设备截留上清液,取分子量<30000道尔顿的胎盘多肽提取物,其中胎盘多肽提取物中分子量低于80道尔顿的多肽含量为57.0%~69.3%,90~280道尔顿的多肽含量为20.1%~31.7%,280~30000道尔顿的多肽含量为5.2~11.3%,除菌过滤,备用;将1ml胎盘多肽提取物加入到200ml鲜乳中,经高压均质工艺加工,包装,即成肽乳。