CN101120776A - 用膜分离技术从谷物麸皮中提取β-葡聚糖的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种采用膜分离技术从谷物麸皮中分离β－葡聚糖的方法，该方法利用蛋白质在碱性、近常温时溶解度最大，并可在酸性条件下析出的原理，分别用乙醇和水提取谷物籽粒中的醇溶蛋白和水溶蛋白，提取液经离心分离，滤液采用膜分离技术进行富集后酸沉后，再进行醇沉，离心分离，并将沉淀进行脱溶后采用滤膜过滤，得精制β－葡聚糖。本发明制备的β－葡聚糖纯度高(一般在60～80％)，得率高(一般在5～15％)。本发明的工艺简单，操作易于控制，成本低，易于工业化；而且膜分离滤液可作为工艺用水循环使用，大大降低了耗水量和废水处理量。
Description
技术领域
本发明属于生物化工技术领域，涉及一种β-葡聚糖的提取方法，尤其涉及一种采用膜分离技术从青稞、莜麦和燕麦等谷物的麸皮中提取β-葡聚糖的方法。
背景技术
研究表明，β-葡聚糖具有调解血糖、提高免疫力、抗肿瘤等作用。目前生物医学界及营养学界普认为β-葡聚糖的生理作用主要有4个方面：清肠作用、调解血糖、降低胆固醇、提高免疫力。
据资料介绍，青稞/燕麦/莜麦等谷物的籽粒均中含有大量的蛋白质和β-葡聚糖，其中青稞的蛋白质含量10～15％左右，β-葡聚糖含量3.5～8.6％左右；燕麦的蛋白质含量最高可达17.92％，最低为8.7％，多数在10％～15％之间，β-葡聚糖含量为2.0％～7.5％；莜麦蛋白质含量在11.35％～19.94％，β-葡聚糖含量为3％～6％。β-葡聚糖主要存在于谷物得麸皮中，其化学名称为：(1-3)(1-4)-β-D-葡聚糖，是一种非淀粉多糖，按其溶解性分可为水溶性和水不溶性两类。
目前工业制备β-葡聚糖的方法，多为化学法、酶法提取水溶性β-葡聚糖，而水不溶性β-葡聚糖随废料弃去，造成了水不溶性β-葡聚糖得流失；同时耗水量较大，废水处理量大。
膜分离是一种很新的分离方法，其具有能耗低，单级分离效率高，分离过程简单，不污染环境等优点，被广泛应用于生物制备和医药生产中的分离、浓缩和纯化。
发明内容
本发明的目的在于提供一种利用膜分离技术从谷物麸皮中提取β-葡聚糖的方法。
本发明采用膜分离技术从青稞、莜麦和燕麦等谷物麸皮中提取β-葡聚糖的方法，包括以下步骤：
①将谷物麸皮用2～10倍体积的50％～90％乙醇，在50℃～80℃下回流提取2～4个小时，使谷物麸皮中醇溶β-葡聚糖溶解，同时灭活谷物麸皮中各种酶；冷却至25～35℃，过滤，收集滤液1；过滤后的湿麸皮用2～10倍体积量的无水乙醇继续提取5～20分钟，过滤，收集滤液并与滤液1合并；滤渣于10℃～60℃下减压干燥10～35小时，使麸皮中的乙醇完全挥发而达到脱溶目的。
②将脱溶的谷物麸皮加入到2～10倍体积量的水中搅拌混匀形成溶液，并用0.5～5mol/L氢氧化钠溶液调至pH 8～10，于10℃～60℃下搅拌10～40分钟，使谷物麸皮中水溶β-葡聚糖溶解；冷却至10～40℃，离心分离，收集滤液2；将离心分离所得沉淀继续加入到2～10倍体积量的水中搅拌混匀形成溶液，用0.5～5mol/L氢氧化钠溶液调至pH 8～10，于10～60℃下搅拌10～40分钟，冷却、离心分离，并将滤液与滤液2合并。
③合并步骤①和②的滤液，采用膜浓缩分离设备浓缩滤液至原体积的1/8～1/15，再用0.5～5mol/L盐酸溶液调节滤液pH至2～5，离心分离，沉淀于10℃～60℃下减压干燥10～35小时以达到脱溶的目的；然后过100～500μm筛，得粗β-葡聚糖；
④将粗β-葡聚糖加入到5～10倍体积的去离子水中，加热至30℃～50℃，搅拌溶解，然后加入同体积的异丙醇，于30℃～50℃搅拌10～30分钟，离心分离；沉淀于10℃～60℃下减压脱容10～35小时，过100～500μm筛，得精制β-葡聚糖。
本发明所采用的谷物麸皮为青稞、燕麦或莜麦等β-葡聚糖含量较大的麸皮。
本发明与现有技术相比具有以下优点：
1、本发明利用β-葡聚糖在碱性、近常温时，溶解度最大，并可在酸性条件下析出的原理，分别用乙醇和水提取谷物麸皮中的醇溶β-葡聚糖和水溶β-葡聚糖，提取液经离心分离，滤液采用膜分离技术进行富集后酸沉后，再进行醇沉，离心分离，并将沉淀进行脱溶后采用滤膜过滤，得精制β-葡聚糖。本发明制备的β-葡聚糖纯度高，用“燕麦、大麦和纤维样品中混联β-葡聚糖含量测定方法”测定，β-葡聚糖的含量在60～90％，得率较高(为5％～15％)。
2、本发明的膜分离滤液可作为工艺用水循环使用，大大降低了耗水量和废水处理量。
3、本发明的工艺简单，操作易于控制，成本低，易于工业化。
具体实施方式
实施例1：从青稞中提取β-葡聚糖的方法：
①将青稞籽粒净选，淘洗，去除杂质及泥沙后，进行干燥，并控制水分在＜8％；
②将干燥后的青稞籽粒采用物理方法使麸皮从籽粒表面脱离，并收集青稞麸皮；
③将青稞麸皮用2～10倍体积的50％～90％乙醇，在50℃～80℃下回流提取2～4个小时，使青稞麸皮中醇溶β-葡聚糖溶解，同时灭活麸皮中各种酶；冷却至25～35℃，过滤，收集滤液1；将离心分离所得湿麸皮继续用体积2～10倍量的无水乙醇提取5～20分钟，过滤，滤液与与滤液1合并；滤渣于10～30℃下减压干燥10～35小时，使麸皮中的乙醇完全挥发而达到脱溶目的。
④将脱溶的青稞麸皮加入到2～10倍体积量的水中搅拌混匀形成溶液，并用0.5～5mol/L氢氧化钠溶液调至pH 8～10，于10～60℃下搅拌10～40分钟，使青稞麸皮中水溶性β-葡聚糖溶解；冷却至10～40℃，离心分离(1000～5000转/分)，收集滤液2；将离心分离所得沉淀继续加入到2～10倍体积量的水中搅拌混匀形成溶液，用0.5～5mol/L氢氧化钠溶液调至pH 8～10，于10～60℃下搅拌10～40分钟，冷却、离心分离(1000～5000转/分)，提取液与滤液2合并。
⑤合并滤液1、滤液2，采用膜浓缩分离设备(滤膜的孔径为200～500μm)浓缩滤液至原体积的1/8～1/15，再用0.5～5mol/L盐酸溶液调节滤液pH至2～5，离心分离，沉淀于10℃～60℃下减压干燥10～35小时以达到脱溶的目的；然后过100～500μm筛，得粗β-葡聚糖；
⑥将粗β-葡聚糖加入到5～10倍体积的去离子水中，加热至30～50℃，搅拌溶解，然后加入同体积的异丙醇，于30～50℃搅拌10～30分钟，离心分离(1000～5000转/分)；沉淀于10℃～60℃下减压脱容10～35小时，过100～500μm筛，得精制β-葡聚糖。
经“燕麦、大麦和纤维样品中混联β-葡聚糖含量测定方法”分析，测定该精制β-葡聚糖的纯度为60～90％，得率为5～15％。
实施例2、从莜麦中提取β-葡聚糖的方法：
①将莜麦籽粒净选，淘洗，去除杂质及泥沙后，进行干燥，并控制水分在＜8％；
②将干燥后的莜麦籽粒采用物理方法使麸皮从籽粒表面脱离，并收集莜麦麸皮；
③将莜麦麸皮用2～10倍体积的50％～90％乙醇，在50℃～80℃下回流提取2～4个小时，使莜麦麸皮中醇溶β-葡聚糖溶解，同时灭活麸皮中各种酶；冷却至25～35℃，过滤，收集滤液1；将离心分离所得湿麸皮继续用体积2～10倍量的无水乙醇提取5～20分钟，过滤，滤液与滤液1合并；滤渣于10～30℃下减压干燥10～35小时，使麸皮中的乙醇完全挥发而达到脱溶目的。
④将脱溶的莜麦麸皮加入到2～10倍体积量的水中搅拌混匀形成溶液，并用0.5～5mol/L氢氧化钠溶液调至pH 8～10，于10～60℃下搅拌10～40分钟，使莜麦麸皮中水溶性β-葡聚糖溶解；冷却至10～40℃，离心分离(1000～5000转/分)，收集滤液2；将离心分离所得沉淀继续加入到2～10倍体积量的水中搅拌混匀形成溶液，用0.5～5mol/L氢氧化钠溶液调至pH 8～10，于10～60℃下搅拌10～40分钟，冷却、离心分离(1000～5000转/分)，提取液与滤液2合并。
⑤合并滤液1、滤液2，采用膜浓缩分离设备(滤膜的孔径为200～500μm)浓缩滤液至原体积的1/8～1/1 5，再用0.5～5mol/L盐酸溶液调节滤液pH至2～5，离心分离，沉淀于10℃～60℃下减压干燥10～35小时以达到脱溶的目的；然后过100～500μm筛，得粗β-葡聚糖；
⑥将粗β-葡聚糖加入到5～10倍体积的去离子水中，加热至30～50℃，搅拌溶解，然后加入同体积的异丙醇，于30～50℃搅拌10～30分钟，离心分离(1000～5000转/分)；沉淀于10℃～60℃下减压脱容10～35小时，过100～500μm筛，得精制β-葡聚糖。
经“燕麦、大麦和纤维样品中混联β-葡聚糖含量测定方法”分析，测定该精制β-葡聚糖的纯度为60～90％，得率为5～15％。
实施例3：从燕麦中提取β-葡聚糖的方法：
①将燕麦籽粒净选，淘洗，去除杂质及泥沙后，进行干燥，并控制水分在＜8％；
②将干燥后的燕麦籽粒采用物理方法使麸皮从籽粒表面脱离，并收集谷物麸皮；
③将燕麦麸皮用2～10倍体积的50％～90％乙醇，在50℃～80℃下回流提取2～4个小时，使燕麦麸皮中醇溶β-葡聚糖溶解，同时灭活麸皮中各种酶；冷却至25～35℃，过滤，收集滤液1；将离心分离所得湿麸皮继续用体积2～10倍量的无水乙醇提取5～20分钟，过滤，滤液与与滤液1合并；滤渣于10～30℃下减压干燥1 0～35小时，使麸皮中的乙醇完全挥发而达到脱溶目的。
④将脱溶的燕麦麸皮加入到2～10倍体积量的水中搅拌混匀形成溶液，并用0.5～5mol/L氢氧化钠溶液调至pH 8～10，于10～60℃下搅拌10～40分钟，使燕麦麸皮中水溶性β-葡聚糖溶解；冷却至10～40℃，离心分离(1000～5000转/分)，收集滤液2；将离心分离所得沉淀继续加入到2～10倍体积量的水中搅拌混匀形成溶液，用0.5～5mol/L氢氧化钠溶液调至pH 8～10，于10～60℃下搅拌10～40分钟，冷却、离心分离(1000～5000转/分)，提取液与滤液2合并。
⑤合并滤液1、滤液2，采用膜浓缩分离设备(滤膜的孔径为200～500μm)浓缩滤液至原体积的1/8～1/15，再用0.5～5mol/L盐酸溶液调节滤液pH至2～5，离心分离，沉淀于10℃～60℃下减压干燥10～35小时以达到脱溶的目的；然后过100～500μm筛，得粗β-葡聚糖；
⑥将粗β-葡聚糖加入到5～10倍体积的去离子水中，加热至30～50℃，搅拌溶解，然后加入同体积的异丙醇，于30～50℃搅拌10～30分钟，离心分离(1000～5000转/分)；沉淀于10℃～60℃下减压脱容10～35小时，过100～500μm筛，得精制β-葡聚糖。
经“燕麦、大麦和纤维样品中混联β-葡聚糖含量测定方法”分析，测定精制β-葡聚糖的纯度为60～90％，得率为5～15％。
Claims (4)
1.一种采用膜分离技术从谷物麸皮中提取β-葡聚糖的方法，包括以下步骤：
①将谷物麸皮用2～10倍体积的50％～90％乙醇，在50℃～80℃下回流提取2～4个小时，冷却至25～35℃，过滤，收集滤液1；滤渣于10℃～60℃下减压脱溶10～35小时；
②将脱溶的谷物麸皮加入到2～10倍体积量的水中搅拌混匀形成溶液，并用0.5～5mol/L氢氧化钠溶液调至pH8～10，于10℃～60℃下搅拌10～40分钟，冷却至10～40℃，离心分离，收集滤液2；
③合并滤液1、滤液2，采用膜浓缩分离设备浓缩滤液至原体积的1/8～1/15，再用0.5～5mol/L盐酸溶液调节滤液pH至2～5，离心分离，沉淀于10℃～60℃下减压脱溶10～35小时，过100～500μm筛，得粗β-葡聚糖；
④将粗β-葡聚糖加入到5～10倍体积的去离子水中，加热至30℃～50℃，搅拌溶解，然后加入同体积的异丙醇，于30℃～50℃搅拌10～30分钟，离心分离；沉淀于10℃～60℃下减压脱容10～35小时，过100～500μm筛，得精制β-葡聚糖。
2.如权利要求1所述从谷物麸皮中提取β-葡聚糖的方法，其特征在于：所述谷物麸皮为青稞、燕麦或莜麦的麸皮。
3.如权利要求1所述从谷物麸皮中提取β-葡聚糖的方法，其特征在于：步骤③所述得膜浓缩分离设备滤膜的孔径为200～500μm。
4.如权利要求1所述从谷物麸皮中提取β-葡聚糖的方法，其特征在于：所述离心分离的转速为1000～4000转/分。
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Effective date of registration: 20091023 Address after: Lanzhou, Gansu province (high tech Development Zone) 808 Zhang Yue beach, zip code: 730010 Applicant after: Tibet Qizheng Original Ecological Health Products Co., Ltd. Address before: C8, Les Loges Du Park Hotel, 6 Zaki West Road, West Road, Tibet, China (P.O. Box 14-081), postcode: 850000 Applicant before: Yutuo Tibetan Medicine Research Co., Ltd., Tibet |
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| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CP03 | Change of name, title or address |
Address after: 851400 No. 11, Linqionggang Road, Lhasa Economic and Technological Development Zone, Tibet Autonomous Region Patentee after: Tibet Qizheng Highland Barley Health Technology Co., Ltd. Address before: 730010 Zhangsutan 808, Chengguan District High-tech Development Zone, Lanzhou City, Gansu Province Patentee before: Tibet Tianmaili Health Food Co., Ltd. |
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| CP03 | Change of name, title or address |