CH663476A5

CH663476A5 - Enceinte pour le dosage d'anticorps ou d'antigenes dans un liquide biologique.

Info

Publication number: CH663476A5
Application number: CH2956/85A
Authority: CH
Inventors: Antony Ringrose
Original assignee: Serono Diagnostics Ltd
Priority date: 1985-07-08
Filing date: 1985-07-08
Publication date: 1987-12-15
Also published as: JPH0782016B2; JPS6212858A; EP0209490A2; EP0209490A3; CA1276596C; DE3686967D1; EP0209490B1; US4793973A; DE3686967T2; ATE81554T1

Description

La présente invention se rapporte à une enceinte pour le dosage d'anticorps ou d'antigènes dans un liquide biologique par formation de complexes anticorps-antigènes spécifiques, l'un des éléments du complexe étant initialement associé à des particules magnétiques en suspension, puis regroupement de ces particules magnétiques contre une portion d'une paroi latérale de ladite enceinte placée dans un champ magnétique traversant cette portion de paroi latérale.

On connaît un processus pour le dosage d'anticorps ou d'antigènes dans un liquide biologique qui consiste à mettre en suspension dans ce liquide des particules magnétiques associées à des antigènes ou anticorps spécifiques aux anticorps, respectivement antigènes, que l'on veut doser et en quantité excédentaire afin de s'assurer que tous les anticorps respectivement antigènes puissent se combiner avec un antigène, respectivement anticorps spécifique. On attire magnétiquement les particules magnétiques contre une paroi de l'enceinte, on évacue de cette enceinte toutes les substances autres que les particules magnétiques associées aux antigènes respectivement anticorps spécifiques combinés ou non aux anticorps respectivement antigènes, on rince l'enceinte, on y introduit ensuite un liquide de réaction destiné à produire une réaction enzymatique avec les anticorps respectivement antigènes, on met les particules en suspension dans ce liquide pendant une durée déterminée, on ajoute à ce liquide un agent destiné à stopper la réaction enzymatique, on attire à nouveau les particules magnétiques conte une paroi de l'enceinte et on effectue une mesure colorimétrique du liquide de réaction.

On a déjà proposé d'attirer les particules magnétiques contre le fond d'une cuvette et d'évacuer le liquide biologique en renversant la cuvette accompagnée de l'aimant destiné à retenir les particules magnétiques contre son fond. Cette manière de procéder n'est pas très pratique. Dans le cas d'un appareil d'analyse automatique, ce renversement nécessite plusieurs organes mécaniques. Il faut aussi prévoir la récupération du liquide s'écoulant des cuvettes.

En variante, il a également été proposé de placer l'aimant sur le côté de la cuvette de manière à attirer les particules magnétiques contre une portion de la paroi latérale de la cuvette. Le fond des cuvettes est constitué par un arrondi soit en forme de calotte sphérique tangente à un corps tubulaire pour un tube à section circulaire, soit par un arrondi à génératrice droite parallèle à deux faces opposées du tube et tangent à ces faces pour un tube à section rectangulaire. Ces arrondis tangents à la partie tubulaire de la cuvette sont destinés

à favoriser le brassage du liquide en évitant de créer des zones mortes dans lesquelles le liquide reste immobile hors de son agitation, provoquant un mélange inhomogène. Cette conformation du fond des tubes présente l'inconvénient, dans le cas où les particules 5 magnétiques sont attirées contre une portion de la paroi latérale de la cuvette, de ne tenir contre cette portion que si l'aimant qui les attire se trouve constamment vis-à-vis de cette portion de paroi.

Cela suppose donc que dans un appareil d'analyse, dans lequel les tubes sont déplacés entre différents postes de travail par un dispositif io transporteur, l'aimant soit solidaire du transporteur, ce qui suppose un aimant par tube et des moyens pour déplacer cet aimant entre deux positions active respectivement inactive. Une telle solution est compliquée et donc chère à réaliser. Si on ne place des aimants que vis-à-vis des portions de la trajectoire du transporteur dans lesquel-15 les les particules magnétiques doivent être attirées contre ladite portion de la paroi latérale de la cuvette, ces particules glisseront progressivement le long de cette paroi latérale chaque fois que le transporteur déplacera la cuvette d'un aimant à l'aimant suivant et elles se retrouveront progressivement plus ou moins au fond de la 20 cuvette. Etant donné que cette solution qui consiste à réunir les particules magnétiques contre une portion de la paroi latérale de la cuvette a pour but de permettre d'évacuer le liquide par pipettage, le glissement de ces particules vers le fond de la cuvette présente le risque de pipetter une partie de ces particules et de fausser de façon 2s inadmissible la mesure.

Le but de la présente invention est de remédier au moins en partie aux inconvénients des solutions susmentionnées.

A cet effet, cette invention a pour objet une enceinte pour le dosage d'anticorps selon la revendication 1.

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L'avantage de cette enceinte est d'empêcher momentanément le glissement des particules magnétiques rassemblées en raison de la surface formant un angle obtus avec une face latérale de la cuvette. En effet, en rassemblant les particules magnétiques contre la face latérale de l'enceinte adjacente à cet angle obtus contre la portion de cette face adjacente au sommet de l'angle, les particules rassemblées, laissées momentanément hors de l'influence du champ magnétique qui les a rassemblées, sont empêchées de descendre en raison de la face oblique qui forme l'angle obtus avec la face latérale contre laquelle elles se trouvent rassemblées. En outre, cette face oblique étant tangente à une portion concave elle-même tangente à la face latérale opposée, cette configuration du fond de l'enceinte ne crée pas de zones mortes lors du mélange du liquide puisqu'elle conserve l'essentiel de la forme arrondie du fond de la cuvette. Cette configuration du fond de l'enceinte permet de réaliser le pipettage au-dessous du niveau de rassemblement des particules, de sorte que la totalité du liquide, aussi bien le liquide biologique que le liquide de rinçage, peut être évacuée de l'enceinte.

Le dessin annexé illustre, schêmatiquement et à titre d'exemple, 50 une forme d'exécution de l'enceinte objet de la présente invention.

La fig. 1 est une vue en élévation de face de cette enceinte.

La fig. 2 est une vue en coupe selon la ligne II-II de la fig. 1.

L'enceinte selon la forme d'exécution illustrée est constituée par un élément tubulaire 1, divisé intérieurement par une paroi 2 en 55 deux compartiments 3 et 4, de sections rectangulaires et s'évasant légèrement vers le haut, dont l'un est destiné à recevoir un échantillon à analyser avec son ou ses réactifs appropriés et dont l'autre constitue le compartiment destiné à recevoir le ou les mêmes réactifs avec une substance témoin et servant de base comparative pour la mesure 60 effectuée dans l'autre compartiment. Il est bien évident que l'invention n'est pas limitée à la présence de deux compartiments.

La vue en élévation latérale de la fig. 2 montre que le fond de l'enceinte n'est pas formé par un arc de cercle tangent aux deux faces latérales opposées, comme toutes les enceintes d'analyse de ce type, 65 cette forme étant choisie pour éviter la formation de zones mortes lors de l'agitation du liquide. Le fond de cette enceinte présente bien un arc de cercle 5 tangent à une face latérale 6 de l'enceinte. Cet arc de cercle n'est cependant pas tangent à la face latérale opposée de

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cette enceinte, mais à une face oblique 7 qui forme elle un angle obtus avec la face latérale opposée 8 de cette enceinte.

La portion de cette face latérale 8 adjacente à l'angle obtus formé avec la face oblique 7 est destinée à être placée en face d'un aimant permanent 9 dont le rôle est de rassembler les particules ma- 5 gnétiques 10 qui se trouvent en suspension dans les compartiments 3 et 4 de l'enceinte, pour les raisons que l'on a expliquées en détail précédemment. Dans la forme d'exécution illustrée, l'angle obtus entre les faces 7 et 8 est de 110°. Plus cet angle se rapproche de 90°, plus l'effet de retenue des particules contre la base de la face latérale 8 est 10 efficace, mais une face à 90° aurait pour conséquence que le fond de l'enceinte et le bas de la portion de surface contre laquelle les particules magnétiques sont rassemblés seraient au même niveau. En outre, plus cet angle est proche de 90°, plus il y a de risque de former une zone morte lors de l'agitation du liquide. Comme on l'a expli- 15 qué, il est de plus préférable que le niveau de la pointe de la pipette puisse se trouver au-dessous de celui du bas de la portion de surface contre laquelle les particules magnétiques sont rassemblées. En pratique, cet angle obtus entre les faces 7 et 8 peut varier de préférence entre 105 et 120°. 20

Cette portion de la face latérale 8 contre laquelle les particules magnétiques sont destinées à être rassemblées, coïncide à peu près à une portion de la paroi de chaque compartiment 3 et 4 présentant une surface annulaire 11 (fig. 1) amincie entourant une zone circulaire 12 dont l'épaisseur correspond à celle du reste de la paroi de 2s l'enceinte. La surface annulaire 11 amincie est destinée à former une sorte de membrane élastique solidaire de la paroi de l'enceinte, mais susceptible de fléchir élastiquement par rapport au reste de cette paroi. Au centre de la face interne de la zone circulaire 12, une rainure 13 est ménagée. Le rôle de cette surface annulaire 11, de la zone circulaire 12 et de la rainure 13 est de transmettre au liquide les vibrations ultrasoniques induites par un transducteur ultrasonique destiné à être appliqué contre la zone circulaire 12 en vue de créer une agitation du liquide consécutivement à un phénomène de cavita-tion induit dans ce liquide. Il est à noter que la surface annulaire 11 est située à proximité du sommet de l'angle obtus entre les faces 7 et 8. Cette position est favorable dans la mesure où elle constitue une deuxième garantie pour éviter toute zone morte dans le liquide qui est mis en mouvement, dans la seule zone où l'agitation serait autrement susceptible d'être atténuée. En outre, lorsque les particules ont été rassemblées contre cette portion de la paroi 8 adjacente à cet angle obtus et qu'elles doivent à nouveau être mises en suspension, les ultrasons peuvent agir directement sur elles pour les disperser.

Les dimensions de la surface annulaire 11 sont, dans cet exemple, de 6 mm pour le diamètre extérieur et de 2 mm pour le diamètre intérieur. L'épaisseur de la paroi de l'enceinte est de 0,8 mm et celle de la surface annulaire de 0,3 mm. L'enceinte est en polystyrène ou en polyacrylique injecté.

Bien que les compartiments 3, 4 de l'enceinte présentent, dans l'exemple décrit, des formes tubulaires à section rectangulaire, il est évident que l'invention est applicable sans autre à une section circulaire par exemple. Cette forme rectangulaire est choisie notamment lorsque l'on veut procéder à une mesure colorimétrique du liquide dans l'enceinte elle-même, de manière à former des surfaces parallèles pour le passage d'un faisceau lumineux.

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1 feuille dessins

Claims

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1. Enceinte pour le dosage d'anticorps ou d'antigènes dans un liquide biologique par formation de complexes anticorps-antigènes spécifiques, l'un des éléments du complexe étant initialement associé à des particules magnétiques en suspension, puis regroupement de ces particules magnétiques contre une portion d'une paroi latérale de ladite enceinte placée dans un champ magnétique traversant cette portion de paroi latérale, caractérisée par le fait que l'extrémité inférieure de ladite portion de paroi latérale est adjacente à une surface plane formant un angle obtus par rapport à ladite paroi latérale et tangente à une surface concave elle-même tangente à une paroi latérale de cette enceinte opposée à celle qui forme ledit angle obtus.

2. Enceinte selon la revendication 1, caractérisée par le fait que ledit angle obtus est compris entre 105 et 120°.

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REVENDICATIONS

3. Enceinte selon la revendication 1, caractérisée par le fait qu'une cloison s'étend entre les deux dites parois latérales opposées pour diviser ladite enceinte en deux compartiments identiques.

4. Enceinte selon la revendication 1, caractérisée par le fait que ladite portion de paroi latérale présente une zone de transmission des ultrasons comprenant une partie dont la rigidité est réduite par rapport à celle de ladite paroi latérale et dont la périphérie est reliée êlastiquement à cette paroi latérale.