CN101084780A - 一种促进鹅肝发育的微生物饲料添加剂及制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种促进鹅肝发育的微生物饲料添加剂的制备方法，其特征在于，采用的所有菌种都是从动物肠道中筛选出的；采用菌种复合培养方法，使所有菌种在同一培养基中培养；运用复合同步固体发酵方法，构成强大的复合微生物菌群并形成有效的产酶能力，使产品中含有大量的分解纤维素、果糖的活性酶、小肽、抗氧化物质、游离氨基酸、维生素等生理代谢物质；本发明的优点是促进动物对饲料的消化吸收，促进机体蛋白质的合成及充分利用，增强畜禽及水产动物的抗病能力和免疫能力，提高饲料转化率及养殖动物的生产能力，是一种实用性和针对性很强的农业生态产品。

Description

一种促进鹅肝发育的微生物饲料添加剂及制备方法

技术领域

本发明涉及一种促进鹅肝发育的微生物饲料添加剂及制备方法，能提高鹅肝中卵磷脂合成能力，属于农业生物制品技术领域。

背景技术

鹅以饲喂青绿饲料为主，很少使用药物，在消费者心目中已逐步将鹅肉列为绿色、安全食品。鹅体内最有食用价值的部位是鹅肝，鹅肝含脂肪40％---60％，其中含不饱和脂肪酸65％---68％可降低人体血液中胆固醇含量，  抑制其他脂肪的吸收，对人体极为有益；每100克鹅肝中含高达4.5---7克的卵磷脂，有软化血管，延缓衰老，防治心脑血管疾病发生的功效；亚油酸为人体所必需，且在人体内不能合成，同时，鹅肝口感芬香醇厚，与鱼仔酱、松露齐名的世界三大美食珍品之一，随着人们生活水平提高和健康意识的日益增强，鹅肝的消费量节节攀升。

但是由于鹅主要食用新鲜的青绿饲料，其中最主要的成分是植物纤维，植物纤维在动物体内分解很慢，主要是因为缺乏分解这些纤维的纤维素酶、半纤维素酶和木糖酶，所以，鹅的养殖期比其它禽类都要长，擅长美食的法国人想出了用混合了小麦、玉米、脂肪、盐的饲料来进行4个星期的强化喂养的方法，使鹅“肝病变”，这种鹅肝体型大，分量足，颜色纯，深受国人喜爱，但这种“病变”的鹅肝在食用上却让人难以放心。

同类中相似的一项有关鹅饲料专利名为“含有微交变生物电场调制的酵母菌的鹅饲料”，其申请号为CN01129529.5  ，该专利特征，通过含有经微交变生物电场调制酵母菌，经一定时间超高频电波辐射，加入到鹅饲料中被鹅食用后，可增强鹅的抗病能力，该专利通过一种物理方法处理了一单一菌种，无任何微生物作用及机理。

发明内容

本发明的目的是提供一种促进鹅肝发育的微生物饲料添加剂及制备方法。

为实现以上目的，本发明的技术方案是提供一种促进肉鹅肝脏发育的微生物饲料添加剂，其特征在于，由复合菌种原液、炭源、氮源、无机盐、诱导剂原料通过复合同步固体发酵而成，它由以下重量百分比配制而成：  复合菌种原液15-20％、碳源40-60％、氮源10-15％、无机盐0.5-1％、酪蛋白0.5-1％、水3-35％；

所述的复合菌剂由植物乳杆菌、双歧杆菌、干酪乳杆菌、啤酒酵母菌、枯草芽孢杆菌组成，其重量百分配比为：植物乳杆菌20-30％、双歧杆菌25-35％、干酪乳杆菌10-15％、啤酒酵母菌15-20％、枯草芽孢杆菌10-30％。

所述的碳源为淀粉、纤维素、玉米粉之一或它们的混合物；所述的氮源为豆饼粉、花生饼、鱼粉、蚕蛹粉、酵母粉、玉米浆之一或它们的混合物；所述的无机盐为铵盐、硝酸盐之一或它们的混合物；

一种促进肉鹅肝脏发育的微生物饲料添加剂的制备方法，其特征在于，采用菌种复合培养方法，使菌种在同一培养基中驯化培养，其制备步骤为：

第一步：菌种筛选和生产制种

a.菌株筛选：在健康鹅小肠中取食糜为菌源，采用乳酸菌培养基进行乳酸菌分离，筛选植物乳杆菌、双歧杆菌、干酪乳杆菌和枯草芽孢杆菌；在啤酒发酵液中用麦氏琼脂培养基分离啤酒酵母菌在实验室中作菌株保存；

b.将分离的植物乳杆菌、双歧杆菌、干酪乳杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌分别接种于肉汤培养基中，同时添加0.5-1％比例的酪蛋白，在35-40℃温度下培养20-25小时，然后将啤酒酵母菌接种于麦氏琼脂培养基、枯草芽孢杆菌接种于营养琼脂培养基，植物乳杆菌、双歧杆菌、干酪乳杆菌分别接种于步骤a中的乳酸菌培养基中，进行划线培养，选出生长快、菌体特征明显的啤酒酵母、双歧杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌和枯草芽孢杆菌，在实验室中保存；

c.生产制种：将步骤b的啤酒酵母、双歧杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌和枯草芽孢杆菌分别转接入装有营养琼脂培养基的茄子瓶中，在35-40℃温度下培养40-50小时，待茄子瓶表面菌苔布满，并白中带黄时即可取出，然后放入2-6℃的冰箱中进行保存；

第二步：复合菌剂制作

a.按以下重量配比称取茄子瓶中各生产菌种：植物乳杆菌20-30％、双歧杆菌25-35％、干酪乳杆菌10-15％、啤酒酵母菌15-20％、枯草芽孢杆菌10-30％；

b.将生产菌种混合，将混合后的菌种按复合菌剂重量比例的4-6％添加在由糖蜜0.5-1％、蛋白胨0.5-1％、葡萄糖1-2％、氯化钠0-1％、酵母膏4-6％、硫酸镁0-1％、水88-93.2％组成的复合菌剂培养基中，调节ph值至6-8，放入容器中加温至110-130℃进行灭菌20-40分钟，冷却至25-35℃后在发酵罐中发酵4-6天；

第三步：复合菌剂扩大和驯化培养

a.将复合菌剂按以下重量配比与炭源、氮源、无机盐及诱导剂混合：复合菌种原液15-20％、碳源40-60％、氮源10-15％、无机盐0.5-1％、酪蛋白0.5-1％、水3-35％混合置入密闭罐中，110-130℃进行灭菌20-40分钟，冷却至25-35℃后在发酵罐中发酵4-6天；

b.发酵过程中取样三次，检测水分30-35％、Ph值3.5-4；

第四步：粉碎过筛

a.将发酵好的产品在40-45℃下干燥12-15小时，干燥后产品进行粉碎，粉碎后的产品过50目筛，筛出的粗料再进行粉碎和过筛，

b.过筛后装入包装袋中，转入成品库有序堆放，通知品管部门取样检测，主要参数：水份≤12.0％、活菌数≥50亿/g；物理性状：淡黄色粉末状固体。

本发明采用在健康鹅小肠中取食糜为菌源中筛选出的菌种与有机营养物质混合，通过微生物发酵技术制成，它含有多种活性酶、小肽、游离氨基酸、单体蛋白、抗氧化物质、维生素及抗菌物质，有益菌活菌数的数量达到了50亿/克；酸性蛋白酶6500u/g、木聚糖酶10000u/g、纤维素酶9000u/g、β-葡聚糖酶8000u/g、果胶酶10000u/g、植酸酶650u/g；活性小肽含量大于25％。

在正常家禽的肠道中存活着多种细胞构成的菌群，当本发明产品的有益微生物进入家禽肠道后，结合原有的有益菌，迅速形成优势微生物菌群，抑制了肠道有害菌的生长，其中的有益微生物在肠道壁周围通过磷壁酸与肠粘膜上皮细胞紧密结合，形成菌膜屏障，阻止有害菌的定植；复合微生物还可以产生抗菌物质、乳糖菌素、杆菌肽等，抑制大肠杆菌、沙门氏菌等有害菌在肠道内的繁殖、定植和吸附、中和毒性产物，抑制氨和胺的合成，促进肠道相关淋巴组织的高度反应能力。

本发明产品中所含的蛋白酶可将组成蛋白的大分子多肽水解成小肽或氨基酸；纤维素酶、半纤维素、木糖酶、果胶酶能破除植物细胞壁和分解植物纤维，使细胞内容物充分释放出来，为动物肠胃道所吸收；β-葡聚糖酶、木聚糖酶能水解水溶性β-葡聚糖酶、木聚糖，有效降低动物肠道中食糜粘度，有利于内源消化液充分和食糜混合，充分消化，减少畜禽下痢，利于营养物的吸收提高饲料的利用率及能量，降低料重比；植酸酶能催化植酸向正磷酸盐、肌醇和肌醇衍生物转化，可使植酸中的磷水解释放出来，使其中的磷得以为动物利用，这样可减少外加无机酸盐，减少粪便磷的排放，减轻对环境的污染，而且还可以提高被结合的蛋白质、矿物元素的利用，提高消化率。

本发明产品采用碳源、氮源、无机盐及酪蛋白作为菌种培养原料，它们是微生物细胞结构和酶的重要组成部分，还可维持酶的活性，能促进微生物生长繁殖，刺激活性酶及小肽的生成。

本发明从生态绿色养殖的目的入手，选育自然界中分离的益生素菌种，以农业原料为培养基，通过多级的富集发酵，产生高浓度的有益于对饲料中多种成分消化和吸收的有益菌群，同时产生大量的促进植物纤维分解多种活性酶及小肽等物质的添加剂，在饲料中直接添加，可形成动物机体良性生态环境，提高鹅体的免疫能力，促进鹅肝中卵磷脂和蛋白质合成，是一种安全、高效的绿色饲料添加剂，此发明的产品已在上海饲料办公室申请批准文号，批准文号：饲添字(2002)127370，在上海及江浙一代养殖户中销售并使用，增产增质效果十分明显。

本发明的优点是：

1、采用独创的复合培养及驯化相结合的发酵技术，既保证了有益菌种的高速生长，又保证了其代谢产物完全保留，最大限度保证了产品的特殊功效；

2、乳酸菌能改善鹅的肠道消化吸收功能，酵母菌提高合成鹅肝蛋白所需的单细胞蛋白，芽孢杆菌提供抵抗疾病的杆菌肽等抗生素，多种菌群综合作用，菌体代谢产生大量的微量元素和多种维生素，促进肝脏中卵磷脂和其它蛋白质的合成，使鹅肝个体大、分量足、口感鲜嫩，使用效果明显。

3、产品中含有促进饲料中纤维素、果糖等物质分解的纤维素酶、半纤维素酶、木糖酶、果糖酶等多种活性酶，与有益菌群共同作用，使饲料中的营养充分吸收利用。

4、采用粮食作物和常用饲料载体作为主要培养基原料，降低了生产成本，同时使用常用的发酵及生产设备，易于在家禽养殖中推广。

5、本发明的产品采用饲料工业中318公告的菌种进行发酵，在保证鹅营养需要的情况下改善自身免疫系统和生长发育，在动物体内无任何抗生素和重金属残留，符合生态农业的要求，保证了食用者的身体健康。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明作进一步说明。

实施例1

第一步：菌种筛选和生产制种

a.菌株筛选：在健康鹅小肠中取食糜为菌源，采用由酵母膏7.5g、蛋白胨7.5g、葡萄糖10g、KH₂PO₄2g(磷酸二氢钾)、西红柿汁100ml、Tween(吐温)80 0.5ml、蒸馏水900ml pH 7.0的乳酸菌培养基进行乳酸菌分离、筛选植物乳杆菌、双歧杆菌、干酪乳杆菌和枯草芽孢杆菌；在啤酒发酵液中用由葡萄糖1g、氯花钾1.8g、酵母浸膏2.5g、醋酸钠8.2g、琼脂15-20g、蒸馏水1000ml组成的麦氏琼脂培养基分离啤酒酵母菌在实验室中作菌株保存，本发明使用如下菌种：Lactobacillus plantarum(ATCC8014)植物乳杆菌、双歧杆菌Lactobacillus casei(ATCC7469)、Lactobacillus casei(ATCC7469)干酪乳杆菌、Saccharomyces cerevisiae(IFO0203)，啤酒酵母菌Saccharomyces cerevisiae(IFO0203)、枯草芽孢杆菌，Bacilluslicheniformis(13123)

b.将分离的植物乳杆菌、双歧杆菌、干酪乳杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌分别接种于肉汤培养基中，同时添加1％比例的酪蛋白，在35℃温度下培养24小时，然后将啤酒酵母菌接种于由葡萄糖1g、氯化钾1.8g、酵母浸膏2。5g、醋酸钠8.2g、琼脂15-20g、蒸馏水1000ml组成的麦氏(Meclary)琼脂培养基中，枯草芽孢杆菌接种于由牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化钠5g、琼脂15-20g、水1000ml、pH7.0-7.2组成的营养琼脂(LB培养基)，植物乳杆菌、双歧杆菌、干酪乳杆菌接种于步骤a中的乳酸菌培养基中，进行划线培养，选出生长快、菌体特征明显的啤酒酵母和植物乳杆菌、干酪乳杆菌和枯草芽孢杆菌，在实验室中保存；

c.生产制种：将步骤b的啤酒酵母、双歧杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌和枯草芽孢杆菌分别转接入装有营养琼脂培养基的茄子瓶中，在35℃温度下培养45小时，待茄子瓶表面菌苔布满，并白中带黄时即可取出；然后放入4℃的冰箱中进行保存；

以上分离培养基在实验室操作手册中均可查到。

第二步：复合菌剂制作

a.按以下重量配比称取茄子瓶中各生产菌种：植物乳杆菌20％、双歧杆菌25％、干酪乳杆菌10％、啤酒酵母菌15％、枯草芽孢杆菌30％。

b.将生产菌种混合，按培养基重量的4％比例添加在由糖蜜1％、蛋白胨0.9％、葡萄糖2％、氯化钠1％、酵母膏6％、硫酸镁0.5％、水88.6％组成的复合菌剂培养基中，ph值调节至6.8，放入容器中加温至120℃进行灭菌30分钟，冷却至30℃后在发酵罐中发酵4天；

第三步：复合菌剂扩大和驯化培养

a.将复合菌剂按重量配比与炭源、氮源、无机盐及诱导剂混合：复合菌剂20％、玉米粉60％(碳源)、豆饼粉15％(氮源)、硫酸铵1％(无机盐)、酪蛋白1％、水3％混合置入密闭罐中，加温至120℃进行灭菌30分钟，冷却至30℃后在发酵罐中发酵4天；

b.发酵过程中取样三次，检测水分30-35％、Ph值3.5-4结束。

第四步：粉碎过筛

a.将发酵好的产品在42℃下干燥15小时，干燥后产品进行粉碎，粉碎后的产品过50目筛，筛出的粗料再进行粉碎和过筛，

b.过筛后装入包装袋中，转入成品库有序堆放，通知品管部门取样检测，主要参数：水份≤12.0％、活菌数≥50亿/g；物理性状：淡黄色粉末状固体。

实施例2

第一步：菌种筛选和生产制种  同实施例1一样；

第二步：复合菌剂制作

a.按以下重量配比称取茄子瓶中各生产菌种：植物乳杆菌30％、双歧杆菌35％、干酪乳杆菌15％、啤酒酵母菌20％、枯草芽孢杆菌10％；

b.将生产菌种混合，按6％比例添加在由糖蜜0.5％、蛋白胨0.3％、葡萄糖1％、氯化钠0.2％、酵母膏4％、硫酸镁0.8％、水93.2％组成的复合菌剂培养基中，ph值调节至7，放入容器中加温至121℃进行灭菌40分钟，冷却至30℃后在发酵罐中发酵6天；

第三步：复合菌剂扩大和驯化培养

a.将复合菌剂按以下比例与炭源、氮源、无机盐及诱导剂混合：复合菌剂15％、玉米粉40％(碳源)、豆饼粉10％(氮源)、硫酸铵0.5％(无机盐)、酪蛋白0.5％、水34％混合置入密闭罐中，加温至125℃进行灭菌30分钟，冷却至30℃后在发酵罐中发酵4天；

b.发酵过程中取样三次，检测水分30-35％、Ph值3.5-4结束。

第四步：粉碎过筛

a.将发酵好的产品在45℃下干燥13小时，干燥后产品进行粉碎，粉碎后的产品过50目筛，筛出的粗料再进行粉碎和过筛，

b.过筛后装入包装袋中，转入成品库有序堆放，通知品管部门取样检测，主要参数：水份≤12.0％、活菌数≥50亿/g；物理性状：淡黄色粉末状固体。使用时按1.0-2.0‰比例添加到鹅饲料中并搅拌均匀，本产品需在干燥通风处密闭封存，开封后应尽快使用。本产品使用鹅牛每日摄食量将明显增加，鹅肝总量和比例明显提高，在上海农科院饲料研究开发中心进行的对比试验中，添加0.1％和0.2％本专利产品，鹅49日龄平均体增重比对照组分别提高8.82％和6.44％(P＜0.01)，鹅肝重量试验组较对照组增加25％。

Claims (5)

1.一种促进肉鹅肝脏发育的微生物饲料添加剂，其特征在于，由复合菌种原液、炭源、氮源、无机盐、诱导剂原料通过复合同步固体发酵而成，它由以下重量百分比配制而成：复合菌种原液15-20％、碳源40-60％、氮源10-15％、无机盐0.5-1％、酪蛋白0.5-1％、水3-35％；

所述的复合菌剂由植物乳杆菌、双歧杆菌、干酪乳杆菌、啤酒酵母菌、枯草芽孢杆菌组成，其重量百分配比为：植物乳杆菌20-30％、双歧杆菌25-35％、干酪乳杆菌10-15％、啤酒酵母菌15-20％、枯草芽孢杆菌10-30％。

2.根据权利要求1所述的一种促进肉鹅肝脏发育的微生物饲料添加剂，其特征在于，所述的碳源为淀粉、纤维素、玉米粉之一或它们的混合物。

3.根据权利要求1所述的一种促进肉鹅肝脏发育的微生物饲料添加剂，其特征在于，所述的氮源为豆饼粉、花生饼、鱼粉、蚕蛹粉、酵母粉、玉米浆之一或它们的混合物。

4.根据权利要求1所述的一种促进肉鹅肝脏发育的微生物饲料添加剂，其特征在于，所述的无机盐为铵盐、硝酸盐之一或它们的混合物。

5.根据权利要求1所述的一种促进肉鹅肝脏发育的微生物饲料添加剂的制备方法，其特征在于，采用菌种复合培养方法，使菌种在同一培养基中驯化培养，其制备步骤为：

第一步：菌种筛选和生产制种

a.菌株筛选：在健康鹅小肠中取食糜为菌源，采用乳酸菌培养基进行乳酸菌分离，筛选植物乳杆菌、双歧杆菌、干酪乳杆菌和枯草芽孢杆菌；在啤酒发酵液中用麦氏琼脂培养基分离啤酒酵母菌在实验室中作菌株保存；

b.将分离的植物乳杆菌、双歧杆菌、干酪乳杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌分别接种于肉汤培养基中，同时添加0.5-1％比例的酪蛋白，在35-40℃温度下培养20-25小时，然后将啤酒酵母菌接种于麦氏琼脂培养基，枯草芽孢杆菌接种于营养琼脂培养基，植物乳杆菌、双歧杆菌、干酪乳杆菌分别接种于步骤a中乳酸菌培养基中，进行划线培养，选出生长快、菌体特征明显的啤酒酵母、双歧杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌和枯草芽孢杆菌，在实验室中保存；

c.生产制种：将步骤b的啤酒酵母、双歧杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌和枯草芽孢杆菌分别转接入装有营养琼脂培养基的茄子瓶中，在35-40℃温度下培养40-50小时，待茄子瓶表面菌苔布满，并白中带黄时即可取出，然后放入2-6℃的冰箱中进行保存；

第二步：复合菌剂制作

a.按以下重量配比称取茄子瓶中各生产菌种：植物乳杆菌20-30％、双歧杆菌25-35％、干酪乳杆菌10-15％、啤酒酵母菌15-20％、枯草芽孢杆菌10-30％；

b.将生产菌种混合，将混合后的菌种按复合菌制重量比例的4-6％添加在由糖蜜0.5-1％、蛋白胨0.5-1％、葡萄糖1-2％、氯化钠0-1％、酵母膏4-6％、硫酸镁0-1％、水88-93.2％组成的复合菌剂培养基中，调节ph值至6-8，放入容器中加温至110-130℃进行灭菌20-40分钟，冷却至25-35℃后在发酵罐中发酵4-6天；

第三步：复合菌剂扩大和驯化培养

a.将复合菌剂按以下重量配比与炭源、氮源、无机盐及诱导剂混合：复合菌种原液15-20％、碳源40-60％、氮源10-15％、无机盐0.5-1％、酪蛋白0.5-1％、水3-35％，混合置入密闭罐中，110-130℃进行灭菌20-40分钟，冷却至25-35℃后在发酵罐中发酵4-6天；

b.发酵过程中取样三次，检测水分30-35％、Ph值3.5-4；

第四步：粉碎过筛

a.将发酵好的产品在40-45℃下干燥12-15小时，干燥后产品进行粉碎，粉碎后的产品过50目筛，筛出的粗料再进行粉碎和过筛，

b.过筛后装入包装袋中，转入成品库有序堆放，通知品管部门取样检测，主要参数：水份≤12.0％、活菌数≥50亿/g；物理性状：淡黄色粉末状固体。