CN101119987A

CN101119987A - 新化合物

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Publication number: CN101119987A
Application number: CNA2005800481778A
Authority: CN
Inventors: 巴林特·加博斯; 迈克尔·伦德克维斯特; 马格努斯·芒克阿夫罗森肖尔德; 艾戈尔·沙莫夫斯基; 帕沃尔·兹拉托伊德斯基
Original assignee: AstraZeneca AB
Current assignee: AstraZeneca AB
Priority date: 2004-12-17
Filing date: 2005-12-14
Publication date: 2008-02-06
Also published as: WO2006065215A1; JP2008524210A; EP1831199B1; NO20073572L; UA90285C2; AU2005317286B2; US20080293743A1; SE0403085D0; TW200635917A; RU2376301C2; AU2005317286A1; AR051795A1; BRPI0517035A; KR20070090924A; ATE545642T1; ES2380670T3; NZ555831A; RU2007126746A; US20100256166A1; EP1831199A1

Abstract

本发明提供式(I)的化合物，式中R¹，R²，A，A¹和B如说明书中所定义；它们的制备方法；包含它们的药物组合物；该药物组合物的制备方法；它们的在治疗中的用途。该化合物可用作MMP抑制剂。

Description

新化合物

本发明涉及新乙内酰脲衍生物，它们的制备方法，含有它们的药物组合物以及它们在治疗中的用途。

金属蛋白酶是蛋白酶类(酶)的超家族，其数量近年来显著地增加。基于结构和功能性的考虑，将这些酶已经分为家族和亚家族，如N.M.Hooper(1994)FEBS Letters 354：1-6中所述。金属蛋白酶的例子包括基质金属蛋白酶(MMPs)例如胶原酶(MMP1，MMP8，MMP13)，明胶酶(MMP2，MMP9)，溶基质蛋白酶(stromelysins)(MMP3，MMP10，MMP11)，基质溶解因子(matrilysin)(MMP7)，金属弹性蛋白酶(MMP12)，成釉溶素(enamelysin)(MMP19)，MT-MMPs(MMP14，MMP15，MMP16，MMP17)；reprolysin或釉质溶素(adamalysin)或MDC家族，其包括分泌酶和脱落酶(sheddases)例如TNF转化酶(ADAM 10和TACE)；龙虾肽酶家族(astacinfamily)，包括酶例如溶胶原加工蛋白酶(PCP)；及其它金属蛋白酶例如可聚蛋白聚糖(aggrecanase)，内皮素转化酶家族和血管紧张肽转化酶家族。

人们认为金属蛋白酶在涉及组织再造(例如胚胎发育、骨形成和月经期间的子宫再造)的生理病过程的多血症中是重要的。这基于金属蛋白酶断裂大量基质底物例如胶原、蛋白多糖和纤连蛋白的能力。也认为金属蛋白酶在生物学重要细胞介质(例如肿瘤坏死因子(TNF))的加工或分泌、以及生物学重要膜蛋白质(例如低亲合性IgE受体CD23)的后翻译蛋白酶解加工或脱落中是重要的(对于更全面的列举，见N.M.Hooper等人，(1997)Biochem J.321：265-279)。

金属蛋白酶与许多疾病或病症有关。抑制一或多种金属蛋白酶的活性可以在下列这些疾病或病症中是非常有益的，例如：各种炎症性和变态反应性疾病例如，关节炎症(特别是类风湿性关节炎，骨关节炎和痛风)，胃肠道炎症(特别是炎症性肠病，溃疡性结肠炎和胃炎)，皮肤炎症(特别是牛皮癣，湿疹，皮炎)；肿瘤转移或侵入；与细胞外基质的非受控降解有关的疾病，例如骨关节炎；骨再吸收性疾病(例如骨质疏松症和变形性骨炎)；与异常血管生成有关的疾病；与糖尿病、牙周病(例如龈炎)、角膜溃疡形成、皮肤溃疡、手术后病症(例如结肠联结现象)和皮肤创伤愈合有关的胶原再造增加；中枢和外周神经系统的脱髓鞘疾病(例如多发性硬化)；阿尔茨海默氏病；在心血管疾病例如再狭窄和动脉粥样硬化中观察到的细胞外基质再造；哮喘；鼻炎；和慢性阻塞性肺病(COPD)。

MMP12，又称为巨噬细胞弹性蛋白酶或金属弹性酶，最初由Shapiro等人在小鼠中克隆出[1992，Journal of Biological Chemistry 267：4664]，并且在1995年由同一小组在人类中克隆出。MMP12优先在活化巨噬细胞中表达，并且已经证明，可以从吸烟者的肺泡巨噬细胞中分泌[Shapiro等人，1993，Journal of Biological Chemistry，268：23824]，以及从动脉粥样硬化病变的泡沫细胞中分泌[Matsumoto等人，1998，Am J Pathol 153：109]。COPD的小鼠模型基于用香烟挑战小鼠，小鼠吸烟六个月，一天两只香烟，一周六天。这种处理之后，野生型小鼠出现肺气肿。当在该模型中对MMP12基因敲除小鼠进行测试时，它们没有出现显著的肺气肿，这强烈表明MMP12是COPD发病机理的关键酶。MMPs例如MMP12在COPD(肺气肿和支气管炎)中的作用已经，在Anderson和Shinagawa，1999，Current Opinion inAnti-inflammatory and Immunomodulatory Investigational Drugs 1(1)：29-38中进行了讨论。最近发现，吸烟增加了在人类的颈动脉斑点中的巨噬细胞渗透和巨噬细胞衍生的MMP-12的表达，Kangavari[Matetzky S，Fishbein MC等人，Circulation 102：(18)，36-39Suppl.S，Oct 31，2000]。

MMP9(明胶酶B；92kDa TypeIV胶原酶；92kDa明胶酶)是一种分泌的蛋白质，其在1989年首先被纯化、然后克隆和排序[S.M.Wilhelm等人(1989)J.Biol Chem.264(29)：17213-17221；published erratum in J.Biol Chem.(1990)265(36)：22570]。MMP9的最近综述对于这种蛋白酶的详细信息和参考文献提供了出色来源：T.H.Vu&Z.Werb(1998)(In：Matrix Metalloproteinases.1998.Edited by W.C.Parks&R.P.Mecham.pp 115-148.Academic Press.ISBN0-12-545090-7)。下列要点来自T.H.Vu&Z.Werb(1998)的综述。

MMP9的表达通常被限制在几种细胞类型中，包括滋养母细胞、破骨细胞、嗜中性白细胞和巨噬细胞。然而，它的表达能在这些相同细胞和在其它细胞类型中由一些介质引起，包括细胞与生长因子或细胞因子的接触。这些是常常在初始炎症性反应中牵涉的相同介质。如同其它分泌的MMPs一样，MMP9被释放为非活性的酶原，随后酶原断裂，形成酶促的活性酶。这种体内活化所需的蛋白酶不是已知的。活性MMP9相对于非活性酶的平衡通过与一种天然存在的蛋白TIMP-1(金属蛋白酶-1的组织抑制剂)相互作用在体内进一步得到调节。TIMP-1与MMP9的C-末端区域结合，导致MMP9的催化区域的抑制作用。ProMMP9的诱发表达的平衡、前MMP9至活性MMP9的裂解和TIMP-1的存在结合在一起，以测定存在于局部位点的催化活性MMP9的量。蛋白水解活性MMP9攻击包括明胶、弹性蛋白和天然IV型和V型胶原的底物；它对天然I型胶原、粘蛋白或层粘连蛋白没有活性。

存在大量的数据，这些数据牵涉MMP9在各种生理学和病理过程中的作用。生理学作用包括：在胚胎移植的最初阶段胚胎滋养母细胞经过子宫上皮侵入；在骨生长发育中的一些作用；和炎性细胞从血管系统递送到组织。

与源于其它人群的液体和AM上清液相比较，在源于未经治疗的哮喘患者的液体和AM上清液中MMP9的释放显著地增加，MMP9的释放是使用酶免疫分析法测定的[Am.J.Resp.Cell&Mol.Biol.，Nov 1997，17(5)：583-591]。在某些其它病理学病症中也已经观察到MMP9表达增加，由此在例如COPD、关节炎、肿瘤转移病变、阿尔茨海默氏病、多发性硬化、和导致急性冠状动脉病症(例如心肌梗塞)的动脉粥样硬化的斑点破裂等疾病过程中牵涉MMP9。

许多金属蛋白酶抑制剂是已知的(例如，参见下列针对MMP抑制剂的综述：Beckett R.P.and Whittaker M.，1998，Exp.Opin.Ther.Patents，8(3)：259-282，和Whittaker M.等人，1999，Chemical Reviews 99(9)：2735-2776)。

WO 02/074767公开了下式的乙内酰脲衍生物

其可以作为MMP抑制剂，特别是作为有效的MMP12抑制剂。

现在，我们公开了又一组乙内酰脲衍生物，它们是金属蛋白酶的抑制剂，并在抑制MMPs(例如MMP12和MMP9)中具有特别的益处。本发明的化合物具有有益的功效、选择性和/或药物动力学性质。

根据本发明，提供式(I)的化合物

式中

R¹表示环丁基或环丙基；所述环丙基任选被CH₃，CN或者一或两个氟原子进一步取代；

R²表示C_1-3烷基或环丙基；及

A，A¹和B独立地表示CH或N；

及其药用盐。

式(I)的化合物可以对映异构体的形式存在。应当理解，所有对映异构体、非对映异构体、外消旋体及其混合物均包括在本发明的范围内。

式(I)的化合物也可以各种互变异构的形式存在。所有可能的互变异构形式及其混合物均包括在本发明的范围内。

在一个实施方案中，R¹表示环丙基；所述环丙基任选被一或两个氟原子进一步取代。

在一个实施方案中，R¹表示环丙基。

在一个实施方案中，R²表示甲基或乙基。在一个实施方案中，R²表示甲基。

在一个实施方案中，A和A¹各自表示N。在另一实施方案中，A表示N和A¹表示CH。

在一个实施方案中，B表示N。在另一实施方案中，B表示CH。

在一个实施方案中，R¹表示环丙基；R²表示甲基或乙基；A和A¹各自表示N；及B表示CH。

在一个实施方案中，R¹表示环丙基；R²表示甲基或乙基；A和A¹各自表示N；及B表示N。

在一个实施方案中，R¹表示环丙基；R²表示甲基或乙基；A表示N和A¹表示CH；及B表示N。

在一个实施方案中，R¹表示环丙基；R²表示甲基或乙基；A表示N和A¹表示CH；及B表示CH。

在一个实施方案中，R¹表示环丙基；所述环丙基任选被CH₃，CN或者一或两个氟原子进一步取代；R²表示C_1-3烷基；及A，A¹和B独立地表示CH或N。

除非另外指出，本文中提及的术语″C_1-3烷基″表示具有1～3个碳原子的直链或支链烷基。该基团的实例包括甲基，乙基，正丙基及异丙基。

任选被一或两个氟原子进一步取代的环丙基环的实例包括1-氟-1-环丙基，2，2-二氟-1-环丙基和2，3-二氟-1-环丙基：

本发明的化合物的实例包括：

(5S)-5-({[6-(2-环丙基嘧啶-5-基)-3，4-二氢异喹啉-2(1H)-基]磺酰基}甲基)-5-甲基咪唑烷-2，4-二酮；

(5S)-5-({[6-(6-环丙基吡啶-3-基)-3，4-二氢-2，7-二氮杂萘-2(1H)-基]磺酰基}甲基)-5-甲基咪唑烷-2，4-二酮；

(5S)-5-({[6-(2-环丙基嘧啶-5-基)-3，4-二氢-2，7-二氮杂萘-2(1H)-基]磺酰基}甲基)-5-甲基咪唑烷-2，4-二酮；

(5S)-5-({[6-(2-环丙基嘧啶-5-基)-3，4-二氢-2，7-二氮杂萘-2(1H)-基]磺酰基}甲基)-5-乙基咪唑烷-2，4-二酮；

(5S)-5-({[6-(2-环丙基嘧啶-5-基)-3，4-二氢异喹啉-2(1H)-基]磺酰基}甲基)-5-乙基咪唑烷-2，4-二酮；

(5S)-5-({[6-(2-环丁基嘧啶-5-基)-3，4-二氢异喹啉-2(1H)-基]磺酰基}甲基)-5-甲基咪唑烷-2，4-二酮；

(5S)-5-甲基-5-({[6-[2-(1-甲基环丙基)嘧啶-5-基]-3，4-二氢异喹啉-2(1H)-基]磺酰基}甲基)咪唑烷-2，4-二酮；和

(5S)-5-环丙基-5-({[6-(2-环丙基嘧啶-5-基)-3，4-二氢异喹啉-2(1H)-基]磺酰基}甲基)咪唑烷-2，4-二酮；

及其药用盐。

各示例的化合物代表了本发明的具体而又独立的方面。

式(I)的化合物可以以对映体形式存在。因此，所有的对映体、非对映体、外消旋体和其混合物，包括在本发明范围内。各种旋光异构体可以使用传统方法例如分步结晶或HPLC通过分离化合物的外消旋混合物而进行分离。可供选择地，旋光异构体可以通过不对称合成或通过由光学活性原料合成而获得。

如果本发明的化合物中存在旋光异构体，作为本发明的独立具体实施方案，我们公开所有的独立光学活性形式和这些的组合，以及它们相应的外消旋体。

优选式(I)的化合物具有如下所示的(5S)-立体化学结构：

如果本发明的化合物中存在互变异构体，作为本发明的独立具体实施方案，我们公开所有的独立互变异构形式和这些的组合。

本发明包括盐形式的式(I)化合物。合适的盐包括那些与有机或无机酸或有机或无机碱形成的盐。这种盐通常是药用盐，而非药用盐在具体化合物的制备和纯化中具有应用性。这种盐包括酸加成盐例如盐酸盐，氢溴酸盐，柠檬酸盐，甲苯磺酸盐和马来酸盐，以及与磷酸或硫酸形成的盐。在另一个方面，合适的盐是碱盐(base salt)，例如碱金属盐，例如钠或钾盐，碱土金属盐，例如钙或镁盐，或有机胺盐，例如三乙胺盐。

式(I)化合物的盐可以通过游离碱或其另一种盐与一个或多个当量的合适酸或碱反应来形成。

式(I)的化合物是有用的，因为它们在动物中具有药理学活性，并由此作为药物是潜在可用的。尤其是，本发明的化合物是金属蛋白酶抑制剂，并由此可以用于治疗由MMP12和/或MMP9介导的疾病或病症，例如哮喘，鼻炎，慢性阻塞性肺疾病(COPD)，关节炎(例如类风湿性关节炎和骨关节炎)，动脉粥样硬化和再狭窄，癌症，侵入和转移病变，涉及组织损坏的疾病，髋关节移位的松驰，牙周病，纤维化疾病，梗塞和心脏病，肝脏和肾纤维化，子宫内膜异位，与细胞外基质弱化有关的疾病，心力衰竭，主动脉瘤，CNS相关的疾病例如阿尔茨海默氏病和多发性硬化(MS)，和血液学病症。

通常，本发明的化合物是MMP9和MMP12的有效抑制剂。本发明的化合物对较少抑制各种其它MMPs(MMP8、MMP14和MMP19)还显示出良好的选择性。

因此，本发明提供了用于治疗的如上文所限定的式(I)化合物、或其药用盐。

另一方面，本发明提供了如上文所限定的式(I)化合物、或其药用盐在制备用于治疗的药物中的用途。

另一方面，本发明提供了如上文所限定的式(I)化合物、或其药用盐在制备用于治疗其中抑制MMP12和/或MMP9是有益的疾病或病症的药物中的用途。

另一方面，本发明提供了如上文所限定的式(I)化合物、或其药用盐在制备用于治疗炎性疾病的药物中的用途。

另一方面，本发明提供了如上文所限定的式(I)化合物、或其药用盐在制备用于治疗阻塞性气道疾病例如哮喘或COPD的药物中的用途。

另一方面，本发明提供如上文所限定的式(I)的化合物或其药用盐，在制备用于治疗类风湿性关节炎、骨关节炎、动脉粥样硬化、癌症或多发性硬化的药物中的用途。

在本说明书的上下文中，除非有与此相反的具体说明，术语“治疗”也包括“预防”。应该相应地解释术语“治疗学的”和“治疗地”。

预防被认为与患有所述疾病或病症的先前发作的人员的治疗特别有关，或被认为与处于所述疾病或病症的增加危险之中的人员的治疗特别有关。处于形成具体疾病或病症的危险之中的人员，通常包括具有该疾病或病症的家族史的那些人员，或已经通过遗传学试验或筛选确定为对形成该疾病或病症特别敏感的那些人员。

本发明进一步提供了治疗其中抑制MMP12和/或MMP9是有益的疾病或病症的方法，该方法包括对患者给药治疗有效量的如上文所限定的式(I)化合物或其药用盐。

本发明也提供了治疗阻塞性气道疾病(例如哮喘或COPD)的方法，该方法包括对患者给药治疗有效量的如上文所限定的式(I)化合物或其药用盐。

当然，对于上述治疗用途，给药剂量随所采用的化合物、给药方式、所需要的治疗和所治疗的病症而变化。式(I)化合物/盐(活性组分)的每日剂量可以在0.001mg/kg至75mg/kg的范围，尤其是从0.5mg/kg至30mg/kg。这种日剂量可以根据需要以分份剂量的形式给予。典型地，单位剂型含有约1mg至500mg的本发明的化合物。

可以单独使用式(I)的化合物和其药用盐，但通常以药物组合物的形式给药，在药物组合物中，式(I)化合物/盐(活性组分)与可药用助剂、稀释剂或载体结合。根据给药方式，药物组合物优选包含0.05至99％w(重量百分比)、更优选0.10至70％w的活性组分，和1至99.95％w、更优选30至99.90％w的可药用助剂、稀释剂或载体，所有的重量百分数基于全部组合物。例如，选择和制备合适药物制剂的常规方法描述在下面中：“Pharmaceuticals-TheScience of Dosage Form Designs”，M.E.Aulton，Churchill Livingstone，1988。

由此，本发明也提供了一种药物组合物，其包括如上文所限定的式(I)化合物或其药用盐，以及结合有可药用助剂、稀释剂或载体。

本发明进一步提供了制备本发明药物组合物的方法，其包括将如上文所限定的式(I)化合物或其药用盐与可药用助剂、稀释剂或载体混合。

对所希望治疗的疾病或病症，可以以标准方式给药本发明的药物组合物，例如通过口服、局部、肠胃外、口腔、经鼻、阴道或直肠给药或通过吸入给药。为了达到上述目的，可以将本发明化合物通过本领域已知的方法配制成下列形式：例如片剂，胶囊，水溶液或油性溶液，混悬剂，乳状液，乳膏剂，油膏，凝胶剂，鼻腔喷雾剂(nasal spray)，栓剂，用于吸入的微细粉末或气雾剂，和用于肠胃外使用(包括静脉内，肌肉内或输液)的无菌水溶液或油性溶液或混悬剂或无菌乳状液。

除了本发明的化合物之外，本发明的药物组合物也可以含有对于治疗一或多种上文所指疾病或病症中有价值的药理学试剂例如“Symbicort”(商标)产品，或与其共同给药(同时或顺序)。

本发明进一步提供了制备如以上所定义的式(I)化合物或其药用盐的方法，其包括：

a)使式(II)的化合物和式(III)化合物(或其盐)反应

其中R²如式(I)所定义和L¹表示离去基团

其中R¹、A、A¹和B如式(I)中所定义；或

b)使式(V)的化合物与式(XII)的硼酸衍生物(boronic acid derivative)反应，

其中R²和B如式(I)中所定义，LG为离去基团；

其中R¹、A和A¹如式(I)中所定义；或

c)使式(IX)的化合物与碳酸铵和氰化钾反应

其中R¹、R²、A、A¹和B如式(I)中所定义；

以及之后任选地形成其药用盐。

在上述方法(a)中，合适的离去基团L¹包括卤素，特别是氯或三氟甲磺酸酯基。反应优选在合适的溶剂中，任选在加入碱的情况下，在环境温度至回流温度下进行合适的时间，典型地是0.5至16小时。通常，使用溶剂例如N，N-二甲基甲酰胺、吡啶、四氢呋喃、乙腈、N-甲基吡咯烷或二氯甲烷。当使用时，加入的碱可以是有机碱例如三乙胺，N，N-二异丙基乙基胺，N-甲基吗啉或吡啶，或无机碱例如碱金属碳酸盐。反应典型地在环境温度进行0.5至16小时，或如通过色谱或光谱方法测定的，直至已经达到反应结束。磺酰基卤化物与各种伯胺和仲胺的反应是文献中已知的，并且反应条件的改变对本领域的技术人员是显然的。

式(II)的磺酰氯(其中L¹表示氯，R²表示Me)已经公开于WO 02/074767中，在此将其引入作为参考。可使用类似的方法制备其中R²表示C_1-3烷基的相应化合物。

制备式(I)的化合物的合适方法以逆合成的方式描述于方案1中。

方案1

在方案1中，保护基团(PG)可以是氨基甲酸酯(例如叔丁氧基氨基甲酸酯)、酰胺(例如三氟乙酰基)或烷基(例如叔丁基或苯基)。离去基团(LG)可以是氯、溴、碘或三氟甲磺酸酯基。在钯催化的Suzuki偶合反应中，可以使用硼酸(boronic acid)或频哪醇硼酸酯(pinacolboronates)。可以利用标准Suzuki偶合反应(Chem.Rev.1995，95，2457)，在亲电子试剂(VIIa-c)和硼试剂(XII)之间，或者相反地，在亲电子试剂(XI)和硼试剂(VIIIa-c)之间制备中间体(IVa-c)。后者可使用标准Miyaura条件从(VIIa-c)获得(J.Org.Chem.1995，60，7508-7510)。使用氯化氢的甲醇溶液(PG＝叔丁氧羰基)或回流氯甲酸1-氯乙基酯/回流甲醇(PG＝叔丁基或苯基)(Synlett.1993，195-196)进行(IVa-c)的脱保护，得到盐酸盐形式的氨(IIIa-c)。游离碱可如下获得：用碱处理(IIIa-c)，然后用有机溶剂(例如乙酸乙酯或甲苯)萃取。在叔胺(例如三乙胺、吡啶或N，N-二异丙基乙胺)的存在下，使盐形式或碱形式的(IIIa-c)在合适溶剂(例如，乙腈、四氢呋喃、N-甲基吡咯烷或N，N-二甲基甲酰胺)中与磺酰氯(II)反应0.5至16小时，制备式(I)的化合物。

从中间体(IIIa-c)经过甲磺酰胺(Xa-c)和酮(IXa-c)制备式(I)化合物的可供选择的途径先前已经有描述(WO 02/074767)。简而言之，用甲磺酰氯和叔胺(例如三乙胺、吡啶或N，N-二异丙基乙胺)在合适的溶剂(二氯甲烷或四氢呋喃)中处理(IIIa-c)，制备甲磺酰胺(Xa-c)，接着可使用标准操作将其转化成酮(IXa-c)。在密封的小瓶中，于80-90℃加热酮(IXa-c)与碳酸铵和氰化钾的50％含水乙醇的溶液1至5小时，得到外消旋乙内酰脲，其可用手性色谱(例如在OD-H上用100％乙醇)拆分。

在第三条途径中，如上所述对中间体(VIIa-c)脱保护，得到盐酸盐形式的胺(VIa-c)。游离碱可通过用碱处理，然后用有机溶剂例如乙酸乙酯或甲苯萃取而分离。在叔胺(例如三乙胺、吡啶或N，N-二异丙基乙胺)的存在下，使盐形式或碱形式的(VIa-c)在合适溶剂(例如乙腈、四氢呋喃、N-甲基吡咯烷或N，N-二甲基甲酰胺)中与磺酰氯(II)反应0.5至16小时，制备手性磺酰胺(Va-c)。可使用标准的Suzuki条件，使磺酰胺(Va-c)与硼试剂(XII)偶合得到式(I)的化合物。

使用如下方法便利地制备中间体(VIIa-b)。

1，2，3，4-四氢异喹啉中间体(VIIa)

1，2，3，4-四氢异喹啉的合成方法是文献中公知的。典型的途径是苯甲醛与二乙缩醛保护的氨基乙醛的Pomeranz-Fritz反应(Org.React.1951，6，191)，得到异喹啉核，将其经过催化还原得到1，2，3，4-四氢-异喹啉。另一途径是2-苯基乙胺的氨基甲酸酯与磷酰氯在回流的甲苯或二甲苯中的Bischler-Napieralski反应(Org.React.1951，6，74)。利用氢化锂铝的四氢呋喃溶液(J.Med.Chem.1987，30(12)，2208-2216)或二硼烷的四氢呋喃溶液(J.Med.Chem.1980，23(5)，506-511)还原所得的环状苯甲酰胺，获得1，2，3，4-四氢异喹啉。Bischler-Napieralski反应的变化形式是Pictet-Spengler合成(Org.React.1951，6，151)。在该反应中，将2-苯基乙胺的酰胺、氨基甲酸酯或磺酰胺与低聚甲醛(paraformaldehyde)和强质子酸(例如三氟乙酸、硫酸)或路易斯酸(Lewis acid)在溶剂(例如，二氯甲烷、甲苯、甲酸)中加热，从而以单个步骤得到1，2，3，4-四氢异喹啉(Tetrahedron 2002，58(8)，1471-1478)。

方案2

试剂：

a)(CF₃CO)₂O，Et₃N+4℃b)(HCHO)_n，H₂SO₄，HOAc；RT.c)NaBH₄，EtOH；RT或NH₃(浓)，EtOH，加热

d)(t-BuOCO)₂O，Et₃N，DCM，RT

方案2

优选地，1，2，3，4-四氢异喹啉中间体(VIIa)用方案2中所示的途径A合成。该途径是N-[2-(3-溴苯)乙基]-2，2，2-三氟乙酰胺与甲醛和硫酸在乙酸中的Friedel-Craft型反应(Tetrahedron Lett.1996，37(31)，5453-5456)，该反应得到比例为3∶1的6-溴和8-溴异构体的混合物。用BOC基团代替三氟乙酰胺基团得到(VIIa)。该区域异构体(regioisomer)在此阶段不能便利地分离。

1，2，3，4-四氢-2，7-二氮杂萘中间体(VIIb)

与1，2，3，4-四氢异喹啉相反，文献中关于1，2，3，4-四氢-2，7-二氮杂萘合成方法的例子相当少。制备1，2，3，4-四氢-2，7-二氮杂萘的一个重要方法是，2，7-二氮杂萘的区域选择性催化还原(Eur.J.Med.Chem.Ther.1996，31(11)，875-888)。2，7-二氮杂萘及其某些衍生物的合成已经描述于该文献中。一个典型的途径包括几个步骤，从丙二腈与1，3-丙酮二羧酸二乙酯的酸催化缩合反应开始(J.Chem.Soc.1960，3513-3515；也参见J.Heterocycl.Chem.1970，7，419-421)。2，7-二氮杂萘的稍微不同制备途径包括氧化4-甲酰基-2，7-二氮杂萘，得到2，7-二氮杂萘-4-羧酸，接着进行脱羧反应(Synthesis 1973，46-47)。一种完全不同的方法是基于N-(乙氧羰基)-N-(丁-3-炔基)氨基-甲基吡嗪的内Diels-Alder反应，并在氨基甲酸酯基团水解之后得到1，2，3，4-四氢-2，7-二氮杂萘和5，6，7，8-四氢-1，7-二氮杂萘的混合物(WO 02/064574)。

方案3

试剂：

a)LiCH₃NCH₂CH₂N(CH₃)₂，THF，-70℃，b)n-BuL₁己烷溶液，-70℃，然后I₂.c)TMS-乙炔，PdCl₂(PPH₃)₂，CuI，Et₃N，THF，60℃.

d)7M NH₃，EtOH，80℃ e)H₂，PtO₂，HOAc.f)48％HBr(aq)，120℃.g)(BOC)₂O，Et₃N，H₂O，THF h)Tf₂O，PhMe，30％K₃PO₄

优选地，1，2，3，4-四氢-2，7-二氮杂萘中间体(VIIb)可以如方案3和4中所示来合成。在途径B中，用N，N，N′-三甲基乙二胺的锂盐连续地处理市售的6-甲氧基烟碱甲醛(6-methoxynicotinaldehyde)，然后用正丁基锂的己烷溶液处理，最后用碘处理，得到4-碘-6-甲氧基烟碱甲醛(参见Tetrahedron Lett.1993，34(39)，6173-6176)。在通常的Sonagashira-Hagihara条件下，使该碘化合物与三甲基甲硅烷基乙炔偶合(Synthesis 1980，627-630)，将所得的6-甲氧基-4-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]烟碱甲醛与氢氧化铵在乙醇中缩合，得到3-甲氧基-2，7-二氮杂萘(Synthesis 1999，2，306-311)。区域选择性催化还原(参见Eur.J.Med.Chem.Ther 1996，31(11)，875-888)后，得到6-甲氧基-1，2，3，4-四氢-2，7-二氮杂萘。用BOC-酸酐脱甲基化和N-保护，最后用三氟甲磺酸酐在两相体系中处理所得的6-羟基-3，4-二氢-2，7-二氮杂萘-2(1H)-羧酸叔丁酯，得到(VIIb)。

方案4

试剂：

a)n-BuLi，THF，-70℃然后DMF，-70℃至RT.b)t-BuNH₂；DCM：3μmol滤网c)Li-TMP，-20℃然后DMF，-2℃至-10℃

d)NaBH₃CN，MeOH，HOAc；RT.e)18％H Br(aq)回流，用K₂CO₃(aq-)再处理f)Ti₂O，吡啶+4℃

在途径C中，用正丁基锂将市售的5-溴-2-甲氧基-4-甲基吡啶的无水四氢呋喃溶液金属化(metallate)，然后用N，N-二甲基甲酰胺处理，得到6-甲氧基-4-甲基烟碱甲醛。用叔丁基胺的二氯甲烷溶液将其转化成叔丁基亚胺。用2，2，6，6-四甲基哌啶锂(Li-TMP)进行金属化(参见J.Org.Chem.1993，58，2463-2467)，以及加入N，N-二甲基甲酰胺，得到亚氨基乙醛，将其用氰基硼氢化钠的甲醇溶液还原，得到2-叔丁基-6-甲氧基-1，2，3，4-四氢-2，7-二氮杂萘。用48％的氢溴酸回流使甲基断裂，并在碱的存在下用三氟甲磺酸酐处理，得到(VIIb)，其被保护为叔丁基胺。

本领域技术人员可以理解，在本发明的方法中，起始试剂或中间体化合物中的某些潜在地反应性官能团例如羟基或氨基，可以需要通过合适的保护基进行保护。由此，在各步骤中，本发明化合物制备可以包括一或多种保护基的添加和除去。

合适的保护基和添加与除去这种基团的详细方法描述在‘ProtectiveGroups in Organic Chemistry’，edited by J.W.F.McOmie，Plenum Press(1973)and′Protective Groups in Organic Synthesis′，3^rd Edition，T.W.Greene and P.G.M.Wuts，Wiley-Interscience(1999)中。

本发明的化合物和其中间体可以从它们的反应混合物中分离，并且如果需要的话，可以使用标准技术进一步纯化。

现在将参考下列说明性的实施例进一步解释本发明。

一般方法

在Varian Inova 400MHz或Varian Mercury-VX 300MHz仪器上记录¹HNMR和¹³C NMR谱图。氯仿-d(δ_H 7.27ppm)、二甲基亚砜-d₆(δ_H 2.50ppm)、乙腈-d₃(δ_H 1.95ppm)或甲醇-d₄(δ_H 3.31ppm)的中心峰用作内标。使用硅胶(0.040-0.063mm，Merck)，施加轻微的超压(0.2-0.4bar)到柱上，进行柱色谱分析。对于制备型HPLC，使用Kromasil KR-100-5-C₁₈柱(250×20mm，AkzoNobel)和含有0.1％TFA的乙腈/水的混合物，流速为10mL/min。除非另外说明，原料是市售的。所有的溶剂和商用试剂是实验室级的，并且原样使用。如果没有另外说明，经无水硫酸钠干燥提取物的有机相。通过旋转蒸发浓缩有机相或溶液。产率是未优化的。

下面的方法用于LC-MS分析：

仪器Agilent 1100；Column Waters Symmetry 2.1×30mm；质量APCI；流量0.7mL/min；波长254或220nm；溶剂A：水+0.1％TFA；溶剂B：乙腈+0.1％TFA；梯度15-95％/B 2.7分钟，95％B 0.3分钟。

下面的方法用于GC-MS分析：

仪器Hewlett Packard 5890 Series II；柱Agilent HP-5(30m×0.32mmID)；质量选择检测器Hewlett Packard 5971 Series；压力55kPa He；炉程序100℃(3min)至300℃，25℃/min。

BOC-酸酐二碳酸二叔丁基酯

n-BuLi 正丁基锂

DCM 二氯甲烷

DIPEA N，N-二异丙基乙胺

DMF N，N-二甲基甲酰胺

DMSO 二甲基亚砜

EtOAc 乙酸乙酯

EtOH 乙醇

GC-MS 气相色谱-质谱

LDA 二异丙基氨基锂(lithium diisopropyl amide)

MeOH 甲醇

LC-MS 液相色谱-质谱

PdCl₂x dppf 1，1′-双(二苯基膦)二茂铁二氯化钯(II)

RT 室温，通常为20至22℃

TEA 三乙胺

THF 四氢呋喃

TBME 叔丁基甲基醚

TFA 三氟乙酸

Triflic anhydride 三氟甲磺酸酐(Tf₂O)

实施例1(5S)-5-({[6-(2-环丙基嘧啶-5-基)-3，4-二氢异喹啉-2(1H)-基]磺酰基}甲基)-5-甲基咪唑烷-2，4-二酮

在室温，将[(4S)-4-甲基-2，5-二氧代咪唑烷-4-基]甲磺酰氯(0.020g，0.087mmol)于无水THF(0.40mL)中的溶液滴加到搅拌着的6-[2-(环丙基)嘧啶-5-基]-1，2，3，4-四氢异喹啉(0.023g，0.091mmol)，DIPEA(0.022mL，0.13mmol)和无水THF(0.50mL)的溶液中。加完后，将该溶液在室温搅拌2小时，然后吸收于水-盐水中并用EtOAc萃取两次。将合并的有机相用盐水洗涤，干燥，过滤并浓缩，得到粗产物。通过制备型HPLC进行纯化，得到0.021g(50％)的标题化合物。其为白色固体。

LC-MS m/z 442(M+1)；

¹H NMR(CD₃CN)δ8.97(s，2H)，8.62(br s，1H)，7.52(s，1H)，7.51(dd，1H)，7.30(d，1H)，6.40(br s，1H)，4.48(s，2H)，3.54(t，2H)，3.51(d，1H)，3.42(d，1H)，3.01(t，2H)，2.38(m，1H)，1.48(s，3H)，及1.23(m，4H)ppm。

原料制备如下：

6-[2-(环丙基)嘧啶-5-基]-1，2，3，4-四氢异喹啉

在室温，将6-[2-(环丙基)嘧啶-5-基]-3，4-氢异喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.034g，0.13mmol)在TFA(1.0mL)和DCM(1.0mL)中搅拌过夜，然后浓缩两次，第二次加入有甲苯(5mL)，得到标题产物的三氟乙酸盐。

¹H NMR(CD₃OD)δ8.87(s，2H)，7.60(d，1H)，7.59(s，1H)，7.37(d，1H)，4.43(s，2H)，3.55(t，2H)，3.21(t，2H)，2.27(m，1H)，及1.14(m，4H)ppm。

将粗产物吸收于1M碳酸钠溶液(10mL)，并用EtOAc萃取两次。将合并的有机相用盐水洗涤，干燥，过滤并浓缩，得到0.023g(94％)的标题产物，其为白色固体。

LC-MS m/z 252(M+1)。

5-溴-2-环丙基嘧啶

标题化合物根据Hickey等人(WO 00/066566)制备。

LC-MS m/z 199/201(M+1)；

¹H NMR(CDCl₃)δ8.61(s，2H)，2.30-2.18(m，1H)，及1.15-1.10(m，4H)ppm。

6-[2-(环丙基)嘧啶-5-基]-3，4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯

将6-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-3，4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯与8-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-3，4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯的4∶1混合物(0.097g，0.27mmol)，5-溴-2-环丙基嘧啶(0.054g，0.27mmol)，PdCl₂x dppf(0.0045g)，2M碳酸钠(1.0mL)，甲苯(4.0mL)和EtOH(1.0mL)用干氩气吹洗10分钟，然后在密封瓶中于81℃加热6小时。将该黑色溶液通过玻璃棉过滤，吸收于水-盐水中并用EtOAc洗涤两次。将合并的有机相干燥，过滤并用硅胶(5g)浓缩。经过EtOAc-庚烷(1∶5至1∶2)的柱色谱，得到0.034g(36％)的标题产物，其为白色固体。

LC-MS m/z 352(M+1)；

¹H NMR(CDCl₃)δ8.74(s，2H)，7.35(dd，1H)，7.29(s，1H)，7.22(d，1H)，4.62(s，2H)，3.68(t，2H)，2.90(t，2H)，2.30(m，1H)，1.50(s，9H)，1.18(m，2H)，及1.11(m，2H)ppm。

6-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-3，4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯

将6-溴-3，4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯和8-溴-3，4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯的3∶1混合物(0.49g，1.6mmol)，二(频哪醇合)二硼烷(bis(pinacolato)diborane)(0.45g，1.8mmol)，PdCl₂x dppf(0.039g，0.048mmol)，乙酸钾(0.48g，4.8mmol)和DMF(8.0mL)在81℃加热过夜。蒸发溶剂，剩余物吸收于水-盐水中并用EtOAc洗涤两次。将有机相干燥，过滤并浓缩。经过EtOAc-庚烷(1∶10至1∶4)的柱色谱，得到标题产物和8-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-3，4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯的4∶1混合物(0.24g)。

¹H NMR(CDCl₃)δ7.62(d，1H)，7.60(s，1H)，7.13(d，1H)，4.59(s，2H)，3.64(t，2H)，2.85(t，2H)，1.50(s，9H)，及1.35(s，12H)ppm(6-位异构体)。

¹H NMR(CDCl₃)δ7.69(d，1H)，7.24-7.14(m′s，2H)，4.88(s，2H)，3.64(t，2H)，2.85(t，2H)，1.50(s，9H)，及1.35(s，12H)ppm(8-位异构体)。

6-溴-3，4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯

6-溴-2-(三氟乙酰基)-1，2，3，4-四氢异喹啉按下面Stokker方法(TetrahedronLett.1996，37(31)，5453-5456)由[2-(3-溴苯基)乙基]胺(4.0g，20mmol)分两步制得。经EtOAc-庚烷(1∶10至1∶6)的柱色谱，得到6-溴-2-(三氟乙酰基)-1，2，3，4-四氢异喹啉和8-溴-2-(三氟乙酰基)-1，2，3，4-四氢异喹啉的3∶1混合物(2.3g，7.5mmol)。

¹H NMR(CDCl³)δ7.62(d，1H)，7.60(s，1H)，7.13(d，1H)，4.59(s，2H)，3.64(t，2H)，2.85(t，2H)，1.50(s，9H)，及1.35(s，12H)ppm(6-位异构体)。

¹H NMR(CDCl₃)δ7.69(d，1H)，7.24-7.14(m，2H)，4.88(s，2H)，3.64(t，2H)，2.85(t，2H)，1.50(s，9H)，及1.35(s，12H)ppm(8-位异构体)。

将该混合物与无水EtOH(100mL)和25％氢氧化铵(10mL)在60℃搅拌4小时。再加入25％氢氧化铵(15mL)并在室温继续搅拌过夜。蒸发挥发物，留下粗胺，其为白色固体。LC-MS m/z 212/214(M+1)。

加入无水THF(50mL)和DIPEA(1.3mL，7.5mmol)，接着加入BOC-酸酐(1.8g，8.2mmol)。将该混合物在室温搅拌过夜。蒸发挥发物，并将剩余物吸收于水中。用1M磷酸调节pH至2，并将产物用EtOAc萃取两次。合并的有机相用盐水洗涤，用饱和碳酸氢钠使该盐水呈弱碱性，干燥，过滤并浓缩。粗产物通过EtOAc-庚烷(1∶50至1∶20)的柱色谱进行纯化，得到标题产物与8-溴-3，4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯的3∶1混合物(2.24g，96％)。

LC-MS m/z 256/258(M-56)；

¹H NMR(CDCl₃)δ7.31(dd，1H)，7.30(br s，1H)，6.98(d，1H)，4.52(s，2H)，3.63(t，2H)，2.81(t，2H)，及1.50(s，9H)ppm(6-位异构体)。

¹H NMR(CDCl₃)δ7.42(dd，1H)，7.12-7.01(m′s，2H)，4.55(s，2H)，3.64(t，2H)，2.84(t，2H)，及1.51(s，9H)ppm(8-位异构体)。

作为选择，6-(2-环丙基-嘧啶-5-基)-1，2，3，4-四氢-异喹啉可制备如下：

a)1，2，3，4-四氢-异喹啉-6-醇氢溴酸盐

将6-甲氧基-1，2，3，4-四氢-异喹啉盐酸盐(制备于WO 2004/26305中)(18.9g，94mmol)在48％氢溴酸水溶液中于100℃加热12小时，然后冷却至0℃。滤除固体，用叔丁基甲基醚洗涤并干燥。收率＝17.1g(79％)。

APCI-MS m/z：150[M+H⁺]；

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ2.91(t，2H)，3.27-3.35(m，2H)，4.13(t，2H)，4.52(s，1H)，6.59(d，1H)，6.66(dd，1H)，7.00(d，1H)，9.07(s，2H)ppm。

b)6-三氟甲磺酰氧基-3，4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯

上面的两个步骤按Synthetic Communications，25(20)，3255-3261，(1995)中所述进行。

c)6-(2-环丙基-嘧啶-5-基)-3，4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯

将6-三氟甲磺酰氧基-3，4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(11.51g，30mmol)溶解于DMF(250mL)，并将该黄色溶液藉氩气(g)鼓泡经过该溶液进行吹洗。加入乙酸钾(8.83g，90mmol)，二(频哪醇合)二硼烷(8.38g，33mmol)，PdCl₂dppf(1.22g，1.5mmol)和dppf(0.83g，1.5mmol)，并将该混合物再次用氩气吹洗。然后将该混合物在90℃加热2小时。加入一水合磷酸三钾(18g，78mmol)，接着加入2-环丙基-5-溴-嘧啶(7.76g，39mmol)，并在90℃继续搅拌5小时。将反应混合物倒在饱和碳酸氢钠溶液中并用乙酸乙酯萃取若干次。将乙酸乙酯溶液通过硫酸镁干燥，滤除干燥剂，并蒸发滤液。剩余物通过快速色谱进行纯化，以乙酸乙酯∶庚烷(1∶3)洗脱，得到8.1g(76％)的标题化合物，其为无色的固体。

APCI-MS m/z：352[M+H⁺]；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ8.77(2H，s)，7.36(1H，d)，7.31(1H，brs)，7.24(1H，d)，4.63(2H，s)，3.70(2H，brt)，2.92(2H，brt)，2.35(1H，m)，1.51(9H，s)，1.24-1.10(4H，m)ppm。

d)6-(2-环丙基-嘧啶-5-基)-1，2，3，4-四氢-异喹啉

将6-(2-环丙基-嘧啶-5-基)-3，4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(9.49g，27mmol)在50℃溶解于乙酸乙酯(100mL)，并向该热溶液中加入1.5M氯化氢的乙酸乙酯(200mL)溶液。1小时之后，将该混合物冷却至室温，滤出固体并干燥。

APCI-MS m/z：252[M+H⁺]；

¹H-NMR(CD₃OD)：δ9.35(2H，s)，7.76-7.70(2H，brs+brdd)，7.46(1H，d)，4.47(2H，s)，3.57(2H，t)，3.25(2H，t)，2.46(1H，m)，1.51-1.45(4H，m)ppm。

¹³C-NMR(CD₃OD)：δ168.39，155.82，134.34，132.65，132.52，131.32，129.22，128.74，126.69，45.56，42.69，26.17，16.51，14.11ppm。

将该二盐酸盐(8.82g，27mmol)悬浮于水(100mL)中并加入2M NaOH(300mL)。然后将该混合物用4∶1乙酸乙酯/二乙醚(4×300mL)萃取。将合并的有机相通过无水碳酸钾进行干燥，过滤并蒸发，得到标题化合物，其为游离碱(6.65g)。

APCI-MS m/z：252[M+H⁺]；

¹H-NMR(CD₃OD)：δ8.81(2H，s)，7.43-7.38(2H，d+s)，7.18(1H，d)，3.99(2H，s)，3.10(2H，t)，2.90(2H，t)，2.25(1H，m)，1.18-1.06(4H，m)ppm。

¹³C-NMR(CD₃OD)：δ171.53，155.83，137.05，137.01，133.50，132.32，128.51，128.36，125.20，48.35，44.28，29.49，18.38，11.16ppm。

实施例2(5S)-5-({[6-(6-环丙基吡啶-3-基)-3，4-二氢-2，7-二氮杂萘-2(1H)- 基]磺酰基}甲基)-5-甲基咪唑烷-2，4-二酮

标题化合物由6-(6-环丙基吡啶-3-基)-1，2，3，4-四氢-2，7-二氮杂萘盐酸盐(0.63mmol)和[(4S)-4-甲基-2，5-二氧代咪唑烷-4-基]甲磺酰氯(0.70mmol)，按照实施例1的一般方法制备。经过净EtOAc和EtOAc-MeOH(9∶1)作为洗脱液的柱色谱，得到0.060g几乎纯净的产物。用99％EtOH重结晶，得到0.019g(7.0％)的标题化合物，其为白色固体。

LC-MS m/z442(M+1)；

¹H NMR(DMSO-d₆)δ10.8(s，1H)，9.06(d，1H)，8.49(s，1H)，8.26(dd，1H)，8.06(s，1H)，7.83(s，1H)，7.39(d，1H)，4.45(s，2H)，3.61(d，1H)，3.48(d，1H)，3.46(m，2H)，2.97(m，2H)，2.16(m，1H)，1.34(s，3H)和1.02-0.94(m，4H)ppm。

原料制备如下：

6-(6-环丙基吡啶-3-基)-1，2，3，4-四氢-2，7-二氮杂萘盐酸盐

将6-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}-3，4-二氢-2，7-二氮杂萘-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.34g，0.90mmol)，2-环丙基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶(0.20g，0.82mmol)，PdCl₂x dppf(0.050g)，饱和碳酸钠(2mL)，EtOH(4mL)和甲苯(4mL)在80℃搅拌2小时。将该溶液冷却至室温，吸收于水(15mL)中，并用EtOAc-Et₂O萃取三次。将合并的有机相干燥，过滤并浓缩。通过柱色谱进行纯化，以EtOAc-庚烷(1∶1至3∶1)和EtOAc-MeOH(9∶1)为洗脱液，得到0.22g(70％)的6-(6-环丙基吡啶-3-基)-3，4-二氢-2，7-二氮杂萘-2(1H)-甲酸叔丁酯，其为白色固体。

LC-MS m/z 352(M+1)。

将该材料溶解于EtOAc(5mL)，并在1.5M氯化氢的EtOAc溶液(5mL)中于50℃搅拌4小时。蒸发溶剂，以定量的收率留下粗标题化合物(0.63mmol)。

2-环丙基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶

在氩气氛下，将0.5M氯化锌的THF溶液(5.5mL，2.8mmol)加到0.5M环丙基溴化镁于THF(5.5mL，2.8mmol)中的溶液中。将该溶液在室温搅拌2小时，此时形成浆状物。向该浆状物中一部分地加入2，5-二溴吡啶(0.65g，2.8mmol)和PdCl₂x dppf(0.041g，0.050mmol)。几分钟之后，观察到放热且浆状物变稠，放热平息，并将该浆状物在室温搅拌过夜。将反应混合物倒入饱和碳酸氢钠溶液中并用乙醚萃取。将醚相干燥，过滤并浓缩，然后重新溶解于DCM，并施加到硅胶短塞上。将硅胶用DCM洗涤，并浓缩洗涤液。剩余物吸收于乙醚中，并用1.0M盐酸洗涤。利用2.0M氢氧化钠使酸性的水相呈碱性，并将产物反向萃取到醚中。将合并的醚相用盐水洗涤，干燥，过滤并浓缩，得到0.28g(50％)的5-溴-2-环丙基吡啶，其为黄色油状物。

LC-MS m/z 197.9/199.9(M+1)；

¹H-NMR(CDCl₃)δ8.48(d，1H)，7.63(dd，1H)，7.04(d，1H)，1.99(m，1H)，1.03-0.98(m，4H)ppm。

将5-溴-2-环丙基吡啶(0.21g，1.1mmol)，二(频哪醇合)二硼烷(0.31g，1.2mmol)和乙酸钾(0.32g，3.2mmo1)悬浮在二氧己环(10mL)中。将该浆状物用氩气脱气10分钟，然后加入PdCl₂x dppf(0.026g)。将反应混合物在80℃加热15小时，然后在冷却至室温之后，通过硅藻土塞进行过滤。浓缩滤液，得到黑色的油状物，将其溶解于乙醚，并用1.0M氢氧化钠萃取四次。将合并的黄色水相冷却至10℃，用2.5M盐酸酸化至pH6.5，然后用乙醚反复萃取。将合并的有机相用无水硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到0.27g(103％)的标题产物，其为缓慢固化的黄色油状物。¹H-NMR表明约60-65％纯度的所需产物，主要杂质为频哪醇硼烷。该粗物质无需进一步纯化即可使用。

GC-MS m/z 245.2(M+)，244.2(M-1)；

¹H-NMR(CDCl₃)δ8.78(br s，1H)，7.93(dd，1H)，7.10(d，1H)，2.10(m，1H)，1.34(s，12H)，1.10-1.00(m，4H)ppm。

6-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}-3，4-二氢-2，7-二氮杂萘-2(1H)-甲酸叔丁酯

在室温，将粗3-甲氧基-2，7-二氮杂萘(由4.4mmol的6-甲氧基-4-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]烟碱甲醛制得)通过PtO₂(约0.1g)于HOAc(25mL)中氢化(30psi压力)2.5小时。将该溶液通过硅藻土垫过滤，并通过冷冻干燥法浓缩澄清的滤液，得到粗6-甲氧基-1，2，3，4-四氢-2，7-二氮杂萘，其为乙酸盐。

LC-MS m/z 165(M+1)。

将该物质在48％氢溴酸中回流10小时。蒸发挥发物，并将剩余物在45℃减压干燥，得到粗5，6，7，8-四氢-2，7-二氮杂萘-3-醇氢溴酸盐(约0.70g)。

LC-MS m/z 151(M+1)。

将该物质(约4.8mmol)溶解于水(13mL)，并在室温用THF(33mL)、Et₃N(0.85mL，6.0mmol)和BOC-酸酐(1.6g，7.3mmol)处理。待在相同温度下搅拌6小时之后，将该溶液浓缩至其原体积的三分之一，并将剩余物吸收于水中，用EtOAc萃取三次。将合并的有机相干燥，过滤并浓缩，得到0.80g(67％粗产物收率)的6-羟基-3，4-二氢-2，7-二氮杂萘-2(1H)-甲酸叔丁酯，其为白色固体。

LC-MS m/z 251(M+1)，195(M-55)。

将该物质(约5.4mmol)溶解于甲苯(20mL)和30％正磷酸三钾水溶液(20mL)的两相体系，并在4℃用三氟甲磺酸酐(1.6mL，6.8mmol)处理[Org.Lett.2002，4(26)，4717-4718]。移去冰浴，继续在室温搅拌2小时，之后将两相分离。水相用甲苯洗涤一次。将合并的有机相用盐水洗涤，干燥并浓缩。通过柱色谱进行纯化，以EtOAc-庚烷(2∶1)作为洗脱液，得到0.45g(17％收率)的标题产物。

LC-MS m/z 383(M+1)，283(M-99)。

3-甲氧基-2，7-二氮杂萘

在氩气氛下和-70℃，向搅拌着的N，N，N′-三甲基乙二胺(1.9mL，15mmol)于无水THF(65mL)中的溶液中缓慢地加入1.6M n-BuLi的己烷溶液(9.0mL，14mmol)。待在-70℃搅拌15分钟之后，滴加6-甲氧基-烟碱甲醛(1.3g，9.8mmol)。加完之后，继续在-70℃再搅拌15分钟。然后滴加1.6Mn-BuLi的己烷溶液(10mL，16mmol)，并在-45℃继续搅拌4小时。将该溶液冷却至-70℃，然后滴加碘(3.0g，12mmol)于无水THF(25mL)中的溶液。滴加完成时，继续在-70℃搅拌30分钟，然后在室温搅拌3小时。将粗产物吸收于乙醚(40mL)中并相继用饱和氯化铵(2×40mL)和5％硫代硫酸钠(2×20mL)洗涤。将有机相干燥，过滤并浓缩。通过柱色谱进行纯化，以EtOAc-庚烷(1∶1)为洗脱液，得到0.41g(15％收率)的4-碘-6-甲氧基烟碱甲醛。

LC-MS m/z 264(M+1)；

¹H NMR(CDCl₃)δ9.95(s，1H)，8.53(s，1H)，7.32(s，1H)及3.98(s，3H)ppm。

将4-碘-6-甲氧基烟碱甲醛(0.41g，1.6mmol)，三甲基甲硅烷基乙炔(0.35mL，2.8mmol)，PdCl₂(PPh₃)₂(催化量)，CuI(催化量)，三乙胺(2mL)和THF(10mL)在60℃搅拌2小时。蒸发挥发物，并将剩余物吸收于水中，且用乙醚萃取。将有机相干燥，过滤并浓缩。通过柱色谱进行纯化，以EtOAc-庚烷(1∶3)为洗脱液，得到0.25g(68％收率)的6-甲氧基-4-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]烟碱-甲醛。

LC-MS m/z 234(M+1)；

¹H NMR(CDCl₃)δ10.4(s，1H)，8.73(s，1H)，6.84(s，1H)，4.03(s，3H)及0.30(s，9H)ppm。

将6-甲氧基-4-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-烟碱甲醛(0.25g，1.1mmol)和7M氨的MeOH溶液(5mL)在密封瓶中于80℃搅拌过夜。将该溶液浓缩，吸收于饱和碳酸钠溶液中并用乙醚萃取。将有机相干燥，过滤并浓缩，得到0.20g的标题产物。

GC-MS m/z 160(M⁺)；

¹H NMR(CDCl₃)δ9.41(s，1H)，9.27(s，1H)，8.47(d，1H)，7.64(d，1H)，7.03(s，1H)，及4.12(s，3H)ppm。

实施例3(5S)-5-({[6-(2-环丙基嘧啶-5-基)-3，4-二氢-2，7-二氮杂萘 -2(1H)-基]磺酰基}甲基)-5-甲基咪唑烷-2，4-二酮

向搅拌着的6-(2-环丙基嘧啶-5-基)-1，2，3，4-四氢-2，7-二氮杂萘盐酸盐(0.12g，0.42mmol)于DCM(10mL)中的溶液中加入TEA(0.12mL，0.84mmol)，接着在-10℃滴加[(4S)-4-甲基-2，5-二氧代咪唑烷-4-基]甲磺酰氯(0.090g，0.40mmol)于THF(10mL)中的溶液。将该混合物在室温搅拌过夜，浓缩，吸收于水(10mL)中，并用EtOAc萃取四次。将合并的有机相干燥，过滤并浓缩。通过制备性HPLC进行纯化，得到0.12g(64％)的标题化合物，其为白色固体。

LC-MS m/z 442.9(M+1)；

¹H NMR(CD₃OD)δ9.05(s，2H)，8.43(s，1H)，7.81(s，1H)，4.63(s，2H)，3.40(t，2H)，3.38(q，2H)，3.00(t，2H)，2.20(m，1H)，1.40(s，3H)，及1.05(m，4H)ppm。

实施例4(5S)-5-({[6-(2-环丙基嘧啶-5-基)-3，4-二氢-2，7-二氮杂萘-2(1H)- 基]磺酰基}甲基)-5-乙基咪唑烷-2，4-二酮

通过实施例3的一般方法制备标题化合物，但是采用[(4S)-4-乙基-2，5-二氧代咪唑烷-4-基]甲磺酰氯。

LC-MS m/z 457(M+1)。

原料制备如下：

6-(2-环丙基嘧啶-5-基)-1，2，3，4-四氢-2，7-二氮杂萘盐酸盐

在防潮(氯化钙管)条件下，将2-叔丁基-6-(2-环丙基嘧啶-5-基)-1，2，3，4-四氢-2，7-二氮杂萘(0.12g，0.39mmol)，氯甲酸1-氯乙酯(1.0mL，5.8mmol)和甲苯(10mL)的混合物回流4小时。浓缩至干之后，将暗色的剩余物吸收于MeOH(10mL)中并再回流3小时。加入木炭(1g)并继续回流20分钟。然后将该混合物通过硅藻土过滤，并浓缩澄清的滤液，得到固体的标题化合物(0.12g)。

LC-MS m/z 253(M+1)；

¹H NMR(CDCl₃)δ9.22(s，2H)，8.57(s，1H)，7.98(s，1H)，4.41(s，2H)，3.45(t，2H)，2.44(m，2H)，2.32(m，1H)，及1.21(m，4H)ppm。

2-叔丁基-6-(2-环丙基嘧啶-5-基)-1，2，3，4-四氢-2，7-二氮杂萘

向搅拌着的2-叔丁基-6-羟基-1，2，3，4-四氢-2，7-二氮杂萘(0.15g，0.73mmol)于吡啶(5.0mL)中的冷(4℃)溶液中，缓慢加入三氟甲磺酸酐(0.14mL，0.80mmol)。加完后，将该混合物在4℃搅拌30分钟，用5％碳酸钾溶液(10mL)淬灭，并用DCM萃取四次。将合并的有机相干燥，过滤并浓缩，得到粗产物。通过EtOH-TBME(1∶9)为洗脱液的柱色谱，得到0.30g粗三氟甲磺酸盐，其为油状物。

LC-MS m/z 339.2(M+1)。

将该三氟甲磺酸盐溶解于二氧己环(10mL)，并加入无水乙酸钾(0.43g，4.5mmol)，2-环丙基嘧啶-4-硼酸(0.14g，0.89mmol)和PdCl₂x dppf(0.0050g)。将该混合物用氩气脱气，密封并于90℃搅拌过夜。冷却之后，将该溶液吸收于水(20mL)中并用EtOAc萃取三次。将合并的有机相用盐水洗涤，干燥，过滤并浓缩。经过以EtOH-TBME(1∶9)和TBME-EtOH-TEA(20∶2∶1)为洗脱液的柱色谱，得到0.12g(两步骤为53％)的标题化合物，其为淡棕色的固体。

LC-MS m/z 309(M+1)；

¹H NMR(CDCl₃)9.05(s，2H)，8.45(s，1H)，7.38(s，1H)，3.97(m，2H)，2.95(m，4H)，2.00(m，1H)，1.21(s，9H)，1.11(dt，2H)，及1.09(dt，2H)ppm。

2-叔丁基-6-羟基-1，2，3，4-四氢-2，7-二氮杂萘

将2-叔丁基-6-甲氧基-1，2，3，4-四氢-2，7-二氮杂萘(5.1g，23mmol)和45％氢溴酸的乙酸溶液(70mL)的溶液在密封瓶中于100℃加热1小时，冷却至室温并浓缩。将剩余物小心溶解于20％碳酸钾溶液(100mL)并用EtOAc萃取四次。将合并的有机相干燥，过滤并浓缩。用TBME-己烷重结晶，得到3.7g(77％)的标题化合物，其为白色固体。

LC-MS m/z 207(M+1)；

¹H NMR(CDCl₃)δ7.21(s，1H)，6.35(s，1H)，4.77(m，2H)，4.11(m′s，4H)，及1.31(s，9H)ppm。

2-环丙基嘧啶-4-硼酸

按照Li等人(J.Org.Chem.2002，67，5394-5397)的方法，由4-溴-2-环丙基嘧啶(WO 00/066566)，制备标题化合物，收率为90％(25mmol比例)。LC-MS表明，产物由硼酸和三酸酐(sym-环硼氧烷)构成。

LC-MS m/z 165(M+1)和439(M+1)。

2-叔丁基-6-甲氧基-1，2，3，4-四氢-2，7-二氮杂萘

在氩气氛下和-20℃，向搅拌着的2，2，6，6-四甲基哌啶(9.0mL，60mmol)于无水THF(300mL)中的溶液中缓慢加入1.6M n-BuLi的己烷溶液(40mL，60mmol)，同时保持温度为-20℃。加完之后，继续在-20℃搅拌40分钟。然后在-20℃滴加叔丁基-[(6-甲氧基-4-甲基吡啶-3-基)亚甲基]胺(6.3g，30mmol)于无水THF(100mL)中的溶液。将该混合物在-15至-10℃搅拌1.5小时，然后冷却至-20℃。历时5分钟滴加无水DMF(6.5ml，70mmol)，并在-10℃继续搅拌1.5小时。然后加入于MeOH(250ml)中的冰乙酸(60mL)，接着历时5分钟逐份地加入氰基硼氢化钠(2.3g，40mmol)。搅拌过夜之后，蒸发溶剂，并缓慢地加入20％碳酸钾溶液，以将pH提升至9。将该混合物用TBME萃取四次。将合并的有机相用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到粗油状物。真空蒸馏，得到5.2g(77％)的标题化合物，其为无色的油状物，沸点105-106℃/0.5mmHg。

GC-MS m/z 220.1(M⁺)；

¹H NMR(CDCl₃)δ7.90(s，1H)，6.55(s，1H)，3.95(s，3H)，3.81(m，3H)，2.95-2.90(m，3H)，及1.11(s，9H)ppm。

叔丁基-[(6-甲氧基-4-甲基吡啶-3-基)亚甲基]胺

将2-甲氧基-4-甲基烟碱甲醛(1.8g，12mmol)，叔丁胺(15mL)，3分子筛(8g)和无水DCM(10mL)混合，并在防潮(氯化钙管)条件下使之在室温静置。两天之后，将该混合物过滤，并用干燥DCM洗涤分子筛若干次。将合并的洗涤液浓缩，得到2.2g(89％)的标题化合物，其为粗油状物，并立即用于下一步骤。

¹H NMR(CDCl₃)δ8.55(br s，1H)，8.50(s，1H)，6.50(s，1H)，3.96(s，3H)，2.50(s，3H)，及1.30(s，9H)ppm。

2-甲氧基-4-甲基烟碱甲醛

在-70℃和氩气氛下，历时10分钟向搅拌着的5-溴-2-甲氧基-4-甲基吡啶(2.6g，13mmol)于无水THF(40mL)中的溶液中加入1.6M n-BuLi的己烷溶液(8.1mL，14mmol)。将该混合物在-70℃搅拌30分钟，然后以保持温度为-70℃的速率滴加无水DMF(1.2mL，15mmol)。加完时，将该混合物在-70℃搅拌30分钟，然后在室温搅拌过夜。将反应用1M盐酸(40mL)淬灭，然后用TBME萃取三次。将合并的有机相用盐水洗涤，干燥，过滤并浓缩。经过以TBME-轻质石油醚(1∶1)为洗脱液的柱色谱，得到1.8g(91％)的标题化合物，其为浅黄色固体。

LC-MS m/z 152(M+1)；

¹H NMR(CDCl₃)δ10.1(s，1H)，8.55(s，1H)，6.61(s，1H)，4.05(s，3H)，2.60(s，3H)ppm。

[(4S)-4-乙基-2，5-二氧代咪唑烷-4-基]甲磺酰氯

按WO 02/074767中所述的制备[(4S)-4-甲基-2，5-二氧代咪唑烷-4-基]甲磺酰氯的方法制备。

实施例5(5S)-5-({[6-(2-环丙基嘧啶-5-基)-3，4-二氢异喹啉-2(1H)-基]磺酰基}甲基)-5-乙基咪唑烷-2，4-二酮

利用WO 02/074767中所述方法，通过手性色谱拆分(±)-5-({[6-(2-环丙基嘧啶-5-基)-3，4-二氢异喹啉-2(1H)-基]磺酰基}甲基)-5-乙基咪唑烷-2，4-二酮，制备标题化合物。

制备型色谱数据：

Chiracel OD-H柱(L 25cm，2cm)Daicel Chemical Industries Ltd.

洗脱液：100％EtOH

流速：15mL/分钟

检测：UV 254nm。

分析色谱数据：

Chiralcel OD-H柱(L 15cm，0.46cm)Daicel Chemical Industries Ltd.

洗脱液：100％EtOH

流速：0.30mL/分钟

检测：UV 254/220nm。

保留时间(t_R)-见下面

(S)-对映异构体(t_R 13.0分钟)

¹H NMR(DMSO-d₆)δ10.79(br s，1H)，8.94(s，2H)，7.97(br s，1H)，7.60-7.56(m，2H)，7.33-7.28(m，1H)，4.41(s，2H)，3.59-3.40(m，4H)，2.96(t，J＝6.2Hz，2H)，2.28-2.21(m，1H)，1.65(q，J＝7.6Hz，2H)，1.11-1.00(m，4H)，及0.78(t，J＝7.5Hz，3H)ppm。

(R)-对映异构体(t_R 18.3分钟)

¹H NMR(DMSO-d₆)δ10.79(br s，1H)，8.94(s，2H)，7.97(br s，1H)，7.60-7.56(m，2H)，7.32-7.28(m，1H)，4.41(s，2H)，3.58-3.40(m，4H)，2.96(t，J＝6.2Hz，2H)，2.28-2.21(m，1H)，1.65(q，J＝7.6Hz，2H)，1.11-1.00(m，4H)，及0.78(t，J＝7.5Hz，3H)ppm。

(±)-5-({[6-(2-环丙基嘧啶-5-基)-3，4-二氢异喹啉-2(1H)-基]磺酰基}甲基)-5-乙基咪唑烷-2，4-二酮)

根据WO 02/074767中所述方法，由6-(2-环丙基嘧啶-5-基)-1，2，3，4-四氢异喹啉制备标题化合物。

LC-MS m/z 456(M+1)；

¹H NMR(DMSO-d₆)δ10.78(br s，1H)，8.94(s，2H)，8.03(br s，1H)，7.61-7.56(m，2H)，7.30(d，J＝8.5Hz，1H)，4.42(s，2H)，3.60-3.40(m，4H)，2.96(t，J＝6.2Hz，2H)，2.26-2.20(m，1H)，1.65(q，J＝7.2Hz，2H)，1.10-1.01(m，4H)，及0.78(t，J＝7.5Hz，3H)ppm。

实施例6(5S)-5-({[6-(2-环丁基嘧啶-5-基)-3，4-二氢异喹啉-2(1H)-基]磺酰基}甲基)-5-甲基咪唑烷-2，4-二酮

利用实施例1中所述的方法制备标题化合物。

LC-MS m/z456(M+1)；

¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.31(s，3H)，1.83-2.12(m，2H)，2.26-2.45(m，4H)，2.96(s，2H)，3.19-3.55(m，4H)，3.78(q，1H)，4.43(s，2H)，6.92(s，1H)，7.32(d，1H)，7.60(s，2H)，9.04(s，2H)，10.81(s，1H)ppm。

所需原料同样利用实施例1中所述的一般方法制备。

6-(2-环丁基嘧啶-5-基)-3，4-二氢异喹啉-2(1H)-甲酸1，1-二甲基乙酯

LC-MS m/z366(M+1)；

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.81(s，2H)，7.13-7.37(m，3H)，4.55(d，2H)，3.64(t，2H)，2.82-2.90(m，2H)，2.30-2.50(m，6H)，1.84-2.14(m，1H)，1.45(s，9H)ppm。

6-(2-环丁基嘧啶-5-基)-1，2，3，4-四氢异喹啉鎓氯化物

LC-MS m/z 266(M+1)；

环丁基(亚氨基)甲基氯化铵(Cyclobutyl(imino)methanaminium chloride)

¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.69-1.84(m，1H)，1.86-2.05(m，2H)，2.08-2.32(m，3H)，3.29-3.42(m，1H)，8.85(s，4H)ppm。

5-溴-2-环丁基嘧啶

GC-MS m/z211/213(M)；

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ1.88-2.17(m，2H)，2.36-2.46(m，4H)，3.78(td，1H)，8.72(s，2H)ppm。

实施例7(5S)-5-甲基-5-({[-[2-(1-甲基环丙基)嘧啶-5-基]-3，4-二氢异喹啉-2(1H)-基]磺酰基}甲基)咪唑烷-2，4-二酮

利用实施例1中所述的方法制备标题化合物。

LC-MS m/z456(M+1)；

¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.94(q，2H)，1.30(d，2H)，1.34(s，3H)，1.54(s，3H)，2.96(t，2H)，3.40-3.62(m，4H)，4.42(s，2H)，7.31(d，1H)，7.58(d，2H)，8.06(s，1H)，8.97(s，2H)，10.77(s，1H)ppm。

所需原料同样按实施例中所述的一般方法制备：

6-[2-(1-甲基环丙基)嘧啶-5-基]-1，2，3，4-四氢异喹啉鎓氯化物

LC-MS m/z266(M+1)；

¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ0.94(q，2H)，1.30(q，2H)，1.53(s，3H)，2.96-3.14(m，2H)，3.29-3.42(m，2H)，4.18-4.32(m，2H)，5.81(s，1H)，7.15-7.27(m，1H)，7.36(t，1H)，7.63(d，1H)，8.98(s，2H)，9.85(s，1H)ppm。

亚氨基(1-甲基环丙基)甲基氯化铵

¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.46(dd，2H)，0.91(q，2H)，1.21(s，3H)，7.35(s，4H)ppm。

5-溴-2-(1-甲基环丙基)嘧啶

LC-MS m/z 213/215(M+1)；

¹H NMR(399.988MHz，CDCl₃)δ0.93(dd，2H)，1.35(dd，2H)，1.54(s，3H)，8.59(s，2H)ppm。

实施例8(5S)-5-环丙基-5-({[6-(2-环丙基嘧啶-5-基)-3，4-二氢异喹啉 -2(1H)-基]磺酰基}甲基)咪唑烷-2，4-二酮

利用实施例1中所述的一般方法，由6-[2-(环丙基)嘧啶-5-基]-1，2，3，4-四氢异喹啉和(4S)-(4-环丙基-2，5-二氧代咪唑烷-4-基)甲磺酰氯制备标题化合物。

LC-MS m/z 468(M+1)；

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ0.18(q，1H)，0.33-0.56(m，3H)，1.02-1.17(m，5H)，2.24(dd，1H)，2.96(t，2H)，3.40-3.82(m，4H)，4.43(s，2H)，7.31(t，1H)，7.58(d，2H)，7.95(s，1H)，8.94(s，2H)，10.74(s，1H)ppm。

所需原料制备如下：

2-苄基硫基-1-环丙基-乙酮

将苄硫醇(15.6ml，0.133mol)在DCM(100ml)中搅拌，加入三乙胺(20.5ml，0.146mol)，将该混合物冷却于冰/丙酮浴中，并滴加溶解于DCM(100ml)中的按WO 03/074495制备的2-溴-1-环丙基-乙酮(21.77g，0.133mol)。将该混合物搅拌48小时，用水及然后的盐水洗涤，通过硫酸钠干燥并蒸发。

GC-MS m/z 206(M)；

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ0.86-0.91(m，2H)，0.99-1.03(m，2H)，2.05-2.16(m，1H)，3.22(s，2H)，3.64(s，2H)，7.18-7.31(m，5H)ppm。

该材料无需进一步纯化即可使用。

苄基硫基甲基-5-环丙基-咪唑烷-2，4-二酮

将2-苄基硫基-1-环丙基-乙酮(27.55g，0.133mol)溶解于乙醇(250ml)并分配到20×40ml小瓶中。将氰化钠(6.52g，0.133mol)和碳酸铵(64g，0.667mol)溶解于水(250ml)并分装到小瓶中，然后将小瓶密封并在安全网下于90℃加热5小时。冷却至室温后，合并小瓶的内容物，加入TBME，并将该混合物用水(×2)和盐水(×1)洗涤，然后用硫酸钠干燥。接着蒸发，得到粗产物(16.5g，45％)。将该物质吸附在硅胶上，并进行色谱(5×9.5cm硅胶柱)，用异己烷至50％乙酸乙酯的异己烷溶液洗脱，得到标题化合物(11.81g，32.1％)。

LC-MS m/z277(M+1)；

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ0.23-0.59(m，4H)，1.12-1.19(m，1H)，2.87(dd，2H)，3.67-3.74(m，2H)，6.06(s，1H)，7.15-7.33(m，5H)，8.66(s，1H)ppm。

在Chiralpak AD半制备型柱上分离异构体。

洗脱液：65％醇/35％异己烷

浓度：50mg/ml

注入体积：2ml

馏出时间：21分钟

在Chiralpak AD 25×0.46cm柱上以0.7ml/分钟的流速进行的手性分析给出8.9和11.5分钟的保留时间。将馏出较快的异构体用于进一步的反应。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ0.19-0.58(m，4H)，1.10-1.24(m，1H)，2.86(dd，2H)，3.62-3.78(m，2H)，5.87(s，1H)，7.16-7.34(m，5H)，8.51(s，1H)ppm。

(4S)-(4-环丙基-2，5-二氧代咪唑烷-4-基)甲磺酰氯

将(5S)-苄基硫基甲基-5-环丙基-咪唑烷-2，4-二酮(770mg，2.78mmol)溶解于90％乙酸(100ml)并在冰水浴中冷却，同时使氯气鼓泡经过10分钟。将反应混合物冻干，得到标题化合物，其为白色固体(640mg，91％)。

¹H NMR(400MHz，THF)δ0.37-0.65(m，4H)，1.25-1.33(m，1H)，4.62(dd，2H)，7.39(s，1H)，9.86(s，1H)ppm。

药理学实施例

分离的酶测定

MMP12

重组人类MMP12催化区域可以按照Parkar A.A.等人(2000)，ProteinExpression and Purification，20：152的描述来表达和纯化。纯化的酶能够用于监测抑制剂的活性，如下所述：在存在抑制剂(10倍浓度)或不存在抑制剂的条件下，在室温，将MMP12(50ng/ml最终浓度)在测定缓冲液(0.1M“Tris-HCl”(商标)缓冲液，pH值7.3，含有0.1M NaCl、20mM CaCl₂、0.020mMZnCl和0.05％(w/v)“Brij 35”(商标)清净剂)中用合成底物Mac-Pro-Cha-Gly-Nva-His-Ala-Dpa-NH₂(10μM)培养60分钟。通过在λex320nm和λem 405nm处测定荧光来测定活性。百分数抑制(抑制百分数)计算如下：

％抑制等于[荧光_加抑制剂-荧光_背景]/[荧光_无抑制剂-荧光_背景]。

MMP8

纯化的前MMP8购自Calbiochem。通过1mM的对氨基-苯基-乙酸汞(APMA)在35℃将酶(10μg/ml)活化2.5h。活化的酶可以用于如下监测抑制剂的活性：在35℃(80％H₂O)，在存在抑制剂(10倍浓度)或不存在抑制剂的条件下，将MMP8(200ng/ml的最终浓度)在测定缓冲液(0.1M“Tris-HCl”(商标)缓冲液，pH7.5，含有0.1M NaCl、30mM CaCl₂、0.040mM ZnCl和0.05％(w/v)、“Brij 35”(商标)清净剂)中，用合成底物Mca-Pro-Cha-Gly-Nva-His-Ala-Dpa-NH₂(12.5μM)培养90分钟。通过在λex320nm和λem 405nm处测定荧光来测定活性。百分数抑制计算如下：

MMP9

表达重组人类MMP9催化区域，然后通过螯合Zn柱色谱并接着通过氧肟酸酯亲合柱色谱来纯化。该酶能够用于如下监测抑制剂的活性：在室温，在存在抑制剂(10倍浓度)或不存在抑制剂的条件下，将MMP9(5ng/ml的最终浓度)在测定缓冲液(0.1M“Tris-HCl”(商标)缓冲液，pH7.3，含有0.1MNaCl、20mM CaCl₂、0.020mM ZnCl和0.05％(w/v)、“Brij 35”(商标)清净剂)中，用合成底物Mca-Pro-Cha-Gly-Nva-His-Ala-Dpa-NH₂(5μM)培养30分钟。通过在λex 320nm和λem 405nm处测定荧光来测定活性。百分数抑制计算如下：

MMP14

重组人类MMP14催化区域可以按照Parkar A.A.等人(2000)，ProteinExpression and Purification，20，152来表达和纯化。纯化的酶能够用于监测抑制剂的活性，如下所述：在存在抑制剂(5倍浓度)或不存在抑制剂的条件下，在室温，将MMP14(10ng/ml最终浓度)在测定缓冲液(0.1M“Tris-HCl”(商标)缓冲液，pH值7.5，含有0.1M NaCl、20mM CaCl₂、0.020mM ZnCl和0.05％(w/v)“Brij 35”(商标)清净剂)中用合成底物Mac-Pro-Cha-Gly-Nva-His-Ala-Dpa-NH₂(10μM)培养60分钟。通过在λex320nm和λem 405nm处测定荧光来测定活性。百分数抑制计算如下：

使用表达和纯化的前MMP来试验其它基质金属蛋白酶(包括MMP9)的方案，例如如C.Graham Knight等人(1992)FEBS Lett.296(3)：263-266所述。

MMP19

重组人类MMP19催化区域可以按照Parkar A.A.等人(2000)，ProteinExpression and Purification，20，152来表达和纯化。纯化的酶能够用于监测抑制剂的活性，如下所述：在存在抑制剂(5倍浓度)或不存在抑制剂的条件下，在35℃，将MMP19(40ng/ml最终浓度)在测定缓冲液(0.1M“Tris-HCl”(商标)缓冲液，pH值7.3，含有0.1M NaCl、20mM CaCl₂、0.020mM ZnCl和0.05％(w/v)“Brij 35”(商标)清净剂)中用合成底物Mca-Pro-Leu-Ala-Nva-Dpa-Ala-Arg-NH₂(5μM)培养120分钟。通过在λex320nm和λem 405nm处测定荧光来测定活性。百分数抑制计算如下：

下表显示了本发明化合物代表性选择。

表

化合物	hMMP12IC₅₀(nM)	hMMP9IC₅₀(nM)	hMMP8IC₅₀(nM)	hMMP14IC₅₀(nM)	hMMP19IC₅₀(nM)
化合物	hMMP12IC₅₀(nM)	hMMP9IC₅₀(nM)	hMMP8IC₅₀(nM)	hMMP14IC₅₀(nM)	hMMP19IC₅₀(nM)	实施例1	8.78	10.1	3050	＞10000	＞10000
实施例2	26.6	21.5	2470	＞10000	＞10000	实施例1	8.78	10.1	3050	＞10000	＞10000
实施例2	26.6	21.5	2470	＞10000	＞10000	实施例5	6.9	3.8	1310	8810	3760

Claims

1.式(I)的化合物或其药用盐

式中

R²表示C_1-3烷基或环丙基；及

A，A¹和B独立地表示CH或N；

2.根据权利要求1的化合物或其药用盐，其中R¹表示环丙基。

3.根据权利要求1或2的化合物或其药用盐，其中R²表示甲基或乙基。

4.根据权利要求1～3中任一项的化合物或其药用盐，其中B¹表示CH。

5.根据权利要求1～4中任一项的化合物或其药用盐，其中A和A¹各自表示N。

6.根据权利要求1的化合物或其药用盐，该化合物选自：

(5S)-5-环丙基-5-({[6-(2-环丙基嘧啶-5-基)-3，4-二氢异喹啉-2(1H)-基]磺酰基}甲基)咪唑烷-2，4-二酮。

7.制备权利要求1所定义的式(I)的化合物或其药用盐的方法，其包括：

a)使式(II)的化合物和式(III)化合物(或其盐)反应

其中R²如式(I)所定义和L¹表示离去基团

其中R¹、A、A¹和B如式(I)中所定义；或

b)使式(V)的化合物与式(XII)的硼酸衍生物反应，

其中R²和B如式(I)中所定义，LG为离去基团；

其中R¹、A和A¹如式(I)中所定义；或

c)使式(IX)的化合物与碳酸铵和氰化钾反应

其中R¹、R²、A、A¹和B如式(I)中所定义；

以及之后任选地形成其药用盐。

8.一种药物组合物，其包括如权利要求1-6中任一项所要求的式(I)的化合物或其药用盐，以及结合有可药用助剂、稀释剂或载体。

9.一种制备权利要求8所要求的药物组合物的方法，其包括将权利要求1-6中任一项所要求的式(I)的化合物或其药用盐与可药用助剂、稀释剂或载体混合。

10.权利要求1-6中任一项所要求的式(I)的化合物或其药用盐，其用于治疗。

11.权利要求1-6中任一项所要求的式(I)的化合物或其药用盐在制备用于治疗阻塞性气道疾病的药物中的用途。

12.权利要求11的用途，其中阻塞性气道疾病是哮喘或慢性阻塞性肺病。

13.权利要求1-6中任一项所要求的式(I)化合物或其药用盐在制备用于治疗类风湿性关节炎、骨关节炎、动脉粥样硬化、癌症或多发性硬化的药物中的用途。

14.治疗由MMP12和/或MMP9介导的疾病或病症的方法，该方法包括对患者给药治疗有效量的权利要求1-6中任一项所要求的式(I)化合物或其药用盐。

15.治疗阻塞性气道疾病的方法，该方法包括对患者给药治疗有效量的权利要求1-6中任一项所要求的式(I)化合物或其药用盐。