CN105777932A - 一种具有辅助降血糖功效的低分子量青稞β-葡聚糖的制备方法 - Google Patents

一种具有辅助降血糖功效的低分子量青稞β-葡聚糖的制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种具有辅助降血糖功效的低分子量青稞β‑葡聚糖的制备方法，是首先将青稞米粉碎成10～50目，然后加水，调节pH至8～10后提取1～2小时，回调pH至2.5～6.5，离心后在上清液中加入物料总重量0.1～0.4%的α‑淀粉酶酶解40～60分钟，再加入物料总重量0.13%～0.4%糖化酶酶解40～60分钟，灭酶，离心、浓缩后醇沉、干燥即得数均分子量为6.827×102～7.968×104β‑葡聚糖，产品中总多糖含量≥50%，β‑葡聚糖含量≥15%，在水和50度乙醇中的溶解量≥150mg/L；本发明的低分子量青稞β‑葡聚糖具有很好的辅助降血糖功效，并且更方便在各种功能性食品中进行应用。

Description

一种具有辅助降血糖功效的低分子量青稞β-葡聚糖的制备方法
技术领域
本发明提供了一种具有辅助降血糖功效的低分子量青稞β-葡聚糖的制备方法，本发明制备的青稞β-葡聚糖的数均分子量(Mn)为6.827×102～7.968×104g/mol，经药效学试验验证，本发明方法制备的低分子量青稞β-葡聚糖具有很好的辅助降血糖功效，并且更方便在各种功能性食品中进行应用。
背景技术
青稞隶属禾本科，大麦属，它是世界上最古老的粮食作物之一，又是家畜饲料和工业原料作物。青稞是世界上麦类作物中β-葡聚糖含量最高的作物，据检测，青稞中β-葡聚糖平均含量为6.57％，优良品种中β-葡聚糖含量甚至可以达到8.6％。青稞因其富含有β-葡聚糖，近年来在食品科学研究上受到很大关注，据现代医学和营养学研究发现，青稞β-葡聚糖具有以下功效：①降低胆固醇，②调节血糖，③调节机体免疫力，④改变肠道系统中微生物群落组成，⑤降低血压。但是目前并没有人对青稞中的β-葡聚糖进行系统研究，有文献报道，青稞β-葡聚糖具有辅助降血糖的功效，但是并未有人对这一功效进行验证，同时也未筛选具有辅助降血糖功能的β-葡聚糖的分子量，导致没有实证支持具有降血糖功效的β-葡聚糖的产品开发。目前行业中对青稞β-葡聚糖的研究还不充分，在行业中的应用也较为低端，大多数仅限于将青稞进行粉碎后制作饼干、面条等普通食品，不能作为制备功能性食品的原料。
目前也有一些关于青稞中β-葡聚糖的制备方法的专利公开，但是大多数方法一般仅仅是对其中的β-葡聚糖进行粗提，制备所得的β-葡聚糖分子量一般比较大，产品的功能不是很明确，也很难在食品中进行应用。因此，深入研究青稞β-葡聚糖的降血糖功效，并将其制备成可以方便应用于各种高端功能性食品中的制品，对青稞高端产品的开发利用具有十分重要的意义。
发明内容
本发明的目的就是针对目前青稞β-葡聚糖的应用仅限于低端产品，还没有人对青稞β-葡聚糖的降血糖功效进行进一步研究并确认其有效分子量范围，并且常规方法制备的产品分子量较大，很难在制品中进行应用的问题，提供一种具有辅助降血糖功效的低分子量青稞β-葡聚糖的制备方法。
本发明的一种具有辅助降血糖功效的低分子量青稞β-葡聚糖的制备方法，所述青稞β-葡聚糖的数均分子量Mn为6.827×102～7.968×104，其制备方法包括以下步骤：
(1)原材料处理：取干燥的青稞米，称量后粉碎成10～50目的粗粉，投入提取罐中；
(2)提取：将原材料3～5倍的纯净水搅匀，投入提取罐中，补水至原材料重量的9～12倍，用饱和碳酸钠溶液调节pH至8.0～10.0，60～85℃下搅拌提取1～2小时；提取完成后，提取液倒入盛料筒中，用质量分数为10％的盐酸溶液调节提取液pH至2.5～6.5，搅拌均匀，静置过夜冷却；
(3)离心：用三足台式离心机离心，转速为1000～3000r/min，合并离心上清液；
(4)酶解：①淀粉酶酶解：上清液中加入物料总重量0.1～0.4％的α-淀粉酶，40～60℃活化30分钟，用饱和碳酸钠溶液调节pH至4.0～6.0，40～60℃下搅拌40～60分钟；②糖化酶酶解：加入物料总重量0.13％～0.4％的糖化酶，质量分数为10％的盐酸溶液调节pH至2.5～6.5，40～60℃搅拌40～60分钟；③灭酶：酶解结束后，煮沸30～60分钟，冷却；
(5)离心：采用三足台式离心机离心，转速1000～3000r/min，合并离心上清液；
(6)浓缩：采用球型浓缩器将离心清液在65～85℃下减压浓缩至生药比1:0.5～2；
(7)醇沉：浓缩液冷却后，缓慢搅拌下加入物料总重量2～4倍质量分数为95％乙醇，静置；
(8)干燥：抽滤分离醇沉沉淀和清夜，沉淀置于热风循环干燥箱中于65～85℃下干燥至水分≤8％，称重，粉碎，即得数均分子量Mn为6.827×102～7.968×104的青稞β-葡聚糖，产品中总多糖含量≥50％，β-葡聚糖含量≥15％，在水和50度乙醇中的溶解量≥150mg/L。
所述α-淀粉酶的酶活力为4×103u/g，所述糖化酶的酶活力为105u/g。
本发明方法在制备过程中，首先将青稞米粉碎至10-50目，然后在pH8.0～10.0的碱性环境下提取1-2小时，以增加目标产物的水溶性，从而增加青稞β-葡聚糖的产率，然后回调pH至2.5～6.5，静置过夜，除去提取液中的杂质，再离心后在上清液中首先加入α-淀粉酶，水解上清液中可溶性淀粉，使可溶性淀粉水解为多糖，然后在酶解液中加入糖化酶，使大分子多糖分解为低分子葡聚糖，酶解结束后灭酶，离心，浓缩，醇沉，干燥，即得本发明的低分子量青稞β-葡聚糖。
为验证本发明的低分子量青稞β-葡聚糖具有辅助降血糖功效，本发明按照《保健食品辅助降血糖试验方法》进行试验验证，结果表明本发明制备的青稞β-葡聚糖具有辅助降血糖功效。
本发明与现有技术相比，具有以下优点：
1.对具有辅助降血糖功效的青稞β-葡聚糖的分子量进行了进一步的研究和确认，明确了低分子量的青稞β-葡聚糖具有辅助降血糖功效；
2.针对低分子量青稞β-葡聚糖设计了针对性的制备方法，为低分子量青稞β-葡聚糖的工业化生产提供了依据；
3.由于本发明方法制备的产品是低分子量青稞β-葡聚糖，更方便在各类制品中应用，为青稞β-葡聚糖在高端产品中应用打下了良好的基础。
附图说明
图1是本发明的工艺流程方框图；
图2是本发明青稞β-葡聚糖辅助降血糖实验中高血糖模型实验组各小组平均血糖值对测量时间的图；
图3是本发明青稞β-葡聚糖辅助降血糖实验中高血糖模型实验组各小组小鼠对血糖曲线下面积的图。
具体实施方式
下面以在劲牌生物医药有限公司生产本发明的低分子量青稞β-葡聚糖为例，来详细解释本发明，但是它们不以任何方式限制本发明，具体生产情况如下：
实施例1
参见图1，(1)原材料处理：取干燥的青稞米60kg，称量后粉碎成50目的粗粉，投入提取罐中；
(2)提取：将180L纯净水搅匀，投入提取罐中，补水至540L，用饱和碳酸钠溶液调节pH至10.0，75℃下搅拌提取1.5小时；提取完成后，提取液倒入盛料筒中，用质量分数为10％的盐酸溶液调节提取液pH至4.5，搅拌均匀，静置过夜冷却；
(3)离心：用三足台式离心机离心，转速为3000r/min，合并离心上清液；
(4)酶解：①淀粉酶酶解：上清液中加入240gα-淀粉酶，60℃活化30分钟，用饱和碳酸钠溶液调节pH至5，50℃下搅拌60分钟；②糖化酶酶解：加入240g糖化酶，用质量分数为10％的盐酸溶液调节pH至4.5，50℃搅拌60分钟；③灭酶：酶解结束后，煮沸60分钟，冷却；
(5)离心：采用三足台式离心机离心，转速3000r/min，合并离心上清液1090L；
(6)浓缩：采用球型浓缩器将离心清液在75℃下减压浓缩至生药比1:1，得60L浓缩液；
(7)醇沉：浓缩液冷却后，缓慢搅拌下加入240L质量分数为95％乙醇，静置；
(8)干燥：抽滤分离醇沉沉淀和清夜，沉淀置于热风循环干燥箱中于65～85℃下干燥至水分≤8％，称重，粉碎，即得2.05kg数均分子量Mn为6.827×102的青稞β-葡聚糖，产品中总多糖含量≥50％，β-葡聚糖含量≥16.9％，在水和50度乙醇中的溶解量≥150mg/L。
经辅助降血糖实验表明，本实施例制得的青稞β-葡聚糖降血糖效果最佳。
实施例2
(1)原材料处理：取干燥的青稞米30kg，称量后粉碎成20目的粗粉，投入提取罐中；
(2)提取：将90L纯净水搅匀，投入提取罐中，补水至270L，用饱和碳酸钠溶液调节pH至9.0，75℃下搅拌提取1.5小时；提取完成后，提取液倒入盛料筒中，用质量分数为10％的盐酸溶液调节提取液pH至4.5，搅拌均匀，静置过夜冷却；
(3)离心：用三足台式离心机离心，转速为1500r/min，合并离心上清液；
(4)酶解：①淀粉酶酶解：上清液中加入60gα-淀粉酶，50℃活化30分钟，用饱和碳酸钠溶液调节pH至5.0，50℃下搅拌40分钟；②糖化酶酶解：加入60g糖化酶，用质量分数为10％的盐酸溶液调节pH至4.5，50℃搅拌50分钟；③灭酶：酶解结束后，煮沸45分钟，冷却；
(5)离心：采用三足台式离心机离心，转速1500r/min，合并离心上清液590L；
(6)浓缩：采用球型浓缩器将离心清液在75℃下减压浓缩至生药比1:1，得30L浓缩液；
(7)醇沉：浓缩液冷却后，缓慢搅拌下加入90L质量分数为95％乙醇，静置；
(8)干燥：抽滤分离醇沉沉淀和清夜，沉淀置于热风循环干燥箱中于65～85℃下干燥至水分≤8％，称重，粉碎，即得1.05kg数均分子量Mn为5.964×103的青稞β-葡聚糖，产品中总多糖含量≥50％，β-葡聚糖含量≥40.4％，在水和50度乙醇中的溶解量≥150mg/L。
实施例3
(1)原材料处理：取干燥的青稞米50kg，称量后粉碎成30目的粗粉，投入提取罐中；
(2)提取：将150L纯净水搅匀，投入提取罐中，补水至450L，用饱和碳酸钠溶液调节pH至10.0，85℃下搅拌提取2小时；提取完成后，提取液倒入盛料筒中，用质量分数为10％的盐酸溶液调节提取液pH至6.5，搅拌均匀，静置过夜冷却；
(3)离心：用三足台式离心机离心，转速为3000r/min，合并离心上清液；
(4)酶解：①淀粉酶酶解：上清液中加入150gα-淀粉酶，60℃活化30分钟，用饱和碳酸钠溶液调节pH至6.5，60℃下搅拌50分钟；②糖化酶酶解：加入165g糖化酶，用质量分数为10％的盐酸溶液调节pH至4.5，60℃搅拌60分钟；③灭酶：酶解结束后，煮沸60分钟，冷却；
(5)离心：采用三足台式离心机离心，转速3000r/min，合并离心上清液910L；
(6)浓缩：采用球型浓缩器将离心清液在85℃下减压浓缩至生药比1:0.5，得25L浓缩液；
(7)醇沉：浓缩液冷却后，缓慢搅拌下加入100L质量分数为95％乙醇，静置；
(8)干燥：抽滤分离醇沉沉淀和清夜，沉淀置于热风循环干燥箱中于65～85℃下干燥至水分≤8％，称重，粉碎，即得1.75kg数均分子量Mn为3.496×103的青稞β-葡聚糖，产品中总多糖含量≥50％，β-葡聚糖含量≥25.9％，在水和50度乙醇中的溶解量≥150mg/L。
实施例4
(1)原材料处理：取干燥的青稞米10kg，称量后粉碎成10目的粗粉，投入提取罐中；
(2)提取：将30L纯净水搅匀，投入提取罐中，补水至90L，用饱和碳酸钠溶液调节pH至8.0，60℃下搅拌提取1小时；提取完成后，提取液倒入盛料筒中，用质量分数为10％的盐酸溶液调节提取液pH至2.5，搅拌均匀，静置过夜冷却；
(3)离心：用三足台式离心机离心，转速为1000r/min，合并离心上清液；
(4)酶解：①淀粉酶酶解：上清液中加入10gα-淀粉酶，40℃活化30分钟，用饱和碳酸钠溶液调节pH至4.0，40℃下搅拌60分钟；②糖化酶酶解：加入13g糖化酶，用质量分数为10％的盐酸溶液调节pH至2.5，40℃搅拌60分钟；③灭酶：酶解结束后，煮沸30分钟，冷却；
(5)离心：采用三足台式离心机离心，转速1000r/min，合并离心上清液210L；
(6)浓缩：采用球型浓缩器将离心清液在65℃下减压浓缩至生药比1:2，得20L浓缩液；
(7)醇沉：浓缩液冷却后，缓慢搅拌下加入40L质量分数为95％乙醇，静置；
(8)干燥：抽滤分离醇沉沉淀和清夜，沉淀置于热风循环干燥箱中于65～85℃下干燥至水分≤8％，称重，粉碎，即得0.38kg数均分子量Mn为7.968×104的青稞β-葡聚糖，产品中总多糖含量≥50％，β-葡聚糖含量≥54％，在水和50度乙醇中的溶解量≥150mg/L。
将上述实施例1-4制得的青稞β-葡聚糖分别编号为A、B、C、D，送到青岛科标化工分析检测有限公司检测其各自的数均分子量(Mn)，重均分子量(Mw)，Z均分子量(mz)，分子量分布指数(PD)，所得检测结果见下表一：
表一：实施例1-4中β-葡聚糖中的分子量检测结果
为验证上述实施例1-4制得的A、B、C、D四个样品青稞β-葡聚糖的辅助降血糖功效，按照《保健食品辅助降血糖试验方法》进行试验验证，具体试验情况如下：
青稞β-葡聚糖辅助降血糖实验
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 样品：
实施例1-4制得的青稞β-葡聚糖(分别编号为A、B、C、D)，灰白色粉状，纯度分别为A(16.9％)、B(40.4％)、C(25.9％)、D(54％)，劲牌生物医药有限公司提供，后采用随机盲样法进行分组实验。
1.1.2 实验材料
SD大鼠(SPF等级，湖南斯莱克景达实验动物有限公司)
KM小鼠(SPF等级，湖南斯莱克景达实验动物有限公司)
辐照消毒垫料(湖南斯莱克景达实验动物有限公司)
辐照大小鼠繁殖饲料(湖南斯莱克景达实验动物有限公司)
高脂饲料(ResearchDiets)
1.1.3试剂及溶液
链脲佐菌素(Sigma)，血脂四项试剂盒(南京建成生物工程研究所)，
血脂康胶囊(北大维信)，人体推荐量(130mg/Kg)。
柠檬酸缓冲液：称取2.1g柠檬酸(MW:210.4)溶于双蒸水，定容至100mL，配成A液。称取2.94g柠檬酸钠(MW:294.10)溶于双蒸水，定容至100mL，配成B液。用时将A液和B液1:1.32混合，即配成柠檬酸缓冲液。
链脲佐菌素溶液：用柠檬酸缓冲液配置，现配现用，遮光置于冰上，30分钟内，必须注射完毕。
1.1.4仪器设备
JPS系列手持式全血葡萄糖测试仪
(JPS-6型，北京怡成生物电子技术有限公司)
血糖试条(虹吸式，北京怡成生物电子技术股份有限公司)
实验动物笼具、水瓶(苏州市苏杭科技器材有限公司)
酶标仪(GO型，Thermo Scientific公司)
实验动物笼具、水瓶(苏州市苏杭科技器材有限公司)
一次性使用无菌注射器(1mL、2mL)
大小鼠灌胃针(武汉恒康医疗器械有限公司)
1.2方法
1.2.1 青稞葡聚糖辅助降血糖功能评价
1、正常小鼠降血糖实验
购回KM小鼠，适应性饲养一周后，选健康成年KM小鼠按禁食7～8小时的血糖水平分组，随机选1个对照组和4个样品组(预实验每组用6只小鼠)。对照组给予同体积溶剂，4个样品组分别给予高剂量浓度(20倍人体推荐量)受试样品青稞葡聚糖(A、B、C、D)，连续35天，经口灌胃，测空腹血糖值(禁食同实验前)，比较各组动物血糖值。
2、高血糖模型小鼠降血糖实验
购回KM小鼠，适应性饲养1周后，随机取15只动物禁食7－8小时，测空腹血糖，作为该批次动物基础血糖值。随后确定模型鼠数量，将待造模小鼠禁食12小时以上(自由饮水)，注射链脲佐菌素(用前新鲜配制)造模，小鼠腹腔注射80mg/kg.BW，连续注射两天。5－7天后小鼠禁食7－8小时，测血糖，血糖值10－25mmol/L的小鼠，判断高血糖模型成功。
选成功的高血糖模型小鼠按禁食7－8小时的血糖水平分组，随机选1个模型对照组和4个样品组(组间差不大于1.1mmol/L)。样品组给予青稞葡聚糖(A、B、C、D)，模型对照组给予同体积溶剂，经口灌胃，连续30天，测空腹血糖值(禁食同实验前)，比较各组动物血糖值及血糖下降百分率。
3、高血糖模型小鼠糖耐量实验
高血糖模型小鼠降血糖实验，连续30天，测空腹血糖值(禁食同实验前)，作为给葡萄糖(即0小时)血糖值，15－20分钟后各组经口给予葡萄糖2.0g/kg.BW，测定给葡萄糖后各组0.5、2小时的血糖值，观察模型对照组与受试样品组给葡萄糖后各时间点(0、0.5、2小时)血糖值及血糖曲线下面积的变化。
1.2.2 青稞葡聚糖辅助降血脂功能评价
购回SD大鼠，适应性饲养1周后，按体重随机分成2组，分别为空白对照组、模型组，6只大鼠给予普通饲料(15g/只)作为空白对照组，36只给予高脂饲料(15g/只)并辅加1倍普通饲料作为高脂模型组。每周称量体重1次。
模型组饲养2周后，空白对照组和模型组大鼠不禁食采血(尾部)，采血后尽快分离血清，测定血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平。根据TC水平将模型组随机分成6组，分别为模型对照组、阳性药物对照组、药物A组、药物B组、药物C组、药物D组，分组后空白对照组和各模型组比较TC、TG、LDL-C、HDL-C差异均无显著性。
分组后，阳性药物对照组、药物A组、药物B组、药物C组、药物D组，每天经口灌胃，阳性药物(血脂康)、受试样品青稞葡聚糖(A、B、C、D)，空白对照组和模型对照组同时给予同体积的相应溶剂，空白对照组继续给予普通饲料，模型组继续给予模型饲料并辅加1倍普通饲料，并定期称量体重，于实验结束时不禁食采血，采血后尽快分离血清，测定血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平。
2 结果
2.1.1 青稞葡聚糖辅助降血糖功能评价
1、正常小鼠降血糖实验
灌胃35天后，各组血糖平均值，如表二所示。
表二：正常小鼠实验组各小组灌胃35天青稞葡聚糖后的血糖平均值
小鼠编组 小鼠血糖平均值(mmol/L)
正1(对照组) 6.7
正2(灌喂A样品) 7.0
正3(灌喂B样品) 8.0
正4(灌喂C样品) 7.9
正5(灌喂D样品) 8.1
结果分析：
灌喂青稞葡聚糖样品A的小鼠血糖平均值与对照组小鼠血糖平均值相比无显著差异；灌喂青稞葡聚糖样品B、C、D样品与对照组小鼠血糖平均值相比有所升高。
2、高血糖模型小鼠降血糖实验
(1)建模成功后各组小鼠血糖值，如表三所示。
表三：高血糖模型实验组各小组初始血糖平均值
分组 各组小鼠血糖平均值(mmol/L) 血糖高于正常对照组(％)
正常对照组 8.1 0
模一 12.4 53.9
模二 11.0 35.9
模三 11.7 44.3
模四 11.6 43.0
模五 11.8 45.5
备注：分组满足模型组组间差不大于1.1mmol/L的要求。
(2)灌喂样品N天后，各组小鼠血糖值，如表四所示。
表四：高血糖模型实验组各小组灌胃青稞葡聚糖N天后的血糖平均值
结果分析：
与模型对照组血糖水平相比，灌喂青稞葡聚糖样品A、B、C、D组的模型鼠血糖水平有所降低，且血糖水平降幅随着时间延长而增大。可初步判定A、B、C、D四个样品降低动物空腹血糖结果为阳性，且A辅助降血糖效果最明显。
3、高血糖模型小鼠糖耐量实验
糖耐量实验各组血糖平均值，如表五所示。
表五：高血糖模型实验组各小组糖耐量实验血糖平均值
以各组小鼠平均血糖值对测量时间作图见图2所示；
以各组小鼠对血糖曲线下面积作图见图3所示。
结果分析：
灌喂青稞葡聚糖样品A、B、C、D组的模型鼠糖耐量试验中血糖峰值和血糖曲线下面积介于正常对照组和模型对照组之间，且与模型对照组相比降幅明显。可以初步判定灌喂青稞葡聚糖样品A、B、C、D组的模型鼠糖耐量实验结果为阳性。
3.小结
根据《辅助降血糖功能评价方法》中结果判定方法：“空腹血糖和糖耐量二项指标中一项指标阳性，且对正常动物空腹血糖无影响，即可判定该受试样品辅助降血糖功能动物实验结果阳性”。
正常组降血糖实验中，仅青稞葡聚糖样品A的小鼠血糖平均值与对照组小鼠血糖平均值相比无显著差异；灌喂青稞葡聚糖样品B、C、D样品与对照组小鼠血糖平均值相比有所升高。
模型组降血糖实验中，与模型对照组血糖水平相比，灌喂青稞葡聚糖样品A、B、C、D组的模型鼠血糖水平有所降低，且血糖水平降幅随着时间延长而增大。可判定A、B、C、D四个样品降低动物空腹血糖结果为阳性，且A辅助降血糖效果最明显。
根据上述实验数据，可判断样品A具有一定的辅助降低血糖功能，其次是样品D、C、B。说明按照本发明方法生产的青稞β-葡聚糖的确具有辅助降血糖功效。

Claims (2)

1.一种具有辅助降血糖功效的低分子量青稞β-葡聚糖的制备方法，其特征在于：所述青稞β-葡聚糖的数均分子量Mn为6.827×102～7.968×104，其制备方法包括以下步骤：
（1）原材料处理：取干燥的青稞米，称量后粉碎成10～50目的粗粉，投入提取罐中；
（2）提取：将原材料3～5倍的纯净水搅匀，投入提取罐中，补水至原材料重量的9～12倍，用饱和碳酸钠溶液调节pH至8.0～10.0，60～85℃下搅拌提取1～2小时；提取完成后，提取液倒入盛料筒中，用质量分数为10%的盐酸溶液调节提取液pH至2.5～6.5，搅拌均匀，静置过夜冷却；
（3）离心：用三足台式离心机离心，转速为1000～3000r/min，合并离心上清液；
（4）酶解：①淀粉酶酶解：上清液中加入物料总重量0.1～0.4%的α-淀粉酶，40～60℃活化30分钟，用饱和碳酸钠溶液调节pH至4.0～6.0，40～60℃下搅拌40～60分钟；②糖化酶酶解：加入物料总重量0.13%～0.4%的糖化酶，质量分数为10%的盐酸溶液调节pH至2.5～6.5，40～60℃搅拌40～60分钟；③灭酶：酶解结束后，煮沸30～60分钟，冷却；
（5）离心：采用三足台式离心机离心，转速1000～3000r/min，合并离心上清液；
（6）浓缩：采用球型浓缩器将离心清液在65～85℃下减压浓缩至生药比1:0.5～2；
（7）醇沉：浓缩液冷却后，缓慢搅拌下加入物料总重量2～4倍质量分数为95%乙醇，静置；
（8）干燥：抽滤分离醇沉沉淀和清夜，沉淀置于热风循环干燥箱中于65～85℃下干燥至水分≤8%，称重，粉碎，即得数均分子量Mn为6.827×102～7.968×104的青稞β-葡聚糖，产品中总多糖含量≥50%，β-葡聚糖含量≥15%，在水和50度乙醇中的溶解量≥150mg/L。
2.根据权利要求1所述的一种具有辅助降血糖功效的低分子量青稞β-葡聚糖的制备方法，其特征在于：所述α-淀粉酶的酶活力为4×103u/g，所述糖化酶的酶活力为105u/g。
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