CN101343317A - 脑肽及其制备方法及其用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种脑肽及其制备方法及其用途，将哺育动物的脑经过生物工程提纯并在体外进行酶解成易吸收的小分子肽，每日服用量将会大大减少(只需几克)，适合各类人群，不存在口味的问题，进入人体不需再消化，可被小肠直接吸收，快捷参与各种生理活动。可用于制备补脑、健脑、辅助治疗脑疾病等方面的生物制剂。

Description

脑肽及其制备方法及其用途

技术领域

本发明涉及一种肽提取物及其制备方法及其用途，尤其涉及一种从哺乳动物的脑组织中分离提取的脑肽及其制备方法及其用途。

背景技术

肽可以被肠道直接吸收，而且吸收速度快。蛋白质经消化道酶促反应后，并不一定成为完全的游离氨基酸后才被吸收，而是主要以低肽(特别是二肽、三肽)的形式吸收。低肽的吸收率比氨基酸更高，比氨基酸更易、更快被机体利用。

脏器疗法在我国有着悠久的历史，经过历代的补充与发展，至今仍然在临床发挥着重要作用，并且成为养生保健的常用方法。

脏器疗法的治疗原理，主要是基于“同气相求”与“以脏补脏”的学说。中医学认为动物脏器气味醇厚，为血肉有情之品，较草本药物更易被人体吸收，因而迅速起效，尤其在调养、补益方面效果更加明显，此即“同气相求”之理。现代研究证明，动物脏器在生化特性和成分构成上也有许多与人相似之处。因此对人体相应的器官组织有药理作用，此即“以脏补脏”学说。

以脏补脏的方法大都是食补，就是日常膳食。这种补益方法有很大弊端，食用量大，进入人体还得经过胃、肠等消化才能吸收。利用率低，见效慢。有的脏器因有特殊味道，而被拒之门外，比如动物脑，不仅气味难闻，而且因其含有大量的脑脂肪，也很少有人食用。

发明内容

本发明的目的是提供一种服用方便、易于吸收的脑肽及其制备方法及其用途。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

本发明的脑肽，是从哺乳动物的脑组织中提取而成的，包括40％以上的活性小分子肽，所述活性小分子肽的分子量为600-2600道尔顿。

本发明的脑肽的制备方法，所用的主原料为哺育动物脑脏，包括步骤：

A、将所述脑脏经过磨碎处理，然后用乙醇将所述脑脏中的胆固醇分离出；

B、向所述脑脏中加入清水搅拌成脑浆液，并升温至85-95℃，保持15-25分钟；

C、将所述脑浆液进行酶解；

D、调节所述脑浆液的PH值并使酶灭活，之后过滤得包含所述活性小分子肽的肽液。

E、将所述肽液进行浓缩处理，得所述脑肽。

本发明的脑肽在制备补脑、键脑及辅助治疗脑疾病的药物方面的用途。

由上述本发明提供的技术方案可以看出，本发明所述的脑肽及其制备方法及其用途，由于将哺育动物的脑经过生物工程提纯并在体外进行酶解成易吸收的小分子肽，每日服用量将会大大减少(只需几克)，适合各类人群，不存在口味的问题，更大的优点就是进入人体不需再消化，可被小肠直接吸收，快捷参与各种生理活动。是制备补脑、健脑、辅助治疗脑疾病的药物的理想生物制剂。

附图说明

图1为本发明脑肽的制备方法的具体体实施例的流程图。

具体实施方式

本发明的脑肽，其较佳的具体实施方式是，从哺乳动物的脑组织中提取而成的，包括40％以上的活性小分子肽，可以是40、45、50、55、60％等比例，这里的百分比为重量百分比。

所述活性小分子肽的分子量为600-2600道尔顿，可以是600、1000、1500、2000、2400、2600道尔顿。

所述的哺育动物可以为猪、狗、牛、羊、鹿、马或兔中任意一种或多种，优选为羊。

本发明的脑肽的制备方法，所用的主原料为上述的哺育动物脑脏，具体制备方法包括：

步骤1、将所述脑脏经过磨碎处理，然后用乙醇将所述脑脏中的胆固醇分离出，可以向磨碎后的脑脏中加入85-95％的乙醇，搅拌8-12小时后，将酒精倒出，这一步骤进行1-3次。

步骤2、向所述脑脏中加入清水搅拌成脑浆液，并升温至85-95℃，保持15-25分钟；

步骤3、将所述脑浆液进行酶解，这一步骤包括：

步骤3.1、将所述脑浆液保持温度53～55℃，并调节PH值为8.5～8.8，向所述脑浆液中加入碱性蛋白酶，搅拌均匀后恒温静置2～3小时。

步骤3.2、将所述脑浆液保持温度46～48℃，并调节PH值为7.8～8.0，向所述脑浆液中加入激活好的哺育动物的胰脏，搅拌均匀后恒温静置4～5小时。

步骤3.1和步骤3.2可以同时使用，也可以单独使用，也可以分先后依次使用。

步骤3.2中，所述胰脏的激活方法为：取需要量的胰脏，磨碎后加入所述胰脏重量1.5倍的25％的乙醇溶液，4～10℃下放置12～14小时，然后再加入3倍蒸馏水，搅匀，再放置12～14小时。

步骤4、调节所述脑浆液的PH值并使酶灭活，之后过滤得包含所述活性小分子肽的肽液。可以首先用饱和柠檬酸调PH值为6.5～6.0，再用盐酸调节PH值至5.4～5.1，之后升温煮沸10～20分钟，使酶灭活。

步骤5、将所述肽液进行浓缩处理，得所述脑肽。可以在65-75℃条件下，对所述肽液进行真空浓缩，控制婆美度Be/30℃＝20～22。

本发明的脑肽可用于制备补脑、键脑及辅助治疗脑疾病等方面的药物。可制成药剂学上可接受的不同剂型，比如口服液、小容量注射剂、大容量注射剂、片剂、胶囊剂或粉剂。

一个具体实施例，以制备100克脑肽为例，选用的主原料和辅料及其用量如表1所示：

表1：制备100克脑肽所需的主原料和辅料及其用量

如图1所示，详细的制备工艺如下：

1、羊脑与颅腔的分离：

经过检疫的健康羊宰杀后，用真空泵将脑浆吸出，速冻后冷藏待用，也可以用牛、猪或其它的哺育动物。

2、脑中胆固醇的分离：

脑组织中含有2％的胆固醇，是对人体有害的物质，根据相似相溶原理，胆固醇极易溶解于醇类，而乙醇是符合食品级要求的最好溶剂。另外脑脂肪对水解液的过滤有很大影响，而卵磷脂也溶于乙醇，但卵磷脂是对人体有益的物质，所以只要除去影响过滤的部分卵磷脂即可。

提取方法：脑浆经过绞肉机粗碎两遍，再过胶体磨精碎一遍，加入2倍重量95％的乙醇，在30℃温度下温和搅拌8～12小时，停止搅拌，静置使其自然分层，倾出上部提取液(一次浸提酒精)，然后加入85％的同样重量的乙醇，用同样的方法再浸提一次。两次浸提的酒精合并后进行蒸馏回收，循环利用。

3、脑蛋白的热变性：

脑蛋白具有紧密的立体结构，不利于酶的水解，当它受热时，蛋白质发生变性，使得保持蛋白质构象的那些弱键断裂，破坏了肽链的特定的排列，原来在分子内部的一些非极性基团暴露到分子的表面，这样使水解部位增加，使水解速度加快，因此有利于酶解。所以在脑蛋白水解前，应使蛋白变性。具体方法是：向经乙醇浸提后的脑糜(主要含有脑蛋白)，加入3倍清水，制成脑浆液，升温至85～95℃，保持15～25分钟。(温度高时间短)

4、酶解：

4.1、碱性蛋白酶的水解：

将变性的脑浆液，降温至53～55℃，用40％氢氧化钠溶液调节至PH8.5～8.8，加入配制好的碱性蛋白酶溶液，温和搅拌至均匀，停止搅拌，恒温水解2～3小时。

其中，碱性蛋白酶的配制方法是，提前30分钟，将称量准确的碱性蛋白酶粉，用10倍蒸馏水溶解，室温下静置使其自然分层，取其清液。

4.2、胰脏的水解：

碱性蛋白酶水解完毕，测定其PH值，用氢氧化钠调节PH值至7.8～8.0，物料温度降至46～48℃，加入激活好的胰脏，温和搅拌均匀，恒温水解4～5小时。激活剂用量是胰脏用量的1.5％。

其中，胰脏的激活方法是，准确计算所需的胰脏量，将新鲜或冷冻的胰脏粗碎两遍，精碎一遍，加入1.5倍的25％的乙醇溶液，4～10℃下放置12～14小时，再加入3倍蒸馏水，搅匀，再放置12～14小时，即可使用。

5、调酸：

水解完毕，用饱和柠檬酸调PH值6.5～6.0，再用盐酸调节PH值至5.4～5.1，升温煮沸10～20分钟，使未分解的大分子蛋白质和酶在酸性条件下变性、沉淀或凝聚上浮，同时使酶灭活，使水解液灭菌。而水解后所得的肽和部分游离的氨基酸呈清亮透明的液体。

6、过滤：

通过固定滤纸式或钛棒过滤器，将肽和游离的氨基酸清液与杂质分离，滤液呈清亮透明的液体。

7、浓缩：

在65～75℃条件下，肽液经过真空浓缩，控制婆美度Be/30℃＝20～22。

8、离心喷雾干燥：

物料经高速离心器雾化，形成雾状，然后在103～105℃温度下瞬间干燥成脑肽粉剂。

具体实验例：取本发明的脑肽粉剂适量进行检验，得出如下指标：

1、产品特点：

①易溶于水，水溶液清亮透明，有微量白色颗粒状沉淀。水解过滤液没有沉淀，白色颗粒是在浓缩时浓度达到一定值出现的，经检测是含氮物质，所以推断该物质为肽结晶物。②水溶液pH6.5～6.8；③分子小，经质谱检测，其分子量在600～2600道尔顿；紫外光谱在195nm和266nm处有双吸收峰。④遇酸、碱、高温稳定，在pH3～10范围内能经受100℃、30分钟或121℃、20分钟的耐热试验。⑤肽含量高，每100克本品中肽和游离氨基酸总量≥60克，其中肽含量40％以上；⑥必需氨基酸占整个氨基酸比例≥40％，与世界卫生组织WHO推介的理想模式十分接近。而且八种必需氨基酸的构成比例平衡(检验报告附后)。

2、感官要求

感官指标符合表2的规定：

表2感官指标

项目	指标
		色泽	呈浅灰色
外观及性状	呈疏松的粉未状，无颗粒、结块
		气味和滋味	具有该产品所特有的气味，无其它异味
杂质	无肉眼可见外来杂质、异物

3、理化指标

理化指标符合表3的规定：

表3  理化指标

项目	指标
		水分％              ≤	8.0
溶解度％            ≥	95.0
		灰分％              ≤	8.0
氯化物％，(以Nacl计)≤	5.0
		铅(以Pb计)mg/kg     ≤	0.5
砷(以As计)mg/kg     ≤	0.3
		汞(以Hg计)mg/kg     ≤	0.05

表2和表3中的各种指标是根据国家卫生部批准的，从牛羊骨髓中提取的肽类保健食品“颐宁多肽冲剂‘卫食健字[1997]第682号’”企业标准Q/XMXS01-2003制定的。

4、微生物限量

微生物指标符合表4的规定：

表4  微生物限量

项目	指标
		菌落总数cfu/g       ≤	30000
大肠菌群MPN/100g    ≤	60
		霉菌cfu/g           ≤	25
酵母cfu/g           ≤	25
		致病菌(沙门式菌、志贺式菌、金黄色葡萄球菌和溶血性链球菌)	不得检出

表4中的各项指标是依据GB16740-1997《保健(功能)食品通用标准》确定的。

5、营养成分指标：

营养成分指标符合表5的规定

表5  营养成分指标

项目	指标
		总氮(以N计)％   ≥	10
氨基氮(以AN计)％≥	3.5
		脑肽％          ≥	40

具体应用例：如表6所示，选不同的人群试服，观察服用效果。

表6：脑肽胶囊试服效果统计

以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1、一种脑肽，其特征在于，它是从哺乳动物的脑组织中提取而成的，包括40％以上的活性小分子肽，所述活性小分子肽的分子量为600-2600道尔顿。

2、根据权利要求1所述的脑肽，其特征在于，所述的哺育动物为猪、狗、牛、羊、鹿、马或兔中任意一种或多种，优选为羊。

3、一种权利要求1或2所述的脑肽的制备方法，其特征在于，所用的主原料为哺育动物脑脏，包括步骤：

A、将所述脑脏经过磨碎处理，然后用乙醇将所述脑脏中的胆固醇分离出；

B、向所述脑脏中加入清水搅拌成脑浆液，并升温至85-95℃，保持15-25分钟；

C、将所述脑浆液进行酶解；

D、调节所述脑浆液的PH值并使酶灭活，之后过滤得包含所述活性小分子肽的肽液；

E、将所述肽液进行浓缩处理，得所述脑肽。

4、根据权利要求3所述的脑肽的制备方法，其特征在于，所述的步骤A包括：向磨碎后的脑脏中加入85-95％的乙醇，搅拌8-12小时后，将酒精倒出，这一步骤进行1-3次。

5、根据权利要求3所述的脑肽的提取方法，其特征在于，所述的步骤C包括步骤：

C1、将所述脑浆液保持温度53～55℃，并调节PH值为8.5～8.8，向所述脑浆液中加入碱性蛋白酶，搅拌均匀后恒温静置2～3小时。

6、根据权利要求5所述的脑肽的制备方法，其特征在于，所述的步骤C1之后还包括步骤：

C2、将所述脑浆液保持温度46～48℃，并调节PH值为7.8～8.0，向所述脑浆液中加入激活好的哺育动物的胰脏，搅拌均匀后恒温静置4～5小时。

7、根据权利要求6所述的脑肽的制备方法，其特征在于，所述胰脏的激活方法为：取需要量的胰脏，磨碎后加入所述胰脏重量1.5倍的25％的乙醇溶液，4～10℃下放置12～14小时，然后再加入3倍蒸馏水，搅匀，再放置12～14小时。

8、根据权利要求3所述的脑肽的制备方法，其特征在于，所述的步骤D中，首先用饱和柠檬酸调PH值为6.5～6.0，再用盐酸调节PH值至5.4～5.1，之后升温煮沸10～20分钟，使酶灭活。

9、根据权利要求3所述的脑肽的制备方法，其特征在于，所述的步骤E包括：在65-75℃条件下，对所述肽液进行真空浓缩，控制婆美度Be/30℃＝20～22，并制成药剂学上可接受的不同剂型，包括口服液、小容量注射剂、大容量注射剂、片剂、胶囊剂或粉剂。

10、一种权利要求1或2所述的脑肽在制备补脑、键脑及辅助治疗脑疾病的药物方面的用途。

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