CN101715877A - 一种利用乳酸杆菌和酵母菌生产功能性微生物制剂的制备方法 - Google Patents
一种利用乳酸杆菌和酵母菌生产功能性微生物制剂的制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种利用乳酸杆菌和酵母菌生产功能性微生物制剂的制备方法，其特征在于，采用有益菌株的液体培养；离心收集菌体细胞壁；然后将菌群进行固体扩大培养，在培养物中添加收集富含多糖的细胞壁。本发明的优点是产品中的高浓度乳酸菌能显著提高养殖动物的消化吸收功能，同时产生的代谢产物如肽聚糖增加了动物对病原体的免疫能力；产品中高浓度的酵母菌能提高动物生长需要的丰富的单细胞蛋白，同时，酵母细胞被充分破壁，释放出大量的β-1，3葡聚糖，显著提高对革兰氏阳性和阴性菌的免疫能力，采用粮食作物和常用饲料载体作为主要培养基原料，降低了生产成本，易于在动物养殖中推广。
Description
技术领域
本发明涉及一种利用乳酸杆菌和酵母菌生产功能性微生物制剂的制备方法，该制剂可用于促进养殖动物生长、提高养殖动物的免疫能力，属于农业生物制品技术领域。
背景技术
多年来，由于我国动物养殖业的低成本急剧扩张，从而形成了饲养环境失控、动物免疫机能下降、疾病发生率不断高攀的格局。
自1929年英国Fleming发现抗生素以来，并被广泛地应用于养殖业，大大地提高了养殖业的生产水平。但由于人们过分追求养殖的经济效益，致使抗生素、激素类以及化学合成药物等各种饲料添加剂的用量成倍增加，形成了“高营养水平+高剂量药物”的饲养模式，使动物机体免疫系统功能不全而必须依赖抗生素等物质才能抵御感染的局面，最终成为一种恶性循环，造成了①饲料中的抗生素和药物通过食物链逐级富集，增强了其毒性和危害；②在畜产品中抗生素和药物残留，细菌的耐药性提高、严重危害了人体健康。据报道，仅1992年全美就有13300名患者死于抗生素耐药性细菌感染。在国内，磺胺类、四环素类、青霉素、氯霉素、卡那霉素、庆大霉素等药物，在畜禽中已产生严重的抗药性，临床效果越来越差，使用剂量随之增加；③由于氮、磷、铜、锌及药物添加剂排出养殖动物体内后，造成了对环境的污染，致使土壤和地下水质恶化、释放出各种恶臭等。据专家预测，一个万头猪场按美国FDA允许使用的砷制剂剂量推算，若连续使用含砷的加药饲料，5～8年之后将可能向猪场周边排放近1t砷，16年后土壤中砷含量即上升0.28mg/kg，按此计算不出10年，该地所产甘薯中砷含量会全部超过国家食品卫生标准，这片耕地只能废弃或种其它作物；④造成动物机体的免疫力下降，引起内源性感染。震惊世界的英国“疯牛病”事件、比利时“二恶英污染(dioxin)”事件、法国“污水饲料事件”和供港猪的“盐酸克伦特罗”事件，唤起了人们对畜产品安全性的高度重视。
在当前的严峻形势下，对于既有提高动物免疫力效能，又可促进动物生长、安全无害的新型产品的开发就显得日益迫切。而通过有益微生物及其代谢产物在水体及代谢产物在动物养殖中的利用，可提高养殖动物的消化吸收能力，促进其生长，同时抑制肠道内致病菌的大量繁殖，增强机体免疫力，这是一种治本的处理方法，也是推行绿色养殖的最佳措施。
发明内容
本发明的目的是提供一种提高养殖动物免疫能力和消化吸收能力的利用乳酸杆菌和酵母菌生产功能性微生物制剂的制备方法。
为实现以上目的，本发明的技术方案是提供一种利用乳酸杆菌和酵母菌生产功能性微生物制剂的制备方法，其特征在于，采用液体高速培养和固体扩大结合的发酵方法，其生产步骤为：
第一步：发酵菌株来源及培养
a.菌株来源：本发明的植物乳酸杆菌和酵母菌均来源农业部微生物菌种保藏中心，其中植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)，菌种编号：ACCC10533，啤酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)，菌种编号：ACCC20065；
b.将植物乳杆菌和酿酒酵母菌分别接种于肉汤培养基中，在35-40℃温度下培养20-25小时，然后将酿酒酵母菌接种于酵母膏麦芽汁琼脂培养基，将植物乳杆菌接种于乳酸菌培养基中，进行划线培养，选出生长快、菌体特征明显的植物乳杆菌、酿酒酵母菌分别在实验室中保存；
c.生产制种：最后将选出生长快的植物乳杆菌转接入装有营养琼脂培养基的茄子瓶中，将酿酒酵母菌转接入酵母膏麦芽汁琼脂作培养基的茄子瓶中，在35-40℃温度下培养45-50小时，待茄子瓶表面菌苔布满，并白中带黄时即可取出，然后放入2-6℃的冰箱中进行保存；
第二步：有益菌株的液体培养
a.按以下重量配比例称取各菌种：植物乳杆菌55-60％、酿酒酵母菌40-45％
b.将称取的植物乳杆菌和酿酒酵母菌混合在一起进行复合培养：步骤a中称取的混合菌苔按1∶25-30的比例接种于120-130℃、30-45min高温灭菌的液体培养基中，在发酵罐中搅拌30min，其转速为200-240r/min，搅拌均匀后放入消毒后塑料桶中静置5-7天，静置过程中每天测定pH值并释放产出的气体；
c.发酵过程中抽样3次，显微镜下检测菌体生长情况和测定pH值，当活菌总数达到20亿/ml浓度和pH值达到3.0-4.0时停止发酵；
第三步：离心收集菌体细胞壁
a.将步骤1中发酵液在离心机以8000r/min，10min离心收集菌体沉淀，用0.9％生理盐水反复洗涤细菌至白色，将菌体悬浮于蒸馏水中，然后用超声波细胞破碎机处理30-40min，进行物理破碎2-4次；
b.细胞壁分离：将物理破碎后的溶液在离心机以每4000r/min离心15-20min，移去沉淀物，以去除未破碎菌体，再将上清夜在离心机以每8000r/min离心20min，收集沉淀的粗细胞壁；
第四步：菌群的固体扩大培养
a.将步骤2复合培养的菌液混合按1∶25-30的比例接入120-130℃、30-45min高温灭菌的固体扩大培养基中，搅拌30-45min至均匀，倒入50-70kg消毒双层饲料袋中密封发酵，温度30-35℃，时间8-10天，发酵过程中取样三次，测定水分和pH值，发酵结束后取样，测定水分为35-40％、pH值为3.5-4.0；
b.添加粗细胞壁：将细胞壁收集物与固体扩大发酵物按1∶50-60比例混合，倒在搅拌机中搅拌，转速为150-200转/min，搅拌时间为30min；
第五步：干燥及粉碎过筛
a.干燥：将步骤4发酵完全的产品按时间先后放入培养箱干燥，温度控制在40-45℃，时间14-16小时，干燥完成的物料水份控制在≤12％；
b.粉碎过筛：将干燥后的产品转入粉碎机进行粉碎，物料温度控制在45℃以下，粉碎后的物料过50目筛网，筛后粗料重新粉碎；
c.过筛后装入带有内袋的桶或袋中，扎紧袋口，系好标识牌，转入成品库有序堆放；取样检测，主要参数：水份≤12％、活菌数60-80亿/g；物理性状：深黄色粉末状固体。
所述的步骤2液体培养基为无菌水再加豆粕粉、尿素、硫酸铵、酵母粉、玉米粉、糖蜜、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、磷酸镁、硫酸镁的至少三种混合物，其重量百分配比为：豆粕2-6％、尿素1-3％、硫酸铵0-1％、酵母粉0-3％、玉米粉2-8％、糖蜜10-20％、磷酸二氢钾0-1％、磷酸二氢钠0-2％、磷酸镁0-1％、硫酸镁0-1％、无菌水54-84％。
所述的步骤4的固体扩大培养基为清糠和无菌水再加豆粕粉、糖蜜、玉米粉、磷酸二氢钾、磷酸二氢钠、硫酸镁、无菌水10-30％、尿素中的至少四种混合物组成，其重量百分配比为：豆粕2-6％、糖蜜8-12％、玉米粉4-8％、清糠40-70％、磷酸二氢钾0.03-0.06％、磷酸二氢钠1-2％、硫酸镁0.4-0.8％、尿素1-2％、无菌水15-45％。
非特异性防御机制是脊椎动物抵抗病原体微生物感染的第一道防线系指机体组织和体液中大量的细胞和抗菌的蛋白质、肽类。在微生物细胞中，同样存在着这些可被养殖动物直接吸收利用的肽类及多糖，如肽聚糖和葡聚糖等，肽聚糖(PG)存在于革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的细胞壁中，是由N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸形成的二糖通过胎链相互交叉构成的聚合物。已被证实口服肽聚糖能增强动物对革兰氏阳性病菌的抵抗能力，肽聚糖还能增强动物白细胞的噬菌作用及对病毒的抵抗能力(Itami er al.1998)，而且对血淋巴中的抗菌、溶菌、酚氧化酶和超氧化歧化酶具有不同程度的诱导作用。(孟凡超等，1999)。葡聚糖的免疫效果已得到广泛的研究，现已应用于养殖动物中的有酵母葡聚糖，β-1，3葡聚糖等类型，其中研究最多的是酵母葡聚糖，酵母葡聚糖能提高动物的溶菌酶产量和巨噬细胞的杀菌活性(Jorgensen，Rorstad，1993)。β-1，3葡聚糖已被用来预防疾病，它能增强动物的溶菌酶和补体活性，吞噬细胞的呼吸爆炸作用及其过氧化物的产量。总的来说，微生物的代谢产物是一类带有多种复杂基团的生物聚合物，它能作为免疫增强剂激活非特异性免疫系统，通常这些聚合物是通过微生物进化保留下来的特定序列结构，但不是高等动物体的组成成分。
本专利选取一种乳酸杆菌，进行摇瓶实验，选择在培养基中高速生产的菌种，同时选取一种酿酒酵母菌，其细胞壁中含有大量的葡聚糖特别是β-1，3葡聚糖，能显著提高养殖动物对革兰氏阳性和阴性病菌的免疫能力，同时提高动物对饲料的消化吸收能力，使日增重明显提高，养殖周期缩短。
本发明的优点是：
1.采用液体高速培养和固体扩大结合的发酵技术，既保证了有益菌种的高速生长，又保证了其代谢产物完全保留；
2.产品中的高浓度乳酸能显著提高动物的消化吸收功能，同时产生的肽聚糖增加了动物对病原体的免疫能力；
3.产品中高浓度的酵母能提高动物生长需要的丰富的单细胞蛋白，同时，酵母细胞被充分破壁，释放出大量的β-1，3葡聚糖，显著提高对革兰氏阳性和阴性菌的免疫能力；
4.乳酸菌和酵母菌发酵营养丰富的固体培养基，产生大量的纤维素酶、半纤维素酶、低聚肽、短肽混合物、抗生素、微量元素及其它代谢产物，为养殖动物提供最佳的营养生长条件；
5.采用粮食作物和常用饲料载体作为主要培养基原料，降低了生产成本，同时使用常用的发酵及生产设备，易于在养殖中推广；
6.本发明的产品添加到动物饲料中，提供丰富的乳酸菌提高动物的消化吸收能力，提供丰富的微生物代谢产物提高养殖体的非特异性免疫能力，减少了抗生素在养殖中的使用量，在动物体内无任何抗生素和重金属残留，是一种安全、绿色的微生物产品。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步说明。
实施例1
第一步：发酵菌株来源及培养
a.菌株来源：本发明的植物乳酸杆菌和酵母菌均来源农业部微生物菌种保藏中心，其中植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)，菌种编号：ACCC10533，啤酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)，菌种编号：ACCC20065；
b.将分离的植物乳杆菌、酿酒酵母菌分别接种于肉汤培养基中，在37℃温度下培养22小时后，将酿酒酵母菌接种于酵母膏麦芽汁琼脂培养基，将植物乳杆菌接种于乳酸菌培养基中，进行划线培养，选出生长快、菌体特征明显的植物乳杆菌、酿酒酵母菌分别在实验室中保存；
c.生产制种：最后将选出生长快的植物乳杆菌转接入装有营养琼脂培养基的茄子瓶中，酿酒酵母菌转接入装有酵母膏麦芽汁琼脂作培养基的茄子瓶中，在37℃温度下培养47小时，带茄子瓶表面菌苔布满，并白中带黄时即可取出，然后放入4℃的冰箱中进行保存；
MRS乳酸菌培养基：Yeast extract(酵母膏)7.5g Peptone(蛋白胨)7.5Glucose(葡萄糖)10g、KH2PO4 2g(磷酸二氢钾)、Tomato juice(西红柿汁)100ml Tween(吐温)800.5ml、Distilled water(蒸馏水)900mlpH 7.0；
酵母选择培养基为：葡萄糖1g、KCl1.8g、酵母浸膏2.5g、醋酸钠8.2g、琼脂15-20g、蒸馏水1000ml。
营养琼脂培养基：牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化钠5g、琼脂15-20g、水1000ml、pH7.0-7.2；
肉汤培养基：牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化钠5g、水1000ml、pH7.0-7.2，酵母膏麦芽汁琼脂培养基：麦芽粉3g、酵母浸膏0.1g、水1000ml。
以上几种培养基在实验室操作教科书上都有记载；
第二步：有益菌株的液体培养
a.按以下重量配比称取各菌种：植物乳杆菌55％、酿酒酵母菌45％；
b.将称取的植物乳杆菌和酿酒酵母菌混合在一起进行复合培养：步骤a中称取的混合菌苔按1∶25的比例接种于121℃、45min高温灭菌的液体培养基中，倒在发酵罐中搅拌30min，其转速为220r/min，搅拌均匀后放入消毒后塑料桶中静置5天，静置过程中每天测定Ph值并释放产出的气体，
c.发酵过程中抽样3次，显微镜下检测菌体生长情况和测定Ph值，当活菌总数达到20亿/ml浓度以上和pH值达到3.0-4.0时停止发酵；
液体培养基：豆粕2％、尿素1％、硫酸铵0.5％、酵母粉1％、玉米粉3％、糖蜜10％、磷酸二氢钾0.5％、磷酸二氢钠0.7％、磷酸镁0.6％、硫酸镁0.2％、无菌水80.5％；
第三步：离心收集菌体细胞壁
b.将步骤1中发酵液在外购离心机以8000r/min，10min离心收集菌体沉淀，用0.9％生理盐水反复洗涤细菌至白色，将菌体悬浮于蒸馏水中，然后用外购超声波细胞破碎机处理30-40min，进行物理破碎2-4次；
c.细胞壁分离：将物理破碎后的溶液在离心机以4000r/min离心15-20min，移去沉淀物，以去除未破碎菌体，再将上清夜在离心机以8000r/min离心20min，收集沉淀的粗细胞壁；
第四步：菌群的固体扩大培养
a.将步骤2复合培养的菌液混合按1∶25的比例接入121℃、30min高温灭菌的固体扩大培养基中，搅拌30min至均匀，倒入50kg消毒双层饲料袋中密封发酵，温度30℃，时间8-10天，发酵过程中取样三次，测定水分和pH值，发酵结束后取样，测定水分为35-40％、pH值为3.5-4.0；
b.添加粗细胞壁：将细胞壁收集物与固体扩大发酵物按1∶50比例混合，倒在搅拌机中搅拌，转速为200转/min，搅拌时间为30min；
固体扩大培养基：豆粕2％、糖蜜8％、玉米粉4％、清糠40％、磷酸二氢钾0.03％、磷酸二氢钠1％、硫酸镁0.4％、无尿素1％、无菌水43.57％；
第五步：干燥及粉碎过筛
a.干燥：将步骤4发酵完全的产品按时间先后放入培养箱干燥，每盘重量2.0公斤±0.5，温度控制在40-45℃，时间14-16小时，干燥完成的物料水份控制在≤12％；
b.粉碎过筛：将干燥后的产品转入粉碎间进行粉碎，物料温度控制在45℃以下，粉碎后的物料过50目筛网，筛后粗料重新粉碎；
c.过筛后装入带有内袋的桶或袋中，扎紧袋口，系好标识牌，转入成品库有序堆放；取样检测，主要参数：水份≤12％、活菌数60-80亿/g；物理性状：深黄色粉末状固体。
实施例2
第一步：发酵菌株来源及培养：同实施例1；
第二步：有益菌株的液体培养
a.按以下重量配比称取各菌种：植物乳杆菌60％、酿酒酵母菌40％
b.将称取的植物乳杆菌和酿酒酵母菌混合在一起进行复合培养：步骤a中称取的混合菌苔按1∶30的比例接种于121℃、45min高温灭菌的培养基中，在发酵罐中搅拌30min，其转速为200r/min，搅拌均匀后放入消毒后塑料桶中静置7天，静置过程中每天测定pH值并释放产出的气体；
c.发酵过程中抽样3次，显微镜下检测菌体生长情况和测定pH值，当活菌总数达到20亿/ml浓度和pH值达到3.0-4.0时停止发酵；
液体培养基：豆粕6％、尿素3％、硫酸铵1％、酵母粉3％、玉米粉8％、糖蜜20％、磷酸二氢钾1％、磷酸二氢钠1.9％、磷酸镁0.8％、硫酸镁0.9％、无菌水54.4％；
第三步：离心收集菌体细胞壁
a.将步骤1中发酵液在外购离心机以8000r/min，10min离心收集菌体沉淀，用0.9％生理盐水反复洗涤细菌至白色，将菌体悬浮于蒸馏水中，然后用外购超声波细胞破碎机处理30-40min，进行物理破碎2-4次；
b.细胞壁分离：将物理破碎后的溶液在离心机以4000r/min离心15-20min，移去沉淀物，以去除未破碎菌体，再将上清夜在离心机以8000r/min离心20min，收集沉淀的粗细胞壁；
第四步：菌群的固体扩大培养
a.将步骤2复合培养的菌液混合按1∶30的比例接入121℃、45min高温灭菌的固体扩大培养基中，搅拌45min至均匀，倒入70kg消毒双层饲料袋中密封发酵，温度35℃，时间10天，发酵过程中取样三次，测定水分和pH值，发酵结束后取样，测定水分为35-40％、pH值为3.5-4.0
b.添加粗细胞壁：将细胞壁收集物与固体扩大发酵物按1∶60比例混合，倒入搅拌机中搅拌，转速为180转/min，搅拌时间为30min；
固体扩大培养基：豆粕粉6％、糖蜜12％、玉米粉8％、清糠55％、磷酸二氢钾0.06％、磷酸二氢钠2％、硫酸镁0.8％、尿素1.8％、无菌水43.3％
第五步：干燥及粉碎过筛
a.干燥：将步骤4发酵完全的产品按时间先后放入培养箱干燥，温度控制在45℃，时间16小时，干燥完成的物料水份控制在≤12％；
b.粉碎过筛：将干燥后的产品转入粉碎间进行粉碎，物料温度控制在45℃以下，粉碎后的物料过50目筛网，筛后粗料重新粉碎；
其余同实施例1一样。
使用时按1-1.5‰比例添加到动物饲料搅拌均匀后投喂，在动物发病期间应加大使用量，按2-3‰比例添加使用至发病症状消失为止，本产品需在干燥通风处密闭封存，开封后应尽快使用。在上海市科委领导的关心和支持下，于2007年开始在上海市奉贤区进行肉猪的养殖研究，从实验数据可以看出，试验期间，试验组的日增重达到了862g，对照组只有789g，试验组日增重提高了9.25％，料肉比降低了7.9％，肉猪的发病率试验组比对照组下降了24.8％。
Claims (3)
1.一种利用乳酸杆菌和酵母菌生产功能性微生物制剂的制备方法，其特征在于，采用液体高速培养和固体扩大结合的发酵方法，其生产步骤为：
第一步：发酵菌株选育
a.菌株来源：本发明的植物乳酸杆菌和酵母菌均来源农业部微生物菌种保藏中心，其中植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)，菌种编号：ACCC10533，啤酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)，菌种编号：ACCC20065；
b.将分离的植物乳杆菌和酿酒酵母菌分别接种于肉汤培养基中，在35-40℃温度下培养20-25小时，然后将酿酒酵母菌接种于酵母膏麦芽汁琼脂培养基，将植物乳杆菌接种于乳酸菌培养基中，进行划线培养，选出生长快、菌体特征明显的植物乳杆菌、酿酒酵母菌分别在实验室中保存；
c.生产制种：最后将选出生长快的植物乳杆菌转接入装有营养琼脂培养基的茄子瓶中，将酿酒酵母菌转接入酵母膏麦芽汁琼脂作培养基的茄子瓶中，在35-40℃温度下培养45-50小时，待茄子瓶表面菌苔布满，并白中带黄时即可取出，然后放入2-6℃的冰箱中进行保存；
第二步：有益菌株的液体培养
a.按以下重量配比例称取各菌种：植物乳杆菌55-60％、酿酒酵母菌40-45％；
b.将称取的植物乳杆菌和酿酒酵母菌混合在一起进行复合培养：步骤a中称取的混合菌苔按1∶25-30的比例接种于120-130℃高温灭菌的液体培养基中，在发酵罐中搅拌30min，其转速为200-240r/min，搅拌均匀后放入消毒后塑料桶中静置5-7天，静置过程中每天测定pH值并释放产出的气体；
c.发酵过程中抽样3次，显微镜下检测菌体生长情况和测定Ph值，当活菌总数达到20亿/ml浓度和pH值达到3.0-4.0时停止发酵；
第三步：离心收集菌体细胞壁
a.将步骤1中发酵液在离心机以8000r/min，10min离心收集菌体沉淀，用0.9％生理盐水反复洗涤细菌至白色，将菌体悬浮于蒸馏水中，然后用超声波细胞破碎机处理30-40min，进行物理破碎2-4次；
b.细胞壁分离：将物理破碎后的溶液在离心机以4000r/min离心15-20min，移去沉淀物，以去除未破碎菌体，再将上清夜在离心机以8000r/min离心20min，收集沉淀的粗细胞壁；
第四步：菌群的固体扩大培养
a.将步骤2复合培养的菌液混合按1∶25-30的比例接入120-130℃、30-45min高温灭菌的固体扩大培养基中，搅拌30-45min至均匀，到入50-70kg消毒双层饲料袋中密封发酵，温度30-35℃时间8-10天，发酵过程中取样三次，测定水分和pH值，发酵结束后取样，测定水分为35-40％、pH值为3.5-4.0；
b.添加粗细胞壁：将细胞壁收集物与固体扩大发酵物按1∶50-60比例混合，倒在搅拌机中搅拌，转速为150-200转/min，搅拌时间为30min；
第五步：干燥及粉碎过筛
a.干燥：将步骤4发酵完全的产品按时间先后放入培养箱干燥，温度控制在40-45度，时间14-16小时，干燥完成的物料水份控制在≤12％；
b.粉碎过筛：将干燥后的产品转入粉碎机进行粉碎，物料温度控制在45℃以下，粉碎后的物料过50目筛网，筛后粗料重新粉碎；
c.过筛后装入带有内袋的桶或袋中，扎紧袋口，系好标识牌，转入成品库有序堆放；取样检测，主要参数：水份≤12％、活菌数60-80亿/g；物理性状：深黄色粉末状固体。
2.根据权利要求1所述的利用乳酸杆菌和酵母菌生产功能性微生物制剂的制备方法，其特征在于，所述的步骤2液体培养基为无菌水再加豆粕粉、尿素、硫酸铵、酵母粉、玉米粉、糖蜜、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、磷酸镁、硫酸镁的至少三种混合物，其重量百分配比为：豆粕2-6％、尿素1-3％、硫酸铵0-1％、酵母粉0-3％、玉米粉2-8％、糖蜜10-22％、磷酸二氢钾0-1％、磷酸二氢钠0-2％、磷酸镁0-1％、硫酸镁0-1％、无菌水54-84％。
3.根据权利要求1所述的利用乳酸杆菌和酵母菌生产功能性微生物制剂的制备方法，其特征在于，所述的步骤4的固体扩大培养基为清糠和无菌水再加豆粕粉、糖蜜、玉米粉、磷酸二氢钾、磷酸二氢钠、硫酸镁、尿素中的至少四种混合物组成，其重量百分配比为：豆粕2-6％、糖蜜8-12％、玉米粉4-8％、清糠40-70％、磷酸二氢钾0.03-0.06％、磷酸二氢钠1-2％、硫酸镁0.4-0.8％、无尿素1-2％、无菌水15-45％。
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