CA2560683A1 - Derives de benzothiazoles capables de moduler l'activite des cdk et leur utilisation comme agents anticancereux - Google Patents

Derives de benzothiazoles capables de moduler l'activite des cdk et leur utilisation comme agents anticancereux Download PDF

Info

Publication number
CA2560683A1
CA2560683A1 CA002560683A CA2560683A CA2560683A1 CA 2560683 A1 CA2560683 A1 CA 2560683A1 CA 002560683 A CA002560683 A CA 002560683A CA 2560683 A CA2560683 A CA 2560683A CA 2560683 A1 CA2560683 A1 CA 2560683A1
Authority
CA
Canada
Prior art keywords
benzothiazol
ester
acid
amino
benzenesulfonic acid
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Abandoned
Application number
CA002560683A
Other languages
English (en)
Inventor
Stephanie Deprets
Anke Steinmetz
Odile Angouillant-Boniface
Daniel Bezard
Jidong Zhang
Yannick Benedetti
Francois Clerc
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Aventis Pharma SA
Original Assignee
Aventis Pharma S.A.
Stephanie Deprets
Anke Steinmetz
Odile Angouillant-Boniface
Daniel Bezard
Jidong Zhang
Yannick Benedetti
Francois Clerc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Aventis Pharma S.A., Stephanie Deprets, Anke Steinmetz, Odile Angouillant-Boniface, Daniel Bezard, Jidong Zhang, Yannick Benedetti, Francois Clerc filed Critical Aventis Pharma S.A.
Publication of CA2560683A1 publication Critical patent/CA2560683A1/fr
Abandoned legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/60—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D277/62—Benzothiazoles
    • C07D277/68—Benzothiazoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached in position 2
    • C07D277/82—Nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Thiazole And Isothizaole Compounds (AREA)

Abstract

La présente invention concerne des dérivés des benzothiazoles de formule (I) , les compositions les contenant, et leur utilisation comme inhibiteurs de CDK pour le traitement du cancer.

Description

NOUVEAUX BENZOTHIAZOLES ET LEUR UTILISATION COMME
MEDICAMENTS
La présente invention concerne notammenfi de nouveaux composés chimiques, particulièrement de nouveaux dérivés des benzothiazoles, les compositions les contenant, et leur utilisation comme médicaments.
Plus particulièrement, l'invention concerne de nouveaux esters sulfoniques des benzothiazoles présentant une activité anticancéreuse, via la modulation de l'activité de protéines, en particulier des kinases.
A ce jour, la plupart des composés commerciaux utilisés en chimiothérapie sont des cytotoxiques qui posent des problèmes importants d'effets secondaires et de tolérance par les patients. Ces effets pourraient étre limités dans la mesure où les médicaments utilisés agissent sélectivement sur les cellules cancéreuses, à l'exclusion des cellules saines. Une des solutions pour limiter les effets indésirables d'une chimiothérapie peut donc consister en l'utilisation de médicaments agissant sur des voies métaboliques ou des éléments constitutifs de ces voies, exprimés majoritairement dans les cellules cancéreuses, et qui ne seraient pas ou peu exprimés dans les cellules saines.
Les protéines kinase sont une famille d'enzyme qui catalysent la phosphorylation de groupes hydroxy de résidus spécifiques de protéines tels que des résidus tyrosine, sérine ou thréonine. De telles phosphorylations peuvent largement modifier la fonction des protéines ; ainsi, les protéines kinases jouent un r"ole importanfi dans la régulation d'une grande variété de processus cellulaires, incluant notamment le métabolisme, la prolifération cellulaire, la différéntiation cellulaire, la migration cellulaire ou la survie cellulaire. Parmi les difFérentes fonctions cellulaires dans lesquelles l'activité
d'une protéine kinase est impliquée, certains processus représentent des cibles attractives pour traiter les maladies cancéreuses ainsi que d'autres maladies.
Ainsi, un des objets de la présente invention est de proposer des compositions ayant une activité anticancéreuse, en agissant en particulier vis-à-vis de kiriases. Parmi les kinases pour lesquelles une modulation de
2 l'activité est recherchée, les kinases cycline dépendantes ainsi que Aurora-2 sont préférées.
La progression du cycle cellulaire est souvent gérée par des kinases cycline dépendantes (CDK) qui sont activées par une interaction avec des proteines appartenat à la famille des cyclines, activation qui se termine par la phosphorylation de substrats et finalement par la division cellulaire. En plus les inhibiteurs endogènes des CDK qui sont activés (famille des INK4 et des KIP/CIP) régulent de façon negative l'activité des CDK. La croissance des cellules normales est due à une balance entre les activateurs des CDK (les cyclines) et les inhibiteurs endogènes des CDK. Dans plusieurs types de cancers, l'expression ou l'activité abérante de plusieurs de ces régulateurs du cycle cellulaire a été décrite.
La cycline E active la kinase Cdk2 qui agit ensuite pour phosphoryler la protéine pRb (protéine du rétinoblastome) résultant en un engagement dans la division cellulaire irréversible et une transition vers la phase S (PL
Toogood, Medicinal Research Reviews (2001 ), 21 (6) ; 487-498. La kinase CDK2 et peut étre CDK3 sont nécessaires pour la progression dans la phase G1 et l'entrée en phase S. Lors de la formation de complexe avec la cycline E, elles maintiennent l'hyperphosphorylation de pRb pour aider la progression de la phase G1 en phase S. Dans les complexes avec la Cycline A, CDK2 joue un rôle dans l'inactivation de E2F et est nécessaire pour la réalisation de la phase S (TD. Davies et al. (2001 ) Structure 9, 389-3).
Le complexe CDK1/cycline B régule la progression du cycle cellulaire entre la phase G2 et la phase M. La régulatiori négative du complexe CDK/Cycline B
empêche les cellules normale d'entrer en phase S avant que la phase G2 ait été correctement et complètement réalisée. (K.K. Roy and E.A. Sausville Current Pharmaceutical Design, 2001, 7, 1669-1687.
Un niveau de régulation de l'activité des CDK existe. Les activateurs de cycline dépendantes kinases (CAK) ont une action positive de régulation des CDK. CAK phosphoryle les CDK sur le résidu thréonine pour rendre l'enzyme cible totalement active.
La présence de défauts dans les molécules intervenant sur le cycle cellulaire entraîne l'activation des CDK et la progression du cycle, il est normal de
3 vouloir inhiber l'activité des enzymes CDK pour bloquer la croissance cellulaire des cellules cancéreuses.
De nombreuses protéines impliquées dans la ségrégation des chromosomes et l'assemblage du fuseau ont été identifiées dans la levure et la drosophile.
La désorganisation de ces protéines conduit à la non-ségrégation dés chromosomes et à des fuseaux monopolaires ou désorganisés. Parmi ces protéines, certaines kinases, dont Aurora efi fpl1, provenant respectivement de drosophile et de S. cerevisiae, sont nécessaires pour la ségrégation des chromosomes et la séparation du centrosome. Un analogue humain de Ipl1 de levure a été récemment cloné et caractérisé par différents laboratoires.
Cette kinase, nommée aurora2, STK15 ou BTAK appartient à la famille des kinases à sérine/thréonine. Bischoff et al. ont montré que Aurora2 est oncogène, et est amplifié dans les cancers colorectaux humains (EMBO J, 1998, 17, 3052-3065). Cela a également été exemplifié dans des cancers impliquant des tumeurs épithéliales telles que le cancer du sein.
La présente invention concerne de nouveaux dérivés des benzothiazoles.
Elle concerne ainsi l'utilisation des dérivés des benzothiazoles comme agents d'inhibition des kinases et plus particulièrement comme agent anticancéreux.
Parmi ceux ci elle concerne préférentiellement les esters sulfoniques des benzothiazoles. Elle concerne également l'utilisation desdits dérivés pour la préparation d'un médicament destiné au traitement de l'homme.
Parmi l'art antérieur connu à ce jour décrivant les esters sulfoniques des benzothiazoles on peut citer la demande de brevet publiée JP 0539036 qui décrit un procédé de préparation de dérivés de formule générale suivante ~ Y'~~ Y )n 7C3 ~ N z où
Y1 peut représenter un atome de soufre, n peut être égal à zéro, Z peut être un groupe acylamino
4 les groupes X1, X2, X3, X4, sont égaux à H ou peuvent représenter un groupe alkylsulfonyoxy.
Parmi l'immense majorité des composés inclus dans la formule générale du brevet ci-dessus référencé aucun des exemples ne décrit de composés correspondant aux composés actifs selon l'invention ni méme ne décrit la synthèse de benzothiazoles.
Les composés selon l'invention répondent à la formule générale (I) suivante /O iS~X-Ar (I) R~~ N ~ I O ~~O
O N u dans laquelle ~ X représente un groupe choisi parmi une liaison covalente, (CH2)~, avec n égal à 1 ou 2 ~ Ar représente un groupe aryle ou hétéroaryle; ce groupe est éventuellement substitué par un groupe choisi parmi les groupes alkyles, halogènes, NR~R~ (R~ et R~ étant choisis parmi les groupes hydrogène, alkyles, cycloalkyles ou ensemble peuvent former un radical hétérocyclique ou hétéroaryle, ces groupes étant eux méme éventuellement substitués), SO~alk, Salkyl, alkoxy, hétéroaryles, ou aryles ~ R représente un groupe choisi parmi l'hydrogène, un groupe alkyle, cycloalkyle, hétérocycloalkyle, aryle, heteroaryle, alkoxy, cycloalkoxy, hétérocycloalkoxy, amino; R peut ëtre éventuellement substitué par un ou plusieurs groupes choisis parmi les mémes radicaux que ceux définis pour R.
Les éventuels substituants du groupes R~ et R2 sont choisis notamment parmi ' les groupes hydroxy, hétéroaryles, cycloalkyle, aminoalkyles.
On entend au sens de la présente invention par groupe alkyle des chaînes droites ou ramifiées contenant 1 à 10 atomes de carbone.
On entend au sens de la présente invention par groupe c~cloalkyle des chaînes alkyles cycliques contenant 3 à 10 atomes de carbone.

On entend au sens de la présente invention par groupe hétérocycloalkyle des chaînes alkyles cycliques contenant 3 à 10 atomes de carbone et contenant au moins un hétéroatome choisis parmi O, N ou S.
On entend au sens de la présente invention par groupe NR~RZ des groupes
5 amino de préférence secondaire c'est à dire des groupes pour lesquels au moins un des substituants est l'hydrogène.
Tous ces groupes sont éventuellement substitués par un groupe alkyle, cycloalkyle, hétérocycloalkyle, hétéroaryle, aryle, amino, hydroxy, alkoxy ou halogène.
On entend au sens de la présente invention par radicaux aryle et hétéroaryle les radicaux monocycliques comportant éventuellement un ou plusieurs hétéroatomes choisis parmi O, N et S ou les radicaux fusionnés à un autre cycle comportant 5 ou 6 chaïnons et éventuellement un à trois hétéroatomes choisis parmi O, N et S. De préférence parmi les radicaux aryles ou hétéroaryles on peut citer les groupes phényle, pyridyle, pyrimidine, triazine, pyrrolyle, imidazolyle, thiazolyle, furyle, thiényle, indolyle, azaindazolyle, isobenzofuranyle, isobenzothiényle, benzoxazolyle, benzothiazolyle, arylvinylène, arylamido, arylcarboxamide, ' aralkylamine, quinoléyle, isoquinoléyle, cinnolyle, quinazolyle, naphtyridyle, triazolyle ou tétrazolyle.
On préfère choisir parmi les groupes aryle et hétéroaryle les groupes phényle, thiényle, pyrazolyle, imidazolyle éventuellement substitué.
Parmi les substituants du groupe phényle on préfère les groupes amino et les halogènes en particulier le chlore et le fluor, ainsi parmi les groupes aryles on préfère tout particulièrement les di et trifluorophényles et les monoalkylamino phényles, la chaïne alkyle étant éventuellement substituée par un groupe hydroxy, dialkylamino.
On préfère encore, choisir parmi les composés de formule (I) ceux pour lesquels X représente une liaison covalente et ceux pour lesquels R
représente un radical cycloalkyle.
On peut citer parmi les composés répondant à la formule (I) les composés suivants
6 4-(2-hydroxy-2-methyl-propylamino)-benzenesulfonic acid 2-[(piperidine-4-carbonyl)-amino]-benzothiazol-6-yl ester 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-(cyclopropanecarbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester -cyclopentylamino-benzenesulfo;~ic 2-(cyclopropanecarbonylamino)-benzo-thiazol-6-yl ester 4-(3-imidazol-1-yl-propylamino)-benzenesulfonic 2-(cyclopropanecarbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester 4-mefihylamino- benzenesulfonic 2-(cyclopropanecarbonylamino)-benzothiazol-6-yl ester 4-(2-hydroxy-2-methyl-propylamino)-benzenesulfonic 2-(cyclopropane-carbonylamino)-benzothiazol-6-yl ester 4-(2-düsopropylamino-ethylamino)- benzenesulfonic 2-(cyclopropane-carbonylamino)-benzothiazol-6-yl ester 4-[4-(4-pyridin-3-yl-imidazol-1-yl)-butylamino]- benzenesulfonic 2-(cyclo-propanecarbonylamino)-benzothiazol-6-yl ester 4-(2-Isopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(2-piperidin-4-yl-acetylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate 4-(3-Imidazol-1-yl-propylamino)-benzenesulfonic acid 2-(2-piperidin-4-yl-acetylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate 4-(2-Ethylamino-efhylamino)-benzenesulfonic acid 2-(2-piperidin-4-yl-acetylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate 4-[2-(2-Hydroxy-ethylamino)-ethylamino]-benzenesulfonic acid 2-(2-piperidin-4-yl-acetylamino)-benzôthiazol-6-yl ester chlorydrate 4-(2-Hydroxy-2-methyl-propylamino)-benzenesulfonic acid 2-(ê-piperidin-4-yl-acetylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate 4-(2-isopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(8-amino-octanoylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate 4-(3-imidazol-1-yl-propylamino)-benzenesulfonic acid 2-(8-amino-octanoylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate
7 PCT/FR2005/000761 4-(2-ethylamino-ethylamino)-benzene sulfonic acid 2-(8-amino-octanoylamino)-benzothiazol-6-yl ester 4-[2-(2-hydroxy-ethylamino)-ethylamino]-benzenesulfonic acid 2-(8-amino-octanoylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate ç-(2-Hydroxy-2-methyl-propylamino)-benzenesulfcnic acid 2-(8-amino-octanoylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate 4-(2-Isopropylâmino-ethylamino)-benzenésulfonic acid 2-(3-pipéridin-4-yl-propionylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate 4-(3-Imidazol-1-yl-propylamino)-benzenesulfonic acid 2-(3-piperidin-4-yl-propionylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate 4-(2-Ethylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(3-piperidin-4-yl-propionylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate 4-[2-(2-Hydroxy-ethylamino)-ethylamino]-benzenesulfonic acid 2-(3-piperidin-4-yl-propionylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate 4-Isobutylamino-benzenesulfonic acid 2-(2-piperidin-4-yl-acetylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate 4-Isobutylamino-benzenesulfonic acid 2-(3-piperidin-4-yl-propionylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate 4-Isobutylamino-benzenesulfonic acid 2-(8-amino-octanoylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate Thiophene-2-sulfonic acid 2-[(piperidine-4-carbonyl)-amino]-benzothiazol-6-yl ester; compound with trifluoro-acetic acid Thiophene-2-sulfonic acid 2-(3-piperidin-4-yl-propionylamino)-benzothiazol-6-yl ester; compound with trifluoro-acetic acid Thiophene-2-sulfonic acid 2-(2-amino-acetylamino)-benzothiazol-6-yl ester Thiophene-2-sulfonic acid 2-(2-methylamino-acetylamino)-benzothiazol-6-yl ester; compound with trifluoro-acétic acid Thiophene-2-sulfonic acid 2-(3-amino-propionylamino)-benzothiazol-6-yl ester; compound with trifluoro-acetic acid
8 Thiophene-2-sulfonic acid 2-(8-amino-octanoylamino)-benzothiazol-6-yl ester;
compound with trifluoro-acetic acid Thiophene-2-sulfonic acid 2-(3-diethylamino-propionylamino)-benzothiazol-6-yl ester; compound with trifluoro-acetic acid Thiophene-2-sulfonic acid 2-(cycloprcpanecarbony!-amino)-benzothiazol-6-yl ester 4-(2-DÜsopropylarrüno-éthylamino)-b~erizenesulfônic acid 2-[(azétidine-3-carbonyl)-amino]-benzothiazol-6-yl ester 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(8-amino-octanoylamino)-benzothiazol-6-yl ester 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-[(1-amino-cyclopentanecarbonyl)-amino]-benzothiazol-6-yl ester 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(2-piperidin-4-yl-acetylamino)-benzothiazol-6-yl ester 4(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-acetylamino-benzothiazol-6-yl ester 4{2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(2-methoxy-acetylamino)-benzothiazol-6-yl ester 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(cyclopentane-carbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester ~2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(6-amino-hexanoylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate 4-(2-DÜsoproaylamino-ethylamino~benzenesulfonic acid 2-(7-amino-heptanoylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate 4-(2-isopropylamino-ethylamino)- benzenesulfonic 2-(cyclopropanecarbonylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-isôbutyrylamino-.. benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate 4-(2-DÜsoproaylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-propionylamino-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate ~2-Hydroxy-2-methyl-propylamino)-benzenesulfonic acid 2-proaionylamino-benzothiazol-6-yl ester 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(cyclobutanecarbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-(3-pyridin-3-yl-propionylamino)-benzothiazol-6-yl ester 4-(2-DÜsopropyiamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(3-pyridin-3-yl-propionylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate ~2-Hydroxy-2-methyl-propylamino~ benzenesulfonic acid 2-(3-pyridin-3-yl-propionylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate 4-(1-oxyl-2 2 6,6-tetramethyl-piperidin-4-ylamino)-benzenesulfonic acid 2-(cyclopropanecarbonylamino)-benzothiazol-6-yl ester 4-(2-Hydroxy-2-methyl-propylamino)-benzenesulfonic acid 2-(3-piperidin-4-yl-I~ropionylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorydrate 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-butyrylamino-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate 4-(2-isopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-butyrylamino-benzothiazol-6-yl ester; compound with trifluoro-acetic acid 4-(2-isopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-isobutyrylamino-benzothiazol-6-yl ester; compound with trifluoro-acetic acid 4-(2-Hydroxy-2-methyl-proaylamino)-benzenesulfonic acid 2-butyrylamino-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate 4-(2-isopropylâmino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-propionylamino-benzothiazol-6 fil ester; compound with trifluoro-acetic acid ~2-isopropylamino-ethylamino)-berizenesulfonic acid 2-aceylamino-benzothiazol-6 y1 ester ~2-isopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-acetylamino-benzothiazol-6 y1 ester chlorhydrate 4-(,2-Isopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(2-methoxy-acetylamino)-benzothiazol-6-yl ester 4-(2-Isopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(cyclopentanecarbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester 4-(2-Isopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(cyclobutanecarbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester; compound with trifluoro-5 acetic acid 1-Methyl-1 H-imidazole-4-sulfonic acid 2-(cyclopropanecarbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester 5-Pyridin-2-yl-thiophene-2-sulfonic acid 2-(cyclopropanecarbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester 10 4-(2-Methyl-2-phosphonooxy-propylamino)-benzenesulfonic acid 2-(cyclopropanecarbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester Un des procédés de préparation des composés selon l'invention peut être schématisé de la façon suivante 1. Les composés de formule (I) pour lesquels R = alkyle, cycloalkyle, aryle, hétéroaryle peuvent être préparés selon le schéma de synthèse 1.

HN~\ I \ O\ HN~S I \ _0.H
H N / H N /
(2) RCOzH
(3) O
R--~ S \ O.H _ I/
N
(4) CÖ S; X~Ar O (5) O \ O\S x-Ar R--~ S
H~\ I /
N O O
(6) if XAr =

(7) R1 O
R~ S \ O.S -_ H~\ . I / Ö v0 N
($) Les composés de la présente invention peuvent être préparés facilement à
partir de 5-méthoxy-benzothiazol-2-ylamine (composé cômmercial).
Dans uné première étape, le produit de départ est déméthoxylé en milieu acide, préférentiellement dans un mélange acide acétique/acide bromhydrique aqueux.

Dans une deuxième étape, les 5-hydroxy-benzothiazol-2-ylamides (4) sont obtenues par réaction entre la 5-hydroxy-benzothiazol-2-ylamine (2) et un acide de formule (3) (R tel que défini dans la formule générale (I)) en présence d'un agent de couplage tel que HATU ou HBTU et d'une base telle que la düsopropyléthylamine ou la triéthylamine dans un solvant appropié.
Parmi les solvants pouvant être utilisés, nous pouvons citer la diméthylformamide, le dichlorométhane. La température de choix pour effectuer cette réaction est comprise entre températûre ambiante et réflux.
Dans une troisième étape, les sulfono-esters de formule (6) sont obtenus par réaction entre les 5-hydroxy-benzothiazol-2-ylamides (4) et un chlorure de sulfonyle de formule (5) (X et Ar tels que définis dans la formule générale (I)) dans un solvent inerte (acétone, THF, dichlorométhane, toluène) en présence d'une base telle que la triéthylamine ou la pyridine.
Dans le cas où XAr correspond au 4-fluorophényl, la substitution nucléophile du F par des amines de formule (7) (R1 R2 tels que définis dans la formule générale (I)) pour conduire aux dérivés de formule (8) est effectuée dans un solvant aprotique tel que la N-methylpyrrolidone ou la diméthylformamide à
une température variant de 90 à 130°C en tube scellé ou au micro-ondes.
2. Les composés de la présente invention pour lesquels R = alkoxy, cycloalkoxy, hétérocycloalkoxy peuvent être préparés selon le schéma de synthèse 2.

HN~\ I \ O\ HN~S I \ O.H
H N H N
(2) CI~ ~X~
O S O Ar t3) O X-Ar S \ ~S
R1 N- if XAr = v / F HaN~\ I / p ~O

R1R2NH ~6) ( ) O
S \ O.S R3~ ~ ~5) O CI
/ Ö ~O
HaN~\
N O
~~ O ; ~-Ar R3~O~CI t5) R30~ ---<\ I \ isv H ~ O O
N
C8) Les composés de la présente invention peuvent étre préparés facilement à
partir de 5-méthoxy-benzothiazol-2-ylamine (composé commercial).
Dans une première étape, le produit de départ est déméthoxylé en milieu acide, préférentiellement dans un mélange acide acétique/acide bromhydrique aqueux.
Dans une deuxième étape, les sulfono-esters, de formule (4) sont obtenus par réaction entre la 5-hydroxy-benzothiazol-ê-ylamine (2) ét un chlorure de sulfonyle de formule (3) (X et Ar tels que définis dans la formule générale (I)) dans un solvent inerte (acétone, THF, dichlorométhane, toluène) en présence d'une base telle que la triéthylamine ou la pyridine.
Dans lé cas où XAr correspond au 4-fluorophényl, la substitution nucléophile du F. par des aminés de formule (6) (R1 R2 téls que définis dans la formule générale (I)) pour conduire aux dérivés de formule (7) ést effectuée dans un solvant aprotique tel que la N-methylpyrrolidoné ou la dimëthylformamide à
une température variant de 90 à 130°C en tube scellé ou au micro-ondes.
Les carbamatés (8) sont ôbtenus par réaction enire les amines de formules (4 et 7) et un chloroformate de formule (5) (R3 tél que défini. dans la formule générale (I)) én présence d'une base organique telle que la pyridine, la triéthylamine, la düsopropylethylamine ou inorganique telle que le carbonate de potassium dans un solvant appropié. Parmi les solvants pouvant être utilisés, nous pouvons citer le tétrahydrofurane, le dichlorométhane et le dioxane. La température de choix pour effectuer cette réaction est comprise entre 0°C et reflux.
3. Les composés de la présente invention pour lesquels R = alkylamino, cycloalkylamino, heterocycloamino peuvent être préparés selon le schéma de synthèse 3.

.~/ O O ~-Ar O \ S \ .S

O O
($) H
R4~N~R5 ( S O\S ~-Ar N O O
(10) Les urées de formule (10) peuvent être obtenues par réaction entre les carbamatés de formule (8) (R3 = Me de préférence) et une amine de formule
(9) (R4 et R5 tels que définis dans la formule générale (I)) dans un solvant aprotique tel que la N-méthylpyrrolidone ou la diméthylformamide à une température variant de 90°C à 130°C en tube scellé ou au micro-ondes.
Les composés selon l'invention sont utilisables en thérapie humaine et plus particulièrement dans le traitement du cancer, plus particulièrement des cancers sensibles aux inhibiteurs d'Aurora-2 et à ceux de Cdk2.
La présente invention sera plus complètement décrite à l'aide des exemples suivants qui ne doivent pas ëtre considérés comme limitatifs dé l'invention.

Les spectres DCI ont été réalisés en désorbtion-ionisation chimique (gaz réactant : ammoniac, appareil Finnigan SSQ7000).
Les spectres en électrospray (ES~) ont été réalisés sur un appareil Platform II
(Micromass).
S Analyses LC/MS
Méthode d'analyse par LC/MS (méthode A1 ) Les analyses LC/MS ont été réalisées sur un appareil Micromass modèle LCT relié à un appareil HP 1100. L'abondance des produits a été mesurée à
l'aide d'un détecteur à barrette de diodes HP G1315A sur une gamme d'onde
10 de 200-600 nm et un détecteur à dispersion de lumière Sedex 65.
L'acquisition des spectres de masses Mass spectra a été réalisée sur une gamme de 180 à 800. Les données ont été analysées en utilisant le logiciel Micromass MassLynx. La séparation a été effectuée sur une colonne Hypersil BDS C18, 3 pm (50 x 4.6 mm), en éluant par un gradient linéaire dé 5 à 90 15 d'acétonitrile contenant 0,05 % (v/v) d'acide trifluoroacétique (TFA) dans l'eau contenant 0,05 % (v/v) TFA en 3,5 mn â un débit de 1 mL/mn. Le temps total d'analyse, incluant la période de rééquilibration de la colonne, est de 7 mn.
Méthode d'analyse par LC/MS (méthode A2) Les analyses LC/MS ont été réalisées sur un appareil Micromass modèle Platfom. L'abondance des produits a été mesurée à l'aide d'un détectéur à
barrette de diodes HP G1315A sur une gamme d'énde de 200-400 nm et un détecteur à dispersion de lumière Sedex 65. L'acquisition des spectres de masses Mass spectra a été réalisée sur une gamme de 50 à 1500. Les données ont été analysées en utilisant le logiciel Micromass MassLynx. La séparation a été effectuée sur une colonne XTerral 3,5 pm (50 x 2.1 mm), en éluarit par un gradient linéaire de 5 à 95 d'acétonitrile dans l'eau contenant 0,1 % (v/v) d'acide formique en 9 mn à un débit de 0.7 mL/mn. Le temps total d'analyse, incluant la période de rééquilibration de la colonne, est de 9 mn.
Purification par LC/MS préparative (Méthode B):

Les produits ont été purifiés par LC/MS en utilisant un système Waters FractionsLynx composé d'une pompe à gradient Waters modèle 600, d'une pompe de régénération Waters modèle 515, d'une pompe de dilution Waters Reagent Manager, d'un auto-injecteur Waters modèle 2700, de deux vannes Rheodyne modèle LabPro, d'un détecteur à barrette de diodes Waters modèle 996, d'un spectromètre de masse Waters modèle ZMD et d'un collecteur de fractions Gilson modèle 204. Le système est contrôlé par du lôgiciel Waters FractiônLynX. La séparation a été effectuée alternâtivement sur deux colonnes Waters Symmetry (C~8, 5 pM, 19x50 mm, référence catalogue 186000210), une colonne étant en cours de régénération par un mélange eau/acétonitrile 95/5 (v/v) contenant 0,07 % (v/v) d'acide trifluoroacétique, pendant que l'autre colonne était en cours de séparation.
L'élution des colonnes a été effectuée en utilisant un gradient linéaire de 5 à
95 % d'acétonitrile contenant 0,07 % (v/v) d'acide trifluoroacëtique dans l'eau contenant 0,07 % (v/v) d'acide trifluoroacétique, à un débit de 10 mL/mn. A la sortie de la colonne de séparation, un millième de l'effluent est séparé par un LC Packing Accurate, dilué à l'alcool méthylique à un débit de 0,5 mLlmn et envoyé vers les détecteurs, à raison de 75 % vers le détecteur à barrette de diodes, et les 25 % restants vers le spectromètre de masse. Le reste de l'effluent (999/1000) est envoyé vers le collecteur de fractions où le flux est éliminé tant que la masse du produit attendu n'est pas détectée par le logiciel FractionLynx. Les formules moléculaires des produits attendus sont fournies au logiciel FractionLynx qui déclenche la collecte du produit quand le signal de masse détecté correspond à l'ion [M+H]+ et/ou au [M+Na]+. Dans certains cas, dépendant des résultats de LC/MS analytique, quand un ion intense correspondant à [M+2H]++ a été détecté, la valeur correspondant à la moitié
de la masse moléculaire calculée (MW/2) est aussi fournie au logiciel FractionLynx. Dans ces conditions, la collecte est aussi déclenchée quand le signal de masse de l'ion [M+2H]++ et/ou [M+Na+H]++ sont détectés. Les produits ont été collectés en tube de verre tarés. Après collecte, les solvants ont été évaporés, dans un évaporateur centrifuge Savant AES 2000 ou Genevac HT8 et les masses de produits ont été déterminées par pesée des tubes après évapôration des solvants.
Purification par chromatographie flash : les produits bruts sont purifiés par chromatographie flash sur silice de granulométrie 15-35 pm sous une pression d'argon de 0.5 bar. Les fractions correspondant au produit attendu sont rassemblées et concentrées sous pression réduite à l'évaporateur rotatif.
La présente invention sera plus complètemént décrite à l'aide des exemple suivants qui ne doivent pas être considérés comme limitatifs de l'invention Intermédiaire 1 : Préparation du 2-amino-benzothiazol-6-0l g ~ OH
HZN-y I , N
Une solution de 2-amino-6-ethoxybenzothiazole (5 g, 25.74 mmol) et d'acide hydrobromique à 48 % dans l'eau (130 ml, 1.141 mol) dans 65 ml d'acide acétique est répartie dans '10 tubes de 20 ml pour micro-ondes, puis chauffée à 150°C au micro-ondes pendant 200 secondes. Le milieu réactionnel est concentré. Le résidu est repris par 200 ml d'eau, basifié à pH 8 par addition de 75 ml d'une solution saturée de NaHC03 et extrait à l'acétate d'éthyle, lavé par une solution saturée de chlorure de sodium, séché sur sulfate de magnésium et concentré à sec pour conduire à 3.4 g de 2-Amino-benzothiazol-6-0l (poudre grise). LC/MS (méthode A1 ) : [M+H]+=167.00, temps de retention : 1.07 min.
Intermédiaire 2 : Préparation du 4-(6-hydroxy-benzothiazol-2-ylcarbamoyl)-piperidine-1-carboxylic acid tert-butyl ester 0 ~ //0 -N\~ S ~ OH
~O N~\
N
Une solution de pipéridine-1,4-dicarboxylic acid mono-tert-butyl ester (276 mg, 1.203 mmol), d'HATU (549 mg, 1.444 mmol) et de düsopropyléthylamine (187 mg, 1.44 mmol) dans 3 ml de DMF est agitée à
température ambiante pendant 15 minutes. Le 2-amino-benzothiazol-6-0l (intermédiaire 1 ) (200 mg, 1.203 mmol) en solution dans 3 ml de DMF est additionné en une fois. Le milieu réactionnel est agité à température ambiante pendant 2 heures, versé sur une solution de 10 % Na2C03 dans l'eau (20 ml) et extrait à l'acétate d'éthyle. Le brut réactionnel ést purifié par chromatographie sur colonne (éluant : EtOAc! heptane (1/1 )) pour conduire à
401 mg de 4-(6-hydroxy-benzothiazol-2-ylcarbamoyl)- pipéridine-1-carboxylic 1~
acid tert-butyl ester (solide blanc). LC/MS (méthode A2) : [M+H]+ = 378.0, temps de rétention : 3.9 minutes.
Intermédaire 3 : Préparation du 4-[6-(4-fluoro-benzénesulfonyloxy)-benzothiazol-2-ylcarbamoyl]-piperidine-1-carboxylic acid tert-butyl ester F
O O
~N~~ S \ O~S
N~\ ~ / O~ ~~O
N
Une solution de 4-(6-hydroxy-benzothiazol-2-ylcarbamoyl)-pipéridine-1-carboxylic acid tert-butyl ester (intermédiaire 2) (454 mg, 1.20 mmol), de 4-fluoro-benzènesulfonyl chloride (234 mg, 1.20 mmol) et de triéthylamine (320 p1) dans 10 ml d'acétone est agitée à température ambiante pendant 1 heure. Le chlorhydrate de triéthylamine est filtré et le filtrat évaporé. Le brut réactionnel est purifié par chromatographie sur colonne (éluant : EtOAc/
Heptane (7/3) pour conduire à 400 mg de 4-fluoro-benzènesulfonic 2-[(pipéridine-4-carbonyl)-amino] benzothiazol-6-yl ester (solide blanc).
LC/MS (méthode A2) : [M+H]+ = 535.9, temps de rétention : 4.9 minutes.
Intermédaire 4 : Préparation du 4-fluoro-benzènesulfonic 2-[(pipéridine-4-carbonyl)-amino] benzothiazol-6-yl ester F
O
N S \ O.
~'__~N osv '~\ ~ / O O
N
Une solution de 4-[6-(4-fluoro-benzènesulfonyloxy)-benzothiazol-2-yl carbamoyl]-pipéridine-1-carboxylic acid tert-butyl ester (intermédiaire' 3) (100 mg, 0.187 mmol), de TFA (0.5 ml) dans du dichlorométhane (4.5 ml) est agitée à température ambiante pendant 1 heure. Le milieu réactionnel est ramenë à sec. Le résidu repris dans le minïmum d'eau, neutralisé par addition d'une solution aqueuse 10 % de Na2C03 et extrait à l'acétate d'éthyle pour conduire à 55 mg de 4-fluoro-benzenesûlfonic 2-[(piperidine-4-carbonyl)-amino] benzothiazol-6-yl ester (solide blanc). LC/MS (méthode A2) : [M+H]+ _ 435.9, temps de rétention : 3.0 minutes:

Exemple 5 : Préparation du 4-(2-hydroxy-2-methyl-propylamino)-benzenesulfonic acid 2-[(piperidine-4-carbonyl)-amino]-benzothiazol-6-yl ester O / Nv 'O
O. \
N\'~ S
N'~\ I \ 0 Sv N / O
Une solution de 4-fluoro-benzenesulfonic 2-[(piperidine-4-carbonyl)-amino]
benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 4) (50 mg, 0.114 mmol) et de 4-(4-pyridin-3-yl-imidazol-1-yl)-butylamine (40.93 mg, 0.459 mmol) dans 0.5 ml de NMP est chauffée à 130°C au micro-ondes pendant 5 minutes. Le brut réactionnel est purifié par LC/MS préparative (milieu basique (pH 9)) pour conduire après lyophilisation à 21 mg de 4-(2-hydroxy-2-methyl-propylamino)-benzenesulfonic 2-(cyclopropanecarbonylamino)-benzothiazol-6-yl ester (solide jaune pâle). LC/MS (méthode A2) : [M+H]+ = 505.2, temps de rëtention : 2.70 minutes.
Intermédaire 6 : Préparation du Cyclopropanecarboxylic acid (6-hydroxy-benzothiazol-2-yl)-amide O S ( \ OH
N-<~
H N
Dans un' ballon de 100 ml, muni d'un barreau aimanté, une solution de 2-amino-benzothiazol-6-0l (intermédiaire 1 ) (850 mg, 4.6 mmol), d'acide cyclopropane-carboxylique (1.564 g, 18.1 mmol), de N,N-düsopropyl-ethylamine (3.6 ml, 24.4 mmol), d'HBTU (4.1 g, 5.53 mmol) dans 40 ml de dimethylformamide est agitée à température ambiante pendant 16 heures.
150 ml d'eau sont ajoûtés au milieu réactionnel, extrait à l'acétate d'éthyle, lavé par une solution saturée de chlorure de sodium, séché sur sulfate de magnésium et concentré à sec. Le résidu obtenu est lavé par de l'acétate d'éthyle conduisant à 893 mg de Cyclopropanecarboxylic acid 2-(cyclopropanecarbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester. LC/MS
(M+H]+=303.18, TR=3.53 min. A ce produit est ajoutée une solution de lithium hydroxide monohydrate (200 mg, 4.768 mmol) dans 50 ml de méthanol et 5 ml d'eau. Le milieu réactionnel est mis au reflux sous agitation pendant une heure. Le milieu réactionnel est concentré, acidifié à pH 1 par une solution d'acide chlorhydrique 2N, dilué avec 100 ml d'eau et extrait à, l'acétate d'éthyle. La phase organique est lavée par de l'eau, puis par une 5 solution saturée de chlorure de sodium, ramenée à sec conduisant à 500 mg de Cyclopropanecarboxylic acid (6-hydroxy-bénzothiazol-2-yl)-amide avec un rendement de 72 % (poudre beige).
RMN : Spectre RMN 1 H ( 400MHz ) - ô en ppm - dans le DMSO-d6 de 0,90 à 1,00 (mf, 4H) ; 1,98 (mf, 1 H) ; 6,88 (dd, J = 8,5 et 3,0 Hz, 1 H) ;
10 7,27 (d, J = 3,0 Hz, 1 H) ; 7,54 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ; 9,51 (s large, 1 H) ; 12,4 (s large, 1 H) .
Exemple 7 : Préparation du 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-(cyclopropane-cârbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester F
O g 0 S
i O
15 Dans un ballon de 100 ml, muni d'un barreau aimanté, une solution de cyclopropanecarboxylic acid (6-hydroxy-benzothiazol-2-yl)-amide (intermédiaire 6) (1.81 g, 7.72 mmol), de 4-fluorobenzenesulfonylchloride (1.5 g, 7.72 mmol), de triéthylamine (2.14 ml, 15.45 mmol) dans 43 ml d'acétone est mise sous agitation pendant une heure à température 20 ambiante. Le précipité obtenu est filtré et le filtrat est évaporé. Le résidu est lavé par de l'acétone et de l'éther éthylique, conduisant à 1.92 g de 4-fluoro-benzenesulfonic acid 2-(cyclopropane-carbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester (poudre blanc cassé) avec un rendement de 66 %.
Masse : IE: m/z 392 [M+'], m/z 324 : [M+']-COC3H5 , m/z 233 : [M+']-S02PhF , m/z 165 : 324-S02PhF, m/z 69 (pic de base) : [COC3H5]+.
Spectre RMN 1 H ( 300MHz ) - b en ppm - dans le DMSO-d6 de 0,92 à 1,03 (mf, 4H)~ ; 2,02 (mf, 1 H) ; 7,04 (dd, J --'' 8,5 et 2,5 Hz, 1 H) ;
7,54 (mf, 2H) ; 7,70 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ; 7,80 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) ; 7,97 (mf, 2H) ; 12,75 (s large; ~1 H) .

Exemple 8 : Préparation du 4-cyclopentylamino-benzenesulfonic 2-(cyclo-propanecarbonylamino)-benzothiazol-6-yl ester N
O
S \ O.S
N~\ ~ / O~ ~O
N
Une solution de 4-fluoro-benzenesulfonic 2-(cyclopropanecarbonylamino)-benzothiazol-6-yl ester (exemple 7) (50 mg, 127.4 pmol) et de cyclopentylamine (51 p1, 0.51 mmol) dans 0.5 ml de NMP est chauffée à
150°C au micro-ondes pendant 5 minutes. Le brut réactionnel est purifié
par LC/MS préparative (milieu basique (pH 9)) pour conduire après lyophilisation à 38 mg de 4-cyclopentylamino-benzenesulfonic 2-(cyclopropanecarbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester (solide blanc). LC/MS (méthode A2) [M+H]+ = 458.0, temps de rétention : 4.39 minutes.
Exemple 9 : Préparation du 4-(3-imidazol-1-yl-propylamino)-benzenesulfonic 2-(cyclopropanecarbonylamino)-benzothiazol-6-yl ester Nw/\/ ~N
O
S \ 0.
N
~\ ~ O S O
N /
Une solution de 4-fluoro-benzenesulfonic 2-(cyclopropariecarbonylamino)-benzothiazol-6-yl ester (exemple 7) (100 mg, 0.255 mmol) et de 3-imidazol-1-yl-propylamine (123 p1, 1.019 mmol) dans 2 ml de NMP est chauffée à
150°C
au micro-ondes pendant 5 minutes. Le brut réactionnel est purifié par LC/MS
préparative (milieu~basiqué (pH 9)) pour conduire après lyophilisation à 63 mg de4-(3-imidazol-1-yl-propylamino)-benzenesulfonic 2-(cyclopropanecarbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester (solide blanc). LC/MS (méthode A2) [M+H]+ = 498.0, temps de rétention : 2.90 minutes.
Exemple 10 : Préparation du 4-methylamino-benzenesulfonic 2-(cyclo-propanecarbonylamino)-benzothiazol-6-yl ester / N\
O
S
~\ ~ \ O S~
N ~ O

Une solution de .4-fluoro-benzenesulfonic 2-(cyclopropanecarbonylamino)-benzothiazol-6-yl ester (exemple 7) (25 mg, 63.71 Nmol) et de methylamine (2N dans MeOH, 200 p1) dans 300 p1 de NMP est chauffée à 150°C au micro-ondes pendant 3 minutes. Le brut réactionnel est purifié par LC/MS
préparative (milieu basique (pH 9)) pour conduire après lyophilisation à
6.7 mg de 4-méthylamino-benzenesulfonic 2-(cyclopropanecarbonylamino)-benzo-thiazol-6-yl ester (solide beige). LC/MS (méthode A2) : [M+H]+ _ 404.1, témps de rétention : 3.83 minutés.
Exemple 11 : Préparation du 4-(2-hydroxy-2-methyl-propylamino)-benzene-sulfonic 2-(cyclopropanecarbonylamino)-benzothiazol-6-yl ester O ~ N v _O
O~ \ I
S
N'~\ I \ Ö S O
N
Une solution de 4-fluoro-benzenesulfonic 2-(cyclopropanecarbonylamino)-benzothiazol-6-yl ester (exemple 7) (100 mg, 255 pmol) et de 1-amino-2-methyl-propan-2-ol (91 mg, 1.02 mmol) dans 2 ml de NMP est chauffée à
150°C au micro-ondes pendant 5 minutes. Le brut réactionnel est purifié
par LC/MS préparative (milieu basique (pH 9)) pour conduire après lyophilisation à 61 mg de 4-(2-hydroxy-2-methyl-propylamino)-benzenesulfonic 2-(cyclo-propane-carbonylamino)-benzothiazol-6-yl ester (solide beige). LC/MS
(méthode A2) : [M+H]+ = 462.1, temps de rétention : 3.83 minutes.
Exemple 12 : Préparation du 4-(2-düsopropylamino-ethylamino)-benzene-sulfonic 2-(cyclopropanecarbonylamino)-benzothiazol-6-yl ester O / NON
s c.s ~ ~ i\
N--~\ ' (~ ô' 'O
N /
Une solution de 4-fluoro-benzenesulfonic 2-(cyclopropanecarbonylamino)-benzothiazol-6-yl ester (exempté 7) (100 mg, 255 Nmol) et de N,N-düsopropyl-ethane-1, 2-diamine (147 mg, 1.02 mmol) dans 2 ml de NMP est chauffée à 110°C au micro-ondes pendant 10 minutes. Le brut réactionnel est purifié par LC/MS préparative (milieu basique (pH 9)) pour conduire après lyophilisation à 66 mg de 4-(2-hydroxy-2-methyl-propylamino)-benzenesulfonic 2-(cyclopropane-carbonylamino)-benzothiazol-6-yl ester (solide beige). LC/MS (méthode A2) : [M+H]+ = 517.1, temps de rétention 2.93 minutes.
exemple 13 : Préparation du 4-[4-(4-pyridin-3-yi-imidazoi-1-yl)-butyiamino]
benzenesulfonic 2-(cyclopropanecarbonylamino)-benzothiazol-6-yl ester O / I. N~N~N
S \ OwS \
N-~
\N I / O O ~ \N
Une solution de 4-fluoro-benzenesulfonic 2-(cyclopropanecarbonylamino)-benzothiazol-6-yl ester (exemple 7) (50 mg, 127.4 pmol) et de 4-(4-pyridin-3-yl-imidazol-1-yl)-butylamine (110.2 mg, 0.51 mmol) dans 0.5 ml de NMP est chauffée à 150°C au micro-ondes pendant 8 minutes. Le brut réactionnel est purifié par LC/MS préparative (milieu basique (pH 9)) pour conduire après lyophilisation à 36 mg de 4-(2-hydroxy-2-methyl-propylamino)-benzenesulfonic 2-(cyclo-propanecarbonylamino)-benzothiazol-6-yl ester (solide beige). LC/MS (méthode A2) : [M+H]+ = 589.0, temps de rétention 3.14 minutes.
Intermédiaire 14 : Préparation du (6-Hydroxy-benzothiazol-2-yl)-carbamic acid tert-butyl ester O
O NOS I ~ OH
v H N
Dans un ballon de 100 ml, muni d'un barreau aimanté, une solution de 2-amino-benzothiazol-6-0l (intermédiaire 1 ) (1.91 g, 11.49 mmol), de di-tert-butyl dicarbonate (7.52 g, 34.47 mmol), de triethylamine (4.9 ml, 34.47 mmol), de 4-diméthylaminopyridine (168 mg, 1.38 mmol) dans 50 ml de dichlorométhane est agitée une nuit à température ambiante. Le milieu réactionnel est ramené à sec et le résidu obtenu est lavé par du dichlorométhane et de l'éther éthylique conduisant à 4.2 g de Carbonic acid 2-tert-butoxycarbonylamino-benzothiazol-6-yl ester tert-butyl ester avec un rendement quantitatif. LC/MS : [M+H]+ :311.16, temps de rétention 5.27 min.
A ce produit est ajoutée une solution de soude (920 mg, 22.8 mmol) dans 110 ml de méthanol. Le milieu réactionnel est agité 2 heures à température ambiante sous ultra-sons, puis acidifié à pH4 avec une solution d'acide chlorhydrique 2N.
Le milieu réactionnel est ramené à sec et le résidu obtenu est lavé par du dichlorométhane et de l'éther éthylique conduisant à 2.35 g de (6-Hydroxy benzothiazol-2-yl)-carbamic acid tert-butyl ester (poudre beige) avec un rendement de 77 %.
Masse : IE: m/z 266 [M+'], m/z 166 (pic de base) : [M+']-CO~tBu IR : KBr 3422; 3263; 3091; 2981; 1725; 1608; 1562; 1468; 1278; 1245; 1154; 1049;
862 et 852 cm ~
Spectre RMN 1 H ( 300MHz ) - ~ en ppm - dans le DMSO-d6 1,52 (s, 9H) ; 6,85 (dd, J = 9,0 et 3,0 Hz, 1 H) ; 7,24 (d, J = 3,0 Hz, 1 H) ;
7,49 (d, J = 9,0 Hz, 1 H) ; 9,44 (mf étalé, 1 H) ; 11,5 (mf, étalé, 1 H) .
Intermédiaire 15 : Préparation du 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-tert-butoxycarbonylamino-benzothiazol-6-yl ester F
O~ S
..
i O
Dans un ballon de 100 ml, muni d'un barreau aimanté, une solution de (6-Hydroxy-benzothiazol-2-yl)-carbâmic acid tert-butyl ester (intermédaire 14) (3.61 g, 13.08 mmol), de 4-fluorobenzenesulfonylchloride (2.56 g, 13.08 mmol), de triéthylamine (3.63 ml, 26.16 mmol) dans 65 ml d'acétone est mise sous agitation à température ambiante pendant une nuit. Filtration du précipité obtenu et le filtrat est ramené à sec. Le résidu sec est lavé par de l'acétate d'éthylé conduisant à 5.02 g de 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-tert-butoxycarbonylamino-benzothiazol-6-yl ester (poudre blanche) avec un rendement de 62 %.
Spectre RMN 1 H ( 400MHz ) - ô en ppm - dans le DMSO-d6 1,53 (s, 9H) ; 7,02 (dd, J = 9,0 et 2,5 Hz, 1H) ; 7,55 (t, J = 9,0 Hz, 2H) ;
7,65 (d, J = 9,0 Hz, 1 H) ; 7,78 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) ; 7,98 (dd, J = 5,0 et 9,0 Hz, 2H) ;
11,9 (s large, 1 H) .
Intermédiaire 16 : Préparation du 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-amino-5 benzothiazol-6-yl ester F
. S 00 ~ I
S
H2N--y N
Dans un ballon de 100 ml, muni d'un barreau aimanté, une solution de 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-tert-butoxycarbonylamino-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 15) (1.7 g, 3.60 mmol), de 10 ml d'acide trifluoroacétique 10 (130 mmol) dans 10 ml ~ de dichlorométhane, et 1 ml d'eau est mise sous agitation pendant 2 heures à température ambiante. Le milieu réactionnel est ramené à sec et le résidu obtenu est lavé par de l'éther éthylique conduisant à 1.31 g de 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester sous forme de sel d'acide trifluoroacétique (poudre blanche) avec un 15 rendement de 83 %. LC/MS (méthode A1 ): [M+H]+ :325.13, temps de rétention : 3.12 min.
Intermédiaire 17 : Préparation du 4-{[6-(4-Fluoro-benzenesulfonyloxy)-benzo-thiazol-2-ylcarbamoyl]-methyl}-piperidine-1-carboxylic acid tert-butyl ester O N
O ,IF
N -eS I i H N
20 Dans un tube à essai, muni d'un barreau aimanté, une solution de 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 16) (580 mg, 1.32 mmol), de 4-carboxymethyl-piperidine-1-carboxylic acid tert-butyl ester (640 mg, 2.63 mmol), d'HBTU (1.1 g, 2.9 mmol), de N,N-düsopropylamine (1.2 ml, 6.89 mmol) dans 12 ml de diméthylformamide est 25 agitée 3 jours à température ambiante. 200 ml d'eau sont ajôutés au milieu réactionnel extrait à l'acétate d'éthyle. La phase organique est ensuite lavée à

l'eau et par une solution saturée de chlorure de sodium, puis séchée sur sulfate de magnésium et évaporée. Le résidu obtenu est repris par de l'acétate d'éthyle et purifié sur cartouche flash Varian contenant 50 g de silice de porosité 15-35 ~r par un gradient de 5 à 30 % d'acétate d'éthyle dans le cyclohexane en 100 minutes. Après évaporation du solvant, 700 mg de 4-~[6-(4-Fluoro-benzenesulfonyloxy)-benzothiazol-2-ylcarbamoyl]-methyl}-piperidine-1-carboxylic acid teri-butyl ester sont obtenus (huile jaune) avec un rendëment de 96 %. LC/MS (méthode A1): [M+H]+ :550.11, temps de rétention : 4.14 min.
Exemple 18 : Préparation du 4-(2-Isopropylamino-ethylamino)-benzene sulfonic acid 2-(2-piperidin-4-yl-acetylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate HN
CIH ~ H
C'S..O
N-C.N~ Ö
H
1 ère étape : Dans un tube à essai, muni d'un barreau aimanté, une solution de 4-~[6-(4-Fluoro-benzenesulfonyloxy)-benzothiazol-2-ylcarbamoyl]-methyl}-piperidine-1-carboxylic acid tert-butyl ester (intermédiaire 17) (174 mg, 0.318 mmol), de N-isopropylethylenediamine (97 mg, 0.954 mmol), de carbonate de cesium (103 mg, 0.318' mmol) dans 3 ml de dimethylsulfoxyde est agitée pendant une nuit à 90°C. 100 ml d'eau sont ajoutés au milieu réactionnel extrait à l'acétate d'éthyle. La phase organique est ensuite lavée à l'eau et par une solution saturée de chlorure de sodium, puis séchée sur sulfate de magnésium et évaporée conduisant à 103 mg de 4-(~6-[4-(3-Imidazol-1-yl-propylaminô)-benzenesulfonyloxy]-benzothiazol-2-ylcarbamoyl}-methyl)-piperidine-1-carboxylic acid tert-butyl ester (poudre blanche) avec un rendement de 50 %.
2ème étape : Une solution 103 mg de 4-({6-[4-(3-Imidazol-1-yl-propylamino)-benzenesulfonyloxy]-benzothiazol-2-ylcarbamoyl}-methyl)-piperidine-1-carboxylic acid fart-butyl ester, de 2 ml de dioxanne, de 2 ml d'acide chlorhydrique 4N dans le dioxanne est agitée pendant 3 heures à
température ambiante. Le précipité obtenu est filtré et lavé par du dioxanne et de l'éther éthylique conduisant à 110 mg de 4-(2-Isopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(2-piperidin-4-yl-acetylamirio)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate (poudre blanche) avec un rendement de 88 %.
Masse : LC/MS: m/z 532 [M+H]+ , m/z 407 (pic de base) : [M+H]+ -C5H~oNCH2C0 IR : KBr 3432; 2960; 2793; 2464; 2598; 1560; 1470; 1364; 1162; 1120; 1093; 915; 853 et 753 cm ~
Spectre RMN 1 H ( 400MHz ) - ô en ppm - dans le DMSO-d6 1,28 (d, J = 7,0 Hz, 6H) ; 1,48 (m, 2H) ; 1,83 (d large, J = 12,5 Hz, 2H) ;
2,12 (mf, 1 H) ; 2,52 (masqué, 2H) ; 2,92 (m, 2H) ; 3,10 (mf, 2H) ; 3,28 (d large, J =
12,5 Hz, 2H) ; 3,36 (mt, J = 7,0 Hz, 1 H) ; 3,50 (t, J = 6,0 Hz, 2H) ; 6,78 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,03 (dd, J = 8,5 et 2,5 Hz, 1 H) ; 7,30 (mf, étalé, 1 H) ;
7,56 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,71 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ; 7,78 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) ; 8,58 (mf étalé, 1 H) ; 8,81 (mf étalé, 1 H) ; 9,00 (mf étalé, 2H) ;
12,5 (s large, 1 H) .
Exemple 19 : En utilisant la même méthode que l'exemple 18, les exemples suivants sont réalisés en utilisant le 4-{[6-(4-Fluoro-benzenesulfonyloxy)-benzothiazol-2-ylcarbamoyl]-methyl)-piperidine-1-carboxylic acid fart butyl ester comme précurseur (intermédiaire 17) combiné avec différentes amines.
Dans les exemples suivants, le composé obtenu après la première étape est purifié sur cartouche flash de 5 g de silice Interchim (15-35p) p) par un gradient de 5 à 10 % de méthanol dans le dichlorométhane avec un débit de 10 ml/min. Ces exemples sont présentés dans le tableau suivant N
xem amine compos caractrisation le IR : KBr 3426; 2957; 2717; 2462;
1597; 1545;

1451; 1364; 1199; 1161;
1092; 872;

750 et 586 cm-~

Masse : LC/MS: m/z 555 [M+H]+, mlz 430 (pic de base) : [M+H]+
-CSH~oNCH2C0 Spectre RMN-1 H ( 400MHz ) - b- en ppm - dans le DMSO-d6 yl- 1,48 (m, 2H) ; 1,84 (d 4-(3-Imidazol-1 large, J = 12,5 I Hz, 2H) ; 2,12 (mf, 3H) propylamino)- ; 2,52 (masqu, . 2H) ; 2,91 (m, 2H) ; 3,13 benzenesulfonic (t, J = 6,5 Hz, acid 19 2-(2-piperidin-4-yl-2H) ; 2,28 (d large, J
a = 12,5 Hz, 2H) ;

acetylamino)- 4,33 (t, J = 6,5 Hz, 2H) ; 6,70 (d large, benzothiazol-6-ylJ = 9,0 Hz, 2H) ; 7,02 ester (dd, J = 9,0 et chlorhydrate; 3,0 Hz, 1 H) ; 7,20 (mf trs tal, 1 H) ;

7,51 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,71 (d, J = 9,0 Hz, 1 H) ; 7,73 (s large, 1 H) ;

7,78 (d, J = 3,0 Hz, 1 H) ; 7,87 (s large, 1 H) ; 8,70 (mf tal, 1 H) ; 8,91 (mf tal, 1 H) ; 9,24 (s large, 1 H) ; 12,5 (s large, 1 H) ; 14, 55 (mf trs tal, 1 H) .

1R : KBr 3425; 2956; 2717; 2462;
1597; 1558;

1469; 1364; 1162; 1119;
1094; 872;

744 et 584 cm'~

Masse : LC/MS: m/z 518 [M+H]+, m/z 393 (pic de base) : [M+H]+
-CSH~oNCH2C0 Spectre RMN 1 H ( 400MHz ) - b en ppm - dans le DMSO-d6 4-(2-Ethylamino- 1,25 (t, J = 7,0 Hz, 3H) ; 1,47 (m, 2H) ;

ethylamino)- 1,85 (d large, J = 12,5 Hz, 2H) ; 2,12 N~ benzenesulfonic (mf, 1 H) ; 2,52 (masqu, acid 2H) ; 2,91 (m, 19 ~ 2-(2-piperidin-4-yl-2H) ; 3,02 (q, J = 7,0 b Hz, 2H) ; 3,10 acetylamino)- (mf, 2H) ; 3,28 (d, J
= 12,5 Hz, 2H) ;

benzothiazol-6-yl3,48 (t, J = 6,0 Hz, 2H) ester ; 6,78 (d large, chlorhydrate J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,02 (dd, J = 8,5 et 2,5 Hz, 1 H) ; 7,30 (mf trs tal, 1 H) ;

7,45 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,71 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ; 7,78 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) ; 8,62 (mf tal, 1 H) ; 8,86 (mf tal, 1 H) ; 9,04 (mf, 2H) ; 12,45 (s large, 1 H) .

IR : KBr 3435; 2949; 2790; 2462;
1598; 1561;

1470; 1363; 1161; 1093;
854; 751 et 590 cm-~

Masse : LC/MS: m/z 534 [M+H]+, m/z 409 (pic de base) : [M+H]+
-GSH~oNCH2G0 4-[2-(2-Hydroxy- Spectre RMN 1H ( 400MHz ) - 8 en ethylamino)- ppm - dans le DMSO-d6 JJf ethylamino]- _ 1,46 (m, 2H) ; 1,85 (d _ _ large, J = 12,5 bnzenesulfonic Hz, 2H) ; 2,12 (mf, 1 H) acid ; 2,52 (masqu, 19 2-(2-piperidin-4-yl-2H) ; 2,92 (m, 2H) ; 3,08 c (mf, 2H) ;

acetylamino)- 3,13 (mf, 2H) ; 3,28 (d large, J = 12,5 benzothiazol-6-ylHz, 2H) ; 3,45 (masqu, ester 2H) ; 3,71 (t, J

chlorydrate = 5,5 Hz, 2H) ; 6,77 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,03 (dd, J =
8,5 et 2,5 Hz, 1 H) ; 7,18 (mf, tal, 1 H) ; 7,55 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,72 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ; 7,79 (d, J =
2,5 Hz, 1 H) ;

8,51 (mf tal, 1 H) ; 8,75 (mf tal, 1 H) ; 8,87 (mf tal, 2H) ; 12,5 (s large, 1 H) .

LC/MS : [M+H]+ = 519.08, temps retention : 2.66 min IR : KBr 3415; 2971; 1597; 1563;
1470; 1365;

1161; 1094; 915; 854; 746 et 586 cm-~

Spectre RMN 1 H ( 400MHz ) - i5 en 4-(2-Hydroxy-2- ppm - dans le DMSO-d6 methyl-propylamino)-1,18 (s, 6H) ; 1,45 (m, 2H) ; 1,85 (d benzenesulfonic large, J = 12,5 Hz, 2H) acid ; 2,13 (mf, 1 H) ;

19 o 2-(2-piperidin-4-yl-2,52 (masqu, 2H) ; 2,92 d (m, 2H) ;

~ acetylamino)- 3,06 (s, 2H) ; 3,28 (d large, J = 12,5 benzothiazol-6-ylHz, 2H) ; 6,78 (d large, ester J = 9,0 Hz, chlorhydrate ' 2H) ; de 6,50 7,00 (mf tal, 1 H) ;

7,02 (dd, J = 9,0 et 2,5 Hz, 1 H) ; 7,45 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,70 (d, J =

9,0 Hz, 1 H) ; 7,75 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) ;

8,51 (mf tal, 1 H) ; 8,78 (mf tal, 1 H) ; 12,5 (s large, 1 H) .

Intermédiaire 20 : Préparation du 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-(8-tert-butoxycarbonylamino-octanoylamino)-benzothiazol-6-yl ester ~~ N
O
N-cS p v'F
Selon la méthode de l'intermédiaire 17, le 4-Fluoro-benzenesulfonïc acid 2-(8-tert-butoxyçarbonylamino-octanoylamino)-benzothiazol-6-yl. ester est préparé
en combinant le 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl 5 ester (intermédiaire 16) avec du Boc-8-aminocaprylic acid.
LC/MS (méthode A1 ): [M+H]+:566.01, temps de retention : 4.21 min.
Exemple 21 : Préparation du 4-(2-isopropylamino-ethylamino)-benzene-sulfonic acid 2-(8-amino-octanoylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate 10 Selon la méthode de l'exemple 18, le 4-(2-isopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(8-amino-octanoylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate est préparé en combinant le 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-(8-tert-butoxycarbonylâmino-octanoylamino)-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 20) avec la N-isopropylethylenediamine: Le composé issu de la 15 première étape (4-(2-isopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(8-tert-butoxycârbonylamino-octanoylamino)-benzothiazol-6-yl ester est purifié
sur silice par un gradient de 4 à 15 % de méthanol dans le dichlorométhane.
Masse : EI: m/z 406 : [M+'] - CgH~6O , m/z 335 : [M+'] - C4H~oN , m/z 72 C4H~oN (pic de base).
20 CI : m/z 548 [M+H]+ (pic de base) , m/z 407 : [M+H]+ - C$H~6N0 IR : KBr 3426; 2923; 2448;1717; 1697; 1563; 1472; 1371; 1165; 1092; 911; 857; 755;
574 et '548 cm'~ .
Spectre RMN 1 H ( 400MHz ) - â en ppm - dans le DMSO-d6 1,30 (t, J = 7,0 Hz, 6H) ; 1,33 (mf, 6H) ; 1,58 (mf, 2H) ; 1,67 (mf, 2H) ;
2,52 (masqué, 2H) ; 2,79 (mf, 2H) ; 3,01 (mf, 2H) ; 3,36 (mt, J = 7,0 Hz, 1 H) ;
3,48 (mf, 2H) ; 6,78 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,02 (dd, J = 8,5 et 2,5 Hz, 1 H) ;
7,30 (mf, 1 H) ; 7,56 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,70 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ;
7,77 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) ; 7,82 (mf étalé, 3H) ; 9,00 (mf étalé, 2H) ; 12,45 (s large, 1 H) .
Exemple 22 : En utilisant la méme méthode que l'exemple 21, les exemples suivants sont réalisés en utilisant le 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-(8-tert-butoxycarbonylamino-octanoylamino)-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 20) comme précruseur combiné avec différentes amines. Ces exemples sont présentés dans le tableau suivant N
exempleamine compos caractrisation N 4-(3-imidazol-1-Spectre RMN 1 H ( 300MHz ) -en ppm -22 ~~ yl-propylamino)-dans le DMSO-d6 a benzenesulfonic1,31 (mf, 6H) ; de 1,49 1,68 (mf, 4H) ; 2,11 acid 2-(8-amino-(mt, J = 7,0 Hz, 2H) ; 2,52 (masqu, 2H) ; 2,75 octanoylamino)-(mf, 2H) ; 3,11 (t, J = 7,0 Hz, 2H) ; 4,32 (t, J =

benzothiazol-6-yl7~0 Hz, 2H) ; 6,68 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ;

ester 6,97 (dd, J = 9,0 et 2,5 Hz, 1 H) ; 7,20 (mf trs chlorhydratetal, 1 H) ; 7,50 (d large, J
= 9,0 Hz, 2H) ;

7,67 (d, J = 9,0 Hz, 1 H) ;
7,72 (t, J = 2 Hz, 1 H) 7,74 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) ;
7,85 (t, J = 2 Hz, 1 H) ; 7,89 (mf tal, 3H) ; 9,24 (t, J = 2 Hz, 1 H) ; 12,45 (s large, 1 H) ; 14,6 (mf tal, 1 H) .

N 4-(2-ethylamino-IR : KBr 22b ~ 3421; 2931; 2457; 1717; 1596;
1563;' 1472;

ethylamino)-1370; 1357; 1199; 1163; 1093;
benzene sulfonic911; 857; 756;
~

acid 2-(8-amino-g7T 611' 574 et 547 cm-*
' Masse octanoylamino)-(pic de base).
CI : m/z 534 [M+H]

benzothiazol-6-ylSpectre RMN 1 H ( 400MHz ) -S en ppm -ester dans le DMSO-d6 1,22 (t, J = 7,0 Hz, 3H) ; 1,32 (mf, 6H) ; 1,56 (mf, 2H) ; 1,64 (mf, 2H) ; 2,52 (masqu, 2H) ;

2,79 (mf, 2H) ; 3,01 (mf, 2H) ; 3,10 (mf, 2H) ;

3,45 (mf, 2H) ; 6,73 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ;

7,02 (dd, J = 8,5 et 3,0 Hz, 1 H) ; 7,22 (mf tal, 1 H) ; 7,55 (d large, J
= 9,0 He, 2H) ;

7,67 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ;
7,78 (d, J = 3,0 Hz, 1 H) ; 7,82 (mf tal, 3H) ; 8,92 (mf tal, 2H) ;

12,4 (s large, 1 H) 22 N~o 4-[2-(2-hydroxy-c 3444; 2926; 2627; 2416; 1715;
1597;

ethylamino)-N ethylamino]-1563; 1473; 1370; 1196; 1165;
1148;

benzenesulfonic1092; 911; 858; 849; 757; 612;
574 et 549 acid 2-(8-amino-Cm i octanoylamino)-Masse : CI : m/z 550 [M+H]+, m/z 409 : [M -benzothiazol-5-ylCO(CH2)7NH2 + H]H+ (pic de base).

ester Spectre RMN 1 H ( 300MHz ) -chlorhydrate en ppm -dans le DMSO-d6 1,28 (mf, 6H) ; de 1,43 1,67 (rrf, 4H) ; 2,52 (masqu, 2H) ; 2,73 (mf, 2H) ; de 3,00 3,15 (mf, 4H) ; 3,45 (mf, 2H) ; 3,67 (mf, 2H) ; 6,72 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ;
6,98 (d large, J =

9,0 Hz, 1 H) ; 7,20 (mf tal, 1 H) ; 7,52 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,65 (d, J = 9,0 Hz, 1 H) ; 7,72 (s large, 1 H) ;
7,82 (mf tal, 3H) ;

8,92 (mf tal, 2H) ; 12,4 (s large, 1 H) .

y y- - Masse : LCIMS: m/z 535 [M+H]T
e drox 2 (pic de base), +

22 m ~h~ - m/z 463 : [M+H]
d - C4H90 +

N
propylamino)-(pic de base).
CI : m/z 535 [M+H]

benzenesulfonicSpectre RMN 1 H ( 300MHz ) -acid 2-(8-amino-8 en ppm -dans le DMSO-d6 octanoylamino)-1,14 (s, 6H) ; 1,29 (mf, 6H) benzothiazol-6-yl; 1,53 (mf, 2H) ;

1~g3 (mf, 2H) ; 2,52 (masqu, ester 2H) ; 2,75 (mf, 2H) ; 3,03 (s, 2H) ; 6,75 (d chlorhydratelarge, J = 9,0 Hz, 2H) ; 6,97 (dd, J = 9,0 et 2,5 Hz, 1 H) ; 7,42 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,65 (d, J = 9,0 Hz, 1 H) ; 7,70 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) ; 7,78 (mf tal, 3H) ; 12,4 (s large, 1 H) .

Intermédiaire 23 : Préparation du 4-~2-[6-(4-Flûoro-benzenesulfonyloxy)-benzo-thiazol-2-ylcarbamoyl]-ethyl}-piperidine-1-carboxylic acid tert-butyl ester c o /
O~N N s O,1Ö
O
Selon la méthode de l'intermédiâire 17, le 4-{2-[6-(4-Fluoro-benzenesulfonyloxy)-benzothiazol-2-ylcarbamoyl]-ethyl}-piperidine-1-carboxylic acid tert-butyl ester est préparé en combinant le 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 16) avec du N-Boc-4-piperidinepropionic acid. LC/MS (méthode A1 ): [M+H]+ :564.16, temps de rétention : 4.24 min.
Exemple 24 : 4-(2-Isopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(3-piperidin-4-yl-propionylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate H
HN~O S \~ \INf~
H-cN I . ~ . Ö .
CIH
Selon la méthode de l'exemple 18, le 4-(2-Isopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(3-piperidin-4-yl-propionylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate est préparé en combinant le 4-(2-[6-(4-Fluoro-benzenesulfonyloxy)-benzothiazol-2-ylcarbamoyl]-ethyl)-piperidine-1-carboxylic acid tert-butyl ester (intermédiaire 23) avec la N,N-düsopropylamine. Le composé issu de la première étape ( le 4-(2-~6-[4-(2-Isopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonyloxy]-benzothiazol-2-ylcarbamoyl}-ethyl)-piperidine-1-carboxylic acid tert-butyl ester) est purifié
sur cartouche flash de 5 g de silice de porosité 15-35 p par un gradient de 1 % à
10 % de méthanol dans le dichlorométhane.
Masse : LC/MS: m/z 546 [M~H]+, m/z 407: [M+H]+ - CSH~pNC2H4C0 , m/z 274 : [M+2H]2~ m/z 294 (pic de base). .
Spectre RMN 1 H ( 300MHz ) - Sen ppm - dans le DMSO-d6 1,25 (d, J = 7,0 Hz, 6H) ; 1,32 (m, 2H) ; de 1,45 à 1,65 (mf, 3H) ; 1,81 (d large, J = 12,5 Hz, 2H) ; 2,52 (masqué, 2H) ; 2,82 (m, 2H) ; 3,07 (mf, 2H) ;
3,25 (d large, J = 12,5 Hz, 2H) ; 3,35 (masqué, 1 H) ; 3,45 (mf, 2H) ; 6,73 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 6,99 (dd, J = 8,5 et 2,5 Hz, 1 H) ; 7,20 (mf, étalé, 1 H) ;
7,52 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,67 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ; 7,73 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) ; 8,40 (mf étalé, 1 H) ; 8,65 (mf étalé, 1 H) ; 8,87 (mf étalé, 2H) ;
12,4 (s large, 1 H) .
Exemple 25 : En utilisant la même méthode que l'exemple 24, les exemples ' suivants sont réalisés en utilisant le 4-(2-[6-(4-Fluoro-benzenesulfonyloxy)-benzothiazol-2-ylcarbamoyl]-ethyl)-piperidine-1-carboxylic acid tert-butyl ester y~' comme précurseur (intermédiaire 23) combiné avec différentes amines. Ces exemples sont présentés dans le tableau suivant N~ amine compos Caractrisation exem le 4-(3-Imidazol-1-yl-propyl-LC/MS: m/z 569 [M+H]~r, m/z 430 +

amino)-benzenesulfonic- CSH~oNC2H4C0 acid ' [M+H]

2-(3-piperidin-4-yl-propionyl-m/z 306 (pic de base) Spectre RMN 1H ( 300MHz ) - ij amino)-benzothiazol-6-ylen ppm - dans le DMSO-d6 ester chlorhydrate 1,32 (m, 2H) ; de 1,45 1,65 (mf, 3H) ; 1,81 (d large, J = 12,5 Hz, 2H) ; 2,10 (mf, 2H) ; 2,52 (masqu, 2H) ; 2,82 (m, 2H) ;

3,10 (mf, 2H) ; 3,23 (d large, J =

12,5 Hz, 2H) ; 4,29 (t, J = 7,0 Hz, 25 2H) ; 6,65 (d large, a J = 9,0 Hz, N 2H) ; 6,98 (dd, J =
8,5 et 2,5 Hz, 1 H) ; 7,10 (mf tal, 1 H) ; 7,48 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,67 (d, J

= 8,5 Hz, 1 H) ; 7,70 (s large, 1 H) ;

7,72 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) ; 7,81 (s large, 1 H) ; 8,45 (mf tal, 1 H) ;

8,72 (mf tal, 1 H) ;
9,17 (s large, 1 H) ; 12,4 (s large, 1 H) ; 14, 4 (mf tal, 1 H) .

4-(2-Ethylamino-ethylamino)-LC/MS: m/z 532 [M+H]T, m/z 393:
[M+Hl - CsH~oN(CHz)ZCO~

benzenesulfonic acidm/z 267 : [M+2H]2+, 2-(3- m/z 287 (pic piperidin-4-yl-propionylamino)-de base).

benzothiazol-6-yl ester Spectre RMN 1 H ( 300MHz ) - ~

chlorhydrate en ppm - dans le DMSO-d6 1,21 (t, J = 6,5 Hz, 3H) ; 1,30 (m, 2H) ; de 1,45 1,65 (mf, 3H) ;

1,80 (d large, J = 12,5 Hz, 2H) ;

2,52 (masqu, 2H) ; 2,83 (m, 2H) ; 2,97 (q, J = 6,5 Hz, 2H) ;

25b 3,07 (mf, 2H) ; 3,25 (d large, J =

12,5 Hz, 2H) ; 3,44 (mf, 2H) ; 6,73 (d, large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 6,99 (dd, J = 9,0 et 3,0 Hz, 1 H) ; 7,15 (mf tal, 1 H) ; 7,52 (d large, J =

9,0 Hz, 2H) ; 7,67 (d, J = 9,0 Hz, 1 H) ; 7,73 (d, J =
3,0 Hz, 1 H) ;

8,35 (mf tal, 1 H) ;
8,63 (mf tal, 1 H) ; 8,81 (mf tal, 2H) ;

12,4 (s large, 1 H) .

4-[2-(2-Hydroxy-ethylamino)-+
~C/MS: m/z 548 [M+H]
, m/z 409:

ethylamino]-benzenesulfonic acid 2-(3-piperidin-4-yl-[M+H]+ - C5H10NC2H4C0 ,mlz propionylamino)-benzothiazol-2+
275 : [M+2H] m/z 295 (pic de 6-yl ester chlorhydrate base).

Spectre RMN 1H ( 300MHz ) - 8 N~o , en ppm - dans le DMSO-d6 ~ 1,32 (m, 2H) ; de 1,45 ( 1,65 (mf, J 3H) ; 1,80 (d large, N J - 12,5 Hz, 2H) ; 2,52 (masqu, 2H) ; 2,82 25 (m, 2H) ; 3,03 (mf, c 2H) ; 3,10 (mf, 2H) ; 3,25 (d large, J = 12,5 Hz, - 2H) ; 3,45 (masqu, 2H) ; 3,69 (t, J = 5,5 Hz, 2H) ; 6,72 (d large, J =

9,0 Hz, 2H) ; 6,99 (dd, J = 8,5 et 2,5 Hz, 1 H) ; 7,18 (mf tal, 1 H) ;

7,52 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ;

7,67 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ; 7,73 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) ; 8,50 (mf tal, 1 H) ; 8,75 (mf tal, 1 H) ; 8,91 (mf tal, 2H) ; 12,4 (s large, 1 H) .

Intermédiaire 26 : Préparation du 4-Isobutylamino-benzenesulfonic acid 2-tert-butoxycarbonylamino-benzothiazol-6-yl ester / I N
O~( S ~ O S
ii N-C.N I / O .
5 Une solution de 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-tert-butoxycarbonylamino-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 15) (1 g, 2.32 mmol), d'isobutylamine (517 mg, 7.07 mmol), de carbonate de cesium (845 mg, 2.59 mmol)dans 12 ml de DMSO est agitée à 80°C pendant une nuit. Au milieu réactionnel, 60 ml d'eau sont ajoutés. II est extrait par de l'acétate d'éthyle. La phase 10 organique est lavée par de l'eau et par une solution saturée de chlorure de sodium, séchée sur sulfate de magnésium puis évaporée à sec. Le résidu est lavé par de l'éthér éthylique conduisant à 880 mg de 4-Isobutylamino-benzenesulfônic âcid 2-tert-butoxycarbonylamino-benzothiazol-6-yl ester (solide beige) avec un rendement de 80 %.
15 ' LC/MS (méthode A1 ): [M+H]+ :478.01, temps de rétention : 4.31 min.

intermédiaire 27 : Préparation du 4-Isobutylamino-benzenesulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester N
S \ O S \ I
/ n N~N I / O
Une solution de 4-Isobutylamino-benzenesulfonic acid 2-tert-butoxycarbonyl-amino-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 26) (880 mg, 1.93 mmol),d'acide trifluoroacétique (5.7 ml, 74 mmol) dans 6 ml de dichlorométhane et 600 p1 d'eau est mise sous agitation pendant une nuit à température ambiante.
Le milieu réactionnel est concentré à sec et le résidu est lavé par de l'ether éthylique conduisant à 700 mg de 4-Isobutylamino-benzenesulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester sous forme de sel d'acide trifluoroacétique (solide blanc) avec un rendement de 52 %.
LCIMS (méthode A1 ): [M+H]+ :378.05, temps de retention : 3.60 min.
Exemple 28 : Préparation du 4-Isobutylamino-benzenesulfonic acid 2-(2-piperidin-4-yl-acetylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate CIH
. 'NH
O g \ O.S-O
H~N I i ~ 1 / N
1 ère étape : Une solution de 4-Isobutylamino-benzenesulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 27) (300 mg, 0.495 mmol) de 4-carboxymethyl-piperidine-1-carboxylic acid tert-butyl ester (361 mg, 1.485 mmol), d'HBTU (563 mg, 1.485 mmol), de N-N-düsopropylethylamine (432 p1, 2.475 mmol) dans 4, ml de dimethylformamide esf agitée à
température ambiante pendant une nuit. De l'eau est ajoutée au milieu réactionnel qui est extrait par de l'acétate d'éthyle. La phase organique est lavée par de l'eau, puis par une solution saturée de chlorure de sodium, séchée sur sulfate de magnésium et concentrée à sec. Le résidu obtenu est purifié par CLHP sur colonne Dynamax C18, 60ä, 21 x 300 mm par un mélange d'eau/acétonitrile 95/5 pendant 5 minutes, par un gradient de 5 à
40 % dans l'eau pendant 5 minutes, par un gradient de 40 à 80 d'acétonitrile dans l'eau pendant 30 minutes, par un gradient de 80 à 95 d'acétonitrile dans l'eau pendant 5 minutes, puis par un mélange d'eau/acétonitrile 5/95 pendant 5 minutes avec un débit de 20 ml / min. Les solvants contiennent chacun 0.07 % (v/v) d'acide trifluoroacétique. Les fractions sont collectées toutes les 30 secondes et sont contrôlées par CLHP
anéò~tiqué ~sùr co¿onne Hypérsil C18, 4,6 x~ 50 mm. Par un gradierit de 0 à
100 % d'acétonitrile dans l'eau en 10 minutes à un débit de 1 ml/min. Les solvants contiennent chacun 0.07 % (v/v) d'acide trifluoroacétique. Les fractions contenant l'attendu sont concentrés à sec conduisant au 4-{[6-(4-Isobutylamino-benzenesulfonyloxy)-benzothiazol-2-ylcarbamoyl]-methyl}
piperidine-1-carboxylic acid tert-butyl ester.
2ème étape : Une solution de 4-{[6-(4-Isobutylamino-benzenesulfonyloxy)-benzothiazol-2-ylcarbamoyl]-methyl}piperidine-1-carboxylic acid tert-butyl ester (110 mg, 182 pmol), de dioxanne (2 ml) et d'acide chlorhydrique 4N
dans le dioxanne est mise sous agitation péndant 2 heures à température ambiante. Le milieu réactionnel est concentré à sec et le résidu obtenu est lavé par de l'éther éthylique conduisant à 183 mg de 4-Isobutylamino-benzenesulfonic acid 2-(2-piperidin-4-yl-acetylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate (poudre blanche) avec un rendement de 64 %.
Masse : IE: m/z 502 [M+'], m/z 377 : [M+'] - C~H~2N0 , m/z 212 [S02PhNHiBu]+' m/z 165 : [377 - 212] +', m/z 126 : [C~H~2N0]+' (pic de base).
Spectre RMN 1 H ( 300MHz ) - ô en ppm - dans le DMSO-d6 0,94 (d, J = 6,5 Hz, 6H) ; 1,45 (m, 2H) ; de 1,77 à 1,88 (mf, 3H) ; 2,10 (mf étalé, 1 H) ; 2,52 (masqué, 2H) ; 2,83 (m, 2H) ; 2,91 (d, J = 6,5 Hz, 2H) ;
3,25 (d large, J =12,5 Hz, 2H) ; 6,67 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,00 (dl, J = 9,0 Hz, 1 H) ; 7,15 (mf très étalé, 1 H) ; 7,45 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,67 (d, J
= 9,0 Hz, 1 H) ; 7,73 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) ; 8,62 (mf étalé, 1 H) ; 8,85 (mf étalé;
1 H) ;
12,5 (s large, 1 H) Exemple 29 : En utilisant la même méthode que l'exemple 28, les exemples suivants sont réalisés en utilisant le 4-Isobutylamino-benzenesulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester cortime précurseur (intermédiaire 27) combiné avec différents acides. Ces exemples sont présentés dans le tableau suivant N
exem acide compos Caractrisation le 4-Isobutylamino- Masse : LC/MS: m/z 517 [M+H]T (pic benzenesulfonic acid de base) 2-(3-piperidin-4-yl-propionylamino)-IE: m/z 516 [M+'], benzothiazol-6-yl m/z 377 : [M+']- C$H~4N0, ester chlorhydrate m/z 212 : [S02PhNHiBu]+' 0 o m/z 165 : [377 - 212]
+.

Spectre RMN 1 H ( 400MHz ) - ~ en ppm - dans le DMSO-d6 0,94 (d, J = 7,0 Hz, 6H) ; 1,32 (m, 2H) ; de 1,50 1,65 (mf, 3H) ; de 1,78 1,88 (mf, 3H) ; 2,52 (masqu, 2H) ;

29 2,83 (m, 2H) ; 2,92 (d, a J = 7,0 Hz, 2H) ; 3,25 (d, J = 12,5 Hz, 2H) ; 6,67 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,00 (dd, J =

8,5 et 2,5 Hz, 1 H) ;
de 6 ,90 7,10 (mf trs tal, 1 H) ; 7,45 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,68 (d, J =
8,5 Hz, 1 H) ;

7,72 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) ; 8,40 (mf tal, 1 H) ; 8,70 (mf tal, 1 H) ; 12,45 (s large, 1 H) .

HzN 4-Isobutylamino- Masse : LC/MS: m/z 519 [M+H]+ (pic benzenesulfonic acid de base) 2-(8-amino-octanoylamino)-IE: m/z 518 [M+'], benzothiazol-6-yl m/z 377 : [M+']- CO(CH~)~NHZ
ester , chlorhydrate m/z 212 : [S02PhNHiBu]+' o m/z 165 : [377 - 212]
+' (pic de base).

oH Spectre RMN 1 H ( 400MHz ) - 8 en ppm - dans le DMSO-d6 0,95 (d, J = 6,5 Hz, 6H) ; 1,32 (mf, 6H) ; 1,55 (mf, 2H) ;
29b 1,64 (mf, 2H) ;

1,83 (mt, J = 6,5 Hz, 1 H) ; 2,52 (masqu; 2H) ; 2,78 (mf, 2H) ; 2,91 (d, J = 6,5 Hz, 2H) ; 6,67 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 6,98 (d large, J = 9,0 Hz, 1 H) 7,45 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,68 (d, J = 9,0 Hz, 1 H) ;
7,72 (s large, 1 H) 7,89 (mf tal, 3H) ; 12,4 (s large, 1 H) .

Intermédiaire 30 : Préparation de Thiophene-2-sulfonic acid.2-tert-butoxycarbonyl-amino-benzothiazol-6-yl ester O
S w O,S O S
H~N ~ i p' ~ I
Une solution de (6-Hydroxy-benzothiazol-2-yl)-carbamic acid tert-butyl ester (intermédiaire 14) (527 mg, 1.979 mmol), de 2-thiophènesulfonylchloride (433 mg, 2.37 mmol), de triethylamine (677 NI, 4.75 mmol) dans,. 10 ml d'acétone est mise sous agitation pendant une nuit à temperature ambiante.
Le milieu réactionnel est concentré à sec. Le résidu obtenu est lavé à l'eau, à
l'acétone puis à l'éther éthylique conduisant à 621 mg de Thiophene-2-sulfonic acid 2-tert-butoxycarbonylamino-benzothiazol-6-yl ester (poudre gris clair) avec un rendement de 76 %. LC/MS : [M+H]+=412.98, temps de rétention : 3.99 min.
lintermédiaire 31 : Préparation du Thiophene-2-sulfonic acid 2-amino-benzo-thiazol-6-yl ester g ~ O.S-.O S
H2N~~ ~ i N
Une solution de Thiophene-2-sulfonic acid 2-tert-butoxycarbonylamino-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 30) (1.5 g, 3.63 rnmol), d'acide trifluoroacétique (15 ml, 196 mmol) dans 15 ml de dichloromethane et 600 p1 d'eau est mise sous agitation pendant 2 heures à temperature ambiante. Le milieu réactionnel est concentré à sec conduisant à 900 mg de Thiophene-2-sulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester sous forme de sel d'acide trifluoroacétique (huile) avec un rendement de 76 %.
LCIMS (méthode A1 ): [M+H]+ :313, temps de rétention : 3.11 min.
Exemple 32: Préparation du Thiophene-2-sulfonic acid 2-[(piperidine-4-carbonyl)-amino]-benzothiazol-6-yl ester; compound with trifluoro-acetic acid o s~
H S ~ O, F~~H HN~N-CN I i F O
1 ère étape : Une solution de Thiophene-2-sulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 31 ) (80 mg, 0.256 mmol), de Boc-isbnipecotic. acid (176 mg, 0.768 mmol) d'HBTU (291 mg, 0.768 mmol), , de N,N-düsopropylethylamine (223 p1, 1.28 mmol) dans 4 ml de dimethylformamide est mise sous agitation pendant 3 jours à température ambiante. 30 ml d'eau sont ajoutés au milieu réactionnel qui est extrait par de l'acétate d'éthyle.
La 5 phase organique est lavée par de l'eau et par une solution saturée de chlorure de sodium, séchée sur sulfate de magnésium et concentrée à sec conduisant au 4-[6-Thiophene-2-sulfonyloxy)benzothiazol-2-ylcarbamoyl]-piperidine-1-carboxylic acid tert-butyl ester. LC/MS :[M+H]+ :523.96, temps de rétention : 4.00 min.
10 2eme étape : Une solution de 4-[6-Thiophene-2-sulfonyloxy)benzothiazol-2-yl carbamoyl]-piperidine-1-carboxylic acid tert-butyl ester, d'acide trifluoroactéique (1.5 ml) dans 1.5 ml de dichlorométhane et 100 p1 d'eau est mise sous agitation pendant une nuit à température ambiante. Le milieu réactionnel est concentré à sec, repris dans 500 p1 de DMSO et un 15 échantillon est purifié par LC/MS préparative (méthode B), conduisant à 3 mg de Thiophene-2-sulfonic acid 2-[(piperidine-4-carbonyl)-amino]-benzothiazol-6-yl ester; compound with trifluoro-acetic acid.
LC/MS : [M+H]+ :423.97, temps de rétention : 2.74 min.
Exemple 33 : En utilisant la même méthode que l'exemple 32, les exemples 20 suivants sont réalisés en utilisant le Thiophene-2-sulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester comme précurseur (intermédiaire 31 ) combiné avec différents acides. Ces exemples sont présentés dans le tableau suivant , les LC/MS sont réalisés selon la méthode A1:
[M+H)+Temps No de exemplecide compos rtention min r"~ hiophene-2-sulfonic acid 2-(3-iperidin-4-yl-propionylamino)-452.012.77 33a enzothiazol-6-yl ester;
compound ith trifluoro-acetic acid hiophene-2-sulfonic acid 2-(2-amino-~

33b ~~ cetylamino)-benzothiazol-6-yl369.982.62 ester;

ompound with trifluoro-acetic acid Ni hiophene-2-sulfonic acid 2-(2-ethylamino-acetylamino)-384.002.67 [

33c o~ enzothiazol-6-yl ester;
' compound [ ith trifluoro-acetic acid N hiophene-2-sulfonic acid 2-(3-amino-ropionylamino)-benzothiazol-6-yl383.992.65 33d o ster; compound with trifluoro-acetic cid o HZN hiophene-2-sulfonic acid 2-(8-amino-ctanoylamino)-benzothiazol-6-yl453.982.91 ster; compound with trifluoro-acetic 33f cid OH

hiophene-2-sulfonic acid 2-(3-iethylamino-propionylamino)-440.032.81 N enzothiazol-6-yl ester compose avec ' 33g acide trifluoroactique O' 'O

hiophene-2-sulfonic acid cyclopropanecarbonyl-amino)-380.993.63 33h enzothiazol-6-yl ester O o Intermédiaire 34 : Préparation du 4-(2-düsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester ~ O~S ~
S
HzN~\ I / O~ ~p N
Une solution de 4-fluoro-benzenesulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 16) (100 mg, 0.225 mmol. et de N,N-düsopropylethylenediamine (395 p1, 2.25 mmol.) dans 5 ml de NMP est chauffée à 150°C par micro-ondes "Emrys TM Optimizer" pendant 20 minutes.
Le brut réactionnel est repris par 60 ml d'acétate d'éthyle, la solution résultante est lavée par 5 fois 50 ml d'eau. Après décantation la phase organique est séchée sur sulfate de sodium, filtrée et évaporée sous pression réduite pour donner 100 mg de 4-(2-düsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester .
LC/MS (méthode A1 ) : [M+H]+ = 449.22, temps de retention : 2.36 min.

Intermédiaire 35 : Préparation du 3-(6-[4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonyloxy]-benzothiazol-2-ylcarbamoyl]-azetidine-1-carboxylic acid tert-butyl ester NON
0 0 ~ ao ~
~--N~i~~ s O
Sur une solution de 4-(2-düsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 34) (100 mg, 0.225 mmol.) dans 5 ml de dimethylformamide sont ajoutés 68 mg de Azetidine-1,3-dicarboxylic acid mono-tert-butyl ester, 256 mg de HBTU, 235 p1 de DIEA. La solution obtenue est agitëe 20 heures à température ambiante. Après avoir ajouté 50 ml d'eau, le mélange réactionnel est extrait par 3 fois 25 ml d'acétate d'éthyle. Les extraits séchés sur sulfate de magnésium, filtrés et évaporés sous pression réduite, conduisent à 700 mg d'huile brute. Cette huile est purifiée par élution dans un mélange dichloromethane / methanol 95:5 débit de 10 ml/rnn.sur 20 g de silice pour donner 39 mg de 3-(6-[4-(2 Düsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonyloxy]-benzothiazol-2 ylcarbamoyl}-azetidine-1-carboxylic acid tert-butyl ester.
LC/MS : [M+H]+ : 632.11 Temps de rétention : 3.00 min. Méthode A1 Intermédiare 36 : Préparation du 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzene-sulfonic acid 2-(8-tert-butoxycarbonylamino-octanoylamino)-benzothiazol-6-yl ester o~ H
O / b~N~

N
Sur une solution de 4-(2-düsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 34) (100 mg, 0.225 mmol.) dans 5 ml de dimethylformamide sont ajoutés 175 mg de 8-tert-Butoxycarbonylamino-octanoic acid, 256 mg de HBTU, 235 p1 de DIEA. La solution obtenue est agitée 20 heures à température ambiante. Après avoir ajouté 50 ml d'eau, le mélange réactionnel est extrait par 3 fois 25 ml d'acétate d'éthyle. Les extraits sont séchés sur sulfate de magnésium, filtrés S et évaporés sous pression réduite, et conduisent à 338 mg d'huile brute.
Cette huile est purifiée par élution dans un mélange dichloromethane/
methanol 95:5 débit de 10 ml/mn. sur 10 g de silice pour donner 153 mg de 4-(2-DÜsoprop~lamino-ethjrlamino)-benzenésulfonic acid 2-(8-tert-butôxy-carbonylamino-octanoylamino)-benzo-thiazol-6-yl ester.
LC/MS : [M+H]+ : 690.33 Temps de rétention : 3.25 min. Méthode A1 Intermédiaire 37 : Préparation du 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzene-sulfonic acid 2-[(1-tert-butoxycarbonylamino-cyclopentanecarbonyl)-amino]-benzothiazol-6-yl ester.
o~
O~N O / NON
S
~N-~~~ ~ II
N'V O
Sur une solution de 4-(2-düsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 34) (100 mg, 0.225 mmol.) dans 5 ml de diméthylformamide sont ajoutés 155 mg de 1-tert-Butoxycarbonylamino-cyclopentanecarboxylic acid, 256 mg de HBTU, 235 p1 de DIEA. La solution obtenue est agitée 20 heures à température ambiante.
Après avoir ajouté 50,m1 d'eau, le mélange réactionnel est extrait par 3 fois ml d'acétate d'éthyle. Les extraits sont séchés sur sulfâte de magnésium, filtrés et évaporés sous pression réduite, et conduisent à 720 mg d'huile brute. Cette huile est purifiée par élution dans un mélange dichloromethane /
methanol 95:5 débit de 10 ml/mn.sur 10 g de silice pour donner 120 mg de 4-25 (2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzénesulfonic acid 2-[(1-tert-butoxy-carbonyl amino-cyclopentanecarbonyl)-amino]-benzothiazol-6-yl ester.
LC/MS : [M+H]+ : 660.56 Temps de rétention : 3.11 min. Méthode A1 lintermédiaire 38 : Préparation du 4-((6-[4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonyloxy]-benzothiazol-2-carbamoyl}-methyl)-piperidine-1-carboxylic acid tert-butyl ester o~
NON
o I
~ /5 ~ O
N~N I /
Sur une solution de 4-(2-düsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 34) (100 mg, 0.225 mmol.) dans 5 ml de dimethylformamide sont ajoutés 164 mg de 4-Carboxymethyl-piperidine-1-carboxylic acid tert-butyl ester, 256 mg de HBTU, 235 trl de DIEA. La solution obtenue est agitée 20 heures à température ambiante.
Après avoir ajouté 50 ml d'eau, le mélange réactionnel est extrait par 3 fois 25 ml d'acétate d'éthyle. Les extraits sont séchés sur sulfate de magnésium, filtrés et évaporés sous pression réduite, et conduisent à 380 mg d'huile brute. Cette huile est purifiée par élution dans un mélange dichloromethane/
methanol 95:5 débit de 10 ml/mn.sur 10 g de silice pour donner 90 mg de 4-(~6-[4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonyloxy]-benzothiazol-2-carbamoyl}-methyl)-piperidine-1-carboxylic acid tert-butyl ester.
LC/MS : [M+H]+ : 674.57 Temps de rétentïon : 3.11 mim. Méthode A1 Exemple 39 : Préparation du 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzene-sulfonic acid 2-[(azetidine-3-carbonyl)-amino]-benzothiazol-6-yl ester.
O / NON
N 5 \ ~~
yN-~~
N~ O
A une solution de 39 mg de 3-{6-[4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonyloxy]-benzothiazol-2-ylcarbamoyl}-azetidine-1-carboxylic acid tert-butyl ester (intermédiaire 35) dans 1.5 ml de dioxanne est âjoutée 1.5 ml de dioxanne chlorhydrique. La solution résultante est agitée pendant 5 heures à température ambiante puis évaporée sous pression réduite pour conduire à

49 mg d'huile, purifiée par LC/MS donne 9.7 mg de 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-[(azetidine-3-carbonyl)-amino]-benzo-thiazol-6-yl ester.
MS : DCI : m/z=532 [M+H]*
5 ES* : m/z=532 [M+H]* ; m/z=266,8 [M+2H]**
Exemple 40 : Préparation du 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzene-sulfonic acid 2-(8-amino-octanoylamino)-benzothiazol-6-yl ester.
A une solution de 153 mg de 3-(6-[4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-10 benzenesulfonyloxy]-benzothiazol-2-ylcarbâmoyl}-azetidine-1-carboxylic acid tert-butyl ester (intermédiaire 36) dans 3 ml de dioxanne est ajoutée 3 ml de dioxanne chlorhydrique. La solution résultante est agitée pendant 5 heures à
température ambiante puis évaporée sous pression réduite pour conduire à
152 mg de 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(8 15 amino-octanoylamino)-benzothiazol-6-yl ester.
MS : DCI : m/z=590 [M+H]*
ES* : m/z=590 [MH]* ; m/z=295.95 [M+2H]*+
Spectre RMN 1 H ( 300MHz ) - 8 en ppm - dans le DMSO-d6 De 1,20 à 1,38 (mf, 16H) ; de 1,42 à 1,68 (mf, 6H) ; 2,29 (t, J = 7,0 Hz, 2H) ;
20 2,74 (mf , 4H) ; 3,16 (mf, 2H) ; de 3ï60 à 3,80 (mf, 2H) ; 6,71 (d large, J
= 9,0 Hz, 2H) ; 6,96 (d large, J = 9,0 Hz, 1 H) ; 7,33 (t large, J = 6,0 Hz, 1 H) ;
7,51 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,64 (d, J = 9,0 Hz, 1 H) ; 7,68 (s large, 1 H) ;
7,85 (mf étalé, 3H) ; 9,98 (mf, 1 H) ; 12;4 (s large, 1 H) .
Exemale 41 : Préparation du 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzene-25 sulfonic acid 2-[(1-amino-cyclopentanecarbonyl)-amino]-benzothiazol-6-yl ester N\/~N
N ~
g ~ 0o \
I~I
A une solution de 120 mg de 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-[(1-tert-butoxycarbonylamino-cyclopentanecarbonyl)-aminà]-bënzothiazol-6-yl ester (intérmédià'ire 37) dàns 3 ml de diàxanne est ajoutée 3 ml de dioxanne chlorhydrique. La solution résultante est agitée pendant 5 heures à température ambiante puis évaporée sous pression réduite pour conduire à 90 mg d'huile, purifiée par LC/MS donne 32 mg de 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-[(1-amino-cyclopentanecarbonyl)-amino]-benzothiazol-6-yl ester.
Spectre RMN 1 H ( 300MHz ) - s en ppm - dans le DMSO-d6 + 1 goutte AcCOD
1,26 (d, J = 6,5 Hz, 12H) ; de 1,85 à 2,02 (mf, 6H) ; 2,35 (mf, 2H) ; 3,19 (t, J =
7,0 Hz, 2H) ; 3,50 (t, J = 7,0 Hz, 2H) ; 3,68 (mt, J = 6,5 Hz, 2H) ; 6,72 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 6,98 (dd, J = 8,5 et 2,5 Hz, 1 H) ; 7,55 (d large, J
= 9,0 Hz, 2H) ; 7,76 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ; 7,85 (d, J =2,5 Hz, 1 H) .
Exemple 42 : Préparation du 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzene-sulfonic acid 2-(2-piperidin-4-yl-acetylamino)-benzothiazol-6-yl ester ~ NON
O O

N-~\
N
A une solution de 90 mg de 4-({6-[4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonyloxy]-benzothiazol-2-carbamoyl}-methyl)-piperidine-1-carboxylic acid tert-butyl ester (intermédiaire 38) dans 3 ml de dioxanne est ajoutée 3 ml de dioxanne chlorhydrique. La solution résultante est agitée pendant 5 heures à température ambiante puis évapôrée sous pression réduite pour conduire à 90 mg d'huile, purifiée par LC/MS donne 101 mg de 4-(2-DÜsopropylàmino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(2-piperidin-4-yl-acetylamino)-benzo-thiazol-6-yl ester.
LC/MS : [M+H]+ : 574.23 Temps de rétention : 2.24 min. Méthode A1 MS : DCI : m/z=574 [MH~]
ES~ : m/z=574 [MH+] ; m/z=287,9 [(M+2H)/2]+
Spectre RMN 1 H ( 400MHz ) - 8 en ppm - dans le DMSO-d6 + 1 goutte AcCOD à 383 K (110°C) 1,33 (d, J = 7,0 Hz, 12H) ; de 1,42 à 1,58 (mf, 2H) ; de 1,85 à 1,95 (mf, 2H) ;
2,15 (mf, 1H) ; 2,31 (d, J = 7,0 Hz, 2H) ; de 2,87 à 2,97 (mf, 2H) ; 3,22 (t, J =
6,5 Hz, 2H) ; de 3,24 à 3,32 (mf, 2H) ; 3,58 (t, J = 6,5 Hz, 2H) ; de 3,65 à
3,75 (mf, 2H) ; 6,75 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,08 (dd, J = 8,5 et 2,5 Hz, 1 H) 7,58 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,62 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) ; 7,65 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) .
Exemple 43 : Préparationdu4~(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzene-sulfonic acid 2-acetylamino-benzothiazol-6-yl ester NON
S
N--(v I ~ O
N
Sur une solution de 4-(2-düsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester(intermédiaire 34) (70 mg, 0.156 mmol.) dans 4 ml de dimethylformamide sont ajoutés 28 mg d'acide acétique, 177.5 mg de HBTU, 163 p1 de DIEA. La solution obtenue est agitée 20 heures à
température ambiante. Après avoir ajouté 50 ml d'eau, le mélange réactionnel est extrait par 3 fois 25 ml d'acétate d'éthyle. Les extraits séchés sur sulfate de magnésium, filtrés et évaporés sous pression réduite, conduisent à
130 mg d'huile brute. Cette huile est purifiée par LC/MS donner 15 mg de 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-acetylamino-benzo-thiazol-6-yl ester.
I R : 3420; 2989; 2680; 1674; 1599; 1542; 1452; 1367; 1268; 1202; 1176;
1161; 1134; 1094; 914; 851; 831; 753; 720 et 579 cm ~
Spectre RMN 1 H ( 300MHz ) - â en ppm - dans le DMSO-d6 1,30 (d, J = 6,5 Hz, 12H) ; 2,22 (s, 3H) ; 3,23 (mf , 2H) ; 3,51 (mf, 2H) ;
3,72 (mf, 2H) ; 6,74 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 6,90 (mf étalé, 1 H) ; 7,03 (d large, J
= 9,0 Hz, 1 H) ; 7,56 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,68 (d, J = 9,0 Hz, 1 H) ;
7,70 (d, J = 3,0 Hz, 1 H) ; 8,46 (mf, 1 H) ; 12,4 (s large, 1 H) .

Exemple 43 a : Préparation du 4~(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzene-sulfonic acid 2-acetylamino-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate H
~ NON
O
S 00 \
S
ii Nr / O CIH
L'exemple 43 a est synthétisé à partir de 250 mg (0.557 mmol) de 4-(2-düsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-amino-benzo-thiazol-6-yl ester(intermédiaire 34) en solution avec 57 mg (0.557 mmol) d'anhydride acétique, de 216 mg (1.671 mmol) de N,N-düsopropylethylamine, dans 10 ml de dichlorométhane. Le milieu réactionnel est mis une nuit sous agitation, puis les mémes quantités d'anhydride acétique et de N,N-düsopropylethylamine sont ajoutées 2 fois et la réaction est continuée pendant 3 jours à température ambiante. 50 ml de dichlorométhane sont ensuite ajoutés au milieu réactionnel qui est lavé à l'eau. La phase organique est additionnée d'une solution d'acide chlorhydrique 2N jusqu'â pH 3, puis est lavée par une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, séchée sur sulfate de magnésium et évaporée à sec conduisant à 140 mg de 4-(2-Düsopropylamino-ethylamino)-benzene-sulfonic acid 2-acetylamino-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate avec un rendement de 48 %.
Masse : ES m/z=491 MH+ pic de base RMN : Spectre RMN 1 H à 300 MHz sur spectromètre BRUKER AVANCE
DPX-300 avec les déplacements chimiques (â en ppm) - dans le solvant diméthylsulfoxide - d6 (DMSO-d6) référencé à 2,50 ppm De 0,90 à 1,35 (m, 12H) ; 2,20 (s, 3H) ; 3,18 (m large, 2H) ; 3,53 (m large, 2H) ; de 3,60 à 3,77 (m large, 2H) ; 6,72 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,00 (dd, J
= 2,5 et 8,5 Hz, 1 H) ; 7,04 (m large, 1 H) ; 7,53 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ;
7,66 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ; 7,68 (d, J = 2,5 Hz; 1 H) ; 9,09 (m large, 1 H) ; 12,4 (s large, 1 H) .
1R : KBr 3427; 2978; 2658; 1693; 1598; 1542; 1452; 1367; 1267; 1160; 1093; 913; 850 et 578 cm ~

Exemple 44 : 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(2-methoxy-acetylamino)-benzothiazol-6-yl ester NON
- O
S \ O S \
N ~~ ~ / O
N
Sur une solution de 4-(2-düsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 34) (70 mg, 0.156 mmol.) dans 4 ml de dimethylformamide sont ajoutés 42.1 mg d'acide méthoxyacétique, 177.5 mg de HBTU, 163 p1 de DIEA. La solution obtenue est agitée 20 heures à température ambiante. Après avoir ajouté 50 ml d'eau, le mélange réactionnel est extrait par 3 fois 25 ml d'acétate d'éthyle. Les extraits séchés sur sulfate de magnésium, filtrés et évaporés sous pression réduite, conduisent à 98 mg d'huile brute. Cette huile est purifiée par LC/MS donner 47.8 mg de 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(2-methoxy-acetyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester.
I R : 3390; 2993; 2666; 1674; 1599; 1541; 1452; 1365; 1269; 1202; 1175;
1161; 1125; 1094; 914; 852; 830; 757; 720 et 570 cm ~
Spectre RMN 1 H ( 300MHz ) - s en ppm - dans le DMSO-d6 1,29 (d, J = 6,5 Hz, 12H) ; 3,23 (mf , 2H) ; 3,40 (s, 3H) ; 3,52 (mf, 2H) ;
3,72 (mf étalé, 2H) ; 4,22 (s, 2H) ; 6,75 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 6,90 (t large, J =
6,0 Hz, 1 H) ; 7,05 (dd, J = 9,0 et 2,5 Hz, 1 H) ; 7,55 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ;
7,70 (d, J = 9,0 Hz, 1 H) ; 7,72 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) ; 8,48 (mf, 1 H) ; 12,35 (s, 1 H) .
Exemple 44â : Préparation du 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzene-sulfonic acid 2-(2-methoxy-acetylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate / NON
-O, ,,O
S \ OOS
Ny I / O CI
N
L'exemple 44 a est synthétisé selon la méthode de l'exemple 44, à partir de 750 mg (1.672 mmol) de 4-(2-düsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-amino-benzôthiazol-6-yl ester (intermédiaire 34) pour obtenir le : 4-(2-Düsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(2-methoxy-acetyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester brut. Celui-ci a été solubilisé dans 1 ml de méthanol, 3 ml de dioxanne. 4 ml de dioxanne/HCl 4N ont été ajoutés à la solution. Le milieu réactionnel est mis sous agitation à température ambiante 5 pendant une nuit, puis évaporé à sec. Le résidu obtenu est purifié en chromatographie flash sur une première cartouche de 20 g de silice par un gradient de 0 à 10 % de méthanol dans le dichlorométhane. Le produit obtenu ayant une pureté de 90 %, une deuxièt~e purification est réaliséé sur une cartouche de 50 g de silice par un gradient de 0 à 10 % de méthanol 10 dans le dichlorométhane en 1 H30 avec un débit de 20 ml/min. Après concentration à sec des fractions contenant le produit, 205 mg de 4-(2-Düsopropylamino-ethylamino)-benzene-sulfonic acid 2-(2-methoxy-acetyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate sont obtenus avec un rendement de 22 %.
15 Masse : ES m/z=521 MH+ pic de base RMN : Spectre RMN 1 H à 300 MHz sur spectromètre BRUKER AVANCE
DPX-300 avec les déplacements chimiques (â en ppm) - dans le solvant diméthylsulfoxide - d6 (DMSO-d6) référencé à 2,50 ppm De 0,80 à 1,40 (m, 12H) ; de 2,90 à 3,70 (m partiellement masqué, 6H) ; 3,38 20 (s, 3H) ; 4,20 (s, 2H) ; 6,68 (d large, J = 8,5 Hz, 2H) ; 7,00 (dd, J = 2,5 et 8,5 Hz, 1 H) ; 7,49 (d large, J = 8,5 Hz, 2H) ; 7,68 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ; 7,70 (d, J =
2,5 Hz, 1 H) ; 12,35 (s large, 1 H) .
1R : KBr 3388; 2965; 2653; 1704; 1598; 1539; 1451; 1363; 1160; 1093; 914; 852; 754 25 et 567 cm ~
Exemple 45 : 4-(2-DÜsôpropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(cyclopentanecarbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester.
/ NON
O
S
Ny ~ / O
N

Sur une solution de 4-(2-düsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 34) (70 mg, 0.156 mmol.) dans 4 ml de dimethylformamide sont ajoutés 42.1 mg d'acide méthoxyacétique, 177.5 mg de HBTU, 163 p1 de DIEA. La solution obtenue est agitée 20 heures à température ambiante. Après avoir ajouté 50 ml d'eau, le mélange réactionnel est extrait par 3 fois 25 ml d'acétate d'éthyle. Les extraits séchés sur sulfate de magnésium, filtrés et évaporés sous pression réduite, conduisent à 135 mg d'huile brute. Cette huile est purifiée pâr LC/MS donner 55.2 mg de 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(cyclopentane-carbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester.
I R : 3423; 2968; 2672; 1673; 1599; 1541; 1451; 1365; 1261; 1202; 1175;
1161; 1137; 1094; 916; 852; 829; 752; 720 et 568 cm ~
Spectre RMN 1 H ( 300MHz ) - s en ppm - dans le DMSO-d6 + 1 goutte AcOD
1,27 (d, J = 6,5 Hz, 12H) ; de 1,52 à 1,80 (mf, 7H) ; 1,90 (mf, 1 H) ; 2,97 (mt , J = 7,5 Hz, 1 H) ; 3,20 (t, J = 6,5 Hz, 2H) ; 3,50 (t, J = 6,5 Hz, 2H) ; 3, 69 (mt, J = 6,5Hz, 2H) ; 6,71 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,04 (dd, J = 9,0 et 2,5 Hz, 1 H) ;7,53 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,58 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) ; 7,64 (d, J
= 9,0 Hz, 1 H) .
Intermédiaire 46 - Préparation du 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-(6-tert-butoxycarbonylamino-hexanoylamino)-benzothiazol-6-yl ester N
S~H
~l O
O NHBOC
Dans un ballon de 20 ml muni d'un barreau aimanté, une solution de 4-fluoro-benzenesulfônic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 16, brevetbenzothiazole_V2) (0.15 g 0.46 mmole), de BOC-6-Aminohexanoic acid (0.128 g 0.555 mmole), d'HATU (0.211 g 0.555 mmole), de N,N-düsopropylethylamine (95 p1 0.555 mmole) dans 2m1 de DMF est chauffé vers 60°C (ext.) durant 5 heures. -Le milieu réactionnel est extrait à l'acétate d'éthyle, lavé avec une solution d'acide chlorhydrique N puis à l'eau. La phase organiqûe est séchée sur sulfate de sodium, filtrée puis évaporée à sec. Le résidu est purifié par chromatographie à l'aide du Quad 12/25 sur une cartouche de type Biotage (40 g de silice) en éluant avec un mélange chlorure de méthylène-Isopropanol 97: 3. Après évaporation du solvant, 0.199 g de 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-(6-tert-butoxycarbonylamino-hexanoylamino)-benzo-thiazol-6-yl ester sont récupérés avec un rendement de 80 %.
Intermédiaire 47 - Préparation du 4-(2-DÜsopropyiamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(6-tert-butoxycarbonylamino-hexanoylamino)-benzothiazol-6-yl ester \ 0 ~N
N
S~ N
O
~ÖI ~NHBOC
Une solution de 0.194 g de 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-(6-tert-butoxycarbonylamino-hexanoylamino)-benzothiazol-6-yl ester (0.194 g 0.36 mmole) et de N,N-düsopropylethylenediamine (0.33 ml 1.8 mmole) dans 4 ml de NMP est chauffée 10 minutes à 150°C au micro-ondes. Le brut réactionnel est extrait à l'AcOEt, lavé à l'eau. La phase organique est séchée sur sulfate de sodium, filtrée puis évaporée : on obtient 1.8 g (liquide jaune).
On chromatographie sur silice 60 (40-63 pm) en éluant avec un mélange CH2CI2-MeOH 93 : 7. Après évaporation du solvant on obtient une gomme (0.215 g) que l'on triture à l'eau. On élimine l'eau, puis reprend la gomme avec du toluène et évapore à sec ce qui conduit à 0.13 g de 4-(2-Düsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(6-tert-butoxycarbonyl-amino-hexanoylamino)-benzothiazol-6-yl ester soit un rendement de 54 %.
Exemple 49 - Préparation du 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(6-amino-hexanoylamino)-benzôthiazol-6-yl ester chlorhydrate.

O
N
N ~ ~ g1\ ~ / \~H
S
H pl ~ N HZ

Dans un ballon de 10 ml muni d'un barreau aimanté, on introduit 0.12 g de 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(6-tert-butoxy-carbonylamino-hexanoylamino)-benzothiazol-6-yl ester dans 2 ml d'AcOEt, puis on ajoute goutte à goutte 0.5 ml d'acide chlorhydrique en solution dans l'AcOEt. IL se forme une gomme que l'on agite 1 heure à température ambiante.
Le milieu réactionnel est repris à l'eau puis amener à pH 8 avec de l'ammoniaque à 28 %: On extrait à l'AcOEt, lave à l'eau puis séche la phase organique sur sulfate de sodium. Après filtration, le filtrat est évaporé à
sec, conduisant à 0.1 g de poudre blanche qui est mise en solution dans 5 ml de méthanol puis amenëe à pH 2 avec de l'acide chlorhydrique en solution dans l'AcOEt. La suspension est évaporée à sec et reprise avec de 5 ml d'eau avant d'être lyophilisée conduisant à 91 mg de 4-(2-DÜsopropylamino ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(6-amino-hexanoylamino)-benzothiazol 6-yl ester chlorhydrate soit 80 % de rendement.
Intermédiaire 50 - Préparation du 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-(7-tert-butoxycarbonylamino-heptanoylamino)-benzothiazol-6-yl N
H
F O
N

Selon la méthode de l'intermédiaire 46, le 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-(7-tert-butoxycarbonylamino-heptanoylamino)-benzothiazol-6-yl ester est préparé par action du 4-fluoro-benzenesulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6 yl ester (intermédiaire 16, brevetbenzothiazole V2) avec du BOC
7-aminoheptanoic acid conduisant à 0.164 g de produit.
Intermédiaire 51 - Préparation du 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(7-tert-butoxycarbonylamino-heptanoylamino)-benzothiazol-6-yl ester H
~N~N ~ I O
S.O I /
Ö
Selon la méthode l'intermédiaire 47, le 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(7-tert-butoxycarbonylamino-heptanoylamino)-benzothiazol-6-yl ester est préparé par action du 4-Fluoro-benzenesulfonic acid . 2-(7-tert-butoxycarbonylamino-heptanoylamino)-benzothiazol-6-yl ester avec la N,N-düsopropylethylenediamine. Le produit est purifié par chromatographie sur colonne de type Biotage (8 g de silice) en éluant avec un mélange CHZCI2-MeOH 95: 5, conduisant à 86 mg de produit soit 44 % dé
rendement.
Exemple 52 - Préparation du 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(7-amino-heptanoylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate.
NHZ
~N~/N ~ ~ O ~ N O CIH
ii ~ ~~N
~S~O~S H
O

Selon la méthode de l'exemple 49, ie 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(7-amino-heptanoylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate est préparé par hydrolyse du 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(7-tert-butoxycarbonylamino-heptanoylamino)-5 benzothiazol-6-yl en présence d'acide chlorhydrique en solution dans l'AcOEt, conduisant à 47 mg de chlorhydrate soit 77% de rendement.
Exemple 53 - Préparation du 4-(2-isopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic 2-(cyclopropanecarbonylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate ciH cu~
p H HN' N
~S NH
N i ~ O, w \ D.S
Une solution de 4-fluoro-benzenesulfonic 2-(cyclopropanecarbonylamino)-benzothiazol-6-yl _ester (exemple 53, brevetbenzothiazole V2) (145 mg, 0.37 mmol) et de N-isopropylethylehediamine (233 NI, 1.85 mmol) dans 4.5 ml de °NMP est chaufféé à 150°C au micro-ondes pendant 5 minutes.
Le brut réactionnel est dilué à l'AcOEt, on lave 3 fois à l'eau et extrait deux fois à
l'AcOEt. Les phases organiques sont réunies, séchées sur sulfate de sodium, filtrées puis amenées à sec. Les 165 mg de produit brut sont purifiés par chromatographie sur silice : colonne AIT 8 g. Eluant : CH2CI2 / MeOH/NH40H:
90/10/1. Le solide obtenu (96 mg) est mis en solution dans fAcOEt puis amené à pH 2 avec de l'acide chlorhydrique en solution dans l'AcOEt. La suspension est évaporée à sec et reprise avec 5 ml d'eau avant d'être lyophilisée pour conduire à 76 mg de 4-(2-isopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic 2-(cycloprbpanecarbonylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate.
Intermédiaire 54 - Préparation du 4-Fluoro-benzenesulfonic âcid 2-isobutyrylamino-benzothiazol-6-yl ester F O' \
\ ( S/O I \ ~~-N
S H
/~ ~O
O

Selon la méthode de l'intermédiaire 46, le 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-isobutyrylamino-benzothiazol-6-yl ester est préparé par action du 4-fluoro-benzenesulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 16, brevetbenzothiazole V2) avec fisobutyric acid. Le brut réactionnel est cristallisé avec de l'éther éthylique, après essorage on isole 0.17 g de solide incolore soit 36 % de rendement.
Exemple 55 - Préparation du 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-isobutyrylamino-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate N ~ c~x HN O
i O ~ N
,S. ~ i ~ H
O S
Selon la méthode de l'exemple 53, le 2, 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-isobutyrylamino-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate est préparé par action du 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-isobutyrylamino-benzothiazol-6-yl ester avec la N,N-düsopropyléthylenediamine. Le brut réactionnel est extrait à l'AcOEt, lavé à l'eau. La phase organique est séchée sur sulfate de sodium, filtrée puis évaporée : on obtient 0.327 g de produit brut qui est chromatographié sur colonne de silice biotage (40 g) en éluant avec un mélange CH2CI2-MeOH 90 : 10. L'huile obtenue cristallise dans l'heptane. Le prôduit est redissous dans 5 ml d'AcOEt puis on ajoute une solution d'acide chlorhydrique dans l'AcOEt goutte à goutté jusqu'à pH 2.
Le chlorhydrate est essoré, lavé à fAcOEt puis sëché sous vide à
40°C. On isole 0.112 g de 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-isobutyrylamino-benzothiazol-6-yl ester chlôrhydrate soit 42 % de rendement.
Intermédiaire 56 - Préparation du 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-propionylamino-benzothiazol-6-yl ester F / ~ O. I ~ Ni-'N
S
O O
Selon la méthode de l'intermédiaire 46, le 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-propionylamino-benzothiazol-6-yl ester est préparé par action du 4-fluoro-benzenesulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 16, brevetbenzothiazole V2) avec du propionic acid. Le produit, 0.397 g, est obtenu avec un rendement de 93 %.
Exemple 57 - Préparation du 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-propionylamino-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate.

O~S H
i S=0 O
CIH
Selon la méthode de l'exemple 53, le 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino) benzenesulfonic acid 2-propionylamino-benzothiazol-6-yl ester est préparé
par action du 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-propionylamino-benzothiazol 6-yl ester avec la N,N-düsopropyléthylenediamine en chauffant 10 minutes au micro-ondes à 150°C. Le produit, 0.09 g, est obtenu après purification avec un rendement de 45 % sous forme de chlorhydrate.
Exemple 58 - Préparation du 4-(2-Hydroxy-2-methyl-propylamino)-benzenesulfonic acid 2-propionylamino-benzothiazol-6-yl ester CIH

Selon la méthode de l'exemple 53, le 4-(2-Hydroxy-2-methyl-propylamino)-benzenesulfonic acid 2-propionylamino-benzothiazol-6-yl ester est préparé
par action du 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-propionylamino-benzothiazol-6-yl ester avec la .1-amino-2-methyl-propan-2-ol en chauffant 20 minutes au micro-ondes à 150°C. Le produit, 0.096 g, est obtenu après purification avec un rendement de 50 % sous forme de chlorhydrate.
Intermédiaire 59 - 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-(cyclobutanecarbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester F
o. S
~N ~~
H N
Selon la méthode de l'intermédiaire 46, le 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-(cyclobutanecarbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester est préparé par action du 4-fluoro-benzenesulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester avec le cyclobutanecarboxylic acid.
Exemple 60 : Préparation du 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(cyclobutanecarbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl esfier ch 1o rhyd rate H
N~

~H ~N ~ / 0 CIH
Selon la méthodé de l'exemple 53, le 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(cyclobutanecarbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester est préparé par action du 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-propionylamino-benzothiazol-6-yl ester avec la N,N-düsopropyléthylenediamine en chauffant 10 minutes au micro-ondes à 150°C. Le produit, 0.054 g, est obtenu après purification avec un rendement de 18 % sous forme de chlorhydrate.
Intermédiaire 61 : Préparation du 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-(3-pyridin-3-yl-propionylamino)-bénzothiazol-6-yl ester.

O
'NH
N~S
NJ
\ / O
O-S \ / F
O
Selon-la méthode de l'intermédiaire 46, le 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-(3-pyridin-3-yl-propionylamino)-benzothiazol-6-yl ester est préparé par action du 4-fluoro-benzenesulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester avec le 3-(3-pyridyl)-propionic acid. Le produit est obtenu avec un rendement quantitatif.
Exemple 62 :- Préparation du 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(3-pyridin-3-yl-propionylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate.

'NH
~ N~S c~x N - N \
\ / O
O_S \ / H
O
Selon la méthode de l'exemple 7, le 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(3-pyridin-3-yl-propionylamino)-benzothiazol-6-yl ester est préparé par action du 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-(3-pyridin-3-yl-propionylamino)-benzothiazol-6-yl ester avec la N,N-düsopropyléthylene-diamine en chauffant 10 minutes au micro-ondes à 150°C. Le produit, 0.045 g, est obtenu après purification avec un rendement de 23 % sous forme de chlorhydrate.
Exemple 63 : Préparation du 4-(2-Hydroxy-2-methyl-propylamino)-bénzenesulfonic acid 2-(3-pyridin-3-yl-propionylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate:

O
~NH
I ~ N~S cui N
~--~- OH
O-S ~ / N I
O~H
Selon la méthode de l'exemple 53, le 4-(2-Hydroxy-2-methyl-propylamino)-benzenesulfonic acid 2-(3-pyridin-3-yl-propionylamino)-benzothiazol-6-yl ester est préparé par action du 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-(3-pyridin-3-yl-5 propionylamino)-benzothiazol-6-yl ester avec la 1-amino-2-methyl-propan-2-ol en chauffant 20 minutes au micro-ondes à 150°C. Le produit, 0.104 g, est obtenu après purification avec un rendement de 52 % sous forme de chlorhydrate.
Intermédiaire 64 : Préparation du 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-10 acetylamino-benzothiazol-6-yl ester , F
,-O
S \ O S \
I~
N
Dans un tube à essai, muni d'un barreau aimanté, une solution de 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 16) (101.2 mg, 0.312 mmol), d'acide acétique (56.2 mg, 0.936 mmol), d'HBTU
15 (355 mg, 0.936 mmol), de N,N-düsopropylamine (326 NI, 1.872 mmol) dans 5 ml de diméthylformamide est agitée 20 heures à température ambiante. 100 ml d'eau sont ajoutés au milieu réactionnel extrait à l'acétate d'éthyle. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium et évaporée. Le résidu obtenu est repris par de l'acétate d'éthyle et purifié sur cartouche flash 20 Varian contenant 5 g de silice de porosité 15-35 p par mélange de 1 % de méthanol dans le dichlorométhane. Après évaporation du solvant, 66 mg de 4-Fluoro-bénzenesulfonic acid 2-acetylamino-benzothiazol-6-yl ester sont obtenus (huile jaune) avec un rendemént de 58 %. LC/MS (méthode A1 ):
[M+H]+ : 367.14, temps de rétention : 3.50 min.
25 Exemple 65 : Prépâration du 4-(2-Isoprbpylamino-ethylamino)-benzene-sulfonic acid 2-acetylamino-benzothiazol-6-yl ester N
N
O
S w . 0S.0 N~~ ~
N
Dans un tube à essai, muni d'un barreau aimanté, une solution de 4-Fluoro-benzenesulfonic âcid 2-acetylamino-benzothiâzol-6-yl ester (intermédiaire 64) (66 mg, 0.180 mmol), de N-isopropylethylenediamine (55.2 mg, 0.540 mmol), de carbonate de cesium (58.6 mg, 0.180 mmol) dans 2 ml de dimethylsulfoxyde est agitée pendant une nuit à 80°C. 100 ml d'eau sont ajoutés au milieu réactionnel extrait à l'acétate d'éthyle. La phase organique est ensuite lavée à l'eau, séchée sur sulfate de magnésium et évaporée. Le résidu purifiée par LC/MS conduit à 43 mg de 4-(2-Isopropylamino-ethylamino)-benzenesulforüc acid 2-acetylamino-benzbthiazol-6-yl ester (poudre blanche) avec un rendement de 53 %.
LC/MS (méthode A1 ): [M+H]+ : 449.35, temps de rétention : 3.28 min.
Spectre RMN 1 H à 300 MHz sur spectromètre BRUKER AVANCE DPX-300 avec les déplacements chimiques (â en ppm) - dans le solvant diméthylsulfoxide - d6 (DMSO-d6) référencé à 2,50 ppm Forte présomption pour le produit salifié par TFA avec 1,21 (d, J = 7,0 Hz, 6H) ; 2,20 (s, 3H) ; 3,07 (m , 2H) ; de 3,20 à 3,35 (m masqué, 1 H) ; 3,41 (m, 2H) ; 6,72 (d large, J = 8,5 Hz, 2H) ; 6,93 (t large, J =
6,0 Hz, 1 H) ; 7,01 (dd, J = 2,5 et 8,5 Hz, 1 H) ; 7,53 (d large, J = 8,5 Hz, 2H) ;
7,68 (d, J = 8,5 Hz! 1 H) ; 7,69 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) ; 8,30 (m étalé, 2H) ;
12,4 (s large, 1 H).

Intermédiaire 66 : Préparation du 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-(2-methoxy-acetylamino)-benzothiazol-6-yl ester F
-O~O S \ O O
Ny ~ ii N / O
Dans un tube à essai, muni d'un barreau aimanté, une solution de~ 4-Fluoro-benzenesu(fonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 16) (101.2 mg, 0.312 mmol), de methoxyacetique acid (84.3 mg, 0.936 mmol), d'HBTU (355 mg, 0.936 mmol), de N,N-düsopropylamine (326 p1, 1.872 mmol) dans 5 ml de diméthylformamide est agitée 20 heures à
température ambiante. 100 ml d'eau sont ajoutés au milieu réactionnel extrait à l'acétate d'éthyle. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium et évaporée. Le résidu obtenu est repris par de l'acétate d'éthyle et purifié sur cartouche flash Varian contenant 5 g de silice de porosité 15-p par mélange de 1 % de méthanol dans le dichlorométhane. Après évaporation du solvant, 89 mg de 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-but-3-enoylamino-benzothiazol-6-yl ester sont obtenus (huile , jaune) avec un rendement de 72 %. LC/MS (méthode A1 ): [M+H]+ : 397.11, temps de rétention : 3.59 min.
Exemple 67: Préparation du 4-(2-Isopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(2-methoxy-acetylamino)-benzothiazol-6-yl ester.
N
N
o~
o'S%-/
-°~° S ~ ~ ô ~~°
N~~
N
Dans un tube à essai, muni d'un barreau aimanté, une solution de 4-(2-Isopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(2-methoxy-acetylamino)-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 66) (89 mg, 0.224 mmol), de N-isopropylethylenediamine (68.7 mg, 0.672 mmol), de carbonate de cesium (73 mg, 0.224 mmol) dans 2 ml de dimethylsulfoxyde est agitée pendant une nuit à 80°C. 100 ml d'eau sont ajoutés au milieu réactionnel extrait à
l'acétate d'éthyle. La phase organique est ensuite lavée à l'eau, séchée sur sulfate de magnésium et évaporée. Le résidu purifiée par LC/MS conduit à 46.6 mg de 4-(2-Isopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(2-methoxy-acetylarnino)-bénzothiazol-6-yl ester (poûdre blanche) avec un rendement de 43 %.
LC/MS (méthode A1 ): [M+H]+ : 479.35, temps de rétention : 3.33 min.
Spectre RMN 1 H à 300 MHz sur spectromètre BRUKER AVANCE DPX-300 avec les déplacements chimiques (8 en ppm) - dans le solvant diméthylsulfoxide - d6 (DMSO-d6) référencé à 2,50 ppm Forte présomption pour produit salifié par le TFA avec 1,21 (d, J = 7,0 Hz, 6H) ; 3,07 (t large, J = 6,5 Hz , 2H) ; de 3,15 à 3,35 (m masqué, 1 H) ; 3,38 (s, 3H) ; 3,41 (m, 2H) ; 4,20 (s, 2H) ; 6,72 (d large, J =
8,5 Hz, 2H) ; 6,93 (t large, J = 6,0 Hz, 1 H) ; 7,03 (dd, J = 2,5 et 8,5 Hz, 1 H) ; 7,53 (d large, J = 8,5 Hz, 2H) ; 7,69 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ; 7,71 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) ;
de 8,10 à 8,45 (m étalé, 2H) ; de 12,0 à 12,5 (m très étalé, 1 H).
Intermédiaire 68 - Préparation du 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-(cyclopentane carbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester F
O
O
Dans un tube à essai, muni d'un barreaû aimanté, une solution de 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 16) (101.2 mg, 0.312 mmol), decyclopentanecarboxylique acid (53.4 mg, 0.936 mmol), d'HBTU (355 mg, 0.936 mmol), de N,N-düsopropylamine (326 p1, 1.872 mmol) dans 5 ml de diméthylformamide est agitée 20 heures à
température ambiante. 100 ml d'eau sont ajoutés au milieu réactionnel extrait à l'acétate d'éthyle. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium et évaporée. Le résidu obtenu est repris par de l'acétate d'éthyle et purifié sur cartouche flash Varian contenant 5 g de silice de porosité 15-p par mélange de 1 % de méthanol dans le dichlorométhane. Après évaporation du solvant, 90 mg de 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-(cyclopentane carbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester sont obtenus (huile jaune) avec un rendement de 68 %. LC/MS (méthode A1 ): [M+H]+ : 421.13, temps de rétention : 4.05 min.
Exemple 69: Préparation du 4-(2-Isopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(cyclopentanecarbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester N
N
e~

s ~ o ;s..o ~N-C. 1 , ô
N
Dans un tube à essai, muni d'un barreau aimanté, une solution de 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-(2-methoxy-acetylamino)-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 68) (90 mg, 0.214 mmol), de N-isopropylethylenediamine (65.6 mg, 0.642 mmol), de carbonate de cesium (69.7 mg, 0.214 mmol) dans 2 ml de dimethylsulfoxyde est agitée pendant une nuit à 80°C. 100 ml d'eau sont ajoutés au milieu réactionnel extrait à l'acétate d'éthyle. La phase organique est ensuite lavée à l'eau, séchée sur sulfate de magnésium et évaporée. Le résidu purifiée par LCIMS conduit à 26.2 mg de 4-(2-Isopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(cyclopentanecarbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester (poudre blanche) avec un rendement de 24 %.
LC/MS (méthode A1 ): [M+H]+ : 503.39, temps de rétention : 3.68 min.
Spectre RMN 1 H à 300 MHz sur spectromètre BRUKER AVANCE DPX-300 avec les déplacements chimiques (8 en ppm) - dans le solvant diméthylsulfoxide - d6 (DMSO-d6) référencé à 2,50 ppm Forte présomption pour produit salifié par TFA avec 1,21 (d, J = 7,0 Hz, 6H) ; de 1,50 à 1,80 (m, 6H) ; de 1,82 à 1,98 (m, 2H) ;
2,98 (m, 1 H) ; 3,04 (m, 2H) ; de 3,15 à 3,55 (m, 3H) ; 6,71 (d large, J = 8,5 Hz, 2H) ; 6,92 (t large, J = 6,0 Hz, 1 H) ; 7,02 (dd, J = 2,5 et 8,5 Hz, 1 H) ; 7,53 5 (d large, J = 8,5 Hz, 2H) ; de 7,65 à 7,70 (m, 2H) ; de 8,05 à 8,45 (m très étalé, 2H) ; 12,4 (m étalé, 1 H).
Intermédiaire 70: Préparation du 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-propionylamino-benzothiazol-6-yl ester ~N S ~ O-S ~ ~ F
/ O
N
10 Une solution de 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 16) (500 mg, 1.14 mmol), d'acide propionic, (253 mg, 3.42 mmol), d'HBTU (1.23g, 3.42 mmol), de N,N-düsopropylamine (737 mg, 5.7 mmol) dans 6.5 ml de diméthylformamide est mise sous agitation pendant une nuit à température ambiante. Le milieu réactionnel est évaporé à sec. Le 15 résidu sec est extrait 2 fois par 50 ml d'acétate d'éthyle et lavé à l'eau.
La phase organique est lavée ensuite par une solution saturée de chlorure de sodium. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium, puis évaporée. L'huile obtenue est solubilisée dans 35 ml de dimethylsulfoxyde, puis purifiée en 7 fois par HPLC préparative sur uné colonne de phase 20 inversé Nucléodur C18, 100 A, 10 Nm par un gradient en 52 minutes de 5 à
95 % d'acétonitrile additionné de 0.07 % d'acide trifluoroacétique dans l'eau, additionnée de 0.07 % d'acide trifluoroacétique. Le débit est de 70 ml/min.
Les fractions contenant le produit propre sont concentrées pour obtenir 300 mg de 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-propionylamino-benzothiazol-6-yl 25 ester avec un rendement de 69 %.
RMN : Spectre RMN 1 H à 300 MHz sur spectromètre BRUKER AVANCE
DPX-300 avec les déplacements chimiques (â en ppm) - dans le solvant diméthylsulfoxide - d6 (DMSO-d6) référencé à 2,50 ppm 1,11 (t, J = 7,5 Hz, 3H) ; 2,50 (m partiellement masqué, 2H) ; 7,01 30 (dd, J = 2,5 et 8,5 Hz, 1 H) ; 7,51 (t large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,68 (d, J
= 8,5 Hz, 1 H) ; 7,79 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) ; 7,94 (dd largé, J = 5,5 et 9,0 Hz, 2H) ; 12,4 (s large, 1 H) .

Exemple 71 - Préparation du 4-(2-Isopropylamino-ethylamino)-benzene-sulfonic acid 2-propionylamino-benzothiazol-6-yl ester; compound with trifluoro-acetic acid p~ g ~ o. :o , N-Cv S
N ~ ~ Ö 1 / N F
~O
N./. F
F
Une solution de 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-propionylamino-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 70) (300 mg, 0.789 mmol), de N-isopropylethylenediamine (242 mg, 2.37 mmol), de cesium carbonate (256 mg, 0.789 mmol) dans 4 ml de diméthylsulfoxyde est mise à 80°C
sous agitation pendant 7H30, puis à température ambiante pendant 2 jours. Le milieu réactionnel est filtré, rincé par 8 ml de diméthylsulfoxyde. Le produit attendu est purifié en 3 fois par HPLC préparative dans les mêmes conditions que pour l'intermédiaire 70. 205 mg de 4-(2-Isopropylamino-ethylamino)-benzene-sulfonic acid 2-propionylamino-benzothiazol-6-yl ester; compound with trifluoro-acetic acid sont obtenus avec un rendement de 56 %.
RMN : Spectre RMN 1 H à 300 MHz sur spectromètre BRUKER AVANCE
DPX-300 avec les déplacements chimiques (â en ppm) - dans le solvant diméthylsulfoxide - d6 (DMSO-d6) référencé à 2,50 ppm 1 11 (t J = 7 5 Hz 3H) ' 1 22 ~d J = 6,5 Hz, 6H) ; de 2,45 à 2,54 (m partiellement masaué 2H) ' 3 07 (m, 2H) ; de 3,22 à 3.47 (m partiellement masaué 3H) ' 6 72 (d large J = 9 0 Hz, 2H) - 6,93 (t large, J = 6,0 Hz, 1 H) ;
~ 02 (dd J = 2 5 et 8 5 Hz 1 H) ' 7 53 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,67 (d, J
=
8 5 Hz 1 H) ; 7 69 (d J = 2 5 Hz 1 H) ; de 8 22 à 8.38 (m étalé. 2H) ; 12,35 (s large, 1 H) .
Intermédiaire 72 - Préparation du 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-butyrLrlamino-benzothiazol-6-yl ester O
~N S ~ O-S ~ ~ F
/ O
N
Selon la méthode de l'intermédiaire 70, l'intermédiaire 72 est synthétisé en utilisant le butyric acid. 80 mg de 4-Fluoro-benzènesulfonic acid 2-butyryl-amino-benzothiazol-6-yl ester sont obtenus avec un rendement de 18 %.
RMN : Spectre RMN 1 H à 300 MHz sur spectromètre BRUKER AVANCE
DPX-300 avec les déplacements chimiques (8 en ppm) - dans le solvant diméthylsulfoxide - d6 (DMSO-d6) référencé à 2,50 ppm 0,92 (t, J = 7,5 Hz, 3H) ; 1,64 (m, 2H) ; 2,48 (m partiellement masqué, 2H) ;
7,01 (dd, J = 2,5 et 8,5 Hz, 1 H) ; 7,51 (t large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,68 (d, J =
8,5 Hz, 1 H) ; 7,78 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) ; 7,93 (dd large, J = 5,5 et 9,0 Hz, 2H) ; 12,4 (s large, 1 H) .
Exemple 73 - Préparation du 4-(2-Isopropylamino-ethylamino)-benzene-sulfonic acid 2-butyrylamino-benzothiazol-6-yl ester; compound with trifluoro-acetic acid o .N-es I ~ o.s. ; , o F
N_ s ~O
F
F
Selon la méthode de l'exemple 71, l'exemple 73 est obtenu en utilisant l'intermédiaire 72 avec la N-isopropylethylenediamine. 37 mg de 4-(2 Isopr~pylamino-ethylamino)-benzene-sulfonic acid 2-butyrylamino-benzo thiazol-6-yl ester; compound with trifluoro-acetic acid avec un rendement de 36 %.
RMN : Spectre RMN 1 H à 300 MHz sur spectromètre BRUKER AVANCE
DPX-300 avec les déplacements chimiques (8 en ppm) - dans le solvant diméthylsulfoxide - d6 (DMSO-d6) référencé à 2,50 ppm 0,91 (t, J = 7,5 Hz, 3H) ; 1,22 (d, J = 6,5 Hz, 6H) ; 1,63 (m, 2H) ; 2,47 (t partiellement masqué, J = 7,5 Hz, 2H) ; 3,07 (m, 2H) ; de 3,20 à 3.37 (m masqué, 1 H) ; 3,41 (m, 2H) ; 6,72 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 6,94 (t large, J
= 6,0 Hz, 1 H) ; 7,02 (dd, J = 2,5 et 8,5 Hz, 1 H) ; 7,53 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,66 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ; 7,69 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) ; 8,32 (m étalé, 2H) ;
12,4 (s large, 1 H) .
Intermédiaire 74 - Préparation du 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-iso-butyrylamino-benzothiazol-6-yl ester o~ s ~ o.s:o , ~N I i Ö 1 / F
Selon la méthode de l'intermédiaire 70, l'intermédiaire 74 est synthétisé en utilisant l'isobutyric acid. 75 mg de 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-isobutyrylamino-benzothiazol-6-yl ester sont obtenus avec un rendement de 17 %.
RMN : Spectre RMN 1 H à 300 MHz sur spectrométre BRUKER AVANCE
DPX-300 avec les déplacements chimiques (8 en ppm) - dans le solvant diméthylsulfoxide - d6 (DMSO-d6) référencé à 2,50 ppm 1,14 (d, J = 7,0 Hz, 6H) : 2,79 gym, 1 H) : 7,02 (dd, J = 2,5 et 8,5 Hz, 1 H) ;
7,51 (t large, J = 9.0 Hz, 2H) : 7,68 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) : 7,79 (d, J = 2,5 Hz.
1 H) ; 7,93 (dd lâre~e, J = 5,5 et 9,0 Hz, 2H) ; 12,4 (s large, 1 H) .
Exemale 75 - Préparation du 4-(2-Isopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-isobutLrrylamino-benzothiazol-6-yl ester; compound with trifluoro-acetic acid o~ S ~ o.S:o , NON ~ i ~ ~ e N F
~O
N~ F
F

Selon la méthode de l'exemple 71, l'exemple 75 est obtenu en utilisant l'intermédiaire 74 avec la N-isopropylethylenediamine. 49 mg de 4-(2 Isopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-isobutyrylamino benzothiazol-6-yl ester; compound with trifluoro-acetic acid sont obtenus avec un rendement de 44 %.
RMN : Spectre RMN 1 H à 300 MHz sur spectromètre BRUKER AVANCE
DPX-300 avec les déplacements chimiques (8 en ppm) - dans. le solvant diméthylsulfoxide - d6 (DMSO-d6) référencé à 2,50 ppm 1,14 (d, J = 6,5 Hz, 6H) ; 1,22 (d, J = 6,5 Hz, 6H) ; 2,79 (m, 1H) ; 3,07 (m, 2H) ; de 3,25 à 3.37 (m masqué, 1 H) ; 3,41 (m, 2H) ; 6,72 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 6,93 (t large, J = 6,0 Hz, 1 H) ; 7,03 (dd, J = 2,5 et 8,5 Hz, 1 H) ;
7,53 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; de 7,64 à 7,70 (m, 2H) ; 8,30 (m étalé, 2H) ; 12,4 (s large, 1 H) .
Intermëdiaire 76 - Préparation du 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-(cyclobutanecarbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester O S ~ O.S:O
N~~ ~ i 0 ' / F
N
Selon la méthode de l'intermédiaire 70, l'intermédiaire 76 est synthétisé en utilisant le cyclobutanecarboxylic acid. 185 mg de 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-(cyclobutanecarbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester sont obtenus avec un rendement de 40 %.
Exemale 77 - Préparation du 4-(2-Isopropylamino-ethylamino)-benzene-sulfonic acid 2-(cyclobutanecarbonyl-arnino)-benzothiazol-6-yl ester;
compound with trifluoro-acetic acid O~ g ~ O. :O ~ O
NON I ~ ô 1 ~ N
F
N~ _O
F
F
Selon la méthode de l'exemple 71, l'exemple 77 est obtenu en utilisant l'intermédiaire 76 avec la N-isopropylethylenediamine. 41 mg de 4-(2-Isdpropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-(cyclobutanecarbonyl-5 amino)-benzothiazol-6-yl ester; compound with trifluoro-acetic acid sont obtenus avec un rendement de 37 %.
RMN : Spectre RMN 1 H à 300 MHz sur spectromètre BRUKER AVANCE
DPX-300 avec les déplacements chimiques (â en ppm) - dans le solvant diméthylsulfoxide - d6 (DMSO-d6) référencé à 2,50 ppm :
10 1,22 (d, J = 6,5 Hz, 6H) ; 1,84 (m, 1 H) ; 1,99 (m, 1 H) ; de 2,10 à 2,30 (m, 4H) ; 3,07 (m, 2H) ; de 3,20 à 3.47 (m masqué, 4H) ; 6,72 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 6,97 (t large, J = 6,0 Hz, 1 H) ; 7,01 (dd, J = 2,5 et 8,5 Hz, 1 H) ; 7,53 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,67 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ; 7,69 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) ;
de 8,27 à 8,44 (m étalé, 2H) ; 12,3 (s large, 1 H) .
15 Intermédiaire 78: Préparation du 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-butyrylamino-benzothiazol-6-yl ester.
Dans un ballon de 20 ml, muni d'un barreau aimanté, une solution de 4-Fluoro-benzenésulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 20 16) (359 mg, 1.107 mmol), d'acide butyrique (146 mg, 1.66 mmol), d'HATU
(631 mg, 1.66 mmol), de N,N-düsopropylethylamine (0.286 ml, 1.66 mmol) dans 5.5 ml .de diméthylformamide est agitée 8 heures à 60°C puis abandonnëe une nuit à température ambiante. Le milieu réactionnel est extrait à l'acétate d'éthyle, lavé à l'eau puis avec une solution d'acide chlorhydrique 0.1 N. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium, filtrée puis évaporée à sec. Le résidu obtenu (567 mg solide jaune pâle) est purifié par chromatographie sur cartouche de silice Biotage 40 g en éluant avec un mélange toluèné-isopropanol 9 : 1. Après évaporation du solvant, 239 mg de 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-butyrylamino-benzothiazol-6-yl ester sont obtenus (solide blanc) avec un rendement de 55 %.
Masse LC/MS : m/z 395 : [M+H]+ , m/z 393 : [M-H]-Spectre RMN 1 H à 400 MHz avec les déplacements chimiques (â en ppm) -dans le solvant diméthylsulfoxide - d6 (DMSO-d6) référencé à 2,50 ppm 0,9ns 1 (t, J = 7,5 Hz, 3H) ; 1,64 (m, 2H) ; 2,47 (t partiellement masqué, J =
7,5 Hz, 2H) ; 7,01 (dd, J = 2,5 et 8,5 Hz, 1 H) ; 7,51 (t large, J = 9,0 Hz, 2H) 7,68 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ; 7,79 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) ; 7,93 (dd, J = 6,0 et 9,0 Hz, 2H) ; 12,4 (s large, 1 H).
Exemple 79 : Préparation du 4-(2-DÜsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-butyrylamino-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate.
Dans un vial de 5 ml pour micrô-ondes muni d'un barreau aimanté, une solution de 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-butyrylamino-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 78) (100 mg, 0.2 mmole), de N,N-düsopropyléthylènediamine (185 p1, 1.01 mmol) dans 3m1 de N-méthylpyrrolidone est chauffée 10 min à 150°C au micro-ondes. Le milieu réactionnel est extrait à l'acétate d'éthyle, lavé à l'eau. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium, filtrée puis évaporée à sec. Le résidu obtenu est purifié par chromatographie sur silice Merck (40-63 pm). Après évaporation du solvant 41 mg d'huile incolore (cristallise à sec) sont obtenues. Le produit est dissous dans un minimum d'acétate d'éthyle puis a]oute de l'acide chlorhydrique 4 N en solution dans le dioxanne. II y a précipitation du milieu qui est concentré, repris à l'eau puis filtré sur filtre Milex 45 pm. La solution précipite, 31 mg (rendement 28 %) de 4-(2 Düsopropylamino-ethylamino)-benzenesulfonic acid 2-butyrylamino benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate sont obtenues après essorage puis séchage sous vide à 40°C.
Masse ~ IE : m/z 114 : (C3H7)2NCH2+ (pic de base) Absence de l'ion moléculaire.
~ IC: m/z 519 [M+H]+(pic de base).
~ LC/MS : m/z 519 [M+H]+, m/z 517 : [M-H]
Spectre RMN 1 H à 300 MHz avec les déplacements chimiques (8 en ppm) -dans le solvant diméthylsulfoxide - d6 (DMSO-d6) référencé à 2,50 ppm 0,91 (t, J = 7,5 Hz, 3H) ; de 1,20 à 1,32 (m large, 12 H) ; 1,63 (m, 2H) ; de 2,42 à 2,55 (t partiellement masqué, J = 7,5 Hz, 2H) ; 3,19 (m, 2H) ; 3,51 (m, 2H) ; 3,69 (m étalé, 2H) ; 6,72 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 6,97 (t large, J = 6,0 Hz, 1 H) ; 7,02 (dd, J = 2,5 et 8,5 Hz, 1 H) ; 7,53 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; de 7,63 à 7,69 (m, 2H) ; 8,78 (m étalé, 1 H) ; 12,4 (s large, 1 H) .
Exemple 80: Préparation du 4-(2-Hydroxy-2-methyl-propylamino)-benzenesulfonic acid 2-butyrylamino-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate.

~H
H J\N
y i O=S=O
S I ~ Ö
ciH
N
O
Dans un~ vial de 5 ml pour micro-ondes muni d'un barrëau aimântë, une solution de 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-butyrylamino-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 78) (135 mg, 0.34 mmole), de 1-amino-2-methyl-propan-2-0l (153 mg, 1.718 mmol) dans 3m1 de N-méthylpyrrolidone est chauffée 20 min à 150°C au micro-ondes. Le milieu réactionnel est extrait à
l'acétate d'éthyle (3*20 ml), lavé à l'eau (4*25 ml). La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium, filtrée puis évaporée à sec. Le résidu obtenu est purifié par chromatographie sur silice, colonne AIT 15-35 pm 8 g, en éluant avec un mélange acétate d'éthyle/cyclohexane 9 : 1. Après évaporation du solvant 55 mg de solide incolore sont obtenûes. Le produit est dissous dans un minimum de dioxanne, on ajoute de l'acide chlorhydrique 4 N en solution dans le dioxanne. Le précipité obtenu est essoré, lavé avec du dioxanne puis séché sous vide à 40°C, conduisant à 42 mg de 4-(2-Hydroxy-2-methyl-propylamino)-benzenesulfonic acid 2-butyrylamino-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate soit un rendement de 25 %.
Masse .. 1E: m/z 463 : [M+'] , m/z 228 : [M*']- S02PhNHCH2C3H70 ~ IC : m/z 464 : [M+H]~
~ LC/MS : m/z 464 : [M+H]~ , m/z 462 : [M-H]-Spectre RMN 1 H à 400 MHz (8 en ppm) - dans le solvant diméthylsulfoxide -d6 (DMSO-d6) référencé à 2,50 ppm : 0,93 (t, J = 7,5 Hz, 3H) ; 1,15 (s, 6H) ;
1,66 (m, 2H) ; de 2,46 à 2,59 (m partiellement masqué, 2H) ; 3,04 (s, 2H) ;
6,76 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 6,98 (dd, J = 2,5 et 8,5 Hz, 1 H) ; 7,42 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,66 (d; J = 8,5 Hz, 1 H) ; 7,70 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) ; 12,4 (s large, 1 H).

Intermédiaire 81: Préparation du 4-(2-Hydroxy-2-methyl-propylamino)-benzenesulfonic acid 2-tert-butoxycarbonylamino-benzothiazol-6-yl ester N
O S w O I pH
N~~ ~ , N
Une solution de 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-tert-butoxycarbonylamino-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 15) (300 mg, 0.707 mmol), de carbonate de césium (230 mg, 0.707 mmol), de 1-Amino-2-methyl-propan-2-ol (126 mg, 1.414 mmol) dans 5 ml de dimthylsulfoxide est mise sous agitation à 80°C pendant 72 heures. Le milieu réactionnel est additionné
d'eau et extrait 3 fois par de l'acétate d'éthyle. La phase organique est lavée par une solution saturée de chlorure de sodium, puis séchée sur sulfate de magnésium et enfin évaporé à sec conduisant à 290 mg de 4-(2-Hydroxy-2-methyl-propylamino)-benzenesulfonic acid 2-tert-butoxycarbonylamino-benzo-thiazol-6-yl ester avec un rendement de 83 %.
Intermédiaire 82: Préparation du 4-(2-Hydroxy-2-methyl-propylamino) benzenesulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester ; compound with trifluoroacétic acid H
OS \ / N F F O
S ~ O ~OH
H2N-C~
N ~ F OH
Une solution de 4-(2-Hydroxy-2-methyl-propylamino)-benzenesulfonic acid 2-tert-butoxycarbonylamino-benzothiazol-6-yl ester (intermédiaire 81 ) (170 mg, 0.344 mmol), d'acide trifluoroacétiqué (14.9g, 130.7 mmol) dans 10 ml de dichlorométhane et 100 p1 d'eau est mise sous agitation pendant 2 heures à
témpérature ambiante. Le milieu réactionnel est évaporé à sec, repris dans de l'acétate d'éthyle et lavé à l'eau, puis par une solution saturée de chlorure de sodium. Séchage sur sulfaté de magnésium et concentration à sec de la phase organique conduisant à 130 mg de 4-(2-Hydroxy-2-methyl-propylamino)-benzenesulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester ;
compound with trifluoroacétic acid avec un rendement dé 96 %.
LC/MS : (M+Hj+=394.06, temps de rétention = 2.90 min.

Intermédiaire 83: Préparation du 4-(2-~6-[4-(2-Hydroxy-2-methyl-propylamino)-benzenesulfonyloxy]-benzothiazol-2-ylcarbamoyl]-ethyl)-piperi-dine -1-carboxylic acid tert-butyl ester O
~0 N
O S ~ / N
O S ~ O ~OH
N-(v N
5 Une solution de 1-Boc-piperidin-4-ylpropionoc acid ( 176 mg, 0.686 mmol), d'HBTU (260 mg, 0.686. mmol), de N,N-düdopropylethylamine (185 mg, 1.435 mmol) dans 10 ml de diméthylformamide est mise sous agitation pendant 10 min. Le 4-(2-Hydroxy-2-methyl-propylamino)-benzenesulfonic acid 2-amino-benzothiazol-6-yl ester ; compound with trifluoroacétic acid 10 (intermédiaire 82) (130 mg, 0.33 mmol) est ajouté au milieu réactionnel mis sous agitation pendant 48 heures à température ambiante. Le milieu réactionnel est additionné d'eau, puis extrait trois fois par de l'acétate d'éthyle. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium, puis concentrée à sec. Le résidu sec est purifié en chromatographie phase inverse 15 sûr une colonne C18 Dynamax 300 x 20 mm, par un gradient en 5 minutes de 5 à 40 % d'acétonitrile . dans l'eau additionnée de 0.07 % d'acide trifluoroacétique, puis de 40 à 80 % en 30 minutes. Les fractions contenant le produit sont évaporées à sec conduisant à 111 mg de 4-(2-{6-[4-(2-Hydroxy-2-methyl-propylamino)-benzenesulfonyloxy]-benzothiazol-2-ylcarbamoyl}-20 ethyl)-piperi-dine -1-carboxylic acïd tert-butyl ester avec un rendement de 51 %.
LC/MS : [M+H]+=633.00, temps de retention : 3.94 min.
Exemple 84: Préparation du 4-(2-Hydroxy-2-methyl-propylamino)-benzenesulfonic acïd 2-(3-piperidin-4-yl-propionylamino)-benzothiazol-6-yl 25 ester chlorhydrate H
N
H
O~ ~ ~ N
O S ~ O ~OH
N--C~ I ~ CIH
N
Une solution de 4-(2-~6-[4-(2-Hydroxy-2-methyl-propylamino)-benzene-sulfonyloxy]=benzothiazol-2-ylcarbamoyl}-ethyl)-piperidine-1-carboxylic acide tert-butyl ester (110 mg, 0.173 mmol) dans 8 ml de dioxanne et 8 ml de dioxanne /HCI, 4N est mise sous agitation pendant une nuit à température ambiante. Le précipité formé est filtré, solubilisé dans du méthanol, puis évaporé à sec. Le résidu est lavé par de l'éther éthylique conduisant à
103 mg de 4-(2-Hydroxy-2-methyl-propylamino)-benzenesulfonic acid 2-(3 piperidin-4-yl-propionylamino)-benzothiazol-6-yl ester chlorhydrate avec un rendement de 95 %. , LC/MS (méthode A1 ) : [M+H]+=533.04, temps de rétention = 2.66 min.
RMN : Spectre RMN 1 H à 300 MHz sur spectromètre BRUKER AVANCE
DPX-300 avec les déplacements chimiques (0 en ppm) - dans le solvant diméthylsulfoxide - d6 (DMSO-d6) référencé à 2,50 ppm Pour 80 % du mélange, nous avons 1,13 (s, 6H) ; de 1,22 à 1,40 (m, 2H) ; de 1,42 à 1,65 (m, 3H) ; de 1,75 à
1,85 (m, 2H) ; de 2,40 à 2,58 (m partiellement masqué, 2H) ; de 2,75 à 2,90 (m, 2H) ;
3,02 (s, 2H) ; de 3,15 à 3,30 (m, 2H) ; 6,73 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 6,97 (dd, J = 2,5 et 8,5 Hz, 1 H) ; 7,41 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,65 (d, J = 8,5 Hz! 1 H) ;
7,70 (d, J
= 2,5 Hz, 1 H) ; de 8,32 à 8,53 (m étalé, 1 H) ; de 8,65 à 8,80 (m étalé, 1 H) ; 12,4 (s large, 1 H) .
1R : KBr 3405; 2971; 1725; 1597; 1539; 1470; 1365; 1161; 1094; 915; 856; 748 et 578 Cm ~

Exemple 85 - Préparation du 5-Pyridin-2-yl-thiophene-2-sulfonic acid 2-(cyclopropanecarbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester N~
O S
~-~/O O .S \
S ( \ Ö
~N~~
N
Une solution de cyclopropanecarboxylic acid (6-hydroxy-benzothiazol-2-yl)-amide (intermédiaire 6) (60 mg, 0.256 mmol), de pyridine (80 p1, 0.991 mmol), de 4-dimethylaminopyridine (3 mg, 0.025 mmol), et de 5-(2-pyridyl)thiophene-2-sulfonyl chloride (99 mg, 0.384 mmol) dâns 2 ml d'acétone est mise sous agitation pendant 24 heures à 40 °C. Le milieu réactionnel est concentré à
sec et repris dans 2 ml de DMSO et purifié en 4 fois par LC/MS préparative (méthode B) conduisant à 10 mg de 5-Pyridin-2-yl-thiophene-2-sulfonic acid 2-(cyclopropanecarbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester.
RMN : Spectre RMN 1 H à 300 MHz sur spectromètre BRUKER AVANCE
DPX-300 avec les déplacements chimiques (â en ppm) - dans le solvant diméthylsulfoxide - d6 (DMSO-d6) référencé à 2,50 ppm De 0,98 à 1,10 (m, 4H) ; 1,90 (m, 1 H) ; 7,15 (d large, J = 8,5 Hz, 1 H) ; de 7,30 à 7,38 (m, 2H) ; 7,61 (d, J = 4,0 Hz, 1 H) ; 7,67 (s large, 1 H) ; 7,77 (d, J
= 4,0 Hz, 1 H) ; 7,87 (t large, J = 8,0 Hz, 1 H) . ; 7,99 (d large, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 8,55 (d large, J = 5,0 Hz, 1 H) ; 13,5 (m étalé, 1 H) .
MS : IE m/z=457 M+' m/z=389 (M - C4H40)+~
m/z=325 (m/z=389 - S02) m/z=69 C4H50+ pic de base Exemple 87 - Préparation du 4-(1-oxyl-2,2,6,6-tetramethyl-piperidin-4-ylamino)-benzenesulfonic acid 2-(cyclopropanecarbonylamino)-benzothiazol-6-yl ester H
N
O S ~ O~ ~ I N.O.
HAN ~ i Une solution de 4-Fluoro-benzenesulfonic acid 2-(cyclopropane-carbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester (exemple 7) (0.352 mmol, 138 mg), de 4-amino-TEMPO (0.387 mmol, 66, mg), de carbonate de_césium (0.352 mmol, 114 mg) dans 3.5 ml de diméthylsulfoxyde est chauffée sous agitation pendant 24 heures. Du 4-amino-TEMPO sont ajoutés en deux fois (2 fois 66 mg) au bout de 24 et 48 heures. Au bout de 48 heures, la réaction est mise à température ambiante pendant 48 heures. La solution est ensuite diluée avec de l'eau, extraite par de l'acétate d'éthyle, lavée par une solution saturée de chlorure de sodium et séchée sur sulfate de sodium, puis évaporée à sec, conduisânt à 258 mg de produit brut. Celui-ci est purifié par chromatographie flash sur une cartouche de 5 g de silice. Les éluants utilisés sont respectivement le dichlorométhane, puis le dichlorométhane avec 1 de méthanol ammoniacal 0.01 % à 7M. 28 mg de du 4-(1-oxyl-2,2,6,6-tetramethyl-piperidin-4-ylamino)-benzenesulfonic acid . 2-(cyclopropane-carbonylamino)-benzothiazol-6-yl ester sont obtenus avec un rendement de 14 %.
MS : ES m/z=544 MH+ pic de base IR : KBr 3388; 3252; 2925; 1686; 1598; 1546; 1451; 1327; 1266; 1167; 1094; 907; 852 et 747 cm ~
Intermédiaire 88 : Synthèse du 4-[2-(Bis-benzyloxy-phosphoryloxy)-2-methyl-propylamino]-benzenesulfonic acid 2-(cyclopropanecarbonyl-amino)-benzo-thiazol-6-yl ester O S \ OwS O w N~\ I / p ~ ~ N
N u O
O~P~ O

O
Une solution de 4-(2-hydroxy-2-methyl-propylamino)-benzene-sulfonic 2-(cyclopropanecarbonylamino)-benzothiazol-6-yl ester (exemple 11 ) (0.855 mmol, 394 mg), de 1 H-tetrazole (2.563 mmol, 179 mg), de dibenzyl düsopropyl phosphoramidite (1.70 mmol, 590 mg) dans 6.4 ml de dichlorométhane est mis sous agitation à température ambiante pendant 2 heures. Le milieu réactionnel est refroidi à 7°C et une solution de 3-chloroperoxybenzoic acid (1.025 mmol, 252 mg) dans 1.2 ml de dichlorométhane est ajoutée lentement. Le milieu réactionnel est mis sous agitation pendant une nuit.
10 ml d'une solution de sodium metabisulfite 1 M est ajoutée. La phase organique est ensuite lâvée par 10 ml d'âne solution dé sodium metabisulfite 1 M , par 2 fois 10 ml d'une solution saturée de bicarbonate de sodium, puis par 10 ml d'une solution saturée de chlorure de sodium.
La phase organique esfi lavée sur sulfate de magnésium, filtrée et concentrée à sec. Le résidu sec obtenu est solubilisé dans du dichlorométhane, puis purifié sur cartouche flsh Interchim contenant 50 g de silice de porosité 15-35 Nm par un gradient de 20 à 50 % d'acétate d'éthyle dans, le cyclohexane.
Après évaporation du solvant des fractions contenant le produit attendu, 419 mg de 4-[2-(Bis-benzyloxy-phosphoryloxy)-2-methyl-propylamino]-benzene-sulfonic acid 2-(cyclopropane carbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester sont obtenus avec un rendement de 68 %.
LC/MS (méthode A1 ) : [M+H]+=722.13, temps de rétention : 4.13 min.

Exemple 89: Synthèse du 4-(2-Methyl-2-phosphonooxy-propylamino)-benzenesulfonic acid 2-(cyclopropanecarbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester o S \ o\S o ' N~\ I / p ~ ~ N
N u O
O~P~ O

O
A une solution de 4-[2-(Bis-benzyloxy-phosphoryloxy)-2-methyl-propylamino]-5 benzene-sulfonic acid 2-(cyclopropane carbonyl-amino)-benzothiazol-6-yl ester (intermédiare 88) (0.441 mmol, 318 mg), de formiate d'ammonium (4.41 mmol, 278 mg) dans 15 ml d'éthanol est ajouté 300 mg de palladium sur charbon à 10 %.
Le milieu réactionnel est mis sous agitation au reflux pendant une nuit. Une 10 analyse LC/MS indique qu'il reste du produit monobenzylé. 280 mg (4.41 mmol) de formiate d'ammonium et 100 mg de palladium sur charbon à
10 % sont ajoutés au milieu réactionnel chauffé au reflux pendant '6 heures.
Le milieu réactinnel est filtré, puis concentré. L'huile obtenue est remise en réaction avec 278 mg de formiate d'ammonium (4.41 mmol) et 300 mg de 15 palladium sur charbon à 10 % dans 15 ml d'éthanol. Le milieu réactionnel est mis sous agitation et chauffé au reflux pendant 1 H20. Le milieu réactionnel est filtré et concentré à sec. Lé résidu obténu est purifié par LC/Ms préparative (méthode B) conduisant à 6.2 mg de 4-(2-Methyl-2 phosphonooxy-propylamino)-benzenesulfonic acid 2-(cyclopropanecarbonyl 20 amino)-benzothiazol-6-yl ester avec un rendement de 3 %.
RMN : Spectre RMN 1 H à 300 MHz sur spectromètre BRUKER AVANCE
DPX-300 avec les déplacements chimiques (â en ppm) - dans le solvant diméthylsulfoxide - d6 (DMSO-d6) référencé à 2,50 ppm De 0,90 à 1,01 (m, 4H) ; 1,41 (s, 6H) ; 2,00 (m, 1 H) ; de 3,10 à 3,50 (m 25 masqué, 2H) ; 6,75 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 6,89 (t large, J = 6,0 Hz, 1 H) ;

7,97 (dd, J = 2,5 et 8,5 Hz, 1 H) ; 7,43 (d large, J = 9,0 Hz, 2H) ; 7,66 (d, J =
8,5 Hz, 1 H) ; 7,70 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) ; 12,7 (s large, 1 H) .
Protocoles expérimentaux sur les tests biochimiques 1 Protocole CDK2/cycline E
Purification du complexe CDK2/CycIineE-(His)6 par IMAC (Immobilized Metal Affinity Chromatography) Deux baculovirus recombinants portant les séquences humaines codant respectivement pour CDKZ et la CycIineE (cette dernière comportant un tag hexa-histidine en C terminal) sont utilisés pour co-infecter des cellules d'insecte Sf21. Deux à trois jours après le début de la co-infection, les cellules sont récoltées par centrifugation, puis conservées à -4.0°C
jusqu'à
leur utilisation. Après décongélation et lyse mécanique des cellules, le complexe présent dans le surnageant de lyse est purifié par chromatographie d'affinité sur Nickel (IMAC), et conservé à -80°C.
Essai Flashplate CDK2/CycIinE en format 96 puits.
Un format en plaques 96 puits coatés à la streptavidine est utilisé pour tester l'activité des composés sur l'activité kinase de CDK2/Cycline E.
Pour réaliser cet essai, le substrat peptidique biotynilé, fragment de la protéine pRb, (biotinyl-SACPLNLPLQNNHTAADMYLSPVRSPKKKGSTTR
OH) est solubilisé à la concentration de 1 mM dans du tampon kinase (HEPES/ NaOH 50 mM, NaCI 1 mM, MgCl2 5 mM, pH 7.5) afin de constituer une solution-stock conservée à -20°C sous forme d'aliquots de 110 p1.
Le jour de ¿'expérience, un aliquot de cette solution est décongelé et dilué dans du tampon kinase contenant 1 mM de Dithiothréitol, ajouté au tampon extemporanément, afin d'obterür une concentration de 14.3 pM. 70 p1 de cette solution sont ajoutés dans chaque puits de la Flashplate afin d'obténir une concentration finale en substrat de 10 pM lors de la réaction enzymatique conduite dans un volume final du milieu réactionnel de 100 p1 (cf. ci-après).
Des dilutions intermédiaires d'inhibiteurs (produits de l'invention) à
différentes concentrations sont préparées dans le DMSO à partir de solutions stock à
10 mM dans des tubes séparés. On réalise ainsi des dilutions à 1000 ~M, 333.3 ~M; 111.1 pM, 37.03 NM, 12.35 trM, 4.11 pM et 1.37 ~M. Un p1 de chacune de ces solutions (ou 1 p1 de DMSO pour les contrôles) est transferré
dans les puits de la plaque de test.
Dans chaque puits, sont ensuite ajoutés 19 p1 d'une solution d'un mélange d'adénosinetriphosphate (ATP) et d'ATPy33P dans le tampon kinase à la concentration de 5,26 pM d'ATP total et de 52,6 pCi/ml de 33P. La réaction enzymatique est déclenchée par addition de 10 p1 par puits d 'une solution de CDK2/Cycline E à 200 nM dans le tampon kinase contenant 1 ' mM de dithiôthréitol (ou 10 p1 de tampôn kinàse contenant 1 mM de dithiothréitol pour les blancs réactionnels).
Après addition de chacun des réactifs, le volume final de chaque puits est de 100p1, la concentration finale de substrat est de 10 pM, les concentrations finales en inhibiteurs sont de10 pM, 3,33 pM, 1,11 pM, 0,37 pM, 0,123 pM, 0,041 pM et 0,014 pM (selon la concentration de la dilution intermédiaire), la concentration finale en ATP est de 1 pM, la quantité finale de 33P est de 1 pCi/puits, la concentration finale de complexe CDK2/Cycline E est de 20 nM.
Après l'addition de tous les réactifs, la plaque de test incubée à 30 °C sous agitation orbitale à 650 rpm.
Lorsque l'incubation est terminée, la plaque est lavée trois fois par 300 p1 par puits de PBS (Phosphate Buffered Saline, pH=7,4 sans calcium ni magnésium, référence 10010-015, Gibco BRL). L'incorporation de 33P au peptide est quantifiée par comptage par scintillation avec un appareil Packard Topcount.NXT. L'activité inhibitrice des produits de l'invention est évaluée par mesure de la concentration d'inhibiteur permettant une diminution de l'activité
enzymatique de 50 % (C150).
2 Protocble CDK4/cycline D1 Purification du complexe CDK4-HA/Cycline D1-(His)6 par IMAC (Immobilized Metal Affinity Chromatogràphy) Deux baculovirus recombinants portant les séquences humaines codant respectivement pour CDK4-HA (fusion C terminale avec le tag Hémaglutinine) et pour la Cycline D1-(His) 6 sont utilisés pour co-infecter des cellules d'insecte S1J. Soixante heures après le début de la co-infection, les cellules sont récoltées par centrifugation, puis congelées à -20°C
jusqu'à leur utilisation. Après décongélation dàns le tampon A (HEPES 200 mM pH 7,0, NaCI 50 mM, MgCl2 2 mMï imidazole 25 mM, TCEP 1 mM, glycérol 10 (p/v), NaF 1 mM, Na3V0~ 1 mM), agitation 1 h à 4°C, et centrifugation, le complexe présent dans le surnageant de lyse est purifié par chromatographie d'affinité sur Nickel (IMAC) et conservé à -80°C.
Essai Flashplate CDK4/CycIinD1 en format 96 puits.
Un essai en plaque "Flashplate" de 96 puits recouverts de streptavidine est utilisé pour évaluer l'inhibition du complexe kinase CDK4/cycline D1 par les prodûits de finverïtion: Pour réaliser cet essai, le substrat peptidique biotinylé, fragmént de la protéine pRb, (Biotinyl-RPPTLSPIPHIPRSPYKFPSSPLR-amide) est solubilisé à la concentration de 2 mM dans du tampon kinase (HEPES/NaOH 50 mM, NaCI 1 mM, MgCl2 5 mM, PH=7,5) afin de constituer une solution stock conservée à -20°C sous forme d'aliquots de 110 p1.
Le jour de l'expérience, un aliquot de cette solution est décongelé et dilué dans du tampon kinase contenant 1 mM de dithiothréitol, ajouté extemporanément, de manière à obtenir une concentration finale de peptide de 2.571 uM.
Soixante-dix p1 de cette solution sont déposés dans chaque puits de la plaque Flashplate afin d'obtenir une concentration finale en substrat de 1.8 uM lors de la réaction enzymatique conduite dans un volume final de 100 p1 (cf. ci-après). Des dilûtions intermédiaires d'inhibiteurs (produits de l'invention) à
différentes concentrations sont préparées dans le DMSO à partir de sôlutions stock à 10 mM dans des tubes séparés. On réalise ainsi des dilutions à
1000 pM, 333,3 pM, 111,1 pM, 37,03 trM, 12,35 pM, 4,11 pM et 1,37 pM. Un p1 de chacune de ces solutions (ou 1 p1 de DMSO pour les contrôles) est ensuite transféré dans les puits de la plaque de test. Dans chaque puits, sont ensuite ajoutés 19 p1 d'une solution d'un mélange d'adénosinetriphosphate (ATP) et d'ATPy33P dans le tampon kinase à la concentration de 5,26 pM
d'ATP total et de 78.9 NCi/ml de 33P. La réaction enzymatique est déclenchée par l'addition de 10 Irl par puits d'une solution de complexe CDK4/Cycline D1 à 250 nM dans le tampon kinase contenant 1 mM de dithiothréitol (ou 10 NI
de tampon kinase contenant 1 mM de~ dithiothréitol pour les blancs réactionnels). A l'issue des différentes additions le volume final dans chaque puits est de 100 p1, la concentration finale de substrat est de 1.8 frM, les concentrations finales en inhibiteurs sont de 10 pM, 3,33 pMï 1,11 pM, 0,37 pM, 0,123 pM, 0,041 pM et 0,014 pM (selon la concentration de la dilution intermédiaire), la concentration finale en ATP esfi de 1 pM, la quantité
finale de 33P est de 1.5NCi/puits, la concentration finale de complexe CDK4/Cycline D1 est de 25 nM.
Après l'additions de tous les réactifs, la plaque de test incubée à
30°C sous agitation orbitale à 650 rpm. Après l'incubation, la plaque est lavée trois fois par 300 p1 par puits de tampon PBS (Phosphate Buffered Saline, pH=7.4 sans calcium. ni magnésium, référence 10010-015, Gibco BRL).
L'incorporation de.33P au peptide substrat est mesurée par comptage par scintillation avec un appareil Packard Topcoünt.NXT. L'acfiivité inhibitrice des produits de l'invention est évaluée par détermination de la concéntration d'inhibiteur provoquant une diminution de 50 % de l'activité enzymatique (1C50).
3. Aurora2 L'effet inhibiteur de composés vis-à-vis de la kinase Aurora2 est déterminé
par un test de scintillation par radioactivité.
Une enzyme Aurora2 recombinante complète, dont l'extrémité N-terminale a été marquée à l'histidine, a été exprimée dans E. coli et purifiée jusqu'à une qualité proche de l'homogénéité.
Le fragment C-terminal (Q1687-H2101 ) d'une NuMA (protéine Nucléaire qui s'associe avec l'Appareil Mitotique) exprimé dans E. coli, et dont l'extrémité
N-terminale a été marquée à l'histidine, a été purifié par chromatographie au nickel chélate et utilisé comme substrat dans le test de la kinase Aurora2.
L'activité kinase d'Aurora2 est mesurée par scintillation en microplaque saturée avec du nickel chélate (New England Nuclear, modèle SMP107).
Chaque puits contient 100 NI de la solution suivante : 0.02 NM d'Aurora2 ; 0.5 pM de substrat NuMA ; 1 frM d'ATP additionné de 0.5 pCi d'ATP-[33P]. Les solutions sont incubées pendant 45 minutes à 37°C. Le tampon du test est ensuite éliminé et les puits sont rincés deux fois avec 300 p1 de tampon kinase. La radioactivité est mesurée dans chaque puits à l'aide d'un appareil Packard Model Top Count NXT.
Le bruit de fond est mesuré double exemplaire dans des puits contenant de l'ATP radioactif seul contenant de la kinase tamponnée traitée de la même manière que les autres échantillons.

L'activité du contrôle est effectuée en mesurant en double exemplaire la radioactivité dans le mélange complet du test (ATP, Aurora2 et le substrat NuMA), en l'absence de composé test.
L'inhibition de l'activité de Aurora2 avec un composé de l'invention est 5 exprimée en pourcentage d'inhibition de l'activité de contrôle en l'absence de composé test. De la staurosporine est ajoutée dans chaque plaque comme contrôle d'inhibition.

Aurora HeLa Structure 21C50CDK4 CDK2 proliferation Exemple nM IC50 IC50 EC50 (nM) nM nM

DG

N~OFi /~ ~~0 ~ ~ 3974 995 HN~ S ~
.

.
S
H"O . (. / . O

N

F

7 s , ~ >10000123 1577 s.o Cv 1 , N

N

8 ~o s \ ,s~ 899 86 631 ~ I

~
N

N N

N

g i ~ 65 931 68 611 o ' s ~ ,s C~ I
o''o , N

H
N
i ' S \ o, -s.o (v I

~
N

N
~H

11 0 ~ ~ 105 924 19 80 o s ~
:s.
D-- Hue' I , b N

Nf N
12 ~o o ~ ~' 172 205 25 16 H~N I / ~ S.O
N~N~N
13 . o o' ~ ~ ~_N 6863 678 841 s ô S~o N
HN
CIH
18 ~ ~NH 480 2683 N~
. ~~O S ~ O ~S''O
~.~(H~N I / Ö
i N
19a CIH NH 471 '2720 N
O.
'~ S ~ .S.0 H'-C\N I / Ö
HN
CIH ~H
19b H ~ ~ 732 5470 /N
O.
S w Ö ''O
H-~~N I /
OH
HN
19c cIH ~H 1223 5782 N
O, S w .S''0 H~N I / Ö

H I
I w N~H
21 cIH ° ~S / ~s0 / 539 227 2462 ~ /~ H

H
~N~N~
o. I //' S, 22a cIH ° NJ~-S ~ ° ~ 609 634 H
H

O.
22 b ~ / p''~"~ ~ H 783 547 O Nv r N~S CIH
H
N~ ~OH
O. I / H
22 c ~IH 0 NOS / ° S~ 1570 1099 ~ ~H
HZN
O
O S~ ~ / N
22 d "2N ~ N.~N~ ~ 708 69 5356 " CIH
HN\~O O ~ I ~~NH
J ~ g \ O:S \
24 HAN . ~ ~ ~ 1670 864 >12500 CI"
~~N N
25 a "N~~ /s ~ O 5 ~ ~ 1700 365 >12500 H~N I / O CIH

H
~ ~ N '/' NH
25 b HN~N ~S ~ ~ ~ ' 4077 5871 9962 H N
CIH
~N~OH
25 C HN~O S \ O s ~ ~ H I 3888 2644 >12500 i Ö
CIH
CIH
NH
28 o s ~ o, :o ., 399 266 1328 s H~N I ~ Ö ' / N CH

H
N
29 a o S \ o s,,o ' 573 257 1826 H~N ( / 0 ' / N
HZN
CIH
29b 368 161 8955 o s ~ o.s,o , -H~N I i O 1 / N

HN CIH N S O'S S
33 a ~ ~ ~ ô \ I 436 >10000 3240 p N
S \
33 b N S ~ ~ eS~ ' >10000 6341 O ~O
N
HZN p CIH
N , S C' S S
33 c HN ~ ~ ~ \ ô ~ I >10000 8267 ~ O N
CIH
S \
S ~ O, 33 d N ~N ~ ~ ô S~~O 8271 2947 HZN ~O CIH
NH~
S \
33 f N ~ S I ~ Ö;S\ ~ 7101 1838 N
O
CIH
s \
33 g -~ /~-~~~N I ~ ~~S~y 1901 >10000 5003 N-i "Q
CIH
S \
33 h N--~~5 ~~ ~ p;s, ' 68 358 6981 4427 N~ O O
O

H
i NON
39 HN~N~s ~ ~ ° s~ ~ I ~ 0 2326 3064 H N~ O F~OH
FF

CIH
40 ~~ .S \ og ~ ~ N~~ 253 209 7551 H~N
H
NON
~NH2 /° O I
41 ~H~s I ~ ô 0 325 >10000 >10000 8391 N F
F~OH
F
H
N
CIH
42 ° oo ~ I N~ 202 1143 s ~ s~
H~N I / Ö
H_ N N
O
43 ~ s ~ ° s ~ I ~ 2012 119 49 36 H \ I ~ O
N
-O / ~~N~
44 ~ s ~ o S ~ I ~ 3078 313 108 76 I/
H
° O / I NON
45 ~ s ~ o;s~ ~ 2894 341 136 289 H \'N I / O
oQ
s i 49 ~N~N ~ ~ o cIH ~ 328 183 2705 H S i O.S
NON ~ I ° I ~
52 ~° ~ N~ 189 112 2950 HZN
CIH ~NY
O H HNI \
N
53 i'S ~ 172 205 25 16 NH
N ~ ~ O, w O.S
Ö
o _ ~( \ /
55 HN~~ N 5828 221 73 43 N
~O OHZ CIH
O
O~S H
57 ~ ~ s=o 3178 125 40 79 o CIH
H ~
CIH r NON
60 ~° S ~ o s ~ ~ ~ 2804 265 105 199 H~~ ~ , ô
N
Q
'NH
eux 62 ~ N N ~ S -~ 236 75 296 \.~ o O_~ \ / H

O
NH
N~S c~

\ /
O-O N~OH
\ / HH
N

\
o, ~' S ~ ~ '~O
N-~, i /
H N
N
NH 1217 294 >12500 67 / \
O, ~ _' ~O~ S w Ö ..O
N-~~ ~ /
H N
N
6g NH 914 299 1126 / \
O S ' O ,S''0 .
~N~Cv I / O
~../ H N

g ~ O, ~ ' H~N~ S
i Ö / N
71 0 ~ 424 175 2169 F' ~ H
_0H
- 'F
F
O g ~ O.S:O ~. H

N
F H
'OH
F
F
O~ S ~ O-S:O
HAN ~ i 0 1 / N
75 p ~ 874 445 195 N
F H
OH
F
F
O~ g ~ O.S:O
~N ~ i Ö ~ / N
77 ~ 1012 419 179 H
F
OH
F
F
O NH
7g Nos 70 43 140 \: ~ O ~
CIH

~H
HN
I
80 ~ 674 57 408 o=s=o S Iw O
ciH
N /
O
H
N
84 p=g ~ ~ N 683 220 O ~OH
O S ~
HAN I i CIH
N~
O S
85 0 0 's ~ ~ 6941 >10000 >10000 >12500 S I .~ o N
H
N
87 0~ s ~ °~ ~ I Nw. 809 H--~~N ~ ~
o s ~ o~soo gg ~ 258 3319 105 2512 O~P OH

OH

Claims (14)

REVENDICATIONS
1 - Composés répondent à la formule générale (I) suivante:

dans laquelle .cndot. X représente un groupe choisi parmi une liaison covalente, (CH2)n, avec n égal à 1 ou 2 .cndot. Ar représente un groupe aryle ou hétéroaryle; ce groupe est éventuellement substitué par un groupe choisi parmi les groupes alkyles, halogènes, NR1R2 (R1 et R2 étant choisis parmi les groupes hydrogène, alkyles, cycloalkyles ou ensemble peuvent former un radical hétérocyclique ou hétéroaryle, ces groupes étant eux même éventuellement substitués), SO2alkyl, Salkyl, alkoxy, hétéroaryles, ou aryles .cndot. R représente un groupe choisi parmi l'hydrogène, un groupe alkyle, cycloalkyle, hétérocycloalkyle, aryle, heteroaryle, alkoxy, cycloalkoxy, hétérocycloalkoxy, amino; R peut être éventuellement substitué par un ou plusieurs groupes choisis parmi les mêmes radicaux que ceux définis pour R.
2 - Composés selon la revendication 1 caractérisés en ce que les éventuels substituants des groupes R1 et R2 sont choisis parmi les groupes hydroxy, hétéroaryles, cycloalkyle, aminoalkyles.
3 - Composés selon la revendication 1 caractérisés en ce que les groupes alkyles sont des chaînes droites ou ramifiées contenant 1 à 10 atomes de carbone.
4 - Composés selon la revendication 1 caractérisés en ce que les groupes cycloalkyle sont des chaînes alkyles cycliques contenant 3 à 10 atomes de carbone.
97 - Composés selon la revendication 1 caractérisés en ce que les groupes hétérocycloalkyles sont des chaines alkyles cycliques contenant 3 à
atomes de carbone et contenant au moins un hétéroatome choisis parmi O, N ou S.
6 - Composés selon la revendication 1 caractérisés en ce que dans les groupes NR1R2 l'un des groupes R1 ou R2 est un atome d'hydrogène.
7 - Composés selon les revendications 1 à 6 caractérisés en ce que tous les groupes R, R1 et R2 sont éventuellement substitués par un groupe alkyle, cycloalkyle, hétérocycloalkyle, hétéroaryle, aryle, amino, hydroxy, alkoxy ou halogène.
8 - Composés selon la revendication 1 caractérisés en ce que les radicaux aryle et hétéroaryle sont choisis parmi les radicaux monocycliques comportant éventuellement un ou plusieurs hétéroatomes choisis parmi O, N
et S ou les radicaux fusionnés à un autre cycle comportant 5 ou 6 chaînons et éventuellement un à trois hétéroatomes choisis parmi O, N et S.
9 - Composés selon la revendication 1 caractérisés en ce que les radicaux aryles ou hétéroaryles sont choisis parmi les groupes phényle, pyridyle, pyrimidine, triazinyle, pyrrolyle, imidazolyle, thiazolyle, furyle, thiényle, indolyle, azaindazolyle, isobenzofuranyle, isobenzothiényle benzoxazolyle, benzothiazolyle, arylvinylène, arylamido, arylcarboxamide, aralkylamine, quinoléyle, isoquinoléyle, cinnolyle, quinazolyle, naphtyridyle, triazolyle ou tétrazolyle.
10 - Composés selon la revendication 9 caractérisés en ce que les groupes aryle et hétéroaryle sont choisis pami les groupes phényle, thiényle, pyrazolyle, imidazolyle éventuellement substitué.
11 - Composés selon la revendication 10 caractérisés en ce que le groupe phényl est substitué par un groupe choisi pami les groupes amino et les halogènes, en particulier le chlore et le fluor.
12 - Composés selon la revendication 11 caractérisés en ce que les groupes arylés sont choisis parmi les di et trifluorophényles et les monoalkylamino phényles.
13 - Composés selon la revendication 1 caractérisé en ce X
représente une liaison covalente.
14 - Composés selon la revendication 1 caractérisés en ce que R
représente un radical cycloalkyle.
CA002560683A 2004-04-01 2005-03-30 Derives de benzothiazoles capables de moduler l'activite des cdk et leur utilisation comme agents anticancereux Abandoned CA2560683A1 (fr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR0403421A FR2868421B1 (fr) 2004-04-01 2004-04-01 Nouveaux benzothiazoles et leur utilisation comme medicaments
FR0403421 2004-04-01
PCT/FR2005/000761 WO2005097787A2 (fr) 2004-04-01 2005-03-30 Derives de benzothiazoles capables de moduler l’activite des cdk et leur utilisation comme agents anticancereux

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CA2560683A1 true CA2560683A1 (fr) 2005-10-20

Family

ID=34946087

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CA002560683A Abandoned CA2560683A1 (fr) 2004-04-01 2005-03-30 Derives de benzothiazoles capables de moduler l'activite des cdk et leur utilisation comme agents anticancereux

Country Status (12)

Country Link
US (1) US7632952B2 (fr)
EP (1) EP1745044A2 (fr)
JP (1) JP2007530644A (fr)
KR (1) KR20070007885A (fr)
CN (1) CN1950369A (fr)
AU (1) AU2005232012A1 (fr)
BR (1) BRPI0508182A (fr)
CA (1) CA2560683A1 (fr)
FR (1) FR2868421B1 (fr)
IL (1) IL178259A0 (fr)
SG (1) SG151306A1 (fr)
WO (1) WO2005097787A2 (fr)

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8236338B2 (en) 2004-07-13 2012-08-07 The University Of Tennessee Research Foundation Adhesive composition for carrying therapeutic agents as delivery vehicle on coatings applied to vascular grafts
FR2891273B1 (fr) * 2005-09-27 2007-11-23 Aventis Pharma Sa NOUVEAUX DERIVES BENZIMIDAZOLES ET BENZOTHIAZOLES, LEUR PREPARATION ET LEUR UTILISATION PHARMACEUTIQUE NOTAMMENT COMME INHIBITEURS DE CMet
US8119655B2 (en) 2005-10-07 2012-02-21 Takeda Pharmaceutical Company Limited Kinase inhibitors
US20070112589A1 (en) * 2005-11-17 2007-05-17 Searete Llc, A Limited Liability Corporation Of The State Of Delaware User interface for providing assistance related to health
US20100120717A1 (en) * 2006-10-09 2010-05-13 Brown Jason W Kinase inhibitors
EP2223925A1 (fr) * 2006-10-09 2010-09-01 Takeda Pharmaceutical Company Limited Inhibiteurs de kinase
FR2922550B1 (fr) * 2007-10-19 2009-11-27 Sanofi Aventis Nouveaux derives de 6-aryl/heteroalkyloxy benzothiazole et benzimidazole, application comme medicaments, compositions pharmaceutiques et nouvelle utilisation notamment comme inhibiteurs de cmet
CN102391207B (zh) * 2011-07-26 2014-04-09 贵州大学 N-(2-(取代苯并噻唑-2-氨基甲酰基)-苯基)-苯甲酰胺及其制备方法和用途
AU2013338051C1 (en) 2012-10-29 2017-08-10 Ariste Medical, Llc. Polymer coating compositions and coated products
WO2015164524A1 (fr) 2014-04-22 2015-10-29 Ariste Medical, Inc. Méthodes et procédés pour l'application de revêtements polymères d'administration de médicament

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2541752A1 (de) 1975-09-19 1977-03-24 Hoechst Ag Anthelminthisch wirksame 2-carbalkoxyamino-5(6)-phenyl-sulfonyloxy- benzimidazole und verfahren zu ihrer herstellung
DE3247615A1 (de) 1982-12-23 1984-07-05 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Substituierte phenylsulfonyloxybenzimidazolcarbaminate, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als arzneimittel
GB9216298D0 (en) 1991-08-15 1992-09-16 Ici Plc Piperidine derivatives
AU744281B2 (en) * 1997-11-10 2002-02-21 Bristol-Myers Squibb Company Benzothiazole protein tyrosine kinase inhibitors
GB9823871D0 (en) * 1998-10-30 1998-12-23 Pharmacia & Upjohn Spa 2-Amino-thiazole derivatives, process for their preparation, and their use as antitumour agents
GB9900752D0 (en) 1999-01-15 1999-03-03 Angiogene Pharm Ltd Benzimidazole vascular damaging agents
SK12712002A3 (sk) * 2000-02-07 2003-02-04 Abbott Gmbh & Co. Kg Deriváty 2-benzotiazolylmočoviny a ich použitie ako inhibítorov proteínkináz
EP1379242B1 (fr) 2001-03-26 2012-08-15 Newsouth Innovations Pty Limited Methode de traitement de cancers et compositions appropriees
EP1298125A1 (fr) * 2001-09-26 2003-04-02 Aventis Pharma S.A. Benzimidazoles substitués et leur usage comme traitement du cancer
EP1388341A1 (fr) * 2002-08-07 2004-02-11 Aventis Pharma Deutschland GmbH Dérivés héteroaromatiques acylamino substitués et leur utilisation en tant que medicaments
FR2891273B1 (fr) 2005-09-27 2007-11-23 Aventis Pharma Sa NOUVEAUX DERIVES BENZIMIDAZOLES ET BENZOTHIAZOLES, LEUR PREPARATION ET LEUR UTILISATION PHARMACEUTIQUE NOTAMMENT COMME INHIBITEURS DE CMet

Also Published As

Publication number Publication date
IL178259A0 (en) 2006-12-31
KR20070007885A (ko) 2007-01-16
EP1745044A2 (fr) 2007-01-24
JP2007530644A (ja) 2007-11-01
WO2005097787A3 (fr) 2006-01-26
WO2005097787A2 (fr) 2005-10-20
US7632952B2 (en) 2009-12-15
CN1950369A (zh) 2007-04-18
FR2868421A1 (fr) 2005-10-07
FR2868421B1 (fr) 2008-08-01
AU2005232012A1 (en) 2005-10-20
BRPI0508182A (pt) 2007-08-07
SG151306A1 (en) 2009-04-30
US20070093488A1 (en) 2007-04-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CA2560683A1 (fr) Derives de benzothiazoles capables de moduler l&#39;activite des cdk et leur utilisation comme agents anticancereux
CA2407428C (fr) Activateurs de glucokinase contenant de l&#39;hydantoine
EP1567112B1 (fr) THIAZOLIDIN-4-ONES POUR INHIBER LES PROTÉINES hYAK3
ES2256340T3 (es) Activadores heteroaromaticos fusionados de la glucoquinasa.
EP1183245B1 (fr) Antagonistes selectifs npy (y5)
AU2003270285B2 (en) Indole-3-carboxamides as glucokinase (GK) activators
FR2802206A1 (fr) Derives de 4-aminopiperidine et leur utilisation en tant que medicament
US20040063737A1 (en) CDK-inhibitory 2-heteroaryl-pyrimidines, their production and use as pharmaceutical agents
AU2001252270A1 (en) Hydantoin-containing glucokinase activators
BG107903A (bg) Изоиндолин-1-он активатори на глюкокиназата
EP2247579B1 (fr) Dérivés de quinazoline substituée par une sulfoximine en tant qu&#39;immunomodulateurs, leur préparation et leur utilisation en tant que médicaments
KR20060002728A (ko) 벤조티아졸 유도체의 신규한 용도
HRP20040293A2 (en) Substituted benzimidazole compounds and their use for the treatment of cancer
KR20060098374A (ko) 티아졸리디논, 그의 제조 및 의약으로서의 용도
WO2007036630A1 (fr) Derives de benzimidazoles et benzothiazoles et leur utilisation en tant qu&#39;inhibiteurs de kinases notamment de met
FR2941952A1 (fr) Derives de 6-(6-substitue-triazolopyridazine-sulfanyl) 5-fluoro-benzothiazoles et 5-fluoro-benzimidazoles : preparation, application comme medicaments et utilisation comme inhibiteurs de met.
EP1771424B1 (fr) Nouveaux derives de 2,4-diaminothiazol-5-one
CA2632854A1 (fr) Derives de 2-carbamide-4-phenylthiazole, leur preparation et leur application en therapeutique
MXPA06011160A (en) Novel benzothiazoles and the use thereof as medicaments
CA2533464A1 (fr) Derives de thiazole utiles comme antagonistes de npy *
WO2003087071A1 (fr) Derives de sulfamide

Legal Events

Date Code Title Description
FZDE Discontinued