CN100377653C

CN100377653C - 冬枣的一种生物保鲜法

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Publication number: CN100377653C
Application number: CNB2004100245791A
Authority: CN
Inventors: 李桂凤; 李宗霖
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2004-08-20
Filing date: 2004-08-20
Publication date: 2008-04-02
Anticipated expiration: 2024-08-20
Also published as: CN1736216A

Abstract

本发明提供冬枣的一种生物保鲜法，是果蔬储藏保鲜研究领域的新突破，它从营养免疫学和分子生物学的角度提高了果品自身的免疫和抗染能力，降低了呼吸强度，抑制了有机物的水解，为果蔬保鲜研究开辟了一条新途径，实现的一种生物保鲜法；本法采用如下储藏步骤：第一步：对冬枣的储藏环境进行消毒处理；第二步：对成熟的冬枣采摘后，在一定浓度的AB溶液内浸泡或在采摘储藏的前一天向树上喷洒；第三步：对用AB溶液处理或树上喷洒处理晾干后的枣果装袋入箱；第四步：对储藏环境的温度、湿度及混合气体进行简单调控。可延长冬枣的保鲜期4—6个月，4个月的好果率达98%；货价期15—20天；与气调法相比可降低成本80%；确保了冬枣的原有风味、营养成分不变；农残与保鲜前相比降解为零。

Description

冬枣的一种生物保鲜法

技术领域：

本发明涉及冬枣的一种生物保鲜法，是果品储藏保鲜研究领域的新突破，它从营养免疫学和分子生物学的角度提高了果品自身的免疫和抗染能力，降低了果品的呼吸强度，抑制了有机物的水解，为果蔬保鲜研究开辟了一条新的途径，发明冬枣的一种生物保鲜法。

背景技术：

冬枣外形美观，口感极佳，赭红光亮，皮薄，肉质酥脆，汁液多，甜味浓烈，略有酸味，口食无渣。据测定它不但含有多种营养成分还含有多种微量元素，以及抗癌物质，环磷酸腺苷(CANP)、环磷酸鸟苷(CGNP)等，这些物质，对人们健康十分有益，对心血管病、神经衰弱、高血压、癌症和过敏性疾病等都具良好的医疗保健作用，常食可起到有病食治，无病食疗的作用。是国内外一种极优的鲜食水果，由于它本身的特性，现有的、传统的保鲜方法存在的着许多不足，不能适应市场的需求，气调贮藏，在气调库里，能延迟保鲜时间3个月，但是从库中取出的冬枣，果肉在24小时内会很快变为褐色，气调保鲜法是在各种营养成分仅是成熟期70％的白熟期采摘储藏，其一是不能解决货架期短；其二是不能保持原有的风味不变；其三是成本太高，建一个气调库近百万元；恒温储藏法，一般情况下储藏期为2个月，储藏3个月后，好果率仅达2％-3％，且对库温要求十分严格；冬枣只有储藏到四个月后在春节前后增值才明显。

国外虽有先进的科学技术，但没有鲜食的冬枣。面对广阔的国际市场，冬枣要走出国门参入国际市场竞争，必须：一要延长保鲜时间；二要延长货架期；三要解决农残的问题。

发明内容：

本发明是针对现有保鲜技术的不足，提供的一种生物保鲜法，它不仅可以延长冬枣的保鲜时间，还可以解决气调法不能解决的货架期短、不能保持原有风味不变和成本太高等问题的冬枣的一种生物保鲜法。该方法与恒温法相比可延长保鲜时间2-3倍，与气调法相比可延长货价期15-20天，可降低保鲜成本80％以上，气调保鲜法是在冬枣白熟期采摘储藏，生物保鲜法是在冬枣1/3或1/2变红时储藏，能确保冬枣的原有风味及各种营养成分不变；保鲜后的冬枣农残降解为零。

本发明的技术任务是按以下方式实现的：

经多年的储藏保鲜研究证明：冬枣本身的病害如轮纹病、浆胞病等是造成冬枣难储存的重要原因，本发明是通过采用活性“AB”溶液对冬枣进行浸泡或喷洒，从营养免疫学的角度，提高了冬枣自身的免疫能力、抗病能力和多种微生物的侵染；从分子生物学的角度降低了呼吸强度，抑制了有机物的水解，提高了保护性酶的活性，保持冬枣脆度、硬度、风味基本不变，各种营养成分、活性成分变化较小。

上述活性AB溶液的研制过程主要包括A溶液的制取过程和B溶液的提取过程，其中：

A溶液的制取过程如下：称取大蒜：2-4份、芦荟：2-4份、酵母粉：2-6份组成混合粉，加乙烯吡咯烷酮3-7份及0.1-1份的石英砂和10-28份磷酸缓冲液(PH＝6)，冰浴下充分研磨成匀浆，放入离心管，匀浆在5000-10000R/min条件下冷冻离心10-20min，取上清液，待用；

B溶液的提取过程如下：

(1)试剂：无水硫酸钠，磷酸氢二钠，丙酮，石油醚(30-60℃)，乙醚(不含过氧化物)，氯化钠，以上试剂均为分析纯；中性氧化铝(中性，层析用，200-300目)。

(2)处理氧化铝。磷酸盐处理氧化铝：取245-250份氧化铝，15-25份磷酸氢二钠，1000-1600份蒸馏水放入容积为2L的锥形瓶中，沸水浴20-30min，不时搅拌；冷却，倒掉最上层液体，用布氏漏斗抽滤；将残留物转移至平底玻璃皿中，于140-150℃干燥箱中烘烤3-5h至干；烘烤过程中需不时搅拌混匀，以避免结块，冷却后放入干燥箱中保存。

(3)失活处理氧化铝：使用前将95-100份磷酸盐处理过的氧化铝，装入具塞锥形瓶中，加6-9份去离子水，盖紧瓶塞，蒸汽浴或75-80℃干燥箱，加热3-5分钟，剧烈摇动锥型瓶，使氧化铝可以自由流动，无结块。冷却静置25-30min以上。

洗脱剂：石油醚∶乙醚(91-97∶3-9)。

把新鲜的印柬2-5份、积雪草2-5份、圆瓣姜1-3份混均打成匀浆，称取新鲜样品1-2份，或已磨碎过筛的脱水样品0.5-1份，加到具塞锥形瓶中，加入3-5份丙酮，盖上塞子，振摇3-5min，静置1-2min。将上部澄清液倒入已装有5-10份(0.12-0.16mol/L)NaCL溶液的分液漏斗中，残留物再用丙酮重复提取2-3次。然后继续用石油醚提取3-4次，每次用量约2.0-2.5份，至残渣成无色，将提取液并入同一分液漏斗中，振摇1-2min，静置分层。弃水相，有机相用蒸馏水洗涤3-4遍，至水相澄清，弃水相，将有机相再用失活磷酸盐处理过的氧化铝进行色谱净化处理，分别用极性不同的洗脱液将样品中的活性物质从干扰物中分离出来，收集石油醚∶乙醚(91-97∶3-9)洗脱组分，经无水Na₂SO₄脱水后转移至旋转蒸发瓶中，于45-55℃水浴中减压蒸馏干或立即用氮气吹干用A溶液迅速的溶解蒸干物质，再加入硝酸锌、氯化钙和水杨酸，并使该AB溶液各成分及重量配比是：

(对甲基叶绿素萘醌)4-8份

(2，3-二异丁烷基-4-甲基苯酚)8-12份

(a-Toc-氧化物或a-Toc-醌)16-21份

Zn(NO₃)₂(硝酸锌)7-11份 CaCl₂(氯化钙)19-23份

C₆H₈O₇.H₂O(水杨酸)13-16份 ODS(超氧化歧酶)1-2份

cNH[NONO](CH₂)_XNH₂p(甲胺基多胺聚乙稀)18-21份，从而制得AB溶液。

其中硝酸锌、氯化钙、水杨酸均为试剂商店购买。

该冬枣的一种生物保鲜法，是按照以下步骤进行的：

第一步：对冬枣的储藏环境进行消毒处理；

第二步：按照采收要求，对初红或半红期的枣果采摘，摘后分级，并将分级后的枣果在9mg-50mg/kg的AB溶液内浸泡10-25min或在采摘储藏的前一天向冬枣树上喷洒；

第三步：对用AB溶液处理或树上喷洒处理晾干后的枣果装袋入箱；

第四步：对储藏环境的温度、湿度及臭氧、负离子、一氧化氮、氧气、二氧化碳和乙烯组成的混合气体的浓度进行简单的调控，使温度保持在20--3℃，湿度保持78％-98％，臭氧浓度达1mg/kg-60mg/kg，负离子浓度达1.1个/cm²-8.0×10²⁰个/cm²，一氧化氮的浓度达0.8mg/kg-3.6mg/kg，氧气的浓度＜2％，二氧化碳气体的浓度＜1％，乙烯的浓度＜0.5％。

对冬枣储藏环境的消毒处理是通过二氧化硫熏蒸或40％甲醛和水以1∶1的比例配制成的溶液对墙面和地面进行喷洒或漂白粉消毒中的其中一种或几种实现的。

为了延长冬枣的保鲜期，提高保鲜质量，AB溶液的成分及重量配比是：

(对甲基叶绿素萘醌)4-6份

(2，3-二异丁烷基-4-甲基苯酚)9-12份

或

(a-Toc-氧化物或a-Toc-醌)18-20份

Zn(NO₃)₂(硝酸锌)8-10份 CaCl₂(氯化钙)20-23份

C₆H₈O₇.H₂O(水杨酸)13-15份 ODS(超氧化歧酶)1-2份

cNH[NONO](CH₂)_XNH₂p(甲胺基多胺聚乙稀)19-20份。

其中硝酸锌、氯化钙、水杨酸均为试剂商店购买。

温度控制在20--0.9℃之间。

用冰控制储藏环境的湿度在78％-93.9％之间。

臭氧浓度控制在1mg/kg-14.9mg/kg或25.1mg/kg-60mg/kg，负离子浓度控制在1.1个/cm²-1.1×10³个/cm²或1.1×10⁶个/cm²-8.0×10²⁰个/cm²，一氧化氮的浓度控制在0.8mg/kg-1.6mg/kg，氧气的浓度＜2％，二氧化碳气体的浓度＜1.0％，乙烯的浓度＜0.5％。

本发明的冬枣的一种生物保鲜法与现有技术相比，所产生的有益效果是：

其一是提高了自身的免疫能力和抗病能力，解决了微生物的侵染问题；

其二是降低了呼吸强度，抑制了有机物的水解；

其三是生物保鲜法是在冬枣1/3或1/2变红的成熟时储藏，确保了冬枣的原有风味和各种营养成分基本不变；

其四是消除了在储藏过程中产生的乙烯气体，冬枣的农残与保鲜前相比降解为零；

其五是解决了气调法不能解决的货架期短的问题，与气调法相比可延长货价期15-20天；

其六是与气调法相比可降低保鲜成本80％。

具体实施方式：

实施例1：

第一步：用二氧化硫熏蒸。具体做法是在50立方米空间的房间内将2.0千克硫磺点燃熏烟，密闭36小时后通风；

第二步：适时采收、分级做好贮前处理。按照采收要求，枣果在成熟半红或1/3红时采摘，摘后分级，分别采取储前处理，即在15mg/kg的AB溶液内浸果20分钟。

AB溶液的研制：

A溶液的制取过程：称取大蒜2克、芦荟2克、酵母粉1克组成混合粉5g，加乙烯吡咯烷酮2.5g及少量的石英砂和5ml磷酸缓冲液(PH＝6)，冰浴下充分研磨成匀浆，放入离心管，匀浆在10000R/min条件下冷冻离心10min，取上清液，待用。

B溶液的提取过程：

(2)处理氧化铝：磷酸盐处理氧化铝：取250g氧化铝，20g磷酸氢二钠，1.6L蒸馏水放入容积为2L的锥形瓶中，沸水浴30min，不时搅拌。冷却，倒掉最上层液体，用布氏漏斗抽滤。将残留物转移至平底玻璃皿中，于150℃干燥箱中烘烤3-5h至干。烘烤过程中需不时搅拌混匀，以避免结块，冷却后放入干燥箱中保存。

(3)失活处理氧化铝：使用前将100g磷酸盐处理过的氧化铝，装入具塞锥形瓶中，加9ml去离子水，盖紧瓶塞，蒸汽浴或80℃干燥箱，加热3-5分钟，剧烈摇动锥型瓶，使氧化铝可以自由流动，无结块。冷却静置30min以上。

洗脱剂：石油醚∶乙醚(91-97∶3-9)。

(4)操作步骤：把新鲜的印柬8克、积雪草5克、圆瓣姜3克混均打成匀浆，称取新鲜样品10g，或已磨碎过筛的脱水样品5g，加到具塞锥形瓶中，加入45ml丙酮，盖上塞子，振摇4min，静置1min。将上部澄清液倒入已装有90ml(0.14mol/L)NaCL溶液的分液漏斗中，残留物再用丙酮重复提取3次。然后继续用石油醚提取3次，每次用量约25ml，至残渣成无色，将提取液并入同一分液漏斗中，振摇1min，静置分层。弃水相，有机相用蒸馏水洗涤3遍，至水相澄清。弃水相，将有机相再用失活磷酸盐处理过的氧化铝进行色谱净化处理，分别用极性不同的洗脱液将样品中的活性物质从干扰物中分离出来，收集石油醚∶乙醚(91-97∶3-9)洗脱组分，经无水Na₂SO₄脱水后转移至旋转蒸发瓶中，于50℃水浴中减压蒸馏干或立即用氮气吹干；用A溶液迅速的溶解蒸干物质，然后加入硝酸锌0.08克；氯化钙0.2克；水杨酸0.13克，制得AB溶液。

第三步：装袋入箱。用上述制得的AB溶液浸泡处理后晾干的枣果，装入容积为6千克，厚度为0.05毫米的聚乙烯塑料打孔袋中(一般每盛1千克枣果打2-3毫米孔1-2个)，袋向上不扎口，放入容量为11千克的贮藏箱或周转箱中单层排放入贮藏架上，不要堆叠，每箱间留有空隙，不要靠的太紧。每批移入数量不超过总容量的1/20。将第一批移入的包装袋口扎紧，并码放成垛，再继续移入第二批枣果，以此类推，分批移入。防止一次性移入量太大，温度回升太高，导致贮藏失败。

第四步：温度调控。当冬枣全部移入保鲜间以后，要逐步将环境的温度降低，一般3天降低1℃，不可降温幅度太大。贮藏冬枣的最适恒温应该通过冰点测定而定，本发明一般采用在-1℃。

第五步：保鲜间内湿度的控制。贮藏房间中若湿度太小，就造成枣果的失水失重，湿度过大会造成枣果裂口，本发明在贮藏的环境中，借助冰加湿的作用，保持湿度在90％。

第六步：气体的控制。保持储藏环境中臭氧的浓度在20mg/kg左右，负离子的浓度在1.1×10⁶个/cm³，NO的浓度1.0mg/kg，CO2↑的浓度＜1％，O₂↑的浓度＜2％，CH2＝CH2↑的浓度＜0.5％。

实施例2：

第一步：用40％甲醛和水以1∶1的比例配制成的溶液对墙面和地面进行喷洒，喷后密闭24小时再通风换气。

第二步：适时采收、分级做好贮前处理。按照采收要求，枣果是在成熟期的1/3或1/2变红时采摘，在采摘储藏的前一天用20mg/kg的AB溶液向冬枣树上喷洒；

AB溶液的研制：

A溶液的制取过程：称取大蒜1.5克、芦荟1.5克、酵母粉2克组成混合粉5g，加乙烯吡咯烷酮3g及少量的石英砂和6ml磷酸缓冲液(PH＝6)，冰浴下充分研磨成匀浆，放入离心管，匀浆在8000R/min条件下冷冻离心15min，取上清液，待用。

B溶液的提取过程：

洗脱剂：石油醚∶乙醚(91-97∶3-9)。

(4)操作步骤：把新鲜的印柬8克、积雪草8克、圆瓣姜4克混均打成匀浆，称取新鲜样品10g，或已磨碎过筛的脱水样品6g，加到具塞锥形瓶中，加入40ml丙酮，盖上塞子，振摇4min，静置1min。将上部澄清液倒入已装有80ml(0.14mol/L)NaCL溶液的分液漏斗中，残留物再用丙酮重复提取3次。然后继续用石油醚提取3次，每次用量约26ml，至残渣成无色，将提取液并入同一分液漏斗中，振摇1min，静置分层，弃水相，将有机相再用失活磷酸盐处理过的氧化铝进行色谱净化处理，分别用极性不同的洗脱液将样品中的活性物质从干扰物中分离出来，收集石油醚∶乙醚(91-97∶3-9)洗脱组分，经无水Na₂SO₄脱水后转移至旋转蒸发瓶中，于45℃水浴中减压蒸馏干或立即用氮气吹干，用A溶液迅速的溶解蒸干物质，然后加入硝酸锌0.1克；氯化钙0.23克；水杨酸0.15克.制得AB溶液。

第三步：装袋入箱。用上述制得的AB溶液树上喷洒处理后晾干的枣果，装入容积为6千克，厚度为0.05毫米的聚乙烯塑料打孔袋中(一般每盛1千克枣果打2-3毫米孔1-2个)，袋向上不扎口，放入容量为11千克的贮藏箱或周转箱中移入单层排放入贮藏架上，不要堆叠，每箱间留有空隙，不要靠的太紧。移入时每批数量不超过总容量的1/20，将第一批移入的包装袋口扎紧，并码放成垛，再继续移入第二批枣果，以此类推，分批移入。防止一次性移入量太大，温度回升太高，而导致贮藏失败。

第四步：温度调控。当冬枣全部移入储藏房间以后，要逐步将环境的温度降低，一般3天降低1℃，不可降温幅度太大。贮藏冬枣的最适恒温应该通过冰点，测定而定，本发明一般采用在-2℃。

第五步：借助冰保持湿度在85％。

第六步：保持储藏环境中臭氧的浓度在26.0mg/kg左右，负离子的浓度在1.0×10¹²个/cm³，NO的浓度2.5mg/kg，CO2↑的浓度＜1％，O₂↑的浓度＜2％，CH2＝CH2↑的浓度＜0.5％。

实施例3：

第一步：用漂白粉消毒。取40克漂白粉加水1千克配成溶液，仔细喷洒在墙壁、房顶和地面上；

第二步：适时采收、分级做好贮前处理。按照采收要求，枣果在成熟半红期采摘，摘后分级，分别采取储前处理，即在10mg/kg的AB溶液内浸果25分钟。

AB溶液的研制：

A溶液的制取过程：称取大蒜4克、芦荟4克、酵母粉2克组成的混合粉10g，加乙烯吡咯烷酮5g及少量的石英砂和10ml磷酸缓冲液(PH＝6)，冰浴下充分研磨成匀浆，放入离心管，匀浆在10000R/min条件下冷冻离心13min，取上清液，待用。

B溶液的提取过程：

洗脱剂：石油醚∶乙醚(91-97∶3-9)。

(4)操作步骤：把新鲜的印谏4克、积雪草6克、圆瓣姜3克混均打成匀浆，称取新鲜样品10g，或已磨碎过筛的脱水样品5g，加到具塞锥形瓶中，加入45ml丙酮，盖上塞子，振摇3min，静置1min。将上部澄清液倒入已装有60ml(0.14mol/L)NaCL溶液的分液漏斗中，残留物再用丙酮重复提取4次。然后继续用石油醚提取2次，每次用量约20ml，至残渣成无色，将提取液并入同一分液漏斗中，振摇1min，静置分层。弃水相，将有机相再用失活磷酸盐处理过的氧化铝进行色谱净化处理，分别用极性不同的洗脱液将样品中的活性物质从干扰物中分离出来，收集石油醚∶乙醚(91-97∶3-9)洗脱组分，经无水Na₂SO₄脱水后转移至旋转蒸发瓶中，于55℃水浴中减压蒸馏干或立即用氮气吹干，用A溶液迅速的溶解蒸干物质，硝酸锌0.9克；氯化钙0.21克；水杨酸0.14克，制得AB溶液。

第三步：装袋入箱。用上述制得的AB溶液浸泡处理后晾干的枣果，装入容积为6千克，厚度为0.05毫米的聚乙烯塑料打孔袋中(一般每盛1千克枣果打2-3毫米孔1-2个)，袋口向上不扎口，放入容量为11千克的贮藏箱或周转箱中单层排放贮藏架上，不要堆叠，每箱间留有空隙，不要靠的太紧。每批移入的数量不超过总容量的1/20，将第一批移入的包装袋口扎紧，并码成垛，再继续移入第二批枣果，以此类推。防止一次性移入量太大温度回升太高，导致贮藏失败。

第四步：温度调控。当冬枣全部移入储藏间后，要逐步将环境的温度降低，一般3天降低1℃，不可降温幅度太大。贮藏冬枣的最适恒温应该通过冰点，测定而定，本发明一般采用在20℃。

第五步：贮藏房间内湿度的控制。贮藏间中若湿度太小，就造成枣果的失水失重，太大会造成枣果裂口，本发明在贮藏的环境中，借助冰的作用，保持湿度在78％。

第六步：气体的控制。保持储藏环境中臭氧的浓度在30.0mg/kg左右，负离子的浓度在1.0×10²⁰个/cm³，NO的浓度1.8mg/kg，CO2↑的浓度＜1％，O₂↑的浓度＜2％，CH2＝CH2↑的浓度＜0.5％。

Claims

1.冬枣的一种生物保鲜法，其特征在于该方法是按照以下步骤进行的：

第一步：对冬枣的储藏环境进行消毒处理；

第二步：按照采收要求，对初红或半红期的枣果采摘，摘后分级，并将分级后的枣果在9mg-50mg/kg的AB溶液内浸泡10-25分钟或在采摘储藏的前一天向冬枣树上喷洒；

第四步：对储藏环境的温度、湿度及臭氧、负离子、一氧化氮、氧气、二氧化碳和乙烯组成的混合气体的浓度进行简单的调控，使温度保持在20--3℃，用冰保持湿度在78％-98％，臭氧浓度达1mg/kg-60mg/kg，负离子浓度达1.1个/cm²-8.0×10²⁰个/cm²，一氧化氮的浓度达0.8mg/kg-3.6mg/kg，氧气的浓度＜2％，二氧化碳气体的浓度＜1％，乙烯的浓度＜0.5％。

2.根据权利要求1所述的冬枣的一种生物保鲜法，其特征在于AB溶液的浓度为11mg-50mg/kg；浸泡时间为11-25分钟或在采摘储藏的前一天向冬枣树上喷洒；

3.根据权利要求1所述的冬枣的一种生物保鲜法，其特征在于，温度控制在20--0.9℃之间。

4.根据权利要求1所述的冬枣的一种生物保鲜法，其特征在于，用冰控制储藏环境的湿度在78％-93.9％之间。

5.根据权利要求1所述的冬枣的一种生物保鲜法，其特征在于，臭氧浓度控制在1mg/kg-14.9mg/kg或25.1mg/kg-60mg/kg，负离子浓度控制在1.1个/cm²-1.1×10³个/cm²或1.1×10⁶个/cm²-8.0×10²⁰个/cm²，一氧化氮的浓度控制在0.8mg/kg-1.6mg/kg，氧气的浓度＜2％，二氧化碳气体的浓度＜1.0％，乙烯的浓度＜0.5％。

6.根据权利要求1所述的冬枣的一种生物保鲜法，其特征在于，AB溶液的制备方法包括A溶液的制取过程和B溶液的提取过程：

A溶液的制取过程如下：

称取大蒜：2-4份、芦荟：2-4份、酵母粉：2-6份组成混合粉，加乙烯吡咯烷酮3-7份及0.1-1份的石英砂和10-28份磷酸缓冲液，冰浴下充分研磨成匀浆，放入离心管，匀浆在5000-10000R/min条件下冷冻离心10-20min，取上清液，待用；

B溶液的提取过程如下：

(1)试剂：无水硫酸钠，磷酸氢二钠，丙酮，石油醚，乙醚，氯化钠，以上试剂均为分析纯；中性氧化铝；

(2)处理氧化铝。磷酸盐处理氧化铝：取245-250份氧化铝，15-25份磷酸氢二钠，1000-1600份蒸馏水放入容积为2L的锥形瓶中，沸水浴25-30min，不时搅拌；冷却，倒掉最上层液体，用布氏漏斗抽滤，将残留物转移至平底玻璃皿中，于145-1500℃干燥箱中烘烤3-5h至干；烘烤过程中需不时搅拌混匀，以避免结块，冷却后放入干燥箱中保存；

(3)失活处理氧化铝：使用前将95-100份磷酸盐处理过的氧化铝，装入具塞锥形瓶中，加6-9份去离子水，盖紧瓶塞，蒸汽浴或75-800℃干燥箱，加热3-5分钟，剧烈摇动锥型瓶，使氧化铝可以自由流动，无结块，冷却静置20-30min以上。

洗脱剂：石油醚：乙醚。

把新鲜的印柬2-5份、积雪草2-5份、圆瓣姜1-3份混均打成匀浆，称取新鲜样品1-2份，或已磨碎过筛的脱水样品0.5-1份，加到具塞锥形瓶中，加入3-5份丙酮，盖上塞子，振摇3-5min，静置1-2min；将上部澄清液倒入已装有5-10份NaCL溶液的分液漏斗中，残留物再用丙酮重复提取2-3次；然后继续用石油醚提取3-4次，每次用量约2.0-2.5份，至残渣成无色，将提取液并入同一分液漏斗中，振摇1-2min，静置分层，弃水相，将有机相再用失活磷酸盐处理过的氧化铝进行色谱净化处理，分别用极性不同的洗脱液将样品中的活性物质从干扰物中分离出来，收集石油醚：乙醚洗脱组分，经无水Na₂SO₄脱水后转移至旋转蒸发瓶中，于45℃-55℃水浴中减压蒸馏干燥或立即用氮气吹干，最后用A溶液迅速的溶解蒸干物质，再加入硝酸锌、氯化钙和水杨酸，并使AB溶液中各成分及重量配比是：