CN100529067C - 一种制备竹叶sod的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了制备竹叶SOD的方法，它包括粉碎、浸泡、杀菌、破碎过滤、超滤浓缩沉淀、冻干，其制备方法具有以下优点：工艺简单，操作方便，在竹叶有效成分的研究中，迄今尚未发现任何有毒、有害的成分，其安全性高，生产成本低。竹叶SOD结合竹叶黄酮粉等成分具有优良的降血脂、降血压作用，它还能抗菌、抗病毒、增强免疫力以及抗肿瘤，对增强智力提高学习能力也有一定的功效。
Description
技术领域
本发明涉及生物化学制品、保健食品技术领域，特别是涉及一种制备竹叶SOD的方法。
背景技术
我国素有“竹子王国”之称，境内有竹类40多属400余种，竹林面积约400万公顷。竹子以其独特的生物学、生态学及多用途等特点，日益受到人们的重视，竹子是禾本科多年生常绿植物，是当今世界最具有使用价值的植物之一。现代竹类利用的主要类型如下：工业原材料(纸浆、竹粉、活性碳等)，工艺编品(工艺品、日用器具、文化用品、渔农业生产用品等)，建材(基柱、脚手架、竹制人造板等)，食用品(竹笋及制品、食用菌、竹汁饮料、竹木糖醇等)和药用品(竹黄、竹茹、竹沥、竹叶等)。就竹子的整株利用而言，竹叶的开发明显滞后。
竹叶的医疗保健作用早已为我国人民所认识。竹叶在我国具有悠久的食用和药用历史，人们对竹叶风味的直觉就是那透人心脾的清香。《本草求真》书载，“凉心缓脾、清爽止渴，为治上焦风邪烦热、咳逆喘促、呕岁吐血、一切中风惊痫等症，无非因其轻能解上、辛能散郁、甘能缓脾、凉能入心、寒能疗热耳”。《本经逢原》载：″竹叶兼行肌表，故能疗疮杀虫。竹茹专清胃腑，故能止呕除烦。竹沥善透经络，能治筋脉拘挛。痰在皮里膜外、经络四肢，非竹沥不能化之″。《药品化义》载：″竹叶清香透心，微苦凉热，气味俱清。《经曰》治温以清，专逆喘促，味淡利窍，使心经热血分解。主治暑热消渴，胸中热痰，伤寒虚烦，咳逆喘促，皆用为良剂也。又取清气入肺，是以清气分之热，非竹叶不能……″。竹叶是中医一味传统的清热解毒药，据《中药大辞典》记载，淡竹叶功用主治：清热除烦，生津利尿；治热病烦渴，小儿惊痫，咳逆吐血，面赤，小便短赤，口糜舌疮等。竹叶及其嫩茎是动物界的活化石---大熊猫的专一食料。阔叶箬竹的叶常被用来包裹食物，如我国的粽子和日本的寿司等。在我国少数民族地区还有饮用竹筒茶、竹叶茶，吃竹米饭的习惯。1998年，(淡)竹叶又被卫生部批准列入了″药、食两用的天然植物名单″。
SOD即Superoxide Dismutase(超氧化物歧化酶)，又称为抗氧化酶，广泛存在于自然界的生物体内，能催化生物体内超氧化自由基的歧化反应，具有清除自由基的能力。随着人们年龄的增长，机体组织中SOD含量及其活性明显下降，从而使体内超氧自由基-致老因子不断产生和积累，诱发人体多种疾病，如免疫力下降，高血脂、高血压等。
发明内容
本本发明的目的即在于提供一种竹叶SOD的制备方法。
本发明的目的通过以下技术方案来实现：一种制备竹叶SOD的方法，它包括以下步骤：
(1)将鲜竹叶粉碎成60～80目的竹叶粉；
(2)浸泡：将竹叶粉用3～5倍水浸泡约2小时，在浸泡过程中加入氯化钠5～8％，维生素A作为保护剂；
(3)杀菌：在竹粉水中加0.05～0.09％山梨酸钾，在100～120℃高温瞬间杀菌2～4秒；
(4)破碎过滤：超声波破碎，经过500～800转/min离心约30分钟，过滤；
(5)超滤浓缩沉淀：将过滤后的上清重新超滤浓缩，所得浓缩液与上清的体积比为0.03∶1，用盐酸调浓缩液的PH值为5，用0.8倍丙酮浸泡浓缩液沉淀竹叶蛋白，再将竹叶蛋白经过1000-1200转/min离心约1小时，过滤，过滤后用碳酸氢钠调PH值为7，再加1.5倍丙酮沉淀SOD蛋白，回收丙酮；
(6)冻干：将竹叶SOD蛋白加α-环糊精冷冻干燥，得竹叶SOD粉末。
将步骤(4)破碎过滤后的沉淀经30～50℃干燥得提取SOD后竹粉，将其加入3～6倍的50～60％丙酮浸泡2～3天；破碎释放：将浸泡液用搅拌机破碎约2小时，得释放液；热泡回流：将释放液移入回流装置加热至50～80℃，静置和保温12～24小时，再加入3～5倍50～60％丙酮，升温至85℃回流2～3小时；浓缩：将纯液用蒸馏水方法除去丙酮；干燥，得竹叶黄酮粉。
通过上面的叙述可以看出，本发明提供的竹叶SOD的制备方法具有以下优点：工艺简单，操作方便，在竹叶有效成分的研究中，迄今尚未发现任何有毒、有害的成分，其安全性高，生产成本低。竹叶SOD结合竹叶黄酮粉等具有优良的降血脂作用，抗菌、抗病毒、免疫增强作用，抗肿瘤作用，对增强智力提高学习能力也有一定的功效。
以下通过动物及临床实验对竹叶SOD的各顶功效进行描述：
1、优良的降血脂作用
含竹叶SOD降脂胶囊调节血脂的作用进行了临床验证，结果发现：(1)含竹叶SOD降脂胶囊治疗两个月后脂类代谢障碍患者血清脂质单组分TG显著低于治疗前水平、HDL-C显著高于治疗前水平；(2)在使用过程中未发现明显副作用，对血、尿常规，肝、肾功能和血糖均无不良影响，服用安全是本品突出特点；(3)通过临床验证，证明含竹叶SOD降脂胶囊疗效确切，无毒副作用。适用于多种类型血脂异常代谢，是一种安全有效的调脂药物，值得在临床推广应用。对动脉粥样硬化、心脑血管病的防治具有较好的临床应用前景。下表是竹叶SOD降脂胶囊与复方银杏黄酮胶囊两组患者治疗后比较表，60例患者均为高血脂、高血压患者，男41例，女19例，年龄37-75岁，病程2-10年，其中糖尿病史15例，两组患者治疗6周后，治疗组痊愈显效率为83.3％，常规组为70.0％，经统计学处理，两组差异无显著性，P＞0.05：
两组患者治疗后比较(％)
| 组别 | 例数 | 痊愈 | 显效 | 好转 | 无效 |
| 竹叶SOD降脂胶囊 | 30 | 10(33.3) | 15(50.0) | 4(13.3) | 1(3.3) |
| 复方银杏黄酮胶囊 | 30 | 7(23.3) | 14(46.7) | 6(20.0) | 3(10.0) |
2、免疫增强作用
血清溶血素测定结果表明，含竹叶SOD增强免疫力胶囊在20mg/kg体重的剂量及以上剂量时，可以促进小鼠体内抗体的产生，提高体液免疫功能；DNFB诱导小鼠迟发型变态反应试验结果表明，所试剂量可以促进小鼠细胞免疫功能；小鼠碳廓清试验结果表明，所试剂量可以增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能。
3、提高学习能力增智功效
取健康昆明种小鼠60只，雌雄各半，随机分为3组，分别用2个剂量的含竹叶SOD增智胶囊灌胃7天后，放入小鼠辐射式电迷路箱中逐只测试。固定训练次数为10次，记录错误反应的次数，反应学习能力的强弱；24h后测记忆成绩。试验组与对照组相比，错误反应的次数减少，尤其是高剂量组对学习能力的提高影响是显著的(P＜0.05)，但对记忆再现能力的影响无统计意义。
4、优良的抗活性氧自由基能力
竹叶SOD对生物体内存在的主要活性氧自由基----超氧阴离子自由基(O2-)和羟自由基(-OH)具有很强的清除能力。据对来自6个属17积压竹子秋叶的提取物的调查，用化学发光法测得其醇提取物对O2-的半抑制浓度(IC50)平均为4.97±2.33μg/ml，对-OH的IC50平均为1.50±0.93mg/ml，表明竹叶SOD有很强的清除活性氧自由基的能力，尤其对O2-的效价更高。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的描述：
实施例1：一种制备竹叶SOD的方法，它包括以下步骤：
(1)将鲜竹叶粉碎成60目的竹叶粉；
(2)浸泡：将竹叶粉用3倍水浸泡2小时，在浸泡过程中加入氯化钠5％，维生素A作为保护剂；
(3)杀菌：在竹粉水中加0.09％山梨酸钾，在100℃高温瞬间杀菌4秒；
(4)破碎过滤：超声波破碎，经过800转/min离心25分钟，过滤；
(5)超滤浓缩沉淀：将过滤后的上清重新超滤浓缩，所得浓缩液与上清的体积比为0.03∶1，用盐酸调浓缩液的PH值为5，用0.8倍丙酮浸泡浓缩液沉淀竹叶蛋白，再将竹叶蛋白经过1200转/min离心1小时，过滤，过滤后用碳酸氢钠调PH值为7，再加1.5倍丙酮沉淀SOD蛋白，回收丙酮；
(6)冻干：将竹叶SOD蛋白加α-环糊精冷冻干燥，得竹叶SOD粉末。
实施例2：一种制备竹叶SOD的方法，其特征在于：它包括以下步骤：
(1)将鲜竹叶粉碎成80目的竹叶粉；
(2)浸泡：将竹叶粉用5倍水浸泡约2.2小时，在浸泡过程中加入氯化钠8％，维生素A作为保护剂；
(3)杀菌：在竹粉水中加0.05％山梨酸钾，在120℃高温瞬间杀菌2秒；
(4)破碎过滤：超声波破碎，经过500转/min离心35分钟，过滤；
(5)超滤浓缩沉淀：将过滤后的上清重新超滤浓缩，所得浓缩液与上清的体积比为0.03∶1，用盐酸调浓缩液的PH值为5，用0.8倍丙酮浸泡浓缩液沉淀竹叶蛋白，再将竹叶蛋白经过1000转/min离心1.2小时，过滤，过滤后用碳酸氢钠调PH值为7，再加1.5倍丙酮沉淀SOD蛋白，回收丙酮；
(6)冻干：将竹叶SOD蛋白加α-环糊精冷冻干燥，得竹叶SOD粉末。
实施例3：一种制备竹叶SOD的方法，它包括以下步骤：
(1)将鲜竹叶粉碎成70目的竹叶粉；
(2)浸泡：将竹叶粉用4倍水浸泡1.8小时，在浸泡过程中加入氯化钠7％，维生素A作为保护剂；
(3)杀菌：在竹粉水中加0.07％山梨酸钾，在110℃高温瞬间杀菌3秒；
(4)破碎过滤：超声波破碎，经过700转/min离心30分钟，过滤；
(5)超滤浓缩沉淀：将过滤后的上清重新超滤浓缩，所得浓缩液与上清的体积比为0.03∶1，用盐酸调浓缩液的PH值为5，用0.8倍丙酮浸泡浓缩液沉淀竹叶蛋白，再将竹叶蛋白经过1100转/min离心1.1小时，过滤，过滤后用碳酸氢钠调PH值为7，再加1.5倍丙酮沉淀SOD蛋白，回收丙酮；
(6)冻干：将竹叶SOD蛋白加α-环糊精冷冻干燥，得竹叶SOD粉末。
实施例4：将制作竹叶SOD粉末步骤(4)破碎过滤后的沉淀经50℃干燥得提取SOD后竹粉，将其加入3倍的50％丙酮浸泡3天；破碎释放：将浸泡液用搅拌机破碎2小时，得释放液；热泡回流：将释放液移入回流装置加热至50℃，静置和保温12小时，再加入3倍60％丙酮，升温至85℃回流2小时；浓缩：将纯液用蒸馏水方法除去丙酮；干燥，得竹叶黄酮粉。
Claims (1)
1、一种制备竹叶SOD的方法，其特征在于：它包括以下步骤：
(1)粉碎：将鲜竹叶粉碎成60～80目的竹叶粉；
(2)浸泡：将竹叶粉用3～5倍水浸泡2小时，在浸泡过程中加入氯化钠5～8％，维生素A作为保护剂；
(3)杀菌：在竹粉水中加0.05～0.09％山梨酸钾，在100～120℃高温瞬间杀菌2～4秒；
(4)破碎过滤：超声波破碎，经过500～800转/min离心30分钟，过滤；
(5)超滤浓缩沉淀：将过滤后的上清重新超滤浓缩，所得浓缩液与上清的体积比为0.03∶1，用盐酸调浓缩液的PH值为5，用0.8倍丙酮浸泡浓缩液沉淀竹叶蛋白，再将竹叶蛋白经过1000-1200转/min离心1小时，过滤，过滤后用碳酸氢钠调PH值为7，再加1.5倍丙酮沉淀SOD蛋白，回收丙酮；
(6)冻干：将竹叶SOD蛋白加α-环糊精冷冻干燥，得竹叶SOD粉末。
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