CN101046479A - 不含目标蛋白质人血清基体物质的制备方法 - Google Patents
不含目标蛋白质人血清基体物质的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101046479A CN101046479A CN 200710067299 CN200710067299A CN101046479A CN 101046479 A CN101046479 A CN 101046479A CN 200710067299 CN200710067299 CN 200710067299 CN 200710067299 A CN200710067299 A CN 200710067299A CN 101046479 A CN101046479 A CN 101046479A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- target protein
- human serum
- serum
- base matter
- antibody
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 title claims abstract description 106
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims abstract description 104
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims abstract description 104
- 238000000034 method Methods 0.000 title abstract description 10
- 239000011324 bead Substances 0.000 claims description 25
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 claims description 19
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 claims description 19
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 19
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 12
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 claims description 10
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 claims description 10
- 230000004044 response Effects 0.000 claims description 10
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 9
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 6
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 6
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 5
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 5
- 230000008878 coupling Effects 0.000 claims description 5
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 claims description 5
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 claims description 5
- 238000007306 functionalization reaction Methods 0.000 claims description 4
- 238000003760 magnetic stirring Methods 0.000 claims description 4
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims description 4
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 abstract description 17
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 6
- 238000001514 detection method Methods 0.000 abstract description 3
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 16
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 15
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 15
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 15
- 238000011161 development Methods 0.000 description 14
- 239000000463 material Substances 0.000 description 13
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 13
- 101710095342 Apolipoprotein B Proteins 0.000 description 12
- 102100040202 Apolipoprotein B-100 Human genes 0.000 description 12
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 7
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 7
- 101150102415 Apob gene Proteins 0.000 description 6
- 102000003712 Complement factor B Human genes 0.000 description 5
- 108090000056 Complement factor B Proteins 0.000 description 5
- 108010042653 IgA receptor Proteins 0.000 description 5
- 108010071690 Prealbumin Proteins 0.000 description 5
- 102000007584 Prealbumin Human genes 0.000 description 5
- 102100034014 Prolyl 3-hydroxylase 3 Human genes 0.000 description 5
- 102000002070 Transferrins Human genes 0.000 description 5
- 108010015865 Transferrins Proteins 0.000 description 5
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 5
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 5
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 5
- 229940099472 immunoglobulin a Drugs 0.000 description 5
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 description 5
- QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N serotonin Chemical compound C1=C(O)C=C2C(CCN)=CNC2=C1 QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000010339 medical test Methods 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 2
- 238000011095 buffer preparation Methods 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000007769 metal material Substances 0.000 description 2
- HOGDNTQCSIKEEV-UHFFFAOYSA-N n'-hydroxybutanediamide Chemical compound NC(=O)CCC(=O)NO HOGDNTQCSIKEEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 229940076279 serotonin Drugs 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- FRPHFZCDPYBUAU-UHFFFAOYSA-N Bromocresolgreen Chemical compound CC1=C(Br)C(O)=C(Br)C=C1C1(C=2C(=C(Br)C(O)=C(Br)C=2)C)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 FRPHFZCDPYBUAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- OHJMTUPIZMNBFR-UHFFFAOYSA-N biuret Chemical compound NC(=O)NC(N)=O OHJMTUPIZMNBFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000013016 damping Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000010421 standard material Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
一种不含目标蛋白质人血清基体物质的制备方法，它是依据免疫学反应原理和目标蛋白质在血清中的含量，使一定量结合于不同介质上的抗目标蛋白质的多或单克隆抗体与人血清中的目标蛋白质反应，形成抗原抗体复合物后，通过不同的方法去除含目标蛋白质及其抗体的免疫复合物，从而得到不含目标蛋白质人血清基体物质，它能使标准物质制备用基体物质尽量与实际检测标本的基体物质一致，降低由标准物质与实际检测标本在测试中由于基体物质不一致产生的基体效应，确保检测结果的准确。
Description
技术领域
本发明涉及的是一种主要用于医学检验的不含目标蛋白质人血清基体物质的制备方法，属于医学检验的标准物质制备技术领域。
背景技术：
标准物质是指具有一种或多种足够均匀和很好确定了的特性值，用来校准设备、评价测量方法或给材料赋值的材料和物质。标准物质研制的发展趋势包括两个方向：其一为传统领域到生物、临床等新兴领域；其二为高纯与复杂基体的两极发展。
蛋白质类标准物质是生物、临床等领域中重要的标准物质，我国的标准物质研究中心目前没有适用于医学检验用蛋白质类标准物质。国内临床检验中习惯使用纯分析物质配制于纯溶剂(如水)后形成的标准或参考液，以这样的标准液为标准，求得各标本的分析结果。这样的做法忽视了标本和标准处于完全不同的基体状态所产生的基体效应(matrixeffect)。
分析样品中除了目标分析物以外的所有其他物质和组分称为该分析物的基体，基体(matrix)亦称为基质。基体效应是检测系统检测标本中的目标分析物时，处于目标分析物周围的所有非分析物质(基体)对分析物参与反应的影响。临床实验室测定血液标本中各种蛋白质含量时，所用标准物质的基体应当是除目标蛋白以外的人血清物质，但目前并非如此。制备不含目标蛋白质的血清基体物质是研制目标蛋白质标准物质的基础。
据文献报道：临床检验溯源用蛋白质类标准物质的制备方法如下：得到高纯度的目标产物后，添加40％左右的牛血清白蛋白或人血清白蛋白以及其他血清类物质，总之使目标蛋白质的存在基质类似于人血清的成分。但是人血清是一种很复杂的混合物，其成份可能有几百种之多，目前对其准确的成份、含量及作用机制仍不清楚，尤其对于多肽类生长因子、激素和脂类等尚未充分认识。因此添加物不能代表真正的血清内含物。研制尽可能与人类血清成分一致的基体物质，降低临床用标准物质的基体效应是临床检测结果准确性的必要保证。
发明内容
本发明的目的在于研制用于制备标准物质的、与血清成分基本一致的不含目标蛋白质人血清基体物质的制备方法；使目标蛋白质标准物质的基体尽量与实际检测标本的基体一致，降低由标准物质与实际检测标本基体不一致产生的基体效应。
本发明的目的是通过如下技术方案来完成的，它是依据免疫学反应原理和目标蛋白质在血清中的含量，使一定量结合于不同介质上的抗目标蛋白质的多或单克隆抗体与人血清中的目标蛋白质反应，形成抗原抗体复合物后，通过不同的方法去除含目标蛋白质及其抗体的免疫复合物，从而得到不含目标蛋白质人血清基体物质。
当所述目标蛋白质在血清中含量大于300mg/L时，将该目标蛋白质相应的抗体用双功能试剂交联，使之成为可以与目标蛋白质反应的特异性固体免疫介质，与人血清中的目标蛋白质反应后除去目标蛋白质；当所述的目标蛋白质在血清中含量小于300mg/1L的时候，选取该目标蛋白质相应的抗体与功能化的磁珠偶联形成免疫磁珠，再与人血清中的目标蛋白质反应后除去目标蛋白质。
当目标蛋白质含量大于300mg/L时，选用该蛋白质的特异性固体免疫介质以1∶60～1∶10比例加入至正常人混合血清中，置于磁力搅拌器上，4℃反应，过夜，以10000转/分钟的转速离心；检测离心上清，直至不含目标蛋白质，并保持白蛋白与球蛋白的正常比例；此离心上清为不含目标蛋白质的人血清基体物质。
当目标蛋白质含量为300mg/L以下时，选用目标蛋白质的抗体与功能化的磁珠偶联，制备含抗目标蛋白质抗体的免疫磁珠；将以上免疫磁珠以1∶40～1∶100比例投入正常人混合血清中，置于一定转速的摇床上，37℃反应1～2小时，4℃冰箱放置1～4小时，将反应混合物置于磁场中，使含目标蛋白质及其抗体的免疫磁珠与人血清分离，将血清再以10000转/分钟的转速离心，检测离心上清，直至不含目标蛋白，并保持白蛋白与球蛋白的正常比例；此离心上清为不含目标蛋白质的人血清基体物质。
本发明利用免疫学原理，根据目标蛋白质在正常人血清中的含量，选用不同的方法，得到不含目标蛋白质的人血清基体物质；它能使标准物质制备用基体物质尽量与实际检测标本的基体物质一致，降低由标准物质与实际检测标本在测试中由于基体物质不一致产生的基体效应，确保检测结果的准确。
具体实施方式
下面将结合具体实施例对本发明作详细的介绍：
1.正常人混合血清分析：取若干正常人混合血清，离心后分析血清的理化性质：如血清黏度、pH值、蛋白含量等。其中蛋白含量分析包括血清总蛋白(双缩脲法)、白蛋白(溴甲酚绿法)、球蛋白(按照常规方法，总蛋白与白蛋白的差值)、常见的特种蛋白例如：转铁蛋白、前白蛋白、免疫球蛋白A/G/M、补体C3/C4以及目标蛋白质等(免疫比浊法分析)。分析仪器为全自动生化分析仪(日立7080型)。
2.含目标蛋白质特异性抗体的固体免疫介质以及免疫磁珠的制备：
2.1固体免疫介质的制备：将一定量的抗目标蛋白质的抗体与2.5％戊二醛溶液混合，放置于冰箱过夜，使血清成为胶冻状，打碎后用生理盐水洗涤，成为颗粒状的可以与目标蛋白质反应的固体免疫介质。
2.2免疫磁珠的制备：主要包括以下步骤：用缓冲液对纳米磁珠进行预处理；用碳化二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活化磁珠；随后将磁珠与目标蛋白质的特异性抗体偶联结合，成为含有目标蛋白质特异性抗体的免疫磁珠；用硼酸盐缓冲液纯化免疫磁珠。(详细的方法本课题组已申请专利，专利申请号为：200610053305.4)。
3.不含目标蛋白质的血清基体物质研制：以一定量附于不同免疫介质上的目标蛋白质抗体与人血清中目标蛋白质反应，形成免疫复合物后，通过去除含有目的蛋白质和其特异性抗体的免疫复合物，达到去除目标蛋白质的目的。
3.1目标蛋白质在血清中含量大于300mg/L时，血清基体物质研制：选用含目标蛋白质抗体的固体免疫介质以1∶60～1∶1比例加至正常人混合血清中，置于磁力搅拌器上，4℃反应，过夜，以10000转/分钟的转速离心；检测离心上清中的目标蛋白质，如果仍然含有目标蛋白质，可以添加免疫介质进一步反应，直至不含目标蛋白质。
3.2目标蛋白质在血清中含量小于200mg/L以下时，血清基体物质研制：选用含目标蛋白质抗体的免疫磁珠，将以上免疫磁珠以1∶40～1∶1000比例投入正常人混合血清中，置于一定转速的摇床上，37℃反应1～2小时，4℃冰箱放置1～4小时，将反应混合物置于磁场中，使含目标蛋白质及其抗体的免疫磁珠与人血清分离，将血清再以10000转/分钟的转速离心，检测离心上清中的目标蛋白质，如果仍然含有目标蛋白质，可以添加免疫介质进一步反应，直至不含目标蛋白质。
4.已处理血清成分分析：分析以上物质的理化性质，具体内容和方法与正常人混合血清分析一致。
5.已处理血清成分补充：根据以上测定的结果添加被减少的蛋白质，使之与原血清成分基本一致，并保持白蛋白与球蛋白的正常比例。此物质为不含目标蛋白质的人血清基体物质。
6.基体物质确证试验：利用添加回收(recovery)实验对不含目标蛋白质的血清基体物质的研制结果进行确证。回收率达到95～105％，说明已经得到不含目标蛋白质的人血清基体物质。
实施举例一：不含载脂蛋白B(apoB)的人血清基体物质的制备(apoB在血清中含量为：500～1100mg/L)
1.正常人血清分析：取1ml正常人混合血清，离心后分析血清的黏度、pH值、血清总蛋白、白蛋白、球蛋白、常见特种蛋白如：转铁蛋白、前白蛋白、免疫球蛋白A/G/M、补体C3/C4以及目标蛋白质载脂蛋白B等。
2.不含载脂蛋白B(apoB)血清基体物质研制：选用含有载脂蛋白B抗体的固体免疫介质1g，加入至30ml正常人混合血清中，置于磁力搅拌器上，4℃反应，过夜，以10000转/分钟的转速离心；检测离心上清中的载脂蛋白B，如果仍然含有载脂蛋白B，可以添加免疫介质进一步反应，直至不含载脂蛋白B。
3.已处理血清成分分析：分析以上已处理血清物质的理化性质，具体内容和方法与正常人混合血清分析一致。
4.已处理血清成分补充：通过测定分析发现：血清的黏度、pH值以及所测特种蛋白如：转铁蛋白、前白蛋白、免疫球蛋白A/G/M、补体C3/C4的含量基本保持不变，目标蛋白质载脂蛋白B含量为零，血清总蛋白、白蛋白含量稍有降低，血清成分和基体物质具体测试结果见下表。根据总蛋白含量，以及减少的白蛋白含量，补充加入0.9g白蛋白。保持总蛋白与原来血清中总蛋白含量一致，同时也保证了白蛋白/球蛋白的比例在正常范围内。此物质为不含目标蛋白质的人血清基体物质。完成不含目标蛋白质的人血清基体物质研制的基本程序。
| 测试项目 | 血清总蛋白(g/L) | 白蛋白(g/L) | 载脂蛋白B(g/L) |
| 人血清成分测试结果 | 65.9 | 40.8 | 0.9 |
| 基体物质测试结果 | 65 | 38.4 | 0.0 |
5.基体物质确证试验：利用回收(recovery)实验对不含目标蛋白质的血清基质物质的研制结果进行确证。将一定浓度纯化的载脂蛋白B(apoB)抗原、基体物质、以及纯化的载脂蛋白B(apoB)抗原与基体物质的混合物作为检测标本；以以载脂蛋白B(apoB)羊抗人多克隆抗体和4％聚乙二醇-磷酸缓冲液配制的单试剂，测定波长为：340nm，测试参数为：3ul标本/300ul剂。紫外分光光度计测定以上样品的吸光度，每个样品测定5次，并以其平均值计算回收率。
回收率计算公式：
x1：基体物质平均吸光度
x2：添加物与基体物质平均吸光度
x：添加物的平均吸光度
本实验回收率＝98.7％
实施举例二：不含B因子(Factor B)的人血清基体物质的制备(Factor B在血清中含量为：l40～280mg/L)
1.正常人血清分析：取1ml正常人混合血清，离心后分析血清的黏度、pH值、血清总蛋白、白蛋白、球蛋白、常见特种蛋白如：转铁蛋白、前白蛋白、免疫球蛋白A/G/M、补体C3/C4以及目标蛋白质B因子等。
2.不含B因子(Factor B)血清基体物质研制：选用含有B因子抗体的特异性免疫磁珠100ul，加入至20ml正常人混合血清中，置于一定转速的摇床上，37℃反应1～2小时，4℃冰箱放置1～4小时，将反应混合物置于磁场中，使含目标蛋白质B因子及其抗体的免疫磁珠与人血清分离，将血清再以10000转/分钟的转速离心，检测离心上清中的B因子，如果仍然含有B因子，可以添加免疫磁珠进一步反应，直至不含B因子。
3.已处理血清成分分析：分析以上已处理血清物质的理化性质，具体内容和方法与正常人混合血清分析一致。
4.已处理血清成分补充：通过测定分析发现：血清的黏度、pH值以及所测特种蛋白如：转铁蛋白、前白蛋白、免疫球蛋白A/G/M、补体C3/C4的含量基本保持不变，目标蛋白质B因子含量为零，血清总蛋白、白蛋白含量稍有降低，血清成分和基体物质具体测试结果见下表。根据总蛋白含量，以及减少的白蛋白含量，补充加入0.3g白蛋白。保持总蛋白与原来血清中总蛋白含量一致，同时也保证了白蛋白/球蛋白的比例在正常范围内。此物质为不含目标蛋白质B因子的人血清基体物质。完成不含目标蛋白质的人血清基体物质研制的基本程序。
| 测试项目 | 血清总蛋白(g/L) | 白蛋白(g/L) | 载脂B因子(g/L) |
| 人血清成分测试结果 | 65.9 | 40.8 | 0.2 |
| 基体物质测试结果 | 65.6 | 40.6 | 0.0 |
5.基体物质确证试验：利用回收(recovery)实验对不含目标蛋白质B因子的血清基质物质的研制结果进行确证。将一定浓度的纯化的B因子(Factor B)抗原、基体物质、以及纯化的B因子(Factor B)抗原与基体物质的混合物作为检测标本；以B因子(FactorB)羊抗人多克隆抗体和4％聚乙二醇-磷酸缓冲液配制的单试剂，测定波长为：340nm，测试参数为：6ul标本/300ul试剂。紫外分光光度计测定以上样品的吸光度，每个样品测定5次，并以其平均值计算回收率。
回收率计算公式：
x1：基体物质平均吸光度
x2：添加物与基体物质平均吸光度
x：添加物的平均吸光度
本实验回收率＝97.9％。
Claims (4)
1、一种不含目标蛋白质人血清基体物质的制备方法，它是依据免疫学反应原理和目标蛋白质在血清中的含量，使一定量结合于不同介质上的抗目标蛋白质的多或单克隆抗体与人血清中的目标蛋白质反应，形成抗原抗体复合物后，通过不同的方法去除含目标蛋白质及其抗体的免疫复合物，从而得到不含目标蛋白质人血清基体物质。
2、根据权利要求1所述的不含目标蛋白质人血清基体物质的制备方法，其特征在于当所述目标蛋白质在血清中含量大于300mg/L时，将该目标蛋白质相应的抗体用双功能试剂交联，使之成为可以与目标蛋白质反应的特异性固体免疫介质，与人血清中的目标蛋白质反应后除去目标蛋白质；当所述的目标蛋白质在血清中含量小于300mg/L的时候，选取该目标蛋白质相应的抗体与功能化的磁珠偶联形成免疫磁珠，再与人血清中的目标蛋白质反应后除去目标蛋白质。
3、根据权利要求2所述的不含目标蛋白质人血清基体物质的制备方法，其特征在于当目标蛋白质含量大于300mg/L时，选用该蛋白质的特异性固体免疫介质以1∶60～1∶10比例加入至正常人混合血清中，置于磁力搅拌器上，4℃反应，过夜，以10000转/分钟的转速离心；检测离心上清，直至不含目标蛋白质，并保持白蛋白与球蛋白的正常比例；此离心上清为不含目标蛋白质的人血清基体物质。
4、根据权利要求2所述的不含目标蛋白质人血清基体物质的制备方法，其特征在于当目标蛋白质含量为300mg/L以下时，选用目标蛋白质的抗体与功能化的磁珠偶联，制备含抗目标蛋白质抗体的免疫磁珠；将以上免疫磁珠以1∶40～1∶100比例投入正常人混合血清中，置于一定转速的摇床上，37℃反应1～2小时，4℃冰箱放置1～4小时，将反应混合物置于磁场中，使含目标蛋白质及其抗体的免疫磁珠与人血清分离，将血清再以10000转/分钟的转速离心，检测离心上清，直至不含目标蛋白，并保持白蛋白与球蛋白的正常比例；此离心上清为不含目标蛋白质的人血清基体物质。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2007100672992A CN101046479B (zh) | 2007-02-25 | 2007-02-25 | 不含目标蛋白质人血清基体物质的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2007100672992A CN101046479B (zh) | 2007-02-25 | 2007-02-25 | 不含目标蛋白质人血清基体物质的制备方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101046479A true CN101046479A (zh) | 2007-10-03 |
| CN101046479B CN101046479B (zh) | 2011-08-31 |
Family
ID=38771250
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN2007100672992A Expired - Fee Related CN101046479B (zh) | 2007-02-25 | 2007-02-25 | 不含目标蛋白质人血清基体物质的制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101046479B (zh) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105628926A (zh) * | 2014-11-06 | 2016-06-01 | 上海中信国健药业股份有限公司 | 一种重组人ii型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白浓度测定方法 |
| CN107340341A (zh) * | 2017-06-27 | 2017-11-10 | 长沙都正生物科技有限责任公司 | 一种氧化三甲胺定量检测试剂盒及方法 |
| CN107505460A (zh) * | 2017-08-07 | 2017-12-22 | 嘉兴博泰生物科技发展有限公司 | 用于poct的c反应蛋白质量控制品的制备方法 |
| CN111024963A (zh) * | 2019-12-27 | 2020-04-17 | 桂林英美特生物技术研究所 | 一种液体稳定、抗冰冻的免疫比浊法载脂蛋白b单试剂 |
| CN113176133A (zh) * | 2021-03-15 | 2021-07-27 | 广州邦德盛生物科技有限公司 | 一种分离血浆或血清中蛋白质和脂类的方法及基质血清 |
| CN113702334A (zh) * | 2021-09-26 | 2021-11-26 | 依科赛生物科技（太仓）有限公司 | 一种血清生产工艺中蛋白质含量快速检测的方法 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1005220B (zh) * | 1987-01-26 | 1989-09-20 | 华西医科大学 | 一种用牛、马血清制备放免及生化质控物的方法 |
-
2007
- 2007-02-25 CN CN2007100672992A patent/CN101046479B/zh not_active Expired - Fee Related
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105628926A (zh) * | 2014-11-06 | 2016-06-01 | 上海中信国健药业股份有限公司 | 一种重组人ii型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白浓度测定方法 |
| CN107340341A (zh) * | 2017-06-27 | 2017-11-10 | 长沙都正生物科技有限责任公司 | 一种氧化三甲胺定量检测试剂盒及方法 |
| CN107505460A (zh) * | 2017-08-07 | 2017-12-22 | 嘉兴博泰生物科技发展有限公司 | 用于poct的c反应蛋白质量控制品的制备方法 |
| CN111024963A (zh) * | 2019-12-27 | 2020-04-17 | 桂林英美特生物技术研究所 | 一种液体稳定、抗冰冻的免疫比浊法载脂蛋白b单试剂 |
| CN113176133A (zh) * | 2021-03-15 | 2021-07-27 | 广州邦德盛生物科技有限公司 | 一种分离血浆或血清中蛋白质和脂类的方法及基质血清 |
| CN113176133B (zh) * | 2021-03-15 | 2024-02-13 | 广州邦德盛生物科技有限公司 | 一种分离血浆或血清中蛋白质和脂类的方法及基质血清 |
| CN113702334A (zh) * | 2021-09-26 | 2021-11-26 | 依科赛生物科技（太仓）有限公司 | 一种血清生产工艺中蛋白质含量快速检测的方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN101046479B (zh) | 2011-08-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN108362688B (zh) | 一种25羟基维生素d磁微粒化学发光检测试剂盒 | |
| CN108414748B (zh) | 一种thsd7a抗体的检测试纸条及检测方法 | |
| US4020151A (en) | Method for quantitation of antigens or antibodies on a solid surface | |
| Bright et al. | Regenerable fiber-optic-based immunosensor | |
| JP6172163B2 (ja) | 検体中のヘモグロビンＡ１ｃの免疫測定方法 | |
| CN1563989A (zh) | 一种检测小分子化合物的方法及其专用生物芯片 | |
| CN101046479B (zh) | 不含目标蛋白质人血清基体物质的制备方法 | |
| US4163779A (en) | Test for quantitation of immunoglobulin and identification of abnormal immunoglobulin | |
| HU216915B (hu) | Analizálóküvetta, eljárás és diagnosztikai tesztkészlet teljes vérből történő analízishez | |
| JPH0735752A (ja) | 凝集イムノアッセイ法 | |
| CN1404577A (zh) | 免疫分析试剂和分析方法 | |
| CN111239404B (zh) | 一种可以同时检测尿样本和血清样本中的视黄醇结合蛋白的检测试剂盒 | |
| CN114835808B (zh) | 可定向消除假阳性的阻断剂及其制备方法 | |
| JPH06167495A (ja) | 凝集イムノアッセイ法 | |
| CN114112957A (zh) | 一种脂联素测定试剂盒及其应用 | |
| CN112710826A (zh) | 一种提高试剂稳定性的包被和封闭方法 | |
| GB2217335A (en) | Compositions for isolation and immobilisation of C-reactive protein in body liquids | |
| JP4278123B2 (ja) | 免疫学的測定方法、免疫反応干渉物質の除去方法および測定試薬 | |
| JP3464357B2 (ja) | 免疫学的凝集反応試薬の製造方法 | |
| JP3968287B2 (ja) | 免疫分析方法 | |
| CN114460309A (zh) | 一种检测钙骨素的试剂盒及检测方法 | |
| JP2006105910A (ja) | 標的物質の測定方法および測定試薬 | |
| EP1497652B1 (en) | Method, system and kit for detecting an analyte in a sample | |
| JP2709296B2 (ja) | 免疫学的分析方法 | |
| JP2001228153A (ja) | 免疫学的測定方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20110831 Termination date: 20150225 |
|
| EXPY | Termination of patent right or utility model |