CN100473291C - 用于骨健康的含有植物提取物的食物或宠物食物组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及用于维持骨健康或预防、减轻和/或治疗骨病的组合物。本发明也涉及组合物在制造营养物、补充物或药物的用途;并涉及促进骨生长或维持骨健康的方法,所述方法包括施用有效量的该组合物。
Description
本发明涉及用于维持骨健康或预防、减轻和/或治疗骨病的组合物。本发明也涉及该组合物在制造营养物、补充物或药物中的用途;并涉及促进骨生长或维持骨健康的方法,所述方法包括施用有效量的组合物。
发明背景
健康的骨需要包括骨形成和吸收间平衡的有效骨再造。大多数骨病归咎于骨吸收增加,致使主要治疗目的是抑制骨吸收的增加,因此迄今为止研发的大多数药剂是抗吸收的。例如,雌激素抑制可促进破骨细胞产生和分化的细胞因子的产生。正在研发对骨健康有益同时降低对乳腺或子宫内膜组织产生激素副作用危险的SERMs(选择性雌激素反应调节剂)。认为它们通过与雌激素类似的机理在骨中起作用。二膦酸盐化合物(如阿伦膦酸盐、利塞膦酸盐等)集中于骨,是迄今为止最有效的骨吸收抑制剂。它们抑制关键的酶途径,该途径是破骨细胞活性和破骨细胞存活需要的。降钙素是通过抑制破骨细胞活性而抑制骨吸收的多肽激素。新的靶包括阻断TNF受体/配体家族成员及它们的信号途径,特别是阻断RANK/RANKL,抑制骨特异的金属蛋白酶如组织蛋白酶K或抑制特异的激酶。
刺激骨形成的治疗剂的研发落后于骨吸收治疗剂的研发。已知一些化学品或药剂促进人的骨生长。例如,WO 9619246描述了通过(通常为间歇而非连续)施用甲状旁腺素、PTH-相关蛋白或激动剂至少一个月促进患者骨生长的方法。在WO 9619501中,来源于胰的因子抑制骨吸收并刺激骨细胞增殖和增加骨形成。
虽然证明了这些化学品和药物化合物用于骨病的治疗,但通过提供安全、有效的营养方式来促进骨生长并预防或减轻或治疗哺乳动物的骨/关节病症状仍然是令人感兴趣的。
发明概述
因此,第一方面,本发明提供了用于预防、减轻和/或治疗骨病或维持哺乳动物骨健康的组合物,所述组合物包含至少一种选自蒲公英属(Taraxacum)和唐棣属(Amelanchier)的植物或植物提取物的有效量作为活性成分。
值得注意,现在发现一些植物或植物提取物对骨形成和修复、骨健康的维持或预防、减轻和/或治疗骨病有特别积极的效果。
根据本发明的组合物可用于人或宠物的营养物、补充物、治疗剂或药物的生产。
向哺乳动物施用本发明的组合物导致在骨折愈合期间改善骨再生。它有助于抑制骨吸收。它也有助于在生长期间增加骨形成及骨矿物质密度,并优化骨量峰值。并且,该组合物有助于降低骨丢失,特别是哺乳动物中与年龄相关的骨丢失。它降低骨质疏松症的危险。此外,它有助于构建哺乳动物的软骨,预防宠物或人的骨关节炎,从而使个体的活动或移动性更好。
另一方面,本发明涉及上述植物或植物提取物的用途,用于制备预防、减轻和/或治疗哺乳动物骨病或维持骨健康的组合物。
本发明也涉及上述植物或植物提取物的用途,用于制备抑制骨吸收的组合物。
本发明进一步涉及上述植物或植物提取物的用途,用于制备改善宠物或人的活动和/或移动性的组合物。
另外,本发明提供了治疗、减轻和/或预防哺乳动物骨病或维持哺乳动物骨健康的方法,其包括施用有效量的上述组合物。
本发明进一步提供了在生长期间增加骨形成、骨矿物质密度并优化骨量峰值、治疗或预防骨质疏松症、在骨折愈合期间刺激骨再生的方法,其包括施用有效量的上述组合物。
本发明进一步涉及治疗、减轻和/或预防宠物和人骨关节炎的方法,其包括个体食用上述组合物的步骤。
本发明进一步提供了对人或宠物降低骨丢失,特别是与年龄相关的骨丢失的方法,其包括个体食用上述组合物的步骤。
发明详述
关于本发明的第一个目的,植物或植物提取物选自蒲公英属和唐棣属。
在一个优选的实施方案中,植物或植物提取物为例如药蒲公英(Taraxacum officinale)、橡胶草(Taraxacum kok-saghyz)或卵圆形唐棣(Amelanchier ovalis)、桤叶唐棣(Amelanchier alnifolia)、平滑康棣(Amelanchier laevis)、树康棣(Amelanchier arborea)、东亚唐棣(Amelanchier asiatica)。
根据本发明的植物可来自植物源的任何部分,如叶、块茎、果实或根。在一个最优选的实施方案中,应用蒲公英种的叶或根,或唐棣种的果实,或它们的混合物。植物或植物提取物取决于植物源,可为叶、根和/或果实的干的、冷冻干燥提取物形式,或为新鲜植物,或为通过本领域公知的无机溶剂或有机溶剂提取方法获得的浓缩级分。
本发明的植物或植物提取物可用于制备食物组合物。所述组合物可为营养均衡的食物或宠物食物、膳食补充物、治疗剂或药物组合物的形式。
植物或植物提取物可单独应用或与其它植物如菊苣、茶树、可可树联合应用,或与其它生物活性分子如抗氧化剂、脂肪酸、益生素纤维、葡糖胺、硫酸软骨素联合应用。
在一个实施方案中,制备了用于人消费的食物组合物。该组合物可为营养完全配方、乳制品、冷的或常温稳定的饮料、汤、膳食补充物、膳食替代品和营养棒或甜食。
除了根据本发明的植物提取物外,营养配方可包含蛋白质源。优选应用膳食蛋白质作为蛋白质源。膳食蛋白质可为任何合适的膳食蛋白质;例如动物蛋白(如乳蛋白、肉蛋白和卵蛋白);植物蛋白(如大豆蛋白、小麦蛋白、大米蛋白和豌豆蛋白);游离氨基酸的混合物;或为它们的组合物。特别优选乳蛋白如酪蛋白、乳清蛋白和大豆蛋白。组合物也可包含碳水化合物源和脂肪源。
如果营养配方包括脂肪源,该脂肪源优选地提供营养配方中的约5%至约55%的能量;如提供约20%至50%的能量。组成脂肪源的脂类可为任何合适的脂肪或脂肪混合物。植物脂肪特别适用;如大豆油、棕榈油、椰子油、红花油、葵花子油、玉米油、芸苔油、卵磷脂等。如果需要,也可加入动物性脂肪如乳脂。
营养配方中可加入碳水化合物源。所述碳水化合物源优选地提供占该营养组合物约40%至约80%的能量。可应用任何合适的碳水化合物,如蔗糖、乳糖、葡萄糖、果糖、玉米糖浆固体和麦芽糖糊精及它们的混合物。如果需要也可加入膳食纤维。如果应用碳水化合物,则其优选地包含占营养配方约5%的能量。膳食纤维可来自任何适当来源,包括如大豆、豌豆、燕麦、果胶、瓜尔胶、阿拉伯胶和果糖寡糖。营养配方中也可包括合适的符合适当指标的维生素和矿物质。
如果需要,可在营养配方中掺入一种或多种食物级乳化剂;如单甘油酯和双甘油酯的二乙酰酒石酸酯、卵磷脂及单甘油酯和双甘油酯。同样地可包括合适的盐和稳定剂。植物提取物也可与维生素和矿物质组合。
优选可经肠施用的营养组合物;如以粉剂、片剂、胶囊剂、液态浓缩剂、固体产品或及喝饮料的形式。如果想生产粉剂营养配方,可将经过匀化加工处理的混合物转移到合适的干燥器如喷雾干燥器或冷冻干燥器并转化为粉剂。
在另一实施方案中,营养组合物包含基于乳的谷类并包含益生素的配方。优选地,基于乳的谷类是作为益生素配方的载体的未成熟谷类。
在另一实施方案中,可用至少一种本发明的植物或植物提取物强化普通食品。如发酵乳、酸奶、新鲜乳酪、凝乳、甜食如糖果或甜饮料、甜条、早餐谷片或条、饮料、奶粉、豆制品、非乳发酵品或用于临床营养的营养补充物。
组合物中植物或植物提取物的量可根据植物源和它的用途而改变。在一个优选的实施方案中,其有效日剂量至少为约1mg活性分子/天,更优选地为从1毫克至200毫克活性分子/天。
在一个实施方案中,可制备包含至少一种上述提取物或植物化学品的药物组合物,该药物组合物的量足可使个体达到预期效应。该组合物可为片剂、液体、胶囊剂、软胶囊剂、糊剂、锭剂、胶剂或可饮用溶液或乳剂、干的经口补充物、湿的经口补充物。药物组合物进一步包含适于向靶组织递送不同性质的各活性分子的载体和赋形剂。载体/赋形剂的种类和其量取决于物质的性质和药物递送和/或施用方式。可以理解熟练人员基于他自己的知识可选择适当的组分和植物剂型。
本发明的植物或植物提取物可用于制备宠物食物组合物。所述组合物可作为宠物正常饮食的补充物或作为营养完全的宠物食物组分施用,并且更优选地在低热量宠物食物中。它也可为药物组合物。
植物或植物提取物可单独应用或与其它植物如菊苣、茶树、可可树联合应用,或与其它生物活性分子如抗氧化剂、脂肪酸、益生素纤维、葡糖胺、硫酸软骨素联合应用。
优选地,宠物食物组合物对于15千克的犬,每克干宠物食物包含约0.01至0.5克干植物;对于15千克的犬,每克湿宠物食物包含约0.001至0.1克干植物。
根据本发明的营养完全的宠物食物可为粉状、干燥形式、治疗剂或为湿的、冷的或常温稳定的宠物食物产品。它可冷冻或作为常温稳定产品提供。这些宠物食物可以本领域公知的方式生产。
宠物食物也可任选包含益生素、益生微生物或其它活性剂,如长链脂肪酸。宠物食物中益生素的量优选占低于10%的重量.例如,所包含的益生素可占宠物食物重量的约0.1%至约5%。对于用菊苣作为益生素来源的宠物食物,所包括的菊苣可占食物混合物重量的约0.5%至10%;更优选地占重量的约1%至约5%。
如果应用益生微生物,宠物食物优选每克宠物食物包含约104至约1010个细胞的益生微生物;更优选每克约106至约108个细胞的益生微生物。宠物食物可包含占约0.5%至约20%重量的益生微生物混合物;优选地占重量的约1%至约6%;例如占重量的约3%至约6%。
如果需要,可向宠物食物添加矿物质和维生素以使它们营养完全。此外,根据需要,也可将多种其它成分如糖、盐、香料、调料、调味剂等掺入到宠物食物中。
在另一实施方案中,可制备膳食添加剂以改善宠物食物的质量。作为膳食添加剂,它们无论是湿的还是干的均可被封入胶囊内或可以粉剂形式提供并与正餐一起包装或单独包装。通过举例的方式,含有本发明提取物的粉末可以粉末形式包装入小袋中或包装到凝胶或脂或其它合适的载体中。根据使用者的要求,这些单独的包装单位可与正餐一起提供或为与正餐或治疗剂一同应用的多单位包装。
为达到有益效果,宠物消费的宠物食物的量取决于宠物的大小、宠物的类型和宠物的年龄。但是,每天提供每千克体重约0.5至5克干植物的宠物食物的量对犬和猫一般是足够的。
对人或动物施用上述食物或宠物食物组合物,导致在骨折愈合期间可改善骨再生。它有助于在生长期间刺激骨形成和骨矿物质密度,并优化骨量峰值。特别是它可在人或宠物的幼年期提供最佳骨生长。该食物组合物有助于预防骨丢失,特别是哺乳动物中与年龄相关的骨丢失或长期住院相关的骨丢失。它降低了骨质疏松症的危险。此外,它有助于构建哺乳动物软骨,预防宠物和人的骨关节炎,其导致个体活动或移动性更好。
下列实施例仅以阐述的形式给出,不用于限制本发明的主题。除非另有说明,所有百分数均为重量百分数。实施例之前是对附图的简述。
图1:桤叶唐棣(10μg/ml)果实的提取物:P.E.734用颅盖测定法(calvaria assay)(A)和凹陷测定法(pit assay)(B)所测定的抑制值的比较。
实施例
实施例1:唐棣种和蒲公英种对骨形成的影响
检测了植物物种唐棣和蒲公英的提取物诱导骨形成或抑制骨吸收的潜力。
材料与方法
●用于筛选测定法的提取物的制备:
磨碎的植物材料用己烷脱脂,然后用醇和水混合物进行提取,不同的水百分比为从10至90%,优选地用50%的水。醇可用甲醇或乙醇,获得提取物1a。
对该第一提取物的残余部分,用α和β糖苷酶进行酶促水解作用。酶可用酸性条件替代。此操作可在温和条件下(室温)进行或用不同酸浓度通过回流进行。含水的水解相用不互溶的溶剂提取,优选用乙酸乙酯提取获得提取物2a。
提取物可干燥、冷冻干燥或以液体形式提供。
在一些情况下,多酚可通过聚乙烯聚吡咯烷酮(PVPP)处理后丢弃,避免筛选测定的假象。
制备提取物之后,每种提取物进行称重,用二甲基亚砜(DMSO)再溶解至终浓度20mg/ml并分装置于-20℃保存。这作为母液应用并随后用各测定法所使用的培养基进行稀释。测定法系统中对一系列的剂量进行检测。在反相硅胶柱上通过用不同极性的溶剂洗脱进行分级来制备亚级分。
●骨形成测定法
BMP-2 萤光素酶测定法—用包含与萤光素酶基因可操作地连接的BMP-2 启动子的2T3细胞测定提取物的活性。细胞裂解物中萤光素酶活性增加反映BMP-2启动子活性的增加。提取物最初稀释成100μg/ml,然后进行1/2稀释至0.2μg/ml,进行测定。BMP-2启动子活性通过测定细胞提取物中萤光素酶活性进行测定。
表1 卵圆形唐棣和药蒲公英的提取物在刺激BMP-2表达中得到明显的阳性结果
拉丁名 | 英文名 | 部分 | 浓度μg/ml | 活性提取物/n° |
Amelanchierovalis | 卵圆形唐棣 | 果实 | 10 | MeOH/水/219 |
Taraxacumofficinalis | 药蒲公英 | 叶 | 50 | 乙酸乙酯/750/2034及亚级分2035 |
进一步检测了卵圆形唐棣提取物(P.E.219(MeOH/水))和药蒲公英提取物(P.E.750(乙酸乙酯))在人骨膜/前成骨细胞细胞系hPOB-tert中诱导内源性BMP-2表达的能力。
用他汀类药物作为阳性对照验证本测定法。细胞长成单层后,细胞与0.5μg/ml的洛伐他汀孵育或与植物提取物(10-50μg/ml)孵育24-48小时。用TRIzol试剂(Gibco)提取总RNA。用第一链cDNA合成试剂盒(Boehringer)对10μgRNA进行反转录。BMP-2cDNA序列用特异寡核苷酸引物(5′:TTGCGGCTGCTCAGCATGTT;3′:CATCTTGCATCTGTTCTCGGAA)在退火温度为55℃的条件下进行35个循环进行扩增。PCR产物通过琼脂糖凝胶电泳进行分离并用溴化乙锭染色进行检测。用NIH图象软件进行定量并用肌动蛋白作为管家基因对结果进行校正。
结果:
对于卵圆形唐棣(提取物浓度为10μg/ml):诱导BMP-2为1.5倍。
对于药蒲公英(提取物浓度为50μg/ml)诱导BMP-2为2倍。
实施例2:唐棣和蒲公英对骨吸收的影响
在新生骨吸收测定法中评估了实施例1制备的提取物抑制IL-1(10-10M)刺激的骨吸收的能力。评估了每种提取物在10μg/ml时抑制骨吸收的能力。
桤叶唐棣的果实提取物(10μg/ml)(P.E.734(乙酸乙酯))能在鼠颅盖测定法中抑制IL-1诱导的骨吸收(R.J.Murills,“体外骨吸收测定法”,在骨生物学原理(Principles of Bone Biology)一书中(AcademicPress)1986,第90章)。该作用在骨吸收的第二种测定法中再进行检测,第二种测定法即用在牛骨切片上的兔骨混合细胞培养物的凹陷测定法(Tezuka K等人,1992,Biochem.Biophys.Res.Commun.186(2):911-7和Lorget F.等人,2000,Biochem.Biophys.Res.Commun.268(3):899-903)。吸收凹陷通过TRAP(酒石酸抗性的酸性磷酸酶)染色进行观察,观察阳性细胞并计数。
图1显示了两种测定系统对10μg/ml提取物测得的活性的比较
实施例3:干宠物食物
饲料混合物由占约58%重量的玉米、占约5.5%重量的玉米麸、占约22%重量的鸡食、2.5%干菊苣、约10%蒲公英叶提取物组成,盐、维生素和矿物质组成其余部分。
饲料混合物装入预调节器中并弄湿。然后将湿饲料装入挤压机-炊具中并弄成胶状。离开挤压机的胶状基质通过模具挤压并压出。压出物切成合适的饲喂犬的小块,110℃干燥约20分钟,并冷却形成小块。
该干燥物食对骨和软骨健康有积极效果并增加犬的活动性。
Claims (11)
1.用于人和宠物预防、减轻和/或治疗骨病或维持骨健康的食物组合物,所述组合物包含至少一种唐棣属(Amelanchier)的植物的果实或通过用醇和水的混合物提取获得的植物提取物作为活性成分,所述组合物的有效日剂量至少为1mg活性分子/天,其中所述唐棣属植物选自卵圆形唐棣(Amelanchier ovalis)、平滑康棣(Amelanchier laevis)、树康棣(Amelanchierarborea)和东亚唐棣(Amelanchier asiatica)。
2.根据权利要求1的组合物,其中所述组合物的有效日剂量为1毫克至200毫克活性分子/天。
3.根据权利要求1的组合物,其中所述植物的果实或通过用醇和水的混合物提取获得的植物提取物来自唐棣种的果实。
4.根据权利要求1-3任意一项所述的组合物,其中所述通过用醇和水的混合物提取获得的植物提取物单独应用或与其它植物联合应用,或与抗氧化剂、脂肪酸、益生素纤维、葡糖胺或硫酸软骨素联合应用。
5.根据权利要求4的组合物,其中所述其它植物为菊苣、茶树或可可树。
6.根据权利要求1-3任意一项所述的组合物,所述组合物为营养均衡的食物或宠物食物或药物组合物的形式。
7.选自唐棣属的植物的果实或通过用醇和水的混合物提取获得的植物提取物的用途,用于制备对人或宠物预防、减轻和/或治疗骨病或维持骨健康的食物或宠物食物组合物,其中所述食物或宠物食物组合物对人或宠物在骨折愈合期间有助于骨再生,在生长期间有助于增加骨形成及骨矿物质密度,并优化骨量峰值或减少骨丢失,所述组合物的有效日剂量至少为1mg活性分子/天。
8.根据权利要求7的用途,其中所述骨丢失为与年龄相关的骨丢失。
9.选自唐棣属的植物的果实或通过用醇和水的混合物提取获得的植物提取物的用途,用于制备旨在预防或减轻人或宠物的骨关节炎症状,改善个体的活动和/或移动性的食物或宠物食物组合物。
10.根据权利要求7或9的用途,其中所述食物或宠物食物组合物为有助于构建人软骨或宠物软骨的食物或宠物食物组合物。
11.根据权利要求7或9的用途,其中组合物为如权利要求1至6中任意一项所述的组合物。
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