BRPI0719083A2

BRPI0719083A2 - Método de recuperação de l-treonina a partir de caldo de fermentação de microorganismo de produção de l-treonina, l-treonina cristalina e aditivo de alimentação

Info

Publication number: BRPI0719083A2
Application number: BRPI0719083-2A
Authority: BR
Inventors: Gyu-Nam Cho; Won-Seop Choi; Yong-Bum Seo; Seung-Woo Han; Yoo-Shin Kim; Moung-Ki Shin; Hee-Sung Park; Soon-Won Hong
Original assignee: Cj Cheiljedang Corp
Priority date: 2006-11-27
Filing date: 2007-11-27
Publication date: 2013-12-03
Also published as: ES2619848T3; EP2084291A1; KR100864673B1; CN101535490A; US20100047882A1; WO2008066307A1; EP2084291B1; KR20080047919A; CN101535490B; BRPI0719083B1; US8137939B2; EP2084291A4

Description

“Método de Recuperação de L-Treonina a Partir de Caldo de Fermentação de Microorganismo de Produção de L-Treonina, L-Treonina Cristalina e Aditivo de Alimentação”

Relatório Descritivo Campo Técnico

A presente invenção relaciona-se com um método de recu- perar L-treonina a partir do caldo de fermentação de um microorganis- mo de produção de L-treonina usando um não solvente e, mais particu- larmente, com um método de recuperar L-treonina cristalina usando 10 um processo de afogamento em que o caldo de fermentação de um microorganismo de produção de L-treonina é filtrado e o filtrado é concentrado e reagido com um não solvente para cristalizar L-treonina, L-treonina cristalina recuperada usando o método e um aditivo de alimentação contendo a L-treonina cristalina.

Técnica Antecedente

L-treonina, que é um aminoácido essencial, é principalmen- te usado em formulações completas de aminoácidos, suplementos nutricionais e semelhantes. Recentemente, a L-treonina tem sido usada como aditivo para alimentação animal junto com a L-Iisina e, deste modo a demanda por L-treonina tem aumentado.

A L-treonina é produzida principalmente por fermentação e concentração-cristalização. Ou seja, os corpos microbianos são removi- dos do caldo de fermentação de microorganismos de produção de L- treonina por filtração ou separação centrífuga, o pH do filtrado obtido é 25 ajustado e, então, o pH-ajustado filtrado é concentrado com solvente sendo removido para recuperar L-treonina cristalina na forma de uma agulha. Todavia, quando é usado o método de concentração- cristalização, o rendimento de recuperação da L-treonina cristalina é baixo. No método de concentração-cristalização, para manter a eficiên- cia da separação da pasta e a qualidade de produto cristalino concen- 5 trado, uma Solução contendo L-treonina ou caldo é concentrada para a faixa de 50 a 70% de L-treonina. Como a cristalização é realizada aquecendo o filtrado de um caldo de fermentação que contém L- treonina para evaporar um solvente, a cristalização procede a alta temperatura e uma grande quantidade de L-treonina é dissolvida no 10 filtrado, isto é, a solução-mãe conseqüente. Deste modo, quando a pasta cristalina é separada usando um separador, uma quantidade relativamente grande de L-treonina permanece na solução-mãe e, deste modo, a sua recuperação é impossível.

Além disso, a forma de agulha da L-treonina cristalina, gerada no método de concentração-cristalização, cria uma grande desvantagem. Na ausência de aditivos ou não solventes, a forma cristalina da L-treonina é fina, longa e conformada em agulha. Portan- to, a L-treonina cristalina formada no método de concentração- cristalização é na forma de agulha fina, com um comprimento de cerca de 50 a 250 μπι. A aglomeração na pasta cristalina ocorre entre os cristais de L-treonina na forma de uma agulha e, assim, a viscosidade da pasta cristalina é aumentada, resultando numa redução na eficiên- cia de separação, quando os cristais são separados. Se a eficiência de separação for diminuída, a produtividade da L-treonina é diminuída e as impurezas permanecem nos produtos da L-treonina e, deste modo, a qualidade do produto é degradada. Os cristais de L-treonina na forma de uma agulha também reduzem a fluibilidade do produto e, deste modo, isto ocasiona muitas inconveniências, os quando consumidores usarem o produto. Geralmente, os consumidores usam a L-treonina como um aditivo para a alimentação animal. A L-treonina é adicionada à alimentação animal usando um sistema manual ou automático. Aqui, uma redução na fluibilidade da L-treonina ocasiona problemas no uso desse sistema de mistura de alimentos tanto manual quanto automático e isto freqüentemente leva a reclamações dos consumidores. Além disso, a forte propensão dos cristais de L-treonina na forma de agulha a 5 aglomerarem-se leva a acúmulos e formação de bolos durante o arma- zenamento e o transporte a longo prazo. Devido ã aglomeração, os consumidores podem, às vezes, ter de processar os produtos de L- treonina aglomerados para obter a L-treonina antes de usá-la. Numa era de competição global, quaisquer reclamações dos consumidores e 10 danos conseqüentes para a reputação do produto podem constituir problemas sérios que debilitam a fundação de negócios. Deste modo, a baixa fluibilidade dos cristais de L-treonina na forma de uma agulha pode servir como uma séria desvantagem.

A Publicação de Patente coreana 2000-0013855 revela um 15 método de purificar a L-treonina a partir de um caldo de fermentação de L-treonina por recristalização. Contudo, este método é realizado em quatro etapas de forma que o processo fica excessivamente complicado com muito equipamento exigido. Além disso, é usada uma torre de resina de permuta iônica a fim de recuperar a perda de uma solução- 20 mãe e, deste modo, é usada uma grande quantidade de ácido, base e água. Além disso, em todas as etapas de cristalização, é usado um processo de concentração-cristalização para formar os cristais de L- treonina na forma de uma agulha, resultando em baixa fluibilidade dos produtos de L-treonina.

A Publicação de Patente coreana 2000-0013854 revela um

método de purificar a L-treonina usando a eletrodiálise. Este método pode reduzir uma quantidade de ácido, base e água usada em compara- ção com um método de resina de permuta iônica convencional. Todavi- a, visto que uma solução de L-treonina que passa através de um eletro- 30 dialisador é concentrada sob pressão reduzida para produzir um produto de L-treonina na forma de uma agulha, a fluibilidade do produto é baixa. Além disso, comparado com o caso de concentrar diretamente um filtrado de um caldo de fermentação microbiana, leva 6 horas para passar através do eletrodialisador. Deste modo, a produtivi- dade do Produto de L-treonina é baixa.

Revelação da Invenção Problema Técnico

Portanto, existe ainda a necessidade de desenvolver um método aperfeiçoado de recuperar L-treonina, que pode resolver as inconveniências dos consumidores que são causadas pelo baixo rendi- 10 mento de recuperação de L-treonina a partir do caldo de fermentação e a baixa fluibilidade do produto de L-treonina como resultado dos formatos dos cristais de L-treonina.

Solução Técnica

A presente invenção proporciona um método de recuperar L-treonina cristalina a partir do caldo de fermentação de um microorga- nismo de produção de L-treonina por supressão da cristalização.

A presente invenção também proporciona uma L-treonina cristalina recuperada por supressão da cristalização usando um não solvente.

A presente invenção também proporciona aditivos de ali-

mentação contendo a L-treonina cristalina recuperada por supressão da cristalização usando um não solvente.

De acordo com um aspecto da presente invenção, é propor- cionado um método de recuperar L-treonina a partir de um caldo de 25 fermentação de um microorganismo de produção de L-treonina, com- preendendo o método: separar corpos microbianos a partir do caldo de fermentação que contém L-treonina que é obtido por cultura de um microorganismo de produção de L-treonina e filtrar o caldo para obter um filtrado; concentrar o filtrado; e fazer reagir o filtrado concentrado com um não solvente para obter cristais de L-treonina.

O método de recuperar L-treonina a partir de um caldo de fermentação de um microorganismo de acordo com a presente invenção 5 compreende: separar corpos microbianos a partir do caldo de fermenta- ção que contém L-treonina que é obtido por cultura de um microorga- nismo de produção de L-treonina e filtrar o caldo para obter um filtrado; concentrar o filtrado; e fazer reagir o filtrado concentrado com um não solvente para obter cristais de L-treonina.

Os microorganismos usados na fermentação a fim de prepa-

rar o caldo de fermentação que contém L-treonina podem ser quaisquer microorganismos que consigam produzir L-treonina.

De acordo com uma modalidade da presente invenção, os microorganismos usados na produção de L-treonina podem ser uma 15 cepa transformada de Escherichia coli. A cepa transformada é cultivada num meio de afinamento para obter uma cultura de sementeira e, então, usando a cultura de semente, a pré-cultura e a cultura principal são realizadas por fim para produzir o caldo de fermentação contendo L- treonina. O caldo de fermentação produzido pode conter de 5 a 15% em 20 peso de L-treonina.

De acordo com uma modalidade da presente invenção, a separação dos corpos microbianos a partir do caldo de fermentação de um microorganismo pode ser realizada através de um método selecio- nado do grupo que consiste em filtração, separação centrífuga e trata- mento de calor.

De acordo com uma modalidade da presente invenção, o caldo de fermentação é filtrado por filtração de membrana e, deste modo, é separado num filtrado e numa pasta contendo os microorga- nismos. A filtração de membrana é conduzida de modo a remover os corpos microbianos no caldo de fermentação. Na filtração de membra- na, os corpos microbianos que não podem passar através dos poros da membrana e as impurezas extras são removidos a partir do caldo de fermentação e é obtida apenas uma solução que consegue passar 5 através dos poros da membrana na forma do filtrado. Nisto, o resíduo que não pode passar pelos poros da membrana e, deste modo, não é obtido como filtrado é chamado de pasta e a pasta pode ser descartada num processo de purificação da L-treonina.

Um filtro de membrana usado na filtração de membrana pode ser qualquer filtro que possa separar os corpos microbianos do caldo de fermentação. As condições de operação do filtro de membrana podem ser facilmente configuradas por aquela pessoa de capacidade ordinária na técnica, a fim de separar os corpos microbianos a partir do caldo de fermentação. Por exemplo, o caldo de fermentação pode ser aquecido a mais ou menos 60°C com antecedência sob uma pressão trans-membrana (TMP) de 1,2 a 1,5. A TMP refere-se a um valor que representa a intensidade de pressão que é aplicada numa direção horizontal contra uma solução que flui numa direção vertical e denota a pressão dada ao filtro de membrana pela solução no filtro de membra- na. O tamanho dos poros do filtro de membrana usado pode ser facilmente selecionado por aquela pessoa de capacidade ordinária na técnica.

De acordo com uma modalidade da presente invenção, uma camada de gel pode ser formada em aproximadamente 1 hora depois da 25 filtração da membrana começar. A formação da camada de gel é para manter o fluxo de permeado do filtrado num certo nível durante um período longo de tempo formando uma camada fina dos corpos microbi- anos sobre uma superfície da membrana de filtração. Se não for formada uma camada de gel, o fluxo de permeado do filtrado diminui 30 rapidamente e, deste modo, o filtrado pode não ser apropriadamente obtido e o filtro de membrana deve ser lavado mais freqüentemente. Depois da formação da camada de gel ser completada, o filtrado é obtido através do filtro da membrana.

O filtrado obtido pela filtração de membrana é concentrado.

O processo de concentração destina-se a reduzir a carga sobre os processos subseqüentes diminuindo a quantidade do filtrado e o pro- cesso de concentração é também para facilitar a formação cristalina aumentando a concentração de L-treonina no filtrado.

O método de recuperar L-treonina a partir do caldo de fer- mentação de microorganismos de acordo com a presente invenção inclui concentrar o filtrado obtido separar os corpos microbianos de produção da L-treonina a partir do caldo de fermentação.

O processo de concentração do filtrado obtido depois dos corpos microbianos serem separados pode ser realizado por concentra- is ção sob pressão reduzida. De preferência, a concentração sob pressão reduzida pode ser realizada num concentrador a uma temperatura de 65 a 75°C sob uma pressão de vácuo de 680 a 700 mm Hg. As condi- ções da concentração sob pressão reduzida podem ser ajustadas dependendo do progresso da concentração ou a fim de ajustar a veloci- 20 dade de progresso.

De acordo com uma modalidade da presente invenção, a quantidade de sólidos totais no filtrado pode ser ajustada para a faixa de 20 a 30% em peso por concentração.

De acordo com uma modalidade da presente invenção, a quantidade de L-treonina no filtrado concentrado pode estar na faixa de a 25% em peso. De preferência, a quantidade de L-treonina no filtrado concentrado pode estar na faixa de 10 a 15% em peso.

O método de recuperar L-treonina a partir do caldo de fer- mentação de um microorganismo de acordo com a presente invenção inclui fazer reagir o filtrado concentrado com um não solvente para obter cristais de L-treonina.

Os cristais de L-treonina podem ser obtidos a partir do fil- 5 trado concentrado que contém L-treonina suprimindo a cristalização usando não solvente. Na supressão da cristalização, a solubilidade de um material de destino dissolvido numa solução é rapidamente reduzi- da usando um não solvente e, deste modo, a sobressaturação elevada é facilmente induzida à temperatura ambiente, resultando na recupera- lo Ção dos cristais do material de destino com um elevado rendimento. O termo “não solvente” aqui usado refere-se a um solvente em que o material de destino não é solúvel num nível detectável.

Numa modalidade da presente invenção, o não solvente po- de ser pelo menos um solvente selecionado do grupo que consiste em metanol, etanol, propanol, isopropanol e misturas dos mesmos. De preferência, o não solvente usado na presente invenção pode ser meta- nol.

A sobressaturação dos cristais de destino na supressão da cristalização pode ser formada por dois métodos. Um é adicionar uma 20 solução contendo um material de destino (por exemplo, filtrado e caldo de fermentação concentrado contendo L-treonina) ao não solvente (por exemplo, metanol). O outro é adicionar o não solvente à solução con- tendo o material de destino. Ou seja, quando o não solvente estiver contido num cristalizador, o caldo de fermentação que contém L- 25 treonina, a ser mais tarde adicionado ao não solvente no cristalizador, fica contido num tanque de armazenamento de matéria-prima; ou, quando o caldo de fermentação que contém L-treonina está contido no cristalizador, o metanol, a ser mais tarde adicionado à L-treonina concentrada no cristalizador, fica contido no tanque de armazenamento de matéria-prima. As Figuras 2A e 2B são imagens microscópicas que mostram os formatos cristalinos dependendo do método de formação de um estado sobressaturado na supressão da cristalização de acordo com uma modalidade da presente invenção. A Figura 2A é uma imagem 5 microscópica de uma supressão resultante obtida adicionando metanol como não solvente a um filtrado concentrado e a Figura 2B é uma imagem microscópica de uma supressão resultante obtida adicionando um filtrado concentrado a metanol como não solvente. Conforme ilustrado nas Figuras 2A e 2B, quando a L-treonina concentrada 10 contida no tanque de armazenamento de matéria-prima é adicionada ao metanol contido no cristalizador a uma taxa de fluxo permanente, que é o procedimento usado para produzir o resultante mostrado na Figura 2B, podem ser obtidos cristais de L-treonina mais duros e mais esféri- cos.

De acordo com uma modalidade da presente invenção, a

reação do filtrado concentrado com o não solvente pode ser realizada adicionando o não solvente ao filtrado concentrado no cristalizador.

De acordo com uma modalidade da presente invenção, a reação do filtrado concentrado com o não solvente pode ser realizada 2o adicionando o não solvente ao filtrado concentrado no cristalizador.

De acordo com uma modalidade da presente invenção, o filtrado concentrado ou o não solvente podem ser adicionados ao cristalizador a uma taxa de fluxo de 1,0 a 5,0 g/ minuto e, de preferên- cia, de 1,0 a 3,0 g/minuto. Quando a taxa de fluxo é mais elevada do 25 que 3,0 g/minuto, a intensidade de cristais fica fraca, ao passo que, quando a taxa de fluxo for mais baixa do que 1,0 g/minuto, são forma- dos cristais bons. Deste modo, a taxa de fluxo pode ser mantida, de preferência, a 1,0 a 3,0 g/minuto.

Usando o método descrito acima, o metanol no cristalizador e a L-treonina concentrada são misturados para produzir um estado sobressaturado, resultando na formação de cristais esféricos de L- treonina. A Figura 3 é um gráfico que mostra a nucleação e aglomera- ção cristalina de L-treonina medida usando um analisador de tamanho 5 de partículas de Lasentec, a fim de analisar um mecanismo de cristali- zação na supressão da cristalização. Conforme mostrado na Figura 3, o tamanho de partícula de cristais cresce durante o período de supressão e o tamanho de partícula dos cristais diminui depois do período de supressão. Por outro lado, o número de partículas produzidas tende a IQ aumentar continuamente com tempo.

Na supressão da cristalização, o tanque de armazenamento em que o material de destino a ser cristalizado ou o não solvente é posto e o cristalizador em que a cristalização está realmente realizada são mantidos a uma temperatura específica. A temperatura, o volume e a 15 taxa de injeção de reativos na supressão da cristalização afetam a forma, o tamanho e fatores semelhantes das partículas cristalinas.

De acordo com uma modalidade da presente invenção, a temperatura do filtrado concentrado que contém L-treonina pode estar na faixa de 60 a 70°C.

De acordo com uma modalidade da presente invenção, a

temperatura do não solvente pode estar na faixa de 20 a 30°C.

De acordo com uma modalidade da presente invenção, a temperatura do filtrado concentrado contendo L-treonina pode ser de 70°C e a temperatura do não solvente pode ser de 20°C.

Geralmente, quando é aumentada a temperatura do não

solvente, o tamanho dos cristais esféricos é aumentado. Numa modali- dade da presente invenção, quando a cristalização é realizada adicio- nando o concentrado de L-treonina de uma temperatura de 70°C a metanol de uma temperatura de 20°C, podem ser obtidos cristais grandes.

Além disso, na supressão da cristalização, a quantidade do não solvente usado é importante. Quando a quantidade do não solvente usado é reduzida, um efeito de redução de solubilidade é reduzido; por outro lado, quando a quantidade do não solvente usado é grande, o custo aumenta.

Numa modalidade da presente invenção, o volume do não solvente usado pode ser de 1,0 a 3,0 vezes o volume do filtrado concen- trado. Numa modalidade da presente invenção, quando a quantidade de metanol usado é de 1,0 a 3,0 vezes o volume de 15-25% do concen- trado de L-treonina, é obtido um rendimento cristalino otimizado.

Numa modalidade da presente invenção, quando os cristais esféricos de L-treonina gerados pela supressão da cristalização são 15 separados usando um separador e, depois, secos, os cristais esféricos de L-treonina tendo um conteúdo de pelo menos 98,5% de L-treonina podem ser obtidos com um rendimento de recuperação de pelo menos 95%.

Numa modalidade da presente invenção, o método de recuperar L-treonina a partir do caldo de fermentação de um microor- ganismo usando o não solvente pode incluir, além disso, separar os cristais de L-treonina tendo um tamanho de partícula média de 80 a 100 μηι.

Numa modalidade da presente invenção, o filtrado concen- trado é feito reagir com o não solvente para obter L-treonina cristalina e, então, o não solvente é recuperado a partir de uma solução-mãe separada e pode ser reusado. Como ilustrado na Figura. 1, os cristais são formados pela reação do filtrado concentrado com o não solvente e separados e o não solvente na solução-mãe que permanece depois da separação é recuperado por destilação e pode ser reusado.

A presente invenção proporciona também L-treonina cristalina recuperada a partir do caldo de fermentação de um microor- ganismo de produção de L-treonina usando o não solvente.

A presente invenção provê também um aditivo de alimenta- ção que contém a L-treonina cristalina recuperada a partir do caldo de fermentação de um microorganismo de produção de L-treonina usando o não solvente.

A L-treonina cristalina recuperada a partir do caldo de fermentação usando o não solvente é esférica diferentemente da L- treonina cristalina recuperada usando um processo de concentração convencional, tendo, deste modo, boa fluibilidade e elevada densidade de volume. Conseqüentemente, quando a L-treonina cristalina da presente invenção é usada como aditivo de alimentação, pode contribuir para uma redução nos custos de transporte.

Numa modalidade da presente invenção, a L-treonina cristalina recuperada pode ter um conteúdo de pelo menos 98,5%, um conteúdo de umidade de menos do que 1% e uma densidade de tama- nho de 930 + 50 kg/m3.

Em seguida, a presente invenção será descrita mais especi- ficamente com referência aos exemplos seguintes. Os exemplos seguin- tes são apenas para propósitos ilustrativos e não se pretende que limitem o escopo da invenção.

Efeitos Vantajosos

De acordo com o método de recuperar cristais esféricos de L-treonina usando o não solvente para reduzir a solubilidade de L- treonina em solução, os cristais podem ser recuperados reduzindo a solubilidade da L-treonina numa solução-mãe à temperatura ambiente diferentemente da cristalização por concentração realizada a alta temperatura e, deste modo, pode ser obtido elevado rendimento de recuperação cristalina. Além disso, em comparação com cristais convencionais de L-treonina conformados em agulha, os cristais esféri- cos de L-treonina obtidos usando o não solvente de acordo com a presente invenção têm excelente fluibilidade, proporcionando facilidade de embalagem e manipulação e uma elevada densidade de tamanho, levando a uma redução dos custos de transporte e intensificando, assim, a satisfação dos usuários.

Descrição dos Desenhos

As características e vantagens acima e outras da presente invenção tornar-se-ão mais evidentes descrevendo em detalhe modali- dades exemplificativas da mesma com referência aos desenhos anexos em que:

a Figura 1 é um fluxograma esquemático que mostra um método de recuperação de L-treonina, de acordo com uma modali- dade da presente invenção;

as Figuras 2A e 2B são imagens microscópicas que mostram formatos cristalinos dependendo do método de produção de um estado sobressaturado na supressão da cristalização de acordo com uma modalidade da presente invenção, em que a Figura 2A é uma imagem microscópica de uma supressão resultante obtida adicionando metanol como não solvente a um filtrado concentrado e a Figura 2B é uma imagem microscópica de uma supressão resultante obtida adicio- nando um filtrado concentrado a metanol como não solvente; e

a Figura 3 é um gráfico que mostra como a nucleação cristalina procede com tempo na supressão da cristalização, que foi observada usando um analisador de tamanho de partículas de Lasen- tec.

Modo Para a Invenção Recuperação da L-Treonina Cristalina

a Partir do Caldo de Fermentação Contendo L-Treonina

Escherichia coli FTR2533 recombinante que produz L- treonina foi cultivada num meio de produção (glicose 40 g/L, (NH^2SO4 10 6-9 g/L, MgSO4 4-6 g/L, KH2PO4 2-4 g/L, FeSO4 80-90 mg/L, MnSO4 10-13 mg/L, C0CI2 4-6 mg/L, Na2MoO4 1-3 mg/L, ZnSO4 1-3 mg/L, e H3BO3 0,3-0,8 mg/L) a 33°C durante 65 horas para produzir uma L- treonina contendo caldo de fermentação. 100 L do caldo de fermenta- ção produzido por fermentação foram adicionados a um filtro de mem- 15 brana. Então, o caldo de fermentação foi filtrado pelo filtro de membra- na e foi obtido um filtrado tendo 9,5% de L-treonina e 12,0% de sólidos totais. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para a quanti- dade de sólidos totais de 24,2% em peso e, então, armazenado num tanque de armazenamento de matéria-prima a uma temperatura 20 permanente de 70°C. Metanol num volume 2,0 vezes aquele do concen- trado de L-treonina foi posto num cristalizador. Então, enquanto o concentrado de L-treonina no tanque de armazenamento de matéria- prima foi adicionado ao cristalizador a uma taxa de 2,0 g/minuto, metanol e o concentrado de L-treonina foram feitos reagir no cristaliza- 25 dor; o concentrado de L-treonina e o metanol foram misturados comple- tamente usando um agitador a 300 rpm. Depois que a quantidade total da L-treonina concentrada foi adicionada ao cristalizador, a mistura resultante foi agitada durante 30 minutos. Então, uma pasta cristalina foi separada usando um separador. O separado cristalino foi secado num secador a uma temperatura de 600C durante 2 horas para obter cristais de L-treonina tendo um conteúdo de 98,5% com um rendimento de recuperação de 96%. Aqui, o produto de L-treonina tinha uma densidade de volume de 953,3 kg/m3, um conteúdo de umidade de 0,4% e um conteúdo de material inorgânico de 0,3%.

Embora a presente invenção tenha sido particularmente mostrada e descrita com referência a modalidades exemplificativos da mesma, ficará entendido por aqueles de capacidade ordinária na técnica que podem ser nela feitas várias mudanças na forma e nos detalhes 10 sem sair do espírito e escopo da presente invenção conforme definida pelas Reivindicações seguintes.

Claims

"Método de Recuperação de L-Treonina a Partir de Caldo de Fermentação de Microorganismo de Produção de L-Treonina, L-Treonina Cristalina e Aditivo de Alimentação” Reivindicações

1 . Método de Recuperação de L-Treonina a Partir de Caldo de Fermentação de Microorganismo de Produção de L-Treonina, caracterizado por que compreende: separar corpos microbianos a partir do caldo de fermenta- ção que contém L-treonina obtido por cultura de microorganismos de produção de L-treonina e filtração do caldo de fermentação separado para obter um filtrado; concentrar o filtrado; e fazer reagir o filtrado concentrado com um não solvente para obter cristais de L-treonina.

2 . Método de Recuperação de L-Treonina a Partir de Caldo de Fermentação de Microorganismo de Produção de L-Treonina, de acordo com a Reivindicação 1, caracterizado por que a reação do filtrado concentrado com um não solvente é realizada adicionando o filtrado concentrado ao não solvente contido num cristalizador ou adicionando o não solvente ao filtrado concentrado contido num crista- lizador.

3. Método de Recuperação de L-Treonina a Partir de Caldo de Fermentação de Microorganismo de Produção de L-Treonina, de acordo com a Reivindicação 1, caracterizado por que o não solvente é pelo menos um solvente selecionado do grupo que consiste em metanol, etanol, propanol, isopropanol e misturas dos mesmos.

4. Método de Recuperação de L-Treonina a Partir de Caldo de Fermentação de Microorganismo de Produção de L-Treonina, de acordo com a Reivindicação 1, caracterizado por que o volume do não solvente usado é de 1,0 a 3,0 vezes o volume do filtrado concentrado.

5. Método de Recuperação de L-Treonina a Partir de Caldo de Fermentação de Microorganismo de Produção de L-Treonina, de acordo com a Reivindicação 1, caracterizado por que uma temperatura do filtrado concentrado está na faixa de 60 a 70°C.

6. Método de Recuperação de L-Treonina a Partir de Caldo de Fermentação de Microorganismo de Produção de L-Treonina, de acordo com a Reivindicação 1, caracterizado por que uma temperatura do não solvente está na faixa de 20 a 30°C.

7. L-Treonina Cristalina, caracterizada por que é recuperada pelo método de acordo com qualquer uma das Reivindicações de 1 a 6.

8.Aditivo de Alimentação, caracterizado por que contém a L- treonina cristalina de acordo com a Reivindicação 7.