CN101139572B - 一种麦冬体外精子营养液及其制备方法及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种麦冬体外精子营养液及其制备方法及应用，它是麦冬原料中提取的多糖与生理盐水混合的液体，麦冬多糖与生理盐水的比例是1克麦冬多糖∶10毫升生理盐水。其制备方法是，取麦冬原料将其洗净，干燥、粉碎，置入生理盐水中浸泡，然后将浸泡液置入容器中在95-105℃下加热、过滤得到麦冬提取液；所述的一种麦冬体外精子营养液的应用，将麦冬精子营养液与精液按液体体积1∶1的比例混合均匀，用于培养精子和活化精子。本发明能够提高精子活动率35-56％，对精子无任何损害，无任何毒副作用，其效果完全替代进口产品，而且价格比进口产品大幅度降低。
Description
技术领域
本发明涉及精子营养液，是一种麦冬体外精子营养液及其制备方法及应用。
背景技术
由于精子活力低下而不能生育的不育症患者占不育症患者的比例较大，治疗这类不育症口服药物种类很多，但是，无论西药或中药，其疗效都欠佳，甚至有些患者需口服几年才能见效，给患者造成较大的经济负担及心理压力，并易出现各种不适感，对患者身体健康有一定影响。为此，近几年国际上开始研究使用精子营养液，在体外对患者精子的活力进行培养，最终达到增强精子活力的目的。目前我国使用的这种营养液均为进口产品，价格昂贵，而且这些营养液中一般都含有化学药物成份。然而，本领域研究的终极目标是使用纯天然物质。
发明内容
本发明的目的是，提供一种麦冬体外精子营养液及其制备方法及应用，它采用纯天然物质麦冬为原料提取其中多糖，做成精子营养液，以达到使精子在体外活化增强精子活动能力。
本发明为实现上述目的，通过以下技术方案实现：一种麦冬体外精子营养液，它是麦冬原料中提取的多糖与生理盐水混合的液体，麦冬多糖与生理盐水的比例是1克麦冬多糖∶10毫升生理盐水。
所述的一种麦冬体外精子营养液的制备方法，取麦冬原料将其洗净，在50℃-65℃下干燥1.5-2.5小时，然后粉碎，置入0.8％的生理盐水中浸泡0.8-1.5小时，麦冬原料与生理盐水的比例为100g∶900-1150毫升，然后将浸泡液置入容器中在95-105℃下加热，取出后过滤去渣得到麦冬提取液；
将麦冬提取液在50℃-60℃下干燥1.5-2.5小时，得到干燥物；
按照100克干燥物比250毫米石油醚的比例，将干燥物置入容器内，在60℃-90℃下回流1小时脱脂，过滤，石油醚回收；
再将滤渣挥干溶媒后以80％乙醇在220-260毫升中浸渍10-15小时，在80℃-90℃下回流提取2次，每次1-2小时，得到滤液和滤渣；
再将滤渣加蒸馏水450-550毫升浸0.8-1.2小时后在90℃下温浸30-48分钟，过滤，得到滤液和滤渣；
再将滤渣用220-260毫升蒸馏水在90℃下温浸25-35分钟，过滤，得到滤液；
将上述滤液合并，减压浓缩至75毫升，脱去蛋白质，加1％活性炭脱色2次，抽滤，滤液加95％乙醇使含醇量达80％，在4-12℃下静置10-15小时，过滤；
再将残渣依次用95％乙醇、无水乙醇、乙醚、丙酮洗涤后在50-60℃下烘干，得到麦冬粗多糖；
再将麦冬粗多糖进行分离纯化：用蒸馏水洗脱纤维素柱得到一个麦冬多糖组份；
再用0-0.2摩尔/升氢氧化钠进行梯度洗脱，收集多糖洗脱液，于流水中透析68-76小时，真空冷冻干燥后得精制麦冬多糖；
按照1克精制麦冬多糖加生理盐水10毫升的比例，混合均匀制成麦冬多糖精子营养液。
所述的浸泡液在容器中加热10-45分钟。
所述的麦冬原料与生理盐水的比例是100g∶1000毫升。
所述的一种麦冬体外精子营养液的应用，将麦冬精子营养液与精液按液体体积1∶1的比例混合均匀，用于培养精子和活化精子。
本发明采用的中草药麦冬原料是百台科，多年生草本植物，麦冬的干燥块根，味甘，微苦，性微寒。功效养阴生津，润肺清心。麦冬的主要成分为甾体皂苷、多糖、高异黄酮类，氨基酸等。对于麦冬的药理作用的研究表明：主要集中在免疫、活性、抗心肌缺血、降血糖、耐缺氧、抗过敏等方面。
进一步研究表明：对体外精子的活化有较大作用。
本发明采用中草药麦冬做为体外精子营养液的原料，制取的精子营养液经过实验证明，能够提高精子活动率30-46％，延长精子体外存活时间22-27小时，对精子无任何损害，无任何毒副使用，其效果完全可以替代进口产品，而且价格比进口产品大幅降低。
具体实施方式
实施例：
本发明所述的麦冬体外精子营养液，是采用麦冬原料中提取的多糖与生理盐水混合的液体，麦冬多糖与生理盐水的比例是1克麦冬多糖∶10毫升生理盐水。
所述的麦冬体外精子营养液的制备方法是，取麦冬为原料将其洗净，在60℃下干燥2小时，然后粉碎，置入0.8％的生理盐水中浸泡1小时，麦冬原料与生理盐水的比例为100g∶900-1150毫升，该比例可以是：100g∶900毫升、100g∶1150毫升或100g∶1100毫升等均可，优选的方案是：麦冬原料与生理盐水的比例是100g∶1000毫升。然后将浸泡液置入容器中在100℃下加热，取出后过滤去渣得到麦冬提取液；将麦冬提取液在60℃下干燥1小时，得到干燥物；按照100克干燥物比250毫米石油醚的比例，将干燥物置入容器内，在60℃-90℃下回流1小时脱脂，过滤，石油醚回收，再将滤渣挥干溶媒后以80％乙醇250毫升中浸渍10小时或12小时或15小时均可，在80℃-90℃下回流提取2次，每次1.2小时，得到滤液和滤渣；再将滤渣加蒸馏水450-550毫升、优选500毫升浸0.8-1.2小时后在90℃下温浸40分钟，过滤，得到滤液和滤渣，再将滤渣用250毫升蒸馏水在90℃下温浸30分钟，过滤，得到滤液；将上述滤液合并，减压浓缩至75毫升，脱去蛋白质，加1％活性炭脱色2次，抽滤，滤液加95％乙醇使含醇量达80％，在4--12℃下静置10-15小时，过滤；再将残渣依次用95％乙醇、无水乙醇、乙醚、丙酮洗涤后在60℃下烘干，得到麦冬粗多糖；再将麦冬粗多糖进行分离纯化：用蒸馏水洗脱纤维素柱得到一个麦冬多糖组份；再用0-0.2摩尔/升氢氧化钠进行梯度洗脱，收集多糖洗脱液，于流水中透析68-76小时，真空冷冻干燥后得精制麦冬多糖；按照1克精制麦冬多糖加生理盐水10毫升的比例，混合均匀制成麦冬多糖精子营养液。
本发明所述的浸泡液在容器中加热的时间一般为10-45分钟为宜。
本发明所述的一种麦冬体外精子营养液的应用是，将麦冬精子营养液与精液按液体体积1∶1的比例混合均匀，用于培养精子和活化精子，以达到本发明所述的效果。
Claims (5)
1.一种麦冬体外精子营养液，其特征在于：它是麦冬原料中提取的多糖与生理盐水混合的液体，麦冬多糖与生理盐水的比例是1克麦冬多糖∶10毫升生理盐水。
2.权利要求1所述的一种麦冬体外精子营养液的制备方法，其特征在于：取麦冬原料将其洗净，在50℃-65℃下干燥1.5-2.5小时，然后粉碎，置入0.8％的生理盐水中浸泡0.8-1.5小时，麦冬原料与生理盐水的比例为100g∶900-1150毫升，然后将浸泡液置入容器中在95-105℃下加热，取出后过滤去渣得到麦冬提取液；
将麦冬提取液在50℃-60℃下干燥1.5-2.5小时，得到干燥物；
按照100克干燥物比250毫米石油醚的比例，将干燥物置入容器内，在60℃-90℃下回流1小时脱脂，过滤，石油醚回收；
再将滤渣挥干溶媒后以80％乙醇在220-260毫升中浸渍10-15小时，在80℃-90℃下回流提取2次，每次1-2小时，得到滤液和滤渣；
再将滤渣加蒸馏水450-550毫升浸0.8-1.2小时后在90℃下温浸30-48分钟，过滤，得到滤液和滤渣；
再将滤渣用220-260毫升蒸馏水在90℃下温浸25-35分钟，过滤，得到滤液；
将上述滤液合并，减压浓缩至75毫升，脱去蛋白质，加1％活性 炭脱色2次，抽滤，滤液加95％乙醇使含醇量达80％，在4-12℃下静置10-15小时，过滤；
再将残渣依次用95％乙醇、无水乙醇、乙醚、丙酮洗涤后在50-60℃下烘干，得到麦冬粗多糖；
再将麦冬粗多糖进行分离纯化：用蒸馏水洗脱纤维素柱得到一个麦冬多糖组份；
再用0-0.2摩尔/升氢氧化钠进行梯度洗脱，收集多糖洗脱液，于流水中透析68-76小时，真空冷冻干燥后得精制麦冬多糖；
按照1克精制麦冬多糖加生理盐水10毫升的比例，混合均匀制成麦冬多糖精子营养液。
3.根据权利要求2所述的一种麦冬体外精子营养液的制备方法，其特征在于：浸泡液在容器中加热10-45分钟。
4.根据权利要求2所述的一种麦冬体外精子营养液的制备方法，其特征在于：麦冬原料与生理盐水的比例是100g∶1000毫升。
5.权利要求1所述的一种麦冬体外精子营养液的应用，其特征在于：将麦冬精子营养液与精液按液体体积1∶1的比例混合均匀，用于培养精子和活化精子。
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