CN100563811C - 一种微生物微胶囊大量制备的方法 - Google Patents
一种微生物微胶囊大量制备的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN100563811C CN100563811C CNB2008101149130A CN200810114913A CN100563811C CN 100563811 C CN100563811 C CN 100563811C CN B2008101149130 A CNB2008101149130 A CN B2008101149130A CN 200810114913 A CN200810114913 A CN 200810114913A CN 100563811 C CN100563811 C CN 100563811C
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- microcapsules
- large amount
- preparations
- microbe
- preparation
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Landscapes
- Medicinal Preparation (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Manufacturing Of Micro-Capsules (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种微生物微胶囊大量制备的方法，属于微生物和生物技术领域。一种微生物微胶囊大量制备的方法，包括如下步骤：(1)囊材溶液的配制：配制质量体积比浓度为1-2%w/v的海藻酸钠溶液，灭菌；(2)固化剂的配制：制得0.1-0.3mol/L的氯化钙溶液，灭菌；(3)微生物微胶囊制备：灭菌囊材溶液加入对数生长期的微生物种子液，至106cfu/ml左右浓度，用高压空气，经无菌滤膜和喷头喷入无菌氯化钙溶液，搅拌固化，倾出上清液，得微胶囊，洗胶囊；(4)包被后培养：将包有微生物细胞的微胶囊接入发酵液中，培养至对数生长末期，过滤分离即得。本发明的优点是：克服了发酵前包被法制备微生物微胶囊不能大量生产的缺陷，大量生产，操作简单，材料和设备成本低廉。
Description
技术领域
本发明涉及一种微生物微胶囊大量制备的方法，属于微生物和生物技术领域。
背景技术
在生物技术领域，微胶囊技术是伴随固定化细胞技术的发展而形成的，即利用形成微胶囊的方法将生物物质如细胞等包埋起来。微胶囊固定化微生物细胞的优势表现在：1)在细胞培养过程中形成一种微小的培养环境，降低了培养时剪切力对细胞的影响，使搅拌和直接通气等操作不会影响细胞的正常生长，提高了细胞密度，并使细胞得以重复和继续使用，而不会大量地流失。2)微胶囊可以把目的产物截留于膜内，通过微胶囊与培养液的分离即可实现产物与培养液的分离，可直接从大量稀溶液中把需要的产物提取出来，提高了目的产物的浓度，大大缩小了处理液量，减少了分离过程的负荷。3)微胶囊产品本身还具有良好的流动性和分散性，因此易与其它原料混合均匀，同时便于运输、贮存和添加使用。4)通过微胶囊包被的细胞，如微生态制剂等可更好的耐受体内胃肠道等环境，大大增加益生菌的体内存活率，并使服药过程变得更加简单，通过控制芯材释放和作用的时间、数量和位置，还可实现定点和定量给药。因此，生物微胶囊在饲料、食品及医疗等的多个领域表现了极好的应用和市场前景。
但目前发酵前包被法生产微生物微胶囊的技术很难做到大量生产，大部分方法和设备都在10ml/h微胶囊的水平，甚至更低，因而造成生产成本极高，难于被市场接受。而目前大量使用的发酵后包被法，虽然可以实现大量生产。但是，发酵后包被法需要的微生物细胞数量巨大，大量的细胞存在造成了高质量微胶囊的得率降低。而且发酵后包被法往往需要较高温度和压力的存在，这就很容易的造成微生物细胞活性的损失，降低了产品质量。
发明内容
本发明要解决的技术问题是：提供一种可以用于大量制备微生物微胶囊的方法。
为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
一种微生物微胶囊大量制备的方法，包括如下步骤：
(1)囊材溶液的配制：配制质量体积比浓度为1-2％w/v的海藻酸钠溶液，灭菌备用；
(2)固化剂的配制：制得0.1-0.3mol/L的氯化钙溶液，灭菌备用；
(3)微生物微胶囊制备：灭菌囊材溶液在无菌条件下，加入对数生长期的微生物种子液，至浓度为
用高压空气，经无菌滤膜和喷头喷入无菌氯化钙溶液，不断均匀搅拌，喷完后慢速搅拌固化10-30min，倾出上清液，得直径为300-700微米的微胶囊，用无菌水洗微胶囊1-3次，培养液清洗微胶囊1-2次；
(4)包被后培养：将包有微生物细胞的微胶囊接入发酵液中，培养至对数生长末期，过滤分离微胶囊即得产品。
所述海藻酸钠溶液的浓度为1.5％w/v。
所述氯化钙溶液的浓度为0.1mol/L。
所述高压空气流速为0.6m3/h。
所述海藻酸钠与微生物细胞混合液流速为45ml/min。
所述喷头为实心锥型圆形喷雾，连接管道为1/4英寸。
所述灭菌备用是指在115℃，灭菌20min，4℃保存备用。
所述喷完后慢速搅拌固化20min。
本发明采用发酵前包埋方法，将低密度微生物细胞均匀分散在囊材中，然后用无菌气体，将囊材和微生物混合液喷雾到凝固剂中，进行络合反应得到微生物微胶囊。最后通过包被后的培养控制，得到含有期望微生物密度的微胶囊。大大减少了微囊化过程细胞的利用量，避免了后包埋过程由于受细胞密度影响而造成的微囊化效率和产率较低的不利因素，更易于得到形态和稳定性更好的微囊化产品。同时，菌体可继续在微胶囊微环境下增殖，细胞密度大小可控，并可达到比后包埋更高的微囊化菌体密度。按1-3×106个/ml制备的直径为0.3-0.7mm包被屎肠球菌的湿胶囊，经16小时左右发酵，可得含高密度和高活性屎肠球菌的微胶囊产品，活菌数可达1010个/ml湿胶囊。
本发明的优点是：克服了目前发酵前包被法制备微生物微胶囊不能大量生产的缺陷，大量生产，操作简单，材料和设备成本低廉。
下面结合具体实施方式对本发明作进一步说明，并非对发明的限定，依照本领域公知的现有技术，本发明的实施方式并不限于此，因此凡依照本文公开内容所作出的本领域的等同替换，均属于本发明的保护范围。
具体实施方式
实施例1：
一.材料：
1.海藻酸钠溶液，1.5％w/v。
2.CaCl2溶液，0.1mol/L。
3.屎肠球菌菌种，于2008年5月22日，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址：北京市朝阳区大屯路中国科学院微生物研究所，邮政编码100101)，建议的分类名为屎肠球菌Enterococcus Faecium，保藏号为CGMCC No.2516。
二.方法
1.菌种种子液的制备：将保存屎肠球菌菌种接种在液体培养基中，37±1℃恒温培养8-10小时，当活菌数达到对数生长期，浓度约107-108cfu/ml时结束培养，备用。
2.囊材溶液的配制及灭菌：在不断搅拌下按最终为1.5％w/v的浓度，分批加海藻酸钠入去离子水中，制成为透明胶液，115℃下灭菌20分钟，4℃保存备用。
3.固化剂的配置及灭菌：CaCl2溶液，用蒸馏水配成0.1mol/l溶液，115℃下灭菌20分钟，4℃保存备用。
4.微胶囊制备：无菌条件下，将种子液加入到海藻酸钠溶液中，按1-3×106个/ml海藻酸钠的密度调配，充分搅匀后，用高压无菌气体经喷头喷入CaCl2溶液中(海藻酸钠微生物混合液与CaCl2溶液的体积比最低为1∶3)，均匀缓慢搅拌，固化20分钟左右，即得待培养微胶囊，微胶囊直径为0.3-0.7mm。将含有屎肠球菌的微胶囊接入发酵液中，37℃，150rpm恒温培养，16小时左右，即得含高密度和高活性屎肠球菌的微胶囊产品，经检测，活菌数达到1010个/ml湿胶囊。
本发明将微生物通过微囊化转变成一种稳定的细粉颗粒，改变微生物存在的形态，产品具有良好的流动性和分散性，能够有效地防止菌体失活，提高微生物类产品的稳定性。体内应用时还能防止胃液的破坏，从而使尽可能多的菌体到达肠道，真正起到保健和治疗的作用；可将配伍禁忌的各种成分在同一产品中隔开。
Claims (8)
1.一种微生物微胶囊大量制备的方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)囊材溶液的配制：配制质量体积比浓度为1-2％w/v的海藻酸钠溶液，灭菌备用；
(2)固化剂的配制：制得0.1-0.3mol/L的氯化钙溶液，灭菌备用；
(3)微生物微胶囊制备：灭菌囊材溶液在无菌条件下，加入对数生长期的微生物种子液，至浓度为106cfu/ml，用高压空气，经无菌滤膜和喷头将海藻酸钠和微生物细胞混合液喷入无菌氯化钙溶液中，不断均匀搅拌，喷完后慢速搅拌固化10-30min，倾出上清液，得直径为300-700微米的微胶囊，用无菌水洗微胶囊1-3次，培养液清洗微胶囊1-2次；
(4)包被后培养：将包有微生物细胞的微胶囊接入发酵液中，培养至对数生长末期，过滤分离微胶囊即得产品。
2.根据权利要求1所述的一种微生物微胶囊大量制备的方法，其特征在于：所述海藻酸钠溶液的浓度为1.5％w/v。
3.根据权利要求1所述的一种微生物微胶囊大量制备的方法，其特征在于：所述氯化钙溶液的浓度为0.1mol/L。
4.根据权利要求1所述的一种微生物微胶囊大量制备的方法，其特征在于：所述高压空气流速为0.6m3/h。
5.根据权利要求1所述的一种微生物微胶囊大量制备的方法，其特征在于：所述海藻酸钠与微生物细胞混合液流速为45ml/min。
6.根据权利要求1所述的一种微生物微胶囊大量制备的方法，其特征在于：所述喷头为实心锥型圆形喷雾，连接管道为1/4英寸。
7.根据权利要求1所述的一种微生物微胶囊大量制备的方法，其特征在于：所述灭菌备用是指在115℃，灭菌20min，4℃保存备用。
8.根据权利要求1所述的一种微生物微胶囊大量制备的方法，其特征在于：所述喷完后慢速搅拌固化20min。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNB2008101149130A CN100563811C (zh) | 2008-06-13 | 2008-06-13 | 一种微生物微胶囊大量制备的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNB2008101149130A CN100563811C (zh) | 2008-06-13 | 2008-06-13 | 一种微生物微胶囊大量制备的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101288836A CN101288836A (zh) | 2008-10-22 |
| CN100563811C true CN100563811C (zh) | 2009-12-02 |
Family
ID=40033390
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CNB2008101149130A Expired - Fee Related CN100563811C (zh) | 2008-06-13 | 2008-06-13 | 一种微生物微胶囊大量制备的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN100563811C (zh) |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102987055B (zh) * | 2012-10-17 | 2014-04-23 | 李雪平 | 一种复方包被乳酸菌产品及制备方法 |
| CN105311630B (zh) * | 2014-06-20 | 2019-07-09 | 普莱柯生物工程股份有限公司 | 一种哺乳动物细胞悬浮培养制备疫苗的方法与应用 |
| CN105852131B (zh) * | 2016-04-11 | 2019-12-27 | 华中农业大学 | 制备符合有机食品加工标准的鱼油微胶囊的方法 |
| CN107523502B (zh) * | 2017-10-20 | 2020-04-24 | 刘泽洋 | 一种应用于微生物发酵培养液的可溶释颗粒制作方法 |
| CN114515555A (zh) * | 2022-03-16 | 2022-05-20 | 中南大学 | 一种硫酸盐还原微生物胶囊的制备方法与应用 |
| CN115011508B (zh) * | 2022-05-05 | 2024-02-09 | 国家粮食和物资储备局科学研究院 | 屎肠球菌、其微胶囊制剂和制备方法 |
| CN114886121B (zh) * | 2022-05-17 | 2023-10-03 | 江南大学 | 一种肠道益生菌高活性胶珠制备及应用 |
| CN115363216B (zh) * | 2022-08-12 | 2023-07-04 | 昆明理工大学 | 一种利用发酵罐气升法制备益生菌微胶囊的方法 |
| CN115466736B (zh) * | 2022-10-28 | 2023-06-09 | 广东博沃特生物技术有限公司 | 一种淡紫拟青霉的羽碳双基双层微胶囊制剂及其制备方法 |
-
2008
- 2008-06-13 CN CNB2008101149130A patent/CN100563811C/zh not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN101288836A (zh) | 2008-10-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN100563811C (zh) | 一种微生物微胶囊大量制备的方法 | |
| CN101289648B (zh) | 一种屎肠球菌微胶囊制剂及其制备方法 | |
| CN103173371B (zh) | 酿酒酵母与嗜酸乳杆菌的饲料用复合微生物制剂的生产 | |
| CN102583776A (zh) | 一种改良养殖水体环境的复合菌酶制剂及制备方法 | |
| CN105567669A (zh) | 益生菌微胶囊制剂及其制备方法 | |
| CN104323222B (zh) | 一种富含维生素k2的菌菇粉及其制备方法 | |
| CN108949739A (zh) | 一种用于深度处理高浓度畜禽养殖废水的复合微生物菌剂及其制备方法 | |
| CN103275966B (zh) | 一种利用普通发酵罐制备微生物发酵前包被微胶囊的方法 | |
| CN107853478B (zh) | 一种降低牛甲烷排放的含酶中草药发酵饲料添加剂 | |
| CN103492563A (zh) | 用于生产包囊的细胞产物的设备和方法 | |
| DE202013103204U1 (de) | Präparat, welches eine probiotische Kultur enthält | |
| CN109554302A (zh) | 一种利用固定化细胞技术发酵生产饲用酶制剂的方法 | |
| CN103932198A (zh) | 一种利用啤酒废酵母制备富硒谷胱甘肽啤酒酵母生物制品的方法 | |
| CN101693882A (zh) | 嗜酸乳杆菌冻干复合保护剂及其应用方法 | |
| CN113559022A (zh) | 一种用益生菌发酵中药“新七白”的发酵方法 | |
| CN101381250B (zh) | 红树林专用菌肥微胶囊制剂及其制备方法 | |
| CN101864382A (zh) | 一种新的发酵方法 | |
| CN1803012A (zh) | 富硒复合益生菌活菌制剂保健品的制备方法 | |
| CN104694613B (zh) | 一种辅酶q10提取新工艺 | |
| CN105011270A (zh) | 一种番荔枝酵素饮料的方法 | |
| CN109123076A (zh) | 一种畜禽用维生素b2营养型微生态制剂的生产方法 | |
| CN109055264A (zh) | 一种用于海参养殖的微生物菌剂及其制备方法 | |
| CN102940145A (zh) | 一种发酵型水产保健饲料的制备方法 | |
| CN108624508A (zh) | 一种小球藻高效培养基 | |
| CN102010857B (zh) | 利用乳清粉生产酸性木聚糖酶的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20091202 Termination date: 20170613 |