CN100519559C

CN100519559C - 作为抗癌剂的6-[(经取代的)苯基]三唑并嘧啶

Info

Publication number: CN100519559C
Application number: CNB2004800302006A
Authority: CN
Inventors: 张楠; 塞米拉米斯·艾拉尔-卡劳斯蒂昂; 阮泰协; 吴彦中; 佟伟
Original assignee: Wyeth Holdings LLC
Current assignee: Wyeth Holdings LLC; Wyeth LLC
Priority date: 2003-09-24
Filing date: 2004-09-17
Publication date: 2009-07-29
Anticipated expiration: 2024-09-17
Also published as: PT1680425E; JP2007506744A; PE20050433A1; CR8288A; AR045810A1; CA2539252A1; RU2006107579A; PL1680425T3; SA04250302A; US7507739B2; CY1106392T1; PA8613301A1; ES2279452T3; AU2004276240A1; US20050090508A1; CO5690598A2; GT200400190A; KR20060098368A; ZA200602387B; WO2005030775A1

Abstract

本发明涉及特定6-[(经取代的)苯基]三唑并嘧啶化合物或其医药学上可接受的盐，和含有所述化合物或其医药学上可接受的盐的组合物，其中所述化合物为适用于治疗哺乳动物中癌症的抗癌剂。此外，本发明涉及一种治疗或抑制哺乳动物中癌肿瘤细胞生长和相关疾病的方法，并且还提供一种治疗或预防哺乳动物中需要治疗或预防的表现出多药耐药性(MDR)或因MDR而呈抗药性的癌肿瘤的方法，所述方法包含向所述哺乳动物投与有效剂量的所述化合物或其医药学上可接受的盐。本发明涉及一种通过促进微管聚合作用来治疗或抑制哺乳动物中需要治疗或抑制的癌肿瘤细胞生长和相关疾病的方法，所述方法包含向所述哺乳动物投与有效剂量的所述化合物和其医药学上可接受的盐。

Description

作为抗癌剂的6-[(经取代的)苯基]三唑并嘧啶

技术领域

本发明涉及特定6-[(经取代的)苯基]三唑并嘧啶化合物或其医药学上可接受的盐，和含有所述化合物或其医药学上可接受的盐的组合物，其中所述化合物为适用于治疗哺乳动物中癌症，治疗或预防表现出多药耐药性(MDR)或因MDR而呈抗药性的癌肿瘤的抗癌剂；涉及一种通过促进微管聚合作用来治疗或抑制需要治疗或抑制的哺乳动物中癌肿瘤细胞生长和相关疾病的方法；还涉及一种通过投与有效剂量的本发明化合物或其医药学上可接受的盐来治疗或抑制哺乳动物中对化学治疗中所用的化学治疗剂特别是抗有丝分裂剂具有先天或后天抗性的癌肿瘤的生长的方法。

背景技术

如今使用的大所数细胞稳定剂抑制用于DNA生物合成的必要前驱体的形成或阻碍DNA聚合酶或干扰DNA的模板功能，原因在于DNA是开发用于化学治疗的治疗药物的主要目标。不幸地是，抑制用于DNA生物合成的必要前驱体的形成或阻碍DNA聚合酶或干扰DNA模板功能也会影响正常组织。

抗微管药是主要的抗癌剂种类(Rowinsky，E.K.和Tolcher，A.W.Antimicrotubuleagents.In：V.T.Devita，Jr.，S.Hellman和S.A.Rosenberg(编)，Cancer Principles and Practice，第6版，第431-452页.Philadelphia：Lippincott Williams and Wilkins，2001)。它们通过干扰细胞微管，特别是有丝分裂纺锤体的功能而起作用。正常纺锤体功能的破坏导致凋亡性细胞死亡。

当前存在三种主要类型的已知抗微管药剂。各类具有在β-微管蛋白上不同的结合区域和对微管功能的不同影响。这些类型为：1)促进微管形成且使微管稳定的紫杉烷部位剂(taxane-site agent)；2)使微管不稳定且通常在高浓度下诱发异常聚合物或聚集体形成的长春花/肽部位剂(vinca/peptide-site agent)；和3)同样使微管不稳定但通常不诱发其它聚合物的秋水仙碱部位剂(colchicine-site agent)(Hamel，E.Antimitotic naturalproducts and their interactions with tubulin.Med.Res.Rev.，16：207-231，1996)。所有这些类型部位的大多数配位体是天然产物或天然产物的半合成衍生物。

太平洋紫杉醇(paclitaxel)和其半合成衍生物多西他赛(docetaxel)(Taxotere

)干扰微管形成且使微管稳定。太平洋紫杉醇(Taxol

)是一种从西部(太平洋)紫杉，Taxus brevifolia分离得到的二萜，代表新一类具有紫杉烷环系统的治疗剂。另外在包括在加拿大东部Gaspesia中发现的加拿大紫杉(yew)(加拿大红豆杉(Taxus canadensis))和在欧洲发现的欧洲红豆杉(Taxus baccata，其针含有太平洋紫杉醇和类似物)的紫杉(Taxacae)家族的其它成员中也发现了此类紫杉醇，并因此提供了太平洋紫杉醇和衍生物的可再生资源。20世纪60年代第一次测试粗萃取物，1974年分离出其活性成分并鉴别了化学结构(M.C.Wani等人的J.Am.Chem.Soc，93，2325(1971))。另外，通过其它测试展示出对黑素瘤、白血病、各种癌瘤、肉瘤和非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin lymphoma)以及许多实体肿瘤的广泛活性。已通过自10-去乙酰基浆果赤霉素III(自紫杉(yew)针和枝获得的前驱体)的部分合成，和通过完全合成制备出太平洋紫杉醇和其类似物(Holton等人的J.Am.Chem.Soc.116：1597-1601(1994)和Nicolaou等人的Nature367：630-634(1994))。已证明太平洋紫杉醇具有抗肿瘤活性。最近显示，太平洋紫杉醇的抗肿瘤活性归因于对微管聚合的促进作用(Kumar，N.，J.Biol.Chem.256：10435-10441(1981)；Rowinsky等人的J.Natl.Cancer Inst.，82：1247-1259(1990)；和Schiff等人的Nature，277：665-667(1979))。临床试验中已经证明了太平洋紫杉醇在几种人类肿瘤中的功效(McGuire等人的Ann.Int.Med.，111：273-279(1989)；Holmes等人的J.Natl.Cancer Inst.，83：1797-1805(1991)；Kohn等人的J.Natl.Cancer Inst，86：18-24(1994)；和A.Bicker等人的Anti-Cancer Drugs，4，141-148(1993))。

临床上使用两种紫杉烷部位剂(太平洋紫杉醇和多西他赛)和三种长春花/肽部位剂(长春碱、长春新碱和长春瑞宾(vinorelbine))治疗各种人类癌症。已证明紫杉烷比长春花生物碱更具有抗实体肿瘤(例如，肺、乳房、卵巢)的效用，这表明促进微管形成的药剂可能在临床上优于使微管不稳定的药剂。秋水仙碱部位剂尚未用于治疗。

虽然太平洋紫杉醇和多西他赛在临床上广泛使用，但是这些药物具有若干局限性，进而需要改良的药剂。首先，许多肿瘤先天呈抗药性(例如，结肠肿瘤)或在多个治疗周期之后变成抗药性，这至少部分归因于位于癌细胞膜中的从细胞抽出药物并因而减少药物功效的药物转运体的表达(Gottesman，M.M.Mechanisms of cancer drug resistance.Annu.Rev.Med.，53：615-627，2002)。这些转运体中最熟知的是P-糖蛋白。因此，需要对微管聚合具有类似紫杉烷效应的新颖药剂，并且其不为P-糖蛋白或其它所述泵的底物且因此将克服患者中紫杉烷抗药性的原因。

其次，太平洋紫杉醇和多西他赛的水溶性差，而且太平洋紫杉醇必须经CremophorEL(一种诱发严重过敏反应的媒剂)调配(Li，C.L.，Newman，R.A.，和Wallace，S.Reformulating paclitaxel.Science & Medicine，1月/2月：38-47，1999)。在投与太平洋紫杉醇以前通常用皮质类固醇和抗组胺剂对患者进行预先治疗以使这些毒性最小化。因此，需要对微管聚合具有类似紫杉烷效应的新颖药剂，并且其为高度水溶性且可在生理盐水或其它合适的非毒性媒剂中给药。

第三，太平洋紫杉醇是具有高度复杂结构的天然产物，而多西他赛是紧密相关的半合成衍生物。因此需要易于通过合成获得、结构上不同于紫杉烷并且对微管聚合具有类似紫杉烷效应的化合物。

因此，在所属领域中仍需要用于癌症治疗的细胞毒素剂。特别需要抑制或治疗肿瘤生长并具有类似于太平洋紫杉醇的效应且干扰微管形成过程的细胞毒素剂。因此，在所属领域中需要加速微管蛋白聚合且使组装微管稳定的药剂。

因此，将会有利的是提供新颖化合物进而提供一种通过投与具有类似太平洋紫杉醇抗癌活性的化合物来治疗或抑制哺乳动物中细胞增生、赘瘤生长和恶性肿瘤生长的方法。

因此，将会有利的是提供新颖化合物进而提供一种治疗或抑制表现出多药耐药性(MDR)或因MDR而呈抗药性的癌肿瘤的生长的方法。

此外，将会有利的是提供新颖化合物进而提供一种治疗或抑制哺乳动物中对化学治疗剂特别是抗有丝分裂剂具有先天或后天抗性的癌肿瘤的生长的方法。

在美国专利号：5,593,996；5,756,509；5,948,783；5,981,534；5,612,345；5,994,360；6，020,338；5,985,883；5,854,252；5,808,066；5,817,663；5,955,252；5,965,561；5,986,135；5,750,766；6，117,865；6,117,876；6,124，301；6,204,269；6,255,309；6,268,371；6,277,856；6,284,762；6,297,251；6,387,848；美国专利公开案US2002/0045631A1；US2002/0061882A1；US20030055069A1；和国际公开号：WO98/46607；WO98/46608；WO99/48893；WO99/41255；WO00/18227；WO01/35738A2；WO02/46195A1；WO02/067679A1；WO02/083676A1；EPO834513A2；EPO782997A2；EPO550113B1；FR2784381A1；EPO 989130A1；WO98/41496；WO94/20501；EPO 945453A1；EPO562615A1；EPO 562615B1；EP 0 550113A2；EP 0 943241B1；EP 0 988790B1中描述了所属领域中经取代的三唑并嘧啶的制备方法和在农业中用作杀真菌剂的用途，所述三唑并嘧啶具有以下通式：

国际公开案WO 02/02563中公开了三唑并嘧啶作为抗癌剂的用途。

本发明化合物为满足上文所述需要且与先前已知种类的抗微管化合物显著不同的新一类类紫杉烷剂。本发明化合物在β-微管蛋白的长春花部位结合，然而所述化合物具有许多类似于紫杉烷而不同于长春花部位剂的特性。特别地，本发明化合物在5′-三磷酸鸟苷(GTP)存在下以化合物与微管蛋白低摩尔比率以类似于太平洋紫杉醇和多西他赛的方式增强富含微管相关蛋白(MAP)的微管蛋白的聚合。本发明化合物也在不存在GTP时在适当的实验条件下诱发高纯微管蛋白的聚合，此活性是紫杉烷的标志。本发明化合物是许多培养中的人类癌细胞系(包括过表达膜转运体MDR(P糖蛋白)、MRP和MXR)的有效细胞毒素，因此使得它们对抵抗太平洋紫杉醇和长春新碱的细胞系具有活性。特别是，本发明的代表性实例具有高水溶性且可在盐水中进行调配。本发明的代表性实例是当静脉注射或口服给药时在携带肺癌和结肠癌、黑素瘤和恶性胶质瘤的人类肿瘤异种移植物的无胸腺小鼠中具有作为抗肿瘤剂的活性。

发明内容

根据本发明提供由式(I)表示的化合物：

其中：

R¹选自

和视情况经R⁸取代的C₆-C₈环烷基；

R²为以下基团的部分

n为整数2、3或4；

X为Cl或Br；

Y为O、S、CH₂或NR⁴；

Q选自-NR⁶R⁷和-OH；

L¹和L²各自独立地为H、F、Cl、Br或CF₃；

R³为CF₃或C₂F₅；

R⁴和R⁵各自独立地为H或C₁-C₃烷基；

R⁶和R⁷各自独立地为H或C₁-C₃烷基；或

R⁶和R⁷在视情况与其各自连接的氮原子相结合时形成具有1-2个氮原子和0-1个氧原子或0-1个硫原子，并视情况经R⁸取代的4至6元饱和杂环；

R⁸为C₁-C₃烷基；

或其医药学上可接受的盐。

定义

术语烷基表示1至3个碳原子的直链或分支链烷基部分。

用于本文中的术语t-BOC表示叔丁氧基羰基。

术语氨基烷氧基表示下式的部分

术语氨基烷基表示下式的部分

术语氨基烷硫基表示下式的部分

术语氨基烷氨基表示下式的部分

术语羟基烷氧基表示下式的部分

术语碱金属氢氧化物包括氢氧化锂、氢氧化钾或氢氧化钠。

术语碱金属碳酸盐包括碳酸锂、碳酸钾或碳酸钠。

术语碱金属氢化物包括氢化锂、氢化钾或氢化钠。

术语强碱表示碱金属氢氧化物、碱金属碳酸盐和碱金属氢化物(例如，氢化钠)。

本文中所用的苯基是指6元碳芳环。

本文中所用的环烷基意思是具有6至8个碳原子、视情况经C₁-C₃烷基取代的饱和碳环单环。非限制性代表性实例包括：环己基、环庚基和环辛基。

如本文中所用的饱和杂环为具有1-2个氮原子、0-1个氧原子或0-1个硫原子并视情况经C₁-C₃烷基取代的4至6元环原子。非限制性代表性实例包括：吗啉、哌啶、吡咯烷、哌嗪、吖丁啶和N-甲基-哌嗪。

本发明提供一种通过投与有效剂量的式(I)化合物和其医药学上可接受的盐来治疗或抑制需要治疗或抑制的哺乳动物中癌肿瘤细胞生长和相关疾病的方法。

本发明也提供一种通过促进微管聚合使微管蛋白与微管相互作用来治疗或抑制需要治疗或抑制的哺乳动物中癌肿瘤细胞生长和相关疾病的方法，所述方法包含向所述哺乳动物投与有效剂量的式(I)化合物和其医药学上可接受的盐。

进一步提供一种治疗或预防需要治疗或预防的哺乳动物中表现出多药耐药性(MDR)或因MDR而呈抗药性的肿瘤的方法，其包含向所述哺乳动物投与有效剂量的所述化合物或其医药学上可接受的盐。

本发明也提供一种通过使含微管蛋白系统与有效剂量的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐接触来促进所述含微管蛋白系统中微管蛋白聚合的方法。

此外，本发明还提供一种使含微管蛋白系统中的微管稳定的方法，其包含使所述含微管蛋白的系统与有效剂量的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐接触。

进一步提供一种治疗需要治疗的哺乳动物中肿瘤、抑制肿瘤生长或根除肿瘤的方法，其中所述肿瘤抵抗至少一种化学治疗剂，所述方法包含向所述哺乳动物提供有效剂量的式(I)化合物和其医药学上可接受的盐。

另一方面本发明提供与医药学上可接受的载剂组合或联合的式(I)化合物。特别地，本发明提供包含有效剂量的式(I)化合物和医药学上可接受的载剂的医药组合物。

本发明化合物可含有不对称碳原子且本发明的某些化合物可含有一个和一个以上不对称中心且可因此产生立体异构体，例如对映异构体和非对映异构体。本发明的立体异构体根据普雷洛格(Cahn-lngold-Prelog)系统命名。虽然式(I)中所示未考虑立体化学，但本发明包括所有个别可能的立体异构体；以及外消旋混合物和R和S立体异构体的其它混合物(scalemic混合物；不等量对映异构体的混合物)和其医药学上可接受的盐。本发明包括具有手性中心的通式(I)化合物的(R)和(S)异构体和其消旋体。本发明涵盖所述化合物的所有立体异构体而不管它们是独立于其它立体异构体还是以任何比例与其它立体异构体混和，并因此包括(例如)对映异构体的外消旋混合物和异构体的非对映异构体混合物。任一化合物的绝对构型可由常规的X射线结晶学测定。

光学异构体可由标准分离技术或对映异构体特定合成法以纯形式获得。

同样，本发明化合物的多晶型物、水合物和溶剂化物包括于本发明范围内。

本发明的优选实施例为如下式所示的式(Ia)化合物：

或其医药学上可接受的盐。

本发明的优选实施例为如下式所示的式(Ib)化合物：

或其医药学上可接受的盐。

另一优选为其中R²为以下结构的式(I)化合物：

或其医药学上可接受的盐。

同样优选为其中R¹为视情况经R⁸取代的C₆-C₈环烷基的式(I)化合物，或其医药学上可接受的盐。

根据式(Ia)的本发明化合物(包括其医药学上可接受的盐)的更优选基团选自亚基a)和b)：

a)

R²为：

n为3；

X为Cl或Br；

Y为O；

R³为CF₃；

Q为-NR⁶R⁷；

R⁵为H或甲基；

R⁶和R⁷各自独立地为H或C₁-C₃烷基；或

R⁸为C₁-C₃烷基；

L¹为F；

L²为H或F；

或其医药学上可接受的盐，和

b)

R²为：

n为3；

X为Cl；

Y为O；

Q为-NR⁶R⁷；

R⁶为甲基；

R⁷为H或甲基；

L¹为F；

L²为F；

或其医药学上可接受的盐。

根据式(I)的本发明化合物(包括其医药学上可接受的盐)的更优选基团是以下亚基：

R¹为C₆-C₈环烷基；

R²为

n为3；

X为Cl；

Y为O；

Q为-NR⁶R⁷；

R⁶为甲基；

R⁷为H或甲基；

L¹为F；

L²为F；

或其医药学上可接受的盐。

根据式(Ia)的本发明化合物(包括其医药学上可接受的盐)的最优选基团是以下基团：

R²为

X为Cl；

n为3；

Y为O；

Q为-NR⁶R⁷；

R³为CF₃，

R⁵为H或甲基，

R⁶为甲基；

R⁷为H或甲基；

L¹为F；

L²为F；

或其医药学上可接受的盐。

根据式(Ib)的本发明化合物(包括其医药学上可接受的盐)的最优选基团是以下基团：

R²为

X为Cl；

n为3；

Y为O；

Q为-NR⁶R⁷；

R³为CF₃，

R⁵为H或甲基，

R⁶为甲基；

R⁷为H或甲基；

L¹为F；

L²为F；

或其医药学上可接受的盐。

根据式(I)本发明的特定优选化合物为下列化合物或其医药学上可接受的盐：

5-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-(2，2，2-三氟乙基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-(2，2，2-三氟乙基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

6-[4-(3-氨基丙氧基)-2，6-二氟苯基]-5-氯-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙氧基]苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{4-[3-(乙氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-(4-{3-[乙基(甲基)氨基]丙氧基}-2，6-二氟苯基)-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-[2，6-二氟-4-(3-吡咯烷-1-基丙氧基)苯基]-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-[2，6-二氟-4-(3-哌啶-1-基丙氧基)苯基]-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-[2，6-二氟-4-(3-吗啉-4-基丙氧基)苯基]-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

6-[4-(3-吖丁啶-1-基丙氧基)-2，6-二氟苯基]-5-氯-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2-氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{2，6-二氟-4-[2-(甲氨基)乙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{4-[4-(二甲氨基)丁氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{4-[2-(二甲氨基)乙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-[2，6-二氟-4-(2-吗啉-4-基乙氧基)苯基]-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-(4-{[3-(二甲氨基)丙基]硫基}-2，6-二氟苯基)-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

2-[4-(5-氯-7-{[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]乙醇、

3-[4-(5-氯-7-{[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丙-1-醇、

4-[4-(5-氯-7-{[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丁-1-醇、

N¹-[4-(5-氯-7-{[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯基]-N¹，N³，N³-三甲基丙-1，3-二胺、

N¹-[4-(5-氯-7-{[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯基]-N³，N³-二甲基丙-1，3-二胺、

N¹-[4-(5-氯-7-{[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯基]-N²，N³-二甲基乙-1，2-二胺、

5-溴-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{4-[4-(二甲氨基)丁基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{3-[2-(二甲氨基)乙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{3-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{3-[4-(二甲氨基)丁氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

3-[4-(5-氯-7-环庚基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丙-1-醇、

3-[4-(5-氯-7-环庚基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]-N，N-二甲基丙-1-胺、

3-[4-(5-氯-7-环庚基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]-N-甲基丙-1-胺、

5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，和

5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-(2，2，2-三氟-1-甲基乙基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺。

根据式(Ib)本发明的特定优选化合物为选自以下群组的化合物或其医药学上可接受的盐：

5-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

6-[4-(3-氨基丙氧基)-2，6-二氟苯基]-5-氯-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{4-[3-(乙氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-(4-{3-[乙基(甲基)氨基]丙氧基}-2，6-二氟苯基)-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-[2，6-二氟-4-(3-吡咯烷-1-基丙氧基)苯基]-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-[2，6-二氟-4-(3-哌啶-1-基丙氧基)苯基]-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-[2，6-二氟-4-(3-吗啉-4-基丙氧基)苯基]-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

6-[4-(3-吖丁啶-1-基丙氧基)-2，6-二氟苯基]-5-氯-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2-氟苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{2，6-二氟-4-[2-(甲氨基)乙氧基]苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{4-[4-(二甲氨基)丁氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{4-[2-(二甲氨基)乙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-[2，6-二氟-4-(2-吗啉-4-基乙氧基)苯基]-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-(4-{[3-(二甲氨基)丙基]硫基}-2，6-二氟苯基)-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

2-[4-(5-氯-7-{[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]乙醇、

3-[4-(5-氯-7-{[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丙-1-醇、

4-[4-(5-氯-7-{[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丁-1-醇、

N¹-[4-(5-氯-7-{[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯基]-N¹，N³，N³-三甲基丙-1，3-二胺、

N¹-[4-(5-氯-7-{[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯基]-N³，N³-二甲基丙-1，3-二胺、

N¹-[4-(5-氯-7-{[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯基]-N²，N²-二甲基乙-1，2-二胺、

5-溴-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基]-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{4-[4-(二甲氨基)丁基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{3-[2-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{3-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{3-[4-(二甲氨基)丁氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，和

5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺。

根据式(Ia)本发明的特定优选化合物为下列化合物或其医药学上可接受的盐：

5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

6-[4-(3-吖丁啶-1-基丙氧基)-2，6-二氟苯基]-5-氯-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1-a]嘧啶-7-胺、

N¹-[4-(5-氯-7-{[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯基]-N²，N²-二甲基乙-1，2-二胺、

5-氯-6-{3-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，和

5-氯-6-{3-[4-(二甲氨基)丁氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺。

根据式(Ia)本发明的最特定优选化合物为下列化合物或其医药学上可接受的盐：

5-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，和

5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺。

根据式(Ib)本发明的特定优选化合物为下述化合物或其医药学上可接受的盐：

本发明的更特定优选化合物包括：

5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺盐酸盐、

5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺琥珀酸盐、

5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺反丁烯二酸盐、

5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺二水合琥珀酸盐，和

5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺二水合反丁烯二酸盐。

本发明的最特定优选化合物为：

5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺琥珀酸盐，和

5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺二水合琥珀酸盐。

根据式(I)本发明的其它优选化合物为下列化合物或其医药学上可接受的盐：

5-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-(2，2，2-三氟-1-甲基乙基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-(2，2，2-三氟-1-甲基乙基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

6-[4-(3-氨基丙氧基)-2，6-二氟苯基]-5-氯-N-[2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙氧基]苯基}-N-[2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{4-[3-(乙氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-(2，2，2-三氟-1-甲基乙基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-(4-{3-[乙基(甲基)氨基]丙氧基}-2，6-二氟苯基)-N-[2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-[2，6-二氟-4-(3-吡咯烷-1-基丙氧基)苯基]-N-[2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-[2，6-二氟-4-(3-哌啶-1-基丙氧基)苯基]-N-[2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-[2，6-二氟-4-(3-吗啉-4-基丙氧基)苯基]-N-[2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

6-[4-(3-吖丁啶-1-基丙氧基)-2，6-二氟苯基]-5-氯-N-[2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2-氟苯基}-N-(2，2，2-三氟-1-甲基乙基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{2，6-二氟-4-[2-(甲氨基)乙氧基]苯基}-N-(2，2，2-三氟-1-甲基乙基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{4-[4-(二甲氨基)丁氧基]-2，6-二氟苯基}-N-(2，2，2-三氟-1-甲基乙基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{4-[2-(二甲氨基)乙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-(2，2，2-三氟-1-甲基乙基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-[2，6-二氟-4-(2-吗啉-4-基乙氧基)苯基]-N-[2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-(4-{[3-(二甲氨基)丙基]硫基}-2，6-二氟苯基)-N-(2，2，2-三氟-1-甲基乙基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

2-[4-(5-氯-7-{[2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]乙醇、

3-[4-(5-氯-7-{[2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丙-1-醇、

4-[4-(5-氯-7-{[2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丁-1-醇、

N¹-[4-(5-氯-7-{[2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯基]-N¹，N³，N³-三甲基丙-1，3-二胺、

N¹-[4-(5-氯-7-{[2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯基]-N³，N³-二甲基丙-1，3-二胺、

N¹-[4-(5-氯-7-{[2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯基]-N²，N²-二甲基乙-1，2-二胺、

5-溴-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-(2，2，2-三氟-1-甲基乙基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{4-[4-(二甲氨基)丁基]-2，6-二氟苯基}-N-(2，2，2-三氟-1-甲基乙基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{3-[2-(二甲氨基)乙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-(2，2，2-三氟-1-甲基乙基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{3-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-(2，2，2-三氟-1-甲基乙基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，和

5-氯-6-{3-[4-(二甲氨基)丁氧基]-2，6-二氟苯基}-N-(2，2，2-三氟-1-甲基乙基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺。

具体实施方式

本发明化合物可自(a)市售起始物质；(b)可如文献程序中所描述而制备的已知起始物质或(c)本文中的流程图和实验程序中描述的新颖中间体而制备。

反应在适合于所用试剂和物质并且适合于所要实现的转化的溶剂中进行。有机合成领域的技术人员应了解，存在于分子上的各种官能团必须与提出的化学转化一致。这使得必须判断合成步骤级数的次序。必要时需保护反应性官能团，以防止发生不良副反应。起始物质上的取代基可能与某些反应条件不相容。所属领域的技术人员将明显可见与反应条件相容的取代基的所述限制。反应在适当的惰性气氛下进行。

由式(I)涵盖的本发明化合物，其中Y为O、S或NR⁴且R¹为

可由流程图1中所示的方法制备，所述方法包含在包括碱金属氢氧化物、碱金属碳酸盐和碱金属氢化物的强碱(例如，氢化钠)存在下在有或没有溶剂条件下，用式HY-(CH₂)_nQ化合物(其中Q和Y如上文所定义)处理式(II)化合物(US5,948,783、US5,986,135、US6,117,876和US6,297,251)，其中R¹、R²、R³、R⁵、L¹、L²和X如上文所定义，且L³表示离去基团，离去基团为可移除的基团，特别是氟原子。合适的溶剂包括非质子性溶剂，例如二甲亚砜、二甲基甲酰胺和其类似物。反应适当地在约0℃至约100℃的温度下进行。

流程图I

base碱

式(I)化合物，其中R¹为

Y为CH₂，可有下述流程图II中描述的方法制备，其中R¹、R²、R³、R⁵、R⁶、R⁷、L¹、L²、X和n如上文所定义。

流程图II

如流程图II中所描述，在高达190℃的温度下在例如三丁胺的叔胺碱存在下用2-氨基-1，3，4-三唑(IV)处理二酯(III)提供化合物(V)。以卤化剂POX₃、PX₃或PX₅(例如磷酰氯或磷酰溴)卤化化合物(V)产生5，7-二卤代化合物(VI)，其中X如上文所定义。在合适的非质子性溶剂(例如二甲亚砜或二甲基甲酰胺)中在碱(例如，N，N-二异丙基乙胺)存在下以胺(VII)替换5，7-二卤代化合物(VI)的5-溴或5-氯，提供式(I)化合物。

二酯(III)可由钯催化方法制备，其中三氟甲磺酸酯(XI)与氨基烷基硼酸(XII)偶合。三氟甲磺酸酯(XI)可通过使溴化物(VIII)与丙二酸二乙酯(US5,981,534)偶合以提供二酯(IX)，接着在三溴化硼存在下进行脱甲基化以产生酚(X)来制备。酚(X)与三氟甲磺酸酐的进一步反应提供如流程图III中所示的三氟甲磺酸酯(XI)。

流程图III

式(I)化合物，其中R¹为C₆-C₈环烷基，Y为O、S或NR⁴，且Q为OH，可由下述流程图IV和流程图V中描述的方法制备，其中L¹、L²、L³、X和n如上文所定义。在二异丙基胺基锂(LDA)存在下酯(XIII)与由相应羧酸制备的酰基氯(XIV)(其中R¹为C₆-C₈环烷基)反应产生酮酯(XV)。在高达190℃的温度下在例如三丁胺的叔胺碱存在下酮酯(XV)与2-氨基-1，3，4-三唑(IV)进一步反应提供嘧啶-5-醇(XVI)。

流程图IV

如流程图V中所示，在包括碱金属氢氧化物、碱金属碳酸盐和碱金属氢化物的强碱(例如，氢化钠)存在下在包括二甲亚砜、二甲基甲酰胺和类似物的非质子性溶剂中使嘧啶-5-醇(XVI)与化合物(XVII)反应以产生醚(XVIII)。在N，N-二乙基苯胺存在下醚(XVIII)与卤化剂POX₃、PX₃或PX₅(例如磷酰氯或磷酰溴)反应提供化合物(XIX)，其中X如上文所定义，化合物(XIX)进一步与2，3-二氯-5，6-二氰基-1，4-苯醌(DDQ)反应提供醇(XX)，其中R¹为C₆-C₈环烷基。

流程图V

参考流程图VI，在包括碱金属氢氧化物、碱金属碳酸盐和碱金属氢化物的强碱(例如，氢化钠)存在下在包括二甲亚砜、二甲基甲酰胺和类似物的非质子性溶剂中使嘧啶-5-醇(XVI)(其中R¹为C₆-C₈环烷基)与化合物(XXI)(其中Y为O、S或-NR⁴，且R⁶和R⁷不为H)反应以产生胺(XXII)。在N，N-二乙基苯胺存在下胺(XXII)与卤化剂POX₃、PX₃或PX₅(例如磷酰氯或磷酰溴)反应提供化合物(XXIII)，其中X如上文所定义，R¹为C₆-C₈环烷基，且R⁶和R⁷不为H。

流程图VI

如流程图VII中所示，在包括碱金属氢氧化物、碱金属碳酸盐和碱金属氢化物的强碱(例如，氢化钠)存在下在包括二甲亚砜、二甲基甲酰胺和类似物的非质子性溶剂中使嘧啶-5-醇(XVI)(其中R¹为C₆-C₈环烷基)与氨基化合物(XXIV)(其中Y为O、S或-NR⁴，且R⁷为H)反应以产生胺(XXV)。胺(XXV)与二碳酸二叔丁酯反应提供叔丁氧基羰基(t-BOC)阻断胺(XXVI)。在N，N-二乙基苯胺存在下(t-BOC)阻断胺(XXVI)与卤化剂POX₃、PX₃或PX₅(例如磷酰氯或磷酰溴)反应提供化合物(XXVII)，其中X如上文所定义。接着以三氟乙酸(TFA)使化合物(XXVII)去阻断以提供胺(XXVIII)。

流程图VII

应了解本发明涵盖式(I)化合物的所有结晶和水合形式和其医药学上可接受的盐。本发明化合物的医药学上可接受的盐是那些自形成医药学上可接受的盐的有机和无机酸衍生的盐，所述酸如：乳酸、柠檬酸、乙酸、酒石酸、反丁烯二酸、琥珀酸、顺丁烯二酸、丙二酸、盐酸、氢溴酸、磷酸、硝酸、硫酸、甲磺酸、苯磺酸、L-天冬氨酸、R或S-扁桃酸、棕榈酸和类似的已知可接受的酸。另一种盐为三氟乙酸盐(TFA)。特别地优选盐酸、反丁烯二酸和琥珀酸盐。

作为形成医药学上可接受的盐的代表性实例，用含水碱金属氢氧化物或含水碱金属碳酸盐中和5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺的盐酸盐，并在适当溶剂中使其与上文描述的合适的形成医药学上可接受的盐的酸进一步反应。可使用的适当溶剂包括：水、甲醇、乙醇、异丙醇或其组合和其类似物。优选溶剂为水。

优选地，医药学上可接受的盐可通过在约30-100℃下，优选地在约65-75℃下在适当溶剂中加热式(I)化合物直到形成澄清溶液。冷却之后可收集并干燥化合物。

使用上文描述的条件，制备5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺琥珀酸盐和5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺反丁烯二酸盐。特别地二水合物可通过在室温下使所述盐与约80-100％相对湿度的水气氛进一步接触而形成。

相应地，本发明提供包含与医药学上可接受的载剂组合或缔合的本发明化合物的医药组合物。特别地，本发明提供包含有效剂量的本发明化合物和医药学上可接受的载剂的医药组合物。

基于本文中描述的标准药理学试验程序的结果，本发明化合物适合用作治疗、抑制或控制哺乳动物中需要治疗、抑制或控制的癌肿瘤细胞生长和相关疾病的药剂。本发明化合物适合用作通过使微管蛋白与微管相互作用并促进微管聚合来治疗、抑制或控制哺乳动物中需要治疗、抑制或控制的癌肿瘤细胞生长和相关疾病的药剂。本发明化合物还适合用作治疗或预防表现出多药耐药性(MDR)或因MDR而呈抗药性的癌肿瘤的药剂。

特别地，当使含微管蛋白的系统与有效剂量的式(I)化合物接触导致促进微管聚合且进一步使微管稳定时，并且通过促进微管聚合和使微管稳定，所述式(I)化合物适合用作治疗、抑制或控制癌肿瘤细胞生长和相关疾病的药剂。含微管蛋白的系统可存在於肿瘤细胞中，从而通过投与有效剂量的本发明中描述的化合物来抑制肿瘤疾病。可治疗哺乳动物，特别是人类。另外，所述含微管蛋白的系统可存在於患者中。在癌症治疗的情况下，据信许多肿瘤疾病，例如白血病、肺癌、结肠癌、甲状腺癌、卵巢癌、肾癌、前列腺和乳癌，均可通过有效地投与有效剂量的式(I)化合物来治疗。而且，式(I)化合物适合用作治疗或预防表现出多药耐药性(MDR)或因MDR而呈抗药性的癌肿瘤的药剂。如本文中所用，癌症是指所有类型的癌症或瘤或良性或恶性肿瘤。

使用本文中提供的方法治疗的优选癌症包括癌瘤、肉瘤、淋巴瘤或白血病。癌瘤是指良性或恶性上皮肿瘤且包括(但不限于)乳癌、前列腺癌、非小肺癌、结肠癌、黑素瘤癌、卵巢癌或肾癌。优选宿主为人类。

所用活性成份的有效剂量可依据所用的特定化合物、给药模式和正在治疗的病状的严重性而改变。然而，当以每日约0.10至约100毫克/千克体重的量投与本发明化合物时通常获得满意的结果。最优结果的优选方案可能是每日约1毫克至约20毫克/千克体重，采用所述剂量单位，从而在24小时内向体重约70kg的受检者投与总计约70mg至约1400mg的活性化合物。

可调节治疗哺乳动物的剂量方案以提供最优治疗反应。举例而言，可每日给药若干分剂量或可随治疗病症的紧急状态指示而按比例减少剂量。明显的实际益处在于，这些活性化合物可以例如通过口服、静脉内、肌肉内或皮下途径的任一常规方式给药。

本发明的活性化合物可优选地经口给药，例如，以惰性稀释剂或以可吸收的可食用载剂经口给药，或者可将所述活性化合物封装在硬壳或软壳明胶胶囊中，或者可将它们压缩成片剂，或者可直接与饮食食品合并。就口服治疗给药而言，这些活性化合物可与赋形剂合并且以可摄取的片剂、含片、口含锭、胶囊、酏剂、悬浮液、糖浆、糯米纸囊剂(wafer)和类似物的形式使用。所述组合物和制剂应含有至少0.1％的活性化合物。组合物和制剂的百分比当然可改变且可方便地介于单位重量的约2％至约60％之间。在所述治疗有用的组合物中活性化合物的量是将会获得适当剂量的量。根据本发明制备优选组合物或制剂，以便口服单位剂型含有介于10与1000mg之间的活性化合物。

片剂、口含锭、药丸、胶囊和类似物还含有下列物质：粘合剂，例如黄耆胶、阿拉伯胶、玉米淀粉或明胶；赋形剂，例如磷酸二钙；崩解剂，例如玉米淀粉、马铃薯淀粉、褐藻酸和类似物；润滑剂，例如硬脂酸镁；和甜味剂，例如蔗糖、乳糖或可添加的糖精；或调味剂，例如薄荷、冬青油或樱桃香料。当单位剂型为胶囊时，除上述类型的物质外还可含有液体载剂。各种其它物质可作为涂层存在或用于修饰剂量单位的物理形式。举例而言，片剂、药丸或胶囊可用虫胶、糖或二者涂覆。糖浆或酏剂可含有活性化合物、作为调味剂的蔗糖、作为防腐剂的对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯、染料和例如樱桃或橘子香料的调味剂。当然，用于制备任何剂量单位形式的物质应当是医药学上纯的并且所用的量几乎完全无毒。此外，这些化合物可合并至缓释制剂和配方中。

这些活性化合物也可经肠道外或经腹膜内给药。作为游离碱或药理学上可接受的盐的这些活性化合物的溶液或悬浮液可在合适地与例如羟丙基纤维素的表面活性剂混合的水中制备。分散液也可在甘油、液体聚乙二醇和其于油中的混合物中制备。在普通的储存和使用条件下，这些制剂含有防止微生物生长的防腐剂。

适合注射使用的医药形式包括无菌水溶液或分散液和用于临时制备无菌可注射溶液或悬浮液的无菌粉剂。在所有情况下，所述形式必须是无菌的而且必须为流体以达到易于注射的程度。所述形式在制造和储存条件下必须稳定而且必须抵抗例如细菌和真菌的微生物的污染作用。载剂可以是含有(例如)水、乙醇、多元醇(例如，甘油、丙二醇和液体聚乙二醇)、其合适的混合物和植物油的溶剂或分散液介质。

静脉内给药是本发明化合物的优选给药方式。就静脉内给药而言，非限制性合适载剂的实例包括生理盐水、抑菌注射用水、Cremophor ELTM(BASF，Parsippany，N.J.)或磷酸盐缓冲盐水(PBS)。所述组合物必须是无菌的并且应当为流体以达到易于注射的程度。在制造和储存条件下其应当稳定并且必须抵抗例如细菌或真菌的微生物的污染作用。载剂可以是含有(例如)水、乙醇、多元醇(例如，甘油、丙二醇，和液体聚乙二醇，和类似物)，和其合适的混合物的溶剂或分散液介质。微生物作用的预防可通过各种抗细菌剂和抗真菌剂来达成，例如对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、抗坏血酸、硫柳汞和类似物。在许多情况下，优选在所述组合物中包括等渗剂，例如糖、多元醇(例如甘露醇、山梨糖醇)、氯化钠。可注射组合物的长效吸收可通过在组合物中包括延缓吸收的药剂(例如，单硬脂酸铝和明胶)来达成。

如根据本发明所用的术语“提供有效剂量的化合物”意思是直接投与所述化合物，或投与将在体内形成有效剂量的化合物的前药、衍生物或类似物。

除上述效用之外，本发明的一些化合物还适用于制备本发明的其它化合物。

用几个标准药理学试验程序评估本发明的实例，结果表明，本发明化合物具有作为微管聚合作用的促进剂的显著活性并且是抗肿瘤剂。基于在标准药理学试验程序中展示出的活性，本发明化合物因而适合用作抗癌剂。相关癌症选自由下列各癌症组成的群组：乳癌、结肠癌、肺癌、前列腺癌、黑素瘤、表皮癌、白血病、肾癌、膀胱癌、口癌、喉癌、食道癌、胃癌、卵巢癌、胰腺癌、肝癌、皮肤癌和脑癌。特别地，本发明化合物具有类似于太平洋紫杉醇的作用。所用的试验程序和获得的结果展示于下。

标准药理学试验程序

材料和方法

1.细胞培养基和试剂

培养基为具有L-谷氨酰胺的RPMI-1640，含10％的热灭活胎牛血清、100单位/毫升的盘尼西林和100μg/ml链霉素(Gibco，Grand Island，NY)。均来自牛脑的富含微管相关蛋白(MAP)的微管蛋白(含有约70％微管蛋白和30％MAP(#ML113))和高纯微管蛋白(大于99％，#TL238)得自Cytoskeleton，Inc.，Denver，CO。PEM缓冲液(80mM哌嗪-N，N′-双[2-乙磺酸]，pH值为6.9、1mM乙二醇-双(β-氨基乙基醚)-N，N，N′，N′-四乙酸、1mM氯化镁)和5′-三磷酸鸟苷(GTP)也是得自Cytoskeleton。[³H]太平洋紫杉醇(比活性14.7Ci/mmol)购自Moravek Biochemicals(Brea，CA)。[³H]长春碱(比活性9.60Ci/mmol)和MicroSpin G-50色谱柱得自Amersham Biosciences(Piscataway，NJ)。[³H]秋水仙碱(比活性76.5Ci/mmol)得自New England Nuclear(Boston，MA)。其它试剂自Sigma(St.Louis，MO)获得。

2.细胞系

除非另外指出，否则人类癌细胞系是自美国典型培养物保藏中心(American TypeCulture Collection)(Rockville，MD)获得。下列药物敏感母细胞系和其抗药性对应物是由所列出的来源获得：(a)S1(来自人类结肠癌细胞系LS174T的亚克隆的母细胞系)和表达MXR药物转运体蛋白的衍生S1-M1-3.2(本文中称为S1-M1)是由Dr.L.Greenberger，Wyeth Research(Rabindran，S.K.，He，H.，Singh，M.，Brown，E.，Collins，K.I.，Annable，T.和Greenberger，L.M.Reversal of a novel multidrug resistance mechanism inhuman colon carcinoma cells by fumitremorgin C.Cancer Res.，58：5850-5858，1998)提供；(b)亲代HL-60人类前髓细胞性白血病细胞系和表达MRP1药物转运体蛋白的衍生HL-60/ADR是由Dr.M.Center，University of Kansas(McGrath，T.和Center，M.S.Adriamycin resistance in HL60 cells in the absence of detectable P-glycoprotein.Biochem.Biophys.Res.Commun.，145：1171-1176，1987)经Dr.L.Greenberger，Wyeth Research提供；和(c)亲代KB-3-1(本文中称为KB，自人类表皮样癌克隆而得)和分别表达中度的和极高含量的MDR1(P糖蛋白)药物转运体蛋白的衍生细胞系KB-8-5和KB-V1是由Dr.M.Gottesman，National Cancer Institute(Shen，D.W.，Cardarelli，C，Hwang，J.，Cornwell，M.，Richert，N.，Ishii，S.，Pastan，I.，和Gottesman，M.M.Multiple drug-resistanthuman KB carcinoma cells independently selected for high-level resistance to colchicine，adriamycin，or vinblastine show changes in expression of specific proteins.J.Biol.Chem.，261：7762-7770，1986)经Dr.L Greenberger，Wyeth Research提供。

3.细胞毒性标准药理学试验程序

由Promega(Madison，Wl；CellTiter 96 AQueous Non-Radioactive Cell ProliferationAssay)以试剂盒的形式出售的检测法是基于通过活细胞(而非死细胞)使四唑盐MTS(3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺基苯基)-2H-四唑内盐)转化为由分光光度测定法检测到的水溶性有色甲[月替](formazan)。为测定IC₅₀值，在9个浓度下对化合物进行试验。就试验程序而言，通过胰蛋白酶消化作用(或在非粘附性细胞的情况下，通过简单的再悬浮)收获细胞，洗涤，计数，并在200μL培养基中以1000个细胞/孔分配至96孔平底微量滴定板的孔中。此外，在单独板上的一行孔中如上所述接收细胞(“0时间(time0)”板)。使所有板在37℃下在潮湿的5％CO₂/空气中培养约24hr。

第二天，将用于试验的化合物稀释并添加至孔中。使化合物以10mg/mL溶解于DMSO中。对于每一种化合物，在DMSO中制备9个连续2倍稀释物。将DMSO中的稀释物各10μL转移至100μL的培养基中，充分混和，并接着将5μL的所述稀释物一式四份地转移至含有细胞的孔中。每一种化合物的最终高浓度通常为5μM。将板放回到恒温箱中三天。在向实验板中添加药物的时候，在“0时间”板上进行MTS检测。所述检测得出“0时间MTS值”，此值与添加药物时每孔的活细胞的数目相关。

在受试化合物培养3天之后(总第五天)，在实验板的所有孔上进行MTS检测。求四份样品孔的吸收值的平均值并除以“0时间”值。没有药物的对照孔的平均值除以“0时间”值得出因最后三天培养期间细胞生长引起的MTS得色量的最大相对增加。具有高药物浓度的对照孔的平均值除以“0时间”值得出被完全杀死的细胞的最小相对得色量。对照浓度对每一种化合物的9个值进行绘图，并将得出最大值与最小值之间相对得色量一半的浓度作为IC₅₀值。最有效的化合物具有最低的IC₅₀值。

4.微管蛋白聚合标准药理学测试程序

对所述程序进行两种变化，一种使用富含MAP的微管蛋白而一种使用纯微管蛋白。

将富含MAP的微管蛋白以1.3mg/mL的浓度溶解于含1mM GTP的冰冷PEM缓冲液(GPEM缓冲液)中。在使用之前，立即在4℃下将溶液以最高速度在Eppendorf型号5415C的微型离心机(Brinkmann Instruments，Westbury，NY)中离心10分钟。将微管蛋白溶液添加至已含有所关注化合物的1/2面积96孔板(Costar No.3696，Corning，Inc.，Corning，NY)的孔中。以0.3μM的最终浓度、110μL/孔的体积将每一种化合物一式两份进行试验。所有孔中的最终DMSO浓度为0.3％。一式四份地进行仅接收化合物溶剂的对照反应。将板放置在24℃恒温的SpectraMax Plus平板读取器(Molecular DevicesCorp.Sunnyvale，CA)中，并且每分钟测定340nm下每一孔的吸光率(吸光率是因微管蛋白聚合物形成而导致的浊度外观的量度)，共持续60分钟。将0时间时每一孔的吸光率从所述孔的每一随后吸光率读取值中减去，然后求两份结果的平均值。

纯微管蛋白的程序与此程序相似，但不同之处在于：以1.5至1.8mg/mL(15至18μM)浓度将纯微管蛋白溶解于含10％甘油的冷PEM缓冲液中并且不添加GTP；将离心之后的上清液分配至已含有化合物的96孔板中；以开始於24.3μM的6个连续3倍稀释物一式两份地试验每一种化合物；使平板读取器恒温于35℃。

5.竞争性结合的标准药理学试验程序

本发明实例对高纯微管蛋白的结合由竞争性抑制方法进行研究。αβ-微管蛋白杂二聚体含有对于三种主要类型的微管活性药剂的结合部位：紫杉烷、长春花/肽部位剂和秋水仙碱部位剂。由于长春碱和秋水仙碱优选地结合至未聚合的杂二聚体，因此为研究长春花/肽和秋水仙碱部位可能的竞争，在不利于聚合的条件下进行培育。另一方面，由于太平洋紫杉醇优选地结合至微管，因此为研究紫杉烷部位可能的竞争，使用聚合的微管蛋白(微管)。

将高纯微管蛋白溶解在含GTP的PEM缓冲液中并且在1.0至1.3mg/mL(15至13μM)的最终浓度下使用它。向微管蛋白溶液中添加高达最高浓度100μM的各种浓度的本发明实例，和分别为100nM或50nM最终浓度的[³H]长春碱或[³H]秋水仙碱。在24℃下培养所述溶液1hr并接着施加到MicroSpin G-50色谱柱进而在Eppendorf 5415C台式微量离心机中以3000rpm离心2min。使各色谱柱流出液(含微管蛋白和已结合的放射性配体)的等分试样与发光流体混合并在液体闪烁分光仪中计数。对照组包括没有竞争者的样品，和具有未标记的长春新碱、秋水仙碱或太平洋紫杉醇的样品。竞争者抑制放射性配体结合的能力表示为没有任何竞争者存在时对照组结合的百分比。

就与[³H]太平洋紫杉醇的竞争而言，将高纯微管蛋白溶解在含0.75M谷氨酸和25μM双脱氧GTP的PEM缓冲液中；最终蛋白质浓度为0.25至0.35mg/mL(2.5至3.5μM)。这些条件促进短的、稳定的微管聚合物的快速形成(Hamel，E.，del Campo，A.A.和Lin，CM.Stability of tubulin polymers formed with dideoxyguanosine nucleotides in the presenceand absence of microtubule-associated proteins.J.Biol.Chem.，259：2501-2508，1984)。在37℃下培养所述溶液30min，使得形成微管。接着将[³H]太平洋紫杉醇(最终浓度为2.1μM，1.2Ci/mmol)和竞争者(最终浓度为20μM，除未标记的太平洋紫杉醇为5μM外)添加至聚合微管蛋白溶液的等分试样中并在37℃下继续培养30min。对照组包括没有竞争者的样品，和具有未标记的长春新碱、秋水仙碱或太平洋紫杉醇的样品。为使微管蛋白质形成小球，接着在室温下将反应物以最高速度在Eppendorf模型5415C微型离心机中离心20min。将每种上清液的三等分试样与发光流体混合并在液体闪烁分光仪中计数。自上清液中放射性的量和经测量的总起始放射性计算结合至球状微管蛋白质的[³H]太平洋紫杉醇的量。每种竞争者抑制放射性配体结合至球状蛋白质的能力表示为没有任何竞争者存在时的对照组的百分比。

6.细胞周期分析标准药理学试验程序

通过胰蛋白酶消化作用收获海拉细胞(Hela cell)，洗涤，计数，并在2mL培养基中以125,000个细胞/孔分配至12孔板的孔中。将细胞隔夜培养。在DMSO中制备化合物稀释物并将10μL等分试样添加至每一孔中以产生所要的最终浓度。在添加化合物之后将细胞继续培养18hr，接着收获每一孔中的细胞(务必回收粘附性细胞和非粘附性细胞)并使用CycleTEST PLUS试剂盒(Becton Dickinson Immunocytometry Systems，SanJose，CA)处理所述细胞。流式细胞分析用FACSort仪器(Becton Dickinson)进行。

7.携带人类肿瘤异种移植物的无胸腺小鼠中抗癌活性标准药理学试验程序

在无胸腺小鼠异种移植物标准药理学试验中进行本发明化合物抑制动物中肿瘤生长的能力的研究。远交系白化基因背景中的雌性nu/nu小鼠是自Charles River实验室(Wilmington，MA)获得。以所要的肿瘤细胞悬浮液在肋腹上对动物进行皮下注射。数天后，从那些经注射的小鼠中选出患有大约150mm³肿瘤的小鼠(分期的(staged))并随机地分组，每组5-10只。分期(staging)当天称为第0天。如表中指出，按第0或1天开始的不同日程表通过静脉内注射或口服管饲法(oral gavage)向动物投与通常在盐水(例外在表中指出)中调配的本发明化合物。按相同日程表给每一实验中的对照群组投与媒剂。每3-7天以两个正交维数用测径器测量肿瘤尺寸，并由公式体积＝[(长度×宽度²)/2]来计算肿瘤体积。

肿瘤/对照组(T/C)是通过在每一测量日用治疗组的平均肿瘤体积除以对照组的平均肿瘤体积而获得。若治疗剂量产生0.50或更少统计学显著的T/C，则将其定义为有效的。要求由单侧student’s t-test测定的p值(小于等于0.05)为统计学显著的。若大于10％的动物死于化合物相关的毒性，则治疗剂量定义为有毒的。

结果

1.细胞毒性标准药理学试验程序

1.1.用COLO 205细胞

COLO 205是用于本发明实例和若干参照化合物的比较试验的人类结肠癌细胞系。所述细胞系对太平洋紫杉醇和长春新碱敏感。如表1中所示，(例如)实例32的IC50值为6.6nM。

表1

在用COLO 205细胞¹进行的MTS细胞毒性标准药理学试验程序中本发明的代表性实例和参照化合物的活性

实例或参照化合物	盐盐	IC<sub>50</sub>(nM)	标准偏差	n
实例或参照化合物	盐盐	IC<sub>50</sub>(nM)	标准偏差	n	1		41	13	8
1a	盐酸盐	56	9	11	1		41	13	8
1a	盐酸盐	56	9	11	2		32	10	23
2a	盐酸盐	31	10	11	2		32	10	23
2a	盐酸盐	31	10	11	2c	琥珀酸盐	38	-	1
3		25	9	7	2c	琥珀酸盐	38	-	1
3		25	9	7	3a	盐酸盐	29	7	3
4a	盐酸盐	53	16	10	3a	盐酸盐	29	7	3
4a	盐酸盐	53	16	10	5		452	71	3
6		155	17	3	5		452	71	3
6		155	17	3	7		29	17	3
8		48	6	2	7		29	17	3
8		48	6	2	9		44	13	3
10		113	12	2	9		44	13	3
10		113	12	2	11		89	34	3
11a	盐酸盐	51	30	3	11		89	34	3
11a	盐酸盐	51	30	3	12		326	116	3
13		262	18	2	12		326	116	3
13		262	18	2	14		881	186	2
15		276	53	2	14		881	186	2
15		276	53	2	16		581	157	2
17		245	118	4	16		581	157	2
17		245	118	4	18		192	72	3
19		422	175	2	18		192	72	3
19		422	175	2	20		67	12	5
21		151	19	3	20		67	12	5
21		151	19	3	22		1671	34	2
23		719	185	2	22		1671	34	2
23		719	185	2	24		1728	138	2
25		96	21	6	24		1728	138	2
25		96	21	6	26		665	103	2
27		1568	81	2	26		665	103	2
27		1568	81	2	28		785	64	2
29		433	74	2	28		785	64	2

实例或参照化合物	盐盐	IC<sub>50</sub>(nM)	标准偏差	n
实例或参照化合物	盐盐	IC<sub>50</sub>(nM)	标准偏差	n	30		30	5	5
31		19	8	6	30		30	5	5
31		19	8	6	32	TFA盐	6.6	2	5
33		126	1	2	32	TFA盐	6.6	2	5
33		126	1	2	太平洋紫杉		3.3	1	20
长春新碱		2.6	0.5	7	太平洋紫杉		3.3	1	20

¹IC₅₀值和标准偏差得自指定号码的独立实验。

1.2.用KB、KB-8-5和KB-V1细胞

KB细胞系表达对包括太平洋紫杉醇和长春新碱的许多细胞毒素化合物的作用产生抗性的不同量的P糖蛋白(MDR1)膜泵。亲代KB细胞系不表达P糖蛋白，KB-8-5表达适当含量的蛋白质，而KB-V1表达非常高含量的蛋白质。P糖蛋白识别并输出有效细胞毒素剂的能力可自这些细胞系的IC₅₀值的改变推测出来(Loganzo，F.，Discafani，CM.，Annable，T.，Beyer，C，Musto，S.，Hari，M.，Tan，X.，Hardy，C，Hernandez，R.，Baxter，M.，Singanallore，T.，Khafizova，G.，Poruchynsky，M.S.，Fojo，T.，Nieman，J.A.，Ayral-Kaloustian，S.，Zask，A.，Andersen，R.J.和Greenberger，L.M.HTI-286，a synthetic analogue of thetripeptide hemiasterlin，is a potent antimicrotubule agent that circumventsP-glycoprotein-mediated resistance in vitro and in vivo.Cancer Res.，63：1838-1845，2003)。若化合物被P糖蛋白识别出，则其IC₅₀值将自KB至KB-8-5至KB-V1充分地增加(数百倍)；若化合物未被识别出，则其将在所有三个细胞系上具有类似的IC₅₀值(3倍或更少差异)。举例而言，如表2中所示，KB-8-5细胞适当地抵抗太平洋紫杉醇(19倍)、长春新碱(11倍)、秋水仙碱(3.4倍)和阿霉素(3.0倍)。本发明的代表性实例(第1、2a、4a、20、25、30、32号)显示出IC₅₀值小于2倍的改变。

甚至化合物与P糖蛋白的轻微的相互反应可用KB-V1细胞系测定出，KB-V1细胞系表达高于通常在临床样品中从各种肿瘤发现的含量的蛋白质(Goldstein，L.J.，Galski，H.，Fojo，T.，Willingham，M.，Lai，S.L，Gazdar，A.，Pirker，R.，Green，A.，Crist，W.，Brodeur，G.M.，Lieber，M.，Cossman，J.，Gottesman，M.M.和Pastan，I.Expression of a multidrugresistance gene in human cells.J.Natl.Cancer Inst.(Bethesda)，81：116-124，1989)。KB-V1细胞高度抵抗太平洋紫杉醇(大于345倍)、长春新碱(大于156倍)、秋水仙碱(116倍)、米托蒽醌(mitoxantrone)(77倍)和阿霉素(大于130倍)，本发明的代表性实例(第20、25、30号)显示出与亲代KB细胞系相比IC₅₀小于3倍的改变。这表明这些化合物完全没有被P糖蛋白所识别且因此所述化合物完全克服由P糖蛋白介导的对于细胞死亡的抗性。本发明的代表性实例(第1a、2a、3a、4a、32号)显示出由P糖蛋白识别。

表2

在用KB、KB-8.5和KB-VI细胞进行的MTS细胞毒素标准药理学试验程序中本发明的代表性实例和参照化合物的活性

¹IC₅₀值是2个独立实验的平均值。

²比率＝对KB8.5或KB VI细胞的IC₅₀/对KB细胞的IC₅₀。约为1的比率表示没有抗性。

1.3(用HL-60和HL-60/ADR细胞)

HL-60/ADR细胞过表达介导对某些化学治疗剂的抗性的多药耐药蛋白MRP1(Gottesman，M.M.，Fojo，T.和Bates，S.E.Multidrug resistance in cancer：role ofATP-dependent transporters.Nature Rev.Cancer，2：48-58，2002)。将本发明的代表性实例和参照化合物对HL-60/ADR的IC₅₀值与对敏感性亲代HL-60细胞系的值进行比较。表3中所示的结果表明，虽然HL-60/ADR细胞表现出对长春新碱(8.2倍)、秋水仙碱(7.4倍)、米托蒽醌(17倍)和阿霉素(93倍)的抗性，但是这些细胞没有对本发明的任一代表性实例表现出抗性。这表明本发明化合物不为MRP1所识别且因此克服由所述转运体介导的细胞抗性。

表3

在用HL-60和HL-60/AR细胞进行的MTS细胞毒素标准药理学试验程序中本发明的代表性实例和参照化合物的活性

¹IC₅₀值是2个独立实验的平均值。

²比率＝对HL-60/ADR细胞的IC₅₀/对HL-60细胞的IC₅₀。约为1的比率表示没有抗性。

1.4 用S1和S1-M1细胞

S1-M1细胞过表达介导对某些化学治疗剂的抗性的MXR转运体(Gottesman，M.M.，Fojo，T.和Bates，S.E.Miltidrug resistance in cancer：role of ATP-dependent transporters.Nature Rev.Cancer，2：48-58，2002)。将本发明的代表性实例和参照化合物对S1-M1的IC₅₀值与对敏感性亲代S1细胞系的值进行比较。表4中所示的结果表明，虽然S1-M1细胞表现出对米托蒽醌(大于300倍)和阿霉素(74倍)的抗性，但是这些细胞没有对本发明的任一代表性实例表现出抗性。这表明本发明化合物不为MXR所识别且因此克服由所述转运体介导的细胞抗性。

表4

用S1和S1-M1细胞进行的MTS细胞毒性标准药理学试验程序中本发明的代表性实例和参照化合物的活性

¹IC₅₀值是2个独立实验的平均值。

²比率＝对S1-M1细胞的IC₅₀/对S1细胞的IC₅₀。约为1的比率表示没有抗性。

2.化合物对富含MAP和纯微管蛋白的活体外聚合的影响

在本检测中，用富含MAP的微管蛋白的对照反应展示出特征为三阶段的S形状的吸光率曲线：第一阶段，检测期间吸光率没有改变的停滞期；第二阶段，吸光率增加的聚合阶段；和第三阶段，吸光率达到最大且几乎没有或没有进一步发生改变的平坦阶段。例如太平洋紫杉醇和多西他赛的聚合增强剂缩短或消除停滞期，增加聚合阶段的比率，且通常增加平坦阶段的高度。例如长春新碱和秋水仙碱的聚合抑制剂减少或防止吸光率增加。本发明化合物对聚合反应具有类似紫杉烷效应。这个已通过每一样品在20min处的平均A₃₄₀除以对照组在20min处的平均A₃₄₀而定量表达在表5中。太平洋紫杉醇展示出增强因子为8.5。本发明实例的因子高达8.1，其中大多数为5-6倍。因为长春新碱完全抑制富含MAP微管蛋白的聚合所以其增强因子为0。

表5

用富含MAP的微管蛋白进行的微管蛋白聚合标准药理学试验程序中本发明的代表性实例和参照化合物的活性

实例	盐	A<sub><u>340</u></sub><u>化合物</u>A<sub>340</sub>对照组
实例	盐	A<sub><u>340</u></sub><u>化合物</u>A<sub>340</sub>对照组	1a	盐酸盐	6.1
2		5.8	1a	盐酸盐	6.1
2		5.8	3		6.7
4a	盐酸盐	8.1	3		6.7
4a	盐酸盐	8.1	6		6.7
7		6.4	6		6.7
7		6.4	8		6.2
9		5.8	8		6.2
9		5.8	10		6.3
11a	盐酸盐	6.8	10		6.3
11a	盐酸盐	6.8	12		2.9
13		5.4	12		2.9
13		5.4	14		1.5
15		5.5	14		1.5
15		5.5	16		2.4
17		4.8	16		2.4
17		4.8	18		5.8
22		1.2	18		5.8
22		1.2	23		4.2
24		1.2	23		4.2
24		1.2	25		7.2
26		4.6	25		7.2
26		4.6	太平洋紫		8.5
长春新碱		0.0	太平洋紫		8.5
长春新碱		0.0	对照组		1.0

没有添加GTP的纯微管蛋白在对照反应中没有聚合。多西他赛和在极小程度上太平洋紫杉醇能够在这些条件下诱发纯微管蛋白的聚合。本发明的数个实例以类似于多西他赛的方式诱发没有GTP时的纯微管蛋白的聚合。表6展示出在单一化合物浓度的反应开始之后4个时间点处的平均吸光率。在所述浓度(24.3μM)下多西他赛和代表性实例1a、2a、3a、4a、11a、25和32导致在反应的第一个5min内吸光率快速增加到平坦阶段。这7个实例也全部导致8.1μM下更低的且较慢的增加，但是在2.7μM下没有影响。另一方面，甚至在0.1μM下，多西他赛也诱发吸光率的少量增加。

表6

用纯微管蛋白进行的微管蛋白聚合标准药理学试验程序中本发明的代表性实例和参照化合物的活性

3.化合物至微管蛋白的结合

本发明化合物结合高纯牛脑微管蛋白的部位通过与放射性配体[³H]长春碱、[³H]秋水仙碱和[³H]太平洋紫杉醇的竞争抑制研究来确定。表7中展示的结果表明，所有受试化合物抑制[³H]长春碱至微管蛋白杂二聚体的结合(对照组的11-19％)，但是不抑制[³H]秋水仙碱至微管蛋白杂二聚体或[³H]太平洋紫杉醇至微管蛋白杂二聚体的结合。这是所述化合物在微管蛋白的长春花/肽部位或不在秋水仙碱或紫杉烷位置处结合的强有力的证据。大多数受试化合物实际上使[³H]秋水仙碱的结合增强对照组水平以上的12-34％。这表明这些化合物至长春花/肽部位的结合可诱发导致增强的秋水仙碱结合的蛋白质分子中的构型改变。此改变看起来不是由长春新碱本身诱发的。在测试的对照化合物中，长春新碱抑制[³H]长春碱结合而不是[³H]秋水仙碱，而秋水仙碱抑制[³H]秋水仙碱结合而不是[3H]长春碱。长春新碱和秋水仙碱看似也抑制[³H]太平洋紫杉醇至微管的结合；然而这不是由于结合竞争而是由于[³H]太平洋紫杉醇结合的微管的解聚作用。清楚的是，本发明化合物不诱发[³H]太平洋紫杉醇至微管的结合，这表明所述化合物不与[³H]太平洋紫杉醇竞争结合也不使[³H]太平洋紫杉醇结合的微管解聚。

表7

竞争性结合标准药理学试验程序¹中本发明的代表性实例和参照化合物的活性

¹结果表示为没有竞争者时结合至对照组的百分比。

²数据来自1个(4次重复)或2个(8次重复)独立的实验。

³数据来自1至4个独立的实验(3至12次重复)。

4.化合物对细胞周期进程的影响

本程序测量处于细胞周期的G1、S和G2/M阶段的群体中的细胞百分率。其中利用碘化丙啶染色细胞核并通过流式细胞术进行分析。本程序还通过测量具有DNA的sub-G1量的微粒的外观得到由药物治疗引起的细胞凋亡估计值。由于包含有丝分裂纺锤体的微管的破裂，因此高浓度(意即，大于约5 x IC₅₀浓度)微管活性化合物特性上使细胞在细胞周期的G2/M阶段停滞。然而在较低浓度(接近IC₅₀值)下，在(例如海拉)的某些细胞系上，例如太平洋紫杉醇和多西他赛的紫杉烷在观察到G2/M阻断之前诱发大量的细胞凋亡(Jordan，M.A.，Wendell，K.，Gardiner，S.，Derry，W.B.，Copp，H.和Wilson，L.Mitotic block induced in HeLa cells by low concentrations of paclitaxel(Taxol)results inabnormal mitotic exit and apoptotic cell death.Cancer Res.，56：816-825，1996)；这不是例如长春新碱和秋水仙碱的微管解聚剂的情况。在多种浓度下以细胞培养18hr之后在此程序中对本发明的代表性实例进行试验，以查看它们是否遵循了“稳定剂”(紫杉烷)或“去稳定剂”(长春新碱、水仙碱)模式。表8中提供的结果表明，本发明的代表性实例遵循“稳定剂”模式。

举例而言，在40nM下实例1a展示出约70％细胞凋亡，这与对海拉细胞的IC₅₀接近，与未经处理的对照组相比G2/M分数没有增加。当浓度增加至40nM以上时，细胞凋亡分数减少而G2/M分数增加。对实例2a、3a和4a，和多西他赛可见类似的模式。然而，长春新碱和秋水仙碱展示出细胞凋亡和G2/M分数的平行增加，并且在18hr时的细胞凋亡程度低很多。

表8

用海拉细胞进行的细胞周期分析标准药理学试验程序中本发明的代表性实例和参照化合物的活性

¹Apop＝细胞凋亡

5.化合物的活体内抗瘤活性

已经在无胸腺小鼠中用人类肿瘤异种移植物进行了大量实验，来评估本发明化合物活体内抑制肿瘤生长的能力。表9展示用携带H157非小细胞肺癌瘤(NSCLC)的小鼠进行的实例2a的结果。当在第0天和第6天静脉内给药时，所述化合物在25、15和7.5mg/kg下抑制肿瘤生长。在以H157NSCLC进行的另一个实验中，当在第0天和第7天以20和10mg/kg静脉内给与实例2c的琥珀酸盐时，实例2c的琥珀酸盐为有活性的(表10)。当在第0、6、13和20天静脉内投与实例2a时，实例2a在25和20mg/kg下也抑制另一NSCLC，A549的生长(表11)。当在第1天和第7天以25mg/kg静脉内给与实例2a时，实例2a抑制HT-29结肠癌异种移植物的生长，如表12中所示。此外，当在第0天作为单次剂量以30、20和10mg/kg，而不是5或2.5mg/kg经口给与实例2a时，实例2a抑制U87-MG恶性胶质瘤的生长(表13)。当在第1、8和15天静脉内投与实例2a时，实例2a在20mg/kg时针对HCT-15结肠癌瘤也具有活性(表14)。HCT-15过表达P糖蛋白且抵抗太平洋紫杉醇和长春新碱。

针对LOX黑素瘤异种移植物对实例1a、2a、3a和4a进行试验。表15中的结果表明，当在第1、5、9和13天静脉内投与所有四种化合物时，这四种化合物在6和3mg/kg，而不是1mg/kg下具有活性。

还针对DLD1结肠癌瘤对实例1a、2a、3a和4a进行试验。所述肿瘤过表达P糖蛋白且抵抗太平洋紫杉醇和长春花生物碱。当在第1、5、9和13天静脉内投与实例1和实例2时，两者分别在15mg/kg和20mg/kg下具有活性(表16)。

针对U-87MG恶性胶质瘤异种移植物对实例3a和9进行试验(表17)。经口给药的情况下，实例3a在40、20和10mg/kg下具有活性，而实例9在20mg/kg下具有活性。

当以40mg/kg而不是20或10mg/kg经静脉内q4d×8给与实例4时，如表18所示，实例4抑制A549肺癌瘤的生长。

最后，当在第1、7和14天以50和30mg/kg经口投与实例20时，实例20针对LoVo人类结肠癌异种移植物具有活性(表19)。当以相同的方式投与实例32时，实例32在50mg/kg而不是30mg/kg下具有活性(表19)。

表9

用携带H157人类非小细胞肺癌瘤的小鼠进行的人类肿瘤异种移植物标准药理学试验程序中实例2a的活体内活性

^*＝p小于0.05

^**＝p小于0.01

媒剂为生理盐水

表10

用携带H157人类非小细胞肺癌瘤的小鼠进行的人类肿瘤异种移植物标准药理学试验程序中实例2c的活体内活性

^*＝p小于0.05

^**＝p小于0.01

媒剂为生理盐水

表11

用携带A549人类非小细胞肺癌瘤的小鼠进行的人类肿瘤异种移植物标准药理学试验程序中实例2a的活体内活性

^*＝p小于0.05

^**＝p小于0.01

媒剂为生理盐水

表12

用携带HT-29人类结肠癌瘤的小鼠进行的人类肿瘤异种移植物标准药理学试验程序中实例2a的活体内活性

^**＝p小于0.01

媒剂为生理盐水

表13

用携带U87-MG人类恶性胶质瘤的小鼠进行的人类肿瘤异种移植物标准药理学试验程序中实例2的活体内活性

^*＝p小于0.05

^**＝p小于0.01

媒剂为Klucel

表14

用携带HCT-15人类结肠癌瘤的小鼠进行的人类肿瘤异种移植物标准药理学试验程序中实例2a的活体内活性

^*＝p小于0.05

^**＝p小于0.01

媒剂为生理盐水

注意：在25mg/kg组中，5只小鼠中的两只死亡

表15

用携带LOX人类黑素瘤的小鼠进行的人类肿瘤异种移植物标准药理学试验程序中实例1a、2a、3a和4a的活体内活性

^*＝p小于0.05

^**＝p小于0.01

媒剂为生理盐水

表16

用携带DLD1人类结肠癌瘤的小鼠进行的人类肿瘤异种移植物标准药理学试验程序中实例1a、2a、3a和4a的活体内活性

^*＝p小于0.05

^**＝p小于0.01

媒剂为生理盐水

表17

用携带U87-MG人类恶性胶质瘤的小鼠进行的人类肿瘤异种移植物标准药理学试验程序中实例3a和9的活体内活性

^*＝p小于0.05

^**＝p小于0.01

媒剂为生理盐水

表18

用携带A549人类非小细胞肺癌瘤的小鼠进行的人类肿瘤异种移植物标准药理学试验程序中实例4a的活体内活性

^*＝p小于0.05

^**＝p小于0.01

媒剂为生理盐水

表19

用携带LoVo人类结肠癌瘤的小鼠进行的人类肿瘤异种移植物标准药理学试验程序中实例20和32的活体内活性

^*＝p小于0.05

^**＝p小于0.01

媒剂为0.5％Methocel-0.4％Tween 80

本发明化合物展示出针对培养中多种人类癌细胞系的有效的细胞毒素活性，所述细胞系包括由于药物转运体过表达而抵抗太平洋紫杉醇和长春新碱的细胞系。本发明化合物以类似紫杉烷而不同于解聚剂(例如长春花生物碱和秋水仙碱)抑制作用的方式提高富含MAP的微管蛋白聚合的起始速率。在没有GTP的情况下本发明化合物也诱发纯微管蛋白的聚合。本发明化合物进一步在没有细胞周期阻断的情况下以低浓度(大约为细胞毒素IC₅₀值)诱发目标细胞中的细胞凋亡，另一特性为紫杉烷而不是长春花或秋水仙碱的特征。本发明的代表性化合物抑制无胸腺小鼠中数种人类肿瘤异种移植物的生长，所述异种移植物包括抵抗紫杉烷和长春花生物碱的肿瘤。

下列参考实例适用于制备本发明化合物的代表性非限制性实例，所述代表性非限制性实例适合作为微管聚合的促进剂和作为抗癌剂。

参考实例1

(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙胺盐酸盐

产物(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙胺盐酸盐是根据US5,986,135和US6,204,269中公开的条件制备的。

参考实例2

(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙胺盐酸盐

产物(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙胺盐酸盐是使用L-(+)-酒石酸代替D-(-)-酒石酸根据US5,986,135和US6,204,269中公开的条件制备的。

参考实例3

5-氯-6-(2，4-二氟苯基)-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺

产物5-氯-6-(2，4-二氟苯基)-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺是根据US5,986,135中公开的条件制备的，但如本文实例1中描述，在最后步骤中DMF用作溶剂。

参考实例4

5-氯-6-(2，3，6-三氟苯基)-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺

产物5-氯-6-(2，3，6-三氟苯基)-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺是根据US5,986,135中公开的条件制备的，但如本文实例1中描述，在最后步骤中DMF用作溶剂。

参考实例5

5，7-二氯-6-(2，4，6-三氟苯基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶

产物5，7-二氯-6-(2，4，6-三氟苯基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶是根据US6.117,876和US6,297，251中公开的条件制备的。

参考实例6

5，7-二羟基-6-(2，4，6-三氟苯基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶

产物5，7-二羟基-6-(2，4，6-三氟苯基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶是根据US6.117,876和US6,297,251中公开的条件制备的。

参考实例7

2-(2，6-二氟-4-甲氧基苯基)丙二酸二乙酯

产物2-(2，6-二氟-4-甲氧基苯基)丙二酸二乙酯是根据US5.981,534中公开的条件制备的。

参考实例8

3-(甲氨基)丙-1-醇

产物3-(甲氨基)丙-1-醇是根据J.Org.Chem.44，2718(1979)中公开的条件制备的。

参考实例9

3-(乙氨基)丙-1-醇

产物3-(乙氨基)丙-1-醇是根据J.Chem.Soc.B，1300(1971)中公开的条件制备的。

参考实例10

3-[乙基(甲基)氨基]丙-1-醇

产物3-[乙基(甲基)氨基]丙-1-醇是根据J.Am.Chem.Soc.54，2484(1932)中公开的条件制备的。

参考实例11

3-哌啶-1-基丙-1-醇

产物3-哌啶-1-基丙-1-醇是根据Tetr.Lett.35,761(1994)中公开的条件制备的，其例外在于使用在未蒸馏情况下的粗产物。

参考实例12

3-吗啉-4-基丙-1-醇

产物3-吗啉-4-基丙-1-醇是根据Tetr.Lett.35，761(1994)中公开的条件制备的，其例外在于使用在未蒸馏情况下的粗产物。

参考实例13

3-吡咯烷-1-基丙-1-醇

产物3-吡咯烷-1-基丙-1-醇是根据Tetr.Lett.35,761(1994)中公开的条件制备的，其例外在于使用在未蒸馏情况下的粗产物。

参考实例14

3-(甲基哌嗪-1-基)丙-1-醇

产物3-(甲基哌嗪-1-基)丙-1-醇是根据Tetr.Lett.35,761(1994)中公开的条件制备的，其例外在于使用在未蒸馏情况下的粗产物。

参考实例15

3-吖丁啶-1-基丙-1-醇

产物3-吖丁啶-1-基丙-1-醇是根据Tetr.Lett.35,761(1994)中公开的条件制备的，其例外在于使用在未蒸馏情况下的粗产物。

参考实例16

3-(二甲氨基)丙-1-硫醇

产物3-(二甲氨基)丙-1-硫醇是根据J.Organomet Chem.480,177(1994)中公开的条件制备的。

参考实例17

3-[(4-甲氧基苯甲基)氧基]-1-丙醇

产物3-[(4-甲氧基苯甲基)氧基]-1-丙醇是根据Tetrahedron54，1(1998)中公开的条件制备的。

下列实例为本发明化合物的代表性非限制性实例。

实例1

5-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺

步骤A：5-氯-6-(2，4，6-三氟苯基)-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺

在室温下在氮气氛下搅拌5，7-二氯-6-(2，4，6-三氟苯基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶(3.0g，9.4mmol)、(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基胺盐酸盐(4.2g，28.2mmol)和N，N-二异丙基乙胺(4.9mL，28.2mmol)于100mL N，N-二甲基甲酰胺中的混合物13h。用乙酸乙酯稀释反应混合物。用1N盐酸(2×)和饱和氯化钠(2×)洗涤有机层，经硫酸镁干燥，并浓缩成残余物。经硅胶层析残余物(以己烷中的20％乙酸乙酯洗脱)。浓缩提供呈浅黄色固体状的5-氯-6-(2，4，6-三氟苯基)-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺(3.56g)。MS：m/z 396.0(M+H)。

步骤B：5-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺

在室温下向5-氯-6-(2，4，6-三氟苯基)-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺(600mg，1.5mmol)和3-二甲氨基-1-丙醇(1.03g，10mmol)于5mL的二甲亚砜中的溶液中添加氢化钠(60％于矿物油中，400mg，10mmol)。在50℃下加热混合物30min，并冷却至室温。添加水以中止反应，并用乙酸乙酯(×2)萃取产物。用饱和氯化钠(×4)洗涤经合并的有机萃取物，经硫酸镁干燥，并浓缩成残余物。经硅胶层析残余物(以乙酸乙酯至乙酸乙酯中20％甲醇的梯度洗脱)。浓缩提供呈无色油状的5-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺(486mg)。MS：m/z 479.2(M+H)。

实例1a

5-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺盐酸盐

将实例1的产物5-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺溶解于二氯甲烷(50mL)中并过滤。使氯化氢气体在滤液中起泡。浓缩提供呈白色固体状的5-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺盐酸盐(540mg)。

实例2

5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺

在室温下向氢化钠(60％于矿物油中，2.3g，57.6mmol)于20mL二甲亚砜中的溶液中添加3-(甲氨基)丙-1-醇(5.14g，57.6mmol)于10mL二甲亚砜中的溶液。在室温下搅拌溶液1h，并添加5-氯-6-(2，4，6-三氟苯基)-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺(5.7g，14.4mmol)。在60℃下加热混合物3h，并冷却至室温。用乙酸乙酯稀释反应混合物，并用水和饱和氯化钠洗涤。经硫酸镁干燥有机层，并浓缩成残余物。用少量丙酮，接着用己烷湿磨残余物，并经硅胶层析(以100％乙酸乙酯至100％甲醇的梯度洗脱)。浓缩提供呈白色固体状的5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺(2.7g)。MS：m/z465.1(M+H)。

实例2a

5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺盐酸盐

将实例2的产物溶解于二氯甲烷(150mL)中的10％甲醇中并过滤。使氯化氢气体在滤液中起泡。浓缩提供呈浅黄色固体状的5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺盐酸盐(2.92g)。

实例2b

5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺反丁烯二酸盐

向5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺盐酸盐(7.50g，15.0mmol)和水(100mL)的浆料中逐滴添加氢氧化钠溶液(10N，2.0mL，20mmol)。接着，添加反丁烯二酸(3.48g，30mmol)。搅拌混合物约15-20min且接着加热至约65-75℃并搅拌直至所有固体溶解。过滤溶液并历经约1h将滤液冷却至约0-5℃。搅拌混合物1h且接着过滤并用冷水和异丙醇洗涤收集的固体。在约60℃/10mmHg下在真空下干燥固体20h以产生无水形式的白色固体(6.54g，75％)。在80-100％相对湿度(RH)和室温下将一部分化合物置于干燥皿中约24h。化合物吸收5.8％的水形成在室温下和在5-100％相对湿度(RH)下稳定的二水合物。¹H NMR(CDCl₃)：δ 8.43(s，1H)，6.86(d，2H，J＝10.2Hz)，6.51(s，2H)，5.84(m，1H)，4.15(t，2H，J＝7.9Hz)，3.04(t，2H，J＝7.2Hz)，2.57(s，3H)，2.08(m，2H)，1.33(d，J＝6.7，3H)。

所述化合物在5％-100％RH下吸收两摩尔水成为其二水合物。5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺二水合反丁烯二酸盐。

实例2c

5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺琥珀酸盐

搅拌5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺(9.00g，19.4mmol)和琥珀酸(2.75g，23.3mmol)于水(90mL)中的混合物约15-20min且接着将其加热至65-75℃。过滤溶液并历经约1h将滤液冷却至约0-5℃。搅拌混合物约1h且接着过滤并用冷水(2×9mL)和冷异丙醇(9mL)洗涤收集的固体。在约40℃/10mmHg下在真空下干燥固体约20h以产生无水形式的白色固体(6.6g，73％)。在80-100％相对湿度(RH)和室温下将一部分化合物置于干燥皿中约24h。化合物吸收5.8％的水形成在室温下和在5-100％相对湿度(RH)下稳定的二水合物。¹H NMR(CDCl₃)：δ 10.2(bs，1H)，8.26(s，1H)，6.80(d，2H，J＝10.5Hz)，5.79(m，1H)，4.13(t，2H，J＝6.3Hz)，3.03(t，2H，J＝7.2Hz)，2.57(s，3H)，2.35(s，4H)，2.07(m，2H)，1.27(d，J＝6.0，3H)。

所述化合物在5％-100％RH下吸收两摩尔水成为其二水合物。5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺二水合琥珀酸盐。

实例3-21和其盐酸盐是类似于实例1和实例1a合成的。

实例3

5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-(2，2，2-三氟乙基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺；451.2(M+H)

实例3a

5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-(2，2，2-三氟乙基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺盐酸盐

实例4

5-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-(2，2，2-三氟乙基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺；465.2(M+H)

实例4a

5-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-(2，2，2-三氟乙基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺盐酸盐

实例5

6-[4-(3-氨基丙氧基)-2，6-二氟苯基]-5-氯-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺；451.5(M+H)

实例6

5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺；534.4(M+H)

实例7

5-氯-6-{4-[3-(乙氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺；479.1(M+H)

实例8

5-氯-6-(4-{3-[乙基(甲基)氨基]丙氧基}-2，6-二氟苯基)-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺；493.0(M+H)

实例9

5-氯-6-[2，6-二氟-4-(3-吡咯烷-1-基丙氧基)苯基]-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺；505.2(M+H)

实例10

5-氯-6-[2，6-二氟-4-(3-哌啶-1-基丙氧基)苯基]-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺；519.3(M+H)

实例11

5-氯-6-[2，6-二氟-4-(3-吗啉-4-基丙氧基)苯基]-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺；521.1(M+H)

实例11a

5-氯-6-[2，6-二氟-4-(3-吗啉-4-基丙氧基)苯基]-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺盐酸盐

实例12

6-[4-(3-吖丁啶-1-基丙氧基)-2，6-二氟苯基]-5-氯-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺；489.1(M-H)

实例13

5-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2-氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺；461.2(M+H)

实例14

5-氯-6-{2，6-二氟-4-[2-(甲氨基)乙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺；451.0(M+H)

实例15

5-氯-6-{4-[4-(二甲氨基)丁氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺；493.1(M+H)

实例16

5-氯-6-{4-[2-(二甲氨基)乙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺；465.1(M+H)

实例17

5-氯-6-[2，6-二氟-4-(2-吗啉-4-基乙氧基)苯基]-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺；504.9(M-H)

实例18

5-氯-6-(4-{[3-(二甲氨基)丙基]硫基}-2，6-二氟苯基)-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺；495.2(M+H)

实例19

2-[4-(5-氯-7-{[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]乙醇；438.1(M+H)

实例20

3-[4-(5-氯-7-{[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丙-1-醇；452.1(M+H)

实例21

4-[4-(5-氯-7-{[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丁-1-醇；463.9(M-H)

实例22

N¹-[4-(5-氯-7-{[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯基]-N¹，N³，N³-三甲基丙-1，3-二胺；492.1(M+H)

向5-氯-6-(2，4，6-三氟苯基)-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺(200mg，0.51mmol)于N，N，N′-三甲基-1，3-丙二胺(3.0g，25.8mmol)中的混合物中添加氢化钠(100mg，2.5mmol)。将所得混合物在100℃下加热16h。接着用水中止反应并用乙酸乙酯(×2)萃取。用饱和氯化钠洗涤经合并的有机萃取物，经硫酸镁干燥，并浓缩成残余物。经硅胶层析残余物(以100％乙酸乙酯至于乙酸乙酯中的50％甲醇至100％甲醇的梯度洗脱)。浓缩提供呈黄色油状的N¹-[4-(5-氯-7-{[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯基]-N¹，N³，N³-三甲基丙-1，3-二胺(20mg)。MS：m/z 492.1(M+H)。

实例23-24类似于实例22合成。

实例23

N¹-[4-(5-氯-7-{[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯基]-N³，N³-二甲基丙-1，3-二胺；478.2(M+H)

实例24

N¹-[4-(5-氯-7-{[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯基]-N²，N²-二甲基乙-1，2-二胺；464.1(M+H)

实例25

5-溴-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺

步骤A：5，7-二溴-6-(2，4，6-三氟苯基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶

在120℃下将5，7-二羟基-6-(2，4，6-三氟苯基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶(282mg，1.0mmol)和三溴氧化磷(2.0g，7.0mmol)的混合物加热4h。接着在真空中将过量三溴氧化磷移除。将残余物溶解于二氯甲烷中并用水和饱和氯化钠(×3)洗涤。经硫酸镁干燥有机层，经含水硅酸镁过滤，并浓缩。获得呈褐色半固体状的5，7-二溴-6-(2，4，6-三氟苯基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶(380mg)。其可在未经进一步纯化的情况下直接用于下一步骤。MS：m/z 408.9(M+H)。

步骤B：5-溴-6-(2，4，6-三氟苯基)-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺

在室温下搅拌5，7-二溴-6-(2，4，6-三氟苯基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶(320mg，0.78mmol)、(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基胺盐酸盐(235mg，1.57mmol)和二异丙基乙胺(260mg，2.0mmol)于5mL N，N-二甲基甲酰胺中的混合物18h。添加水以中止反应，并用乙酸乙酯萃取产物。用饱和氯化钠(×3)洗涤经合并的有机萃取物，经硫酸镁干燥，并浓缩成残余物。经硅胶层析残余物(以9:1己烷/乙酸乙酯至2:1己烷/乙酸乙酯的梯度洗脱)。浓缩提供呈浅褐色固体状的5-溴-6-(2，4，6-三氟苯基)-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺(60mg，熔点95-97℃)。MS：m/z 440.0，442.0(M+H)。

步骤C：5-溴-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺

在室温下向5-溴-6-(2，4，6-三氟苯基)-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺(44mg，0.1mmol)和3-二甲氨基-1-丙醇(51m，0.5mmol)于1mL的二甲亚砜中的溶液中添加氢化钠(60％于矿物油中，20mg，0.5mmol)。在60℃下加热混合物2h，并将其冷却至室温。添加水以中止反应，并用乙酸乙酯萃取产物。用饱和氯化钠(×3)洗涤有机层，经硫酸镁干燥，并浓缩成残余物。经硅胶层析残余物(以乙酸乙酯至于乙酸乙酯中的30％甲醇的梯度洗脱)。浓缩提供呈浅褐色固体的5-溴-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺(41mg，熔点40-42℃)。MS：m/z 523.1，525.1(M+H)。

实例26

5-氯-6-{4-[4-(二甲氨基)丁基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺；

步骤A：2-(2，6-二氟-4-羟基苯基)丙二酸二乙酯

在-78℃下向2-(2，6-二氟-4-甲氧基苯基)丙二酸二乙酯(2.11g，7.0mmol)于60mL二氯甲烷的溶液中逐滴添加三溴化硼(2.65mL，28mmol)。接着在-78℃下搅拌混合物10分钟，温至0℃，并在0℃下搅拌1h。缓慢添加碳酸氢钠的5％水溶液以中止反应。用乙酸乙酯萃取产物。用饱和氯化钠洗涤经合并的有机萃取物，经硫酸镁干燥，并浓缩成残余物。经硅胶层析残余物(以于己烷中的10％乙酸乙酯至于己烷中的30％乙酸乙酯的梯度洗脱)。浓缩提供呈无色油状的2-(2，6-二氟-4-羟基苯基)丙二酸二乙酯(1.91g)。MS：m/z 287.2(M-H)。

步骤B：2-(2，6-二氟-4-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}苯基)丙二酸二乙酯

在室温下向2-(2，6-二氟-4-羟基苯基)丙二酸二乙酯(288mg，1.0mmol)和三乙胺(505mg，5.0mmol)于5mL二氯甲烷的溶液中添加三氟甲磺酸酐(1.41g，5.0mmol)。在室温下搅拌混合物10分钟。缓慢添加碳酸氢钠的5％水溶液以中止反应。用乙酸乙酯萃取产物。用饱和氯化钠洗涤经合并的有机萃取物，经硫酸镁干燥，并浓缩成残余物。经硅胶层析残余物(以己烷至于己烷中的15％乙酸乙酯的梯度洗脱)。浓缩提供呈无色油状的2-(2，6-二氟-4-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}苯基)丙二酸二乙酯(361mg)。MS：m/z419.2(M-H)。

步骤C：2-[2，6-二氟-4-(4-羟基苯基)苯基]丙二酸二乙酯

向9-硼二环[3.3.1]壬烷(9-BBN)于四氢呋喃(95mL，47.6mmol)中的0.5M溶液中逐滴添加3-丁烯-1-醇(4.1mL，47.6mmol)，并在室温下在氮气氛下搅拌混合物6h。接着在氮气压下由双头针将所得溶液转移至2-(2，6-二氟-4-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}苯基)丙二酸二乙酯(10.0g，23.8mmol)、磷酸钾(10.1g，47.6mmol)和四-三苯基膦钯(0)(825mg，0.714mmol)于40mL二氧六环中的混合物中。接着在90℃下使混合物加热8h。将反应物冷却至室温，并添加三甲胺N-氧化物(3.57g，47.6mmol)。在80℃下加热反应物1h，并将其冷却至室温。添加乙酸乙酯以稀释反应物。用饱和氯化钠(×2)洗涤经合并的有机相，经硫酸镁干燥，并浓缩成残余物。经硅胶层析残余物(以于己烷中的10％乙酸乙酯至于己烷中的50％乙酸乙酯的梯度洗脱)。浓缩提供呈棕色油状的2-[2，6-二氟-4-(4-羟基丁基)苯基]丙二酸二乙酯(3.5g)。MS：m/z 345.2(M+H)。

步骤D：2-{4-[4-(二甲氨基)丁基]-2，6-二氟苯基}丙二酸二乙酯

在0℃下向2-[2，6-二氟-4-(4-羟基丁基)苯基]丙二酸二乙酯(2.0g，5.8mmol)和三乙胺(2.43mL，17.4mmol)于15ml二氯甲烷的溶液中添加甲磺酰氯(0.898mL，11.6mmol)。在1.5h内将所得混合物温至室温。用10％盐酸、饱和碳酸氢钠和饱和氯化钠洗涤混合物。经硫酸镁干燥有机层并浓缩成黄色油状物。在室温下用于四氢呋喃(56mL，112mmol)中的2.0M二乙胺搅拌由此获得的黄色油状物16h，接着浓缩。用乙酸乙酯稀释残余物。用水和饱和氯化钠洗涤有机层，经硫酸镁干燥，并浓缩成残余物。经硅胶层析残余物(以100％乙酸乙酯至于乙酸乙酯中的50％甲醇至100％甲醇的梯度洗脱)。浓缩提供呈黄色油状的2-{4-[4-(二甲氨基)丁基]-2，6-二氟苯基}丙二酸二乙酯(1.2g)。MS：m/z 372.2(M+H)。

步骤E：6-{4-[4-(二甲氨基)丁基]-2，6-二氟苯基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-5，7-二醇

在160℃下在氮气氛下搅拌2-{4-[4-(二甲氨基)丁基]-2，6-二氟苯基}丙二酸二乙酯(1.0g，2.7mmol)、3-氨基-1，2，4-三唑(250mg，3.0mmol)和三丁胺(0.71mL，3.0mmol)的混合物16h并将其冷却至室温。用20ml己烷搅拌混合物。通过过滤收集沉淀，用己烷洗涤以产生呈白色固体状的6-{4-[4-(二甲氨基)丁基]-2，6-二氟苯基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-5，7-二醇(795mg)。MS：m/z 362.1(M-H)。

步骤F：5-氯-6-{4-[4-(二甲氨基)丁基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺

在115℃下将6-{4-[4-(二甲氨基)丁基]-2，6-二氟苯基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-5，7-二醇(795mg，2.19mmol)于4mL磷酰氯中的混合物加热4h。在真空中移除过量的磷酰氯，并在高真空下使所得残余物进一步干燥以产生在未经进一步纯化的情况下使用的黄色固体(1.13g)。

在室温下搅拌上述固体(300mg，0.75mmol)、(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基胺盐酸盐(675mg，4.51mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.787mL，4.51mmol)于4mL N，N-二甲基甲酰胺中的混合物18h。用乙酸乙酯稀释反应混合物。用饱和碳酸氢钠和饱和氯化钠洗涤有机层，经硫酸镁干燥，并浓缩成残余物。经硅胶层析残余物(以100％乙酸乙酯至于乙酸乙酯中的50％甲醇至100％甲醇的梯度洗脱)。浓缩提供呈浅黄色油状的5-氯-6-{4-[4-(二甲氨基)丁基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺(44mg)。MS：m/z 477.2(M+H)。

实例27-29是类似于实例1，自5-氯-6-(2，3，6-三氟苯基)-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺开始而合成的。

实例27

5-氯-6-{3-[2-(二甲氨基)乙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺；465.1(M+H)

实例28

5-氯-6-{3-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺；479.1(M+H)

实例29

5-氯-6-{3-[4-(二甲氨基)丁氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺；493.1(M+H)

实例30

3-[4-(5-氯-7-环庚基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丙-1-醇；

步骤A：3-环庚基-3-氧代-2-(2，4，6-三氟苯基)丙酸乙酯

在50℃下搅拌2，4，6-三氟苯基乙酸(570mg，3.0mmol)、碘乙烷(1.56g，10mmol)和碳酸钾(1.38g，10mmol)于5mL二甲亚砜中的混合物3h，并将其冷却至室温。将混合物在乙醚与水之间分溶。用水和饱和氯化钠洗涤有机层，经硫酸镁干燥，并经含水硅酸镁过滤。将滤液浓缩以产生呈浅黄色油状的2，4，6-三氟苯乙酸乙酯(581mg，2.66mmol)。

将环庚甲酸(5.0g，35.2mmol)于25mL亚硫酰氯中的混合物回流1h，并浓缩。将由此获得的粗制环庚甲酸氯化物直接用于下一步骤。

将2，4，6-三氟苯基乙酸乙酯(436mg，2.0mmol)于3mL四氢呋喃中的溶液冷却至-78℃，并在搅拌下逐滴添加二异丙基胺基锂(2.0M于庚烷/四氢呋喃/乙苯中，1.0mL，2.0mmol)。在-78℃下搅拌混合物1h，并逐滴添加环庚甲酸氯化物(321mg，2.0mmol)。将混合物温至室温并用2mL的1.0N盐酸酸化。用乙酸乙酯萃取产物。用饱和氯化钠洗涤有机层，经硫酸镁干燥，并浓缩成残余物。经硅胶层析残余物(以己烷至于己烷中的10％乙酸乙酯的梯度洗脱)。浓缩提供呈无色油状的3-环庚基-3-氧代-2-(2，4，6-三氟苯基)丙酸乙酯(410mg)。MS：m/z 341.2(M-H)。

步骤B：7-环庚基-6-(2，4，6-三氟苯基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-5-醇

在160℃下在氮气氛下搅拌3-环庚基-3-氧代-2-(2，4，6-三氟苯基)丙酸乙酯(342mg，1.0mmol)、3-氨基-1，2，4-三唑(84mg，1.0mmol)和三丁胺(185mg，1.0mmol)的混合物2.5h并冷却至室温。将混合物溶解于乙酸乙酯中并用1.0N盐酸和饱和氯化钠洗涤有机层，经硫酸镁干燥，并浓缩成固体。用己烷洗涤由此获得的固体以产生呈浅褐色固体状的7-环庚基-6-(2，4，6-三氟苯基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-5-醇(225mg)。MS：m/z363.2(M+H)。

步骤C：5-氯-7-环庚基-6-(2，6-二氟-4-{3-[(4-甲氧基苯甲基)氧基]丙氧基}苯基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶；

在室温下向7-环庚基-6-(2，4，6-三氟苯基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-5-醇(362mg，1.0mmol)和3-[(4-甲氧基苯甲基)氧基]-1-丙醇(490mg，2.5mmol)于4.0mL的二甲亚砜中的溶液中添加氢化钠(60％于矿物油中，120mg，3.0mmol)。在室温下搅拌混合物3h，并将其于乙酸乙酯和1.0N盐酸之间分溶。用饱和氯化钠洗涤有机溶液，经硫酸镁干燥，并浓缩成残余物。经硅胶层析残余物(以于己烷中的66％乙酸乙酯至于乙酸乙酯中的5％甲醇的梯度洗脱)。浓缩提供呈黄色油状的7-环庚基-6-(2，6-二氟-4-{3-[(4-甲氧基苯甲基)氧基]丙氧基}苯基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-5-醇(820mg)。

向上述7-环庚基-6-(2，6-二氟-4-{3-[(4-甲氧基苯甲基)氧基]丙氧基}苯基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-5-醇(820mg)中添加5mL磷酰氯和2mLN，N-二乙基苯胺，并在回流下将混合物加热1h。在真空中将过量磷酰氯移除，并将所得的残余物于二氯甲烷与1N盐酸之间分溶。用饱和氯化钠洗涤有机层，经硫酸镁干燥，并浓缩成残余物。经硅胶层析残余物(以己烷至于己烷中的20％乙酸乙酯的梯度洗脱)。浓缩提供呈黄色油状的5-氯-7-环庚基-6-(2，6-二氟-4-{3-[(4-甲氧基苯甲基)氧基]丙氧基}苯基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶(180mg)。MS：m/z 557.2(M+H)。

步骤D：3-[4-(5-氯-7-环庚基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丙-1-醇；

向5-氯-7-环庚基-6-(2，6-二氟-4-{3-[(4-甲氧基苯甲基)氧基]丙氧基}苯基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶(56mg，0.1mmol)于4mL二氯甲烷和0.2mL水中的溶液中添加2，3-二氯-5，6-二氰基-1，4-苯醌(100mg，0.44mmol)。在室温下搅拌混合物20分钟，接着用饱和碳酸氢钠水溶液(×2)洗涤，经硫酸镁干燥，并浓缩成残余物。经硅胶层析残余物(以于己烷中的33％乙酸乙酯至于己烷中的66％乙酸乙酯的梯度洗脱)。浓缩提供呈浅黄色固体状的3-[4-(5-氯-7-环庚基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丙-1-醇(34mg)。MS：m/z 437.2(M+H)。

实例31

3-[4-(5-氯-7-环庚基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]-N，N-二甲基丙-1-胺；

在室温下向7-环庚基-6-(2，4，6-三氟苯基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-5-醇(396mg，1.1mmol)和3-二甲氨基-1-丙醇(561mg，5.5mmol)于5mL二甲亚砜中的溶液中添加氢化钠(60％于矿物油中，200mg，5mmol)。在室温下搅拌混合物3h，并将其于乙酸乙酯和水之间分溶。用1N盐酸将水层中和至pH值为8。使一些所希望的产物自溶液沉淀，并通过过滤获得。用饱和氯化钠洗涤有机溶液，经硫酸镁干燥，并浓缩成残余物。将残余物与固体产物合并以提供粗制的7-环庚基-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基-2，6-二氟苯基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-5-醇。MS：m/z 446.1(M+H)。

向上述粗制7-环庚基-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基-2，6-二氟苯基][1，2，4]三唑[1，5-a]嘧啶-5-醇中添加2mL磷酰氯和1mLN，N-二乙基苯胺，并在110℃下将混合物加热1h。

在真空中将过量磷酰氯移除，并将所得的残余物于乙酸乙酯与5％碳酸氢钠水溶液之间分溶。用饱和氯化钠洗涤有机层，经硫酸镁干燥，并浓缩成残余物。经硅胶层析残余物(以二氯甲烷至于二氯甲烷中的20％甲醇的梯度洗脱)。浓缩提供呈褐色固体状的3-[4-(5-氯-7-环庚基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]-N，N-二甲基丙-1-胺(105mg)。MS：m/z 464.0(M+H)。

实例32

3-[4-(5-氯-7-环庚基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]-N-甲基丙-1-胺三氟乙酸盐

步骤A：3-[4-(7-环庚基-5-羟基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯；

在室温下向氢化钠(60％于矿物油中，334mg，8.35mmol)于10mL二甲亚砜中的溶液中添加3-(甲氨基)丙-1-醇(744mg，8.35mmol)。在室温下搅拌混合物1h，并添加7-环庚基-6-(2，4，6-三氟苯基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-5-醇(1.12g，3.1mmol)于10mL二甲亚砜中的溶液。在室温下搅拌混合物6h，并添加二碳酸二叔丁酯(1.82g，8.35mmol)于10mL二甲亚砜中的溶液。在室温下搅拌混合物18h并用乙酸乙酯稀释。用水(×2)和饱和氯化钠洗涤有机层，经硫酸镁干燥，并浓缩成残余物。经硅胶层析残余物(以于己烷中的30％乙酸乙酯至于己烷中的70％乙酸乙酯的梯度洗脱)。浓缩提供呈黄色固体状的3-[4-(7-环庚基-5-羟基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(876mg)。MS：m/z 530.4(M-H)。

步骤B：3-[4-(5-氯-7-环庚基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯；

向3-[4-(7-环庚基-5-羟基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(876mg，1.64mmol)中添加5.8mL磷酰氯和2.9mL N，N-二乙基苯胺，并在90℃下将混合物加热3h。在真空中将过量磷酰氯移除，并用乙酸乙酯稀释所得的残余物。用冰水和饱和氯化钠(×2)洗涤有机层，经硫酸镁干燥，并浓缩成残余物。经硅胶层析残余物(以己烷至于己烷中的40％乙酸乙酯的梯度洗脱)。浓缩提供呈浅黄色固体状的3-[4-(5-氯-7-环庚基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(452mg)。MS：m/z 550.1(M+H)。

步骤C：3-[4-(5-氯-7-环庚基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]-N-甲基丙-1-胺；

向3-[4-(5-氯-7-环庚基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(452mg，0.82mmol)于4mL二氯甲烷中的溶液中添加2.3mL三氟乙酸。在室温下搅拌混合物18h，并在真空中浓缩，产生呈黄色半固体状的3-[4-(5-氯-7-环庚基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]-N-甲基丙-1-胺的三氟乙酸盐(400mg)。MS：m/z 450.2(M+H)。

实例33

5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1R)-2，2，2，-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺；465.2(M+H)

使用实例1的条件且用(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基胺盐酸盐代替(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基胺盐酸盐合成产物5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1R)-2，2，2，-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺。

实例34-37可类似于实例30而合成。

实例34

3-[4-(5-氯-7-环辛基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丙-1-醇

可使用实例30的条件且用环辛甲酸代替环庚甲酸合成本实例的产物。

实例35

3-[4-(5-氯-7-环己基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丙-1-醇；

可使用实例30的条件且用环己甲酸代替环庚甲酸合成本实例的产物。

实例36

2-[4-(5-氯-7-环庚基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]乙醇

可使用实例30的条件且用乙二醇代替1，3-丙二醇合成本实例的产物。

实例37

4-[4-(5-氯-7-环庚基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丁-1-醇可使用实例30的条件且用1，4-丁二醇代替1，3-丙二醇合成本实例的产物。

实例38-41可类似于实例31而合成。

实例38

N-{3-[4-(5-氯-7-环辛基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丙基}-N，N-二甲胺

可使用实例31的条件且用环辛甲酸代替环庚甲酸合成本实例的产物。

实例39

N-{3-[4-(5-氯-7-环己基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丙基}-N，N-二甲胺

可使用实例31的条件且用环己甲酸代替环庚甲酸合成本实例的产物。

实例40

N-{2-[4-(5-氯-7-环己基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]乙基}-N，N-二甲胺

可使用实例31的条件且用2-(二甲氨基)乙醇代替3-二甲氨基-1-丙醇合成本实例的产物。

实例41

N-{4-[4-(5-氯-7-环庚基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丁基}-N，N-二甲胺

可使用实例31的条件且用4-(二甲氨基)-1-丁醇代替3-二甲氨基-1-丙醇合成本实例的产物。

实例42-45可类似于实例32而合成。

实例42

N-{3-[4-(5-氯-7-环辛基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丙基}-N-甲胺

可使用实例32的条件用环辛甲酸代替环庚甲酸合成本实例的产物。

实例43

N-{3-[4-(5-氯-7-环己基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丙基}-N-甲胺

可使用实例32的条件用环己甲酸代替环庚甲酸合成本实例的产物。

实例44

N-{2-[4-(5-氯-7-环庚基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]乙基}-N-甲胺

可使用实例32的条件用2-(甲氨基)乙醇代替3-(甲氨基)丙-1-醇制备本实例的产物。

实例45

N-{4-[4-(5-氯-7-环庚基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丁基}-N-甲胺

可使用实例32的条件用4-(甲氨基)-1-丁醇代替3-(甲氨基)丙-1-醇制备本实例的产物。

粉末XRD测量表明，所获得的无水和水合5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺琥珀酸盐(实例2c)和无水和水合5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺反丁烯二酸盐(实例2b)为晶体且具有不同的结晶结构。使用飞利浦X′Pert PW3040X射线衍射仪收集衍射数据。在4°与40°的2θ角之间每0.01°或0.02°收集衍射强度。使用正常θ/2θ扫描模式。表20列出相应粉末XRD图案的峰位置或2θ角。

表20.琥珀酸盐(实例2c)和反丁烯二酸盐(实例2b)的峰位置

表20.琥珀酸盐(实例2c)和反丁烯二酸盐(实例2b)的峰位置(续表)

^*w＝弱峰，b＝宽峰

极弱的峰以(w)标记

相对宽的峰以(b)标记。

Claims

1.一种式(I)化合物：

其中：

R¹选自

和视情况经R⁸取代的C₆-C₈环烷基；

R²为以下基团的部分

n为整数2、3或4；

X为Cl或Br；

Y为O、S、CH₂或NR⁴；

Q选自-NR⁶R⁷和-OH；

L¹和L²各自独立地为H、F、Cl、Br或CF₃；

R³为CF₃或C₂F₅；

R⁴和R⁵各自独立地为H或C₁-C₃烷基；

R⁶和R⁷各自独立地为H或C₁-C₃烷基；或

R⁶和R⁷在视情况与其各自连接的氮原子相结合时，形成4至6元饱和杂环，所述4至6元饱和杂环具有1-2个氮原子和0-1个氧或硫原子、并视情况经R⁸取代；

R⁸为C₁-C₃烷基；

或其医药学上可接受的盐。

2.根据权利要求1所述的化合物，其中R²为

或其医药学上可接受的盐。

3.根据权利要求1或2所述的化合物，其中Y为O。

4.根据权利要求1所述的化合物，其中n为3。

5.根据权利要求1所述的化合物，其中Q为-NR⁶R⁷。

6.根据权利要求5所述的化合物，其中R⁶为H且R⁷为H或甲基。

7.根据权利要求1所述的化合物，其中L¹为F且L²为H或F。

8.根据权利要求1所述的化合物，其中X为Cl。

9.根据权利要求1所述的化合物，其中R³为CF₃。

10.根据权利要求1所述的化合物，其中R⁵为H或甲基。

11.根据权利要求1所述的化合物，其中

R²为

n为3；

X为Cl或Br；

Y为O；

R³为CF₃；

Q为-NR⁶R⁷；

R⁵为H或甲基；

R⁶和R⁷各自独立地为H或C₁-C₃烷基；或

R⁶和R⁷在视情况与其各自连接的氮原子相结合时形成4至6元饱和杂环，所述4至6元饱和杂环具有1-2个氮原子和0-1个氧或硫原子、并视情况经R⁸取代；

R⁸为C₁-C₃烷基；

L¹为F；

L²为H或F；

或其医药学上可接受的盐。

12.根据权利要求1所述的化合物，其中：

R²为

n为3；

X为Cl；

Y为O；

Q为-NR⁶R⁷；

R⁶为甲基；

R⁷为H或甲基；

L¹为F；

L²为F；

或其医药学上可接受的盐。

13.根据权利要求1所述的化合物，其中

R²为

X为Cl；

n为3；

Y为O；

Q为-NR⁶R⁷；

R³为CF₃，

R⁵为H或甲基，

R⁶为甲基；

R⁷为H或甲基；

L¹为F；

L²为F；

或其医药学上可接受的盐。

14.根据权利要求1所述的化合物，其由式(Ia)表示；

或其医药学上可接受的盐。

15.根据权利要求1所述的化合物，其由式(Ib)表示；

或其医药学上可接受的盐。

16.根据权利要求1所述的化合物，其中R¹为视情况经R⁸取代的C₆-C₈环烷基；或其医药学上可接受的盐。

17.根据权利要求1所述的化合物，其中：

R¹为C₆-C₈环烷基；

R²为

n为3；

X为Cl；

Y为O；

Q为-NR⁶R⁷；

R⁶为甲基；

R⁷为H或甲基；

L¹为F；

L²为F；

Y为O；

或其医药学上可接受的盐。

18.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

19.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]-三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

20.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-(2，2，2-三氟乙基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

21.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-(2，2，2-三氟乙基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

22.根据权利要求1所述的化合物，6-[4-(3-氨基丙氧基)-2，6-二氟苯基]-5-氯-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

23.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

24.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{4-[3-(乙氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

25.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-(4-{3-[乙基(甲基)氨基]-丙氧基}-2，6-二氟苯基)-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

26.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-[2，6-二氟-4-(3-吡咯烷-1-基丙氧基)苯基]-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

27.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-[2，6-二氟-4-(3-哌啶-1-基丙氧基)苯基]-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

28.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-[2，6-二氟-4-(3-吗啉-4-基丙氧基)苯基]-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

29.根据权利要求1所述的化合物，6-[4-(3-吖丁啶-1-基丙氧基)-2，6-二氟苯基]-5-氯-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

30.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2-氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

31.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{2，6-二氟-4-[2-(甲氨基)乙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

32.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{4-[4-(二甲氨基)丁氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

33.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{4-[2-(二甲氨基)乙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

34.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-[2，6-二氟-4-(2-吗啉-4-基乙氧基)苯基]-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

35.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-(4-{[3-(二甲氨基)丙基]-硫基}-2，6-二氟苯基)-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

36.根据权利要求1所述的化合物，2-[4-(5-氯-7-{[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]乙醇，或其医药学上可接受的盐。

37.根据权利要求1所述的化合物，3-[4-(5-氯-7-{[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丙-1-醇，或其医药学上可接受的盐。

38.根据权利要求1所述的化合物，4-[4-(5-氯-7-{[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丁-1-醇，或其医药学上可接受的盐。

39.根据权利要求1所述的化合物，N¹-[4-(5-氯-7-{[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯基]-N¹，N³，N³-三甲基丙-1，3-二胺，或其医药学上可接受的盐。

40.根据权利要求1所述的化合物，N¹-[4-(5-氯-7-{[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯基]-N³，N³-二甲基丙-1，3-二胺，或其医药学上可接受的盐。

41.根据权利要求1所述的化合物，N¹-[4-(5-氯-7-{[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯基]-N²，N²-二甲基乙-1，2-二胺，或其医药学上可接受的盐。

42.根据权利要求1所述的化合物，5-溴-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

43.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{4-[4-(二甲氨基)丁基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

44.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{3-[2-(二甲氨基)乙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

45.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{3-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

46.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{3-[4-(二甲氨基)丁氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

47.根据权利要求1所述的化合物，3-[4-(5-氯-7-环庚基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丙-1-醇，或其医药学上可接受的盐。

48.根据权利要求1所述的化合物，3-[4-(5-氯-7-环庚基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]-N，N-二甲基丙-1-胺，或其医药学上可接受的盐。

49.根据权利要求1所述的化合物，3-[4-(5-氯-7-环庚基[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]-N-甲基丙-1-胺，或其医药学上可接受的盐。

50.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

51.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(2，2，2-三氟-1-甲基乙基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

52.根据权利要求1所述的化合物或其医药学上可接受的盐，选自：

5-氯-6-[2，6-二氟-4-(2-(甲氨基)乙氧基)苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-溴-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{3-[2-(二甲氨基)乙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺、

5-氯-6-{3-[4-(二甲氨基)丁氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺；和

5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-乙基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺。

53.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

54.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

55.根据权利要求1所述的化合物，6-[4-(3-氨基苯氧基)-2，6-二氟苯基]-5-氯-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

56.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙氧基]苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

57.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{4-[3-(乙氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

58.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-(4-{3-[乙基(甲基)氨基]-丙氧基}-2，6-二氟苯基)-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

59.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-[2，6-二氟-4-(3-吡咯烷-1-基丙氧基)苯基]-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

60.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-[2，6-二氟-4-(3-哌啶-1-基丙氧基)苯基]-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

61.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-[2，6-二氟-4-(3-吗啉-1-基丙氧基)苯基]-N-[(1R)-2，2，2-三氟-4-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

62.根据权利要求1所述的化合物，6-[4-(3-吖丁啶-1-基丙氧基)-2，6-二氟苯基]-5-氯-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

63.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2-氟苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

64.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{2，6-二氟-4-[2-(甲氨基)乙氧基]苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

65.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{4-[4-(二甲氨基)丁氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

66.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{4-[2-(二甲氨基)乙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

67.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-[2，6-二氟-4-(2-吗啉-4-基乙氧基)苯基]-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

68.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-(4-{[3-(二甲氨基)丙基]硫基}-2，6-二氟苯基)-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

69.根据权利要求1所述的化合物，2-[4-(5-氯-7-{[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]乙醇，或其医药学上可接受的盐。

70.根据权利要求1所述的化合物，3-[4-(5-氯-7-{[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丙-1-醇，或其医药学上可接受的盐。

71.根据权利要求1所述的化合物，4-[4-(5-氯-7-{[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯氧基]丁-1-醇，或其医药学上可接受的盐。

72.根据权利要求1所述的化合物，N¹-[4-(5-氯-7-{[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯基]-N¹，N³，N³-三甲基丙-1，3-二胺，或其医药学上可接受的盐。

73.根据权利要求1所述的化合物，N¹-[4-(5-氯-7-{[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯基]-N³，N³-二甲基丙-1，3-二胺，或其医药学上可接受的盐。

74.根据权利要求1所述的化合物，N¹-[4-(5-氯-7-{[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基]氨基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-3，5-二氟苯基]-N²，N²-二甲基乙-1，2-二胺，或其医药学上可接受的盐。

75.根据权利要求1所述的化合物，5-溴-6-{4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

76.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{4-[4-(二甲氨基)丁基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

77.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{3-[2-(二甲氨基)乙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

78.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{3-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

79.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{4-[3-(二甲氨基)丁氧基]-2，6-二氟苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

80.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺，或其医药学上可接受的盐。

81.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺盐酸盐。

82.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺琥珀酸盐。

83.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺反丁烯二酸盐。

84.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺盐酸盐。

85.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺琥珀酸盐。

86.根据权利要求1所述的化合物，5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1R)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺反丁烯二酸盐。

87.根据权利要求82所述的化合物，其为二水合物。

88.根据权利要求83所述的化合物，其为二水合物。

89.根据权利要求81所述的化合物，其为二水合物。

90.根据权利要求86所述的化合物，其为二水合物。

91.一种化合物，5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺琥珀酸盐。

92.一种化合物，5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺反丁烯二酸盐。

93.一种化合物，5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺盐酸盐。

94.一种化合物，5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺二水合琥珀酸盐。

95.一种化合物，5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺二水合反丁烯二酸盐。

96.一种根据权利要求91所述的化合物的多晶型物，其具有表20中陈述的X射线衍射2θ角度值。

97.一种根据权利要求92所述的化合物的多晶型物，其具有表20中陈述的X射线衍射2θ角度值。

98.一种根据权利要求94所述的化合物的多晶型物，其具有表20中陈述的X射线衍射2θ角度值。

99.一种根据权利要求95所述的化合物的多晶型物，其具有表20中陈述的X射线衍射2θ角度值。

100.一种根据权利要求1至99中任一权利要求所述的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐在制造药物中的用途，所述药物用于治疗或抑制哺乳动物中需要治疗或抑制的癌肿瘤细胞生长。

101.一种根据权利要求1至99中任一权利要求所述的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐在制造药物中的用途，所述药物用于促进含微管蛋白的系统中微管蛋白聚合。

102.一种根据权利要求1至99中任一权利要求所述的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐在制造药物中的用途，所述药物用于使含微管蛋白的系统中的微管稳定。

103.一种根据权利要求1至99中任一权利要求所述的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐在制造药物中的用途，所述药物用于治疗或预防哺乳动物中需要治疗或预防的表现出多药耐药性或因多药耐药性而呈抗药性的肿瘤。

104.一种根据权利要求1至99中任一权利要求所述的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐在制造药物中的用途，所述药物用于治疗哺乳动物中需要治疗的肿瘤、抑制肿瘤生长或根除肿瘤。

105.一种医药组合物，其包含根据权利要求1至99中任一权利要求所述的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐和医药学上可接受的载剂。

106.一种制备式(I)化合物的方法

其中：R¹为

R²为部分

n为整数2、3或4；

X为Cl或Br；

Y为O、S或NR⁴；

Q选自-NR⁶R⁷和-OH；

L¹和L²各自独立地为H、F、Cl、Br或CF₃；

R³为CF₃或C₂F₅；

R⁴和R⁵各自独立地为H或C₁-C₃烷基；

R⁶和R⁷各自独立地为H或C₁-C₃烷基；或

R⁸为C₁-C₃烷基；

或其医药学上可接受的盐，

所述方法包含在强碱存在下视情况在非质子性溶剂存在下使式(II)化合物

其中L³为离去基团，与式HY-(CH₂)_nQ化合物反应以产生式(I)化合物并且必要时分离成医药学上可接受的盐。

107.根据权利要求106所述的方法，其中所述离去基团L³为F且Y为O。

108.根据权利要求106或107所述的方法，其中所述强碱选自碱金属氢氧化物、碱金属碳酸盐和碱金属氢化物。

109.根据权利要求106所述的方法，其中所述非质子溶剂选自二甲亚砜和二甲基甲酰胺。

110.根据权利要求106所述的方法，其中式(II)由下式表示：

111.一种制备式(I)化合物的方法

其中：R¹为

R²为以下基团的部分

n为整数2、3或4；

X为Cl或Br；

Y为CH₂；

Q为-NR⁶R⁷；

L¹和L²各自独立地为H、F、Cl、Br或CF₃；

R³为CF₃或C₂F₅；

R⁵为H或C₁-C₃烷基；

R⁶和R⁷各自独立地为H或C₁-C₃烷基；或

R⁸为C₁-C₃烷基；

或其医药学上可接受的盐，

所述方法包含以下步骤：

a)在碱存在下使二酯(III)

与2-氨基-1，3，4-三唑反应以提供下式化合物(V)：

b)以POX₃使化合物(V)卤化以提供5，7-二卤代化合物(VI)：

c)在非质子性溶剂中在碱存在下使5，7-二卤代化合物(VI)与胺(VII)

反应以提供相应的式(I)化合物，其中Y为-CH₂-，并且必要时分离成其医药学上可接受的盐。

112.根据权利要求111所述的方法，其中所述碱为N，N-二异丙基乙胺。

113.根据权利要求111或112所述的方法，其中所述非质子溶剂选自二甲亚砜和二甲基甲酰胺。

114.根据权利要求111所述的方法，其中所述胺(VII)

具有(S)构型。

115.一种制备式(I)化合物的医药学上可接受的盐的方法

其中：R¹为

R²为部分

n为整数3；

X为Cl；

Y为O；

Q为-NR⁶R⁷；

L¹和L²各自为F；

R³为CF₃；

R⁵为CH₃；

R⁶为H；

R⁷为CH₃；

所述方法包含在溶剂中视情况在强碱存在下使式(I)化合物

其中R¹、R²和X为上文所定义，与形成医药学上可接受的盐的酸反应以产生式(I)的医药学上可接受的盐。

116.根据权利要求115所述的方法，其中所述溶剂为水、甲醇、乙醇或异丙醇或其组合。

117.根据权利要求115所述的方法，其中所述溶剂为水。

118.根据权利要求115至117中任一权利要求所述的方法，其中所述强碱选自碱金属氢氧化物和碱金属碳酸盐。

119.根据权利要求115所述的方法，其中所述形成医药学上可接受的盐的酸选自反丁烯二酸和琥珀酸。

120.根据权利要求115所述的方法，其中式(I)由下式表示：

121.根据权利要求120所述的方法，其中制备得到5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺琥珀酸盐。

122.根据权利要求120所述的方法，其中制备得到5-氯-6-{2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基}-N-[(1S)-2，2，2-三氟-1-甲基乙基][1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-胺反丁烯二酸盐。