CA2345392A1 - Procede de mesure des interactions proteine-proteine dans des cellules vivantes - Google Patents
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Abstract
Un procédé de détection des interactions protéine-protéine dans une cellule vivante consiste (a) à fournir une cellule contenant un premier conjugué hétérologue ainsi qu'un second conjugué hétérologue, dans laquelle le premier conjugué hétérologue comprend une première protéine étudiée conjuguée à un groupe détectable, et le second conjugué hétérologue comprend une seconde protéine étudiée conjuguée à une protéine se liant spécifiquement à une structure interne dans la cellule, et ensuite (b) à détecter la présence ou l'absence de liaison du groupe détectable à la structure interne, la présence de la liaison indiquant que les première et seconde protéines étudiées se lient spécifiquement l'une à l'autre. D'autres aspects de l'invention concernent des acides nucléiques codant des protéines de fusion telles que décrit ci-dessus, des cellules contenant et exprimant ces protéines de fusion, des matériels utiles pour la mise en oeuvre des méthodes décrites ci-dessus, ainsi que des banques d'acides nucléiques utiles en tant qu'outils de criblage pour la mise en oeuvre des méthodes décrites ci-dessus. L'invention est utile pour cribler des composés présentant une capacité à interrompre ou à inhiber la liaison des paires de liaisons connues et ainsi identifier leurs inhibiteurs en concurrence. L'invention est utile pour cribler une protéine connue étudiée par rapport à une banque d'autres protéines étudiées afin d'identifier des composés se liant à la protéine étudiée connue.
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