BRPI0711310B1 - Composto inibidor de p38 map cinase, composição farmacêutica compreendendo o mesmo e uso do mesmo - Google Patents

Composto inibidor de p38 map cinase, composição farmacêutica compreendendo o mesmo e uso do mesmo Download PDF

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BRPI0711310B1
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David Festus Charles Moffat
Stephane Pintat
Stephen John Davies
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Macrophage Pharma Limited
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Abstract

composto inibidor de p38 map cinase, composição farmacêutica compreendendo o mesmo e uso do mesmo. a presente invenção refere-se aos compostos de fórmula (i) (i) são inibidores de p38 map cinase, e são, portanto, de utilidade no tratamento de, entre outros, condições inflamatórias incluindo artrite reumatóide e copd: em que: g é -n= ou -ch=; d é um radical arila ou heteroarila opcionalmente substituída mono- ou bi-cíclica tendo 5 a 13 membros; r6 é hidrogênio ou c1-c3 alquila opcionalmente substituída; p representa hidrogênio e u representa um radical de formula (ia); ou u representa hidrogênio e p representa um radical de formula -a-(ch2)z,-x1-l1-y-nh-chr1r2 em que a representa um radical mono ou bicíclico carbocíclico ou heterocíclico divalente opcionalmente substituído tendo 5 a 13 membros; z, y, l1, e x1 são como definidos na especificação; r1 é um grupo acido carboxílico (-cooh), ou um grupo éster que é hidrolisável por um ou mais enzimas esterase intracelulares a um grupo ácido carboxílico; e r2 é uma cadeia lateral de um aminoácido alfa natural ou não natural.

Description

A presente invenção refere-se a uma série de compostos de éster de aminoácido e aminoácido, às composições contendo-os, aos processos para sua preparação e ao seu uso em medicina como inibidores de p38 MAP cinase para o tratamento de doenças autoimunes e inflamatórias, incluindo artrite reumatóide, psoríase, doença do intestino inflamatória, doença de Crohn, colite ulcerativa, doença pulmonar obstrutiva crônica, asma, escle- rose múltipla, diabetes, dermatite atópica, doença do enxerto versus hospedeiro, lúpus eritematoso sistêmico e outras.
Antecedentes da Invenção
A ativação inadequada de leucócitos incluindo monócitos, ma- crófagos e neutrófilos induzindo a produção de citocinas em níveis elevados tais como TNF-α, IL1 -β e IL-8, é uma característica da patogênese de diversas doenças inflamatórias incluindo artrite reumatóide, colite ulcerativa, doença de Crohn, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD), asma e psoríase. A produção de citocinas por células inflamatórias é um resultado da resposta a uma variedade de estímulos externos, induzindo a ativação de diversos mecanismos de sinalização intracelular. Proeminente entre eles é a su- perfamília de proteína cinase ativada por mitógeno (MAPK) consistindo em cinases de sinalização altamente conservadas que regulam as respostas de estresse, diferenciação e crescimento celular. Células mamíferas contêm pelo menos três famílias de MAPKs: a cinase regulada por sinal extracelular p42/44 (ERK) MAPKs, cinases de terminal c-Jun NH2 (JNKs) e p38 MAPK (também denominada p38a/Mpk2/RK/SAPK2a/CSBP1/2). p38 MAPK foi primeiro clonada seguindo sua identificação como uma cinase que é tirosina fosforilada após estimulação de monócitos por lipopolissacarídeos (LPS) [Han e outro, Science 1994, 265, 808]. Homólogos adicionais de p38 mamífera foram descritos e incluem p38β [Jiang e outro, J.Biol.Chem, 1996, 271, 17920], p38y[Li e outro, Biochem. Biophys. Res. Commun., 1996, 228, 334] e p38.δ[Jiang e outro, J.Biol.Chem. 1997, 272, 30122]. Enquanto p38a e p38β são ubiqüamente expressas, p38y é primariamente restrita ao músculo esqueletal e p38δ é predominantemente expressa no pulmão e rim.
A liberação de citocinas por células de defesa hospedeiras e a resposta de leucócitos às citocinas e outros estresses pró-inflamatórios são em extensão variável regulada por p38 MAPK [Cuenda e outro, FEBS Lett, 1995, 364, 229-233]. Em outros tipos celulares, p38 MAPK controla as respostas de estresse tais como a produção de IL-8 por células epiteliais bronquiais estimuladas por TNF-q e a super-regulação da molécula de adesão celular ICAM-1 em células endoteliais estimuladas por LPS. Sob ativação, por meio de fosforilação dual de um motivo TGY pela especificidade dual cinases MKK3 e MKK6, p38 MAPK exercem seus efeitos através de fosforilação de fatores de transcrição e outras cinases. Proteína cinase 2 ativada por MAP cinase (MAPKAPK-2) foi identificada como um alvo para fosforilação de p38. Foi demonstrado que os camundongos [Kotlyarov e outro, Nat. Cell Biol. 1999, 1, 94-97] sem MAPKAP-K2 liberaram níveis reduzidos de TNF-α, IL-1 β, IL-6, IL-10 e IFN-y em resposta ao choque endotóxico mediado por LPS/galactosamina. A regulação dos níveis destas citocinas bem como COX-2 está no nível de mRNA. Os níveis de TNF-a são regulados através do controle translacional por meio de elementos ricos em AU do 3’-UTR de TNF-a mRNA, com a sinalização de MAPKAP-K2 aumentando a translação de TNF-a mRNA. A sinalização de MAPKAP-K2 induz à estabilidade de mRNA aumentada para COX-2, IL-6 e proteína inflamatória de macrófago. MAPKAP K2 determina a localização celular de p38 MAPK bem como a transdução de p38 MAPK sinalização de, possuindo um sinal de localização celular em seu terminal carboxila e um sinal de exportação nuclear como parte de seu domínio autoinibidor [Engel e outro, EMBO J. 1998, 17, 3363- 3371]. Em células estressadas, MAPKAP-K2 e p38 MAPK migram ao citoplasma do núcleo, esta migração ocorre apenas quando p38 MAPK está ca- taliticamente ativa. Acredita-se que este evento é acionado pela exposição do sinal de exportação nuclear de MAPKAP-K2, como um resultado de fosforilação por p38 MAPK [Meng e outro, J. Biol. Chem. 2002, 277, 37401- 37405]. Adicionalmente p38 MAPK direta ou indiretamente induz a fosforila- ção de diversos fatores de transcrição acreditados a mediar inflamação, incluindo ATF1/2 (ativando fatores de transcrição 1/2), CHOP-10/GADD-153 (interrompe o crescimento e gene 153 induzível por dano de DNA 153), SAP-1 (proteína acessória de fator de resposta de soro -1) e MEF2C (fator realçador de miócito 2) [Foster e outro, Drug News Perspect. 2000, 13, 488- 497],
Foi demonstrado que a inibição de atividade de p38 MAPK por pequenas moléculas, é útil para o tratamento de diversos estados de doença mediados por produção de citocina inadequada incluindo artrite reumatóide, COPD, asma e isquemia cerebral. Esta modalidade foi o objeto de diversas revisões [Salituro e outro, Current Medicinal Chemistry, 1999, 6, 807-823 e Kumar e outro, Nature Reviews Drug Discovery 2003, 2, 717-726].
Inibidores de p38 MAPK foram demonstrados serem eficazes em modelos animais de artrite reumatóide, tal como artrite induzida por colágeno em rato [Revesz e outro, Biorg. Med. Chem. Lett., 2000, 10, 1261-1364] e artrite induzida por adjuvante em rato [Wadsworth e outro, J. Pharmacol. Exp. Then, 1999, 291, 1685-1691]. Em modelos de murino de dano pulmonar induzido por pancreatite, o pré-tratamento com um inibidor de p38 MAPK reduziu a liberação de TNF-a nas vias aéreas e edema pulmonar [Denham e outro, Crit. Care Med., 2000, 29, 628 e Yang e outro, Surgery, 1999, 126, 216]. A inibição de p38 MAPK antes do desafio com ovalbumina (OVA) em camundongos sensibilizados a OVA diminuiu o acúmulo de citocina e células inflamatórias nas vias aéreas e em um modelo de via aérea de inflamação, [Underwood e outro, J. Pharmacol. Exp. Ther, 2000, 293, 281]. A atividade elevada de p38 MAP cinase foi observada em pacientes sofrendo de doença do intestino inflamatória [Waetzig e outro, J. Immunol, 2002,168, 5432-5351]. Os inibidores de p38 MAPK têm mostrado serem eficazes em modelos de rato de hipertrofia cardíaca [Behr e outro, Circulation, 2001, 104, 1292-1298] e isquemia cerebral focal [Barone e outro, J. Pharmacol. Exp. Ther, 2001, 296, 312-321],
Foi descoberto atualmente um grupo de compostos que são inibidores potentes e seletivos de p38 MAPK (pδδq.β^ e δ e as isoformas e variantes de união destas especialmente p38α, p38β e p38β2. Os compostos são, desse modo de uso em medicamento, por exemplo, no tratamento e profilaxia de distúrbios imunes e inflamatórios descritos aqui. Os compostos são caracterizados pela presença na molécula de um motivo de aminoácido ou motivo de éster de aminoácido que é hidrolisável por um carboxilesterase intracelular. Os compostos da invenção tendo o motivo de éster de aminoácido atravessam a membrana, e são hidrolisados para o ácido pelas carboxi- lesterases intracelulares. O produto de hidrólise polar acumula-se na célula visto que ele não atravessa facilmente a membrana celular. Portanto, a atividade de p38 MAP do composto é prolongada e realçada dentro da célula. Os compostos da invenção são relacionados aos inibidores de p38 MAP a- brangidos pelas descrições no Pedido de Patente Internacional W003076405, porém diferem deles no fato de que os presentes compostos têm o motivo de éster de amino ácido acima referido.
Descrição Detalhada da Invenção
De acordo com a invenção é fornecido aqui um composto de Fórmula (I):
Figure img0001
em que: G é -N= ou -CH= D é um radical arila ou heteroarila mono ou bicíclico divalente opcionalmente substituído tendo 5 a 13 membros; Re é hidrogênio ou C1-C3 alquila opcionalmente substituída; P representa hidrogênio e U representa um radical de Fórmula (IA); ou U representa hidrogênio e P representa um radical de Fórmula (IA); -A-(CH2)Z-X1-L1-Y-NH-CHRIR2 (IA) em que A representa um radical mono ou bicíclico carbocíclico ou hete- rocíclico divalente opcionalmente substituído tendo 5 a 13 membros; Z é 0 ou 1; Y é uma ligação, -C(=O)-, -S(=O)2-, -C(=O)NR3-, -C(=S)-NR3, - C(=NH)NR3 OU -S(=O)2NR3- em que R3 é hidrogênio ou opcionalmente substituída CrCe alquila; L1 é um radical divalente de Fórmula -(alk^míQJníalk^p- em que m, n e p são independentemente 0 ou 1, Q é (i) um radical mono ou bicíclico carbocíclico ou heterocíclico divalente opcionalmente substituído tendo 5 a 13 membros, ou (ii), no caso onde tanto m quanto p são 0, um radical divalente de Fórmula -X2-Q1- ou - Q1-X2- em que X2 é -O-, S- ou NRA- em que RA é hidrogênio ou Cj-C3 alquila opcionalmente substituída, e Q1 é um radical mono ou bicíclico carbocíclico ou heterocíclico divalente opcionalmente substituído tendo 5 a 13 membros, Alq1 e Alq2 independentemente representam radicais divalentes opcionalmente substituídos C3-C7 cicloalquila, ou radicais Ci-C6 alquileno, C2-CΘ al- quenileno, ou C2-Cs alquileno lineares ou ramificados opcionalmente substituídos que podem opcionalmente conter ou terminar em uma ligação de éter (-O-), tioéter (-S-) ou amino (-NRA-) em que RA é hidrogênio ou Ci-C3 alquila opcionalmente substituída; e X1 representa uma ligação; -C(=O); ou -S(=O)2-; -NR4C(=O)-, -C(=O)NR4-,- NR4C(=O)NR5-, -NR4S(=O)2-, OU -S(=O)2NR4- em que R4 e R5 são indepen-dentemente hidrogênio ou opcionalmente substituída Ci-C6 alquila. Ri é um grupo ácido carboxílico (-COOH), ou um grupo éster, ou mais enzimas esterases intracelulares a um grupo ácido carboxílico; e R2 é uma cadeia lateral de a natural ou aminoácido alfa não natural. Os compostos de Fórmula (I) acima podem ser preparados na forma de sais, especialmente solvatos, hidratos, N-óxidos, e sais farmaceuti- camente aceitáveis destes. Qualquer reivindicação a um composto aqui, ou referência aqui aos "compostos da invenção", "compostos em que a invenção está envolvida", "os compostos de Fórmula (I)" e os semelhantes, inclu- em sais, N-óxidos, hidratos, e solvatos de tais compostos. Embora a definição acima potencialmente inclua moléculas de peso molecular elevado, ela é preferível, em linhas com princípios gerais de prática química médica, que os compostos com os quais a invenção está envolvida devem ter pesos moleculares de não mais do que 600. Em outro amplo aspecto a invenção fornece o uso de um composto de Fórmula (I) como acima definido, ou um N-óxido, sal, hidrato ou solvato deste na preparação de uma composição para a inibição da atividade de enzima de p38 MAP cinase. Os compostos em que a invenção está envolvida podem ser utilizados para a inibição de atividade de enzima de p38 MAP cinase in vitro ou in vivo. Em um aspecto da invenção, os compostos da invenção podem ser utilizados na preparação de uma composição para o tratamento de doença autoimune ou inflamatória, particularmente aqueles mencionados acima em que a atividade de p38 MAP cinase desempenha um papel. Em outro aspecto, a invenção fornece um método para o tratamento dos tipos de doença anteriores, que compreende administrar a um indivíduo que está sofrendo de tal doença uma quantidade eficaz de um composto de Fórmula (I) como acima definido.
Terminologia
O termo "éster" ou "grupo carboxila esterificado" significa um grupo RXO(C=O)- em que Rx é o grupo caracterizando o éster, notavelmente derivado do álcool RXOH.
Como utilizado aqui, o termo "(Ca-Cb)alquila" em que a e b são números inteiros refere-se a um radical alquila de cadeia linear ou ramificada tendo átomos de carbonos a a b. desse modo, quando a for 1 e b for 6, por exemplo, o termo incluirá metila, etila, n-propila, isopropila, n-butila, isobutila, sec-butila, t-butila, n-pentila e n-hexila.
Como utilizado aqui o termo "radical (Ca-Cb)alquileno divalente " em que a e b são números inteiros refere-se a uma cadeia de hidrocarbone- to saturada tendo de a a b átomos de carbono e duas valências insastifeitas.
Como utilizado aqui o termo "(Ca-Cb)alquenila" em que a e b são números inteiros refere-se a uma porção alquenila linear ou ramificada tendo de a to b átomos de carbono tendo pelo menos uma ligação dupla de este- reoquímica E ou Z onde aplicável. O termo includes, por exemplo, vinila, alila, 1- e 2-butenila e 2-metil-2-propenila.
Como utilizado aqui o termo "radical (Ca-Cb)alquenileno divalen- te" significa uma cadeia hidrocarboneto tendo de a a b átomos de carbono, pelo menos uma ligação dupla, e duas valências insastifeitas.
Como utilizado aqui o termo "Ca-Cb alquinila" em que a e b são números inteiros refere-se a grupos hidrocarboneto de cadeia linear ou cadeia ramificada tendo de a a b átomos de carbono e tendo além de uma ligação tripla. Este termo pode incluir, por exemplo, etinila, 1-propinila, 1- e 2- butinila, 2-metil-2-propinila, 2-pentinila, 3-pentinila, 4-pentinila, 2-hexinila, 3- hexinila, 4-hexinila e 5-hexinila.
Como utilizado aqui o termo "radical (Ca-Cb)alquinileno divalente" em que a e b são números inteiros refere-se a uma cadeia hidrocarboneto divalente tendo de a a b átomos de carbono, e pelo menos uma ligação tripla.
Como utilizado aqui o termo "carbocíclico" refere-se a um radical mono-, bi- ou tricíclico tendo até 16 átomos de anel, todos dos quais são carbono, e incluem arila e cicloalquila.
Como utilizado aqui o termo "cicloalquila" refere-se a um radical carbocíclico saturado monocíclico tendo de 3-8 átomos de carbono e inclui, por exemplo, ciclopropila, ciclobutila, ciclopentil, cicloexila, cicloeptila e ciclo- octila.
Como utilizado aqui o termo não qualificado "arila" refere-se a um radical aromático carbocíclico mono-, bi- ou tri-cíclico, e inclui radicais tendo dois anéis aromáticos carbocíclicos monocíclicos que são diretamente ligados por uma ligação covalente. Ilustrativos de tais radicais são fenila, bifenila e naptila.
Como utilizado aqui o termo não qualificado "heteroarila refere- se a um radical aromático mono, bi- ou tricíclico contendo um ou mais hete- roátomos selecionados de S, N e O, e incluem radicais tendo dois tais anéis monocíclicos, ou um tal anel monocíclico e um anel arila monocíclico, que são diretamente ligados por uma ligação covalente. Ilustrativos de tais radicais são tienila, benztienila, furila, benzfurila, pirrolila, imidazolila, benzimida- zolila, tiazolila, benztiazolila, isotiazolila, benzisotiazolila, pirazolila, oxazolila, benzoxazolila, isoxazolila, benzisoxazolila, isotiazolila, triazolila, benztriazoli- la, tiadiazolila, oxadiazolila, piridinila, piridazinila, pirimidinila, pirazinila, tria- zinila, indolila e indazolila.
Como utilizado aqui o termo não qualificado "heterociclila" ou "heterocíclico" inclui "heteroarila" como acima definido, e em seu significado não aromático refere-se a um radical não aromático mono-, bi- ou tri-cíclico contendo um ou mais heteroátomos selecionados de S, N e O, e a grupos consistindo em um radical não aromático monocíclico contendo um ou mais tais heteroátomos que são covalentemente ligados a outro tal radical ou a um radical carbocíclico monocíclico. Ilustrativos de tais radicais são os grupos pirrolila, furanila, tienila, piperidinila, imidazolila, oxazolila, isoxazolila, tiazolila, tiadiazolila, pirazolila, piridinila, pirrolidinila, pirimidinila, piperazinila, indolila, morfolinila, benzfuranila, piranila, isoxazolila, benzimidazolila, meti- lenodioxifenila, etilenodioxifenila, maleimido e sucinimido.
Um "radical fenileno, piridinileno, pirimidinileno, ou pirazinileno divalente" é um anel benzeno, piridina, pirimidina ou pirazina, com duas valências insastifeitas, e inclui 1,3-fenileno, 1,4-fenileno, e os seguintes:
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A menos que especificado de outro modo no contexto em que ele ocorre, o termo "substituído" como aplicado à qualquer porção aqui signi fica substituído com até quatro substituintes compatíveis, cada qual inde-pendentemente pode ser, por exemplo, (Ci-Ce)alquila, (C1-Ce)alcóxi, hidróxi, hidróxi(Ci-C6)alquila, mercapto, mercapto(Ci-C6)alquila, (Ci-C6)alquiltio, fenila, halo (incluindo fluoro, bromo e cloro), trifluorometila, trifluorometóxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORA, -CORA, -SO2RA -CONH2, -SO2NH2, - CONHRA, -SO2NHRA, -CONRARB, -SO2NRARB, -NH2, -NHRA, -NRARB, -OCONH2, -OCONHRA, - OCONRARB, -NHCORA, -NHCOORA, -NRBCOORA, -NHSO2ORA, -NRBSO2OH, - NRBSO2ORA, -NHCONH2, -NRACONH2, -NHCONHRB -NRACONHRB, -NHCONRARB. OU -NRACONRARB em que RA e RB são independentemente a (Ci-Cθjalquila, (C3-C6) cicloalquila , fenila ou heteroarila monociclica tendo 5 ou 6 átomos de anel. Um "substituinte opcional" pode ser um dos grupos de substituintes anteriores.
O termo "cadeia lateral de um aminoácido alfa natural ou não natural" refere-se o grupo RY em um aminoácido natural ou não natural de Fórmula NH2-CH(RY)-COOH.
Exemplos de cadeias laterais de aminoácidos alfa naturais incluem aqueles de alanina, arginina, asparagina, ácido aspártico, cisteína, cisti- na, ácido glutâmico, histidina, 5-hidroxilisina, 4-hidroxiprolina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, prolina, serina, treonina, triptofan, tirosina, valina, ácido a-aminoadípico, ácido a-amino-n-butírico, 3,4- diidroxifenilalanina, homosserina, a-metilserina, ornitina, ácido pipecólico, e tiroxina.
Aminoácidos alfa naturais que contêm substituintes funcionais, por exemplo, grupos amino, carboxila, hidróxi, mercapto, guanidila, imidazoli- la, ou indolila em suas cadeias laterais características incluem arginina, lisina, ácido glutâmico, ácido aspártico, triptofan, histidina, serina, treonina, tirosina, e cisteína. Quando R2 nos compostos da invenção for uma daquelas cadeias laterais, o substituinte funcional pode ser opcionalmente protegido.
O termo "protegido" quando utilizados em relação a um substitu- inte funcional em uma cadeia lateral de um aminoácido alfa natural significa um derivado de tal substituinte que é substancialmente não funcional. Por exemplo, grupos carboxila podem ser esterificados (por exemplo, como um éster de Ci-Ce alquila), grupos amino podem ser convertidos em amidas (por exemplo, as como uma amida de NHCOCi-Ce alquila) ou carbamatos (por exemplo, como um carbamato de NHC(=O)OCI-C6 alquila ou NHC(=O)OCH2Ph), grupos hidroxila podem ser convertidos em éteres (por exemplo, um éter de OCi-Cθ alquila ou um éter de O(Ci-Ce alquil)fenila) ou ésteres (por exemplo, um éster de OC(=O)Ci-C6 alquila) e grupos tiol podem ser convertidos em tioéteres (por exemplo, um tioéter de terc-butila ou benzila) ou tioésteres (por exemplo, um tioéster de SC(=O)C1-C6 alquila).
Exemplos de cadeias laterais de aminoácidos alfa não naturais incluem aqueles referidos abaixo na descrição de grupos R2 adequados para uso em compostos da presente invenção.
Como utilizado aqui o termo "sal" inclui adição de base, adição de ácido e sais quartenários. Compostos da invenção que são acídicos podem formar, incluindo sais farmaceuticamente aceitáveis, com bases tais como hidróxidos de metal de álcali, por exemplo, hidróxidos de sódio e potássio; hidróxidos de metal alcalino terroso, por exemplo, hidróxidos de cálcio, bário e magnésio; com bases orgânicas, por exemplo, N-metil-D- glucamina, tris(hidroximetil)amino-metano de colina, L-arginina, L-lisina, pi- peridina de N-etila, dibenzilamina e similares. Aqueles compostos (I) que são básicos podem formar sais, incluindo sais farmaceuticamente aceitáveis com ácidos inorgânicos, por exemplo, com ácidos hidroálicos tais como ácidos hidroclóricos ou hidrobrômicos, ácidos sulfúrico, ácido nítrico ou ácido fosfórico e os semelhantes, e com ácidos orgânicos, por exemplo, com ácidos acéticos, tartáricos, sucínicos, fumáricos, maléicos, málicos, salicílicos, cítricos, metanossulfônicos, p-toluenossulfônicos, benzóicos, benzenossulfôni- cos, glutâmicos, lácticos, e mandélicos e similares. Para uma revisão sobre sais adequados, veja Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, e Use by Stahl e Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Alemanha, 2002).
O termo ‘solvato’ é utilizado aqui para descrever um complexo molecular compreendendo o composto da invenção e uma quantidade este- quiométrica de um ou mais moléculas de solvente farmaceuticamente aceitável, por exemplo, etanol. O termo ‘hidrato’ é empregado quando o referido solvente for água.
Compostos da invenção que contêm um ou mais centros quirais atuais ou potenciais, por causa da presença de átomos de carbono assimétricos, podem existir como enantiômeros ou como diversos de diastereoisô- meros com estereoquímica R ou S em cada centro quiral. A invenção inclui todos os tais enantiômeros e diastereoisômeros e misturas destes.
Como mencionado, os ésteres da invenção são convertidos por esterases intracelulares nos ácidos carboxílicos. Tantos os ésteres quanto os ácidos carboxílicos podem ter atividade inibidora de p38 MAP cinase por sua própria razão. Os compostos da invenção, portanto, não incluem apenas o éster, porém também os produtos de hidrólise de ácido carboxílico correspondente.
Nos compostos com os quais a invenção está envolvida:
O grupo D
D é um radical arila ou heteroarila mono ou bicíclico divalente opcionalmente substituído tendo 5 a 13 membros. Atualmente prefere-se que B seja fenila opcionalmente substituída ou piridinila opcionalmente substituída. Os substituintes opcionais preferidos em B incluem cloro, flúor, metila, metóxi e trifluorometila, por exemplo, quando B for 2,4-difluorofenila.
O substituinte Re
R6 é hidrogênio ou C1-C3 alquila opcionalmente substituída. Atu-almente prefere-se que R6 seja hidrogênio ou metila.
Regioisômeros P/U
Atualmente prefere-se que P seja hidrogênio e U seja um radical de Fórmula (IA) como acima definido.
O radical A
No radical de Fórmula (IA), é atualmente preferido que A seja 1,4 fenileno opcionalmente substituído. No caso substituintes opcionais preferidos incluem flúor e cloro. A pode também ser, por exemplo, qualquer dos
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em que Zi é NH, S ou O. um sub-grupo particularmente preferidos de compostos da invenção consiste naqueles de Fórmula (HA), (IIB) e (IIC):
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5 em que Rn = F, R12 = H, R13 = H e R14 = H; ou Ri 1 = F, R12 = F, R13 = H e R14 = H; ou Ri 1 = F, R12 - H, R-|3 = F e R14 = F; ou Rn = F, Ri2 - F, Ri3 - F e R14 = F; ou Rn = F, Ri2 = F, Ri3 = F e RI4 = H e em que z, X1, L1, Y, R1 e R2 são como definidos acima com referência à Fórmula (I), e como também descritos abaixo.
O radical -Y-L1-X1-[CH2]Z-
Este radical (ou ligação) surge a partir da estratégia química escolhida para ligar o motivo de éster de aminoácido RICH(R2)NH- ao sistema de anel A. Claramente a estratégia química, e desse modo, para o qual o acoplamento pode variar amplamente, e desse modo, muitas combinações das variáveis Y, L1, X1 ez são possíveis. A combinação precisa de variáveis preparando a química de ligação entre o motivo de éster de aminoácido e o sistema de anel A será freqüentemente irrelevante ao modo de ligação do composto como um todo. Por outro lado, aquela química de ligação em alguns casos capturará interações de ligação com a enzima.
Deve-se observar também que os benefícios do motivo de éster de aminoácido (fácil entrada na célula, hidrólise de esterase na célula, e a- cúmulo na célula de produto de hidrólise de ácido carboxílico ativo) são melhores obtidos quando a ligação entre o motivo de éster de aminoácido e o sistema de anel A não é um substrato para atividade de peptidase na célula que pode resultar na divagem do aminoácido da molécula. De fato a estabilidade para peptidases intracelulares é facilmente testada incubando-se o composto com os teores de célula rompida, e analisando para qualquer tal divagem.
Com as seguintes observações gerais em mente, tomando as variáveis que compõe o radical -Y-L1-X1-[CH2]Z- sucessivamente: z pode ser 0 ou 1, de modo que um radical metileno ligado ao sistema de anel A seja opcional;
Exemplos preferidos específicos de Y quando a seletividade de macrófago não é requerida incluem -(C=O)-, -(C=O)NH-, e -(C=O)O-; Onde a seletividade de macrófago é requerida qualquer uma das outras opções para Y, incluindo o caso onde Y é uma ligação, é apropriada.
No radical L1, exemplos de radicais Alq1 e Alq2, quando presen- ts incluem -CH2-, -CH2CH2-, -CH2CH2CH2-, -CH2CH2CH2CH2-, -CH=CH-, -CH=CHCH2-, -CH2CH=CH-, CH2CH=CHCH2-C=C-, -C=CCH2-, CH2C=C-, e CH2C=CCH2. Exemplos adicionais de Alq1 e Alq2 incluem -CH2W-, -CH2CH2W-, -CH2CH2WCH2-, -CH2CH2WCH(CH3)-, -CH2WCH2CH2-, -CH2WCH2CH2WCH2- e -WCH2CH2- onde W é -O-, -S-, -NH-, -N(CH3)-, OU -CH2CH2N(CH2CH2OH)CH2-. Outros exemplos de Alq1 e Alq2 incluem radicais ciclopropila, ciclopentila e cicloexila divalentes.
Em L1, quando n é 0, 0 radical é uma cadeia hid roca rboneto (op-cionalmente substituída e talvez tendo uma ligação de éter, tioéter ou amino). Atualmente prefere-se que não exista nenhum substituinte em L1. Quando tanto m quanto p forem 0, L1 será um radical carbocíclico heterocí- clico mono ou bicíclico divalente com 5-13 átomos de anel (opcionalmente substituídos). Quando n for 1 e pelo menos um dentre m e p for 1, L1 será um radical divalente incluindo uma cadeia ou cadeias hidrocarboneto ou e um radical carbocíclico ou heterocíclico mono- ou bicíclico com 5-13 átomos de anel (opcionalmente substituído). Quando presente, Q pode ser, por exemplo, um radical fenila, naftila, ciclopropila, ciclopentila, ou cicloexila divalente, ou um radical heterocíclico mono-, ou bi-cíclico tendo 5 a 13 membros de anel, tal como radical piperidinila, piperazinila, indolila, piridila, tienila, ou pirrolila, porém 1,4-fenileno é atualmente preferido.
Especificamente, em algumas modalidades da invenção, L1, m e p podem ser 0 com n sendo 1. Em outras modalidades, n e p podem ser 0 com m sendo 1. Em outras modalidades, m, n e p podem ser todos 0. Ainda em outras modalidades m pode ser 0, n pode ser 1 com Q sendo um radical heterocíclico monocíclico, e p pode ser 0 ou 1. Alq e Alq2, quando presente, pode ser selecionado de -CH2-, -CH2CH2-, e -CH2CH2CH2- e Q pode ser 1,4-fenileno.
Exemplos específicos do radical -Y-L1-X1-[CH2]Z- incluem - C(=O)- e -C(=O)NH- bem como -(CH2)V-, -(CH2)VO-, -C(=O)-(CH2)V-, -C(=O)- (CH2)VO-, -C(=O)-NH-(CH2)W-, -C(=O)-NH-(CH2)WO-
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em que v é 1,2, 3 ou 4 e w é 1,2 ou 3, tal como -Y-L1-X1-[CH2]Z-, θ -CH2-, -CH2CH2-, -CH2CH2CH2-, -CH2CH2CH2CH2-, -CH2O-, -CH2CH2O-, - CH2CH2CH2O-, -CH2CH2CH2CH2O-, -C(=O)-CH2-, - C(=O)-CH2O-, -C(=O)- NH-CH2-, OU -C(=O)-NH-CH2O-. O grupo Ri
Em uma classe de compostos da invenção, Ri é um grupo ácido carboxílico. Embora os compostos desta classe possam ser administrados como o ácido carboxílico ou um sal deste, prefere-se que eles sejam gerados na célula pela ação de uma esterase intracelular em um compostos correspondente em que Ri é um grupo éster.
O grupo éster Ri pode ser aquele que no composto é hidrolisá- vel por uma ou mais enzimas carboxilesterase intracelulares a um grupo ácido carboxílico. Enzimas carboxilesterase intracelulares capazes de hidrolisar o grupo éster de um composto da invenção no ácido correspondente incluem os três subtipos de enzima humana hCE-1, hCE-2 e hCE-3. Embora estas sejam consideradas serem as enzimas principais, outras enzimas tais como bifenil-hidrolase (BPH) podem também tem um papel na hidrólise do éster. Em geral, se a carboxilesterase hidrolisa o éster de aminoácido livre no ácido de origem, ela também hidrolisará o motivo de éster quando covalente- mente conjugado ao inibidor. Portanto, o ensaio de célula rompida e/ou o ensaio de carboxilesterase isolada descrito aqui fornece uma primeira avaliação franca, rápida e simples para ésteres que têm o perfil de hidrólise requerida. Motivos de éster selecionados daquela maneira então podem ser reensaiados no mesmo ensaio de carboxilesterase quando conjugado ao inibidor por meio da química de conjugação requerida, para confirmar que ele é ainda um substrato de carboxilesterase naquela base. Submetidos aos requisitos que eles serão hidrolisáveis por enzimas carboxilesterase intracelular, exemplos de grupos éster particulares Ri incluem aqueles de Fórmula -(C=O)ORi4 em que RI4 é R8RgRioC- em que (i) Re é hidrogênio ou (CrCsjalquiHZ^a-KCi-Csjalquiljb- ou (C2- C3)alquenil-(Z1)a-[(Ci-C3)alquil]b- opcionalmente substituído em que a e b são independentemente 0 ou 1 e Z1 é -0-, -S-, ou -NRn- em que Rn é hidrogênio ou (Ci-C3)alquila; e R9 e Rw são independentemente hidrogênio ou (Ci- Csjalquil-; (ii) Re é hidrogênio ou Ri2Ri3N-(Ci-C3)alquil- opcionalmente substituído em que RI2 é hidrogênio ou (Ci-C3)alquila e R13 é hidrogênio ou (Ci- Csjalquila; ou RI2 e R13 juntamente com o nitrogênio ao qual eles são ligados formam um anel heterocíclico monocíclico opcionalmente substituído de 5 ou 6 átomos de anel ou sistema de anel heterocíclico bicíclico de 8 a 10 átomos de anel, e Rθe R10 são independentemente hidrogênio ou (Ci-C3)alquil-;ou (iii) Re e R9 tomados juntamente com o carbono ao qual eles são ligados formam um anel carbocíclico monocíclico opcionalmente substituído de 3 a 7 átomos de anel ou sistema de anel carbocíclico bicíclico de 8 a 10 átomos de anel, e R10 é hidrogênio.
Dentro destas classes, R10 é freqüentemente hidrogênio. Exemplos específicos de R14 incluem metila, etila, n- ou iso-propila, n-, see- ou terc-butila, cicloexila, alila, fenila, benzila, 2-, 3- ou 4-piridilmetila, N- metilpiperidin-4-ila, tetraidrofuran-3-ila ou metoxietila. Atualmente prefere-se onde R14 é ciclopentila.
Macrófagos são conhecidos desempenharem um papel-chave em distúrbios inflamatórios através da liberação de citocinas em particular TNFα e IL-1 (van Roon e outro, Arthritis e Rheumatism, 2003, 1229-1238). Em artrite reumatóide eles são os maiores contribuidores para a manutenção de inflamação de articulação e destruição de articulação. Macrófagos estão também envolvidos em desenvolvimento e crescimento de tumor (Naldini e Carraro, Curr Drug Targets Inflamm Allergy, 2005, 3-8). Portanto, agentes que seletivamente alvejam a proliferação celular de macrófagos podem ser de valor no tratamento de câncer e doença autoimune. O alvejamento de tipos celulares específicos seria esperado induzirem efeitos colaterais reduzidos. Os inventores descobriram um método de alvejar os inibidores de p38 cinase para macrófagos que é baseado na observação de que a maneira em que o motivo esterase é ligado ao inibidor de p38 cinase determina se ele é hidrolisado, e, portanto, se ou não ele acumula-se em diferentes tipos celulares. Especificamente descobriu-se que macrófagos contêm carboxilesterase humano hCE-1 visto que outros tipos não. Na Fórmula geral (I) quando o nitrogênio do motivo esterase RICH(R2)NH- não for diretamente ligado a uma carbonila (-C(=O)-), isto é, quando Y não seja um radical-C(=O), - C(=O)O- ou -C(=O)NR3-,O éster será apenas hidrolisado por hCE-1 e portanto, os inibidores serão apenas acumulados em macrófagos. Aqui, a menos que "monócito" ou "monócitos" seja especificado, o termo macrófago ou macrófagos será utilizado para significar macrófagos (incluindo macrófagos associados com tumor) e/ou monócitos.
A cadeia lateral de aminoácido R2
Submetido ao requisito de que o grupo Ri seja hidrolisável por enzimas carboxilesterase intracelulares, a identidade do grupo de cadeia lateral R2 não é crítica.
Exemplos de cadeias laterais de aminoácido incluem grupos Ci- C6 alquila, fenila, 2,- 3-, ou 4-hidroxifenila, 2,- 3-, ou 4-metoxifenila, 2,-3-, ou 4-piridilmetila, benzila, feniletila, 2-, 3-, ou 4-hidroxibenzila, 2,- 3-, ou 4- benziloxibenzila, 2,- 3-, ou 4- CI-CÔ alcoxibenzila, e benzil0xi(Ci-Cealquil)-; o grupo de caracterização de um α aminoácido natural, em que qualquer grupo funcional pode ser protegido -[Alq]nR6 onde Alq é um grupo (Ci-Ce)alquila ou (C2-Ce)alquenila opcionalmente interrompido por um ou mais átomos de - O-, ou -S- ou grupos -N(R7)- [onde R7 é um átomo de hidrogênio ou um grupo (Ci-C6)alquila], n é 0 ou 1, e Re é um grupo cicloalquila ou cicloalquenila opcionalmente substituído; um grupo benzila substituído no anel fenila por um grupo de Fórmula -OCH2CORi5 onde R15 é hidroxila, amino, (Ci- Ce)alcóxi, fenil(Ci-Ce)alc0xi, (Ci-C6)alquilamino, di((Ci-C6)alquil)amino, fe- nil(Ci-C6)alquilamino, o resíduo de um aminoácido, haleto de ácido, éster ou derivado de amida deste, o referido resíduo sendo ligado por meio de uma ligação de amida, 0 referido aminoácido sendo selecionado de glicina, α ou β alanina, valina, leucina, isoleucina, fenilalanina, tirosina, triptofan, serina, treonina, cisteina, metionina, asparagina, glutamina, lisina, histidina, argini- na, ácido glutâmico, e ácido aspártico; um grupo heterocíclico(Ci-C6)alquila, sendo não substituído ou mono- ou di-substituído no anel heterocíclico com halo, nitro, carbóxi, (Ci-C6)alcóxi, ciano, (Ci-Cθjalcanoila, trifluorometil (Ci- C6)alquila, hidróxi, formila, amino, (Ci-Cejalquilamino, di-(Ci-C6)alquilamino, mercapto, (Ci-Ce)alquiltio, hidróxKCrCejalquila, mercapto(Ci-C6)alquila ou (Ci-C6)alquilfenilmetila; e um grupo -CRaRbRc θm que:
Cada um de Ra, Rb e Rc é independentemente hidrogênio, (CrCθjalquila, (C2-C6)alquenila, (C2-C6)alquinila, fenil(Ci-C6)alquila, (C3-C8)cicloalquila; ou Rc é hidrogênio e Ra e Rb são independentemente fenila ou heteroarila tal como piridila ou Rc é hidrogênio, (Ci-C6)alquila, (C2-C6)alquenila, (C2-C6)alquinila, fenil(Ci- Cθjalquila, ou (Cs-Cejcicloalquila, e Ra e Rb juntamente com o átomo de carbono ao qual eles são ligados formam um anel cicloalquila de 3 a 8 membros ou um heterocíclico de 5- a 6 membros; ou Ra, Rb e Rc juntamente com o átomo de carbono ao qual eles são ligados formam um anel tricíclico (por exemplo, adamantila); ou Ra e Rb são cada qual independentemente (Ci-Cejalquila, (C2-C6)alquenila, (C2-C6)alquinila, fenil(Ci-C6)alquila, ou um grupo como definido para Rc a- baixo diferente de hidrogênio, ou Ra e Rb juntamente com o átomo de carbono ao qual eles são ligados formam um anel cicloalquila ou heterocíclico, e Rc é hidrogênio, -OH, -SH, halogênio, -CN, -CO2H, (Ci-C4)perfluoroalquila, - CH2OH, -CO2(CrC6)alquila, -O(Ci-C6)alquila, -O(C2-C6)alquenila, -S(Ci- C6)alquila, -SO(Ci-C6)alquila, -SO2(C1-C6) alquila, -S(C2-C6)alquenila, - SO(C2-C6)alquenila, -SO2(C2-Ce)alquenila ou um grupo -Q2-W em que Q2 representa uma ligação ou -O-, -S-, -SO- ou -SO2- e W representa um grupo fenila, fenilalquila, (Cs-Csjcicloalquila, (Cs-Cejcicloalquilalquila, (C4- Csjcicloalquenila, (C4-C8)cicloalquenilalquila, heteroarila ou heteroarilalquila, cujo grupo W pode opcionalmente ser substituída por um ou mais substituintes independentemente selecionados de, hidroxila, halogênio, -CN, -CO2H, - CO2(Ci-C6)alquila, -CONH2, -CONH(Ci-Ce)alquila, -CONH(Ci-C6alquila)2, - CHO, -CH2OH, (Ci-C4)perfluoroalquila, -O(CrCô)a!quila, -S(Ci-C6)alquila, - SO(Ci-C6)alquila, -SO2(Ci-C6)alquila, -NO2, -NH2, -NH(Ci-C6)alquila, -N((Ci- Ce)alquila)2, -NHCO(Ci-C6)alquila, (Ci-C6)alquila, (C2-C6)alquenila, (C2- Cβjalquinila, (Cs-Csjcicloalquila, (C4-C8)cicloalquenila, fenila ou benzila. Exemplos particulares de grupos R2 incluem hidrogênio (a glicina "cadeia lateral"), benzila, fenila, cicloexilmetila, cicloexila, piridin-3-ilmetila, terc-butoximetila, iso-butila, sec-butila, terc-butila, 1-benziltio-1-metiletila, 1- metiltio-1 -metiletila, 1-mercapto-1-metiletila, e feniletila. Atualmente os grupos R2 referidos incluem fenila, benzila, iso-butila, cicloexila e t-butoximetila.
Para os compostos da invenção que devem ser sistemicamente administrados, ésteres com uma taxa lenta de clivagem de carboxilesterase são preferidos, desde que eles sejam menos suscetíveis ao metabolismo pré-sistêmico. Sua capacidade de alcançar seu tecido-alvo intacto é, portanto, aumentada, e 0 éster pode ser convertido dentro das células do tecido- alvo no produto ácido. Entretanto, para administração local, onde o éster é diretamente aplicado ao tecido-alvo ou diretamente ali, por exemplo, inalação, será freqüentemente desejável que 0 éster tenha uma taxa rápida de clivagem de esterase, para minimizar a exposição sistêmica e conseqüentes efeitos colaterais indesejados. Nos compostos desta invenção, se o carbono adjacente ao carbono alfa do éster de aminoácido alfa for monossubstituído, isto é, R2 for CH2RZ (RZ sendo o mono-substituinte) então os ésteres tendem a serem clivados mais rapidamente do que se aquele carbono for é di- ou tri- substituído, como no caso onde R2 é, por exemplo, fenila ou cicloexila.
Como acima mencionado, os compostos com os quais a invenção é envolvida são inibidores de atividade de p38 MAK cinase, e são, portanto, de utilização no tratamento de doenças tais como psoríase, doença do intestino inflamatória, Doença de Crohn, colite ulcerativa, doença pulmonar obstrutiva crônica, asma, esclerose múltipla, diabetes, dermatite atópica, doença do enxerto versus hospedeiro, ou lúpus eritematoso sistêmico e artrite reumatóide, em que a atividade de p38 MAP cinase desempenha uma parte.
Será entendido que o nível de dose específica para qualquer paciente particular dependerá de diversos fatores incluindo a atividade do composto específico empregado, a idade, peso corporal, saúde geral, sexo, dieta, tempo de administração, rotina de administração, taxa de excreção, combinação de fármaco e gravidade da doença particular passando por tratamento. Os níveis de dose e freqüências ideais de dosagem serão determinados pelos ensaios clínicos.
Os compostos com os quais a invenção é envolvida podem ser preparados para administração por qualquer rotina consistente com suas propriedades farmacocinéticas. As composições oralmente administráveis podem ser na forma de comprimidos, cápsulas, pós, grânulos, lozangos, preparações líquidas ou em gel, tal como soluções ou suspensões orais, tópicas, ou parenterais estéreis. Comprimidos e cápsulas para administração oral podem ser em forma de representação de dose unitária, e podem conter excipientes convencionais tais como agentes de ligação, por exemplo, xarope, acácia, gelatina, sorbitol, tragacanto, ou polivinil-pirrolidona; cargas, por exemplo, lactose, açúcares, amido de trigo, fosfato de cálcio, sorbitol ou gli- cina; lubrificantes de tabletagem, por exemplo, estearato de magnésio, talco, polietileno glicol ou sílica; desintegrantes, por exemplo, amido de batata, ou agentes umectantes aceitáveis tais como laurila sulfato de de sódio. Os comprimidos podem ser revestidos de acordo com os métodos bem conhecidos na prática farmacêutica normal. Preparações líquidas orais podem ser na forma de, por exemplo, suspensões aquosas ou oleosas, soluções, emulsões, xaropes ou elixires, ou podem ser representados como um produto seco para reconstituição com água ou outros veículos adequados antes do uso. Tais preparações líquidas podem conter aditivos convencionais tais como agentes de suspensão, por exemplo, sorbitol, xarope, metil celulose, xarope de glicose, gorduras comestíveis hidrogenadas de gelatina; agentes emulsificantes, por exemplo, lecitina, monooleato de sorbitan, ou acácia; veículos não oleosos (que podem incluir óleos comestíveis), por exemplo, óleo de amêndoa, óleo de coco fracionado, ésteres oleosos tais como glicerina, propileno glicol, ou álcool etílico; preservativos, por exemplo, p- hidroxibenzoato de metila ou propila ou ácido sórbico, e se desejado agentes aromatizantes ou colorantes.
Para aplicação tópica à pele, o fármaco pode ser preparado em um creme, loção ou ungüento. Formulações de creme ou ungüento que podem ser utilizadas para o fármaco são formulações convencionais bem conhecidas na técnica, por exemplo, como descrito em livros didáticos padrão de produtos farmacêuticos tais como o British Pharmacopoeia.
Para aplicação tópica por inalação, o fármaco pode ser formulado por liberação de aerosol, por exemplo, por atomizadores de jato impulsionado por pressão ou atomizadores ultrassónicos, ou preferivelmente por aerossóis medidos impulsionados por propelente ou administração de pós mi- cronizados, livre de propelente, pós, por exemplo, cápsulas de inalação ou outros sistemas de liberação de "pó seco". Excipientes, tais como, por e- xemplo, propelentes (por exemplo, Frigen no caso de aerossóis medidos), substâncias tensoativas, emulsificantes, estabilizantes, preservativos, aromatizantes, e cargas (por exemplo, lactose no caso de inaladores de pó) podem estar presentes em tais formulações inaladas. Para os propósitos de inalação, um grande número de aparatos é disponível com cujos aerossóis de tamanho de partícula ideal podem ser gerados e administrados, utilizando uma técnica de inalação que é apropriada para o paciente. Além do uso de adaptadores (espaçadores e dilatadores) e recipientes em forma de pêra (por exemplo, Nebulator®, Volumatic®), e dispositivos automáticos emitindo um spray assoprador (Autohaler®), para aerossóis medidos, em particular no caso de inaladores de pó, diversas soluções técnicas são disponíveis (por exemplo, Diskhaler®, Rotadisk®, Turbohaler® ou os inaladores, por exemplo, como descrito no Pedido de Patente Europeu EP 0 505 321).
Para aplicação tópica aos olhos, o fármaco pode ser preparado em uma solução ou suspensão em um veículo aquoso ou não aquoso estéril adequado. Aditivos, por exemplo, tampões tais como metabissulfeto de sódio ou edeato de sódio; preservativos incluindo agentes bactericidas e fungicidas tais como nitrato ou acetato de mercúrio de fenila, cloreto de benzal- cônio ou clorhexidina, e agentes de espessamento tais como hipromelose podem também ser incluídos.
O ingrediente ativo pode também ser parenteralmente administrados em um meio estéril. Dependendo do veículo e concentração utilizados, o fármaco pode ou ser suspenso ou dissolvido no veículo. Vantajosamente, adjuvantes tais como um anestésico local, agente de tamponamento e preservativo podem ser dissolvidos no veículo.
Síntese
Existem múltiplas estratégias sintéticas para a síntese dos compostos (I) com os quais a presente invenção está envolvida, porém todas contam com a química conhecida, conhecida pela química orgânica sintética. Desse modo, os compostos de acordo com a Fórmula (I) podem ser sintetizados de acordo com os procedimentos descritos na literatura padrão e são bem conhecidos por aqueles versados na técnica. Fontes típicas de literature são "Advanced organic chemistry’', 4a Edição (Wiley), J March, "Comprehensive Organic Transformation", 2a Edição (Wiley), R.C. Larock , "Handbook of Heterocyclic Chemistry', 2a Edição (Pergamon), A.R. Katritzky), artigos de revisão tais como encontrados em "Synthesis", "Acc. Chem. Res" , "Chem. Rev", ou fontes de literatura primária identificadas por pesquisas online ou de fontes secundárias tais tal como "Chemical Abstracts" ou "Beilste- in".
Os compostos da invenção podem ser preparados por diversos processos geralmente descritos abaixo e mais especificamente nos Exemplos mais adiante. Nas reações descritas abaixo, pode ser necessário proteger grupos funcionais reativos, por exemplo, grupos hidroxila, amino e car- bóxi, onde estes são desejados no produto final, para evitar sua participação indesejada na reação [veja, por exemplo, Greene, T.W., "Protecting Groups in Organic Synthesis", John Wiley e Sons, 1999]. Grupos de proteção convencionais podem ser utilizados em conjunção com a prática padrão. Em alguns casos a desproteção pode ser a etapa final na síntese de um composto de Fórmula geral (I) e os processos de acordo com a invenção descritos aqui são entendidos estender-se a tal remoção de grupos de proteção.
Exemplos de tais métodos que podem ser empregados para a síntese de compostos de Fórmula geral (I) são estabelecidos, porém não limitados às reações mostradas no Esquema 1. Esquema 1
Figure img0006
Desse modo, os ésteres de amino de Fórmula geral (A) podem ser preparados por tratamento do terc-butilcarbamato de Fórmula geral (2a) com ácido trifluoroacético em diclorometano. Intermediários de Fórmula geral (2) podem ser preparados por métodos descritos em WO 03/076405 e referências a ele. Ésteres de amino de Fórmula geral (2b) podem ser forma-dos como um produto secundário na síntese dos compostos de Fórmula (2a) e tratados com ácido trifluoroacético para fornecer os compostos de Fórmula geral (B).
Ésteres intermediários de Fórmula geral (5) podem ser prepara dos pelos procedimentos mostrados no Esquema 2.
Figure img0007
A hidrogenação do intermediário de nitrobenzila (6) sobre catalisador de paládio-carbono em THF fornece aminas de Fórmula geral (5). Intermediários de Fórmula (6) podem ser preparados pela reação da amina correspondente com di-terc-butoxicarbonato em solvente tal como THF em temperatura ambiente. Intermediários de Fórmula geral (7) podem ser produzidos pela alquilação de ésteres de amino de Fórmula (8) com brometo de 4-nitrobenzila. A reação pode ser realizada em um solvente de dialquilamida tal como DMF na presença de uma base inorgânica tal como carbonato de potássio ou césio. Tais reações são estabelecidas em March’s Advanced Organic Chemistry [John Wiley e Sons, 1992],
Um método geral alternativo para a síntese de ésteres de N- benzilaminoácido de Fórmula geral (9), onde também a funcionalização é requerida no anel arila do substituinte de benzila é estabelecida no Esquema 3.
Figure img0008
Em um outro aspecto da invenção, ésteres de amino de Fórmula geral (9) podem ser preparados por, porém não limitados às, reações estabelecidas no Esquema 3. Desse modo, benzonitrilos de Fórmula geral (11), que são ou comercialmente disponíveis ou podem ser facilmente sintetizados por métodos conhecidos por aqueles versados na técnica, podem ser convertidos no benzaldeído correspondente de Fórmula geral (10) por redução com um hidreto de metal apropriado tal como DIBAL-H e hidrólise ácido da imina intermediário [veja, por exemplo, LeBel J. Am. Chem. Soc., 1964, 86, 3759]. O éster de N-benzilaminoácido de Fórmula geral (9) pode ser preparado por reação com o referido benzaldeído sob condições de alquilação redutiva, empregando reagentes de boroidreto tais como NaBH3CN ou Na- BH(OAC)3 sob condições acídicas em um solvente prótico tal como metanol [veja, por exemplo, Borsch e outro, J.Am. Chem. Soc., 1971, 93, 2897]. Esquema 4
Figure img0009
Em um outro aspecto da invenção, compostos de Fórmula geral (C) podem ser preparados por métodos estabelecidos no Esquema 4, a partir da alquilação de intermediários de Fórmula geral (8) com mesilatos de Fórmula geral (12). A alquilação pode ser realizada em um solvente de éter inerte tal como THF, na presença de iodeto de sódio e bases inorgânicas tais como carbonato de potássio. Será reconhecido por aqueles versados na técnica que os alquilbrometos ou alquicloretos correspondentes serão de utilidade neste processo. A preparação de mesilato (12) pode ser realizada por tratamento do álcool primário (13) com cloreto de metanossulfonila em um solvente inerte tal como diclorometano e na presença de base orgânica tal como trietilamina. Os compostos de Fórmula geral (14) podem ser preparados por métodos descritos em WO 03/076405 e referências a ele.
Em um outro aspecto da invenção os compostos de Fórmula geral (D) podem ser preparados por, porém não limitados às, reações no Esquema 5. Esquema 5
Figure img0010
Desse modo, álcoois de Fórmula geral (14) podem ser alquilados com um derivado de cicloalcanol adequadamente protegido tal como 1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8-ol utilizando trifenilfosfina e um azadicarboxilato de dialquila tal como DEAD em um solvente de etereal inerte [veja, por e- xemplo, Mitsunobu e outro, Buli. Chem. Soc. Jpn., 1967, 40, 2380]. Cetais de Fórmula geral (16) podem ser desprotegidos pela cetona correspondente sob condições acídicas aquosas. Amidação redutiva dos compostos de Fórmula (16) pode ser obtida por tratamento com ésteres de aminoácido de Fórmula geral (8) na presença de reagentes de boroidreto tal como cianobo- roidreto de triacetoxiboroidreto de sódio sob condições acídicas para fornecer compostos de Fórmula geral (D).
Em um aspecto da invenção compostos de Fórmula geral (E) podem ser preparados por, porém não limitados às, reações no Esquema 6.
Figure img0011
Amidação redutiva de os compostos de Fórmula (22) pode ser obtida por tratamento com dibenzilamina na presença de reagentes de bo- roidreto tal como cianoboroidreto de sódio e triacetoxiboroidreto de sódio sob condições acídicas para fornecer compostos de Fórmula geral (21). A hidro- genação de (21) e subseqüente reação com tiofosgênio pode fornecer o iso- cianato de Fórmula geral (20). Compostos de Fórmula geral (19) podem ser preparados por reação de (20) com a acetofenona correspondente utilizando terc-butóxido de sódio. Alquilação de (19) com iodoetano pode ser realizada utilizando uma base inorgânica tal como carbonato de potássio em um solvente tal como acetona. Compostos de Fórmula geral (18) podem ser submetidos à ciclisação, oxidação e em seguida o deslocamento de amónia subseqüente para fornecer cetais de Fórmula geral (17). Desse modo, cetais de Fórmula geral (17) podem ser desprotegidos para o intermediário de ci- cloexano correspondente sob condições acídicas aquosas, o cicloexano em seguida reagido com ésteres de aminoácidos de Fórmula geral (8) sob condições de aminação redutiva empregando reagentes de boroidreto tal como cianoboroidreto de sódio e triacetoxiboroidreto de sódio.
Em outro aspecto da invenção, aminoácidos de Fórmula geral (F) podem ser preparados por, porém não restritos aos métodos estabelecidos no Esquema 7.
Figure img0012
Desse modo, por exemplo, ésteres de aminoácidos de Fórmula geral (C) podem ser hidrolisados aos aminoácidos correspondentes (F) por tratamento com hidróxido de sódio ou potássio aquoso, ou qualquer base 5 apropriada, em temperatura ambiente em um co-solvente tal como metanol ou etanol. Em outro aspecto da invenção, aminoácidos de Fórmula geral (G) podem ser preparados por, porém não restritos aos métodos estabeleci-dos no Esquema 8. 10 Esquema 8
Figure img0013
Desse modo, ésteres de amino de Fórmula geral G podem ser preparados pela alquilação de intermediários de Fórmula geral (8) com mesilates de Fórmula geral (23). A alquilação pode ser realizada em um solvente de éter inerte tal como THF, na presença de iodeto de sódio e bases inorgânicas tais como carbonato de potássio. A preparação de mesilate (23) pode ser realizada por tratamento do álcool primário (24) com cloreto de metanos- sulfonila em um solvente inerte tal como diclorometano e na presença de base orgânica tal como trietilamina. O álcool (24) pode ser preparado por desproteção do grupo acetila de intermediário (25) sob condições acídicas tal como HCI. Intermediários de Fórmula geral (4), (25) e (26) podem ser preparados por métodos similares descritos no WO 03/076405 e referências a ele.
Os seguintes exemplos ilustram a invenção. Todas as temperaturas estão em °C. as seguintes abreviações são utilizadas: MeOH = metanol EtOH = etanol EtOAc = acetato de etila Boc = terc-butoxicarbonila CDI = diimidazol de1,T-carbonila DCM = diclorometano DMF = dimetilformamida DMSO = sulfóxido de dimetila TFA = ácido trifluoroacético THF = tetraidrofurano Na2CO3 = carbonato de sódio HCI = ácido hidroclórico DIPEA = diisopropiletilamina NaH = hidreto de sódio NaOH = hidróxido de sódio NaHCO3 = carbonato de hidrogênio de sódio Pd/C = paládio sobre carbono TME = éter metílico de terc-butila No = nitroaênio Na2SO4 = sulfato de sódio Et3N = trietilamina NH3 = amónia TMSCI = trimetilclorossilano TBME = éter metilico de butila terciária NH4CI = cloreto de amônio LÍAIH4 = hidreto de alumínio litio MgSCU = sulfato de magnésio nBuLi = n-butillitio CO2 = dióxido de carbono EDCI = hidrocloreto de A/-(3-dimetilaminopropil)-/V'-etilcarbodiimida Et2O = éter dietilico LiOH = hidróxido de litio HOBt = 1-hidroxibenzotriazol ELS = Dispersão de Luz Evaporativa TLC = cromatografia de camada líquida ml = mililitro(s) g = grama(s) mg = miligrama(s) mol = moles mmol = milimol(s) LCMS = cromatografia líquida de alta performace/espectrometria de massa RMN = ressonância magnética nuclear RT = temperatura ambiente Irradiação por microondas foi realizada utilizando um reator de microondas focalizado CEM Discover. Os solventes foram removidos utilizando um GeneVac Series I sem aquecimento ou um Genevac Series II com VacRamp a 30 °C ou um evaporador rotatório Buchi. A purificação de compostos por coluna de cromatografia flash foi realizada utilizando sílica gel, tamanho de partícula 40-63 μm (230-400 malhas) obtido de Silicycle. A purificação de compostos por HPLC preparativa foi realizada em sistemas Gil- son utilizando colunas ThermoHypersil-Keystone Hyperprep HS C18 de fase reversa (12 μm, 100 x 21,2 mm), gradiente 20-100% B ( A= água/ 0,1% de TFA, B= acetonitrilo/ 0,1% de TFA) durante 9,5 minutos, fluxo = 30 ml/minuto, solvente de injeção 2:1 DMSO:acetonitrilo (1.6 ml), Detecção de UVa215nm.
Espectros de 1H RMN foram registrados em um espectrômetro Bruker 400 MHz AV ou urn Bruker 300 MHz AV em solventes deuterados. Deslocamentos químicos δ são em partes por milhão. Análise de cromatografia de camada fina (TLC) foi realizada com placas Kieselgel 60 F254 (Merck) e visualizada utilizando luz de UV.
HPLCMS analítica foi realizada em Agilent HP1100, sistemas Waiters 600 ou Waters 1525 LC utilizando colunas Hypersil BDS C18 de fase reversa (5 μm, 2,1 x 50 mm), gradiente 0-95 % B ( A= água/ 0,1% de TFA, B= acetonitrilo/ 0,1% de TFA) durante 2,10 minutos, fluxo =1,0 ml/minuto. Os espectros de UV foram registrados a 215 nm utilizando urn Detector de Grupo Diodo Gilson G1315A, detector de UV de comprimento de onda simples G1214A, detector de UV de comprimento de onda dual War- ters 2487, detector de UV de comprimento de onda dual Waters 2488, ou detector de UV de grupo diodo Waters 2996. Os espectros de massa foram obtidos sobre a faixa de m/z 150 a 850 em uma taxa de amostragem de 2 varreduras por segundo ou 1 varredura por 1,2 segundo utilizando Micromass LOT com interface de spray Z ou Micromass LCT com spray Z ou interface MUX. Os dados foram integrados e reportados utilizando os softwares OpenLynx e OpenLynx Browser. Intermediários Intermediário 1A (S)-2-r(4-aminobenzil)-terc-butoxicarbonilaminol-4- metilpentanoato de ciclopentila
Figure img0014
(S)-2-[terc-butoxicarbonil-(4-nitrobenzil)amino]-4-metilpentanoato de ciclopentila (3,8g, 8,74 mmols) foi dissolvido em EtOH (100 ml) antes da adição de catalisador de Pd/C (10% de umidade) (100 mg) e hidrogenado sob pressão de balão em temperatura ambiente durante 18 horas. A mistura reacional foi filtrada através de uma almofada de Celita e evaporada até secura para fornecer um sólido de cor rosa (3,15g, 89% de produção). 100% de pureza de LCMS, m/z 405 [M+Hf. O material de partida de carbamato de nitrobenzila para este procedimento foi preparado como segue:
Figure img0015
(S)-(4-nitrobenzil)amino]-4-metilpentanoato de ciclopentila (15,8g, 47,4 mmols) foi dissolvido em THF (250 ml) antes da adição de car-bonato de potássio (7,58g, 56,9 mmols) e água (150 ml). Di-terc- butildicarbonato (15,5g, 71,1 mmols) foi adicionado e a mistura reacional aquecida para 50°C durante 18 horas. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida para remover voláteis fornecendo um resíduo aquoso que foi extraído com EtOAc (200 ml). A camada de EtOAc foi lavada conse- cutivamente com HC! a 0,1 M (150 ml), NaHCOs aquoso saturado e água (150 ml). A camada orgânica foi secada (Na2SO4), filtrada e concentrada até secura. Após purificação por cromatografia de coluna flash (10% de EtOAc/ hexano) o produto foi isolado (9,36g, 46% de produção). 94% de pureza de 5 LC, m/z 435 [M+H]+. O material de partida de nitrobenzilamino utilizado neste proce-dimento foi preparado como segue
Figure img0016
Brometo de 4-nitrobenzila (11g, 50 mmols) foi dissolvido em DMF (180 ml) e carbonato de potássio (13,6g, 99 mmols) adicionado, segui- 10 do por éster ciclopentílico de L-leucina (Intermediário 8) (16g, 43 mmols). A reação foi agitada durante 18 horas em temperatura ambiente. O resíduo foi diluído com EtOAc (500 ml) e lavado com água (3x100 ml), secado (Na2SO4) filtrado e concentrado até secura para fornecer o produto cru (15,8g) que foi utilizado na etapa seguinte sem outra purificação. 60% de pureza de LCMS, 15 m/z 335 [M+Hf. Os compostos seguintes foram preparados de uma maneira si-milar: Intermediário 1B (S)-2-r(4-aminobenzil)-terc-butoxicarbonilamino]-3- fenilpropionato de ciclopentila
Figure img0017
75% de pureza de LCMS, m/z 439 [M+H]+. Intermediário 1C (S)-f(4-aminobenzil)-terc-butoxicarbonilaminol- fenilacetato de ciclopentila
Figure img0018
100% de pureza de LCMS, m/z 425 [M+H]+. 5 Intermediário 1D (S)-2-[(4-amino-3,5-difluorobenzil)-terc-butoxicarbo- nilaminol-4-metilpentanoato de ciclopentila
Figure img0019
2(S)-(4-amino-3,5-difluorobenzil)amino]-4-metilpentanoato de ciclopentila (2,54g cru, assumem 5,73 mmols) foi dissolvido em uma mistura de THF (25 ml) e água (25 ml). K2CO3 (5,15g, 37,3 mmols) e BOC2O (8,14g, 10 33,2 mmols) foram adicionados e a agitação em temperatura ambiente con tinuou durante 18 horas. Os voláteis foram removidos sob pressão reduzida e a camada aquosa residual foi extraída com EtOAc (50 ml). A camada orgânica secada (Na2SO4), filtrada e concentrada sob pressão reduzida. Purificação por cromatografia flash (5% de EtOAc/ heptano) fornece o produto 15 protegido por N-Boc (1,0g, 40%). 89% de pureza de LCMS, m/z 441 [M+H]+. O carbamato de benzilamino utilizado como material de partida foi preparado como segue
Figure img0020
A uma solução de 4-amino-3,5-difluorobenzaldeído (0,90g, 5,73 mmols) em 1/1 MeOHZ DMF (16 ml), éster ciclopentilico de L-leucina (Inter-mediário 8) (3,19g, 8,59 mmols) e K2CO3 (1,19g, 8,59 mmols) foram adicio-nados. A mistura reacional foi ajustada para pH 5-6 utilizando ácido acético glacial (gota a gota) e foi agitada durante 1 hora antes da adição de NaCN- BH3 (0,72g, 11,46 mmols). A agitação continuou em temperatura ambiente durante 18 horas. A mistura reacional foi concentrada para remover MeOH, diluída com EtOAc (20 ml), lavada com NaHCOs (5 ml) seguido por água (10 ml). A camada orgânica secada (Na2SO4), filtrada e concentrada a vácuo para fornecer o produto cru (2,54g) que foi reagido na etapa seguinte sem purificação. Pureza de LC = 68%.
O benzaldeído utilizado como material de partida foi preparado como segue;
Figure img0021
A uma solução agitada de 4-amino-3,5-difluorobenzonitrilo (2,0g, 12,98 mmols) em tolueno (16 ml) foi adicionado gota a gota DIBAL (1,5M em tolueno) a 0°C. A mistura reacional foi aquecida para temperatura ambiente e a agitação continuou durante 2 horas. A reação foi saciada por adição gota a gota a 10% de ácido cítrico aquoso (10 ml). EtOAc (50 ml) e tartarato de sódio de potássio aquoso saturado (sal de Rochelle) (30 ml) foram adicionados e a mistura foi vigorosamente agitada durante 20 minutos. A camada orgânica foi isolada e lavada com água (10 ml), secada (Na2SO4), filtrada e concentrada até secura para fornecer um sólido amarelo pálido (1,9g, 93%). 92% de pureza de LCMS, m/z 158 [M+H]+.
Os compostos seguintes foram preparados de uma maneira similar: Intermediário 1E (S)-2-R4-amino-3,5-difluorobenzil)-terc-butoxicar- bonilaminol-3-fenilpropionato de ciclopentila
Figure img0022
86% de pureza de LCMS, m/z 475 [M+H]+. Intermediário 1F(S)-2-R4-amino-3,5-difluorobenzil)-terc- butoxicarbonilaminol-fenilacetato de ciclopentila
Figure img0023
86% de pureza de LCMS, m/z 461 [M+H]+.
Intermediário 2A (S)-rterc-butoxicarbonil-(-4fí3-(4-fluoro fenil)-3- oxopropionimidoillaminobenziDaminofenilacetato de ciclopentila
Figure img0024
Uma mistura de éster de 4-clorofenila de ácido 3-(4-fluorofenil)- 3-oxotiopropionimídico [WO 03/076405] (300 mg, 0,874 mmol), Intermediá rio 1C (0,41 g, 0,961 mmol) e ácido acético glacial (3 ml) foi agitada a 80 °C durante 2 horas. A mistura reacional foi evaporada até secura sob pressão reduzida para fornecer um resíduo grosso que foi triturado com éter (3 ml). O sólido resultante foi coletado por filtração de sucção. O produto foi neutralizado dividindo-se entre EtOAc (20 ml) e NaHCOs aquoso saturado (10 ml). A camada orgânica foi secada (Na2SO4), filtrada e concentrada a vácuo. Produção =305 mg (59%). Pureza de LCMS= 75%, m/z 588 [M+Hf. O produto foi utilizado na etapa seguinte sem outra purificação.
Os materiais de partida seguintes foram preparados de uma ma-neira análoga:
Intermediário 2B (S)-2-rterc-butoxicarbonil-(4-{r3-(4-fluoro fenil)-3- oxopropionimidoillamino}benzil)amino]-3-fenilpropionato de ciclopenti- la
Figure img0025
De Intermediário 1B, 76% de pureza de LCMS, m/z 602 [M+Hf.
Intermediário 2C (S)-2-rterc-butoxicarbonil-(4-{[3-(4-fluoro fenil)-3- oxopropionimidoillamino}benzil)amino]-4-metilpentanoato de ciclopen- tila
Figure img0026
De Intermediário 1A, 55% de pureza de LCMS, m/z 568 [M+Hf.
Intermediário 2D (S)-rterc-butoxicarbonil-(-4-r3-(2,4-fluorofenil) -3- oxopropionimidoillaminobenziDaminofenilacetato de ciclopentila
Figure img0027
De Intermediário 1C, 76% de pureza de LCMS, m/z 606 [M+H]+.
Intermediário 2E (S)-2-rterc-butoxicarbonil-(4-{[3-(2,4-difluoro fenil)-3- oxopropionimidoillamino}benzil)amino]-3-fenilpropionato de ciclopenti- la
Figure img0028
5 De Intermediário 1B, 78% de pureza de LCMS, m/z 620 [M+Hf.
Intermediário 2F (S)-2-rterc-butoxicarbonil-(4-{í3-(2,4-difluoro fenil)-3- oxopropionimidoillamino}benzil)aminol-4-metilpentanoato de ciclopen- tila
Figure img0029
De Intermediário 1A, 76% de pureza de LCMS, m/z 586 [M+Hf. 10 Intermediário 2G (S)-rterc-butoxicarbonil-(-4-r3-(3-metil-4-fluorofenil)-3- oxopropionimidoillaminobenziDaminofenilacetato de ciclopentila
Figure img0030
De Intermediário 1C, 77% de pureza de LCMS, m/z 602 [M+H]+. Intermediário 2 horas (S)-2-rterc-butoxicarbonil-(4-(r3-(3-metil-4- fluorofenil)-3-oxopropionimidoil1amino}benzil)aminol-3-feniipropionato de ciclopentila
Figure img0031
5 De Intermediário 1B, 77% de pureza de LCMS, m/z 616 [M+H]+. Intermediário 2I (S)-2-rterc-butoxicarbonil-(4-([3-(3-metil-4-fluorofenil)-3- oxopropionimidoillamino}benzil)amino]-4-metilpentanoato de ciclopen- tila
Figure img0032
De Intermediário 1A, 77% de pureza de LCMS, m/z 582 [M+H]+. 10 Intermediário 2J(S)-rterc-butoxicarbonil-(3,5-difluoro-4-{[3-(4- fluorofenil)-3-oxo-propionimidoillamino}benzil)aminolfenilacetato de ciclopentila
Figure img0033
De Intermediário 1F, % de pureza de LCMS, m/z 624[M+H]+. Intermediário 2K (S)-2-fterc-butoxicarbonil-(3,5-difluoro-4-{[3-(4-fluoro- fenil)-3-oxopropionimidoiriamino}benzil)aminol-4-metilpentanoato de ciclopentila
Figure img0034
5 De Intermediário 1D, % de pureza de LCMS, m/z 604 [M+H]+. Intermediário 2L (S)-2-rterc-butoxicarbonil-(3,5-difluoro-4-{i3-(4-fluoro- fenil)-3-oxo-propionimidoillamino}benzil)-aminol-3-fenilpropionato de ciclopentila
Figure img0035
De Intermediário 1E, 100% de pureza de LCMS, m/z 638 [M+Hf. 10 Intermediário 2M (S)-2-rterc-butoxicarbonil-(3,5-difluoro-4-(F3-(2,4- difluorofenil)-3-oxopropionimidoil]amino}benzil)aminol-4- metilpentanoato de ciclopentila
Figure img0036
De Intermediário 1D, 86% de pureza de LCMS, m/z 622 [M+H]+. Intermediário 3A (S)-({4-f6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridinil- 1 -illbenzil}-terc-butoxicarbonilamino)fenilacetato de ciclopentila
Figure img0037
A uma solução de Intermediário 2A (305 mg, 0,52 mmol) em 5 MeOH (5 ml) foi adicionado propiolato de metila (70μl, 0,78 mmol). A mistura foi aquecida a 80 °C durante 3 horas. A mistura reacional foi concentrada a vácuo e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (30% de EtOAc/ heptano). Produção= 200 mg (60%). 80% de pureza de LCMS, m/z 640 [M+H]+. 10 Os compostos seguintes foram produzidos de um modo similar: Intermediário 3B (S)-({4-f6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H- piridinil-1 -il]benzil}-terc-butoxicarbonilamino)fenilacetato de ciclopenti- la
Figure img0038
De Intermediário 2D, 71% de pureza de LCMS, m/z 658 [M+H]+. 15 Intermediário 3C (S)-({4-F6-amino-5-(3-metil-4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H- piridinil-1 -il]benzil}-terc-butoxicarbonilamino)fenilacetato de ciclopenti- la
Figure img0039
De Intermediário 2G, 73% de pureza de LCMS, m/z 654 [M+H]+. Intermediário 3D (S)-2-({4-r6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin- 1 -illbenzil}-terc-butoxicarbonilamino)-3-fenilpropionato de ciclopentila
Figure img0040
5 De Intermediário 2B, 64% de pureza de LCMS, m/z 654 [M+Hf. Intermediário 3E (S)-2-({4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H- piridin-1 -ill-benzil}-terc-butoxicarbonilamino)-3-fenilpropionato de ci-clopentila
Figure img0041
De Intermediário 2E, 59% de pureza de LCMS, m/z 672 [M+H]+. 10 Intermediário 3F (S)-2-({4-r6-amino-5-(3-metil-4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H- piridin-1 -ill-benzil}-terc-butoxicarbonilamino)-3-fenilpropionato de ci-clopentila
Figure img0042
De Intermediário 2 horas, 87% de pureza de LCMS, m/z 668 [M+Hf. Intermediário 3G (S)-2-({4-[6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin- 1 -il1benzil)-terc-butoxicarbonilamino)-4-metilpentanoato de ciclopentila
Figure img0043
De Intermediário 2C, 82% de pureza de LCMS, m/z 620 [M+Hf. 5 Intermediário 3I (S)-2-((4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H- piridin-1 -illbenzil}-terc-butoxicarbonilamino)-4-metilpentanoato de ciclopentila
Figure img0044
De Intermediário 2F, 84% de pureza de LCMS, m/z 638 [M+Hf. Intermediário 3J (S)-2-({4-[6-amino-5-(3-metil-4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H- 10 piridin-1 -il]benzil}-terc-butoxicarbonilamino)-4-metilpentanoato de ci-clopentila
Figure img0045
De Intermediário 21, 90% de pureza de LCMS, m/z 634 [M+H]+. Intermediário 3K (S)-2-({4-r6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin- 1-ill-3,5-difluorobenzil}-terc-butoxicarbonilamino)-3-fenilpropionato de ciclopentila
Figure img0046
5 De Intermediário 2L, 92% de pureza de LCMS, m/z 690 [M+Hf. Intermediário 3L (S)-2-({4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H- piridin-1-ill-3,5-difluorobenzil}-terc-butoxicarbonilamino)-4- metilpentanoato de ciclopentila
Figure img0047
De Intermediário 2M, 92% de pureza de LCMS, m/z 674 [M+Hf. 10 Intermediário 4A éster 3-{4-r6-amino-5-(4-fluoro-3-metil-benzoil)-2-oxo- 2H-piridin-1-illfenóxi}propílico de ácido metanossulfônico
Figure img0048
A uma suspensão de 6-amino-5-(4-fluoro-3-metil-benzoil)-1-[4- (3-hidróxi-propóxi)-fenil]-1 H-piridin-2-ona (100 mg, 0,25 mmol) em DCM ani- droso (1 ml) a 0 °C foi adicionado cloreto de metanossulfonila (21,5 μl, 0,28 mmol) seguido por Et3N (70 μl, 0,50 mmol). A mistura reacional foi deixada aquecer até temperatura ambiente e agitada durante 10-20 minutos para conclusão, monitorada por TLC (5% de MeOH/ DCM). A mistura reacional foi diluída com DCM (10 ml), lavada com 10% de ácido cítrico (5 ml), seguido por NaHCO3 aquoso saturado (5 ml) e água (5 ml). A camada de DCM foi secada (Na2SO4), filtrada e concentrada a vácuo. Rendimento = 105 mg (88%). Pureza de LCMS = 79% m/z= 475 [M+Hf. Este material foi utilizado na etapa seguinte sem outra purificação. O álcool utilizado como material de partida foi preparado como segue: O 6-amino-5-(4-fluoro-3-metil-benzoil)-1-[4-(3-hidróxi-propóxi)- fenil]-1 H-piridin-2-ona foi preparado como mostra abaixo. Uma mistura de 6-amino-5-(4-fluoro-3-metil-benzoil)-1-[4-hidróxi- fenil]-1 H-piridin-2-ona [WO 03/076405] (0,80g, 2,37 mmols), 3-bromo-1- propanol (0,23 ml, 2,60 mmols), K2CO3 (1,37g, 9,46 mmols), Nal (0,73g, 4,86 mmols) em acetona (20 ml) foi aquecida a 70 °C durante 18 horas sob N2. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida, suspensa em água (20 ml) e o sólido resultante foi filtrado e lavado com éter (0,5 ml). Produ- ção= 0,8g (85%). Pureza de LCMS= 96%, m/z 397 [M+Hf Os intermediários de metanossulfonato seguintes foram prepa-rados de uma maneira similar ao Intermediário 4A utilizando métodos des-critos em WO 03/076405 para a síntese dos intermediários de 4- hidroxifenila. Intermediário 4B éster 3-{4-r6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H- piridin-1-il]fenóxi}propílico de ácido metanossulfônico
Figure img0049
66% de pureza de LCMS, m/z 461 [M+Hf. Intermediário 4C éster 3-{4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H- piridin-1-illfenóxi}propílico de ácido metanossulfônico
Figure img0050
88% de pureza de LCMS, m/z 479 [M+Hf. Intermediário 4D éster 3-{4-r6-amino-5-(4-fluoro-3-metil-benzoil)-2-oxo- 5 2H-piridin-1-il]-3,5-difluorofenóxi}propilico de ácido metanossulfônico
Figure img0051
51% de pureza de LCMS, m/z 511 [M+H]+. Intermediário 4E éster 3-{4-rβ-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H- piridin-1-il]-3,5-difluorofenóxi}-propilico de ácido metanossulfônico
Figure img0052
72% de pureza de LCMS, m/z 497 [M+Hf. 10 Intermediário 4F éster 3-{4-F6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H- piridin-1-ill-3,5-difluorofenóxi}propílico de ácido metanossulfônico
Figure img0053
81% de pureza de LCMS, m/z 515 [M+Hf. Os seguintes intermediários foram preparados por alquilação direta dos intermediários de 4-hidroxifenila (descrito dentro de 15 W003/076405) com 1-bromo-5-cloropentano. Intermediário 4G 6-amino-1 -{4-r(5-cloropentil)óxi]-2,6-difluorofenil}-5-
Figure img0054
A uma solução de 6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-1-(2,6-difluoro- 4-hidroxifenil)-piridin-2(1H)-ona (300 mg, 0,79 mmol) em acetona (6 ml) sob uma atmosfera de nitrogênio foram adicionados 1-bromo-5-cloropentano (0,115 ml, 0,87 mmol, 1,1 eq), iodeto de sódio (238 mg, 1,59 mmol, 2 eq) e carbonato de potássio (438 mg, 3,17 mmols, 4 eq). A mistura foi aquecida a 70°C durante 16 horas, antes de ser deixada resfriar para temperatura ambiente e dividida entre EtOAc (50 ml) e água (50 ml). A camada orgânica foi secada sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. Purificação por cromatografia de coluna (30 % de EtOAc em heptano) forneceu uma mistura de 3:2 do composto título e 6-amino-1-{4-[(5-iodopentil)óxi]-2,6- difluorofenil}-5-(2,4-difluorobenzoil)piridin-2(1/-/)-ona (142 mg) que foi utilizado sem outra purificação. LC/MS: m/z 483, 575 [M+H]+. Intermediário 4H 6-amino-1 -{4-f(5-cloropentil)óxi]-2,6-difluorofenil}-5-(4- fluoro-benzoil)piridin-2(1 H)-ona
Figure img0055
A uma solução de 6-amino-5-(2,4-fluorobenzoil)-1-(2,6-difluoro- 4-hidroxifenil)-piridin-2(1/-/)-ona (200 mg, 0,56 mmol) em DMF anidroso (6 ml) sob uma atmosfera de nitrogênio foi adicionado 1 -bromo-5-cloropentano (0,088 ml, 0,67 mmol, 1,2 eq) e carbonato de potássio (115 mg, 0,83 mmol, 1,5 eq). A mistura foi aquecida a 40°C durante 19 horas, antes de ser deixada resfriar para temperatura ambiente e diluída com EtOAc (20 ml). A solução foi lavada com água (3 x 20 ml) e salmoura (20 ml). A camada orgânica foi secada sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. Purificação por cromatografia de coluna (20-40 % de EtOAc em heptano) forneceu o composto título como um sólido amarelo (104 mg) que foi utilizado sem outra purificação. LC/MS: m/z 465 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CD3OD) δ: 7,60 (2 H, m), 7,53 (1H, d, J=9,4 Hz), 7,33 (2 H, m), 7,05 (2 H, m), 5,72 (1H, d, J=9,8 Hz), 4,11 (2 H, t, J=6,3 Hz), 3,68 (2 H, t, J=6,5 Hz), 1,84-1,77 (4H, m), 1,56 (2 H, m). Intermediário 4J éster 2-{4-r6-amino-5-(4-fluoro-benzoil)-2-oxo-2H- piridin-1-il]-fenil}-etilico de ácido metanossulfônico
Figure img0056
A uma suspensão de 6-amino-5-(4-fluoro-3-metil-benzoil)-1-[4- (2-hidróxi-etil)-fenil]-1 H-piridin-2-ona (150 mg, 0,43 mmol) em DCM anidroso (3 ml) a 0 °C foi adicionado cloreto de metanossulfonila (34μl, 0,47 mmol) seguido por Et3N (120μl, 0,85 mmol). A mistura reacional foi deixada aquecer até temperatura ambiente e agitada durante 24 horas para conclusão. A mistura reacional foi diluída com DCM (10 ml), lavada com 10% de ácido cítrico (5 ml), seguido por NaHCOs aquoso saturado (5 ml) e água (5 ml). A camada de DCM foi secada ( mgSO4), filtrada e concentrada a vácuo. Pro- dução= 183 mg (cru). Pureza de LCMS = 85% m/z= 431 [M+Hf. Este material foi utilizado na etapa seguinte sem outra purificação. O álcool utilizado como material de partida foi preparado como segue: Éster 2-{4-[6-amino-5-(4-fluoro-benzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]- fenilj-etílico de ácido acético (300 mg) foi dissolvido em água (5 ml) e HCI concentrado (5 ml) e aquecido para 100 °C durante 1 hora. A reação foi em seguida resfriada, diluída com 10 ml de água e filtrada. O sólido resultante foi em seguida secado sob pressão reduzida para fornecer 264 mg de produto, m/z= 353 [M+Hf. O éster 2-{4-[6-amino-5-(4-fluoro-benzoil)-2-oxo-2H-piridin-1 -il]- fenilj-etílico de ácido acético utilizado como material de partida foi preparado como segue: Uma solução de ácido propiônico (270 μl, 4,39 mmols) e CDI (712 mg, 4,34 mmols) em THF (13 ml) foi aquecida de 0°C para temperatura ambiente e agitada durante 1,5 hora. A esta solução foi adicionado éster 2- (4-{[3-(4-fluoro-fenil)-3-oxo-propionimidoil]-amino}-fenil)-etílico de ácido acé- tico (1g, 2,92 mmois) em THF (6 ml) e a reação aquecida para 80 °C durante um periodo de 2 horas máximas. Após resfriamento e evaporação sob pressão reduzida, o resíduo cru foi sonicado com metanol (7 ml) antes da filtração, lavando com uma quantia mínima de metanol. Um sólido não totalmente branco foi coletado (350 mg cru). O éster 2-(4-{[3-(4-fluoro-fenil)-3-oxo-propionimidoil]-amino}- fenil)-etílico de ácido acético utilizado como material de partida foi preparado como segue: Éster 4-cloro-fenílico de ácido 3-(4-fluoro-fenil)-3-oxo- tiopropionimídico (1g, 2,9 mmols) e álcool 4-aminofenetílico (418 mg, 3,08 mmols) foram dissolvidos em ácido acético (5 ml) e aquecidos para 80 °C durante um período de 24 horas. A reação foi resfriada para temperatura ambiente e evaporada sob pressão reduzida. O resíduo cru foi dividido entre DCM e Na2COs. A camada de DCM foi também lavada com salmoura e secada sobre MgSO4 antes da evaporação sob pressão reduzida. O produto foi isolado (1g cru) como uma mistura de 3:1 do produto acetilado: álcool. Este foi empregado não purificado na reação de ciclisação acima. Produto m/z= 343 [M+H]+, álcool m/z= 301 [M+H]+. Intermediário 5 6-amino-1-f2,6-difluoro-4-(4-oxo-cicloexilóxi)fenill-5-(4- fluorobenzoilM H-piridin-2-ona
Figure img0057
A uma solução de 6-amino-1-[4-(1,4-dioxa-espiro[4,5]dec-8- ilóxi)-2,6-difluoro-fenil]-5-(4-fluorobenzoil)-1 H-piridin-2-ona (0,55g, 1,10 mmol) em 1,4-dioxano (10 ml) foram adicionados HCI aquoso a 2M (5 ml) em temperatura ambiente. A agitação continuou durante 18 horas. Na conclusão da reação, a mistura reacional foi diluída com água (10 ml) antes da evaporação de dioxano sob pressão reduzida. A solução aquosa residual foi extraída com EtOAc (2x10 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secadas (Na2SO4), filtradas e concentradas até secura sob pressão reduzida para fornecer a cetona desejada como um sólido branco (0,43g, 86%). 98% de pureza de LCMS, m/z 457 [M+H]+,1H RMN (400 MHz, CDCI3), δ: 2,05- 2,15 (2 H, m), 2,25-2,45 (4H, m), 2,55-2,70 (2 H, m), 4,65-4,75 (1H, m), 5,85 (1H, d), 6,70-6,75 (2 H, m), 7,05-7,15 (2 H, m), 7,50-7,65 (3H, m), O cetal utilizado como material de partida foi preparado como segue:
Figure img0058
A uma solução agitada de 1,4-dioxa-espiro[4,5]decan-8-ol (0,5g, 1,45 mmol) em THF (1,5 ml) foi adicionado 6-amino-1-(2,6-difluoro-4- hidroxifenil)-5-(4-fluoro-benzoil)-1H-piridin-2-ona (preparado pelos métodos descritos em WO 03/076405) (0,5g, 1,39 mmol) e trifenilfosfina (0,38g, 1,45 mmol) em temperatura ambiente. Azodicarboxilato de diisopropila (0,29 ml, 1,45 mmol) foi adicionado gota a gota e a agitação continuou durante 18 horas. A mistura reacional foi evaporada até secura e purificada por cromatografia de coluna para fornecer o material desejado como um sólido branco (0,55g, 79%). 99% de pureza de LCMS, m/z 501 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, CDCI3), δ: 1,55-1,65 (2 H, m), 1,75-2,00 (6H, m), 3,85-3,90 (4H, m,), 4,35- 4,40 (1H, m), 5,85 (1H, d), 6,10-6,20 (2 H, m), 7,05-7,15 (2 H, m), 7,45-7,60 (3H, m). Intermediário 6 6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-1-(4-oxo-cicloexil)-1H-piridin -2-ona
Figure img0059
HCI a 2M (14 ml) foram adicionados a uma solução amarela de 6-amino-1 -(1,4-dioxa-espiro[4,5]dec-8-il)-5-(4-fluorobenzoil)-1 H-piridin-2-ona (664 mg, 1,78 mmol) em 1,4-dioxano (60 ml) em temperatura ambiente. A solução amarela resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 24 horas e em seauida diluída com HoO (30 mh e concentrada a vácuo oara ** •- , remover o 1,4-dioxano fornecendo um sólido cristalino amarelo. O sólido foi isolado por filtração, lavado com H2O e secado a ar fornecendo um sólido cristalino amarelo. Produção = 479 mg, 82%. 92% de pureza de LCMS, m/z 329 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, CDCI3), δ: 1,90-2,30 (8H, m), 5,35 (1H, m), 5,65 (1H, d), 7,05-7,15 (2 H, m), 7,30 (1H, d), 7,35-7,45 (2 H, m), 11,45 (1H, s). O acetal de piridona utilizado como material de partida no proce-dimento acima foi preparado como segue o
Figure img0060
Trietilamina foi adicionado (0,74 ml, 5,31 mmols) a uma solução de 1-(1,4-dioxa-espiro[4,5]dec-8-il)-6-etanossulfinil-5-(4-fluorobenzoil)-1 H- piridin-2-ona (1,046 g, 2,42 mmols) em NH3 a 0,5M em 1,4-dioxano (30 ml) em temperatura ambiente sob N2. A solução amarela resultante foi agitada em temperatura ambiente durante a noite e em seguida concentrada a vácuo fornecendo um sólido amarelo, que foi triturado com TBME, isolado por fil-tração e lavado com TBME fornecendo um sólido amarelo pálido. Produção = 802 mg, 89%. 100% de pureza de LCMS, m/z 373 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, CDCI3), δ:1,90-2,00 (6H, m), 2,60 (2 H, m), 4,15 (4H, m), 5,90 (1H, d), 3,25 (2 H, m), 7,55 (1H, d), 7,65 (2 H, m). O sulfóxido utilizado no procedimento acima foi preparado como Segue
Figure img0061
Ácido m-cloroperbenzóico (583 mg, 2,60 mmols) foi adicionado em uma porção a uma solução amarela de 1-(1,4-dioxaespiro[4,5]dec-8-il)-6- etilsulfanil-5-(4-fluorobenzoil)-1H-piridin-2-ona (986 mg, 2,36 mmols) em CH2CI2 (30 ml) em temperatura ambiente sob N2. A solução amarela resul- 5 tante foi agitada em temperatura ambiente durante a noite e em seguida diluída com CH2CI2 (25 ml) e lavada com Na2SO3 saturado (2 x 30 ml), NaHCOa saturado (2 x 30 ml), H2O (30 ml), secada (Na2SO4), filtrada e concentrada a vácuo fornecendo um óleo amarelo claro. Produção = 1,046g, 102%. 96% de pureza de LCMS, m/z 434 [M+H]+. 10 O sulfeto utilizado no procedimento acima foi preparado como Segue
Figure img0062
1-cloro-N,N-2-trimetilpropenilamina (2,03 ml, 15,34 mmols) foi adicionado a uma solução incolor de ácido propiônico (0,94 ml, 15,34 mmols) em THF anidroso (50 ml) a 0°C sob N2. A solução incolor resultante 15 foi agitada a 0°C durante 2 horas tempo após o qual uma solução amarela do ácido N-(1,4-dioxa-espiro[4,5]dec-8-il)-3-(4-fluorofenil)-3-oxo- tiopropionimídico (4,667g, 12,79 mmols) em THF anidroso (50 ml) foi adicionada durante 5 minutos a 0°C. A solução amarela resultante foi em seguida deixada aquecer para temperatura ambiente e agitada durante 24 horas. A mistura reacional foi concentrada a vácuo fornecendo um óleo marrom escuro, que foi diluído com EtOAc (20 ml) e deixado repousar em temperatura ambiente durante a noite fornecendo um sólido cristalino que foi isolado por filtração e lavado com heptano e TBME. Produção = 216 mg. O filtrado foi concentrado a vácuo fornecendo um sólido marrom que foi dissolvido em CH2CI2 (100 ml) e lavado com Na∑CC^ saturado (3 x 100 ml), H2O (2 x 100 ml), secado (Na2SC>4), filtrado e concentrado a vácuo fornecendo um óleo marrom. Purificação por cromatografia de coluna flash (sílica, 100% de CH2CI2 a 30% de EtOAc/CF^Cfe) fornece 0 produto ciclizado após trituração com TBME. Produção = 770 mg. Produção total = 986 mg, 19%. 100% de pureza de LCMS, m/z 418 [M+H]+. O ácido tiopropionimídico utilizado no procedimento acima foi preparado como segue:
Figure img0063
K2CO3 (16,1g, 117 mmols) foi adicionado a uma solução de N- (1,4-dioxaespiro[4,5]dec-8-il)-3-(4-fluorofenil)-3-oxo-tiopropionamida (18,8g, 55,7 mmols) em acetona (200 ml) em temperatura ambiente/N2 seguido pelo iodeto de etila (6,68 ml, 83,6 mmols). A mistura reacional foi agitada em tem-peratura ambiente/N2 durante 2 horas e em seguida concentrada a vácuo fornecendo uma pasta marrom que foi tomada em EtOAc (300 ml) e lavada com H2O (250 ml). A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 150 ml). As fases orgânicas combinadas foram secadas (Na2SO4), filtradas e concentradas a vácuo fornecendo um óleo marrom. Purificação por cromatografia de coluna flash (sílica, 15% de EtOAc/Heptano) fornece um óleo amarelo. Produção = 9,94g, 49%. 94% de pureza de LCMS, m/z 366 [M+H]+. A tiopropionamida utilizada no processo acima foi preparada como seαue:
Figure img0064
Uma solução de 4-fluoroacetofenona (6,76 ml, 55,7 mmols) em THF (50 ml) foi adicionada lentamente durante 5 minutos a uma suspensão agitada de KO*Bu (6,56g, 58,5 mmols) em THF (40 ml) a 0°C. Uma solução de 8-isotiocianato-1,4-dioxaespiro[4,5]decano (11,1g, 55,7 mmols) em THF (30 ml) foi adicionada a 0°C durante 5 minutos e a mistura resultante foi agi-tada a 0°C durante 90 minutos. A mistura reacional foi evaporada até secura fornecendo um sólido marrom escuro que foi utilizado cru na etapa seguinte. Produção = 18,8g, 100%. LCMS 55% de pureza, m/z 338 [M+H]+. O isotiocianato utilizado no procedimento acima foi preparado como segue
Figure img0065
Carbonato de cálcio (13,75g, 137,4 mmols) foi adicionado a uma solução de 1,4-dioxaespiro[4,5]dec-8-ilamina (13,5g, 85,9 mmols) em CH2CI2 (675 ml) e H2O (330 ml) com agitação vigorosa em temperatura ambiente. O tiosfogênio (8,5 ml, 111,6 mmols) foi adicionado gota a gota durante 5 minutos, e sob adição completa, a mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura reacional foi diluída com H2O (600 ml) e extraída em CH2CI2 (300 ml). A fase orgânica foi secada (Na2SO4), filtrada e concentrada a vácuo fornecendo 0 produto. Produção = 8,5g, 50%. 47% de pureza de LCMS, m/z 200 [M+H]+. A cicloexilamina utilizada no processo acima foi preparada como
Figure img0066
10% de Pd(OH)2/C (1g) foi adicionado a uma suspensão fina de N,N-dibenzil-N-1,4-dioxaespiro[4,5]dec-8-ilamina (21,13g, 62,7 mmols) em EtOH (400 ml) em temperatura ambiente. A mistura resultante foi evacuada e purgada três vezes com H2 e em seguida mantida sob uma atmosfera de H2 (balão) durante a noite. A mistura reacional foi evacuada e purgada três vezes com N2 e em seguida o catalisador foi removido por filtração. O filtrado foi concentrado a vácuo fornecendo a amina como um óleo incolor. Produ-ção = 14,34g, 99%. 100% de pureza de LC-MS (detecção de ELS), m/z 158 [M+H]+. A dibenzilamina utilizada no processo acima foi preparada como segue:
Figure img0067
Dibenzilamina (27,8 ml, 145 mmols) foi adicionado a uma solu ção de 1,4-dioxaespiro[4,5]decan-8-ona (21,5g, 138 mmols) em DCE (350 ml) em temperatura ambiente sob N2 e agitado durante 1 hora. Triacetoxibo- roidreto de sódio (46,7g, 220 mmols) foi adicionado em porções durante 10 minutos e sob adição completa, a reação foi agitada em temperatura ambi-ente/^ durante a noite. NaHCOs saturado (300 ml) foi adicionado seguido por DCM (300 ml) e a mistura reacional foi agitada durante 30 minutos. A fase orgânica foi separada e lavada com NaHCOa (300 ml), salmoura (300 ml), secada (Na2SO4), filtrada e concentrada a vácuo fornecendo um óleo que sob trituração com heptano fornece um banho branco que foi isolado por filtração. Produção = 30,95g, 67%. 100% de pureza de LCMS, m/z 338 [M+H]+. Intermediário 7 (S)-2-(terc-butoxicarbonil-{3,5-difluoro-4-r3-(4-fluoro- benzoil)-6-oxo-1,6-diidropiridin-2-ilamino]benzil}amino)-3- fenilpropionato de ciclopentila
Figure img0068
A piridona foi formada como um produto secundário do procedi- 5 mento descrito para a síntese de Intermediário 3K. LCMS 80% de pureza, m/z 690 [M+H]+. Preparação de ésteres de aminoácido (intermediários 8 a 16)
Figure img0069
Intermediários preparados:
Figure img0070
Síntese dos compostos delineados na Figura 1 Rotina I (exemplificada para Intermediário 9) Etapa 1- Formação de éster
Figure img0071
A uma solução de ácido (S)-2-terc-butoxicarbonilamino-3- cicloexil-propiônico (5g, 19,4 mmols) em DMF (50 ml) a 0°C foi adicionado ciclopentanol (8,8 ml, 97,15 mmols), EDCI (4,09g, 21,37 mmols) e finalmente DMAP (237 mg, 1,94 mmol). A mistura reacional foi aquecida para tempera-tura ambiente e agitada durante 18 horas. O DMF foi removido a vácuo para fornecer um óleo claro. Este foi separado entre água e EtOAc. A fase orgâ-nica foi secada ( mgSO4) e concentrada a vácuo. O extrato cru foi purificado por cromatografia de coluna (25% de EtOAc em heptano) para produzir o produto desejado como um óleo claro (14,87g, 55%) 1H RMN (300 MHz, de- DMSO) δ; 7,09 (1H, d), 5,08 (1H, t), 3,76 (1H, t), 1,50-1,85 (10H, br m), 1,39 (9H, s), 1,00-1,25 (9H, br m). Etapa 2 - desproteção de Boc para produzir hidrocloreto de (2S)- amino(cicloexil)acetato de ciclopentila (Intermediário 9)
Figure img0072
Etapa 1 produto (14,87g, 45,69 mmols) foi dissolvido em DCM (100 ml) e tratado com HCI/dioxano a 4M (22,8 ml, 91,38 mmols) e a mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante 24 horas. A mistura crua foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um óleo laranja. Este foi triturado com Et2O para fornecer um precipitado branco. Este foi também lavado com Et2O para fornecer o produto desejado como um pó branco (7,78g, 65%) 1H RMN (300MHz, d6-DMSO) δ; 8,45 (3H, br s), 5,22 (1H, t), 3,28 (1H, d), 1,95-1,50 (10H, br m), 1,30-0,90 (9H, br m). Rotina II (exemplificada para Intermediário 10) Etapa 1 - Formação de éster para produzir (1S)-2-(ciclopentilóxi)-2-oxo-1- feniletanamínio de 4-metilbenzenossulfonato (Intermediário 10)
Figure img0073
A uma suspensão de (S)-fenilglicina (5g, 33,1 mmols) em cicloe- xano (150 ml) foi adicionado ciclopentanol (29,84 ml, 331 mmols) e ácido p- toluenossulfônico (6,92g, 36,4 mmols). A reação foi equipada com um receptor Dean-Stark e aquecida para 135°C para dissolução completa. Após 12 horas, a reação foi resfriada para temperatura ambiente induzindo à precipitação de um sólido branco. O sólido foi filtrado e lavado com EtOAc antes da secagem sob pressão reduzida para fornecer o produto requerido como um pó branco (11,01g, 85%) 1H RMN (300MHz, cfe-DMSO) δ; 8,82 (2 H, br s), 8,73 (1H, brs), 7,47 (7H, m), 7,11 (2 H, d), 5,25 (1H, brs), 5,18 (1H, m), 2,29 (3H, s), 1,87-1,36 (8H, m).
Intermediários 11 e 12 foram preparados utilizando 2-indanol e a-norborneol respectivamente, em vez de ciclopentanol (por meio da Rotina II). De uma maneira similar, intermediários 13 e 14 foram preparados utilizando dimetilaminoetanol e 4-(2-hidroxietil)-morfolina respectivamente (por meio da Rotina I). Intermediário 15 foi preparado por meio da rotina I utilizando ácido Z-Dab(Boc)-OH (N-a-Z-N-Y-Boc-L-2,4-diaminobutírico comercialmente disponível).
Os ésteres de (R)-aminoácido correspondentes dos intermediários acima podem ser preparados de uma maneira similar à amostra acima, partindo dos (R)-aminoácidos comercialmente disponíveis relevantes. Além disso, os ésteres terc-butílicos de Leucina e Fenilglicina correspondentes são comercialmente disponíveis e são utilizados diretamente onde apropriados. Exemplos Exemplo 1 (S)-{4-r6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1 - illbenzilamino} fenilacetato de ciclopentila
Figure img0074
Uma mistura de Intermediário 3A (80 mg, 0,125 mmol) em 20% de solução de TFA/DCM (5 ml) foi deixada agitar em temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura reacional foi evaporada até secura e purificada por HPLC preparativa para fornecer o produto desejado, produção = 33 mg (40%), pureza de LCMS= 100% m/z 540 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, DM- SO), δ: 1,21-1,82 (8H, m), 4,01-4,14 (2 H, m), 5,11-5,21 (2 H, m), 5,64 (1H, d), 3,21-7,54 (13H, m), 7,62 (1H, d), 10,16(2 H, brs).
Os exemplos seguintes foram preparados de uma maneira similar ao Exemplo 1. Exemplo 2 (S)-2-{4-F6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1 - il]benzilamino}-3-fenilpropionato de ciclopentila
Figure img0075
Do Intermediário 3D. 100% de pureza de LCMS, m/z 554 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, DMSO), δ: 1,22-1,83 (8H, m), 3,10 (1H, m), 4,45 (3H, m), 5,19 (1H, m), 5,85 (1H, d), 7,35-7,74 (14H, m), 7,82 (1H, br s), 9,96 (1H, brs). Exemplo 3 (S)-2-{4-F6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1 - il]benzilamino}-4-metilpentanoato de ciclopentila
Figure img0076
De Intermediário 3G. 100% de pureza de LCMS, m/z 520 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, DMSO), δ: 1,10 (6H, m), 1,70-2,11 (11H, m), 4,14-4,53 (3H, m), 5,42 (1H, m, CH), 5,90 (1H, d), 7,49-7,91 (9H, m), 9,83 (2 H, br s). Exemplo 4 (S)-í4-r6-amino-5-(3-metil-4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1 - illbenzilaminolfenilacetato de ciclopentila
Figure img0077
De Intermediário 3C, 97% de pureza de LCMS, m/z 554 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, CD3OD), δ: 1,30-1,81 (8H, m), 2,25 (3H, s), 3,72 (2 H, s), 4,34 (1H, s), 5,08 (1H, m), 5,70 (1H, d), 7,03-7,38 (10H, m), 7,46-7,61 (3H, m). Exemplo 5 (S)-2-{4-F6-amino-5-(3-metil-4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin- 5 1-il]benzilamino}-3-fenilpropionato de ciclopentila
Figure img0078
De Intermediário 3F. 100% de pureza de LCMS, m/z 568 [M+Hf, 1H RMN (400 MHz, DMSO), δ: 1,09-1,77 (8H, m), 2,30 (3H, s), 2,95 (1H, m), 3,14 (2 H, s), 4,19-4,42 (3H, m), 5,02 (1H, m), 5,69 (1H, d), 7,19-7,51 (11H, m), 7,68 (2 H, m), 9,79 (2 H, br s). 10 Exemplo 6 (S)-2-(4-[6-amino-5-(3-metil-4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin- 1-il]benzilamino}-4-metilpentanoato de ciclopentila
Figure img0079
De Intermediário 3J. 100% de pureza de LCMS, m/z 534 [M+Hf, 1H RMN (400 MHz, DMSO), δ: 0,71 (6H, m), 1,32-1,70 (11H, m), 2,09 (3H, s), 3,72- 4,14 (3H, m), 5,03 (1H, m), 5,50 (1H, d), 7,00-3,29 (6H, m), 7,46 (2 H, m), 9,40 (2 H, br s). Exemplo 7 (S)-{4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1 - illbenzilaminolfenilacetato de ciclopentila
Figure img0080
De Intermediário 3B. 100% de pureza de LCMS, m/z 558 [M+Hf, 1H RMN 5 (400 MHz, DMSO), δ: 1,33-1,89 (8H, m), 3,71 (2 H, m), 4,28 (1H, s), 5,04 (1H, m), 5,61 (1H,d), 6,91 (1H, br s), 7,18-7,60 (13H, m), 10,05 (1H, br s). Exemplo 8 (S)-2-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1 - il]benzilamino}-3-fenilpropionato de ciclopentila
Figure img0081
De Intermediário 3E. 100% de pureza de LCMS, m/z 572 [M+Hf, 1H RMN 10 (400 MHz, DMSO), δ: 1,08-1,76 (8H, m), 2,95 (1H, t), 4,11-4,40 (3H, m), 4,98 (1H, m), 5,68 (1H, d), 6,89 (1H, br s), 7,13-7,50 (12 horas, m), 7,65 (1H, m), 9,64-10,12 (2 H, br s). Exemplo 9 (S)-2-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1 - il]benzilamino}-4-metilpentanoato de ciclopentila
Figure img0082
15 De Intermediário 31.100% de pureza de LCMS, m/z 538 [M+Hf, 1H RMN (400 MHz, DMSO), δ: 0,79 (6H, m), 1,39-1,78 (11H, m), 3,84-4,22 (3H, m), 5,10 (1H, m), 5,59 (1H, d), 6,79 (1H, br s), 7,03-7,18 (2 H, m), 3,21-7,42 (4H, m), 7,56 (2 H, m), 9,54 (1H, br s), 9,92 (1H, br s). Exemplo 10 (S)-2-{4-f6-amino-5-(2,4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1 -il]- 3,5-difluorobenzilamino)-3-fenilpropionato de ciclopentila
Figure img0083
5 De Intermediário 3K. 94% de pureza de LCMS, m/z 591 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, dβ-DMSO), δ: 1,20-1,90 (10H, m), 3,10 (1H, m), 3,50-3,60 (2 H, m), 4,40-4,50 (4H, m), 5,20 (1H, m), 5,90 (1H, d), 7,35-7,50 (7H, m), 7,65- 7,70 (5H, m), 9,50 (1H, br) Exemplo 11 (S)-2-{4-F6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1 -ill- 10 3,5-difluorobenzilamino}-4-metilpentanoato de ciclopentila
Figure img0084
De Intermediário 3L . 96% de pureza de LCMS, m/z 574 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, CD3OD), δ: 0,95-1,15 (6H, m), 1,65-2,05 (11H, m), 4.15-4.25 (1H, m), 4,35-4.45 (2 H, m), 5,35-5.45 (1H, m), 5,85 (1H, d), 7,10-3,20 (2 H, m), 7,45-7,55 (4H, m). 15 Exemplo 12 (S)-2-(3-{4-r6-amino-5-(3-metil-4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H- piridin-1 -il]fenóxi}propilamino)-3-fenilpropionato de ciclopentila
Figure img0085
A uma mistura de sal de tosilato de éster ciclopentilico de L- fenilalanina (Intermediário 16) (218 mg, 0,54 mmol), K2CO3 (192 mg, 1,39 mmol), Nal (108 mg, 0,72 mmol) foi adicionada uma solução de mesilato Intermediário 4A (170 mg, 0,35 mmol) em THF (2 ml). A mistura reacional foi diluída com DMF (2 ml) e aquecida a 70 °C durante 18 horas com agitação. A mistura reacional foi resfriada para temperatura ambiente, THF foi removido por concentração sob pressão reduzida. O resíduo foi diluído com EtOAc (20 ml) e lavado com água (10 ml), secado (Na2SO4), filtrado e evaporado até secura. Purificação por HPLC preparativa forneceu o produto desejado, produção= 57 mg, 15%. 97% de pureza de LCMS, m/z 612 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, CD3OD), δ: 1,30-2,00 (8H, m), 2,30 (2 H, m), 3,10 (1H, m), 3,40 (1H, m), 4,25 (2 H, m), 4,40 (1H, m), 5,20 (1H, m), 5,85 (1H, d), 6,90 (2 H, m), 7,10 (2 H, d), 3,20-7,45 (7H, m), 7,65 (2 H, m), 7,75 (1H, m). Os compostos seguintes foram preparados de uma maneira si-milar Exemplo 13 (S)-(3-{4-r6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1 -ill- 3,5-difluorofenóxi}propilamino)fenilacetato de ciclopentila
Figure img0086
De Intermediário 4E e sal de tosilato de éster ciclopentílico de L-fenilglicina (Intermediário 10), 96% de pureza de LCMS, m/z 620 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, CD3OD), δ: 1,40-1,65 (5H, m), 1,80 (2 H, m), 1,95 (1H, m), 2,30 (2 H, m), 3,15 (1 H, m), 3,30 (1H, m), 4,25 (2 H, m), 5,25 (1H, s), 5,40 (1H, m), 5,90 (1H, d), 6,90 (2 H, d), 7,30 (2 H, t), 7,55 - 7,60 (5H, m), 7,65 (2 H, m) 7,75 (1H, d). Exemplo 14 (S)-(3-{4-r6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-ill- 3,5-difluorofenóxi}propilamino)fenilacetato de ciclopentila
Figure img0087
De Intermediário 4E e sal de tosilato de éster ciclopentilico de L-fenilalanina (Intermediário 16), 97% de pureza de LCMS, m/z 634 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, CD3OD), δ: 1,30-2,00 (8H, m), 2,30 (2 H, m), 3,10 (1 H, m), 3,40 (1H, m), 4,25 (2 H, m), 4,40 (1H, m), 5,20 (1H, m), 5,85 (1H, d), 6,90 (2 H, m), 7,10 (2 H, d), 3,20-7,45 (7H, m), 7,65 (2 H, m), 7,75 (1H, m). Exemplo 15 (S)-2-(3-{4-r6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1- ill-3,5-difluorofenoxifenóxi}propilamino)-4-metilpentanoato de ciclopen- tila
Figure img0088
De Intermediário 4E e éster ciclopentilico de L-leucina (Intermediário 8), 96% de pureza de LCMS, m/z 600 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, CD3OD), δ: 1,10 (6H, m), 1,70-2,0 (12 horas, m), 2,30 (2 H, m), 4,10 (1H, m), 4,25 (2 H, m), 4,40 (1H, m), 5,40 (1H, m), 5,85 (1H, d), 6,90 (2 H, m), 7,10 (2 H, d), 7,60, (2 H, m), 7,65 (2 H, m), 7,75 (1H, m). Exemplo 16 A/-(3-{4-r6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-iH- 3,5-difluorofenóxi}propil)-L-leucinato de etila
Figure img0089
De Intermediário 4E e éster etílico de L-leucina, 98% de pureza de LCMS, m/z 560 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, CD3OD), δ: 1,10-1,20 (6H, m), 1,45-1,55 (3H, t), 1,65-1,85 (2 H, m), 1,90-2,00 (1H, m), 2,15-2,30 (2 H, m), 2,85-3,05 (2 H, m), 3,55 (1H, m), 4,35-4,50 (4H, m), 6,00 (1H, d), 7,10 (1H, d), 7,45- 7,55 (1H, m), 7,80-7,85 (1H, m), 7,95 (1H, d). Exemplo 17 (S)-(3-{4-i6-amino-5-(4-fluoro-3-metilbenzoil)-2-oxo-2H- piridin-1 -ill-3,5-difluorofenóxi)propilamino)fenilacetato de ciclopentila
Figure img0090
De Intermediário 4D e sal de tosilato de éster ciclopentilico de L-fenilglicina (Intermediário 10), 100% de pureza de LCMS, m/z 634 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, de-DMSO), δ: 1,20-1,80 (8H, m), 2,0 (2 H, m), 2,20 (3H, m), 2,80- 3,00 (2 H, m), 4,10 (2 H, m), 5,10 (1H, m), 5,30 (1H, s), 5,60 (1H, d), 6,95 5 (1H, d), 3,20 (1H, m), 7,30 (1H, m), 7,40-7,50 (8H, m), 9,65 (1H, m). Exemplo 18 (S)-2-(3-{4-r6-amino-5-(4-fluoro-3-metilbenzoii)-2-oxo-2H- piridin-1 -ill-3,5-difluorofenóxi}propilamino)-3-fenilpropionato de ciclo-pentila
Figure img0091
De Intermediário 4D e sal de tosilato de éster ciclopentilico de L-fenilalanina 10 (Intermediário 16) , 97% de pureza de LCMS, m/z 648 [M+Hf, 1H RMN (400 MHz, CD3OD), δ: 1,20-1,90 (9H, m), 2,25 (2 H, m), 2,35 (3H, s), 3,15 (1H, m), 3,45 (1H, m), 4,25 (2 H, m), 4,40 (1H, d), 5,20 (2 H, m), 5,82 (1H, d), 6,95 (2 H, m), 3,20 (1H, m), 7,30-7,50 (7H, m), 7,75 (1H, d). Exemplo 19 (S)-2-(3-{4-r6-amino-5-(4-fluoro-3-metilbenzoil)-2-oxo-2H- 15 piridin-1 -ill-3,5-difluorofenóxi}propilamino)-4-metilpentanoato de ciclo Pentila
Figure img0092
De Intermediário 4D e éster ciclopentílico de L-leucina (Intermediário 8), 100% de pureza de LCMS, m/z 614 [M+Hf, 1H RMN (400 MHz, d6-DMSO), δ: 0,90 (6H, m), 1,60-1,70 (10H, m), 1,90 (2 H, m), 2,15 (2 H, m), 2,30 (3H, s), 3,00-3,20 (2 H, m), 4,10 (1H, s), 4,20 (2 H, m), 5,25 (1H, m), 5,70 (1H, d), 7,05 (1H, d), 3,25 (1H, m), 7,40 (1H, m), 7,50 (1H, m), 7,60 (1H, d). Exemplo 20 (S)-(3-{4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1 - ill-3,5-difluorofenóxi}propilamino)fenilacetato de ciclopentila
Figure img0093
De Intermediário 4F e sal de tosilato de éster ciclopentilico de L-fenilglicina (Intermediário 10). 91% de pureza de LCMS, m/z 638 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, de-DMSO), δ: 1,50-2,10 (8H, m), 2,30 (2 H, m), 3,10-3.25 (2 H, m), 4,33 (2 H, m), 5.40 (1H, m), 5,56 (1H, m), 5,90 (1H, d), 3,20 (1H, d) 7,40-7,75 (9H, m), 9,85 (2 H, m). Exemplo 21 (S)-2-(3-{4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin- 1 -ill-3,5-difluorofenóxi}-propilamino)-3-fenilpropionato de ciclopentila
Figure img0094
De Intermediário 4F e sal de tosilato de éster ciclopentilico de L-fenilalanina (Intermediário 16). 100% de pureza de LCMS, m/z 652 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, de-DMSO), δ: 1,10-1,80 (9H, m), 2,15 (2 H, m), 2,95-3,20 (2 H, m), 4,20 (2 H, m), 4,40 (1H, m), 5,10 (1H, m), 5,75 (1H, d), 7,06 (2 H, d), 3,25-7,58 (9H, m), 9,34 (2 H, m). Exemplo 22 (S)-2-(3-{4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin- 1 -ill-3,5-difluorofenóxi}propilamino)-4-metilpentanoato de ciclopentila
Figure img0095
De Intermediário 4F e éster ciclopentilico de L-leucina (Intermediário 8), 87% de pureza de LCMS, m/z 618 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, d6-DMSO), δ: 1,0 (6H, m), 1,75 (9H, m), 1,95 (2 H, m), 2,20 (2 H, m), 3,10-3,30 (2 H, m), 4,16 (1H, m), 4,26 (2 H, m), 5,33 (1H, m), 5,80 (1H, d), 7,15 (2 H, d), 7,40- 5 7,65 (4H, m), 9,13-9,25(2 H, m). Exemplo 23 (S)-(3-{4-r6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1 -ill- fenóxi)propilamino)fenilacetato de ciclopentila
Figure img0096
De Intermediário 4B e sal de tosilato de éster ciclopentilico de L-fenilglicina (Intermediário 10), 95% de pureza de LCMS, m/z 584 [M+H]+, 1H RMN (400 10 MHz, CD3OD), δ: 1,25-1,55 (5H, m), 1,60-1,85 (3H, m), 2,15 (2 H, m), 3,00 (1H, m), 3,15 (1H, m), 4,05 (2 H, m), 5,10 (1H, s), 5,25 (1H, m), 5,70 (1H, d), 7,00 (2 H, m), 7,15 (4H, m), 7,40-7,50 (7H, m), 7,55 (1H, d). Exemplo 24 (S)-2-(3-{4-r6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1 - il]fenóxi}propilamino)-3-fenilpropionato de ciclopentila
Figure img0097
15 De Intermediário 4B e éster ciclopentilico de L-fenilalanina (Intermediário 16), 93% de pureza de LCMS, m/z 598 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, CD3OD), δ: 1,50-2,10 (8H, m), 2,50 (2 H, m), 3,35-3,40 (1H, m), 3,55-3,70 (2 H, m), 4,40-4,50 (2 H, m), 4,60 (1H, m), 5,40-5,45 (1H, m), 6,05-6,10 (1H, d), 7,40- 7,65 (11H, m), 7,85 (2 H, m), 7,90 (1H, m). Exemplo 25 (S)-2-(3-{4-r6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1- infenóxi)propilamino)-4-metilpentanoato de ciclopentila
Figure img0098
De Intermediário 4B e éster ciclopentilico de L-leucina (Intermediário 8), 97% de pureza de LCMS, m/z 564 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, d6-DMSO), δ: 5 0,90 (6H, m), 1,60-1,75 (10H, m), 1,90 (2 H, m), 2,15 (2 H, m), 3,10-3,30 (2 H, m), 4,10 (1H, m), 4,15 (2 H, m), 5,30 (1H, m), 5,70 (1H, d), 7,15 (2 H, d), 7,30 (2 H, d), 7,35 (2 H, t), 7,50 (1H, d), 7,55 (1H, m) 9,05-30 (2 H, m). Exemplo 26 (S)-(3-{4-r6-amino-5-(4-fluoro-3-metilbenzoil)-2-oxo-2H- piridin-1-il-fenóxi)propilamino)fenilacetato de ciclopentila
Figure img0099
10 De Intermediário 4A e sal de tosilato de éster ciclopentilico de L-fenilglicina (Intermediário 10), 95% de pureza de LCMS, m/z 598 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, d6-DMSO), δ: 1,30 2,20 (10H, m), 2,30 (3H, m), 2,90-3,10 (2 H, m), 4,15 (2 H, m), 5,20 (1H, m), 5,30 (1H, m), 5,70 (1H, d), 7,10 (2 H, d), 3,25- 7,40 (5H, m), 7,40-7,50 (3H, m), 7,55 (5H, m), 9,70 (2 H, m). 15 Exemplo 27 (S)-2-(3-{4-r6-amino-5-(4-fluoro-3-metila benzoil)-2-oxo-2H- piridin-1 -il]fenóxi}propilamino)-4-metilpentanoato de ciclopentila
Figure img0100
De Intermediário 4A e éster ciclopentilico de L-leucina (Intermediário 8), 89% de pureza de LCMS, m/z 578 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, d6-DMSO), δ: 0,95 (6H, m), 1,55-2,25 (12 horas, m), 2,30 (3H, m), 2,75-3,30 (2 H, m), 4,15 (3H, m), 5,25 (1H, m), 5,70 (1H, d), 7,15 (2 H, d), 7,30-7,40 (4H, m), 7,40 - 7,50 (2 H, m). Exemplo 28 (S)-(3-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1 - il]-fenóxi}propilamino)fenilacetato de ciclopentila
Figure img0101
5 De Intermediário 4C e Sal de tosilato de éster ciclopentilico de L-fenilglicina (Intermediário 10), 99% de pureza de LCMS, m/z 602 [M+Hf, 1H RMN (400 MHz, dβ-DMSO), δ: 1,35-2,15 (10H, m), 2,90-3,10 (2 H, m), 4,10 (2 H, m), 5,25 (1H, m), 5,40 (1H, m), 5,70 (1H, d), 7,10 (2 H, d), 3,25-7,30 (4H, m), 7,40-7,50 (2 H, m), 7,55 (5H, m), 9,70 (2 H, m). 10 Exemplo 29 (S)-2-(3-{4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin- 1-illfenóxi}propilamino)-3-fenilpropionato de ciclopentila
Figure img0102
De Intermediário 4C e sal de tosilato de éster ciclopentilico de L-fenilalanina (Intermediário 16), 99% de pureza de LCMS, m/z 616 [M+Hf, 1H RMN (400 MHz, d6-DMSO), δ: 1,10-1,80 (8H, m), 2,20 (2 H, m), 2,95 (1H, m), 3,10-3,30 15 (2 H, m), 3,40 (2 H, m), 4,20 (2 H, m), 4,40 (1H, m), 5,05 (1H, m), 5,70 (1H, d), 7,15 (2 H, d), 3,20-7,55 (11H, m), 9,70 (2 H, m). Exemplo 30 (S)-2-(3-{4-r6-amino-5-(2,4difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin- 1-il]fenóxi}propilamino)-4-metilpentanoato de ciclopentila
Figure img0103
De Intermediário 4C e éster ciclopentilico de L-leucina (Intermediário 8), 20 99% de pureza de LCMS, m/z 582 [M+Hf, 1H RMN (400 MHz, d6-DMSO), 0,95 (6H, m), 1,65-2,15 (13H, m), 3,10-3,20 (2 H, m), 4,15 (3H, m), 5,30 (1H, m), 5,70 (1H, d), 7,15 (2 H, d), 3,25-7,55 (6H, m), 9,24 (2 H, m) Exemplo 31 trifluoroacetato de (S)-2-(4-{4-r6-amino-5-(4-fluorobenzoil)- 2-oxo-2H-piridin-1 -ill-3,5-difluorofenóxi)cicloexilamino)-4- metilpentanoato de ciclopentila
Figure img0104
Uma suspensão de Intermediário 5 (120 mg, 0,263 mmol) e sal de tosilato de éster ciclopentilico de L-fenilalanina (Intermediário 16) (98 mg, 0,263 mmol) em MeOH (1,2 ml) foi deixada agitarem temperatura ambiente durante 1 hora antes da adição de NaCNBH3 (66 mg, 1,05 mmol). A agitação continuou em temperatura ambiente durante 18 horas. Na conclusão da reação, a mistura reacional foi concentrada até secura e dividida entre EtOAc (10 ml) e água (10 ml). A camada orgânica foi secada (Na2SO4), filtrada e concentrada até secura sob pressão reduzida e foi purificada por HPCL preparativa. Este fornece o produto desejado como um sal de TFA. Produção= 37 mg (18%). LCMS 97% de pureza, m/z 674 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, CD3OD), δ: 1,10- 2,20 (16H, m), 2,35-2,45 (1H, m), 2,70-3,00 (2 H, m), 3,50-3,55 (1H, m), 4,25-4,35 (1H, m), 4,95-5,05 (1H, m), 5,70 (1H, d), 6,75 (2 H, dd), 7,05-3,25 (7H, m), 7,45-7,55 (2 H, m), 7,65 (1H, d) Os exemplos seguintes foram preparados de uma maneira simi lar: Exemplo 32 (2S)-r(4-(4-r6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxopiridin-1 (2H)- ill-3,5-difluorofenóxi}cicloexil)aminol(fenil)acetato de ciclopentila
Figure img0105
De Intermediário 5 (120 mg, 0,263 mmol) e éster ciclopentilico de L- fenilglicina (Intermediário 10). 97% de pureza de LCMS, m/z 660 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, CD3OD), δ: 1,30-1,80 (14H, m), 1,90-2,05 (2 H, m), 2,35- 2,50 (1H, m), 4,35-4,45 (1H, m), 4,50-4,60 (1H, m), 5,05-5,10 (1H, m), 5,70 (1H, d), 6,75-6,85 (2 H, m), 7,10-7,15 (2 H, m), 3,20-7,35 (5H, m), 7,45-7,55 (2 H, m), 7,55-7,60 (1H, m). Exemplo 33 (S)-2-(4-{4-r6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1 - ill-3,5-difluorofenóxi}cicloexilamino)-4-metilpentanoato de ciclopentila
Figure img0106
De Intermediário 5 (120 mg, 0,263 mmol) e éster ciclopentilico de L-leucina (Intermediário 8). 100% de pureza de LCMS, m/z 640 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, CD3OD), δ: 0,95-1,05 (6H, m), 1,50-2,00 (16H, m), 2,10-2,35 (3H, m), 3,15-3,20 (1H, m), 4,00-4,15 (1H, m), 4,40 e 4,75 (0,5H cada, m), 5,25-5,35 (1H, m), 5,75 (1H, d), 6,85-6,95 (2 H, m), 7,15-3,25 (2 H, m), 7,55-7,65 (2 H, m), 7,65-7,70 (1H, m). Exemplos 34 e 35 (S)-2-{4-r6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin- 1-illcicloexil amino}-3-fenilpropionato de ciclopentila
Figure img0107
Intermediário 6 (50 mg, 0,15 mmol) foi adicionado a uma solução incolor de éster ciclopentilico de L-fenilalanina (89 mg, 0,38 mmol) em MeOH (10 ml) em temperatura ambiente/N2 e agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. AcOH glacial foi adicionado gota a gota para ajustar o pH para 6 se- guido pelo NaCNBHs (38 mg, 0,61 mmol). A solução incolor resultante foi agitada em temperatura ambiente durante a noite e em seguida cuidadosa-mente saciada com NaHCO3 saturado (20 ml) e extraída em CH2CI2 (3x15 ml). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com HCI a 2M (2 x 20 ml), salmoura (20 ml), secadas (Na2SO4), filtradas e concentradas a vácuo fornecendo um sólido de cor creme. Purificação por cromatografia de coluna flash (sílica, eluição gradiente 40 - 100% de EtOAc/ heptano) fornece 0 ma-terial desejado, separável como dois isômeros, isômero 1 (Exemplo 34) como um sólido branco (Produção = 39 mg, 47%) 100% de pureza de LCMS, m/z 546 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, CD3OD), δ: 1,40-2,05 (16H, m), 2,85- 3,10 (3H, m), 3,60-3,70 (1H, m), 4,55-4,65 (1H, m), 5,10-5,20 (1H, m), 5,70 (1H, d), 7,15-7,40 (7H, m), 7,45-7,50 (1H, m), 7,50-7,60 (2 H, m) e isômero 2 (Exemplo 35) 97% de pureza de LCMS, m/z 546 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, CD3OD), δ: 1,25-1,85 (12 horas, m), 1,95-2,20 (2 H, m), 2,45-2,95 (4H, m), 3,00-3,10 (1H, m), 3,65-3,75 (1H, m), 4,55-4,65 (1H, m), 5,05-5,15 (1H, m), 5,65 (1H, d), 3,20-7,35 (7H, m), 7,40-7,50 (1H, m), 7,50-7,60 (2 H, m) como uma película incolor (Produção =15 mg, 18%). Exemplo 36 (S)-(3-{4-F6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1 - il]-3,5-difluorofenóxi}propilamino)fenilacetato de terc-butila
Figure img0108
De Intermediário 4F e éster terc-butílico de L-fenilglicina, 93% de pureza de LCMS, m/z 626 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, CD3OD), δ: 1,30 (9H, s), 2,15 (2 H, m), 3,00-3,15 (2 H, m), 4,06 (2 H, m), 5,02 (1H, s), 5,70 (1H, d), 6,75 (2 H, d), 7,02 (2 H, m), 7,30-7,50 (7H, m). Exemplo 37 (S)-2-(3-{4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin- 1 -iH-3,5-difluorofenóxi}-propilamino)-3-fenilpropionato de terc-butila
Figure img0109
De Intermediário 4F e éster terc-butílico de L-fenilalanina. 97% de pureza de LCMS, m/z 640 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, CD3OD), δ: 1,25 (9H, s), 2,16 (2 H, m), 3,00 (1H, dd), 3,15-3,25 (2 H, m), 3,35 (1H, dd), 4,10 (2 H, m), 4,20 (1H, m), 5,71 (1H, d), 6,79 (2 H, d), 7,02 (2 H, t), 3,20-7,30 (5H, m), 2 h (2 H, 5 m). Exemplo 38 (S)-2-(3-{4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin- 1 -ill-3,5-difluorofenóxi}propilamino)-4-metilpentanoato de terc-butila
Figure img0110
De Intermediário 4F e éster terc-butílico de L-leucina, 97% de pureza de LCMS, m/z 606 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, CD3OD), δ: 0,95 (6H, m), 1,41 10 (9H, s), 1,61 (1H, m), 1,75 (2 H, m), 2,15 (2 H, m), 3,22-3,25 (2 H, m), 3,88 (1H, m), 4,13 (2 H, m), 4,20 (1H, m), 5,40 (1H, s), 5,75 (1H, d), 6,85 (2 H, d), 7,00 (2 H, t), 7,40 (2 H, m). Exemplo 39 (S)-2-(3-{4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin- 1-il1fenóxi}propilamino)-4-metilpentanoato de terc-butila
Figure img0111
15 De Intermediário 4C e éster terc-butílico de L-leucina, 91% de pureza de LCMS, m/z 570 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, CD3OD), δ: 0,95 (6H, m), 1,45 (9H, s), 1,65 (1H, m), 2,15 (2 H, m), 3,15-3,30 (2 H, m), 3,85 (1H, m), 4,15 (2 H, m), 5,75 (1H, d), 7,00-3,20 (6H, m), 7,35 (2 H, m). Exemplo 40 (2S)-r(3-{4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin- 20 1 (2H)-ill-3,5-difluorofenóxi}propil)amino](fenil)acetato de 2,3-diidro-1 H- inden-2-ila
Figure img0112
De Intermediário 4F e éster indanílico de L-fenilglicina (Intermediário 11), 96% de pureza de LCMS, m/z 686 [M+H]+, 1H RMN (300 MHz, CD3OD), δ: 7,55-7,47 (2 H, m), 7,46-7,31 (5H, m), 3,22-7,10 (6H, m), 6,85 (2 H, d, J=9,6 5 Hz), 5,82 (1H, d, J=9,6 Hz), 5,57-5,51 (1H, m), 4,37 (1H, s), 4,13 (1H, t, J=6,0 Hz), 3,32-3,21 (2 H, m), 3,05-2,98 (1H, m), 2,80-2,63 (3H, m), 2,05- 1,97 (2 H, m). Exemplo 41 (2ff)-r(3-{4-r6-amino-5-(2.4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin- 1 (2H)-iH-3,5-difluorofenóxi}propil)aminol(fenil)acetato de 2,3-diidro-1 H- 10 inden-2-ila
Figure img0113
De Intermediário 4F e éster indanílico de D-fenilglicina, 94% de pureza de LCMS, m/z 686 [M+H]+, 1H RMN (300 MHz, CD3OD), δ: 7,56-7,47 (2H, m), 7,38-7,31 (5H, m), 3,28-7,14 (6H, m), 6,85 (2 H, d, J=9,6 Hz), 5,82 (1H, d, J=9,6 Hz), 5,57-5,52 (1H, m), 4,37 (1H, s), 4,13 (1H, t, J=6,0 Hz), 3,31-3,21 15 (2 H, m), 3,09-2,99 (1H, m), 2,78-2,64 (3H, m), 2,06-1,99 (2 H, m). Exemplo 42 (2R)-r(3-{4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin- 1 (2H)-iH-3,5-difluorofenóxi}propil)amino](fenil)acetato de ciclopentila
Figure img0114
De Intermediário 4F e éster ciclopentilico de D-fenilglicina, 95% de pureza de LCMS, m/z 638 [M+H]+. Exemplo 43 (2S)-r(3-{4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin- 1(2H)-ill-3,5-difluorofenóxi}propil)amino](fenil)acetato de bici- clor2,2,1]hept-2-ila
Figure img0115
5 De Intermediário 4F e éster de norborneila de L-fenilglicina (Intermediário 12), 97% de pureza de LCMS, m/z 664 [M+H]+, 1H RMN (300 MHz, CD3OD), δ: 7,50-3,21 (7H, m), 7,02 (2 H, t, J=8,6 Hz), 6,75 (2 H, d, J=9,6 Hz), 5,70 (1H, d, J=9,6 Hz), 4,50 (1H, d, J=6,6 Hz), 4,32-4,26 (1H, m), 4,05 (2 H, t, J=5,9 Hz), 2,71-2,56 (2 H, m), 2,24-1,90 (4H, m), 1,64-1,06 (8H, m). 10 Exemplo 44 (2/?)-r(3-{4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin- 1(2H)-ill-3,5-difluorofenóxi}propil)amino](fenil)acetato de bici- clor2,2,1]hept-2-ila
Figure img0116
De Intermediário 4F e éster de norborneila de D-fenilglicina, 98% de pureza de LCMS, m/z 664 [M+H]+, 1H RMN (300 MHz, CD3OD), δ: 7,42-7,17 (7H, 15 m), 7,00 (2 H, t, J=8,6 Hz), 6,74 (2 H, d, J=9,1 Hz), 5,69 (1H, d, J=9,8 Hz), 4,49 (1H, d, J=6,8 Hz), 4,32-4,26 (1H, m), 4,03 (2 H, t, J=6,0 Hz), 2,70-2,52 (2 H, m), 2,18-1,86 (4H, m), 1,63-0,92 (8H, m). Exemplo 45 (S)-(3-{4-r6-amino-5-(4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1- ill-3,5-difluorofenóxi}propilamino)fenilacetato de terc-butila
Figure img0117
De Intermediário 4E e éster terc-butílico de L-fenilglicina, 100% de pureza de LCMS, m/z 608 [M+H]+, 1H RMN (300 MHz, CD3OD), δ: 7,55-7,47 (3H, m), 7,30-3,21 (6H, m), 7,09 (1H, t, J=8,7 Hz), 6,61 (2 H, d, J=9,3 Hz), 5,81 (1H, d, J=9,6 Hz), 4,18 (1H, s), 4,03 (2 H, t, J=6,0 Hz), 2,75-2,69 (1H, m), 2,65-2,58 (1H, m), 1,96-1,88 (1H, m), 1,96-1,88 (2 H, m), 1,32 (9H, s) Exemplo 46 M-(3-{4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1 (2/7)- il]-3,5-difluorofenóxi}propil)-L-leucinato de 2-(dimetilamino)etila
Figure img0118
De Intermediário 4F e Intermediário 13, 90% de pureza de LCMS, m/z 621 [M+H]+, 1H RMN (300 MHz, DMSO), δ: 10,18 (1 H,br s), 9,50 (1H, br s),7,57 (1H, q, J=7,8Hz), 7,39 (2 H, m),7,37-7,15 (3H, m), 7,04 (2 H, m), 5,73 (1H, d, J=9,6Hz), 4,59-4,46 (2 H, m), 4,21 (2 H, t, J=9,0Hz), 4,11 (1H, m), 3,14 (2 H, m), 2,86 (6H, s), 2,14 (2 H, m), 1,74 (2 H, m), 0,92 (8H, m). Exemplo 47 /V-(3-{4-r6-amino-5-(2,4-difliiorobenzoil)-2-oxopiridin-1 (2H)- il1-3,5-difluorofenóxi}propil)-L-leucinato de 2-morfolin-4-iletila
Figure img0119
De Intermediário 4F e Intermediário 14, 90% de pureza de LCMS, m/z 621 [M+H]+, 1H RMN (300 MHz, DMSO), δ: 7,57 (1H, q, J=7,5 Hz), 7,40 (2 H, m), 3,26-7,17 (3H, m), 7,06 (2 H, d, J=10,8 Hz), 5,74 (1H, d, J=9,9 Hz), 4,53 (2 H, m), 4,21 (4H, m), 3,80 (4H, m), 3,37 (2 H, m), 3,17 (4H, m), 2,15 (2 H, m), 1,75 (3H, m), 0,94 (6H, br s). Exemplo 48 (2S)-n3-{4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin- 1 (2H)-ill-3,5-difluorofenóxi}propil)aminol(cicloexil)acetato de ciclopenti- la
Figure img0120
De Intermediário 4F e éster ciclopentilico de L-cicloexilglicina (Intermediá-rio 9), 95% de pureza de LCMS, m/z 664 [M+H]+, 1H RMN (300 MHz, DMSO), δ: 9,15 (1H, br s), 8,95 (1H, br s), 7,62-7,52 (1H, m), 7,46-7,31 (2 H, m),3,27-3,20 (1H, m), 7,05 (2 H, d, J=10,2Hz), 5,74 (1H, d, J=9,6Hz), 5,30- 5,25 (1H, m), 4,20 (2 H, t, J=5,7Hz), 4,10-3,95 (1H, m), 3,25 -2,95 (2 H, m), 2,20-2,07 (2 H, m), 2,00-1,50 (15H, m),1,30-1,00 (4H, m), 0,95-0,75 (1H, m) Exemplo 49 (2S)-r(3-{4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin- 1 (2H)-ill-3,5-difluorofenóxi}propil)amino](cicloexil)acetato de terc-butila
Figure img0121
De Intermediário 4F e éster terc-butilico de L-cicloexilglicina, 95% de pureza de LCMS, m/z 632 [M+H]+, 1H RMN (300 MHz, DMSO), δ: 9,10 (1H, br s), 8,85 (1H, brs), 7,62-7,52 (1H, m), 7,45-7,31 (2 H, m), 3,28-3,20 (1H, m), 7,06 (2 H, d, J=10,2Hz), 5,74 (1H, d, J=9,6Hz), 4,20 (2 H, t, J=5,9Hz), 3,95-3,85 (1H, m), 3,25-2,95 (2 H, m),2,20-2,07 (2 H, m), 2,00-1,60 (6H, m), 1,51 (9H, s),1,35-1,07 (4H, m),1,00-0,85 (1H, m). Exemplo 50 N-(3-{4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)- ill-3,5-difluorofenóxi}propil)-D-leucinato de ciclopentila
Figure img0122
De Intermediário 4F e éster ciclopentilico de D-leucina, 95% de pureza de LCMS, m/z 618 [M+H]+, 1H RMN (300 MHz, DMSO), δ: 10,10 (1H, br s), 9,40-9,10 (2 H, m), 8,15 (1H, br s), 7,62-7,52 (1H, m), 7,47-7,31 (2 H, m), 3,28-7,12 (1H, m), 7,07 (2 H, d, J=10,5Hz), 5,73 (1H, d, J=9,6Hz), 5,30-5,20 (1H, m), 4,25-4,00 (3H, m), 3,30-3,00 (2 H, m), 2,20-2,00 (2 H, m), 1,95-1,80 (2 H, m), 1,75-1,55 (10H, m), 1,00-0,90 (6H, m). Exemplo 51 N-(3-{4-F6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1 (2H}- ill-3,5-difluorofenóxi}propil)-D-leucinato de terc-butila
Figure img0123
De Intermediário 4F e éster terc-butilico de D-leucina, 95% de pureza de LCMS, m/z 606 [M+H]+, 1H RMN (300 MHz, DMSO), δ: 9,30-9,00 (2 H, m), 7,62-7,52 (1H,m), 7,47-7,32 (2 H, m), 3,28-7,12 (1H, m), 7,06 (2 H, d, J=10,2Hz), 5,73 (1H, d, J=9,6Hz), 4,20 (2 H, t, J=5,7Hz), 3,99 (1H, br s), 3,25-2,95 (2 H, m), 2,20-2,05 (2 H, m), 1,80-1,60 (3H, m), 1,49 (9H, s), 0,95 (6H, d, J=4,8Hz). Exemplo 52 (2S)-4-amino-2-r<3-{4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2- oxopiridin-1(2H)-ill-3,5-difluorofenóxi}propil)amino]butanoato de ciclo-pentila
Figure img0124
De Intermediário 4F e Intermediário 15, 90% de pureza de LCMS, m/z 605 [M+H]+, 1H RMN (300 MHz, CD3OD), δ: 7,46 - 7,55 (2 H, m), 7,12 (2 H, t, J=8,7 Hz), 6,93 (2 H, d, J=9,6 Hz), 5,81 (1H, d, J=9,6 Hz), 5,37 - 5,44 (1H, m), 4,20 - 4,31 (4H, m), 3,33 - 3,42 (1H, m), 2,25 - 2,49 (4H, m), 1,91-2,08 (2 H, m), 1,65- 1,89 (7H, m). Exemplo 53 N-(5-{4-F6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1 (2H}~ il]-3,5-difluorofenóxi}pentil)-L-leucinato de ciclopentila
Figure img0125
De Intermediário 4G. A uma solução de 6-amino-1-{4-[(5-cloropentil)óxi]- 2,6-difluorofenil}-5-(2,4-difluorobenzoil)piridin-2(1/-/)-ona (138 mg, 0,29 mmol) em DMF anidroso (3 ml) sob uma atmosfera de nitrogênio foram adicionados L-leucina de ciclopentila (Intermediário 8) (284 mg, 1,43 mmol, 5 eq), iodeto de sódio (86 mg, 0,57 mmol, 2eq) e /V,/V-diisopropiletilamina (0,052 ml, 0,29 mmol, 1eq). A mistura foi aquecida a 90°C durante 16 horas, antes de ser deixada resfriar para temperatura ambiente e diluída com EtOAc (25 ml). A solução foi lavada com água (2 x 25 ml) e salmoura (25 ml). A camada orgâ-nica foi secada sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. Purificação por cromatografia de coluna (3-4 % de MeOH em DCM) seguido por HPLC preparativa forneceu o composto título como um sólido de cor creme (96 mg, 52% de produção). LC/MS: m/z 646 [M+H]+ 1H RMN (300 MHz, CD3OD) δ: 7,56-7,47 (2 H, m), 7,13 (2 H, m), 6,88 (2 H, m), 5,82 (1H, d, J=9,8 Hz), 5,23 (1H, t, J=4,1 Hz), 4,11 (2 H, t, J=6,3 Hz), 3,28 (1H, m), 2,61-2,51 (2 H, m), 1,95-1,41, (17H, br m), 0,98-0,93 (6H, m). Exemplo 54 N-(5-{4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1 (2H}- il]-3,5-difluorofenóxi}pentil)-L-leucinato de terc-butila
Figure img0126
De Intermediário 4G. A uma solução de 6-amino-1-{4-[(5-cloropentil)óxi]- 2,6-difluorofenil}-5-(2,4-difluorobenzoil)piridin-2(1/-/)-ona (96 mg, 0,20 mmol) em DMF anidroso (3 ml) sob uma atmosfera de nitrogênio foi adicionado hi- drocloreto de L-leucinato de terc-butila (198 mg, 0,99 mmol, 5eq), iodeto de sódio (60 mg, 0,40 mmol, 2eq) e /V,/\/-diisopropiletilamina (0,072 ml, 0,40 mmol, 2eq). A mistura foi aquecida a 90°C durante 20 horas, antes de ser deixada resfriar para temperatura ambiente e diluída com EtOAc (20 ml). A solução foi lavada com água (2 x20 ml) e salmoura (20 ml). A camada orgâ-nica foi secada sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. Purificação por cromatografia de coluna (1-3 % de MeOH em DCM) seguido por HPLC preparativa forneceu o composto título como um sólido branco (23 mg, 18% de produção). LC/MS: m/z 634 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CD3OD) δ: 7,56-7,47 (2 H, m), 7,14 (2 H, m), 6,89 (2 H, m), 5,81 (1H, d, J=9,6 Hz), 4,11 (2 H, t, J=6,2 Hz), 3,19 (1H, m), 2,60-2,53 (2 H, m), 1,89-1,84 (2 H, m), 1,72-1,41 (16H, m), 0,96 (6H, m). Exemplo 55 A/-(5-{4-r6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxopiridin-1 (2H)-ill-
Figure img0127
De Intermediário 4 h. A uma solução de 6-amino-1-{4-[(5-cloropentil)óxi]- 2,6-difluorofenil}-5-(4-fluorobenzoil)piridin-2(1/-/)-ona (99 mg, 0,21 mmol) em DMF anidroso (3 ml) sob uma atmosfera de nitrogênio foram adicionados L- leucina de ciclopentila (Intermediário 8) (212 mg, 1,06 mmol, 5 eq), iodeto de sódio (64 mg, 0,43 mmol, 2eq) e N,A/-diisopropiletilamina (0,039 ml, 0,21 mmol, 1eq). A mistura foi aquecida a 90°C durante 20 horas, antes de ser deixada resfriar para temperatura ambiente e diluir com EtOAc (25 ml). A solução foi lavada com água (2 x 25 ml) e salmoura (25 ml). A camada orgâ-nica foi secada sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. Purificação por cromatografia de coluna (2 % de MeOH em DCM) seguido por HPLC preparativa forneceu o composto título como um sólido amarelo (64 mg, 48% de produção). LC/MS: m/z 628 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CD3OD) δ: 7,71 (1H, d, J=9,6 Hz), 7,62 (2 H, m), 3,26 (2 H, m), 6,89 (2 H, m), 5,81 (1H, d, J=9,6 Hz), 5,23 (1H, t, J=5,3 Hz), 4,11 (2 H, t, J=6,4 Hz), 3,28 (1H, m), 2,55 (2 H, m), 1,91- 1,48 (17H, m), 0,98-0,93 (6H, m). Exemplo 56 /V-({4-r6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxopiridin-1 (2H)- il1fenóxi}acetil)-L-leucinato de ciclopentila
Figure img0128
LC/MS: m/z 564 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 8,47 (1H, d, J=7,7 Hz), 7,56 (2 H, m), 7,45 (1H, d, J=9,6 Hz), 7,38-3,24 (4H, m), 7,15 (2 H, m), 5,69 (1H, d, J=9,8 Hz), 5,09 (1H, t, J=5,3 Hz), 4,63 (2 H, m), 4,31 (1H, m), 1,84-1,79 (2 H, m), 1,66-1,53 (9H, m), 0,92-0,86 (6H, m). A uma solução de 6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-1-(4- hidroxifenil)piridin-2(1 H)-ona [WO 03/076405] (100 mg, 0,31 mmol) em DMF anidroso (3 ml) sob uma atmosfera de nitrogênio foi adicionado N- (bromoacetil)-L-leucinato de ciclopentila (109 ml, 0,34 mmol, 1,1 eq) e carbonato de potássio (51 mg, 0,37 mmol, 1,2eq). A mistura foi aquecida a 40 °C durante 16 horas, antes de ser deixada resfriar para temperatura ambiente e adicionada à água (20 ml). A mistura foi extraída com EtOAc (3x15 ml), e os extratos combinados lavados com água (2 x 40 ml) e salmoura (40 ml). A camada orgânica foi secada sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. Purificação por cromatografia de coluna (2-3 % de MeOH em DCM) seguido por trituração com MeOH mínimo forneceu o composto título como um sólido branco (91 mg, 52% de produção). O /V-(bromoacetil)-L-leucinato de ciclopentila foi sintetizado de L- leucina de ciclopentila em uma etapa, os detalhes dos quais são delineados abaixo.
Figure img0129
A uma solução de L-leucina de ciclopentila (Intermediário 8) (568 mg, 2,84 mmols) em DCM (6 ml) foi adicionado trietilamina (0,24 ml, 2,84 mmols, 1eq) e cloreto de bromoacetila (1,44 ml, 3,13 mmols, 1,1 eq) gota a gota. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 20 ho- ras, diluída com DCM (50 ml) e lavada com água (50 ml) e salmoura (50 ml). A camada orgânica foi secada sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer uma mistura crua contendo o composto título (902 mg) que foi utilizado sem outra purificação. LC/MS: m/z 320/322 [M+Hf. Exemplo 57 A/-f2-(4-{6-amino-5-r(4-fluorofenil)carbonil]-2-oxopiridin- 1(2H)-il}fenil)etill-L-leucinato de ciclopentila
Figure img0130
De Intermediário 4J e éster ciclopentilico de L-leucina (Intermediário 8). LC/MS: m/z 534 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 8,47 (1H, d, J=7,7 Hz), 7,56 (2 H, m), 7,45 (1H, d, J=9,6 Hz), 7,38-3,24 (4H, m), 7,15 (2 H, m), 5,69 (1H, d, J=9,8 Hz), 5,09 (1H, t, J=5,3 Hz), 4,63 (2 H, m), 4,31 (1H, m), 1,84-1,79 (2 H, m), 1,66-1,53 (9H, m), 0,92-0,86 (6H, m). Os exemplos seguintes foram sintetizados de uma maneira simi-lar: Exemplo 58 (V-f2-(4-{6-amino-5-f(4-fluorofenil)carbonill-2-oxopiridin- 1(2H)-il}fenil)etill-L-leucinato de terc-butila
Figure img0131
De Intermediário 4J e éster butílico de L-leucina. LC/MS: m/z 522 [M+Hf. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) Ô: 9,40-9,10 (2 H,m), 7,59-7,44 (5H, m), 7,38- 7,30 (4H, m), 5,71 (1H, d, J=9,6Hz), 4,00 (1H, brs), 3,40-3,28 (1H, m), 3,25- 3,15 (1H, m), 3,10-3,00 (2 H, m), 1,80-1,70 (3H, m), 0,96 (6H, d, J=5,1Hz). Exemplo 59 N-r2-(4-(6-amino-5-r(2,4-difluorofenil)carbonil]-2-oxopiridin- 1(2H)-il)fenil)etil]-L-leucinato de ciclopentila
Figure img0132
Exemplo 59 foi sintetizado por meio de uma rotina similar ao Exemplo 57 utilizando éster 4-cloro-fenílico de ácido 3-(2,4-difluoro-fenil)-3-oxo- tiopropionimídico. LC/MS: m/z 552 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 10,07 (1H, br s), 9,35 (2 H, br s), 7,55-6,95 (8H, m), 5,72 (1H, d, J=9,9Hz), 5,27 (1H, t, J=5,7Hz), 4,15-4,00 (1H, m), 3,41-3,15 (2 H, m), 3,10-3,00 (2 H, m), 1,96-1,80 (2 H, m), 1,78-1,55 (9H, m), 0,95 (6H, d, J=5,1Hz). Exemplo 60 /V-r2-(4-{6-amino-5-[(2,4-difluorofenil)carbonill-2-oxopiridin- 1(2H)-il}fenil)etil]-L-leucinato de terc-butila
Figure img0133
Exemplo 60 foi sintetizado por meio de uma rotina similar ao Exemplo 57 utilizando éster 4-cloro-fenílico de ácido 3-(2,4-difluoro-fenil)-3-oxo- tiopropionimídico. LC/MS: m/z 540 [M+Hf. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 10,07 (1H, br s), 9,30 (2 H, br s), 7,55-6,94 (8H, m), 5,72 (1H, d, J=9,6Hz), 4,05-3,93 (1H, m), 3,40-3,10 (2 H, m), 3,08-3,00 (2 H, m), 1,80-1,65 (3H, m), 1,50 (9H, s), 0,96 (6H, d, J=5,1Hz). Exemplo 61 (2S)-fí2-(4-{6-amino-5-r(4-fluorofenil)carbonill-2-oxopiridin- 1(2H)-il}fenil)etillaminoMfenil)etanoato de ciclopentila
Figure img0134
De Intermediário 4J e éster ciclopentilico de L-fenilglicina (Intermediário 10). LC/MS: m/z 554 [M+Hf. 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ: 10,35 (1H, br s), 7,60-7,13 (14H, m), 5,91 (1H, d, J=10,2Hz), 5,22-5,14 (1H, m), 4,36 (1H, s), 3,00-2,85 (4H, m), 2,16 (1H, brs), 1,99-1,43 (8H, m). Exemplo 62 (2S)-{r2-(4-{6-amino-5-[(4-fluorofenil)carbonill-2-oxopiridin-
Figure img0135
De Intermediário 4J e éster butilico de L-fenilglicina. LC/MS: m/z 542 [M+Hf. 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ: 10,30 (1H, br s), 7,51-7,45 (3H, m), 7,38 (2 H, d, J=6,9Hz), 3,27-7,04 (9H, m), 5,82 (1H, d, J=9,6Hz), 4,20 (1H, s), 2,86-2,75 (4H, m), 2,04 (1H, br s), 1,31 (9H, s). Exemplo 63 M-r2-(4-{6-amino-5-r(4-metilfenil)carboniH-2-oxopiridin- 1(2H)-il}fenil)etill-L-leucinato de ciclopentila
Figure img0136
Exemplo 63 foi preparado por metodologia similar ao Exemplo 59 utilizando éster 4-cloro-fenílico de ácido 3-(4-metil-fenil)-3-oxo-tiopropionimídico, pre-parado por um método similar utilizado para Intermediário 4J. LC/MS: m/z 530 [M+Hf. 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ: 7,65 (1H, d, J=9,9Hz), 7,47 (4H, m), 3,26 (4H, m), 5,89 (1H, d, J=9,9Hz), 5,20 (1H, m), 3,25 (1H, t, J=3,2Hz), 2,87 (4H, m), 2,44 (3H, s), 1,99-1,53 (9H, m), 1,42 (2 H, t, J=6,3Hz), 0,91 (6H, m). Exemplo 64 A/-r2-(4-{6-amino-5-H4-metoxifenil)carbonill-2-oxopiridin- 1(2H)-il}fenil)etill-L-leucinato de ciclopentila
Figure img0137
Exemplo 64 foi preparado por metodologia similar ao Exemplo 59 utilizando éster 4-cloro-fenílico de ácido 3-(4-metóxi-fenil)-3-oxo-tiopropionimídico, pre- parado por um método similar utilizado para Intermediário 4J, LC/MS: m/z 546 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ: 7,67 (1H, d, J=9,9Hz), 7,55 (2 H, d), 7,46 (2 H, d), 3,24 (2 H, d, J=8,4Hz), 6,98 (2 H, d, J=6,9 Hz), 5,90 (1H, d, J=9,6 Hz), 5,18 (1H, m), 3,88 (3H, s), 3,24 (1H, t, J=3,2 Hz), 2,87 (4H, m), 1,97-1,53 (9H, m), 1,43 (2 H, t), 0,90 (6H, m). Exemplo 65 /V-r2-(4-{6-amino-5-r(4-clorofenil)carboniH-2-oxopiridin- 1(2H)-il}fenil)etil]-L-leucinato de ciclopentila
Figure img0138
Exemplo 65 foi preparado por metodologia similar ao Exemplo 59 utilizando éster 4-cloro-fenílico de ácido 3-(4-cloro-fenil)-3-oxo-tiopropionimídico, preparado por um método similar utilizado para Intermediário 4J. LC/MS: m/z 551 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ: 7,40 (7H, m), 7,16 (2 H, d, J=8,4Hz), 5,82 (1H, d, J=9,9 Hz), 5,11 (1H, m), 3,17 (1H, t, J=7,5 Hz), 2,78 (4H, m), 1,92-1,43 (9H, m), 1,35 (2 H, t), 0,82 (6H, dd). Exemplo 66 /V-r3-(4-{6-amino-5-r(4-fluorofenil)carbonil]-2-oxopiridin- 1(2H)-il}-3-fluorophenóxi)propil]-L-leucinato de ciclopentila
Figure img0139
Exemplo 66 foi preparado por metodologia similar ao Exemplo 25 utilizando 6-amino-5-(4-fluoro-3-metil-benzoil)-1-[2-fluoro-4-hidróxi-fenil]-1H-piridin-2- ona [WO 03/076405], 97% de pureza de LCMS, m/z 582 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, de-DMSO), δ: 7,57 (2 H, m), 7,48 (1H, d, J=9,6Hz), 7,34 (3H, m), 7,10 (1H, dd, J=11,9, 2,3Hz), 7,00 (1H, dd,J= 9,7, 2,3Hz), 5,70 (1H, d, J=9,6Hz), 5,12 (1H, m), 4,11 (2 H, t, J=6,2Hz), 3,14 (1H, m), 2,68 (1H, m), 1,98 (1H, m), 1,88-1,82 (4H, m), 1,67-1,57 (7H, m), 0,88 (6H, t, J=3,2Hz). Exemplo 67 /V-r3-(4-{6-amino-5-K4-fluorofenil)carbonill-2-oxopiridin- 1(2H)-il}fenil)propil]-L-leucinato de ciclopentila
Figure img0140
Exemplo 61 foi sintetizado por meio de uma rotina similar ao Exemplo 57 utilizando 3-(4-amino-fenil)-propan-1-ol. LC/MS: m/z 548 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-dε) δ: 9,13 (2 H, br s), 7,59-7,52 (2 H, m), 7,50-7,42 (3H, m), 7,39-3,25 (4H, m), 5,70 (1H, d, J=9,6Hz), 5,28-5,24 (1H, m), 4,04 (1H, br 5 s), 3,35-2,85 (2 H, m), 2,80-2,70 (2 H, m), 2,10-1,80 (4H, m), 1,75-1,55 (10H, m), 0,93 (6H, d, J=3,4Hz). O 3-(4-amino-fenil)-propan-1-ol foi sintetizado em um processo de etapa de álcool 4nitrocinamílico como mostra abaixo: A uma solução de álcool 4-nitrocinamílico (2g, 11,1 mmols) em 10 metanol (30 ml) sob uma atmosfera de nitrogênio foi adicionado Níquel Raney (2 ml de suspensão em água). A reação foi em seguida exposta ao gás de hidrogênio e agitada sob uma atmosfera de hidrogênio durante 12 horas para reação completa. A mistura reacional foi filtrada através de Celita, lavanda com metanol e acetato de etila. O filtrado foi em seguida concentrado 15 sob pressão reduzida antes da purificação por cromatografia de coluna (8:2 EtOAc:Hexano) para fornecer o produto requerido (1,68g, 95%) como um sólido amarelo. Exemplo 68 A/2-r3-(4-{6-amino-5-r(2,4-difluorofenil)carbonill-2- oxopiridin-1(2H)-il}-3,5-difluorophenóxi)propill-L-lisinato de ciclopentila
Figure img0141
20 Exemplo 68 foi sintetizado por meio de uma rotina similar ao Exemplo 52 utilizando éster de L-lisinato(Z)-ciclopentila. LC/MS: m/z 633 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CD3OD) δ: 7,45 - 7,54 (2 H, m), 7,12 (2 H, t, J=8,6 Hz), 6,93 (2 H, d, J=9,8 Hz), 5,81 (1H, d, J=9,8 Hz), 5,33 - 5,40 (1H, m), 4,25 (2 H, t, J=5,1 Hz), 4,10 - 4,16 (1H, m), 2,96 (2 H, t), 2,27 - 2,35 (2 H, m), 1,63 - 2,12 (16H, Exemplo 69 A/2-r3-(4-{6-amino-5-H2,4-ciifluorofenil)carbonill-2- oxopiridin-1 (2H)-il}-3,5-difluorophenóxi)propil]-L-lisinato de terc-butila
Figure img0142
5 Exemplo 69 foi sintetizado por meio de uma rotina similar ao Exemplo 52 utilizando éster de L-lisinato(Z)-t-butila. LC/MS: m/z 621 [M+Hf. 1H RMN (300 MHz, CD3OD) δ: 7,48 (2 H, dd, J=9,7, 2,7 Hz), 7,12 (2 H, t, J=8,6Hz), 6,88 (2 H, d, J=9,2 Hz), 5,81 (1H, d, J=9,6 Hz), 4,18 (2 H, t, J=6,2 Hz), 3,15 ( H, t, J=6,6 Hz), 2,76 - 2,87 (3H, m), 2,68 (1 H, dt, J=11,5, 6,9 Hz), 1,97 - 2,05 10 (4H, m), 1,64 (4H, dt, J= 6,1 Hz), 1,01 (9H, s). Exemplo 70 N-r2-(3-{6-amino-5-r(4-fluorofenil)carbonil]-2-oxopiridin- 1(2H)-il}fenil)etiH-L-leucinato de ciclopentila
Figure img0143
Exemplo 70 foi sintetizado utilizando metodologia similar ao Intermediário 4J (em vez de utilizar álcool 3-aminofenetílico) e éster ciclopentilico de L- 15 leucina (Intermediário 8). LC/MS: m/z 534 [M+Hf. 1H RMN (300 MHz, DM- SO-d6) δ: 9,40-9,00 (2 H, m), 7,65-7,44 (5H, m), 7,38-7,11 (4H, m), 5,72 (1H, d, J=9,9Hz), 5,30-5,20 (1H, m), 4,10-4,00 (1H, m), 3,45-3,15 (2 H, m), 3,10- 3,00 (2 H, m), 1,95-1,80 (2 H, m), 1,75-1,55 (9H, m), 9,93 (6H, d, J=4,8Hz). Exemplo 71(S)-2-{3,5-difluoro-4r3-(4fluorobenzoil)-6-oxo-1.6- diidropiridin-2-ilaminolbenzilamino}-3-fenilpropionato de ciclopentila
Figure img0144
Uma solução de Intermediário 7 (20 mg) em 20% de TFA/ DCM (0,5 ml) foi deixada repousar em temperatura ambiente durante 1 hora. Na 5 conclusão, a mistura reacional foi evaporada até secura por sopro por sopro sob um fluxo suave de N2. DCM (0,5 ml) foi adicionado e foi soprado sob N2. A secagem sob N2 continuou durante a noite. Produção =20 mg, 98%. 96% de pureza de LCMS, m/z 590 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, d6-DMSO), δ: 0,75 -1,33 (8H, m), 2,90 (1H, m), 3,50 (2 H, m), 4,25 (3H, m), 4,93 (1H, m), 10 5,70, (1H, m), 5,98 (1H, m), 7,15-7,62 (11H, m), 9,7 ( 1H, br s), 10,42 (0,5H br s) Exemplo 72 ácido (S)-{4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H- piridin-1 –illbenzilaminojfenilacético
Figure img0145
A uma solução de Exemplo 7 (100 mg, 0,179 mmol) em THF (1 15 ml) e MeOH (0,5 ml) foram adicionados NaOH a 2M (aq, 1 ml). A mistura foi deixada agitar em temperatura ambiente durante 3 horas, evaporada até aproximar-se à secura, acidificada utilizando gota a gota adição de de HCI 1M e extraída com EtOAc (5 ml). A camada de EtOc foi concentrada a vácuo para fornecer o ácido cru. LCMS mostrou 80% do produto m/z = 490 [M+H]+ e 20% de impureza m/z 470 [M+H]+. Purificação por HPLC preparativa for-neceu o produto desejado. Produção= 34 mg, 31%). 100% de pureza de LCMS, m/z 490 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, DMSO), δ: 3,64 (2 H, m, CH2), 4,06 (1H, s, CH), 5,50 (1H, d, Ar), 6,75 (1H, br s, NH), 6,96 (13H, m, Ar), 9,84 (1H, brs, NH). Os compostos seguintes foram preparados de uma maneira si-milar: Exemplo 73 ácido (S)-2-{4-r6-amino-5-(2.4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H- piridin-1-inbenzilamino}-3-fenilpropiônico
Figure img0146
De Exemplo 8. 99% de pureza de LCMS, m/z 504 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, DMSO), δ: 2,96-3,09 (3H, m), 3,81 (1H, d), 3,98 (1H, d), 5,76 (1H, d), 7,00 (1H, brs), 3,22-7,40 (9H, m), 7,41-7,61 (4H, m), 10,11 (1H, brs). Exemplo 74 ácido (S)-2-{4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H- piridin-1-il]benzilamino}-4-metilpentanóico
Figure img0147
De Exemplo 9. 91% de pureza de LCMS, m/z 470 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, DMSO), δ: 0,71 (6H, m), 1,40 (2 H, m), 1,60 (1H, m), 3,44 (1H, m), 3,89 (2 H, s), 5,49 (1H, d), 6,70 (1H, br s), 6,94-7,08 (2 H, m), 7,14-7,33 (4H, m), 7,46 (2 H, m), 9,86 (1H, br s). Exemplo 75 ácido (S)-{4-r6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1- illbenzilaminoifenilacético
Figure img0148
De Exemplo 1. 100% de pureza de LCMS, m/z 472 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, DMSO), δ: 4,13 (1H, d), 4,22 (1H, d), 5,18 (1H, s), 5,73 (1H, d), 7,30- 7,61 (13H, m), 7,73 (1H, d), 10,09 (2 H, brs). Exemplo 76 Ácido (S)-{4-r6-amino-5-(3-metil-4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H- 5 piridin-1-il]benzilamino}fenilacético
Figure img0149
De Exemplo 4. 86% de pureza de LCMS, m/z 486 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, DMSO), δ: 2,20 (3H, s), 3,98 (1H, d), 4,06 (1H, d), 5,07 (1H, s), 5,62 (1H, d), 7,12-7,50 (12 horas, m), 7,61 (1H, d), 9,90 (2 H, br s). Exemplo 77 ácido (S)-2-{4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H- 10 piridin-1-il]benzilamino}-4-metilpentanóico
Figure img0150
De Exemplo 9. 91% de pureza de LCMS, m/z 470 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, DMSO), δ: 0,71 (6H, m), 1,40 (2 H, m), 1,60 (1H, m), 3,44 (1H, m), 3,89 (2 H, s), 5,49 (1H, d), 6,70 (1H, br s), 6,94-7,08 (2 H, m), 7,14-7,33 (4H, m), 7,46 (2 H, m), 9,86 (1H, brs). 15 Exemplo 78 ácido (S)-2-{4-r6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin- 1-il]benzilamino}-3-fenilpropiônico
Figure img0151
De Exemplo 2. 100% de pureza de LCMS, m/z 486 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, DMSO), δ: 3,00 (2 H, m), 3,98 (3H, m), 5,65 (1H, d), 7,15-7,34 (11H, m), 7,40 (1H, d), 7,51 (2 H, m). Exemplo 79 ácido (S)-2-{4-r6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin- 5 1-ill benzi laminol-4-meti I penta nóico
Figure img0152
De Exemplo 3. 100% de pureza de LCMS, m/z 452 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, DMSO), δ: 0,81 (6H, m), 1,51 (2 H, m), 1,72 (1H, m), 3,95 (2 H, m), 5,61 (1H, d), 3,21-7,30 (4H, m), 7,39 (1H, d), 7,48 (2 H, m), 7,52 (2 H, m). Exemplo 80 ácido (S)-2-{4-r6-amino-5-(3-metil-4-fluorobenzoil)-2-oxo- 10 2H-piridin-1-illbenzilamino}-3-fenilpropiônico
Figure img0153
De Exemplo 5. 100% de pureza de LCMS, m/z 500 [M+Hf, 1H RMN (400 MHz, DMSO), δ: 2,33 (3H, s), 2,90-3,07 (3H, m), 3,76 (1H, d), 3,92 (1H, d), 5,72 (1H, d), 3,20-7,42 (9H, m), 7,49 (4H, m). Exemplo 81 ácido (S)-244-r6-amino-5-(3-metil-4-fluorobenzoil)-2-oxo- 15 2H-piridin-1-il]benzilamino}-4-metilpentanóico
Figure img0154
De Exemplo 6. 98% de pureza de LCMS, m/z 500 [M+H]+. Exemplo 82 ácido (S)-2-(3-{4-r6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H- piridin-1 -il]fenóxi}propilamino)-3-fenilpropiônico de ciclopentila
Figure img0155
De Exemplo 24. 93% de pureza de LCMS, m/z 530 [M+H]+, 1H RMN (400 5 MHz, de-DMSO), δ: 1,90 (2 H, m), 2,80-2,90 (2 H, m), 3,00 (2 H, m), 3,40 (1H, m), 4,05 (2 H, m), 5,70 (1H, d), 7,10 (1H, d), 3,20 (2 H, d), 7,30 (5H, m), 7,35 (1H, d), 7,45 (1H, d), 7,60 (1H, d). Exemplo 83 ácido (S)-2-(3-f4-r6-amino-5-(3-metil-4-fluorobenzoii)-2-oxo- 2H-piridin-1-il]fenóxi}propilamino)-3-fenilpropiônico
Figure img0156
10 De Exemplo 12. 96% de pureza de LCMS, m/z 544 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, d6-DMSO), δ: 2,30 (2 H, m), 2,40 (3H, s), 3,30 (1H, m), 4,30 (2 H, m), 4,45 (1H, m), 5,85 (1H, d), 5,40 (1H, m), 5,85 (1H, d), 3,25 (2 H, d), 7,40-7,55 (9H, m), 7,60-7,70 (2 H, m). Exemplo 84 ácido (S)-(3-(4-rβ-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H- 15 piridin-1-ill-fenóxi}propilamino)fenilacético
Figure img0157
De Exemplo 28. 82% de pureza de LCMS, m/z 534 [M+Hf, 1H RMN (400 MHz, CD3OD), δ: 2,25 (2 H, m), 3,10 (1H, m), 3,25 (1H, m), 4,20 (1 H, m), 5,83 (1H,d), 7,15-7,60 (13H,d). Exemplo 85 ácido (S)-2-(3-{4-r6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H- 5 piridin-1-il]fenóxi}propilamino)-4-metilpentanóico
Figure img0158
De Exemplo 25. 100% de pureza de LCMS, m/z 496 [M+Hf, 1H RMN (400 MHz, dθ-DMSO), δ: 1,00 (6H, m), 1,75-1,90 (3H, m), 2,30 (2 H, m), 3,10-3,30 (2 H, m), 4,00 (1H, m), 4,25 (2 H, m), 5,85 (1H, d), 5,40 (1H, m), 5,85 (1H, d), 3,20 (2 H, d), 7,30 (2 H, d), 7,40 (2 H, t), 7,55 (1H, m), 7,65 (2 H, m). 10 Exemplo 86 ácido (S)-2-(3-{4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H- piridin-1-il]fenóxi}propilamino)-3-fenilpropiònico
Figure img0159
De Exemplo 29. 100% de pureza de LCMS, m/z 548 [M+Hf, 1H RMN (400 MHz, dε-DMSO), δ: 2,15 (2 H, m), 3,15-3,30 (3H, m), 3,35 (1H, m), 4,10 (2 H, m), 4,20 (1H, m), 5,65 (1H, d), 7,15 (2 H, d), 3,20- 7,35 (11H, m) 15 Exemplo 87 ácido (S)-(3-{4-r6-amino-5-(4-fluoro-3-metilbenzoil)-2-oxo-
Figure img0160
De Exemplo 26. 95% de pureza de LCMS, m/z 530 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, dθ-DMSO), δ: 2,15 (3H, s) -2,35 (2 H, m), 2,85 (2 H, m), 3,05 (2 H, m), 4,10 (2 H, m), 5,25 (1H, m), 5,70 (1H, d), 4,25 (2 H, m), 5,85 (1H, d), 5,40 (1H, m), 5,85 (1 H, d), 7,10 (2 H, d), 3,25 (2 H, d), 7,3 (1H, d), 7,35 (1H, m), 5 7,40-7,55 (5H, m), 7,60 (2 H, m). Exemplo 88 ácido (S)-2-(3-{4-r6-amino-5-(4-fluoro-3-metila benzoil)-2- oxo-2H-piridin-1-illfenóxi}propilamino)-4-metilpentanóico
Figure img0161
De Exemplo 27. 94% de pureza de LCMS, m/z 510 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, dβ-DMSO), δ: 0,90 (6H, br s), 1,65-1,80 (3H, m), 2,1-2,30 (3H, s+ 2 10 horas, m), 3,0-3,20 (2 H, m), 3,90 (1H, m), 4,15 (2 H, m), 5,65 (1H, d), 7,15 (2 H, d), 3,20-7,30 (3H, m), 7,30 (1H, m), 7,40 (1H, d), 7,45 (2 H, s). Exemplo 89 ácido S)-(3-{4-r6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin- 1-ill-3,5-difluorofenóxi}propilamino)fenilacético
Figure img0162
De Exemplo 13. 91% de pureza de LCMS, m/z 552 [M+H]+, 1H RMN (400 15 MHz, de-DMSO), δ: 2,10-2,25 (2 H, br m), 2,80 (1H, m), 3,00 (1H, m), 4,15 (2 H, d), 5,20 (1H, s), 5,70 (1H, d), 5,65 (1H, d), 6,95 (2 H, d), 7,30 (2 H, t), 7,30 (1H, m), 7,40 -7,60 (8H, m). Exemplo 90 ácido (S)-(3-{4-r6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H- piridin-1-ill-3,5-difluorofenóxi}propilamino)fenilacético
Figure img0163
De Exemplo 14. 98% de pureza de LCMS, m/z 566 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, de-DMSO), δ: 2,35 (2 H, m), 3,1-3,3 (3H, m), 3,50 (1H, m), 4,25-4,40 (3H, m), 5,80 (1H, d), 5,70 (1H, d), 7,10 (2 H, d), 7,30 -7,45 (7H, m), 7,60- 7,70 (3H, m). 5 Exemplo 91 ácido (S)-2-(3-{4-r6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H- piridin-1-ill-3,5-difluorofenoxifenóxi}propilamino)-4-metilpentanóico
Figure img0164
De Exemplo 15. 92% de pureza de LCMS, m/z 532 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, de-DMSO), δ: 0,95 (6H, m), 1,8 (3H, m), 2,30 (2 H, m), 3,10-3,25 (2 H, m), 3,95 (1H, m), 4,25 (2 H, m), 5,80 (1H, d), 7,10 (2 H, m), 7,40 (2 H, m), 10 7,60 (1H, m), 7,65 (2 H, m). Exemplo 92 ácido (S)-2-{4-r6-amino-5-(2,4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H- piridin-1-ill-3,5-difluorobenzilamino}-3-fenilpropiônico
Figure img0165
De Exemplo 10. 95% de pureza de LCMS, m/z 522 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, CD3OD), δ: 3,30 (2 H, m), 4,15 (1H, m), 4,25 (2 H, m), 5,75 (1H, d), 15 7,15-7,35 (9H, m), 5,20 (1 H, m), 5,90 (1H, d), 7,35-7,50 (9H, m), 7,55 (2 H, m), 7,65 (1H, d). Exemplo 93 ácido (S)-2-(3-{4-r6-amino-5-(4-fluoro-3-metilbenzoil)-2-oxo- 2H-piridin-1-ill-3,5-difluorofenóxi}propilamino)-3-fenilpropiônico
Figure img0166
De Exemplo 18. 92% de pureza de LCMS, m/z 580 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, d6-DMSO), δ: 2,30 (2 H, m), 2,40 (3H, s), 3,15-3,35 (4H, m), 3,50 (1H, m), 4,30 (2 H, m), 4,35 (1H, m), 5,80 (1H, d), 7,10 (2 H, m), 7,35-7,50 (7H, m), 7,55 (1H,m), 7,65 (1H,m). 5 Exemplo 94 ácido (S)-(3-{4-f6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H- pirídin-1-il]-fenóxi}propilamino)fenilacético
Figure img0167
De Exemplo 23. 87% de pureza de LCMS, m/z 516 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, dθ-DMSO), δ: 2,25 (2 H, m), 2,80 (1H, m), 3,10 (1H, m), 4,15 (2 H, m), 5,30 (1H, s), 5,75 (2 H, d), 7,15 (2 H, d), 3,25 (2 H, d), 7,40 (2 H, t), 7,50-7,70 - 10 (7H, m). Exemplo 95 ácido (S)-(3-{4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H- piridin-1-ill-3,5-difluorofenóxi}propilamino)fenilacético
Figure img0168
De Exemplo 20. 84% de pureza de LCMS, m/z 570 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, de-DMSO), δ: 2,30 (2 H, m), 2,90 (1H, m), 3,15 (1H, m), 4,23 (2 H, m), 15 5,32 (1H, s), 5,85 (1H, d), 7,10 (2 H, d), 7,50 (3H, m), 7,60-7,65 (6H, m). Exemplo 96 ácido (S)-2-(3-{4-r6-amino-5-(2,4difluorobenzoil)-2-oxo-2H- piridin-1-illfenóxi}propilamino)-4-metilpentanóico
Figure img0169
De Exemplo 30. 93% de pureza de LCMS, m/z 514 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, de-DMSO), δ: 0,95 (6H, m), 1,85 (3H, m), 2,30 (2 H, m), 3,15-3,22 (2 H, 20 m), 3,99 (1H, m), 4,21 (2 H, m), 5,77 (1H, d), 3,20 (2 H, d), 7,30 (4H, m), 7,45 (1H, m), 7,55 (1H, m). Exemplo 97 ácido (S)-2-(3-{4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H- piridin-1-ill-3,5-difluorofenóxi}propilamino)-4-metilpentanóico
Figure img0170
De Exemplo 22. 88% de pureza de LCMS, m/z 550 [M+H]+, 1H RMN (400 5 MHz, dβ-DMSO), δ: 0,80-0,95 (6H, m),1,50-1,85 (3H, m), 1,95-2,10 (2 H, m), 2,95-3,05 (2 H, m), 3,75-3,85 (1H, m), 4,05-4,15 (2 H, m), 5,65 (1H, d), 7,00 (1H, d), 7,10-3,20 (1H, m), 3,25-7,30 (1H, m), 7,30-7,40 (1H, m), 7,45-7,55 (1H, m), 7,80-8,25 (1H, br s), 9,90-10,20 (1H, br s). Exemplo 98 ácido (S)-2-(3-{4-r6-amino-5-(4-fluoro-3-metilbenzoil)-2-oxo- 10 2H-piridin-1-ill-3,5-difluorofenóxi}propilamino)-4-metilpentanóico
Figure img0171
De Exemplo 19. 93% de pureza de LCMS, m/z 546 [M+Hf, 1H RMN (400 MHz, dβ-DMSO), δ: 0,95-1,05 (6H, m), 1,55-1,75 (2 H, m), 1,80-1,90 (1H, m), 2,10-2,25 (2 H, m), 2,35 (3H, s), 3,00-3,15 (2 H, m), 3,70 (1H, m), 4,15-4,30 (2 H, m), 5,80 (1H, d), 7,10 (1H, d), 3,25-7,35 (1H, m), 7,40-7,45 (1H, m), 15 7,50-7,55 (1H, m), 7,55-7,65 (1H, m), 8,90-10,70(2 H, brs). Exemplo 99 ácido (S)-(3-{4-[6-amino-5-(4-fluoro-3-metilbenzoil)-2-oxo- 2H-piridin-1-ill-3,5-difluorofenóxi}propilamino)fenilacético
Figure img0172
De Exemplo 17. 100% de pureza de LCMS, m/z 566 [M+Hf, 1H RMN (400 MHz, d6-DMSO), δ: 2,05-2,20 (2 H, m), 2,30 (3H, s), 2,75-3,05 (2 H, m), 4,05-4,20 (2 H, m), 4,65-4,85 (1H, m), 5,70 (1H, d), 7,00 (1H, d), 3,25-7,35 (1H, m), 7,35-7,60 (8H, m). Exemplo 100 ácido (S)-2-(344-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H- 5 piridin-1-il]-3,5-difluorofenóxi}-propilamino)-3-fenilpropiônico
Figure img0173
De Exemplo 21. 100% de pureza de LCMS, m/z 584 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, DMSO), δ: 2,05-2,15 (2 H, m), 3,00-3,10 (3H, m), 4,00-4,25 (4H, m), 5,75 (1H, d), 7,05 (1H, d), 3,25-7,50 (8H, m), 7,55-7,65 (1H, m). Exemplo 101 ácido (S)-2-{4-r6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H- 10 piridin-1-ill-3,5-difluorobenzilamino}-4-metilpentanóico
Figure img0174
De Exemplo 11. 92% de pureza de LCMS, m/z 506 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, MeOD), δ: 0,85-1,05 (6H, m), 1,65-1,85 (3H, m), 3,95-4,05 (1H, m), 4,25-4,35 (2 H, m), 5,75 (1H, d), 6,90 (1H, d), 7,00-7,10 (2 H, m), 7,35-7,45 (4H, m). 15 Exemplo 102 ácido (S)-2-(4-{4-r6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H- piridin-1-ill-3,5-difluorofenóxi}cicloexilamino)-4-metilpentanóico
Figure img0175
De Exemplo 31. 91% de pureza de LCMS, m/z 606 [M++H], 1H RMN (400 MHz, CD3OD), δ: 1,55-2,55 (8H, m), 3,20-3,40 (2 H, m), 4,25-4,35 (1H, m), 4,45-4,55 (1H, m), 4,85-4,95 (1H, m), 5,95 (1H, d), 6,95-7,10 (2 H, m), 7,35- 7,55 (6H, m), 7,70-7,80 (2 H, m), 7,80-7,85 (1H, d). Exemplo 103 ácido (2S)-r(4-{4-r6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxopiridin- 1(2H)-il]-3,5-difluorofenóxi}cicloexil)aminol(fenil)acético
Figure img0176
De Exemplo 32. 89% de pureza de LCMS, m/z 592 [M+H]+, 1H RMN (400 5 MHz, CD3OD), δ: 1,60-1,75 (2 H, m), 1,80-1,95 (2 H, m), 2,00-2,15 (2 H, m), 2,15-2,30 (2 H, m), 3,05-3,20 (1H, m), 4,65-4,75 (1H, m), 4,75-4,80 (1H, m), 5,80 (1H, d), 6,85-6,95 (2 H, m), 3,20-7,30 (2 H, m), 7,40-7,50 (3H, m), 7,55- 7,65 (4H, m), 7,65-7,70 (1H, m). Exemplo 104 A/-(4-{4-r6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxopiridin-1 (2H)-ill- 10 3,5-difluorofenóxi}cicloexil)-L-leucina
Figure img0177
De Exemplo 33. 93% de pureza de LCMS, m/z 572 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, CD3OD), δ: 0,85-1,00 (6H, m), 1,45-2,00 (9H, m), 2,05-2,25 (3H, m), 3,05-3,15 (1H, m), 3,60-3,75 (1H, m), 4,30 e 4,65 (0,5H cada, m), 5,70 (1H, d), 6,75-6,85 (2 H, m), 7,10-7,15 (2 H, m), 7,45-7,55 (2 H, m), 7,55-7,65 (1H, Exemplo 105 ácido (S)-2-{4-f6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H- piridin-1 -illcicloexil aminol-3-fenilpropiônico
Figure img0178
De Exempio 34. 98% de pureza de LCMS, m/z 478 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, CD3OD), δ: 1,55-1,85 (4H, m), 1,95-2,20 (2 H, m), 2,30-2,75 (2 H, m), 3,15-3,20 (1H, m), 3,25-3,35 (2 H, m), 4,05-4,15 (1H, m), 5,60 (1H, d), 7,05- 7,15 (2 H, m), 7,15-7,35 (5H, m), 7,35-7,45 (3H, m). Exemplo 106 ácido (R)-(3-{4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H- piridin-1-ill-3,5-difluorofenóxi}propilamino)fenilacético
Figure img0179
De Exemplo 42. 88% de pureza de LCMS, m/z 570 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, DMSO), δ: 2,05-2,20 (2 H, m), 2,75-2,95 (2 H, m), 4,10-4,20 (2 H, m), 4,30-4,50 (1H, m), 5,75 (1H, d), 7,00-7,10 (2 H, m), 3,20-7,30 (1H, m), 7,35- 7,50 (7H, m), 7,55-7,65 (1H, m). Exemplo 107 ácido (2S)-r<3-{4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2- oxopiridin-1(2H)-ill-3,5-difluorofenóxi}propil)aminol(cicloexil)acético
Figure img0180
De Exemplo 48, 95% de pureza de LCMS, m/z 576 [M+H]+, 1H RMN (300 MHz, DMSO), δ: 10,16 (1H, br s),8,78 (1H, br s), 8,12 (1H, br s), 7,62-7,53 (1H, m), 7,47-7,32 (2 H, m), 3,27-3,21 (1H, m), 7,07 (2 H, d, J=10,2Hz), 5,74 (1H, d, J=9,6Hz), 4,19 (2 H, t, J=5,7Hz), 3,85-3,75 (1H, m),3,15-3,00 (2 H, m), 2,20-2,05 (2 H, m),1,95-1,60 (6H, m), 1,40-0,90 (5H, m). Exemplo 108 A/-(3-{4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1 (2H)- il]-3,5-difluorofenóxi}propil)-D-leucina
Figure img0181
De Exemplo 50. 90% de pureza de LCMS, m/z 550 [M+H]+, 1H RMN (300 MHz, DMSO), δ: 7.63-7,52 (1H, m), 7,46-7,32 (2 H, m), 3,28-7,10 (1H, m), 7,06 (2 H, d, J=10,2Hz), 5,73 (1H, d, J=9,9Hz), 4,25-4,15 (2 H, m), 3,90-3,80 (1H, m), 3,20-3,00 (2 H, m), 2,20-2,05 (2 H, m), 1,80-1,55 (3H, m), 0,98-0,90 (6H, m). Exemplo 109 A/-(5-{4-r6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-ill- 3,5-difluorofenóxi}pentil)-L-leucina
Figure img0182
De Exemplo 55. A uma solução de /V-(5-{4-[6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2- oxopiridin-1 (2/-/)-il]-3,5-difluorofenóxi}pentil)-L-leucinato de ciclopentila (33 mg, 0,05 mmol) em THF (1 ml) e água (1 ml) foi adicionado LiOH (25 mg, 1,05 mmol, 20eq). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 16 horas, antes de ser aquecida a 80 °C durante 10 horas. A mistura foi con-centrada sob pressão reduzida e água (5 ml) adicionada. O pH foi ajustado para 7 utilizando HCI a 1M e a camada aquosa extraída com 1-butanol (3x5 ml). Os extratos combinados orgânicos foram concentrados sob pressão re-duzida. O resíduo sólido foi triturado com Et20, coletado por filtração e purifi-cado por HPLC preparativa para fornecer o composto título como um sólido branco como o sal de mono-TFA (7 mg, 24% de produção). LC/MS: m/z 560 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 7,62-7,51 (3H, m), 7,34 (2 H, m), 7,05 (2 H, m), 5,72 (1H, d, J=9,8 Hz), 4,09 (2 H, t, J=5,7 Hz), 3,23 (1H, m), 2,80 (2 H, m), 1,79-1,43 (9H, m), 0,89 (6H, t, J=6,7 Hz). Exemplo 110 N-((4-r6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxopiridin-1 (2H}~ il1fenóxi)-acetil)-L-leucina
Figure img0183
De Exemplo 56. A uma solução de A/-({4-[6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2- oxopiridin-1 (2/-/)-il]fenóxi}acetil)-L-leucinato de ciclopentila (35 mg, 0,06 mmol) em THF (1 ml) e água (1 ml) foi adicionado LiOH (30 mg, 1,24 mmol, 20eq). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 16 horas, concentrada sob pressão reduzida e água (5 ml) adicionada. O pH foi ajustado para 7 utilizando HCI a 1M e a camada aquosa extraída com 1-butanol (3x5 ml). Os extratos combinados orgânicos foram concentrados sob pressão reduzida. O resíduo sólido foi triturado com EtsO, filtrado e secado sob pressão reduzida para fornecer o composto título como um sólido creme (11 mg, 36% de produção). LC/MS: m/z 496 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 7,58-7,53 (3H, m), 7,43 (1H, d, J=9,6 Hz), 7,36-6,98 (6H, m), 5,68 (1H, d, J=9,6 Hz), 4,58 (2 H, s), 3,90 (1H, m), 1,67-1,31 (3H, m), 0,86 (6H, m). Exemplo 111 fl-f2-(4-{6-amino-5-r(4-fluorofenil)carboniri-2-oxopiridin- 1 (2H)-il}fenil)etill-L-leucina
Figure img0184
De Exemplo 58. LC/MS. m/z 466 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 8,21 (1H, br s), 7,60-7,44 (4H, m), 7,39-7,30 (4H, m), 5,76-5,69 (1H, m), 4,00-3,85 (1H, m), 3,10-2,95 (2 H, m), 1,85-1,60 (3H, m), 1,30-1,10 (2 H, m), 0,95 (6H, d, J=6Hz). Exemplo 112 M-F2-(4-{6-amino-5-r(4-metilfenil)carbomri-2-oxopiridin- 1 (2H)-il}fenil)etill-L-leucina
Figure img0185
De Exemplo 63 LC/MS: m/z 462 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CD3OD) δ: 7,69 (1H, d, J=9,6Hz), 7,53 (2 H, d, J=3,2 Hz), 7,45 (2 H, d, J=8,1 Hz), 7,34 (2 H, d, J=7,8 Hz), 3,25 (2 H, d, J=8,4 Hz), 5,80 (1H, d, J=9,6 Hz), 3,15 (1H, m), 3,02-2,75 (4H, m), 2,45 (3H, s), 1,73 (1H, m), 1,56-1,22 (2 H, m), 0,96 Exemplo 113 N-r2-(4-{6-amino-5-r(4-metoxifenil)carbonil]-2-oxopiridin- 1 (2H)-il}fenil)etil]-L-leucina
Figure img0186
De Exemplo 64. LC/MS: m/z 478 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 3,28 (2 H, d, J=8,7Hz), 7,15 (2 H, d, J=8,1Hz), 7,04 (1H, d, J=9,3 Hz), 6,89 (4H, m), 4,87 (1H, d, J=9,3Hz), 3,78 (1H, m), 3,41 (3H, s), 2,75 (2 H, m), 1,78 (1H, m), 1,24 (2 H, m), 0,86 (6H, t). Exemplo 114 A/-r2-(446-amino-5-r(4-clorofenil)carbonil]-2-oxopiridin- 1 (2H)-il}fenil)etill-L-leucina
Figure img0187
De Exemplo 65. LC/MS: m/z 482 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CD3OD) δ: 7,16 (1H, d), 7,52 (6H, m), 3,23 (2 H, d), 6,82 (1H, d), 3,15 (1H, t), 1,74 (1H, m), 1,44 (2H, m), 0,93 (6H, dd). Exemplo 115 (2S)-4-amino-2-fí3-{4-í6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2- oxopiridin-1(2H)-ill-3,5-difluorofenóxi}propil)aminolbutanoato
Figure img0188
De Exemplo 52. LC/MS: m/z 537 [M+Hf. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 7,52 - 7,75 (2 H, m), 7,30 - 7,48 (2 H, m), 3,20 - 3,29 (1H, m), 7,09 (2 H, d, J=9,7 Hz), 4,23 (1H, t, J=6,1Hz), 4,07 - 4,17 (2 H, m), 2,14 - 2,32 (2 H, m), 1,22 - 1,41 (6H, m), 0,88 (4H, t, J=7,3 Hz) Exemplo 116 A/-(5-{4-r6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)- il]-3,5-difluorofenóxi}pentil)-L-leucina
Figure img0189
De Exemplo 54. A uma solução de /V-(5-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)- 2-oxopiridin-1(2/-/)-il]-3,5-difluorofenóxi}pentil)-L-leucinato de terc-butila (21 mg, 0,04 mmol) em DCM (2,5 ml) foi adicionado TFA (2,5 ml). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 20 horas, antes de concentrar sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em MeOH mínimo e azeotropado com 1:1 de tolueno/DCM três vezes. O composto título foi fornecido como um sólido de cor creme como o sal de mono-TFA (21 mg, 92% de produção). LC/MS: m/z 634 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) Ô: 10,14 (1H, br s), 8,21 (1H, brs), 7,57 (1H, m), 7,46 (1H, m), 7,34 (1H, dd, J=9,6, 2,4 Hz), 3,21 (1H, m), 7,06 (2 H, d, J=10,2 Hz), 5,73 (1H, d, J=9,9 Hz), 4,10 (2 H, t, J=5,7 Hz), 3,40 (1H, m), 2,84 (2 H, t, J=6,6 Hz), 1,79-1,48 (9H, m), 0,90 (6H, t, J=6,3 Hz). Os exemplos seguintes foram preparados de uma maneira similar: Exemplo 117/V-[2-(4-{6-amino-5-f(2,4-difluorofenil)carbonill-2- oxopiridin-1(2H)-il}fenil)etil]-L-leucina
Figure img0190
De Exemplo 60. LC/MS: m/z 484 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) Ô: 10,06 (1H, br s), 9,17 (2 H, br s), 7,55-6,94 (8H, m), 5,72 (1H, d, J=9,6Hz), 4,05-3,93 (1H, m), 3,40-3,10 (3H, m), 1,85-1,65 (4H, m), 0,95 (6H, d, J=5,7Hz). Exemplo 118 ácido (2S)-fí2-(446-amino-5-r(4-fluorofenil)carbonill-2- oxopiridin-1(2H)-il}fenil)etil]amino}(fenil)etanóico
Figure img0191
De Exemplo 62. LC/MS: m/z 486 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 9,80 (2 H, br s), 7,70-3,20 (14H, m), 5,70 (1H, d, J=9,6Hz), 5,24 (1H, s), 3,20-2,90 (4H, m).
Avaliação de Atividades Biológicas
Atividade de p38 MAP cinase A capacidade dos compostos inibirem atividade de p38 MAP cinase foi avaliada em um ensaio realizado por Upstate (Dundee UK). Em urn volume de reação final de 25 ml, p38 MAP cinase (5-10 mU) é incubada com Tris a 25mM pH 7,5, 0,002 mMEGTA, 0,33 mg/ ml de proteína básica de mi- elina, MgAcetato a 10mM e [g-33p-ATP] (atividade específica de aproximadamente 500cpm/pmol, concentração como requerida). A reação é iniciada pela adição da mistura de MgATP. Após incubação durante 40 minutos em temperatura ambiente, a reação é interrompida pela adição de 5 ml de uma solução de ácido fosfórico a 3%. 10 ml da reação são em seguida manchados em uma esteira filtrante P30 e lavados três vezes durante cinco minutos em ácido fosfórico a 75 mM e uma vez em metanol antes da secagem e contagem de cintilação. Pontos de dados duplicados são geralmente formados a partir de uma série de diluição 1/3 log de uma solução de matéria-prima em DMSO. Nove etapas de diluição são feitas a partir de uma concentração máxima de 10μM, e um absoluto 'nenhum composto' é incluído. O ensaio padrão de ligação de filtro radiométrico é realizado em uma concentração ATP a, ou próximo do Km. Os dados das contagens de cintilação foram coletados e submetidos à análise free-fit por software Prism. A partir da curva gerada, a concentração fornecendo 50% de inibição é determinada e reportada. Estimulação por LPS de células THP-1 As células THP-1 foram colocadas em 100 μl em uma densidade de 4 x 104 células/cavidade em cultura de tecido de 96 cavidades com base em V e incubadas a 37°C em 5% de CO2 durante 16 horas. 2 horas após a adição do inibidor em 10Oμl de meios de cultura de tecido, as células foram estimuladas com LPS (linhagem E coli 005:B5, Sigma) em uma concentração final de 1 μg/ ml e incubadas a 37°C em 5% de CO2 durante 6 horas. Os níveis de TNF-α foram avaliados a partir de sobrenadantes livres de células por ELISA sanduíche (R&D Systems #QTA00B). Estimulação por LPS de sangue total humano Sangue total foi tirado por punção venosa utilizando tubos vacu- tainer heparinizados (Becton Dickinson) e diluído em volume igual de meios de cultura de tecido RPMI1640 (Sigma). 100 μl foram semeados em placas tratadas de cultura de tecido de 96 cavidades com base em V. 2 horas após a adição do inibidor em 100 μl de meios RPMI1640, 0 sangue foi estimulado com LPS (linhagem E coli 005:B5, Sigma) em uma concentração final de 100ng/ ml e incubados a 37°C em 5% de CO2 durante 6 horas. Os níveis de TNF-a foram avaliados a partir dos sobrenadantes livres de células por ELISA sanduíche (R&D Systems #QTA00B) Os valores de IC50 foram distribuídos para uma das três faixas como segue: Faixa A: IC50 < 100nM Faixa B: 100nM < IC50 <1000nM Faixa C: IC50 >1000nM Tabela de Resultados
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Ensaio de Carboxilesterase de Célula Rompida
Qualquer determinado composto da presente invenção em que Ri é um grupo éster pode ser testado para determinar se ele atende ao re-quisito de que ele seja hidrolisado por esterases intracelulares, testando-se seguinte ensaio.
Preparação de extrato celular
Células de tumores U937 ou Hut78 (~ 109) foram lavadas em 4 volumes de Dulbeccos PBS (~ 1 litro) e peletadas a 525 g durante 10 minutos a 4°C. Isto foi repetido duas vezes e a pélete celular final foi ressuspensa em 35 ml de tampão de homogeneização frio (Trizma a 10 mM, NaCI a 130 mM, CaCh a 0,5 mM de pH 7,0 a 25°C). Os homogeneizados foram preparados por cavitação de nitrogênio (49,21 kg/cm2 (700 psi) durante 50 minutos a 4°C). O homogeneizado foi mantido em gelo e suplementado com um co-quetel de inibidores em concentrações finais de: Leupeptina 1 μM Aprotinina 0.1 pM E64 8 pM Pepstatina 1.5 pM Bestatina 162 pM Quimostatina 33 pM Após clarificação do homogeneizado celular por centrifugação a 525 g durante 10 minutos, o sobrenadante resultante foi utilizado como uma fonte de atividade de esterase e foi armazenado a -80°C até ser requerido. Avaliação de clivagem de éster Hidrólise de ésteres para os ácidos carboxílicos correspondentes pode ser avaliada utilizando o extrato celular, como acima preparado. Para este efeito extrato celular (~30 pg / volume total de ensaio de 0,5 ml) foi in-cubado a 37°C em um tampão de Tris- HCI a 25 mM, NaCI a 125 mM, pH 7,5 a 25°C. Em tempo zero o éster (substrato) foi em seguida adicionado em uma concentração final de 2,5 pM e as amostras foram incubadas a 37°C durante o tempo apropriado (geralmente 0 ou 80 minutos). Reações foram interrompidas pela adição de volumes de 3 x de acetonitrilo. Para amostras de tempo zero o acetonitrilo foi adicionado antes do composto de éster. Após centrifugação a 12000 g durante 5 minutos, as amostras foram analisadas 5 para o éster e seu ácido carboxílico correspondente em temperatura ambien te por LCMS (Sciex API 3000, bomba binária HP1100, CTC PAL). A croma-tografia foi baseada em uma coluna AceCN (75x2.1 mm) e uma fase móvel de 5-95 % de acetonitrilo em água /0,1 % de ácido fórmico. As taxas de hidrólise são expressas em pg/ ml/min. 10 Tabela 1 apresenta os dados mostrando que diversos motivos de éster de aminoácido, conjugados a vários inibidores de enzima intracelu-lar por diversas químicas de ligadores diferentes são todos hidrolisados por carboxilesterases intracelulares ao ácido correspondente.
Figure img0198
Legenda: link= ligante Tabela 1

Claims (15)

1. Composto de Fórmula (I):
Figure img0199
caracterizado pelo fato de que: G é-CH= D é um anel fenila opcionalmente substituído; R6 é hidrogênio; P representa hidrogênio e U representa um radical de Fórmula (IA); ou U representa hidrogênio e P representa um radical de Fórmula (IA); -A-(CH2)z-X1-L1-Y-NH-CHRiR2 (IA) em que A representa um anel fenila ou ciclohexila opcionalmente substituído; z é 0 ou 1; Y é uma ligação, -C(=O)-, -S(=O)2-, -C(=O)NR3-, -C(=S)-NR3, - C(=NH)NR3 ou -S(=O)2NR3- em que R3 é hidrogênio ou C1-C6 alquila opcionalmente substituída; L1 é um radical divalente de Fórmula -(Alq1)m(Q)n(Alq2)p- em que m, n e p são independentemente 0 ou 1, Q é (i) um radical mono ou bicíclico carbocíclico opcionalmente substituído apresentando 5 a 13 membros no anel ou um ou heterocíclico divalente mono ou bicíclico opcionalmente substituído tendo 5 a 13 membros, ou (ii), no caso onde tanto m quanto p são 0, um radical divalente de Fórmula -X2-Q1- ou -Q1-X2- em que X2 é -O-, S- ou NRA- em que RA é hidrogênio ou C1-C3 alquila opcionalmente substituída, e Q1 é um radical mono ou bicíclico carbocíclico opcionalmente substituído apresentando 5 a 13 membros no anel ou heterocíclico divalente mono ou bicíclico opcionalmente substituído tendo 5 a 13 membros, Alq1 e Alq2 independentemente representam radicais C3-C7 cicloalquila opcionalmente substituída divalentes, ou radicais C1-C6 alquileno, C2-C6 alquenileno, ou C2-C6 alquinileno opcionalmente substituído lineares ou ramificados, que podem opcionalmente conter ou terminar em uma ligação de éter (-O-), tioéter (-S-) ou amino (-NRA-) em que RA é hidrogênio ou C1-C3 alquila opcionalmente substituída; e (XI) representa uma ligação, -C(=O), -S(=O)2-, -NR4C(=O)-, -C(=O)NR4-,-NR4C(=O)NR5-, -NR4S(=O)2-, ou -S(=O)2NR4- em que R4 e R5 são independentemente hidrogênio ou C1-C6 alquila opcionalmente substituída; (XII) é um grupo ácido carboxílico (-COOH), ou um grupo éster de fórmula (-C=O)OR14 em que R14 é R8R9R10C- em (XIII) R8 é hidrogênio ou (C1-C3) alquil- (Z1)a-[(C1-C3)alquil]b- ou (C2-C3)alquenil-(Z1)a-(C1-C3)alquil]b- em que a e b são independentemente 0 ou 1 e ZI é -O-, -S- ou -NR11-, em que R11 é hidrogênio ou alquil(C1-C3); e R9 e R10 são independentemente hidrogênio ou alquil (C1-C3); (XIV) R8 é hidrogênio ou R12R13N-(C1-C3) alquil opcionalmente substituído - em que R12 é hidrogênio ou (C1-C3) alquil e R13 é hidrogênio ou alquil(C1-C3); ou R12 e R13, juntamente com o nitrogênio ao qual estão ligados, formam um anel heterocíclico monocíclico opcionalmente substituído de 5 ou 6 átomos no anel ou sistema heterocíclico bicíclico de 8 a 10 átomos no anel, e R9 e R10 são independentemente hidrogênio ou (C1 -C3) alquil-; ou (XV) ) R8 e R9 tomados juntamente com o carbono ao qual estão ligados formam um anel carbocíclico monocíclico opcionalmente substituído de 3 a 7 átomos no anel ou sistema de anel carbocíclico bicíclico de 8 a 10 átomos no anel, e R10 é hidrogênio; e R2 é selecionado dentre: Grupos C1-C6 alquila, fenila, 2-, 3- ou 4-hidroxifenila, 2-, 3- ou 4- metoxifenila, 2-, 3- ou 4-piridilmetil, benzil, feniletil, 2-3- ou 4-hidroxibenzil, 2-, 3- ou 4-benziloxibenzil, 2-, 3- ou 4-C2-C6 alcóxibenzil e benziloxi (C1-C6 alquila); Grupos -[AlkjnRe, onde Alk e um grupo (Ci-C6)alquila ou (C2-C6) alquenila, opcionalmente interrompido por um ou mais átomos de -O-, ou -S-ou grupos -N(R7), em que R7 é um átomo de hidrogênio ou um grupo (C1-C6) alquila, n é 0 ou 1, e R6 é um grupo C3-C8 cicloalquil opcionalmente substituído; Um grupo benzil substituído no anel fenil por um grupo de fórmula -OCH2COR15, em que R15 é hidroxil, amino, (C1-C6) alcoxi, fenil (C1-C6) alcoxi, (C1-C6) alquilamino, di ((C1-C6) alquil) amino, fenil (C1-C6) alquilamino, o resíduo de um aminoácido ou halogeneto de ácido, éster ou derivado de amida do mesmo, sendo o referido resíduo ligado através de uma ligação amida, sendo o referido aminoácido selecionado a partir de glicina, α ou β alanina, valina, leucina, isoleucina, fenilalanina, tirosina, triptofano, serina, treonina, cisteína, metionina, asparagina, glutamina, lisina, histidina, arginina, ácido glutâmico e ácido aspártico; Um grupo alquil (C1-C6) heterocíclico, sendo não substituído ou mono- ou di-substituído no anel heterocíclico com halo, nitro, carboxi, alcoxi (C1-C6) alcoxi, ciano, (C1-C6) alcanoil, trifluorometil (C1-C6) alquil, hidroxi, formil, amino, (C1-C6) alquilamino, di- (C1-C6) alquilamino, mercapto, (C1-C6) alquiltio, hidróxi (C1-C6) alquilio, mercapto (C1 -C6) alquil ou (C1-C6) alquilfenilmetil; e Um grupo -CRaRbRc no qual: cada um de Ra, Rb e Rc é independentemente hidrogênio, (C1- C6)alquila, (C2-C6)alquenila, (C2-C6)alquinila, fenila(C1-C6)alquila, (C3- C8)cicloalquila; ou Rc é hidrogênio e Ra e Rb são independentemente fenila ou piridila; ou Rc é hidrogênio, (C1-C6)alquila, (C2-C6)alquenila, (C2-C6)alquinila, fenil(C1-C6)alquila, ou (C3-C8)cicloalquila, e Ra e Rb juntos com o átomo de carbono ao qual eles estão ligados formam uma cicloalquila de 3 a 8 membros ou um anel heterociclila de 5- a 6-membros; ou Ra, Rb e Rc juntos com o átomo de carbono ao qual estão ligados formam uma adamantila; ou Ra e Rb são cada um independentemente (C1-C6)alquila, (C2- C6)alquenila, (C2-C6)alquinila, fenila(C1-C6)alquila, ou um grupo como definido para Rc abaixo diferente de hidrogênio, ou Ra e Rb juntos com o átomo de carbono ao qual estão ligados formam um anel C3-C8 cicloalquila, e Rc é hidrogênio, -OH, -SH, halogênio, -CN, -CO2H, (C1-C4)perfluoroalquila, - CH2OH, -CO2(C1-C6)alquila, -O(C1-C6)alquila, -O(C2-C6)alquenila, -S(C1- C6)alquila, -SO(C1-C6) alquila, -SO2(C1-C6) alquila, -S(C2-C6)alquenila, - SO(C2-C6)alquenila, -SO2(C2-C6)alquenila ou um grupo -Q2-W em que Q2 representa uma ligação ou -O-, -S-, -SO- ou -SO2- e W representa um grupo fenila, (C3-C8)cicloalquila, (C3-C8)cicloalquilalquila, (C4-C8)cicloalquenila ou (C4-C8)cicloalquenilalquila, cujo grupo W pode opcionalmente ser substituído por um ou mais substituintes independentemente selecionados de hidroxila, halogênio, -CN, -CO2H, -CO2(C1-C6)alquila, -CONH2, -CONH(C1-C6)alquila, - CONH(C1-C6alquila)2, -CHO, -CH2OH, (C1-C4)perfluoroalquila, -O(C1- C6)alquila, -S(C1-C6)alquila, -SO(C1-C6) alquila, -SO2(C1-C6) alquila, -NO2, - NH2, -NH(C1-C6) alquila, -N((C1-C6) alquil)2, -NHCO(C1-C6) alquila, (C1-C6) alquila, (C2-C6)alquenila, (C2-C6)alquinila, (C3-C8)cicloalquila, (C4- C8)cicloalquenila, fenila ou benzila; e a não ser se especificado diferente no contexto em que ocorre, o termo "heterociclila" ou "heterocíclico" significa (a) um radical aromático mono-, bi- ou tricíclico contendo um ou dois heteroátomos selecionados de S, N e O, e inclui radicais com dois desses anéis monocíclicos ou um desses anel monocíclico e um anel aril monocíclico, diretamente ligados por uma ligação covalente ou (b) um radical não aromático mono-, bi- ou tricíclico contendo um ou dois heteroátomos selecionados de S, N e O, e a grupos consistindo em um radical não aromático monocíclico contendo um desses heteroátomos que está covalentemente ligado a outro desses radicais ou a um radical carbocíclico monocíclico; e o termo "substituído" como aplicado a qualquer fração aqui significa substituído com até quatro substituintes compatíveis, cada um independentemente pode ser, por exemplo, (C1-C6) alquila, (C1-C6)alcóxi, hidróxi, hidróxi(C1-C6) alquila, mercapto, mercapto(C1-C6) alquila, (C1- C6)alquiltio, fenila, halo (incluindo flúor, bromo e cloro), trifluorometil, trifluorometoxi, nitro, nitrila (-CN), oxo, -COOH, -COORA, -CORA, -SO2RA, - CONH2, -SO2NH2, -CONHRA, -SO2NHRA, -CONRARB, -SO2NRARB, -NH2, -NHRA, -NRARB, -OCONH2, - OCONHRA, -OCONRARB, -NHCORA, -NHCOORA, -NRBCOORA, -NHSO2ORA, -NRBSO2OH, -NRBSO2ORA, -NHCONH2, -NRACONH2, -NHCONHRB, - NRACONHRB, -NHCONRARB, ou -NRACONRARB em que RA e RB são independentemente um (C1-C6) alquila, (C3-C6) cicloalquila ou fenila.
2. Composto de acordo com a re ivindicação 1, caracterizado pelo fato de que D é opcionalmente substituído por 1 a 4 substituintes independentemente selecionados de cloro, flúor, metila e metóxi.
3. Composto como reivindicado de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que P é hidrogênio e U é um radical de Fórmula (IA) como definido de acordo com a reivindicação 1.
4. Composto como reivindicado de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que A é 1,4 fenileno opcionalmente substituído por 1 a 4 substituintes selecionados de cloro e flúor.
5. Composto como reivindicado de acordo com a reivindicação 1 caracterizado pelo fato de que tem Fórmula (IIA), (IIB) e (IIC):
Figure img0200
e em que z, X1, L1, Y, R1 e R2 são como definidos de acordo com a reivindicação 1.
6. Composto como reivindicado de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que o radical -Y-L1-X1-[CH2]z-, é -CH2-, -CH2CH2-, -CH2CH2CH2-, - CH2CH2CH2CH2-, -CH2O-, -CH2CH2O-, -CH2CH2CH2O-, -CH2CH2CH2CH2O-, -C(=O)-CH2-, -C(=O)-CH2O-, -C(=O)-NH-CH2-, ou -C(=O)-NH-CH2O-.
7. Composto como reivindicado de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de que em que R14 é metila, etila, n- ou iso-propila, n-, sec- ou terc-butila, cicloexila, alila, fenila, benzila, 2-, 3- ou 4-piridilmetila, N-metilpiperidin-4-il, tetraidrofuran-3-il ou metoxietila.
8. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado pelo fato de que R2 é (C1-C6) alquila.
9. Composto como reivindicado de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado pelo fato de que R2 é fenila, benzila, cicloexila ou t-butoximetila.
10. Composto como reivindicado de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de que R1 é um grupo éster de Fórmula -(C=O)OR14 em que R14 é ciclopentil, e R2 é fenila, benzila, iso- butila, cicloexila ou t-butoximetila.
11. Composto como reivindicado de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que são selecionados de o grupo consistindo em: Acetato de (S)-(3-{4-[6-amino-5-(2,4-difluoro benzoil)-2-oxo-2H- piridin-1-il]-3,5-difluorofenóxi}propilamino)fenila de ciclopentila Pentanoato de (S)-2-(3-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo- 2H-piridin-1-il]-3,5-difluorofenóxi}propilamino)-4-metila de ciclopentila (2R)-[(3-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]- 3,5-difluorofenóxi}propil)amino](fenil)acetato de ciclopentila N-(3-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3,5- difluorofenóxi}propil)-L-leucinato de 2-morfolin-4-iletila N-(3-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3,5- difluorofenóxi}propil)-L-leucinato de 2-(Dimetilamino)etila N-[2-(4-{6-amino-5-[(4-fluorofenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)- il}fenil)etil]-L-leucinato de Ciclopentila N-(5-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3,5- difluorofenóxi}pentil)-L-leucinato de ciclopentila N-[3-(4-{6-amino-5-[(4-fluorofenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)- il}fenil)propil]-L-leucinato de ciclopentila (2S)-4-amino-2-[(3-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2- oxopiridin-1(2H)-il]-3,5-difluorofenóxi}propil)amino]butanoato de ciclopentila N-(5-{4-[6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3,5- difluorofenóxi}pentil)-L-leucinato de ciclopentila N-[2-(4-{6-amino-5-[(2,4-difluorofenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)- il}fenil)etil]-L-leucinato de ciclopentila N-[2-(4-{6-amino-5-[(2,4-difluorofenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)- il}fenil)etil]-L-leucinato de terc-butila etanoato de (2S)-{[2-(4-{6-amino-5-[(4-fluorofenil)carbonil]-2- oxopiridin-1(2H)-il}fenil)etil]amino}(fenil) de ciclopentila N-[2-(4-{6-amino-5-[(4-metilfenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)- il}fenil)etil]-L-leucinato de ciclopentila; e N-[2-(4-{6-amino-5-[(4-clorofenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)- il}fenil)etil]-L-leucinato de ciclopentila
12. Composto como reivindicado de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 11, caracterizado pelo fato de que é na forma de um sal farmaceuticamente aceitável.
13. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um composto como reivindicado de acordo com quaisquer reivindicações precedentes, juntamente com um veículo farmaceuticamente aceitável.
14. Uso de um composto como reivindicado de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, caracterizado pelo fato de que é na preparação de um medicamento para o tratamento de doença autoimune ou inflamatória,em que a doença é psoríase, doença do intestino inflamatória, doença de Crohn, colite ulcerativa, doença pulmonar obstrutiva crônica, asma, esclerose múltipla, diabetes, dermatite atópica, doença do enxerto versus hospedeiro, ou lúpus eritematoso sistêmico.
15. Uso de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que a doença é artrite reumatóide.
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