CN101040937B - 肠炎宁片的检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种肠炎宁片的制备方法及质量控制方法，它由地锦草330-1120份、黄毛耳草450-1530份、樟树根330-1120份、香薷150-560份、枫树叶150-560份，樟脑(樟脑油)0.2—3份为原料药制成。本发明的制备方法：取部分地锦草、香薷粉碎，其余地锦草、香薷与黄毛耳草、樟树根、枫树叶水提，水提液浓缩至在80℃时测相对密度1.05-1.35，与上述药粉混合，制粒，干燥，加樟脑(樟脑油)，压片。本发明的质量控制方法包括定性鉴别方法和含量测定方法。本发明运用敏感度高、精确性好、重复性好的定性定量方法控制产品质量，确保本发明的制备工艺可控性好。
Description
技术领域
本发明涉及中草药领域，尤其涉及到一种治疗急慢性胃肠炎的肠炎宁片的检测方法。
背景技术
肠易激综合征(Irritable Bowel Syndrone，IBS)是临床上最常见的一种胃肠道功能紊乱性疾病，以指慢性、反复发作、以肠道运动障碍为主，难以用解剖异常解释的特殊病理生理基础的心身疾病。医学界普遍认为，西方国家的IBS患病率较高，约为10～20％；中国与西方国家的IBS发病率较相似；而在东南亚或中东等地区，患病率则较低，新加坡只有2.3％，伊朗约为3～4％。在美国，IBS已成为雇员旷工的第二大原因，仅次于感冒，目前估计美国IBS的直接或间接治疗市场约为300亿美元。从肠炎宁主要成分黄毛耳草中分离出车叶草苷、熊果酸等七种活性成分，可明显抑制小肠推进运动，恢复肠道正常蠕动，有效治疗IBS。
从国内治疗情况看，胃肠道疾病的主要治疗药物集中于胃溃疡、助消化类药物及胃动力药，面对肠炎的治疗药物则相对较少，从临床报道看，中药占据了治疗慢性肠炎的主体，但很多都是白拟处方，未见优势明显的药物。本发明的肠炎宁中地锦草、黄毛耳草等主要成分能有效治疗急慢性胃肠道疾病，可在消化系统用药市场一显身手。
肠炎宁片在胃肠道疾病中的药理和临床研究表明，肠炎宁片对小肠平滑肌有很好的松驰作用，减弱小肠推进运动，对细菌内毒素攻击小鼠有明显的保护作用，显示该药具有解毒作用；本发明对金黄色葡萄球菌、八叠球菌、痢疾杆菌等具有明显的抑制作用；并具有一定镇痛作用。疗效确切，毒副作用少。
发明内容
本发明的目的是在于提供一种治疗急慢性胃肠炎、腹泻、小儿消化不良及肠易激综合征的肠炎宁片的制备方法。
本发明的另一目的是提供一种肠炎宁的检测方法。
本发明是这样来实现的，它包含如下重量份的原料药：
地锦草330～1120份、黄毛耳草450～1530份、樟树根330～1120份、香薷150～560份、枫树叶150～560份、樟脑(樟脑油)0.2～3份。
取地锦草50～110份，香薷50～110份，分别粉碎，过80-120目筛，地锦草粉用文火炒至淡棕色至棕褐色，与香薷粉混匀；另取上述二味药物剩余部分和黄毛耳草、樟树根、枫树叶，加8～12倍量的水提取2～3次，每次1～3小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至在80℃时测相对密度1.05～1.40，放冷，与上述药粉及辅料混合，干燥，粉碎成细粉，加辅料，制粒，干燥，樟脑或樟脑油用乙醇溶解或稀释，喷入，压片，包衣，即得肠炎宁片。
取本晶10片，除包衣物，研细，加醋酸乙酯10～40ml，超声处理10～40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醚2～20ml浸泡3～10分钟，倾去乙醚液，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取地锦草对照药材1g，加水煎煮0.5～2小时，滤过，滤液浓缩至约15ml，加醋酸乙酯振摇提取1～4次，每次10～30ml，分取醋酸乙酯层，合并，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液5μl、对照药材溶液10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷一丙酮(2∶1)为展开剂，在甲酸蒸汽饱和条件下展开，取出，晾干，喷以甲酸溶液，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
取本品10片，除去衣物，研细，加甲醇20～70ml超声处理10～40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10～25ml使溶解，用乙醚振摇提取1～4次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄毛耳草对照药材1g，加水适量煎煮1～3小时，滤过，滤液浓缩至15ml左右，用乙醚振摇提取1-4次，每次10-30ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇0.5ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿一醋酸乙酯一甲醇(1∶5∶0.5)为展开剂，氨蒸汽饱和条件下展开，取出，晾干，喷以5％氢氧化钾溶液，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
取本品10片，除去衣物，研细，加甲醇20～70ml超声处理10～40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10～25ml使溶解，用乙醚振摇提取3次，每次10～30ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，加至中性氧化铝柱(3g，100～200目，柱内径15mm)上，用甲醇20ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取樟树根对照药材1g，加水煎煮0.5～2小时，滤过，滤液浓缩约15ml，用乙醚振摇提取3次，每次10～30ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液10μl，对照药材溶液5μl，分别点于同一以硅胶G薄层板上，以氯仿一醋酸乙酯一甲醇(3∶3∶0.5)为展开剂，展开12cm以上，取出，晾干，依次喷以2％三氯化铁乙醇溶液、铁氰化钾试液，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
照高效液相色谱法
色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.05％磷酸(5∶95)为流动相；检测波长200～300nm，柱温；25℃。理论板数按没食子酸峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备取没食子酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.08mg的溶液，摇匀，即得。
供试品溶液的制备取本品除去包衣物，研细，取0.05-0.3g，精密称定，置具塞三角瓶中，精密加入40～70％甲醇30～70ml，称定重量，超声(功率250W，频率33KHz)处理10～40分钟，放冷，再称定重量，加40～70％甲醇补足减少的重量，摇匀，滤过，取续滤液，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，即得。
本品每片含地锦草以没食子酸(C21H20O9)计，不得少于4.4mg。
经过实验观察，结果发现：本发明的肠炎宁片对小肠平滑肌有很好的松驰作用，可减弱小肠推进运动；对细菌内毒素攻击小鼠有明显的保护作用，显示该药具有解毒作用；本品对金黄色葡萄球菌、八叠球菌、痢疾杆菌等具有明显的抑制作用，并具有一定镇痛作用。本发明的一种治疗急、慢性胃肠炎的肠炎宁片的药效学研究表明，本品具有清热利湿、行气的功效。
本发明的肠炎宁片具有清热利湿、行气的功效，用于治疗急、慢性胃肠炎，腹泻，细菌性痢疾，小儿消化不良，肠易激综合征。
本发明的优点是：一、加入了适量樟脑或樟脑油，可起到芳香祛湿功效，有药用活性；二、本发明的制备工艺改变了，樟脑或樟脑油用高浓度乙醇溶解或稀释后，在颗粒干燥之后整粒之前加入，可避免高温使樟脑(樟脑油)挥发；三，本发明的创新点还在于采用了三个薄层色谱定性鉴别，用高效液相色谱法定量检测地锦草中的没食子酸含量，使产品质量得到有效控制。
具体实施方式
实施例1：
地锦草950g、黄毛耳草1333.33g、樟树根950g、香薷516.67g、枫树叶516.67g。
取地锦草、香薷各90g，分别粉碎成细粉，过100目筛，地锦草用文火炒至淡棕色后与香薷粉混匀，备用；另取上述二味药材剩余的部分和黄毛耳草、樟树根、枫树叶，加水煎煮二次，每次加9倍量的水，每次2小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至在80℃时测相对密度1.15，放冷，与上述细粉及淀粉50g混匀，干燥，粉碎成细粉，制粒，干燥，取樟脑1g，用95％乙醇溶解，喷入颗粒中，硬脂酸镁2.2g，压制成1000片，包衣，即得。
照高效液相色谱法
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.05％磷酸(5∶95)为流动相；检测波长200～300nm，柱温；25℃。理论板数按没食子酸峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备取没食子酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.08mg的溶液，摇匀，即得。
供试品溶液的制备取本品除去包衣物，研细，取0.05～0.3g，精密称定，置具塞三角瓶中，精密加入40～70％甲醇30～70ml，称定重量，超声(功率250W，频率33KHz)处理10～40分钟，放冷，再称定重量，加40～70％甲醇补足减少的重量，摇匀，滤过，取续滤液，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，即得。
本品每片含地锦草以没食子酸(C21H20O9)计，为5.02mg。
实施例2：
地锦草977.78g、黄毛耳草293.33g、樟树根977.78g、香薷508.89g、枫树叶508.89g。
取地锦草、香薷各70g，分别粉碎，过80目筛，地锦草用文火炒至淡棕色后与香薷粉混匀，备用；另取上述二味药材剩余的部分和黄毛耳草、樟树根、枫树叶，分别加10倍量的水煎煮二次，第一次2.5小时，第二次2小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至在80℃时测相对密度为1.20，放冷，与上述细粉及糊精60g混匀，干燥，粉碎，制粒，干燥，取樟脑油1.5g，用95％的乙醇稀释，喷入颗粒，加滑石粉3g，压制成1000片，包衣，即得。
取本品10片，除包衣物，研细，加醋酸乙酯20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醚10ml浸泡5分钟，倾去乙醚液，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取地锦草对照药材1g，加水煎煮1小时，滤过，滤液浓缩至约15ml，加醋酸乙酯振摇提取3次，每次20ml，分取醋酸乙酯层，合并，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液5μl、对照药材溶液10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷一丙酮(2∶1)为展开剂，在甲酸蒸汽饱和条件下展开，取出，晾干，喷以甲酸溶液，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
取本品10片，除去衣物，研细，加甲醇40ml超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10～25ml使溶解，用乙醚振摇提取3次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄毛耳草对照药材1g，加水适量煎煮1.5小时，滤过，滤液浓缩约15ml，用乙醚振摇提取3次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇0.5ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿一醋酸乙酯一甲醇(1∶5∶0.5)为展开剂，氨蒸汽饱和条件下展开，取出，晾干，喷以5％氢氧化钾溶液，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
取本品10片，除去衣物，研细，加甲醇40ml超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水15ml使溶解，用乙醚振摇提取3次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，加至中性氧化铝柱(3g，100～200目，柱内径15mm)上，用甲醇20ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取樟树根对照药材1g，加水煎煮1小时，滤过，滤液浓缩约15ml，用乙醚振摇提取3次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液10μl，对照药材溶液5μl，分别点于同一以硅胶G薄层板上，以氯仿一醋酸乙酯一甲醇(3∶3∶0.5)为展开剂，展开12cm以上，取出，晾干，依次喷以2％三氯化铁乙醇溶液、铁氰化钾试液，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
照高效液相色谱法
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.05％磷酸(5∶95)为流动相；检测波长273nm，柱温；25℃。理论板数按没食子酸峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备取没食子酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.08mg的溶液，摇匀，即得。
供试品溶液的制备取本品除去包衣物，研细，0.2g，精密称定，置具塞三角瓶中，精密加入50％甲醇50ml，称定重量，超声(功率250W，频率33KHz)处理30分钟，放冷，再称定重量，加50％甲醇补足减少的重量，摇匀，滤过，取续滤液，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，即得。
本品每片含地锦草以没食子酸(C21H20O9)。
Claims (1)
1.一种肠炎宁片的检测方法，其中肠炎宁片的制备方法如下：由以下重量份的原料药制成：
地锦草330～1120份、黄毛耳草450～1530份、樟树根330～1120份、香薷150～560份、枫树叶150～560份、樟脑0.2～3份，其制备方法为：取地锦草50～110份，香薷50～110份，分别粉碎，过80～120目筛，地锦草粉用文火炒至淡棕色至棕褐色，与香薷粉混匀；另取上述二味药物剩余部分和黄毛耳草、樟树根、枫树叶，加8～12倍量的水提取2～3次，每次1～3小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至在80℃时测相对密度1.05～1.35，放冷，与上述药粉及辅料混合，干燥，粉碎成细粉，加辅料，制粒，干燥，樟脑用乙醇溶解，喷入颗粒，压片，包衣，即得肠炎宁片；
其特征在于：
取本品10片，除包衣物，研细，加醋酸乙酯10～40ml，超声处理10～40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醚2～20ml浸泡3～10分钟，倾去乙醚液，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液，另取地锦草对照药材1g，加水煎煮0.5～2小时，滤过，滤液浓缩至15ml，加醋酸乙酯振摇提取1～4次，每次10～30ml，分取醋酸乙酯层，合并，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液5μl、对照药材溶液10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-丙酮为展开剂，正己烷与丙酮比例为2∶1，在甲酸蒸汽饱和条件下展开，取出，晾干，喷以甲酸溶液，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
取本品10片，除去包衣物，研细，加甲醇20～70ml超声处理10～40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10～25ml使溶解，用乙醚振摇提取1～4次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液，另取黄毛耳草对照药材1g，加水适量煎煮1～3小时，滤过，滤液浓缩至15ml，用乙醚振摇提取1～4次，每次10～30ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇0.5ml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇为展开剂，氯仿、醋酸乙酯与甲醇的比例为1∶5∶0.5，氨蒸汽饱和条件下展开，取出，晾干，喷以5％氢氧化钾溶液，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
取本品10片，除去包衣物，研细，加甲醇20～70ml超声处理10～40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10～25ml使溶解，用乙醚振摇提取3次，每次10～30ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，加至中性氧化铝柱上，用甲醇20ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液，另取樟树根对照药材1g，加水煎煮0.5～2小时，滤过，滤液浓缩至15ml，用乙醚振摇提取3次，每次10～30ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液10μl，对照药材溶液5μl，分别点于同一以硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇为展开剂，氯仿、醋酸乙酯与甲醇的比例为3∶3∶0.5，展开12cm以上，取出，晾干，依次喷以2％三氯化铁乙醇溶液、铁氰化钾试液，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
照高效液相色谱法
色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.05％磷酸为流动相；甲醇与磷酸的比例为5∶95，检测波长200～300nm，柱温25℃，理论板数按没食子酸峰计算应不低于2000；
对照品溶液的制备：取没食子酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.08mg的溶液，摇匀，即得；
供试品溶液的制备：取本品除去包衣物，研细，取0.05～0.3g，精密称定，置具塞三角瓶中，精密加入40～70％甲醇30～70ml，称定重量，超声处理10～40分钟，放冷，再称定重量，加40～70％甲醇补足减少的重量，摇匀，滤过，取续滤液，用微孔滤膜滤过，即得；
本品每片含地锦草以没食子酸计，不得少于4.4mg。
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Assignee: Jiangxi tianshikang Pharmaceutical Co. Ltd. of Yiyang Assignor: Tianshikang Chinese Medicines Co., Ltd., Jiangxi Contract record no.: 2011360000001 Denomination of invention: Quality control method of Changyanning pills Granted publication date: 20101117 License type: Exclusive License Open date: 20070926 Record date: 20110105 |
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Effective date of registration: 20160617 Address after: 334400 No. 19 crossing area, Yiyang Industrial Park, Jiangxi Province Patentee after: Jiangxi tianshikang Pharmaceutical Co. Ltd. of Yiyang Address before: No. 21, Jianshe Road, Jiangxi, Yingtan Patentee before: Tianshikang Chinese Medicines Co., Ltd., Jiangxi |
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