Procédé de préparation de l'acide ptéroy1glutamique. La présente invention est relative à -Lui nouveau procédé de préparation de l'acide ptérovlglutamique, composé connu aussi sous le nom d'acide folique, présentant, au moins sous l'une de ses formes tautomères, la for mole
EMI0001.0005
EMI0001.0006
>Suivant.
<SEP> le <SEP> procédé <SEP> de <SEP> l'invention, <SEP> on <SEP> pré pare <SEP> l'acide <SEP> ptéroplglutamique <SEP> en <SEP> mélangeant
<tb> et <SEP> en <SEP> chauffant <SEP> de <SEP> la <SEP> 2-amino-4-hydroxv-6 inétlivlol-ptéridine <SEP> avec <SEP> un <SEP> sel <SEP> (le <SEP> l'acide
<tb> j)-aminolienzovl-r,,lutaniique <SEP> et <SEP> en <SEP> traitant <SEP> en- suite le produit de la réaction avec un acide minéral.
Cette réaction petit être représentée par L'équation suivante
EMI0001.0010
dais laquelle -NH A représente le radical de l'acide glutamique.
La ?-ainino--l-livdi-oxv-6-métlivlol-ptéricline, employée comme produit de départ, est un comlios#é nouveau, dont. la préparation sera illustrée par l'exemple suivant: On fait. bouillir :50 parties de dibromo- acéton.#-llilitaliniide pendant une heure dans <B><U>'</U></B>00 parties d'eau. On refroidit et filtre la solution, on ajoute 100 g de bisulfite de so dium, puis on règle le pH de la solution à 8 u moyen de soude caustique. L'emploi de bi sulfite de sodium n'est pas essentiel, mais paraît aboutir à la formation de plus beaux cristaux.
Par chauffage avec de l'eau, la dibromo- aeétonvlphtalimide est hydrolysée eu plital- imide, d'une part, et en un composé à trois atomes de carbone, d'autre part, ce composé étant capable de réagir avec la 2,4,
5-triamino- 6-hy droxv -pvrimidine. On croit que ce com posé à trois atomes de carbone ne contient plus (le brome et qu'il s'agit de l'hvdroNvmétlivl- -l. oxal. On prépare une solution de 42,5 parties de dichlorhydrate de 2,4,5-triamino-6-liv droxv- pvrimidinedans 500 parties d'eau et on l'ajoute lentement, en -15 minutes,
à la solu tion aqueuse obtenue à partir de la dibromo- acétonvl-plitalimide. Pendant cette addition, on maintient le<B>pH</B> à environ 8. On filtre le mélange de réaction, on lave le précipité à l'eau et à. l'alcool et on le sèche. On dissout les 17 parties de ptéridine brute que l'on -obtient par le procédé ci- dessus .dans 250 parties d'une solution éten due de soude caustique, on les traite avec une petite quantité de charbon actif et l'on filtre, puis on ajoute lentement la solution alcaline à 20 000 parties d'eau à 80-5" C contenant ?5 parties d'acide acétique.
On laisse la solu tion refroidir à -10 et on la filtre. On place le filtrat dans un local froid jiisqu#au lende main, et on filtre le produit. qui se sépare. On le dissout ensuite dans une solution éten due de soude caustique. On la traite par du charbon actif et l'on filtre. On ajoute le filtrat à 1800 parties d'eau à 85 renfermant. 5 parties d'acide acétique. Après un refroi dissement de quelques degrés, on filtre la solution et l'on refroidit à 0 ; à ce moment, la 2-amino-4-hvdi-oxy-6-méthy-lol-ptéridine re cherchée précipite. Après lavage à l'eau puis à l'acétone, on sèche ce produit. Les propor tions en C, H et.
N trouvées à l'analyse sont très proches des valeurs théoriques.
Le procédé suivant l'invention est de pré férence mis en #uvre à température élevée, supérieure à. 100 C et pouvant. aller jusqu'au point de décomposition des divers produits de départ ou obtenus. Un mode opératoire préféré consiste à chauffer les produits de départ dans un liquide ou un solvant inerte aux environs de 180 à '?00 C.
LTn solvant très utile de ce genre est l'étlivlène-glvcol, dont le point. d'ébullition se trouve normalement autour de 196 C. On peut, bien entendu, utiliser d'autres solvants tels que la ,@ly-eérine. Si on le désire, on peut. mettre en oeuvre la réaction dans un auto clave sous pression, permettant d'obtenir aisé ment les températures élevées nécessaires.
La durée (le la réaction dépend dans une certaine mesure de la température; plus celle-ci est élevée, plus la durée nécessaire pour la réaction est réduite. A 100", par exemple, et après ?0 heures, l'on obtient < le ]'acide ptérovlglutamique avec un rendement faible. A 150" C, on obtient déjà en 30 mi nutes de l'neide ptérovlglutamique avec un faible rendement.. En prolongeant le chauf fage, on obtiendrait sans aucun doute dans les deux cas un rendement plus élevé.
La réaction comportant l'élimination d'une molécule d'eau, il. est avantageux d'utiliser des solvants tendant à. exercer aine action dés livdratante, tels que l'éthy-lène-a@lvcol ou la @rly-eérine. On peut aussi, si on le\ désire, ajou ter au mélange réactionnel du chlorure de zinc et autres agents féshvdratant.s analogues.
L'utilisation des sels alcalins de l'acide p- aniinolienzoy-1-;lutaniique dans la réaction paraît réduire au minimum la raeémisation <B>(lu</B> produit.
Dans les esemples ci-dessous, toutes les proportions sont données en poids, sauf indi cation contraire.
<B><I>Exemple 1:</I></B> On sèche à 100 sous pressioxi réduite, pen dant trois heures. 100 parties de 2-amino--1- hvdroxv-6-métliviol-ptéridine et 320 parties (lu sel disodique de l'acide p-aminobenzov 1- glutamique. On v ajoute 4450 parties d'éthy- lène-glycol,
et l'on chauffe le mélange pen dant @30 minutes à 196 . On sépare alors la plus grande partie de l.'étlivlène-,-;lycol, par distillation sous pression réduite, et l'on re prend le résidu clans 5000 parties d'eau. On acidule la solution à l'acide chlorhydrique et l'on sépare la matière insoluble par eentrifu- gation; on la lave à. l'eau et. à l'acétone, puis on la sèche. Le produit, dont on obtient 1.59 parties en poids, contient 24,75% d'acide ptéroylglutamique, ainsi qu'on le constate par un essai biologique.
Le produit brut ainsi obtenu peut être uti lisé tel quel pour de nombreuses applications importantes, par exemple comme adjonction aux aliments pour le bétail; cependant, il peut. être désirable de le soumettre à une purifi cation plus poussée dans le but d'obtenir des qualités pharmaceutiques.
<I>Exemple ?:</I> On chauffe pendant 30 minutes, à 196 C, <B>.5</B> parties de 2-amino-4-hydroly-6-méthylol- 9 ptéridine et 40 parties du sel disodique de l'acide p-aminobenzoy 1-ghitamique dans<B>1500</B> parties d'éthylène-glyeol. La plus grande partie de l'éthylène-glycol est séparée par distillation sous pression réduite, et l'on reprend le résidu dans l'eau. La solution aqueuse est acidulée avec l'acide chlorhy drique et la matière inso luble séparée par filtration, lavée à l'eau et à l'acétone et séchée.
L n essai biologique du pro duit brut montre qu'il renferme ± parties d'acide ptéroylglutamique.
Process for preparing pteroylglutamic acid. The present invention relates to -the novel process for the preparation of pterovlglutamic acid, a compound also known under the name of folic acid, exhibiting, at least in one of its tautomeric forms, the form mole
EMI0001.0005
EMI0001.0006
> Next.
<SEP> the <SEP> process <SEP> of <SEP> the invention, <SEP> on <SEP> prepares <SEP> the acid <SEP> pteroplglutamic <SEP> in <SEP> mixing
<tb> and <SEP> in <SEP> heating <SEP> of <SEP> the <SEP> 2-amino-4-hydroxv-6 inétlivlol-pteridine <SEP> with <SEP> a <SEP> salt <SEP> (the <SEP> acid
<tb> j) -aminolienzovl-r ,, lutaniique <SEP> and <SEP> in <SEP> treating <SEP> then the product of the reaction with a mineral acid.
This reaction can be represented by The following equation
EMI0001.0010
but in which -NH A represents the radical of glutamic acid.
? -Ainino - 1-livdi-oxv-6-metlivlol-ptericline, used as a starting material, is a new comlios, of which. the preparation will be illustrated by the following example: We do. boil: 50 parts of dibromoaceton. # - llilitaliniide for one hour in <B><U>'</U> </B> 00 parts of water. The solution is cooled and filtered, 100 g of sodium bisulfite are added, then the pH of the solution is adjusted to 8 μm of caustic soda. The use of sodium bisulphite is not essential, but appears to result in the formation of finer crystals.
By heating with water, the dibromo- aeetonvlphthalimide is hydrolyzed to plitalimide, on the one hand, and to a compound with three carbon atoms, on the other hand, this compound being capable of reacting with 2,4 ,
5-triamino-6-hy droxv -pvrimidine. It is believed that this three-carbon compound no longer contains (the bromine and that it is hvdroNvmétlivl- -l. Oxal. A solution of 42.5 parts of 2,4-dihydrochloride is prepared. 5-triamino-6-liv droxv- pvrimidin in 500 parts of water and added slowly, over 15 minutes,
to the aqueous solution obtained from dibromoacetonvl-plitalimide. During this addition, the <B> pH </B> is maintained at about 8. The reaction mixture is filtered, the precipitate washed with water and. alcohol and dried. The 17 parts of crude pteridine obtained by the above process are dissolved in 250 parts of an extensive solution of caustic soda, treated with a small amount of activated carbon and filtered, then the alkaline solution is slowly added to 20,000 parts of water at 80-5 ° C containing 5 parts of acetic acid.
The solution is allowed to cool to -10 and filtered. The filtrate is placed in a cold room jiisqu # in the following hand, and the product is filtered. that separates. It is then dissolved in an extensive solution of caustic soda. It is treated with activated carbon and filtered. The filtrate is added to 1800 parts of water containing 85. 5 parts of acetic acid. After cooling a few degrees, the solution is filtered and cooled to 0; at this time, the desired 2-amino-4-hvdi-oxy-6-methyl-lol-pteridine precipitates. After washing with water and then with acetone, this product is dried. The proportions in C, H and.
N found on analysis are very close to the theoretical values.
The process according to the invention is preferably carried out at high temperature, greater than. 100 C and can. go to the point of decomposition of the various starting or obtained products. A preferred procedure is to heat the starting materials in an inert liquid or solvent to about 180 to 200 ° C.
A very useful solvent of this kind is ethylene-glvcol, whose dot. The boiling point is normally around 196 ° C. Of course, other solvents such as ly-erine can be used. If we want, we can. carrying out the reaction in an autoclave under pressure, making it possible to easily obtain the necessary high temperatures.
The time (the reaction depends to some extent on the temperature; the higher the temperature, the shorter the time required for the reaction. At 100 ", for example, and after? 0 hours one obtains < pterovlglutamic acid with a low yield. At 150 ° C., pterovlglutamic neide is already obtained in 30 minutes with a low yield. By prolonging the heating, a yield would undoubtedly be obtained in both cases. higher.
The reaction involving the removal of a water molecule, it. is advantageous to use solvents tending to. exerting action dice livdrating, such as ethylene-a @ lvcol or @ rly-erine. Zinc chloride and other similar hydrating agents can also be added to the reaction mixture, if desired.
The use of the alkali salts of p-aniinolienzoy-1-; lutaniic acid in the reaction appears to minimize the reemization of <B> (lu </B> product.
In the examples below, all the proportions are given by weight, unless otherwise indicated.
<B> <I> Example 1: </I> </B> It is dried at 100 under reduced pressure, for three hours. 100 parts of 2-amino - 1-hydroxv-6-metliviol-pteridine and 320 parts (the disodium salt of p-aminobenzov 1-glutamic acid. 4450 parts of ethylene glycol are added.
and the mixture is heated for 30 minutes at 196. Most of the etlivlene -, -; lycol is then separated by distillation under reduced pressure, and the residue is taken up in 5000 parts of water. The solution is acidified with hydrochloric acid and the insoluble material is separated by centrifugation; we wash it at. water and. with acetone, then dried. The product, of which 1.59 parts by weight was obtained, contained 24.75% pteroylglutamic acid, as observed by a biological test.
The crude product thus obtained can be used as it is for many important applications, for example as an adjunct to animal feed; however, he can. be desirable to subject it to further purification in order to obtain pharmaceutical qualities.
<I> Example ?: </I> Heated for 30 minutes at 196 C, <B> .5 </B> parts of 2-amino-4-hydroly-6-methylol-9 pteridine and 40 parts of the salt p-aminobenzoy 1-ghitamic acid disodium in <B> 1500 </B> parts of ethylene-glyeol. Most of the ethylene glycol is separated by distillation under reduced pressure, and the residue is taken up in water. The aqueous solution is acidulated with hydrochloric acid and insoluble material separated by filtration, washed with water and acetone and dried.
Bioassay of the raw product shows that it contains ± parts of pteroylglutamic acid.