CN108624508A - 一种小球藻高效培养基 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种小球藻高效培养基，每升小球藻高效培养基包括以下组份：（1）大量元素：硝酸钠0.10‑0.20g、磷酸二氢钾0.01‑0.04g、七水硫酸镁0.02‑0.08g、尿素0.02‑0.06g、氯化钙0.01‑0.04g、碳酸氢钠0.01‑0.05g、氯化钠0.50‑1.5g；(2)微量元素：柠檬酸三铁2.00‑5.00mg、五水硫酸铜0.05‑0.10mg、硼酸2.00‑3.00mg、四水氯化锰1.50‑2.00mg、二水钼酸钠0.10‑0.40mg；所述小球藻高效培养基的其余组份为海水。本发明所述小球藻高效培养基可直接添加应用，使小球藻在短时间内迅速吸收液体培养基中的各种营养成分，实现高密度培养，还能得到更快的生长速率和更高的产量；同时省去购买琼脂粉的费用，降低生产成本。
Description
技术领域
本发明涉及培养基技术领域，具体是一种小球藻高效培养基。
背景技术
小球藻为绿藻门小球藻属普生性单细胞绿藻，是一种球形单细胞淡水藻类，直径3～8微米，是地球上最早的生命之一，出现在20多亿年前，基因始终没有变化，是一种高效的光合植物，以光合自养生长繁殖，分布极广。
小球藻的营养成分 小球藻细胞内光合作用色素丰富，因此具有较强的光合作用生产能力，其细胞内含有丰富的多糖、蛋白质、色素、维生素、矿物质等，与此对应的是一系列的保健功能与药理作用。小球藻的营养成分--蛋白质 小球藻蛋白质含量很高，但营养成分会因藻种品系、培养方式以及培养基的不同而有所差异。
小球藻的培养方法既可以进行自养培养又可以进行异养培养。传统的多采用自养培养，小球藻的自养培养既可利用自然光照，也可以利用人工光照，培养基主要由无机化合物组成，传统的培养方法产量低且易受自然条件的影响。自从Lewin等首先发现了一些藻类能利用有机物作为唯一碳源和能源进行异养生长，人们便开始对微藻异养培养产生极大兴趣，能克服自养培养的缺点，可以纯种培养，条件也更容易控制，实现高密度培养，还能得到更快的生长速率和更高的产量。
发明内容
本发明的目的在于提供一种小球藻高效培养基，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种小球藻高效培养基，每升小球藻高效培养基包括以下组份：
(1)大量元素：硝酸钠0.10-0.20g、磷酸二氢钾0.01-0.04g、七水硫酸镁0.02-0.08g、尿素0.02-0.06g、氯化钙0.01-0.04g、碳酸氢钠0.01-0.05g、氯化钠0.50-1.5g；
(2)微量元素：柠檬酸三铁2.00-5.00mg、五水硫酸铜0.05-0.10mg、硼酸2.00-3.00mg、四水氯化锰1.50-2.00mg、二水钼酸钠0.10-0.40mg；
所述小球藻高效培养基的其余组份为海水。
作为本发明进一步的方案：每升小球藻高效培养基包括以下组份：
(1)大量元素：硝酸钠0.10-0.18g、磷酸二氢钾0.01-0.03g、七水硫酸镁0.02-0.06g、尿素0.02-0.05g、氯化钙0.01-0.03g、碳酸氢钠0.01-0.03g、氯化钠0.50-1.2g；
(2)微量元素：柠檬酸三铁2.00-4.50mg、五水硫酸铜0.05-0.09mg、硼酸2.00-2.90mg、四水氯化锰1.50-1.90mg、二水钼酸钠0.10-0.30mg；
所述小球藻高效培养基的其余组份为海水。
作为本发明再进一步的方案：每升小球藻高效培养基包括以下组份：
(1)大量元素：硝酸钠0.16g、磷酸二氢钾0.02g、七水硫酸镁0.05g、尿素0.04g、氯化钙0.02g、碳酸氢钠0.02g、氯化钠1.00g；
(2)微量元素：柠檬酸三铁4.00mg、五水硫酸铜0.08mg、硼酸2.86mg、四水氯化锰1.81mg、二水钼酸钠0.21mg；
所述小球藻高效培养基的其余组份为海水。
所述小球藻高效培养基的制备方法，步骤如下：
1）按上述配方比例称取各原料，备用；
2）依次将上述所需要量的硝酸钠、磷酸二氢钾、七水硫酸镁、尿素、氯化钙、碳酸氢钠和氯化钠溶解混匀于上述所需要量的海水中，用的乙酸溶液调节pH至6.5；
3）向上述溶液中加入上述所需要量的柠檬酸三铁、五水硫酸铜、硼酸、四水氯化锰和二水钼酸钠，混合均匀后得混合液A；
4）将充分混匀后的混合液A放在除菌过滤器中用压力为0.4公斤/cm2的CO2气体压滤除菌后装入300ml三角瓶中，每瓶装量为200ml，用纱布封口；
5）对三角瓶中的溶液进行灭菌处理即得小球藻高效培养基。
作为本发明再进一步的方案：步骤2）中，所述乙酸溶液的浓度为0.1Mol/L。
作为本发明再进一步的方案：步骤5）中，灭菌温度为115-130℃，灭菌压强为0.069-0.103MPa。
作为本发明再进一步的方案：步骤5）中，灭菌处理的时长为30-45min。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明所述小球藻高效培养基可直接添加应用，使小球藻在短时间内迅速吸收液体培养基中的各种营养成分，实现高密度培养，还能得到更快的生长速率和更高的产量；同时省去购买琼脂粉的费用，降低生产成本。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明的技术方案作进一步详细地说明。
实施例1
一种小球藻高效培养基，每升小球藻高效培养基包括以下组份：
(1)大量元素：硝酸钠0.10g、磷酸二氢钾0.01g、七水硫酸镁0.02g、尿素0.02g、氯化钙0.01g、碳酸氢钠0.01g、氯化钠0.50g；
(2)微量元素：柠檬酸三铁2.00mg、五水硫酸铜0.05mg、硼酸2.00mg、四水氯化锰1.50mg、二水钼酸钠0.10mg；
所述小球藻高效培养基的其余组份为海水。
所述小球藻高效培养基的制备方法，步骤如下：
1）按上述配方比例称取各原料，备用；
2）依次将上述所需要量的硝酸钠、磷酸二氢钾、七水硫酸镁、尿素、氯化钙、碳酸氢钠和氯化钠溶解混匀于上述所需要量的海水中，用的乙酸溶液调节pH至6.5；
3）向上述溶液中加入上述所需要量的柠檬酸三铁、五水硫酸铜、硼酸、四水氯化锰和二水钼酸钠，混合均匀后得混合液A；
4）将充分混匀后的混合液A放在除菌过滤器中用压力为0.4公斤/cm2的CO2气体压滤除菌后装入300ml三角瓶中，每瓶装量为200ml，用纱布封口；
5）对三角瓶中的溶液进行灭菌处理即得小球藻高效培养基。
步骤2）中，所述乙酸溶液的浓度为0.1Mol/L。
步骤5）中，灭菌温度为115℃，灭菌压强为0.069MPa。
步骤5）中，灭菌处理的时长为30min。
实施例2
一种小球藻高效培养基，每升小球藻高效培养基包括以下组份：
(1)大量元素：硝酸钠0.15g、磷酸二氢钾0.02g、七水硫酸镁0.03g、尿素0.04g、氯化钙0.02g、碳酸氢钠0.03g、氯化钠0.8g；
(2)微量元素：柠檬酸三铁3.00mg、五水硫酸铜0.08mg、硼酸2.50mg、四水氯化锰1.80mg、二水钼酸钠0.20mg；
所述小球藻高效培养基的其余组份为海水。
所述小球藻高效培养基的制备方法，步骤如下：
1）按上述配方比例称取各原料，备用；
2）依次将上述所需要量的硝酸钠、磷酸二氢钾、七水硫酸镁、尿素、氯化钙、碳酸氢钠和氯化钠溶解混匀于上述所需要量的海水中，用的乙酸溶液调节pH至6.5；
3）向上述溶液中加入上述所需要量的柠檬酸三铁、五水硫酸铜、硼酸、四水氯化锰和二水钼酸钠，混合均匀后得混合液A；
4）将充分混匀后的混合液A放在除菌过滤器中用压力为0.4公斤/cm2的CO2气体压滤除菌后装入300ml三角瓶中，每瓶装量为200ml，用纱布封口；
5）对三角瓶中的溶液进行灭菌处理即得小球藻高效培养基。
步骤2）中，所述乙酸溶液的浓度为0.1Mol/L。
步骤5）中，灭菌温度为120℃，灭菌压强为0.072MPa。
步骤5）中，灭菌处理的时长为35min。
实施例3
一种小球藻高效培养基，每升小球藻高效培养基包括以下组份：
(1)大量元素：硝酸钠0.16g、磷酸二氢钾0.02g、七水硫酸镁0.05g、尿素0.04g、氯化钙0.02g、碳酸氢钠0.02g、氯化钠1.00g；
(2)微量元素：柠檬酸三铁4.00mg、五水硫酸铜0.08mg、硼酸2.86mg、四水氯化锰1.81mg、二水钼酸钠0.21mg；
所述小球藻高效培养基的其余组份为海水。
所述小球藻高效培养基的制备方法，步骤如下：
1）按上述配方比例称取各原料，备用；
2）依次将上述所需要量的硝酸钠、磷酸二氢钾、七水硫酸镁、尿素、氯化钙、碳酸氢钠和氯化钠溶解混匀于上述所需要量的海水中，用的乙酸溶液调节pH至6.5；
3）向上述溶液中加入上述所需要量的柠檬酸三铁、五水硫酸铜、硼酸、四水氯化锰和二水钼酸钠，混合均匀后得混合液A；
4）将充分混匀后的混合液A放在除菌过滤器中用压力为0.4公斤/cm2的CO2气体压滤除菌后装入300ml三角瓶中，每瓶装量为200ml，用纱布封口；
5）对三角瓶中的溶液进行灭菌处理即得小球藻高效培养基。
步骤2）中，所述乙酸溶液的浓度为0.1Mol/L。
步骤5）中，灭菌温度为125℃，灭菌压强为0.082MPa。
步骤5）中，灭菌处理的时长为40min。
实施例4
一种小球藻高效培养基，每升小球藻高效培养基包括以下组份：
(1)大量元素：硝酸钠0.20g、磷酸二氢钾0.04g、七水硫酸镁0.08g、尿素0.06g、氯化钙0.04g、碳酸氢钠0.05g、氯化钠1.5g；
(2)微量元素：柠檬酸三铁5.00mg、五水硫酸铜0.10mg、硼酸3.00mg、四水氯化锰2.00mg、二水钼酸钠0.40mg；
所述小球藻高效培养基的其余组份为海水。
所述小球藻高效培养基的制备方法，步骤如下：
1）按上述配方比例称取各原料，备用；
2）依次将上述所需要量的硝酸钠、磷酸二氢钾、七水硫酸镁、尿素、氯化钙、碳酸氢钠和氯化钠溶解混匀于上述所需要量的海水中，用的乙酸溶液调节pH至6.5；
3）向上述溶液中加入上述所需要量的柠檬酸三铁、五水硫酸铜、硼酸、四水氯化锰和二水钼酸钠，混合均匀后得混合液A；
4）将充分混匀后的混合液A放在除菌过滤器中用压力为0.4公斤/cm2的CO2气体压滤除菌后装入300ml三角瓶中，每瓶装量为200ml，用纱布封口；
5）对三角瓶中的溶液进行灭菌处理即得小球藻高效培养基。
步骤2）中，所述乙酸溶液的浓度为0.1Mol/L。
步骤5）中，灭菌温度为130℃，灭菌压强为0.103MPa。
步骤5）中，灭菌处理的时长为45min。
本发明所述小球藻高效培养基可直接添加应用，使小球藻在短时间内迅速吸收液体培养基中的各种营养成分，实现高密度培养，还能得到更快的生长速率和更高的产量；同时省去购买琼脂粉的费用，降低生产成本。
上面对本发明的较佳实施方式作了详细说明，但是本发明并不限于上述实施方式，在本领域的普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本发明宗旨的前提下作出各种变化。
Claims (7)
1.一种小球藻高效培养基，其特征在于，每升小球藻高效培养基每升小球藻高效培养基包括以下组份：
(1)大量元素：硝酸钠0.10-0.20g、磷酸二氢钾0.01-0.04g、七水硫酸镁0.02-0.08g、尿素0.02-0.06g、氯化钙0.01-0.04g、碳酸氢钠0.01-0.05g、氯化钠0.50-1.5g；
(2)微量元素：柠檬酸三铁2.00-5.00mg、五水硫酸铜0.05-0.10mg、硼酸2.00-3.00mg、四水氯化锰1.50-2.00mg、二水钼酸钠0.10-0.40mg；
所述小球藻高效培养基的其余组份为海水。
2.根据权利要求1所述的小球藻高效培养基，其特征在于，每升小球藻高效培养基包括以下组份：
(1)大量元素：硝酸钠0.10-0.18g、磷酸二氢钾0.01-0.03g、七水硫酸镁0.02-0.06g、尿素0.02-0.05g、氯化钙0.01-0.03g、碳酸氢钠0.01-0.03g、氯化钠0.50-1.2g；
(2)微量元素：柠檬酸三铁2.00-4.50mg、五水硫酸铜0.05-0.09mg、硼酸2.00-2.90mg、四水氯化锰1.50-1.90mg、二水钼酸钠0.10-0.30mg；
所述小球藻高效培养基的其余组份为海水。
3.根据权利要求1所述的小球藻高效培养基，其特征在于，每升小球藻高效培养基包括以下组份：
(1)大量元素：硝酸钠0.16g、磷酸二氢钾0.02g、七水硫酸镁0.05g、尿素0.04g、氯化钙0.02g、碳酸氢钠0.02g、氯化钠1.00g；
(2)微量元素：柠檬酸三铁4.00mg、五水硫酸铜0.08mg、硼酸2.86mg、四水氯化锰1.81mg、二水钼酸钠0.21mg；
所述小球藻高效培养基的其余组份为海水。
4.一种如权利要求1-3任一所述的小球藻高效培养基的制备方法，其特征在于，步骤如下：
1）按上述配方比例称取各原料，备用；
2）依次将上述所需要量的硝酸钠、磷酸二氢钾、七水硫酸镁、尿素、氯化钙、碳酸氢钠和氯化钠溶解混匀于上述所需要量的海水中，用的乙酸溶液调节pH至6.5；
3）向上述溶液中加入上述所需要量的柠檬酸三铁、五水硫酸铜、硼酸、四水氯化锰和二水钼酸钠，混合均匀后得混合液A；
4）将充分混匀后的混合液A放在除菌过滤器中用压力为0.4公斤/cm2的CO2气体压滤除菌后装入300ml三角瓶中，每瓶装量为200ml，用纱布封口；
5）对三角瓶中的溶液进行灭菌处理即得小球藻高效培养基。
5.根据权利要求6所述的小球藻高效培养基，其特征在于，步骤2）中，所述乙酸溶液的浓度为0.1Mol/L。
6.根据权利要求6所述的小球藻高效培养基，其特征在于，步骤5）中，灭菌温度为115-130℃，灭菌压强为0.069～0.103MPa。
7.根据权利要求6所述的小球藻高效培养基，其特征在于，步骤5）中，灭菌处理的时长为30-45min。
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