CH665832A5

CH665832A5 - Sale di d,l-lisina dell'acido 1-(4-clorobenzoil)-5-metossi-2-metil-1h-acetico e composizioni farmaceutiche che lo contengono.

Info

Publication number: CH665832A5
Application number: CH3804/85A
Authority: CH
Inventors: Alberto Reiner
Original assignee: Sigma Tau Ind Farmaceuti
Priority date: 1984-09-06
Filing date: 1985-09-04
Publication date: 1988-06-15
Also published as: DE3531279C2; IT8448807A1; FR2569690A1; IT8448807A0; IT1178411B; FR2569690B1; AT385986B; ATA260385A; DE3531279A1

Description

DESCRIZIONE La presente invenzione riguarda il sale di D,L-lisina dell'acido l-(4-clorobenzoil)-5-metossi-2-metil-lH-indol-3- acetico quale composto chimico e le composizioni farmaceutiche ad azione antiinfiammatoria contenenti il sale quale principio attivo.

Sono note da lungo tempo le proprietà antiinfiammatorie, antipiretiche e analgesiche dell'acido l-(4-clorobenzoil)-5--metossi-2-metil-lH-indol-3 acetico o indometacina che lo rendono particolarmente utile nella cura dell'artrite reumatoide, della spondilite anchilosante, della gotta e dell'osteoartrite.

Sebbene l'indometacina sia generalmente ben tollerata, essa può tuttavia provocare degli effetti tossici e collaterali, particolarmente a carico dell'apparato gastrointestinale. Questi effetti non desiderati sono ascrivibili, almeno in parte, alla idroinsolubilità dell'indometacina che ne rende impossibile la formulazione in composizioni somministrabili per via parenterale, mentre 25 le forme orali e rettali in commercio hanno mostrato frequentemente una indesiderabile azione aggressiva nei confronti della mucosa gastrica e intestinale.

Per superare questi problemi, sono stati da tempo descritti sali idrosolubili dell'indometacina con amminoacidi naturali, 30 quali lisina e arginina o con ammine quali la N-metil-D-gluc-ammina.

Ad esempio, nella domanda di brevetto francese 7 305 161 (n. di pubblicazione 2 217 003) depositata il 14 febbraio 1973 a nome Instituto de Investigaciones terapeutical, S.A. è descritta 35 la preparazione di sali idrosolubili dell'acido l-(p-clorobenzoil)--2-metil-5-metossi-benzopirrilacetico con lisina e arginina. Nella descrizione non è specificato se il sale è ottenuto per reazione dell'acido sopramenzionato con la L-, la D- oppure la D,L-lisina. Tuttavia, confrontando il punto di fusione del sale la 40 cui preparazione è illustrata nell'esempio 2 della domanda di brevetto francese, con il punto di fusione del sale della presente invenzione, si desume che il sale del brevetto francese è quello con L-lisina. Ciò appare del resto ben comprensibile considerando che l'isomero L non solo è la forma «naturale» dell'am-45 minoacido, ma anche quella reperibile a minor costo.

Si è ora sorprendentemente trovato che il sale di D,L-Iisina dell' acido 1 -(4-clorobenzoil)-5-metossi-2-metil-1 H-indol-3 acetico, avente formula (A)

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ch3°.

S-An

I

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c/oVci

(i)

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3

665 832

in cui (I) è l'anione di detto acido e (II) è il catione della D,L-lisina, è notevolmente più idrosolubile del corrispondente, già noto, sale di L-lisina precedentemente menzionato. Infatti, mentre il sale di L-lisina ha una solubilità di 7,6 grammi/litro di acqua distillata a 26°C, la solubilità del sale di D,L-lisina secondo la presente invenzione è di 12,5 grammi/litro di acqua distillata a 26°C.

Un procedimento per la preparazione del sale di D,L-lisina dell'acido l-(4-clorobenzoil)-5-metossi-2-metil-lH-indol-3 acetico, comprende gli stadi di:

(1) contattare quantità equimolecolari di acido l-(4-cloro-benzoil)-5-metossi-2-metil-lH-indol-3 acetico e di D,L-lisina base in un solvente di reazione con ottenimento di un grezzo comprendente il composto di formula (A) che viene separato dal solvente di reazione, lavato ed essiccato sotto vuoto;

(2) sciogliere il prodotto risultante dallo stadio (1) in una fase idroalcolica, innalzare la temperatura della risultante soluzione a 60-80°C e quindi raffreddare bruscamente a 10-5°C sotto veloce agitazione con ottenimento di cristalli micronizzati del composto di formula (A), che vengono separati, lavati ed essiccati sotto vuoto.

In vista di tale superiore idrosolubilità, il sale della presente invenzione è non solo più adatto del corrispondente sale di L-lisina alla preparazione di composizioni somministrabili per via parenterale, ma è il composto di elezione della indometacina per preparare una composizione somministrabile per via orale in fórma di compressa a velocità di rilascio costante del principio attivo. Preferibilmente, la composizione di tale compressa è quella descritta e rivendicata nella domanda di brevetto europea 85 830 182.3 depositata il 16 luglio 1985 dalla stessa Richiedente della presente domanda. In breve, tale compressa a rilascio controllato comprende un serbatoio («reservoir») consistente di una matrice solida di una miscela omogenea di un materiale polimerico, di almeno parte del principio attivo e di un additivo solubile nel succo gastrico con calore di soluzione negativo; un rivestimento sulla matrice-serbatoio costituito da una prima membrana insolubile, di controllo, che modula la velocità di rilascio del principio attivo secondo la desiderata cinetica; è una seconda membrana, di protezione, di materiale polimerico solubile, sovrapposta alla membrana di controllo. Secondo una forma particolarmente preferita, la matrice-serbatoio della compressa ha forma di discoide biconvesso di diametro compreso fra 6 e 16 mm, il raggio di curvatura dei segmenti sferici del discoide biconvesso è compreso fra 10 e 18 mm e il rapporto diametro : spessore del discoide biconvesso è compreso fra 2 e 5.

Pertanto, costituiscono oggetto della presente invenzione anche composizioni farmaceutiche somministrabili per via orale o parenterale ad attività antiinfiammatoria, antipiretica ed analgesica per il trattamento terapeutico di artrite reumatoide, spondilite anchilosante, gotta ed osteoartrite comprendenti una quantità terapeuticamente efficace di sale di D,L-lisina dell'acido l-(4-clorobenzoil)-5-metossi-2-metil-lH-indol-3- acetico quale principio attivo e un eccipiente farmacologicamente accettabile.

È stato trovato che una dose adatta di sale di D,L-lisina dell'indometacina è da 10 a 70 mg/kg di peso corporeo/giorno. Forme di dosaggio unitario contengono opportunamente da 100 -a 500 mg di principio attivo.

Degli esempi non limitativi che seguono, l'esempio 1 illustra la preparazione del sale di D,L-lisina dell'indometacina, mentre l'esempio 2 illustra la preparazione di compresse a velocità di rilascio costante del principio attivo.

Esempio 1

Preparazione del sale di D,L-lisina dell'indometacina

(1) Reazione di salificazione dell'indometacina con la D,L-lisi-

na base.

Quantità praticamente equimolecolari di D,L-lisina cristalli (146 kg) e indometacina F.U. microcristalli (357 kg) vennero sciolte in acetone (4,500 kg). La risultante miscela di reazione venne tenuta sotto agitazione per 4 ore a 40°C in un reattore smaltato munito di camicia di riscaldamento e agitatore. Il prodotto grezzo di reazione venne centrifugato, lavato abbondantemente con una soluzione di acetone al 20% in volume di acqua ed essiccato a una temperatura non superiore a 40° C in forni di essiccamento sotto vuoto.

(2) Cristallizzazione e purificazione del sale grezzo di D,L-lisi-

na dell'indometacina.

Questa operazione venne effettuata allo scopo di ottenere dei cristalli micronizzati non meccanicamente ma mediante l'uso di solventi chimici per conferire al principio attivo una perfetta uniformità dimensionale indispensabile per produrre forme farmaceutiche costantemente biodisponibili. 400 kg di sale grezzo di D,L-lisina dell'indometacina vennero disciolti in 3000 kg di etanolo al 95% in volume in un reattore munito di camicia di riscaldamento e di mezzi per il rapido raffreddamento e per la vorticosa agitazione del contenuto del reattore.

La soluzione, mantenuta sotto rapida agitazione, venne portata alla temperatura di ebollizione dell'etanolo. Si aggiunsero litri 1000 di acqua deionizzata e quindi la soluzione venne bruscamente raffreddata a 5°C con ottenimento di un precipitato che venne centrifugato, lavato con acetone ed essiccato in essiccatori sotto vuoto ad una temperatura non superiore a 40°C.

Si ottennero 300 kg (resa del 75%) di sale puro di D,L-lisina dell'indometacina, avente le seguenti caratteristiche:

caratteristiche organolettiche: polvere microcristallina da debolmente gialla a gialla, inodore e praticamente insapore;

solubilità: 12,5 g/1 di acqua distillata, a 26°C. Poco solubile negli alcooli. Praticamente insolubile in cloroformio e negli esteri;

punto di fusione: 204-207°C (con decomposizione);

spettro UV: lo spettro di assorbimento di una soluzione eta-nolica 2 mg/1 (p/v) esaminata in euvetta da cm 1 di percorsdo ottico, presenta 2 massimi di assorbimento: 267 ± 1 nm e 321 ± 1 nm;

spettro IR: lo spettro di assorbimento all'infrarosso eseguito in Nujol, per il sale in questione, mostra dei massimi di assorbimento caratteristici alle seguenti lunghezze d'onda:

— a 1680 cm-1 assorbimento del carbonile ammidico

— a 1630 cm"1 assorbimento dello ione carbossile

— a 1300 cm"1 assorbimento dello ione carbossile;

spettro NMR: D20, 8 1,32-2,03 m 6H (3CH2); 2,15 s 3H

(1CH3); 2,9-3,13 12H (1CH2); 3,46 s 2H (1CH2(; 3,65 s 3H (ICH3); 3,7-3,86 t IH (ICH); 6,16-6,56 m 2H (Arom); 6,9-7,46 m 5H (Arom);

Identificazione cristallografica: l'esame difrattometrico-cristallografico è stato condotto con difrattometro Philips. Il confronto dei difrattogrammi relativi all'indometacina tal quale (1), alla D,L-lisina base tal quale (2) e al loro prodotto di reazione dimostra senza alcun dubbio che nella salificazione di (1) e (2) si è formata una fase cristallina nuova corrispondente a un vero composto chimicamente ben definito.

Esempio 2

Preparazione di compresse del sale di D,L-lisina dell'indometacina a velocità di rilascio costante del principio attivo.

a) Preparazione del deposito monolitico

Per la preparazione di 1000 depositi monolitici vennero impiegate le seguenti quantità di prodotti:

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

665 832

4

Sale di D,L-lisina dell'indometacina g 100

idrossipropil metil cellulosa

3,0 g

(preparato come indicato nell'esempio 1)

(Pharmacoat 606, Shin Etsu Chemical)

Cellulosa acetato propionato g io titanio biossido

1,0 g

(peso molecolare medio = 75.000 Eastman Kodak, tipo 482-20)

5 magnesio carbonato

2,5 g

Na2HP04

g 80

sale di D,L-lisina dell'indrometacina

5,0 g

Mannitolo g 70

miscela solvente

(acetone : isopropanolo, 1:1)

88 ml

Talco

Magnesio stearato g 60 g 3

In un mescolatore per polveri vennero introdotti il principio attivo, il sodio fosfato, il mannitolo e il talco che vennero mescolati fino ad ottenete una miscela completamente omogenea.

Si preparò una soluzione del materiale polimerico in 55 mi di acetone : isopropanolo 1:1 bagnando quindi la miscela di polveri. La massa venne quindi granulata su griglia di 800 n, essiccata e ripassata su rete da 420 p..

Il granulato ottenuto venne miscelato con il magnesio stearato, e quindi sottoposto a compressione utilizzando punzoni bombati del diametro 12 ad una pressione di circa 3000 kg/cm2 producendo dei depositi monolitici lenticolari biconvessi (si veda la figura 1 della domanda di brevetto europea 85 830 182.3 depositata il 16 giugno 1985 dalla stessa richiedente della presente domanda di brevetto).

Le caratteristiche geometriche di tali depositi monolitici furono le seguenti:

12 mm

14 mm 4

1,15 cm2 2,30 cm2 0,30 cm2 2,60 cm2

diametro raggio di curvatura dei segmenti sferici formanti la lente rapporto diametro/spessore area superficiale esposta area di un singolo segmento sferico area della coppia di segmenti sferici area della superficie laterale area totale

(b) Applicazione della membrana di controllo

Per l'applicazione della membrana di controllo della cessione del principio attivo si impiegarono i seguenti prodotti:

copolimero acrilico a bassa permeabilità 4,5 g

(EUDRAGITR RS, Röhm Pharma)

copolimero acrilico ad elevata permeabilità 18,2 g (EUDRAGIT R RL, Röhm Pharma)

olio di ricino 0,6 g acetone 110 mi isopropanolo 110 mi

L'applicazione della membrana di controllo sui depositi monolitici venne realizzata in bassina secondo procedure note spruzzando la soluzione polimerica a brevi intervalli seguiti da pause di essiccamento con aria fredda.

Lo spessore della membrana di controllo fu di circa 0,06 mm che risultò equivalente a 5,4 mg di rivestimento/cm2 di superficie del deposito monolitico lenticolare.

(c) Applicazione della membrana protettiva

Per l'applicazione della membrana protettiva si impiegarono i seguenti prodotti:

La soluzione di materiale polimerico per l'applicazione della membrana protettiva venne applicata, utilizzando come nel caso della membrana di controllo una bassina, sui depositi monolitici rivestiti con la membrana di controllo provenienti dalla fais se precedente.

L'operazione relativa all'applicazione della membrana protettiva venne effettuata caricando nella soluzione di materiale polimerico la quantità di principio attivo calcolato nel 10% della dose totale.

20 Le caratteristiche cinetiche della cessione del sale di D,L-lisina dell'indometacina vennero determinate sia «in vitro» che «in vivo».

Prove «in vitro»

25 Le prove «in vitro» vennero effettuate sia sui depositi monolitici non rivestiti che sulle compresse finite, cioè sui depositi monolitici rivestiti sia con la membrana di controllo che con la membrana protettiva caricata con la quota di principio attivo che si desiderava risultasse immediatamente disponibile.

Per tali determinazioni venne utilizzato l'apparecchio di dissoluzione della USP XX «paddle» e come fluido di cessione acqua distillata a 37°C.

I risultati delle prove «in vitro» ottenuti sono qui di seguito riportati:

35

A - Cessione del sale di D,L-lisina dell'indometacina dal deposito monolitico

Tempo (min)

30 60 90 120

mg di farmaco decuti

20 54 65 75

B - Cessione del sale di D,L-lisina dell'indometacina dal deposito monolitico rivestito sia con la membrana di controllo che con la membrana protettiva caricata con una quota di principio attivo

50

Tempo (ore)

1

2

3

4

5

6

mg di farmaco ceduti

14 25 40 57 77 93

I risultati ottenuti indicano chiaramente che il principio attivo viene totalmente ceduto dal deposito monolitico con velocità decrescente in circa 5 ore. Dopo l'applicazione della membrana di controllo la cessione viene mantenuta sino alla sesta ora a una velocità «in vitro» costante, compresa fra 10 e 20 mg/ora.

Prove «in vivo»

La stessa compressa venne somministrata ad un volontario sano. Si rivelarono i seguenti livelli ematici di principio attivo:

5

665 832

Tempo (ore)

1

2 5 8

12 24

mcg/ml

1,6

2,5 3,2 1,5 1,1 0,8

Proprietà farmacologiche

Con il composto dell'invenzione vennero effettuati dei test farmacologici, allo scopo di verificarne l'attività in confronto all'indometacina.

Le procedure dei test ed i relativi risultati vengono qui di seguito illustrati.

(1) DL 50 nel topo

Vennero usati topi albini di tipo Swiss di ambo i sessi, aventi peso corporeo compreso tra 23 e 25 gr. Il trattamento per os venne effettuato per mezzo di sonda gastrica dopo aver disciolto in acqua o sospeso in gomma arabica al 5% i prodotti in esame.

La stessa procedura venne seguita per il trattamento intrape-ritoenale.

La DL 50 venne calcolata con il metodo di Spearman-Karber riportando i limiti fiduciali al 95%.

(2) DL 50 nel ratto

Vennero usati ratti albini di ceppo Sprague-Dawley di ambo i sessi del peso corporeo di gr 200-210.1 composti in esame vennero disciolti in acqua oppure sospesi in gomma arabica al 5%.

(3) Attività ulcero gena

Vennero usati ratti Sprague-Dawley di sesso maschile del peso de gr 200 circa. Le sostanze in esame vennero disciolte in acqua o sospese in gomma arabica al 5%. Venne seguito lo schema sperimentale descritto da Shriver D. A., White C.B., San-dor A., e Rosenthal M.E., in Toxicology and Applied Pharma-cology 32, 73, 1975.

Le lesioni gastriche vennero valutate con i seguenti punteggi:

0 Nessuna lesione

1 Suffusioni emorragiche

2 Numerose piccole ulcerazioni

3 Grande ulcera e diverse piccole ulcerazioni

4 Numerose grandi ulcerazioni

5 Ulcera perforata o morte d'animale.

di carragenina. La determinazione del volume della zampa venne ripetura 5 ore più tardi. Il confronto dell'incremento di volume di ciascun gruppo sperimentale con quello ottenuto per il gruppo di controllo (posto = 100) permise di calcolare l'inibi-s zione percentuale dell'edema.

(5) Valutazione dell'attività analgesica

Vennero usati topi albini maschi di ceppo Swiss del peso di io gr 30-40 sui quali venne eseguito il test della inibizione dello «strechting or writhing» indotto da acido acetico (Witkin L.B., Huebner C.F., Galdi F., O' Keefe E., Spitaletta P., Plummer A.J., J. Pharmacol. Exp. Therap., 133, 400, 1961).

Nel primo giorno della prova vennero selezionati topi che i5 esibivano in 15 minuti (da 5 a 20 minuti dopo l'iniezione intraperitoneale di 0,35 mi si acido acetico allo 0,6%) non meno di 20 e non più di 50 contorsioni.

Il numero medio di risposte risultò di 32,7 contorsioni in 15 minuti. Gli animali vennero poi suddivisi in gruppi sperimentali 20 che, nel secondo giorno della prova, furono trattati con indometacina o D,L-lisinato di indometacina alle dosi dl 1, 2, 4 e 8 mg/kg, iniettate per via sottocutanea. Le sostanze furono sciolte in acqua deionizzata; alla soluzione di indometacina venne aggiunta goccia a goccia una soluzione di NaOH 5N fino a 25 scomparsa del residuo non disciolto.

Venti minuti più tardi si iniettò a ciascun animale acido acetico allo 0,6% (0,35 mi per topo); si attesero 5 minuti e si contarono le contorsioni di ciascun topo per 15 minuti.

Il numero medio di contorsioni calcolato per ciascun gruppo 30 sperimentale di topi venne confrontato con il numero medio osservato nel primo giorno della prova (32,7 posto = 100) per calcolare l'inibizione percentuale dello «strechting or writhing» provocata da ciascuna dose delle due sostanze esaminate.

35 I risultati dei test precedentemente illustrati furono i seguenti:

(4) Attività antiinfiammatoria

Test dell'edema da carragenina

Il test venne eseguito su ratti maschi di ceppo S. D. del peso di gr 180-200 somministrando a gruppi di tre animali le sostanze in esame alle dosi di 1, 2, 4, 8 mg/kg. Le sostanze vennero sciolte o sospese in acqua; la dose per kg di peso corporeo era contenuta in 10 mi di soluzione o sospensione.

Un gruppo di 5 ratti (controllo) riceveva acqua di fonte.

Al mattino tutti gli animali vennero posti a digiuno. Un'ora più tardi si misurò il volume della zampa posteriore destra scartando quegli animali che fornirono valori molto distanti dalla media. Immediatamente dopo si procedette al trattamento effettuato mediante sonda esofagea. L'iniezione di carragenina (mi 0,1 di una soluzione 2% in soluzione fisiologica) venne effettuata un'ora più tardi nella regione tarso-metatarsica della zampa posteriore destra. Un accurato massaggio assicurava la distribuzione uniforme nel tessuto sottocutaneo della soluzione

DL 50 nel topo, per os indometacina 40 D,L-lisinato di indometacina

DL 50 nel topo, i.p.

indometacina

D,L-lisinato di indometacina

45 DL 50 nel ratto, per os indometacina

D,L-lisinato di indometacina

DL 50 nel ratto, i.p.

indometacina

D,L-lisinato di indometacina

Attività ulcero gena indometacina: DU 50 D,L-lisinato di indometacina: DU 50

Edema da carragenina indometacina: DE33

60

D,L-lisinato di indometacina: DE33

Attività analgesica indometacina: DE50 D,L-lisinato di indometacina: DE50

19,03 mg/kg 38,05 mg/kg

38,5 mg/kg 76,11 mg/kg

16,32 mg/kg 24,68 mg/kg

10,26 mg/kg 18,35 mg/kg

3,98 mg/kg 6,87 mg/kg

4,27 mg/kg 0,012 mM/kg 3,24 mg/kg 0,006 mM/kg

8,92 mg/kg 8,13 mg/kg

65 Si è trovato che una dose adeguata di D,L-lisinato di indometacina è compresa fra 10 e 70 mg/kg di peso corporeo/giorno.

v

Claims

665 832

2

RIVENDICAZIONI 1. Sale di D,L-lisina dell'acido l-(4-clorobenzoil)-5-metossi--2-metil-lH-indol-3 acetico, quale composto chimico avente formula (A)

(-) (+)

CHo-C00 NH -CH -(CH ) -CH COOH ò d. 2 J

P—\ O /—^

H

NH,

(A)

(I)

(II)

in cui (I) è l'anione di detto acido e (II) è il catione della D,L-lisina.
2. Composizione farmaceutica somministrabile per via parenterale o orale ad attività antiinfiammatoria, antipiretica ed analgesica per il trattamento terapeutico di artrite reumatoide, spondilite anchilosante, gotta e osteoartrite comprendente una quantità terapeuticamente efficace del sale della rivendicazione 1 quale principio attivo e un eccipiente farmacologicamente accettabile.