CN100528891C - 从西兰花籽中分离制备葡萄糖莱菔子苷的方法 - Google Patents

从西兰花籽中分离制备葡萄糖莱菔子苷的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN100528891C
CN100528891C CNB2007100699586A CN200710069958A CN100528891C CN 100528891 C CN100528891 C CN 100528891C CN B2007100699586 A CNB2007100699586 A CN B2007100699586A CN 200710069958 A CN200710069958 A CN 200710069958A CN 100528891 C CN100528891 C CN 100528891C
Authority
CN
China
Prior art keywords
glycosides
glucose
semen raphani
caulis
separating
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CNB2007100699586A
Other languages
English (en)
Other versions
CN101100475A (zh
Inventor
杜琪珍
崔洪刚
沈莲清
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Zhejiang Gongshang University
Original Assignee
Zhejiang Gongshang University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zhejiang Gongshang University filed Critical Zhejiang Gongshang University
Priority to CNB2007100699586A priority Critical patent/CN100528891C/zh
Publication of CN101100475A publication Critical patent/CN101100475A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN100528891C publication Critical patent/CN100528891C/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Landscapes

  • Extraction Or Liquid Replacement (AREA)
  • Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)

Abstract

本发明公开了一种从西兰花籽中分离制备葡萄糖莱菔子苷的方法。采用甲醇浸提西兰花籽中的硫苷；用萃取法对浸提得到提取物进行初步纯化，得到西兰花籽硫苷粗提物；以逆流色谱仪为分离设备分离纯化西兰花籽花色苷粗提物中的葡萄糖莱菔子苷，其溶剂系统由常温常压下处于液态的正丁醇、乙腈、和10%硫酸铵水溶液组成，乙腈、正丁醇和10%硫酸铵的体积比为0.5∶2～4∶1，本发明的方案成本较低、经济适用，分离所得葡萄糖莱菔子苷纯度在85%以上。

Description

从西兰花籽中分离制备葡萄糖莱菔子苷的方法
技术领域
本发明属于食品加工技术领域，涉及西兰花籽深加工技术，特别是从西兰花籽中分离制备葡萄糖莱菔子苷的方法。
技术背景
西兰花是我国的传统特产蔬菜，其风味独特，且具有很高的营养保健价值，含有丰富的营养物质和活性物质，硫代葡萄糖苷类化合物是其中最主要的一类活性成分。西兰花籽硫苷主要成分为葡萄糖莱菔子苷。国内外研究表明葡萄糖莱菔子苷具有抗氧化、抗癌、抗突变等生物活性，并对DNA分裂有保护作用和减轻眼睛的疲劳、提高夜间视力和改善视觉瞬间改变适应性。从西兰花籽分离制备葡萄糖莱菔子苷未有文献报道。
现有关于硫代葡萄糖苷的分离主要采用制备型高效液相色谱，其局限性是分离量少。其次，高效液相色谱柱价格昂贵、再生使用相对困难，分离得到硫代葡萄糖苷成本较高，难以发展成为制备量大的分离技术。
发明内容
本发明的目的是提供一种成本较低、经济适用的从西兰花籽中分离制备葡萄糖莱菔子苷的方法。
为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：采用甲醇浸提西兰花籽中的硫苷；用萃取法对浸提得到提取物进行初步纯化，得到西兰花籽硫苷粗提物；以逆流色谱仪为分离设备分离纯化西兰花籽花色苷粗提物中的葡萄糖莱菔子苷.，其溶剂系统由常温常压下处于液态的乙腈、正丁醇和10％硫酸铵水溶液组成，乙腈、正丁醇和10％硫酸铵的体积比为0.5∶2～4∶1，水的用量应至少保证使溶剂系统上下相分层，硫酸铵水溶液的浓度为10％。下相做固定相，上相做流动相。
以上方案按步骤叙述如下：
1.采用甲醇溶剂浸提西兰花籽中的葡萄糖莱菔子苷，得到葡萄糖莱菔子苷提取液。
2.将葡萄糖莱菔子苷提取液真空浓缩至含固形物；
3.在上述浓缩液中加入适量的水，用乙酸乙酯萃取两次，脱脂为水相葡萄糖莱菔子苷；
4.将葡萄糖莱菔子苷水相真空浓缩至糊状，再冷冻干燥，获西兰花籽葡萄糖莱菔子苷粗提物；
5.采用逆流色谱方法分离纯化葡萄糖莱菔子苷粗提物；
6.收集逆流色谱分离的葡萄糖莱菔子苷组分进行真空浓缩，直至固形物浓度达到40％以上，再采用冷冻干燥，得到纯化的葡萄糖莱菔子苷粉末，纯度达95％以上。
步骤(1)所述的浸提过程是：采用甲醇溶剂，浸提溶剂与西兰花籽的体积比为5～10∶1，条件为沸水浴，浸提时间为1小时，浸提次数2～3次。
步骤(2)、步骤(4)和步骤(6)所述真空浓缩的真空度低于0.09Mpa，温度为35～40℃。
步骤(4)和步骤(6)所述冷冻干燥的真空度低于50Pa，温度低于-35℃。
步骤(5)所述逆流色谱方法为：采用逆流色谱仪为分离设备，溶剂系统由常温常压下处于液态的正丁醇、乙腈和10％硫酸铵水溶液组成，乙腈、正丁醇和10％硫酸铵的体积比为0.5∶2～4∶1，水的用量应至少保证使溶剂系统上下相分层，硫酸铵水溶液的浓度为10％，下相做固定相，上相做流动相；用泵将上述溶剂系统的下相注入逆流色谱仪的色谱柱，并取上述溶剂系统的部分上相溶解花色苷粗提物制备逆流色谱样品溶液；开启逆流色谱仪和流动相输液泵，将样品溶液和流动相输入逆流色谱分离柱；用紫外-可见检测器检测逆流色谱流出液，根据所得的色谱图收集葡萄糖莱菔子苷组分。
步骤(5)所述逆流色谱方法中的逆流色谱仪为高速逆流色谱仪(HSCCC)或低速逆流色谱仪(SRCCC)。
附图说明
图1为本发明的工艺流程图。
图2为实施例1的HSCCC分离图谱。
图3为实施例1分离所得的葡萄糖莱菔子苷的HPLC图谱。
图4为实施例2的HSCCC分离图谱。
图5为实施例3的SRCCC分离图谱。
具体实施方式
实施例1
本实施例的溶剂系统采用乙腈∶正丁醇∶10％硫酸铵水溶液＝0.5∶3∶1，硫酸铵水溶液浓度为10％；逆流色谱仪为HSCCC-D1000高速逆流色谱仪，葡萄糖莱菔子苷粗提物中葡萄糖莱菔子苷约占3.6％。
量取乙腈500ml、正丁醇3000ml和10％硫酸铵1000ml，置于5000ml分液漏斗，充分摇匀，静置分层后，将上下两相分别装入试剂瓶。将下相以40ml/min的流速注入高速逆流色谱的色谱柱。称取葡萄糖莱菔子苷粗提物2.0g溶于50ml下相中制备逆流色谱样品溶液，开启逆流色谱仪至800转/min，然后以1.0ml/min的流速输入样品溶液，待进样结束后，再以2.0ml/min的流速输入流动相以洗脱柱内的组分，用紫外可见检测器在253nm下检测逆流色谱流出液，根据检测器采集的图谱收集葡萄糖莱菔子苷组分。分离得到葡萄糖莱菔子苷组分131mg，纯度达86％以上。
实施例2
本实施例的溶剂系统采用乙腈∶正丁醇∶10％硫酸铵水溶液＝0.5∶2∶1，硫酸铵水溶液浓度为10％，逆流色谱仪为HSCCC-D1000高速逆流色谱仪，西兰花籽花色苷提取物中葡萄糖莱菔子苷约占6.6％。
量取乙腈500ml、正丁醇2000ml和10％硫酸铵1000ml，置于5000ml分液漏斗，充分摇匀，静置分层后，将上下两相分别装入试剂瓶。将下相以40ml/min的流速注入高速逆流色谱的色谱柱。葡萄糖莱菔子苷粗提物2.0g溶于50ml下相中制备逆流色谱样品溶液，开启逆流色谱仪至800转/min，然后以1.0ml/min的流速输入样品溶液，待进样结束后，再以2.0ml/min的流速输入流动相洗脱柱内的组分，用紫外可见检测器在253nm下检测逆流色谱流出液，根据检测器采集的图谱收集葡萄糖莱菔子苷组分。分离得到葡萄糖莱菔子苷组分130mg，纯度达88％以上。
实施例3
本实施例的溶剂系统采用乙腈∶正丁醇∶10％硫酸铵水溶液＝0.5∶4∶1，硫酸铵水溶液浓度为10％，逆流色谱仪为SRCCC-D40L低速逆流色谱仪，西兰花籽花色苷提取物中葡萄糖莱菔子苷约占6.6％。
量取乙腈20L、正丁醇160L和水40L，置于不锈钢桶中，充分搅拌匀，静置分层后，将上下两相分别装入试剂桶。将上相以600ml/min的流速注入低速逆流色谱的色谱柱。称取葡萄糖莱菔子苷粗提物500g溶于18L下相中制备逆流色谱样品溶液，开启低速逆流色谱仪至80转/min，然后以5.0ml/min的流速输入样品溶液，待进样结束后，再以15.0ml/min的流速输入流动相洗脱柱内的花色苷组分，用紫外可见检测器在235nm下检测逆流色谱流出液，根据检测器采集的图谱收集葡萄糖莱菔子苷组分。分离得到葡萄糖莱菔子苷组分35.0g，纯度在85％以上。

Claims (6)

1、从西兰花籽中分离制备葡萄糖莱菔子苷的方法，其特征在于以下步骤：
(1)采用甲醇溶剂浸提西兰花籽中的葡萄糖莱菔子苷，得到葡萄糖莱菔子苷提取液；
(2)将葡萄糖莱菔子苷提取液真空浓缩至含固形物；
(3)在上述浓缩液中加入适量的水，用乙酸乙酯萃取两次，脱脂为水相葡萄糖莱菔子苷；
(4)将葡萄糖莱菔子苷水相真空浓缩至糊状，再冷冻干燥，获西兰花籽葡萄糖莱菔子苷粗提物；
(5)采用逆流色谱方法分离纯化葡萄糖莱菔子苷粗提物；
(6)收集逆流色谱分离的葡萄糖莱菔子苷组分进行真空浓缩，直至固形物浓度达到40％以上，再采用冷冻干燥，得到纯化的葡萄糖莱菔子苷粉末。
2、根据权利要求1所述从西兰花籽中分离制备葡萄糖莱菔子苷的方法，其特征在于步骤(1)所述的浸提过程是：采用甲醇浸提溶剂与西兰花籽的液料体积比为5～10∶1，条件为水浴加热，浸提时间1小时，浸提次数2～3次。
3、根据权利要求1所述从西兰花籽中分离制备葡萄糖莱菔子苷的方法，其特征在于：步骤(2)、步骤(4)和步骤(6)所述真空浓缩的真空度低于0.09Mpa，温度为35～40℃。
4、根据权利要求1所述从西兰花籽中分离制备葡萄糖莱菔子苷的方法，其特征在于：步骤(4)和步骤(6)所述冷冻干燥的真空度低于50Pa，温度低于-35℃。
5、根据权利要求1所述从西兰花籽中分离制备葡萄糖莱菔子苷的方法，其特征在于步骤(5)所述逆流色谱方法为：采用逆流色谱仪为分离设备，溶剂系统由常温常压下处于液态的正丁醇、乙腈、和10％硫酸铵水溶液组成，乙腈、正丁醇和10％硫酸铵的体积比为0.5∶2～4∶1，硫酸铵水溶液的浓度为10％，下相做固定相，上相做流动相；用泵将上述溶剂系统的上相注入逆流色谱仪的色谱柱，并取上述溶剂系统的部分下相溶解硫苷粗提物制备逆流色谱样品溶液；开启逆流色谱仪和流动相输液泵，将样品溶液和流动相输入逆流色谱分离柱；用紫外-可见检测器检测逆流色谱流出液，根据所得的色谱图收集葡萄糖莱菔子苷组分。
6、根据权利要求1所述从西兰花籽中分离制备葡萄糖莱菔子苷的方法，其特征在于：步骤(5)所述逆流色谱方法所用的逆流色谱仪为高速逆流色谱仪(HSCCC)或低速逆流色谱仪(SRCCC)。
CNB2007100699586A 2007-07-09 2007-07-09 从西兰花籽中分离制备葡萄糖莱菔子苷的方法 Expired - Fee Related CN100528891C (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB2007100699586A CN100528891C (zh) 2007-07-09 2007-07-09 从西兰花籽中分离制备葡萄糖莱菔子苷的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB2007100699586A CN100528891C (zh) 2007-07-09 2007-07-09 从西兰花籽中分离制备葡萄糖莱菔子苷的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN101100475A CN101100475A (zh) 2008-01-09
CN100528891C true CN100528891C (zh) 2009-08-19

Family

ID=39034949

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNB2007100699586A Expired - Fee Related CN100528891C (zh) 2007-07-09 2007-07-09 从西兰花籽中分离制备葡萄糖莱菔子苷的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN100528891C (zh)

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101514174B (zh) * 2009-02-24 2011-11-02 黑龙江八一农垦大学 一种从西兰花芽苗菜中提取多功能莱菔硫烷的方法
CN102048791B (zh) * 2009-11-01 2012-05-23 桂林莱茵生物科技股份有限公司 黑芥子甙提取物的制备方法
CN102911216A (zh) * 2011-08-02 2013-02-06 苏州宝泽堂医药科技有限公司 一种从老鼠瓜中分离制备白花菜苷的方法
CN103315297A (zh) * 2013-07-07 2013-09-25 安徽世茂中药股份有限公司 一种西兰花浓缩粉的提取制备方法
US10441594B2 (en) * 2013-12-06 2019-10-15 Rutgers, The State University Of New Jersey Methods of making quinoa leachates and uses thereof
CN104707358A (zh) * 2013-12-13 2015-06-17 中国科学院大连化学物理研究所 一种新型双水相高速逆流色谱
CN111297931A (zh) * 2020-02-24 2020-06-19 成都市三禾田生物技术有限公司 一种西兰花总有效部位提取物及其制备方法和用途
CN111320660A (zh) * 2020-03-04 2020-06-23 北京农学院 一种辣根中烯丙基硫苷含量的测定方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
萝卜硫素研究进展. 王见东等.食品与发酵工业，第29卷第2期. 2002
萝卜硫素研究进展. 王见东等.食品与发酵工业，第29卷第2期. 2002 *
西兰花中萝卜硫素提取。分离与抗癌活性研究. 季宇彬等.哈尔滨商业大学学报，第21卷第3期. 2005
西兰花中萝卜硫素提取。分离与抗癌活性研究. 季宇彬等.哈尔滨商业大学学报，第21卷第3期. 2005 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN101100475A (zh) 2008-01-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN100528891C (zh) 从西兰花籽中分离制备葡萄糖莱菔子苷的方法
CN100439384C (zh) 从桑椹中分离制备花色苷单体的方法
CN100439385C (zh) 从杨梅中分离制备矢车菊色素-3-葡萄糖苷的方法
CN103550273B (zh) 一种从人参中提取低农残人参皂苷的方法
CN103145677B (zh) 一种利用高速逆流色谱分离白木香叶片中活性成分的方法
CN100528892C (zh) 从萝卜籽中分离4-甲基亚磺酰基-3-丁烯基硫代葡萄糖苷的方法
CN101525357A (zh) 一种从中药中分离制备五没食子酰基葡萄糖的方法
CN105131077A (zh) 从破壁灵芝孢子粉中提取过氧麦角甾醇的方法
CN104861019A (zh) 高速逆流色谱制备油茶籽壳中黄酮类化合物的方法
CN107823237A (zh) 一种牛蒡根总黄酮的提取方法
CN101798358B (zh) 从黑木耳中分离制备β-葡聚糖的方法
CN101781184A (zh) 从生姜中分离制备6-姜酚单体的方法
CN102115467A (zh) 一种单体儿茶素的制备方法
CN102040500B (zh) 一种黄腐酚和黄酮类化合物的萃取分离方法
CN105111061B (zh) 一种抗肿瘤活性化合物的制备方法
CN105330710B (zh) 一种从女贞子中同时提取三种环烯醚萜苷类化学对照品的方法
CN105294722A (zh) 一种高纯度光甘草定单体的制备方法
CN102432656B (zh) 一种蛹虫草子实体中虫草素提取纯化的方法
CN105175426B (zh) 一种从四方藤中提取纯化岩白菜素的方法
CN101565437B (zh) 万寿菊素-3-o-葡萄糖苷和紫云英苷的分离制备方法
CN102532147B (zh) 高纯度白鲜碱单体的制备方法
CN101538308A (zh) 用高速逆流色谱法从人参果中分离制备高纯度人参皂苷Re的方法
CN102389456A (zh) 一种提取蓝萼香茶菜总二萜或蓝萼甲素的方法
CN101863953B (zh) 从禾叶山麦冬中分离制备禾叶山麦冬皂苷a的方法
CN109320572B (zh) 从滇山茶中提取黄酮类化合物的方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
C17 Cessation of patent right
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20090819

Termination date: 20100709